抑制物
凝血因子Ⅷ抑制物实验室检测
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立即封板，37 ℃ 2h
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ID
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106
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定量检测性能评价
阳性率：61.19%，Bethesda方法为64.31% 经配对卡方检验：P＝0.144 一致性检验：Kappa=0.715， P＝0.000 灵敏度：87.22% 特异度：85.71% 阴性预测值：78.83% 阳性预测值：91.67% 诊断符合率：86.69%
160.0BU/mL
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指标性能评价(n=261)：
定性检测性能评价
经ROC曲线分析(0.939)，APTTD（APTT2-APTT1）CUT-OFF值为1.6sec
APTTCI纠正指数CUT-OFF值为0.55(APTTCI=APTT*APTT1*APTT2* APTTD3/106)
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FⅧ抑制物自动化筛查的方法学研究
1. 以SYSMEX CA1500为检测平台 2. 以凝固法为检测原理 3. 分别设定即刻纠正试验（APTT1）及孵育后纠正
试验（APTT2）程序 4. 所有试剂均为商品化试剂 5. FⅧ抑制物筛查所需时间小于20min
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FVIII抑制物检测SOP
Betheda法
一、原理 Bethesda单位的定义为，在37℃中孵育2小时后，抑制物中和加入因子VIII量的50%为一
个单位。 未肯定存在抑制物的患者：
1.患者血浆(0.2ml)和正常人血浆(0.2ml)等比混合 2.对照为正常人混合血浆0.2ml加缓冲液0.2ml 3.37℃孵育2h，用测VIII:C的方法，检测各管VIII:C水平 体内存在抑制物的患者 1. 首先用FVIII分析缓冲液稀释患者血浆，在实验中设置多个稀释度更可取。孵育2h
Verbruggen B, Novakova I, Wessels H, Boezeman J, van den Berg M,MauserBunschoten E.The Nijmegan modification of the Bethesda Assay for factor VIII:C Inhibitors: improved specificity and reliability. Thrombosis & Haemostasis 1995 73: 247-251. (For the Nijmegenmodification.)
以 APTT 测定为基础的凝血因子抑制物的筛查
一、原理 凝血因子抑制物对APTT可能产生即刻或时间依赖性的影响。待测血浆中含有即刻反应抑
制物时，加入正常血浆，只能很小程度上纠正凝血时间或不能纠正。当待测血浆中含有时间 依赖性抑制物时，则需要与正常血浆孵育一段时间后才能检测到抑制物。
正常血浆、待测血浆和二者作1：1的混合血浆分别置37oC孵育60分钟，然后检测正常血 浆、待测血浆、已孵育的混合血浆及分别孵育后的正常血浆和待测血浆等体积混合后的APTT， 最后比较两种混合血浆的APTT被纠正程度。
常见的PCR反应抑制物一览
1、假阳性问题
方法学问题：靶基因序列特异性、引物错配、非特异性扩增污染问题：样本污染、产物污染、产物污染解决办法：严格区分试验区域及人员培训，使用UNG技术
2、假阴性问题
问题来源：试剂因素、操作因素、仪器因素、标本因素解决办法：设置阳性对照监测试剂问题降低操作难度，提高操作人员水平室内质控、室间质控监控使用抗干扰能力强的试剂提取样本
体系外部因素
