高效液相色谱法测定精氨酸中的赖氨酸
高效液相色谱法测定氨基酸
脑蛋白水解物溶液氨基酸含量分析方法研究方案1、仪器与试药1.1 仪器1525型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；Waters1525型泵，Waters2487型检测器，Waters5CH 型柱温箱，WatersBREEZE数据处理软件，水浴恒温器（精度±0.1℃），旋涡器，微量移液器，衍生专用管；CP225D型分析天平（德国）；4umNora-Pak TM C18（3.9mm×150mm，5μm）色谱柱（美国）1.2 药品与试剂16种氨基酸（门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）由中国药品生物制品检定所提供。
脑蛋白水解物注射液，云南盟生药业有限公司生产，规格10ml/支。
批号：2013、2013、2013.乙腈（HPLC级）；EDTA（分析纯）；磷酸（分析纯）；二乙胺（分析纯）；三水合乙酸钠（分析纯）。
2、方法与结果2.1色谱条件流动相A为AccQTag醋酸—磷酸盐缓冲液；由AccQTagEluent A浓缩制备AccQTag洗脱液,用前稀释10倍（或按以下方法配制：称19.04g三水合乙酸钠，加1000ml纯化水，搅拌，溶解，用50%H3PO4将pH调至5.2，加入1ml 1mg/ml的EDTA溶液，加入2.37ml二乙胺，用50%H3PO4滴定至pH4.95，用水溶性过滤器过滤，超声，脱气，备用。
）；流动相B为60% HPLC级乙腈，按梯度表梯度洗脱；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；进样量5μl；柱温38℃。
2.2对照品溶液、供试品溶液的制备分别精密称取16种氨基酸标准品，用纯化水配制成浓度如下表所示的混合溶液。
取上述溶液0.1ml，加纯化水0.9ml，旋涡器混匀，作为对照品溶液；取脑蛋白水解物注射液，加水稀释成含总氮为1mg/ml的溶液，取0.1ml，加纯化水0.9ml,旋涡器混匀，作为供试品溶液。
高效液相色谱法测定精氨酸催产素及其酶催化降解产物
４ ．酶催化反应是一类重要的特殊的复
杂反应，反应体系中成分复杂，有些性质很 相似，一般的方法不能完美地解决浓度测定 这个关键，ＨＰ Ｃ Ｌ 法可以直接测定酶催化反 应体系中组分的浓度，这就大大简化了分离
手段。用Ｈ Ｌ 研究这类反应 的动力 学机 ＰＣ
制，前景令人乐观。
反应速度常数ｋ［，２ １ １３ ｏ Ｌ－ ２］ ＝ ． ０ｍ ｌ ） ６ｋ ２ （ ／ １
反应体系为 ６ ００ｍｏ Ｌ ｍｌ．４ ｌ 磷酸缓冲溶 ／
（ 一）仪器及试剂
美国 Ｖ ｒ ｎ ６ ａｉ ５ ０高 效 液 相色谱仪及 ａ ０
Ｕ －０检测器；日 ｉ ｃｉ －０ Ｖ １０ 本Ｈｔ ｈ ８５５ 氨基 ａ ３
酸分析仪。
液 ｐ ． 在该体系中 既 Ｈ７ ， ０ 准 确加入一定量的标 准Ａ Ｔ Ｖ 和新制备的酶催化剂，使Ａ Ｔ的初 Ｖ 始浓度Ｃ为３ ０ １－ ｏ Ｌ 酶催化剂的 ｏ ． ０ ０５ ｌ ｍ ／ 量为２ ｍ ／ ｌ ． ｇｍ ，恒温３℃进行反应。分别 ５ ７ 在反应时间 ｔ０３ ０１０２０ ６分钟） （ ０８ ６ ４和３０
［ ］Ｄ ｅ ｅ，Ｂ ｏｕ，“ ａ ｒｉ ｏ ４ ．Ｄ Ｗｉ ｄ ．Ｂｈｓ Ｍ ｔａｏ ｆ ｕ ｔｎ
Ｔ ｅ ｒｏｓ ｓｍ Ｐｏｒ ｓ Ｂａ ｈ Ｎ ｖｕ Ｓ ｔ ， ｒ ｅ ｉ ｒｉ ｅ ｙｅ ｇ ｓ ｎ ｎ
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ｔ ｒ ｈｄ １ ｏ ａ ｈｏ ｒ Ｒ －８ ｕ ｎ ｏ ａ ｅ ａ ７ ｎ ｌ ｒ ｏｂ １ ｃｌ ｇｐ ｔ ｉ ｓ ｃ Ｐ ｏｍ
ｕｉｇ ４ｎ ｕｔ ｖ ｌ ｄｔ ｔｒ Ｂ ｃｕｅ ｍ ｓ ａ２ －ｍ ｌａ ｉ ｅ ｅ ｃ ． ｅａｓ ｓ ｅ ｎ ５ ｒ ｏ ｔ ｅ ｏ ｏ ａ ｕ ｔ ｍ ｔａ ｏ ｉ ｓｂｔｕｅ ｆｒ ｂｌ ｍｏｎ ｏ ｆ ｅｈｎ ｌ ｕ ｓ ｔｔ ｓ ｉ ｄ ｏ ｍｏ ｉ ｅ
高效液相色谱法测定赖氨酸含量
二、高效液相色谱法测定赖氨酸含量
4.结果计算 样品中赖氨酸含量按下式计算：
式中X——样品中赖氨酸的含量，％ c——从标准曲线上查找的试液中赖氨酸含量，ug
／mL m——样品质量，g 50——样品溶液的体积，mL 25/ 0.4——稀释倍数 10-6——将μg换算为g的系数
二、高效液相色谱法测定赖氨酸含量
■ 赖氨酸是一种碱性氨基酸，是谷物蛋白的第一限制性氨 基酸，在谷物食料中添加适量的赖氨酸，其蛋白质的生物 价大大提高，因此赖氨酸的应用范围很广。据统计全世界 赖氨酸产量的5%左右用于医药工业，约5%用于食品工业， 其余的90%左右用于饲料工业。 ■ 赖氨酸的价格较高，产品品质参差不齐，甚至还有掺假 现象，因此掌握正确的赖氨酸检测方法，不仅可为用户提 供购选产品及计算配方用量的参考，同时也可作为识别假 冒伪劣产品重要的手段和依据。 ■ 检测赖氨酸的方法主要有茚三酮溶液显色法、高效液相 色谱法等
