“三基”训练检验分册351-385ppt课件

抗球蛋白试验可分直接法和间接法。直接法 是检测体内被抗体／补体致敏的红细胞,如自身 免疫性溶血性贫血和新生儿溶血病的诊断等。 间接法是检测红细胞在体外致敏的方法,亦即检 测血清中有无游离的不完全抗体,可用于检测孕 妇Rh抗体和鉴定Rh血型等。
360.什么是免疫浊度法? 免疫浊度法是抗原抗体在一种特殊缓冲液中 快速形成抗原抗体复合物,反应物中呈现浊度, 与一系列标准品对照,从而计算出受检物的含量。 免疫浊度法现在已有免疫透射比浊测定法、免 疫胶乳浊度测定法和免疫速率散射浊度比浊法。 免疫浊度法较一般沉淀试验操作简单、测定时 间短、敏感度高,且可以使用于自动化仪器。此 项技术已应用于临床体液蛋白的检测。
357.试述间接荧光素标记抗体技术的原理。 将含有抗原的细胞制成抗原片,加上待测血 清后,其中所含的相应抗体可与细胞内或细胞表 面的抗原结合,再加入标记有异硫氰酸荧光素的 第二抗体(抗抗体,一般是抗人lgG)时,荧光素标 记抗体又可和已与抗原结合的待测血清中的抗 体反应,在荧光显微镜下,即可见到抗原部位呈 现荧光,间接证实待检样品中存在某种抗体。
359.简述抗球蛋白试验的原理。 红细胞表面包被了lgG抗体分子或补体分子 C3、C。片段,但不能产生凝集现象。lg6抗体和 补体都是人球蛋白,以此免疫动物,或用杂交瘤 (hybri—doma)技术可以得到抗球蛋白。这类 抗体的特异性是针对lgG-分子的Fc段或补体G、 G的片段,可以和包被在红细胞上的抗体分子和 补体分子作用,使红细胞发生凝集,抗球蛋白分子 起着搭桥的作用。红细胞包被的抗体还可以是 lgA或lgM,这必须用相应的抗lgA和抗lgM才能 检出。
355.何谓凝集反应?一般可分几种? 凝集反应是指颗粒性抗原或细胞性抗原与其 相应抗体,在适量电解质和一定温度条件下,经 过一定时间,出现肉眼可见凝集的现象。凝集反 应可分为直接凝集反应、间接凝集反应、胶乳 凝集试验、协同凝集反应、抗球蛋白试验以及 病毒血凝及血凝抑制反应等。其中间接凝集反 应又可分为正向间接凝集反应、反向间接凝集 反应和间接凝集抑制反应。抗球蛋白试验又可 分为直接试验和间接试验。
356.何谓沉淀反应?沉淀反应试验可分几种? 沉淀反应是指可溶性抗原(血清蛋白质、细 菌培养滤液、细菌浸出液等)与其相应抗体结合 后,在适量电解质和一定温度条件下,且两者比 例适合时,产生肉眼可见的沉淀物的现象。
常用的沉淀试验有环状沉淀试验、絮状沉淀试 验和在凝胶中的沉淀试验。凝胶中的沉淀试验 是指可溶性抗原与其相应抗体在凝胶中自由扩 散,或在电场中扩散,在适量电解质和一定温度 条件下,在抗原抗体比例适合处,形成白色沉淀 线、沉淀环或沉淀峰。自由扩散有单向扩散和 双向扩散试验,电场中扩散有单向电扩散(火箭 电泳)和双向电扩散(对流电泳)。此外,还有免疫 电泳,即琼脂平板电泳与双向扩散等。
由于细胞核成分复杂,不同成分的抗原性亦有不 同,故有多种不同的ANA,如抗核蛋白抗体(抗 DNP)、抗DNA抗体、抗可提取性核抗原抗体 (抗ENA)。抗‘ENA又可分为十几种。
364.类风湿因子是什么?其对类风湿性关节炎 诊断有无特异性? 类风湿因子(RF)是抗变性lg6自身抗体,主要 为1 9S的lgM,也可见到7S的lg6及lgA。 RF主要出现在类风湿性关节炎病人血清中。 RF阳性支持早期类风湿性关节炎的倾向性诊断, 但RF也如ANA一样,并不是类风湿性关节炎独 有的特异性抗体。其他疾病如结缔组织病、病 毒性肝炎等,甚至老年人中亦有不同程度的阳性 率。
353.影响抗原抗体反应有哪些因素? 影响抗原抗体反应的主要因素是电解质、酸 碱度和温度。适当振荡也可促进抗原抗体分子 接触,从而加速反应。 ‘
354.血清学反应的应用原则是什么?试举例说 明o (1)用已知抗原检测未知抗体,如诊断伤寒的 肥达试验和诊断梅毒的LJSR试验。 (2)用已知抗体检测未知抗原,如用诊断血清 鉴定病原微生物,用抗甲胎蛋白血清检测甲胎蛋 白等。
《医学临床“三基”训练》
检验分册(第四版）
基础理论、知识问答（351-385）
§5.2基础理论和基本知识问答
351.抗原抗体反应有何特点? 抗原抗体反应的特点是:①特异性。②按比 例。③可逆性。
Байду номын сангаас
352.抗原抗体反应可分为几个阶段? 抗原抗体反应可分为两个阶段。第一阶段为 特异性结合阶段,此阶段反应快,但不出现可见 反应。第二阶段为反应阶段,在各种环境因素影 响下,抗原抗体进一步交联和聚集,出现肉眼可 见反应,此阶段反应慢。实际上两阶段难以严格 区分,若反应开始时抗原抗体浓度较大且两者比 例适合,在多种因素影响下,可很快形成可见反 应。
361.什么是自身免疫病? 当某些原因使自身免疫应答过分强烈,导致相 应的自身组织器官损伤或功能障碍,这种病理状 态被称为自身免疫病。
362.自身抗体检测有何临床意义? 多数自身免疫病病人血清中都会出现针对自 身抗原的自身抗体,虽然有些自身抗体在自身免 疫病中的确切意义尚未得到严格证实,但其相关 性已得到认可,故血清自身抗体检测对自身免疫 病的诊断、治疗和评价等方面仍有重要意义,如 ANA、ENA、dsDNA的检测等。
待加入底物后,酶催化底物,产生呈色物质。根 据着色深浅,可判定待测抗体的有无及含量。如 检测lgM类抗体,可用抗弘链抗体包被固相载体, 再依次加入待测血清、抗原、酶标记的针对抗 原的特异抗体。如检测抗原,可采用抗原捕获 (双抗体夹心)EIJSA。除此之外,EIJSA还有很多 其他的衍变方法,如竞争抑制法等。
358.试述酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理。 将抗原包被于固相载体,加人待测血清,如其 中含有相应抗体,可与包被抗原结合。洗去不参 与反应的无关蛋白成分后,再加入酶标记的第二 抗体或酶标记抗原,使与待测抗体反应,在固相 载体上形成抗原一待测抗体一酶标记抗抗体或 抗原一待测抗体一酶标记抗原的复合物。
363.什么是抗核抗体?有什么临床意义?有些什 么类型? 抗核抗体(ANA)是泛指抗各种核成分的抗体,是 一种广泛存在的自身抗体。ANA可以与不同来 源的细胞核起反应,无器官特异性和种属特异性。 ANA在系统性红斑狼疮病人血清中滴度较 高,但也出现在其他许多自身免疫病病人中,故 有时临床将检出ANA作为自身免疫甚至自身免 疫病的依据。