SDS:离子去污剂，0.01%即可完全抑制PCR反应，0.005%可显著降低产量苯酚:0.5%即可完全抑制PCR反应，0.2%可显著降低产量乙醇:大于1%的浓度可抑制PCR反应，但在某些体系里又能增加产量异丙醇:抑制作用比乙醇稍强乙酸钠:大于5mM时抑制PCR反应氯化钠:大于25mM时抑制PCR反应（生理盐水无影响）EDTA:0.5mM可使PCR产物减少，1mM完全没有PCR产物血红素（heme）-来源：血液，大于1mg/ml抑制PCR反应氯高铁血红素（hemin）：大于0.1ng/μl抑制PCR反应丹宁酸（tannic acids）：大于0.1ng/μl抑制PCR反应肝素：大于0.15IU/ml抑制PCR反应尿素-来源：尿，大于20mM时产生抑制腐殖质-来源：土壤，植物材料，自然界水植物多糖-来源：粪便，植物多糖聚苯乙烯，聚丙烯-来源：紫外线照射塑料管胆酸盐-来源：粪便胶原质-来源：组织靛青染料-来源：粗斜纹棉布，牛仔裤蛋白酶-来源：牛奶钙离子-来源：牛奶，骨头铁离子-来源：血液二甲苯胺溴酚兰胆红素（bilirubin）其他抑制剂除上述抑制剂外，还存在一定的PCR增强剂，比如甜菜碱、二甲基亚砜、甲酰胺、甘油、PEG、亚精胺和单链DNA结合蛋白等，但是在高浓度情况下，也会对PCR产生抑制，因此如何采用增强剂消除抑制剂的影响，采用多少的浓对结果都存在很大的影响。
纤溶酶原激活剂抑制物PAI检测介绍
样本
为了获得血浆，小心混合 1 份枸橼酸钠（0.11mol/l）和 9 份静脉全血，避免产生泡沫。立即
离心，不小于 1500×g，至少 Nhomakorabea0 分钟。
标本的稳定性：
≤-20℃
1 个月
+2～+8℃
8 小时
注释 1. 加倍或减半对计算值或实验室-内部因子没有影响。 2. 采用不稀释的血浆。如果样本中 PAI 活性超过标准液 S2 的范围，样本必须以标准血浆
S1 预先稀释（例如 1：1），然后重测，结果应按照稀释度校正。 3. 每次更换设备、新批号 PAI 试剂和新测量系统时，必须重测标准液 S1 和标准液 S2，并
试验原理
PAI 可使样本中的尿激酶失活。通过纤溶酶原转化为纤溶酶试验可检测残余尿激酶的活性。 生成的纤溶酶与底物反应，在 405nm 波长测定吸光度。干扰物α2-抗纤溶酶能被氯胺 T 氧 化而灭活。 PAI+尿激酶 → [PAI –尿激酶]+尿激酶（残余）
纤溶酶原 ⎯尿⎯激⎯酶（⎯剩⎯余）→ 纤溶酶
纤溶酶原激活剂抑制物 PAI 检测介绍
用途
用于测定人体血浆中 PAI 的活性。
概要和说明
尿激酶（uPA）和组织型纤溶酶原激活物（tPA）活化纤溶酶原，形成具有活化纤维蛋白酶 的纤溶酶。这些激活物受到纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）的调节。I 型抑制物(PAI-1) 在循 环中发挥着重要生理作用，能溶解新形成的血栓，具有非常迅速的作用。在急性肺栓塞、败 血症、恶性疾病、术后和妊娠患者的血浆中 PAI 活性可升高。PAI 水平升高与心肌梗塞、再 梗死和术后深静脉血栓有关；脓毒性休克患者若 PAI 活性升高，表示预后不良。
血友病抑制物的产生与防治策略
抑制物分类
抑制物按照Bethesda 单位 (BU)进行测量 ，产生抑制物的患者按照其敏感程度 分为高滴度和低滴度
• 低滴度: ≤ 5 BU (无免疫应答) • 高滴度: > 5 BU (有免疫应答)
抑制物又可分为一过性的(自然消失)和持续存在的
CH-MA中-华20医1学20会3血2液2-分00会1血栓与止血学组, 中华血液学杂志. 2013, 34(5):980-981
同时应用FEIBA®, 50 IU/kg 每天两次 • 该方案一直使用到抗体滴度低于1BU/ml0
Van Creveld protocol
• 25 IU FVIII/kg 隔日一次或每周三次*
-*滴度开始下降后开始减少的FVIII 剂量 -剂量每次减少30％，最终减至10-15 IU／kg，每周3次
血友病抑制物的产生与防治策略
杨仁池 中国医学科学院血液病医院 国家血友病病例信息管理中心
CH-MA-20120322-001
目录
1
抑制物的产生及危害
2
抑制物的检测与应对
CH-MA-20120322-001
何为抑制物？
血友病中“抑制物”是指中和抑制凝血因子的抗体，又称“凝血因子抗体”，造成 凝血因子治疗无效。
CH-MHAa-e2m0o1p2h0ili3a2220-0060; 112(Suppl. 6): 1–7.
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如何降低抑制物的发生风险？
• 预防治疗 • 产品的选择
CH-MA-20120322-001
如何降低抑制物的发生风险？
• 预防治疗 • 产品的选择
CH-MA-20120322-001
预防治疗可能比按需治疗的抑制物发生风险低
血友病合并抑制物诊断与治疗中国指南(2023年版)解读PPT课件
THANKS
分型
根据凝血因子缺乏的种类，血友病可分为血友病A（缺乏FⅧ）、血友病B（缺 乏FⅨ）和血友病C（缺乏FⅪ）。抑制物可分为高反应性和低反应性两类。
实验室检查方法
凝血因子活性测定
通过测定凝血因子活性，了解凝血因子缺乏程度和类型。
抑制物检测