品种。
■ L-赖氨酸的化学名称为L-2,6-二氨基己酸或α，ε-二 氨基己酸，属于单斜晶系，熔点为263℃，比旋光度是 +21°，难溶于醇和醚，易溶于水，等电点为9.59。游离的 L-赖氨酸具有很强的呈盐性，极易吸收空气的CO2生成碳酸 盐，故一般商品是以L-赖氨酸盐酸盐的形式存在。L-赖氨 酸盐酸盐的化学组成为C6H15O2N2Cl或C6H14O2N2·HCl，其相 对分子量为182.64，化学性质稳定，为无色晶体，几乎无 味，易溶于水，难溶于醇和醚，在25℃的水中溶解度为 793g/L。
■ c(Na2CO3)0.4mol／L溶液 于100 mL纯水中
称取4.3g Na2CO3固体，溶
■ 2,4-二硝基氯苯(CDNB)溶液 称取2,4一二硝基氯苯(化 学纯)2.0g，溶于100 mL甲醇中，浓度为20 g／mL
高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量-精品文档
高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量复方氨基酸注射液是一种透明、无色或微黄色的澄明液体，适用于不能口服或经肠道补给营养，以及营养不能满足需要的患者。
复方氨基酸注射液具有促进人体蛋白质代谢正常，纠正负氮平衡，补充蛋白质，加快伤口愈合的作用。
氨基酸（Amino acid）是构成蛋白质的基本单位，赋予蛋白质特定的分子结构形态，使他的分子具有生化活性[1-4]。
蛋白质是生物体内重要的活性分子，包括催化新陈代谢的酵素和酶。
酪氨酸是一种芳香族氨基酸，亦是20种用来合成蛋白质的蛋白氨基酸之一[5-11]。
色氨酸具有促进胃液及胰液产生的作用。
目前主要生产复方氨基酸注射液的厂家有上海长征富民金山制药XX公司、广东利泰制药XX公司、八峰药化宜昌有限责任公司、石家庄四药XX公司、西南药业XX 公司、湖南科伦制药XX公司、安徽丰原药业XX公司、广东科伦药业XX公司、广东利泰制药XX公司、广州百特侨光医疗用品XX公司等。
本文采用高校液相测定了复方氨基酸注射液中酪氨酸和色氨酸的含量。
1 仪器与试药瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；SCQ-1020超声波清洗器（上海声彦超声仪器XX公司）；UltiMate3000 高效液相色谱仪（上海仪先仪器XX公司）；E2000制冷色谱柱温箱（上海子期实验设备XX公司）；UV2800紫外可见分光光度计（上海舜宇恒平科学仪器XX公司）；PHS-3C酸度检测仪（深圳市卡迪亚科技XX公司）；MP-TA-10L 超纯水器（成都优越科技XX公司）。
乙腈（济南汇丰达化工XX公司）、三乙胺（吴江市吉祥精细化工XX公司）、冰醋酸（济南汇丰达化工XX公司）、甲醇（吴江市吉祥精细化工XX公司）、醋酸钠（济南汇丰达化工XX公司）、磷酸二氢钠（吴江市吉祥精细化工XX 公司）、四氢呋喃（济南汇丰达化工XX公司）、磷酸（淄博丰仓化工XX公司）。
2 含量测定2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果[11]，确定色谱条件如下。
饲料中氨基酸的测定高效液相色谱法
《饲料中氨基酸的测定高效液相色谱法》河南省地方标准编制说明一、编制的目的和意义氨基酸是羧酸碳原子上的氢原子被氨基取代后的化合物，氨基酸分子中含有基和氨羧基两种官能团。
与羟基酸类似，其可按照氨基连在碳链上的不同位置而分为α-，β-，γ-...w-氨基酸，但经蛋白质水解后得到的氨基酸都是α-氨基，它们是构成动物营养所需蛋白质的基本物质，是维持动物生长所必需的营养物质，其种类和含量是评价饲料蛋白质营养价值的根本指标，测定饲料中的氨基酸具有非常重要的意义。
随着畜牧养殖业的迅猛发展，对饲料营养成分分析也提出了更高的要求。
饲料分析已从比较单一的高含量营养成分，如蛋白质、脂肪等的总量分析，深入到比较复杂的微量营养素，如多种氨基酸、维生素、微量元素及饲料中的有害物质等分析。
目前，饲料产品国标中氨基酸的测定采用的是离子交换柱后茚三酮衍生色谱法。
但众所周知，该方法使用的氨基酸自动分析仪价格昂贵（约70万左右），专属性强，只能分析氨基酸，且分析速度慢。
而采用高效液相色谱法测定氨基酸，具有价格便宜，分析速度快、灵敏度高、操作简便的特点，其次，目前很多实验室都配置了高效液相色谱仪，其价格易于接受（约10万左右），而且它的分析范围很广，可测定饲料中的氨基酸、维生素、碳水化合物、脂肪酸、有机酸、添加剂(风味剂、防腐剂等)和有害物质(如黄曲霉素、棉酚和农药残留等)，因而实现了一机多用的可能。
