生理实验报告材料2红细胞计数

红细胞计数

一、实验目的：

学习、掌握应用稀释法计数红细胞的方法

二、实验原理：

1．血液中血细胞数很多，直接计数有一定难度，需要将血液稀释到一定倍数，然后用血细胞计数板计数。

2．在显微镜下计数一定容积的稀释血液中的红细胞，之后需要将其换算成每升血液中所含的红细胞数。

三、实验用品：

器具：显微镜、血细胞计数板、小试管、采血管、1mL和5mL移液管、玻璃棒、刺血针、干棉球

试剂：哺乳动物红细胞稀释液、蒸馏水、75%酒精

四、实验方法与步骤：

1．采血

2．稀释：用移液管取10微升血液，加至2mL红细胞稀释液中

3．充池：将盖玻片的一边与计数池的纵线末端接触，然后缓慢放下，使盖玻片平放在计数室两侧的隆起上，醮少许红细胞稀释液靠近盖玻片乾元，靠毛细管作用将稀释液冲入计数池，于高倍镜下观察红细胞分布情况

4．静置计数板 2~3min 待经红细胞下沉后，大方格四角以及中央取5个4×4中方格红细胞数，用高倍镜或低倍镜计数

5．计数，计算

注意事项：

1.保证计数板和盖玻片清洁；以防影响计数结果的准确性。

2.一次完成充池，如充池过少、过多、有气泡或出现任何碎片，应拭净计数板及盖玻片后重新操作。

3.充池后平放计数板，不能移动盖玻片。

4.计数板中细胞如果严重分布不均，应重新充池计数。

5.凡压线的细胞应按照数上不数下、数左不数右的原则，避免漏数或重复计数。

五、实验结果观察与记录以及分析：

1．结果计算：（53+113+76+60+64）/5=73.2

每16格平均73.2个红细胞,红细胞数：

73.2×25×200×10×1000000=3.66×10的12次方个／升

2．显微镜下图片

①空白计数板：

低倍镜：

高倍镜：

②400格：

③16格（5个）：

16格计数图片：

六、思考题：

1.稀释液装入计数板后，为什么静置一段时间才开始计数？

为使红细胞沉降完全

2.显微镜载物台为什么应置于水平位，而不能倾斜？

计数时是取某一视野的细胞数来估算整体数的，如果倾斜了，会使一边多一边少，如果取了多的那边数个数，整体的就比实际值多了，取少的那边计算，整体就比实际值少了，误差太大。

3.分析影响计数准确性的可能因素。

采集的红细胞在实验过程中，因外界原因破裂；红细胞计数误差；红细胞在计数板上分布不均