采用Bethesda法或Nijmegen法检测抑制物，确定抑制物的存 在和滴度。
关节病变处理
对于关节病变，可采取物理治疗、药物治疗或手术治疗等方法。物理治疗包括冷敷、热敷 、理疗等；药物治疗可使用非甾体抗炎药、止痛药等；手术治疗主要针对严重关节病变患 者，如关节置换术等。
抑制物处理
对于产生抑制物的患者，可采取免疫抑制剂治疗、血浆置换等方法。同时，应调整凝血因 子替代治疗方案，如增加剂量、改变给药途径等。
预防措施建议
01
避免外伤
血友病患者应尽量避免外伤，如 避免剧烈运动、使用锐利工具等 。
02
03
定期输注凝血因子
疫苗接种
对于重型或中型血友病患者，定 期输注凝血因子可有效预防出血 和关节病变。
血友病患者可接种相关疫苗，如 流感疫苗、肺炎球菌疫苗等，以 预防感染。
处理方法介绍
出血处理
对于急性出血，应立即给予凝血因子替代治疗，同时采取局部止血措施。对于严重出血或 危及生命的情况，应及时就医并采取相应治疗措施。
社会资源整合及政策支持
社会资源整合
整合社会资源，为患者提供医疗 、教育、就业等方面的支持，减 轻患者的经济负担，提高患者的 生活质量。
政策支持
倡导政府加大对血友病合并抑制 物患者的关注和支持力度，推动 相关政策的制定和实施，为患者 提供更多的保障和救助。
05 并发症预防与处理
血友病伴抑制物的解读及处理
七、抑制物实验室诊断
（参照WFH实验室手册）
1、筛选试验： APTT延长，PT，TT正常， 2、纠正试验：延长的APTT不能被正常血浆纠正；
FⅧ:C减少，且随孵育时间呈进行性下降。 3、FVIII抑制物滴度测定 (Bethesda方法) ： 4、Nijmegen改良法：将患者血浆与缓冲后的正常人血浆共同温育
同种免疫抗体（allo- antibodies）: 血友病（HA）患者输注FVIII制品后产生的抗FVIII抗体
自身免疫抗体（Auto-antibodies ，获得性FVIII抑制物) 非血友病患者自发产生的抗FVIII抗体
血友病患者接受凝血因子(未接触过外源性蛋白)治疗后体内免疫反 应产生的特异性抗体-中和或抑制FVIII/FIX活性，引起FVIII/FIX降低， 导致临床难以控制的出血，对以往的治疗无效。
应对并发症 立足关节保护 -处理好紧急与重要
应对并发症：
紧急
抑制物、关节手术、理疗、急性出 血事件等一系列临床问题
重要
立足于关节保护的预防治疗
1、重要：预防治疗是减少血友病 应急事件发生的有效方法；
2、定期对患者进行评估（结构、 功能和参与度）
血友病伴抑制物解读及处理
安徽省立医院血液科
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吴竞生
一. FVIII抑制物定义
（一）患者相关因素
种族区别 非洲裔、拉丁裔美国人50%＞白种美国人25% 可能rFVIII产品基因型与黑人患者基因型不匹配有关
家族、兄弟 兄弟50% ＞远亲10%
Malmo 兄弟研究 RR 3.2 较年轻的兄弟易受累
1、遗传因素
2、抑制物产生的时间与暴露天数
• Median exposure 9-36 days
组织因子途径抑制物的研究进展
组织因子途径抑制物的研究进展组织因子途径抑制物(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)是一种存在于血液中的天然抗凝物质，通过作用于外源性凝血途径对体内凝血系统起调节作用。
近年研究发现，TFPI在血友病、脓毒症、抗磷脂综合征、静脉血栓栓塞等疾病中起重要作用，随着对TFP1.功能机制、检测方法及其与疾病的关系研究的深入，有助于探索TFP1.的潜在诊疗作用。
一、TFPI的基本特征TFPI基因位于染色体2q31-2q32,属于KUnitZ型蛋白酶抑制剂家族蛋白，具有三个串联功能区，从带负电荷的酸性氮基端到带正电荷的碱性较基端，分别为K1、K2、K3,如图1所示，通过与体内多种蛋白酶结合从而发挥生理功能。
TFPI主要由内皮细胞合成，也广泛在多种细胞与组织中表达。
在合成后TFP1.存在于内皮细胞、血浆和血小板中。
在血浆中，与脂蛋白结合的TFP1.约占80%；20%的TFP1.以游离形式循环于血液中。
研究证实与脂蛋白结合的TFP1.由于缺乏疑基末端而无抗凝活性，从而为游离的TFP1.起主要抗凝活性提供依据。
图1TFPI的mRNA结构(框代表外显子，连接线代表内含子，框内显示由每个外显子编码的TFP1.区域，C-Term为C末端，K为KUnitZ结构域，1.为连接区域，N-Terrn为N末端）二、TFPI的多重抗凝调控机制TFPI作为天然抗凝物质主要发挥抗凝功能，研究者分别对其结构域和抗凝机制进行了一系列的研究，发现TFP1.的主要抗凝方式是以FXa依赖的方式使TF-FVIIa复合物失活，通过外源性凝血途径抑制凝血的起始阶段。