相比于目前国标方法GB/T 18246-2000《饲料中氨基酸的测定》规定的氨基酸分析方法，高效液相则具有较好的通用性，应用范围广且市场占有率高，利于推广。
随着高效液相色谱技术的日趋成熟和普及，高效液相色谱法必将成为各检测机构测定氨基酸含量的主要方法。
二、任务来源及编制原则和依据2.1 任务来源根据河南省质量技术监督局文件《河南省质量技术监督局关于下达2017年第四批河南省地方标准制修订计划的通知》豫质监标发〔2017〕355号的要求，由河南海瑞正检测技术有限公司负责对项目编号为20174210667的河南省地方标准《饲料中氨基酸的测定高效液相色谱法》的起草、制定工作。
一种用高效液相色谱法测定醋酸赖氨酸中有关物质的方法
一种用高效液相色谱法测定醋酸赖氨酸中有关物质的方法高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）是一种广泛应用于实验室和工业领域的分析技术。
它是一种以溶液为介质的液相色谱分离技术，其分离原理是依据样品组分在固定相和流动相之间的相互作用力差异将其分离。
醋酸赖氨酸是一种常见的氨基酸，它在生物体内起着重要的生理功能。
为了更好地研究和分析醋酸赖氨酸中的有关物质，可以使用HPLC技术进行测定。
测定醋酸赖氨酸中有关物质的方法如下：1.仪器准备：HPLC仪器由溶液输送系统、样品进样系统、色谱柱和检测器等部分组成。
根据具体实验需要，选择合适的柱和检测器。
2.样品准备：将醋酸赖氨酸样品溶解在适当的溶剂中，如水或有机溶剂。
可以根据实验需要进行前处理步骤，如提取、稀释等。
3.色谱柱选择：根据有关物质的性质和分离需求，选择合适的色谱柱。
一般而言，可以选择反相柱来分离醋酸赖氨酸和有关物质。
4.流动相选择：根据具体实验要求，选择适当的流动相。
一般而言，可以选择水和有机溶剂的混合物作为流动相，通过改变混合物组成和流速来实现分离。
5.进样和检测：使用自动进样器或手动装置将样品进样到色谱柱中。
分析时，设置适当的检测器，并选择合适的检测波长。
6.方法优化和验证：根据实验需要，优化测定方法的参数，如流速、柱温等。
进行方法验证，包括线性范围、灵敏度、精密度和准确度等指标的确定。
7.数据分析：根据检测器所得到的色谱图，通过峰面积或峰高等参数进行定量分析。
可以使用专业的色谱数据处理软件进行数据处理和分析。
HPLC技术可以有效地测定醋酸赖氨酸中有关物质的含量和纯度。
其优点包括灵敏度高、分离效果好、选择性强、操作简便等。
同时，HPLC仪器和试剂的供应也非常便捷，能够满足实验室和工业领域的需求。
总之，通过使用HPLC技术测定醋酸赖氨酸中的有关物质，可以实现准确、快速和可靠的定量分析。
在具体实验中，需要根据具体要求选择合适的方法和参数，并进行合理的方法验证和数据分析。
高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量
高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量【摘要】本文采用高校液相测定了复方氨基酸注射液中酪氨酸和色氨酸的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），甲醇-乙腈-0.1%醋酸钠水溶液（3：5：92）为流动相，检测波长为280nm；色氨酸在50～150μg·mL-1范围内呈良好的线性关系；酪氨酸在100～900μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
色氨酸和酪氨酸的平均回收率分别为99.5%、99.5%，RSD为0.63%（n=6）、0.56%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于复方氨基酸注射液中色氨酸和酪氨酸的含量测定。
【关键词】复方氨基酸注射液；色氨酸；酪氨酸复方氨基酸注射液是一种透明、无色或微黄色的澄明液体，可提供完全、平衡的18种必需和非必需氨基酸，改善氮平衡。
复方氨基酸注射液具有促进人体蛋白质代谢正常，纠正负氮平衡，补充蛋白质，加快伤口愈合的作用。
复方氨基酸注射液用于大面积烧伤、创伤及严重感染等应激状态下肌肉分解代谢亢进、消化系统功能障碍、营养恶化及免疫功能下降的病人的营养支持。
复方氨基酸注射液含有L-脯氨酸（C5H9NO2）、L-组氨酸（C6H9N3O2）、L-色氨酸（C11H12N2O2）、L-丝氨酸（C3H7NO3）、L-丙氨酸（C3H7NO2）、L-精氨酸（C6H14N4O2）、L-缬氨酸等。
本文采用高校液相测定了复方氨基酸注射液中酪氨酸和色氨酸的含量。
