B-CrossLaps serum

E170
| Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim l B-CrossLaps/serum
用途：
用免疫学方法定量测定人血清或血浆中I型胶原的分解产物。

电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys1010、2010和E170（Elecsys模块）免疫测定分析仪。

概述:
骨基质的有机成分中，90%是由I型胶原组成的。

在正常的骨代谢过程中,骨基质进行着有序的合成与分解。

因此，I型胶原在骨中合成，同时也被分解成碎片释放入血流中，并从肾脏排出。

通过检测骨吸收指标，可了解骨转换的程度。

在生理性或病理性（如年老或骨质疏松症）骨吸收增强时，I型胶原的降解也增高，相应的分解片段在血中的含量随之升高。

重要的I型胶原分解片段是C端肽（CTx）。

在骨成熟过程中，C端肽的α-天冬氨酸转变成β型（β-CTx）。

此C端肽的同分异构体是I型胶原降解所特异的。

检测血清C端肽可用于监测骨质疏松症或其它骨疾病的抗吸收治疗，疗效可在几周后反应出来。

由于采用了针对β-8AA八肽的两种单克隆抗体，Elecsysβ-CrossLaps/serum能特异检测交联的I型胶原同分异构体片段及含有此八肽双体的所有I型胶原分解片段（β-CTx）。

原理：
采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。

·第1步：50ml标本和生物素化的抗β-CrossLaps单克隆抗体混匀，样本中的抗原从血清成份中释放出来。

·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒和钌标记的抗β-CrossLaps单克隆抗体形成夹心复合物，此复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。

·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过2点定标校正由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

试剂：
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。

粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。

含防腐剂。

R1：生物素化的抗β-CrossLaps单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。

浓度2.5mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.2。

含防腐剂。

R2：Ru(bpy)32+标记的抗β-CrossLaps单克隆抗体（黑盖），1瓶，8ml，浓度2.4mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.2。

含防腐剂。

储存和稳定性：
存放在2-8 度，切莫倒置。

未开封，可稳定至标明的保质期。

开封后，2－8度，12周；放在Elecsys2010或E170上，8周；放在Elecsys1010上，4周（使用后放回2－8度；如置20－25度，约20小时）。

标本采集和准备：
血清：按标准常规方法采集。

血浆：肝素、EDTA-K3 抗凝（首选EDTA-K3抗凝血浆，较血清更为稳定）。

因为β-CTx的浓度呈一定程度的昼夜变化，所以建议抽取早晨空腹的血,如作长期观察,标本之间的采样条件均应相同。

稳定性：
血清或肝素抗凝血浆在2-25度可稳定24小时，-20度可稳定3个月。

需长时间保存时，置-70
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度。

只能冻融一次。

EDTA抗凝血浆在15－25度可稳定24小时，2－8度可稳定8天，-20度可稳定3个月。

需长时间保存时，置-70度。

只能冻融一次。

溶血标本（Hb>0.5g/dl）可导致β-CTx 测定值降低。

含沉淀的标本使用前需离心。

标本和质控品禁用叠氮钠防腐。

方法：
按仪器操作说明进行操作。

检查试剂与消耗品是否充足。

使用前需混匀微粒。

仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。

如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。

Elecsys2010和E170：
将冷藏试剂预温到20 度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。

仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。

Elecsys1010：
将冷藏试剂预温到20－25度放置于仪器的样品/试剂盘上（室温20 －25度），避免产生泡沫。

使用前手工打开试剂瓶盖，使用后手工关闭试剂瓶盖并放回2 －8度。

定标：
每批β-CrossLaps试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。

应用β
-CrossLaps CalSet定标液定标。

定标频率：
每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求：
Elecsys2010或E170：
·一个月（同一批号试剂）
· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）
Elecsys1010：
·每一试剂盒做一次
· 7天（室温20 －25度）
· 3天（室温25－32度)
各种分析仪均适用的情况：
·根据要求进行定标：如质控结果超出范围时。

质控：
Elecsys骨标志物质控品1，2和3（PreciControl Bone）。

各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。

质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。

检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。

计算：
对每一个标本，仪器会自动计算β-CTx含量，单位是ng/ml或pg/ml。

干扰因素：
该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl）、溶血（Hb>0.5g/dl）脂血（脂质1500mg/dl）和生物素<90ng/ml干扰。

接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。

不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。

17种常用药物经试验对本测定无干扰。

β-CTx浓度高达150ng/ml（150，000pg/ml）也不出现钩状效应。

接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。

检测结果可能与一些影响骨吸收的临床状况相混
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淆，如甲状旁腺功能亢进或甲状腺功能亢进。

在预测骨质疏松进程、骨折危险度、甲状旁腺功能亢进或甲状腺功能亢进等方面，本试验的应用尚待证实。

Elecsysβ-CrossLaps测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。

不可作为制定或修改现有治疗方案的唯一依据。

检测范围：
0.010-6.00ng/ml 或10-6000pg/ml
稀释：
由于检测范围较宽,不需要稀释。

正常参考值：
例数均数SD 均数+ 2SD
ng/ml pg/ml ng/ml pg/ml ng/ml pg/ml
男性
30–50 岁 165 0.300 300 0.142 142 0.584 584
50–70 岁 109 0.304 304 0.200 200 0.704 704
> 70 岁 365 0.394 394 0.230 230 0.854 854
女性
停经前 254 0.299 299 0.137 137 0.573 573
停经后 429 0.556 556 0.226 226 1.008 1008
如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。