该过程需要两步完成：TFPI通过K2与FXa 结合形成TFPI-FXa复合物，抑制FXa活性；TFPI-FXa复合物中TFPI 通过K1.与TF-FVIIa复合物中的FVIIa活性部位结合，形成稳定TF-FVIIa-TFPI-FXa四联体复合物，而后被单核细胞等吞噬清除，从而实现对TF-FVIIa复合物的抑制［1］o蛋白S作为TFP1.的辅因子在上述的抗凝过程中起协同作用已被研究证实，蛋白S通过与TFPI的K3上的Arg199和G1.u226结合，降低TFP1.的受体亲和力，增强TFP1.FXa复合物的形成，减少凝血酶生成。
常见的PCR反应抑制物一览
常见的PCR反应抑制物一览一个PCR反应过程分为很多的步骤，同时也受到很多因素的影响，可以分为内部因素和外部因素，内部因素是指正常试剂体系中的成分，外部因素是指环境或者样本带入的因素。
体系内部因素引物：引物是整个PCR体系最重要的部分，也是决定一个PCR反应特异性的关键，引物在设计时要遵守一定的原则（长度、扩增跨度、碱基等）。
酶及其浓度：目前有两种Taq DNA聚合酶，一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶，另一种为大肠杆菌合成的基因工程酶，酶浓度过高可引起非特异性扩增，浓度过低则合成产物量减少。
dNTP的质量与浓度：dNTP溶液呈酸性，一般配置成体系需将其调节至7.0-7.5，正常情况下4种dNTP的浓度应该相等，如果其中某一种过高就会引起错配，浓度过低又会引起PCR产物的产量。
模板核酸（靶标）：模板核酸的量和纯化程度，是PCR成败与否的关键环节之一，对于RNA 模板更要注意RNA的降解。
Mg2+浓度：主要影响PCR扩增的特异性和产量，一般要对应dNTP的浓度。
Mg2+浓度过高，反应特异性降低，出现非特异性扩增，浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性，使反应产物减少。
温度与时间的设置：PCR原理三步骤涉及变性-退火-延伸三个温度点，也就是变性温度与时间、退火（复性）温度与时间、延伸温度与时间。
循环次数：循环次数决定PCR扩增程度，PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。
一般温度循环次数在30-40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量就越多。
体系外部因素o SDS:离子去污剂，0.01%即可完全抑制PCR反应，0.005%可显著降低产量o苯酚:0.5%即可完全抑制PCR反应，0.2%可显著降低产量o乙醇:大于1%的浓度可抑制PCR反应，但在某些体系里又能增加产量o异丙醇:抑制作用比乙醇稍强o乙酸钠:大于5mM时抑制PCR反应o氯化钠:大于25mM时抑制PCR反应（生理盐水无影响）o EDTA:0.5mM可使PCR产物减少，1mM完全没有PCR产物o血红素（heme）-来源：血液，大于1mg/ml抑制PCR反应o氯高铁血红素（hemin）：大于0.1ng/μl抑制PCR反应o丹宁酸（tannic acids）：大于0.1ng/μl抑制PCR反应o肝素：大于0.15IU/ml抑制PCR反应o尿素-来源：尿，大于20mM时产生抑制o腐殖质-来源：土壤，植物材料，自然界水o植物多糖-来源：粪便，植物多糖o聚苯乙烯，聚丙烯-来源：紫外线照射塑料管o胆酸盐-来源：粪便o胶原质-来源：组织o靛青染料-来源：粗斜纹棉布，牛仔裤o蛋白酶-来源：牛奶o钙离子-来源：牛奶，骨头o铁离子-来源：血液o二甲苯胺o溴酚兰胆红素（bilirubin）o其他抑制剂除上述抑制剂外，还存在一定的PCR增强剂，比如甜菜碱、二甲基亚砜、甲酰胺、甘油、PEG、亚精胺和单链DNA结合蛋白等，但是在高浓度情况下，也会对PCR产生抑制，因此如何采用增强剂消除抑制剂的影响，采用多少的浓度对结果都存在很大的影响。
组织因子途径抑制物研究进展
１ ＦＩ ．Ｔ Ｐ 和抗凝血酶 （ Ｔ 之 间的抗凝作用 ：Ｆ Ｉ Ａ Ａ ） Ｔ Ｐ 和 Ｔ都可 以抑 制 Ｆ 。我们知 道肝素 可 以有效地加 速 Ａ Ｘａ Ｔ的抗 凝作 用 ， 同时肝素也 可以加速 Ｔ Ｐ 的抗凝作用 ， ＦＩ 尤其是 在凝血 酶原酶复 合物上对 Ｆ Ｘａ的抑制 ， 是肝素 对 ＦＸａ的抑 制作用 较弱 。因 但 此， 生理浓度的 Ａ （ Ｔ Ｏ一２５ｍｏ Ｌ 和 Ｔ Ｐ （ ２ ５ｎ ｏ Ｌ 可能 ． ］ ） ／ Ｆ Ｉ０～ ． ｍ ］ ） ／ 是 Ｆ 更重要 的抑制 剂。据推测 在肝素 存在 的情况 下 ， Ｔ可 Ｘａ Ａ