1.仪器与试药WP-UP-Ⅱ-30分析型实验室专用超纯水机（四川沃特尔水处理设备有限公司）；FL2200-2高效液相色谱仪（浙江福立分析仪器有限公司）；CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）；B8510E-DTH超声波清洗机（必能信超声（上海）有限公司）；320 XT 电子分析天平（上海精科天美贸易有限公司）；U-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
动物营养中赖氨酸与精氨酸互作关系的研究进展
动物营养中赖氨酸与精氨酸互作关系的研究进展2011-07-29中国饲料工业信息网【大中小】【打印】共有评论0条点击507摘要：赖氨酸和精氨酸是对多数动物维持生长和氮平衡等具有重要作用的氨基酸。
二者在动物的蛋白质合成、能量贮存、促进淋巴细胞转化、增强动物的免疫功能和氮代谢产物排泄等方面都有十分重要的功能。
对于不同动物，饲料中不同的赖氨酸和精氨酸比例与动物的生长有很大关系。
本文综述了赖氨酸和精氨酸在动物营养中互作及其二者适宜比例的研究进展。
关键词：精氨酸；赖氨酸；营养；适宜比例1 赖氨酸与精氨酸的理化特性赖氨酸与精氨酸都为R基碱性氨基酸，在生理条件下带正电荷。
赖氨酸分子式C6H15N2O2，分子量为146.13，等电点为9.74。
L-赖氨酸为白色或近白色自由流动的结晶性粉末，无嗅，易溶于水和甲酸，难溶于乙醇和乙醚。
精氨酸分子式C6H14N4O2，分子量为174.20，等电点10.76。
L-精氨酸为白色菱形结晶（含2分子结晶水）或单斜片状结晶（无结晶水），无嗅，味苦，易溶于水，极微溶于乙醇，不溶于乙醚，加热至105℃时失去两分子结晶水。
生产中常用的为二者的L型晶体或其盐酸盐。
2 赖氨酸与精氨酸的合成代谢对于动物机体来说，赖氨酸和精氨酸都属于必需氨基酸（周顺武，2008），二者在机体中合成量有限，主要来源于饲料供给。
日粮中大约40％的精氨酸在小肠内直接被分解消化，其余进入机体循环或其他器官组织。
对于哺乳动物，精氨酸体内直接代谢途径有两个：（1）在精氨酸酶作用下分解为尿素和鸟氨酸，鸟氨酸是合成多胺类物质的前体，多胺对于调节细胞生长和发育具有重要意义；（2）在一氧化氮合酶（NOS）作用下分解为等分子的瓜氨酸和NO。
内源精氨酸的合成主要通过小肠-肾代谢轴完成，在胞液中精氨酸代琥珀酸合成酶和精氨酸代琥珀酸裂解酶的作用下，由瓜氨酸转化为精氨酸（Guoyao Wu等，2009）。
赖氨酸氧化的主要途经是通过赖氨酸α-酮戊二酸还原酶来实现的（Megharaja 等，2005），最后转化为α-氨基己酸参与机体的蛋白质和脂肪合成代谢，肝脏是赖氨酸代谢的主要场所。
高效液相色谱仪测定发酵液中的氨基酸含量
高效液相色谱仪测定氨基酸的含量1 L--色氨酸含量的测定1.1实验仪器与试剂色氨酸样品，甲醇，高效液相色谱仪，0.03%KH2PO4溶液1.2 HPLC色谱分析条件流动相为0.03%KH2PO4溶液（A）-甲醇（B），线性梯度淋洗，流速1.0mL/min，柱温35℃，检测波长276nm。
1.2标准溶液的配制精密称取色氨酸标准标准品50mg，置100ml容量瓶中，振摇，用流动相溶解到刻度，作为供试品溶液，另取色氨酸样品适量，同法操作。
1.3标准直线的制作精密称取色氨酸标准样品适量,分别稀释制成每1ml 中含色氨酸50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液，注入液相色谱仪，以色氨酸峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，制作回归标准直线。
1.4发酵液中样品中色氨酸含量的测定取发酵液，稀释配制成约500μg/ ml 的溶液，摇匀，过滤，取25μl进样，在高效液相色谱仪下测量，记录峰值面积，作图。
2L-精氨酸含量的测定2.1实验仪器与试剂L-精氨酸标准样品，乙腈，高效液相色谱仪，磷酸二氢铵。
PH计，磷酸，2.2HPLC色谱分析条件流动相: 以磷酸二氢铵溶液( 称取磷酸二氢铵1.15g, 加水800m 溶解后, 用磷酸调节pH 值至2.0±0.1, 加水稀释至1000ml ) - 乙腈为流动相，线性梯度淋洗; 柱温为30℃检测波长为206nm；进样量：25μl。
2.2标准直线的制作精密称取精氨酸标准标准品50mg，置100ml 容量瓶中，振摇，用流动相溶解到刻度，作为供试品溶液，另取色氨酸样品适量，同法操作。
精密称取精氨酸标准样品适量,分别稀释制成每1ml 中含精氨酸50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液，注入液相色谱仪，以精氨酸峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，制作回归标准直线。
2.3发酵液中样品中精氨酸含量的测定取发酵液，稀释配制成约500μg/ ml 的溶液，摇匀，过滤，取25μl 进样，在高效液相色谱仪下测量，记录峰值面积，作图。