白的结 合。Ｔ Ｐ 结合 到细胞表 面需要碱 性 Ｃ 末端尾 ， ＦＩ － 其上 有肝
素结合位 点… ， 且是 Ｔ Ｐ 分子发挥抗凝 作用的前 提。Ｔ Ｐ 通过 Ｆ１ ＦＩ 碱性 Ｃ 末端结合 到细胞 表面后介 导 ＦＸ的内化和降解 ， 下调 一 并 Ｔ —Ｖ１ａ活性 。在 Ｓ Ｓ凝胶 电泳 上 Ｔ Ｐ 显示 两个带 ， ＦＦ Ｉ Ｄ ＦＩ 大小 分 别 为（ ５０ ０± ０ ０ Ｄ和（ ３０ ０± ０ ｏ Ｄ， ４ ０ ２ ０ ） ３ ０ ２ ｏ ） 后者是 否是前者 的
降解 产物 目前 不清 。但 两种 形式 发挥 功能均 需要 ＦＸａ 。血 浆
Ｔ Ｐ 分子量以 ３ Ｆ１ ４～４ Ｄ １ｋ ａ为 主 ， 这个 分 子量 的 Ｔ Ｐ Ｆ Ｉ承担着 免 受 血栓 形成 的危 险。动物实验发 现 ， 注 Ｔ Ｐ 主要被 肝和 肾摄 输 ＦＩ 取。 目前 ， 采用抗凝活性 Ｌ 、 ２ 免疫染色 和免疫形态测定 分析 、 Ｆ Ｊ Ｔ— Ｐ Ｎ Ｉ ｍＲ Ａ原位杂交和免疫金 电镜术 、 基因表达 等多种方 法对 Ｔ Ｐ 进行分 析。 ＦＩ 二 、Ｆ Ｉ Ｔ Ｐ 合成部位及血浆水平
最新：血友病合并抑制物诊断与治疗中国指南(2023年版)
最新：血友病合并抑制物诊断与治疗中国指南（2023年版）一、概述抑制物是血友病患者接受外源性凝血因子vm/ix（Fvm/Fix）输注后产生的抗FVHI/FIX同种中和抗体。
抑制物是血友病治疗过程中最严重、最棘手的并发症。
中华医学会血液学分会血栓与止血学组、中国血友病协作组于2018年制订了《凝血因子Vin/IX抑制物诊断与治疗中国指南》。
此后，又分别对国内同行和血友病患者进行了抑制物诊治现状的专项调查，结果表明有关人员对于血友病合并抑制物的认知水平有了较大提高，也有不尽如人意之处。
近年的研究揭示了血友病合并抑制物的发病机制，同时新药的不断涌现也为抑制物患者出血的预防及治疗提供了更多的选择。
为进一步提高对血友病合并抑制物的认识，作到发现及时、处理规范，特制订此指南供国内同行参考。
二、基本概念详见《凝血因子VII/IX抑制物诊断与治疗中国指南（2018版）》。
三、推荐等级根据GRADE方法，本指南推荐等级如下:1级推荐:相当于"指南推荐"，代表该推荐对患者的安全性及获益明显高于风险和负担。
1B级：该推荐至少有一项观察性或干预性研究的数据支持，且该推荐在大多数情况下适用于大多数患者；1C级：该推荐缺乏此类证据支持，但是仍然对患者的安全或获益很重要。
2级推荐:相当于"指南建议"，用于表示较弱的推荐，该建议可能会随着更新证据的出现发生改变。
2B级：病例登记或研究数据支持该建议；2C 级：无前述数据支持。
四、FVH/FIX抑制物（同种抗体）的危险因素抑制物发生的危险因素包括遗传因素和非遗传因素。
遗传因素主要有疾病严重程度、种族和家族史、基因突变类型等。
F8基因突变类型是最重要的抑制物产生危险因素。
与重型血友病A（HA）患者产生抑制物密切相关的主要突变类型包括大片段缺失、无义突变、22号内含子倒位，其次为小片段缺失和插入、错义突变等。
不同类型的基因突变导致抑制物产生的风险差异，可能与体内存在FVHI抗原量有关。
木质纤维素水解液中抑制物对酿酒酵母发酵的影响及应对措施概述
木质纤维素水解液中抑制物对酿酒酵母发酵的影响及应对措施概述木质纤维素是一种典型的生物质，微生物可将其转化为燃料乙醇。
在木质纤维素的资源化利用过程中，酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）是常用菌种之一，可代谢木质纤维素水解液的主要有机质组分（糖类）产生乙醇。
研究表明多种物质影响酿酒酵母的代谢活性，降低木质纤维素的转化效率，全面了解抑制物的种类和应对措施对木质纤维素分解工艺的调控优化具有重要意义。
文章概述了木质纤维素水解液中常见的抑制物种类，不同抑制物对酿酒酵母的影响以及减少抑制物对酿酒酵母代谢过程的抑制作用的方法。
标签：木质纤维素水解液；抑制物；酿酒酵母引言我国每年产生数量庞大的固体废弃物，焚烧已成为最常见的固废处置方式，该方式不仅浪费资源，还严重影响空气质量。
报道显示微生物可将生物质转化为液态、气态的燃料，具有能耗低、转化效率高和不产生二次污染等优点，因此，以生物质材料作为原材料开发新能源已受到世界范围的关注[1]。
农作物秸秆和木材废弃物在固体废弃物中占重要地位，其主要成分是木质纤维素。
木质纤维素是一种典型的生物质，利用微生物代谢木质纤维素产生清洁能源已成为研究热点之一。
目前，酿酒酵母产乙醇被广泛应用于木质纤维素的资源化处理工艺，其具有成本低、原料丰富等优点。
在酿酒酵母利用木质纤维素发酵之前，需对木质纤维素进行预处理和糖化，此时木质纤维素中的纤维素与半纤维素等转化为可发酵糖，在纤维素与半纤维素等大分子物质的分解过程中，引入了一些小分子化合物，这些物质对发酵有抑制作用，统称为抑制物。
1 抑制物的种类及抑制作用木质纤维素水解液中的抑制物大致分为三类：弱酸类、呋喃类和酚类化合物。
弱酸类主要包括甲酸、乙酸和乙酰丙酸，弱酸会破坏细胞内外的渗透压平衡，并进入细胞内部，这部分弱酸在细胞内部进一步解离，使得细胞内环境酸化，影响细胞内部的酶促反应，最终抑制细胞的生长[2]。
呋喃类抑制物主要是糠醛和HMF，这类物质对微生物中的乙醇脱氢酶、丙酮酸脱氢酶和醛脱氢酶产生抑制，减缓酿酒酵母的生长；醛类抑制物会产生细胞内活性氧，导致DNA分解，进而阻碍RNA和蛋白质的合成[3、4]。
抑制物发生与处理(MKT)
结合新兴技术 如人工智能、 大数据等提升 处理技术的智
能化水平。
加强国际合作 与交流引进国 外先进的处理 技术推动全球 范围内处理技
术的发展。
生物降解机制是抑制物发生与处理(MKT)领域的重要研究方向旨在探 究有机污染物的生物降解过程和机理。
未来研究方向包括深入探究生物降解机制的各个环节提高有机污染 物的降解效率和降低其对环境的影响。
探索新型抑制物处理方法的原理和应用范围提高处理效果和适用性。
结合现代科技手段如人工智能、机器学习等开发智能化的新型抑制物 处理方法。 新型抑制物处理方法的研发需要综合考虑环境、经济和社会因素确 保其可持续发展和广泛应用。
深入研究抑制 物发生的机理 为处理技术提 供理论支持。
开发高效、环 保的抑制物处 理技术降低处
序性死亡。
抑制物会干扰生物体的代谢过程 导致能量产生和物质合成受阻。
长期暴露于抑制物会影响生物体 的正常代谢导致健康问题。
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抑制物可以影响酶的活性从而影 响生物体的代谢速度。
某些抑制物可能会影响生物体的 基因表达从而影响其代谢和生长 发育。
抑制物发生与处 理(MKT)对生物 体的影响
原理：利用微生 物或酶分解抑制 物
优点：环保、高 效、选择性高
应用领域：废水 处理、农业废弃 物处理等
案例：活性污泥 法、生物膜法等
物理法：通过改变温度、压力、电场等物理条件来去除或转化抑制物。 化学法：利用化学反应来转化或去除抑制物如氧化还原反应、沉淀反应等。 生物法：利用微生物或酶的生物活性来降解或转化抑制物如活性污泥法、生物膜法等。 联合处理法：将物理法、化学法和生物法联合使用以提高抑制物处理的效率和效果。
因子抑制物对数表
因子抑制物对数表1. 引言因子抑制物对数表是一种用于记录化学反应中各种因子对反应速率的影响的工具。
通过实验测量和整理数据，我们可以得到一个因子抑制物对数表，从而更好地理解反应机理和优化反应条件。
本文将介绍因子抑制物对数表的概念、构建方法和实际应用。
2. 概念2.1 因子抑制物在化学反应中，各种因素会影响反应速率。
有些因素能够促进反应进行，而有些因素则会抑制或减缓反应速率。
这些能够抑制或减缓反应速率的因素被称为因子抑制物。
常见的因子抑制物包括温度、浓度、压力、催化剂等。
2.2 对数表对数表是一种记录数据的方式，通过将数据取对数，可以更好地观察数据之间的关系和趋势。
在因子抑制物对数表中，我们通常将各个因素的取值范围划分为若干个区间，并记录下每个区间内反应速率的取值，并计算其对数值。
3. 构建方法构建因子抑制物对数表的关键是进行实验测量和数据整理。
下面将介绍一种常用的构建方法。
3.1 实验测量首先，选择一个需要研究的化学反应，并确定需要考察的因子抑制物。
例如，我们可以选择酶催化的反应，并考察温度对反应速率的影响。
然后，我们可以设置一系列不同温度下的实验条件，并在每个温度下进行多次实验测量。
通过记录反应开始后一段时间内产生的产物浓度或消耗的底物浓度，我们可以得到不同温度下的反应速率。
3.2 数据整理在得到实验数据后，我们需要对数据进行整理和分析。
首先，将每个温度下的多次实验结果求平均值，以减小误差。
然后，计算每个温度下反应速率的对数值。
接下来，将不同温度下的对数值绘制成图表。
可以使用散点图或折线图来展示数据之间的关系和趋势。
根据图表中数据点的分布情况，我们可以判断因子抑制物对反应速率是否存在明显影响。
最后，根据图表中数据点所呈现出来的趋势，我们可以将温度范围划分为若干个区间，并计算每个区间内反应速率的平均值和对数值。
这些数据将构成因子抑制物对数表的内容。
4. 实际应用因子抑制物对数表在化学研究和工业生产中具有重要的实际应用价值。
抑制动物发情的药什么原理
抑制动物发情的药什么原理
抑制动物发情的药物作用的原理可能会有所不同，具体取决于药物的种类和用途。
下面是一些常见的抑制动物发情的药物及其原理：