高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液中的酪氨酸和色氨酸含量
８ ５ ） ， 甲醇一 水一 冰醋酸（ ３ ３ ： ６ ６ ： １ ） ， 乙腈一 ０ ． ０ １ ｍ ｏ １ ］ Ｌ磷 酸二 氢钾 （ 三 乙胺调
ｐ Ｈ＝ ６ ． ５ ）（ ５ ５ ： ４ ５ ） ， 甲醇 一 水一 三 乙胺 （ ４ ０ ： ６ ０ ： ０ ． １ ） ， 甲醇 一 水一 冰醋酸 （ ４ ６ ： ４ ３ ： １ ） ，
谱 柱 为 奥 泰 公 司 Ｃｌ ８色 谱 柱 （ ２ ５ ０ ｍ ｍｘ ４ ． ６ ｍｍ， ５ ｍ ） ： 乙腈一 甲醇 一 ２ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ
乙腈一 ０ ． ０ １ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ的磷酸氢 二钠一 磷酸 （ ２ ０ ： ８ ０ ： ０ ． ０ １ ） 不 同比例 的流动相 ， 结果 以乙腈一甲醇一 ２ ０ ｍ ｍｏ ｌ ／ Ｌ磷酸 二氢钠溶液 （ 磷酸调 ｐ Ｈ ３ ． ５ ￣ ０ ． １ ） （ ５ ： ５ ： ９ ０ ） 为流 动相， 供试品各峰分离效果最好 ， 故选用 乙腈一 甲醇一 ２ ０ ｍｍ ｏ Ｉ ／ Ｌ磷酸二氢钠 溶液 （ 磷酸调 ｐ Ｈ ３ ． ５ ￣ ０ ． １ ） （ ５ ： ５ ： ９ ０ ） 为流 动相。复方氨基酸注射液 中色 氨酸 和 酪 氨 酸 的含 量 为标 示 量 的 ９ ５ ％一１ ０ ５ ％。 ■ 参 考文献 【 １ １ 焦庆才 ， 赵根 海， 刘均忠， 刘茜． Ｌ 一 色氨 酸工业化技术研 究进展Ｉ Ｊ Ｉ ． 发 酵科技通讯， ２ ０ １ ０（ ４ ） ．
３讨 论
分别考察 乙腈一甲醇一 ２ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ磷酸 二氢钠溶液 （ 磷酸调 ｐ Ｈ ３ ． ５ ￣ ０ ． １ ）
（ ５ ： ５ ： ９ Ｏ ） ， 乙腈 一 甲醇 一 ２ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ磷 酸 ： 二 氢钠溶液 （ 磷酸调 ｐ Ｈ ３ ． ５ ￣ ０ ． １ ）（ １ ０ ： ５ ：
高效液相色谱法测定精氨酸中的赖氨酸
高效液相色谱法测定精氨酸中的赖氨酸赵鑫;肖玉平;黄荣林;黄碧云【摘要】目的建立了一种利用反相高效液相色谱控制精氨酸中赖氨酸杂质限量的方法.方法以组氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生剂,用C18色谱柱在柱温38 ℃下采用二元梯度洗脱,于254 nm波长处检测.结果精氨酸、赖氨酸与各有关物质分离良好,赖氨酸质量浓度在1～40 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999);赖氨酸的回收率在99.0%～100.3%;平均相对标准偏差为0.4%;赖氨酸最低检测限为0.05 μg·mL-1.结论应用该方法可以对精氨酸样品进行杂质限量控制检测.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2013(028)004【总页数】3页(P373-375)【关键词】高效液相色谱法;柱前衍生化;异硫氰酸苯酯;精氨酸;赖氨酸【作者】赵鑫;肖玉平;黄荣林;黄碧云【作者单位】广东轻工职业技术学院食品与生物工程系,广州,510300;广东轻工职业技术学院食品与生物工程系,广州,510300;广东轻工职业技术学院食品与生物工程系,广州,510300;广州医学院药学院,广州,510182【正文语种】中文【中图分类】R927.2精氨酸是人体所需的一种必需氨基酸，具有调节血糖、保护肝脏、增强免疫力、延缓衰老、抗疲劳、促进伤口愈合、促进婴儿生长等作用，是一种常用的制剂原料。
《中国药典》采用薄层色谱法控制精氨酸的杂质限量，单个杂质不得超过0.4%[1]。
《美国药典》采用薄层色谱法控制个体杂质限度不得超过 0.5%，总杂质限量不得超过2.0%[2]。
色谱法分离检测氨基酸的方法很多，但是氨基酸分子较小，且大部分没有紫外或荧光基团，检测氨基酸需要对其衍生后再进行检测。
常用的衍生试剂有异硫氰酸苯酯(PITC)[3-4]、邻苯二甲醛(OPA)[5]、氯甲酸芴甲酯(FMOC-C1)[6-7]、6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)[8-9]等。
高效液相色谱法测定氨基酸口服液中L-色氨酸的不确定度评定
； 期
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色 氨 酸 通 常 以游 离 或 结 合 态 广 泛 存 在 于生 物
称 取 约 ５Ｏ ｇＬ 色氨 酸 标 准 品 ， 水溶 解 并 准 确 ． ｍ 一 ０ 用
０ｍＬ 于 ℃冰箱 中保存 ； 体中， 是人类和动物必需的 ８ 种氨基酸之一 。人体 定 容 至 ５ ， ４ 不能制造它 ， 而必须从膳食 中摄取【２ １］ ，０色氨酸对生 甲醇 ： 色谱纯 ； 水： 超纯 水 ， 电阻率 为 １． Ｍｎ ・ ｍ ； ８２ ｃ 物 的生 长 和 氮平 衡 非 常重 要 ， 氨酸 缺 乏或 代谢 错 色 误 会 引起 一 系列 疾 病 ； 一 方 面 ， 氨 酸 也 可作 为 另 色 氨基 酸 口服液 ：０ｍＬ 支 ， １ ／ 市售 。
二极管阵列检测器 ， 国 Ｗａ ｒ 公司； 美 ｔｓ ｅ 三 色氨酸纯度标准物质 ： Ｂ Ｅ １０６ ， 一 Ｇ Ｗ（） ０２０ 纯度
赖氨酸精氨酸洗脱顺序
赖氨酸精氨酸洗脱顺序赖氨酸精氨酸洗脱顺序，是指在某些实验或研究中，根据目的或需要，将赖氨酸和精氨酸进行一定的处理和分离的顺序。
这一顺序将有助于提取、净化或测定这两种化合物的目标物质。
具体操作步骤一般如下：1. 根据实验设计或要求，选择适当的赖氨酸和精氨酸样品。
样品可以是生物体组织、培养物、食品等含有赖氨酸和精氨酸的物质。
2. 准备洗脱试剂和设备，例如离子交换柱、层析柱等。
根据样品性质和需求，可以选择阳离子交换柱、阴离子交换柱或其他适用的层析方法。
3. 样品处理：首先将样品经过适当的前处理，如浸提、研磨、加热等，以获得目标物质的可提取部分或使其适于后续分离处理。
4. 样品加载：将样品加载到洗脱柱中。
样品中的极性离子（如钠、钾、钙等）和非离子性物质会与洗脱柱中的固定相发生相互作用。
5. 洗脱条件优化：通过改变洗脱试剂的pH、浓度、离子强度等条件，调节洗脱柱中的离子交换平衡，使赖氨酸和精氨酸释放出来。
6. 分离和纯化：利用洗脱柱中对赖氨酸和精氨酸的亲、疏水性差异，通过适当的洗脱条件，使赖氨酸和精氨酸分离出来。
可以通过梯度洗脱、逆流洗脱或其他分离方法实现目标物质的纯化。
7. 提取和干燥：将赖氨酸和精氨酸所得的洗脱液经过适当的提取和干燥过程，得到纯化后的赖氨酸和精氨酸。
8. 分析和检测：经过洗脱和纯化后的赖氨酸和精氨酸可以进行进一步的分析和检测，例如使用色谱、质谱、光谱等方法对其进行定量或定性分析。
总的来说，赖氨酸精氨酸的洗脱顺序是一个有序的分离和纯化过程，需要根据实验设计和目标物质的特性，选择合适的方法和条件进行操作。
高效液相色谱法测定氨基酸
脑蛋白水解物溶液氨基酸含量分析方法研究方案1、仪器与试药1.1 仪器1525型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；Waters1525型泵，Waters2487型检测器，Waters5CH 型柱温箱，WatersBREEZE数据处理软件，水浴恒温器（精度±0.1℃），旋涡器，微量移液器，衍生专用管；CP225D型分析天平（德国）；4umNora-Pak TM C18（3.9mm×150mm，5μm）色谱柱（美国）1.2 药品与试剂16种氨基酸（门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）由中国药品生物制品检定所提供。
脑蛋白水解物注射液，云南盟生药业有限公司生产，规格10ml/支。
批号：2013、2013、2013.乙腈（HPLC级）；EDTA（分析纯）；磷酸（分析纯）；二乙胺（分析纯）；三水合乙酸钠（分析纯）。
2、方法与结果2.1色谱条件流动相A为AccQTag醋酸—磷酸盐缓冲液；由AccQTagEluent A浓缩制备AccQTag洗脱液,用前稀释10倍（或按以下方法配制：称19.04g三水合乙酸钠，加1000ml纯化水，搅拌，溶解，用50%H3PO4将pH调至5.2，加入1ml 1mg/ml的EDTA溶液，加入2.37ml二乙胺，用50%H3PO4滴定至pH4.95，用水溶性过滤器过滤，超声，脱气，备用。
）；流动相B为60% HPLC级乙腈，按梯度表梯度洗脱；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；进样量5μl；柱温38℃。
2.2对照品溶液、供试品溶液的制备分别精密称取16种氨基酸标准品，用纯化水配制成浓度如下表所示的混合溶液。
取上述溶液0.1ml，加纯化水0.9ml，旋涡器混匀，作为对照品溶液；取脑蛋白水解物注射液，加水稀释成含总氮为1mg/ml的溶液，取0.1ml，加纯化水0.9ml,旋涡器混匀，作为供试品溶液。
用高效液相色谱紫外检测法测定赖氨酸注射液中赖氨酸含量
用高效液相色谱紫外检测法测定赖氨酸注射液中赖氨酸含量凌笑梅;刘养清;杜鸣;徐秉玖
【期刊名称】《沈阳药科大学学报》
【年(卷),期】2000(17)5