1. 雄性动物阉割或去势手术：通过切除雄性动物的睾丸，去除产生大量性激素（如睾酮、雄激素）的主要来源，从而抑制动物的性欲和发情行为。
2. 反向性激素类药物：这些药物可以阻断性激素的合成或作用，进而影响动物的性激素水平和发情行为。
例如，抗雄激素药物（如阉割药别嘌呤、黄体形成素释放激素类似物）可以抑制雄性动物的性激素产生和发情行为。
3. 避孕药：对于雌性动物，避孕药物可以通过抑制排卵或改变子宫内膜以阻止受精和妊娠，从而抑制发情行为。
4. 链带类药物：链带类药物可以通过影响神经传导途径或神经递质的释放来影响动物的行为和性激素水平。
这些药物可能会对动物的中枢神经系统产生抑制或兴奋的影响，从而减少或完全抑制动物的发情倾向。
需要注意的是，抑制动物发情的药物必须由兽医或专业人士合理使用和监测，以确保药物的安全性和有效性，并避免对动物的身体健康和行为产生负面影响。
WFH世界血友病联合会指南-什么是抑制物
>5 BU 抑制物作用强大 抑制物快速中和凝血因子
低滴度抑制物 <5 BU
抑制物作用微弱 抑制物缓慢中和凝血因子
高应答
抑制物滴度超过 5 BU 至少 一次 重复暴露于凝血因子将快速激 发新的抑制物形成
低应答
抑制物从不超过 5 BU 暴露于凝血因子将缓慢激发新 的抑制物形成
什么是抑制物? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
哪些人有产生抑制物的风险? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
世界血友病联盟不从事医学实践活动，而且无论何种情况都决不会为 某个人推荐某种治疗。剂量方案和其他治疗方案会不断修订并且不断 确定新的副作用。世界血友病联盟未作出任何声明, 明示或暗示本出 版物中的药物剂量或其他治疗建议为正确的。基于上述原因，强烈建 议患者在服用本出版中提及的任何药物前，应寻求医疗顾问的意见 和/或参阅制药公司提供的印刷版药品说明书。世界血友病联盟不推 荐具体的治疗产品或制造商；如本出版物提及某个产品名称，并不代 表 WFH 推荐该产品。
抑制物?
什么是
目录
世界血友病联盟(WFH)出版 ©世界血友病联盟,2010
WFH 鼓励血友病/出血性疾病非营利性组织分发 WFH 的出版物用 于教育目的。
如需获得翻印,再分发,或翻译本出版物的许可,请通过下列地址联系 联络部 (Communications Department)。 本出版物的 PDF 版本可从世界血友病联盟网站 上下 载。也可从 WFH 处获得额外的副本，其联系信息如下：
因子8抑制物检测
100uL 100uL 100uL
100uL 正常 血浆
100uБайду номын сангаас 正常 血浆
100uL 正常 血浆
37℃孵育2h
检测Ⅷ因子活性
选取剩余因子活性最接近50%的受检管，计算因子活性
后混因子：先混因子≈2:1 即消耗掉约50%，则因子 抗体浓度应该在一个单位 左右，因子消耗掉很多， 则稀释倍数应扩大到几十 个单位，消耗不足50%， 则查表得结果
有抑制物
患者血浆与缓冲液倍比稀释
1:2
1:4
1:8
100uL 患者 血浆
100uL 正常 血浆
37℃孵育2h
等量混匀立即做Ⅷ因子活性 结果计做100%
未确定有抑制物
100uL 正常 血浆
100uL 患者 血浆
37℃孵育2h
后混 等量混匀后立即检 测APTT、Ⅷ因子活性
100uL正常 血浆+100uL 患者血浆
先混
37 ℃ 孵 育 2h 检测APTT Ⅷ因子活性
结果分析： 抑制物阴性：两管APTT
结果接近（如差异在2s以 内）且APTT基本被纠正到 正常范围 两管因子活性接近（差异 在1:1到1:0.85之间）且因 子活性衰减在合理范围内
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报告的抑制物发生率与研究时间与检测频率有关
最近的meta 分析显示:考虑到抑制物检测的频率与研究时间的原因， 血源性与重组两类凝血因子Ⅷ 抑制物发生率的差异会消失。
•越是近年的研究，抑制物的检测越频繁，报告的抑制物发生率越高。
•近年的研究，大多是初治患者应用rFⅧ的研究。
Testing frequency(month/per)
念。
PTPs (预先治疗组) 该组患者至少有一次VIII 因子类产品暴露 史。
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产生抑制物的危险因素
疾病严重程度与类型
20-30%重度甲型血友病(短暂或长期存在) 5%轻中度甲型血友病(短暂或长期存在) 2-5%乙型血友病(短暂或长期存在)
遗传基因
抑制物家族史 种族
For Internal use only!