【摘要】研究了采用高效液相色谱紫外检测法对盐酸赖氨酸注射液中赖氨酸含量的测定 .作者在AminoQuant方法的基础上 ,改为仅采用邻苯二醛 (OPA)衍生化 ,省略了原方法衍生化试剂中的不稳定成分 ,而采用优化的反应条件提高紫外测定的灵敏度 ;又对这个组成较简单的样品改用恒定组成的流动相淋洗 ,手动方法测定避免了对该试样不必要的梯度淋洗 ,较原AminoQuant氨基酸分析法简便、快速 ,结果峰面积与浓度相关系数r =0 9998,回收率为 99 7% (RSD为 1 0 %～ 1 5 % ) .在采用紫外检测法时 ,最小检出量为5 3× 10 -8(S/N =3)
【总页数】4页(P349-352)
【关键词】赖氨酸;邻苯二醛;高效液相色谱法;紫外法
【作者】凌笑梅;刘养清;杜鸣;徐秉玖
【作者单位】北京医科大学药学院;山西师范大学化学系
【正文语种】中文
【中图分类】R977.4;R927.2
【相关文献】
1.高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定舒血宁注射液中白果内酯的含量 [J], 亢苗苗;吴秀芬;高丽丽;李志强
2.高效液相色谱—荧光检测法测定血浆中五聚赖氨酸-β-羰基酞菁锌 [J], 李春艳;李晓静;单丽;黄明东
3.超高效液相色谱-紫外检测法测定婴幼儿配方乳粉中的核苷酸含量 [J], 王象欣;单艺;魏雪冬;李文斌;鄂来明;姜毓君
4.高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定复方盐酸赖氨酸片的含量 [J], 张伟;卓芝;周定娟;张晓松;邹玉明
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高效液相色谱法测定护发日用品中赖氨酸的含量
高效液相色谱法测定护发日用品中赖氨酸的含量邵二磊【期刊名称】《香料香精化妆品》【年(卷),期】2018(0)6【摘要】建立了一种柱前衍生高效液相色谱法测定市售护发产品中赖氨酸含量的方法.样品经0.1 mol/L盐酸溶液超声提取,经设定好的进样程序在线衍生后,采用安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm×5μm)进行分离.选用V(乙腈)︰V(甲醇)︰V(水)=45︰45︰10的有机相和40 mmol/L磷酸二氢钠缓冲溶液(pH=7.8)作为流动相进行梯度洗脱,检测波长为338 nm,柱温是25℃.结果表明:赖氨酸标准溶液在10～500 mg/L的质量浓度范围内保持良好的线性关系,相关系数R大于0.99,检出限为5.0 mg/kg,稳定性和重复性良好,加标回收率在96.42％到111.24％之间,相对标准偏差3.91％～5.23％之间.该方法操作简便,可用于护发产品中赖氨酸含量的测定.【总页数】4页(P37-40)【作者】邵二磊【作者单位】普研(上海)标准技术服务股份有限公司,上海 201318【正文语种】中文【相关文献】1.高效液相色谱法测定二维钙赖氨酸片中盐酸赖氨酸含量 [J], 黄静;张毅2.高效液相色谱法测定葡萄糖酸钙锌口服溶液中盐酸赖氨酸的含量 [J], 王艳芳;李琴;汪六英;李嘉楠3.高效液相色谱法测定过瘤胃赖氨酸盐酸盐的含量 [J], 赵威; 徐振兴; 吴月敏; 吴丽艳; 于思婷; 徐二华; 王效4.高效液相色谱法测定复方赖氨酸颗粒中盐酸赖氨酸含量 [J], 童颖;李苗;宋敏5.用高效液相色谱紫外检测法测定赖氨酸注射液中赖氨酸含量 [J], 凌笑梅;刘养清;杜鸣;徐秉玖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸的含量
高效液相色谱法测定赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸的
含量
高效液相色谱法测定赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨
酸的含量
白敦耀;丁伟杰
【期刊名称】《医药与保健（中旬版）》
【年(卷),期】2009(017)003
【摘要】目的采用高效液相色谱柱前衍生化法测定赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸含量.方法采用HypersiLC18(200mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇:0.05mol/L醋酸钠溶液(用醋酸调pH至 6.8)(65:35);流速为1.0ml/min,检测波长:360nm.结果盐酸赖氨酸在2.5248-25.248mg/L 范嗣内,呈良好的线性关系,回归方程为Y=50967.02+349786.5X,r=0.9993,平均回收率为100.22%,RSD=0.78%.结论本方法灵敏度高,重复性好,结果准确可靠,可作为赖氨肌醇维B12口服溶液中盐酸赖氨酸含量测定方法.
【总页数】3页(12-14)
【关键词】赖氨肌醇维B12;口服溶液;盐酸赖氨酸;高效液相色谱法;含量测定【作者】白敦耀;丁伟杰
【作者单位】武汉市普仁医院,湖北,武汉,430081;武汉市普仁医院,湖北,武汉,430081
【正文语种】中文
【中图分类】R540.41
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定赖氨肌醇维B12口服溶液中维生素B12及肌醇的含量[J], 刘珊珊; 吴琼珠。
精氨酸赖氨酸
精氨酸与赖氨酸精氨酸与赖氨酸，作为生物体内的重要氨基酸成分，各自在生命活动中扮演着不可或缺的角色。
它们不仅参与蛋白质的合成，还在能量代谢、免疫响应、激素分泌等多个生物过程中发挥关键作用。
本文将深入探讨精氨酸与赖氨酸的生物化学特性、生理功能、食物来源以及在健康维护中的应用。
一、精氨酸的生物化学特性与生理功能精氨酸是一种碱性氨基酸，它在体内参与多种生物化学反应。
精氨酸是尿素循环中的一个关键物质，能够帮助身体排除多余的氮，从而维持氮平衡。
此外，精氨酸还被证明具有促进生长激素分泌、增强免疫功能、改善心血管健康等作用。
在能量代谢方面，精氨酸可以通过一系列生物化学反应转化为一氧化氮（NO）和其他生物活性分子，这些分子在血管舒张、血小板聚集、神经传递等过程中发挥重要作用。
因此，精氨酸对于维持心血管系统的正常功能至关重要。
二、赖氨酸的生物化学特性与生理功能赖氨酸作为一种必需氨基酸，人体无法自行合成，必须通过食物摄入。
赖氨酸在体内主要参与蛋白质的合成，是构成肌肉组织的重要成分。
此外，赖氨酸还参与能量代谢、脂肪代谢以及免疫系统的调节。
赖氨酸的一个显著特点是其能够促进钙的吸收和利用，有助于维持骨骼的健康。
同时，赖氨酸还能够提高机体对疾病的抵抗力，促进伤口愈合，对于维持皮肤和黏膜的完整性具有重要作用。
三、精氨酸与赖氨酸的食物来源精氨酸和赖氨酸广泛存在于各种食物中，尤其是富含蛋白质的食物。
肉类、鱼类、奶制品、豆类以及坚果等都是这两种氨基酸的优质来源。
然而，不同食物中精氨酸和赖氨酸的含量和比例有所不同，因此，为了获得全面的营养，建议人们保持均衡的膳食结构。
四、精氨酸与赖氨酸在健康维护中的应用由于精氨酸和赖氨酸在生物体内的多种生理功能，它们在健康维护中具有广泛的应用价值。
例如，在体育运动中，补充精氨酸和赖氨酸可以帮助运动员提高肌肉力量、延缓疲劳、促进恢复。
在医学领域，这两种氨基酸也被用于治疗或辅助治疗一些疾病，如心血管疾病、免疫系统疾病等。
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西北药学杂志
２ ０ １ ３ 年 ７ 月 第 ２ ８卷
第 ４期
３ ７ ３
高 效 液 相 色谱 法 测定 精 氨 酸 中 的赖 氨酸
赵 鑫 ， 肖玉平 ， 黄 荣林 ， 黄碧 云 （ １ ． 广东轻工职业技术学院食品与生物工程系， 广州 ５ １ ０ ３ ０ ０ ； ２ ． 广州医学院药学院，
ｓ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｌ ｙ ｓ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｓ ． Ｔｈ ｅ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｒ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ ｌ ｙ ｓ ｉ ｎ ｅ ｗａ ｓ １ — ４ Ｏ／ ｘ ｇ・ｍＬ （ ｒ 一０ ． ９ ９ ９ ９ ） ． Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｉ ｅ ｓ ｏ ｆ
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ｕ ｍｎ ａ ｔ ３ ８℃ ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ ａ ｂ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ ｇ ｒ ａ ｄ ｉ ｅ ｎ ｔ ｅ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ。 ａ ｎ ｄ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｅ ｄ ａ ｔ ２ ５ ４ ｎ ｍ．Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｉ ｎ ｄ ｉ ｃ ａ ｔ ｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ａ ｒ ｇ ｉ ｎ ｉ ｎ ｅ ｗａ ｓ ｃ ｏ ｍｐ ｌ ｅ ｔ ｅ ｌ ｙ
关键词 ： 高 效 液 相 色谱 法 ； 柱 前 衍 生化 ； 异硫氰酸苯 酯； 精氨酸 ； 赖 氨 酸
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ４ — ２ ４ ０ ７ ． ２分类号 ： Ｒ９ ２ ７ ． ２
精氨酸 、 赖氨 酸 与 各 有
关 物 质 分 离 良好 ， 赖氨酸质量浓度在 １ ～４ Ｏ ｇ・ ｍＬ 范 围 内线 性 关 系 良好 （ ｒ 一０ ． ９ ９ ９ ９ ） ； 赖氨 酸的回收率在 ９ ９ ． ０ ～１ ０ ０ ． ３ ； 平 均 相 对标 准 偏 差 为 ０ ． ４ ； 赖氨 酸 最低 检 测 限 为 ０ ． ０ ５ ｔ ｔ ｇ・ ｍ Ｌ ＿ 。 。结 论 应 用该 方法 可 以 对精 氨 酸 样 品进 行 杂 质 限量 控 制检 测 。
广州 ５ １ ０ １ ８ ２ ） 摘要 ： 目的 建 立 了一 种 利 用 反 相 高效 液相 色谱 控 制 精氨 酸 中赖 氨 酸 杂 质 限量 的 方 法 。 方 法 以 组 氨 酸 为 内标 物 ， 异 硫 氰 酸 苯
酯（ Ｐ Ｉ Ｔ Ｃ ） 为柱前衍生剂 ， 用Ｃ 色谱 柱 在 柱 温 ３ ８ ℃ 下采 用二 元 梯 度 洗脱 ， 于２ ５ ４ ｎ ｍ 波 长 处检 测 。结 果
文献 标 志 码 ： Ａ
文章编号 ： １ ０ ０ ４ — ２ ４ ０ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４ — ０ ３ ７ ３ — ０ ３
Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｌ ｙ ｓ ｉ ｎｅ ｉ ｎ ａ ｒ ｇ ｉ ｎ ｉ ｎｅ ｂ ｙ ＨＰＬＣ
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