Bonn 方案(高剂量方案)
• 低反应: 50-100 IU FVIII/kg一天两次 • 高反应: 100-150 IU FVIII/kg 每12小时两次; 根据出血的严重度
• 同时应用FEIBA®, 50 IU/kg 每天两次
• 该方案一直使用到抗体滴度低于1BU/ml • 在伯恩大学使用该方法治疗60例患者，52例(86．7％)患者获得成功， 治疗时间为14．1～39．9个月。 • 目前该方案并未在各国推广使用，主要是因为输注频繁且治疗费用极为
C. E. Ettingshausen. Why immune tolerance induction is important ? 21st Annual EHC Conference, Dublin, September 12th, 2008
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For Internal use only!
定性检测：
• APTT纠正试验
高滴度抑制物 (>5 BU)
定量检测：
• 高滴度抑制物 (>5 BU) • 低滴度抑制物 (≤5 BU)
低滴度抑制物 (≤5 BU)
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抑制物的监测
儿童患者
– 20个暴露日之前，每五个暴露日检测一次 – 21-50个暴露日， 每10个暴露日检测一次 – 之后一年至少检测两次，直至第150个暴露日
Massimo Franchini et al. Hematology 81 (2012) 82–93
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药物因素
pdFⅧ与rFⅧ转换后新生抑制物的发生率无差异
一项对5项临床试验的汇总分析，共研究了307例曾接受过pdFⅧ的甲型血友病经治患者换用 rFⅧ后新生抑制物的产生率。
Van-Creveld 方案 (低剂量方案)
• 25 IU FVIII/kg 隔日一次或每周三次*
*滴度开始下降后开始减少的FVIII 剂量
剂量每次减少30％，最终减至10-15 IU／kg，每周3次
• 研究显示使用该方案治疗24例初始抗体滴度低于10 BU／ml患者， 21例(87%)患者获得成功。该方案患者易接受而且性价比高。
昂贵。
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Study period(calendar year)
Iorio et al.J Thromb CH-MA-20120322-001
Haemost 2010; 8: 1256–65.
抑 制 物 有 哪 些 症 兆？
出血更频繁，更严重
常用剂量的凝血因子的疗效变差
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如 何 确 诊？
原因：机体排斥异体蛋白
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产生抑制物的危险因素
暴露天数 大量输注
治疗方案 非遗传性因素
药物因素
主要与机体如何适应异体蛋白有关
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FVIII因子抑制物相关风险 前50个暴露日，抑制物发生率最高
50%
45%
25%
患 者 百 分 比
ITI治疗失败或不适 合ITI治疗
ITI是免疫系统的脱敏技术，目的 是清除同种抗体抑制物
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ITI 治疗
高剂量方案
Bonn protocol
低剂量方案
Van Creveld protocol Malmö Protocol
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临床研究 Schwartz, et al. 1990 Aygoren-Pursun et al. 1997 Berntorp, 1997 White et al. 1997
总病例数 86 39 87 69
患者新生 抑制物数 1 0 0 0
Abshire et al. 2000
总和
26
307
0
1
Scharrer I and Ehrlich HJ. Haemophilia 2001; 7(4): 346 – 348.
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Malmö 方案(中剂量方案)
• 初始抗体滴度高的患者，采用该方案时建议使用免疫吸附方法使抗体滴 度低于10BU／ml后开始ITI治疗
• 口服泼尼松50~150 mg和环磷酰胺12~15 mg/kg/d，共2d，以后2~3
mg/kg/d，共8～10 d • 同时也可加用静脉丙种球蛋白0.4 g/kg/d，共5 d • 给予大剂量输注FⅧ，2～3周维持体内FⅧ浓度40％-100％，然后每周 2～3次预防性输注FⅧ治疗 • 该方案治疗的16例患者中10例(62．5％)获得成功
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发生抑制物患者急性出血的处理
抑制物 高滴度
暂时性的
低滴度
提高凝血因子的 用量
开始治疗时 低滴度
开始治疗时 高滴度 免疫吸附
免疫耐受 诱导
From Astermark J. Semin Thromb Hemost. 2003;29:77-85
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药物因素
其他FVIII转为百因止后抑制物发生风险低
新生抑制物出现情况 良好 96例无抑制物病史患者中， 出现新生抑制物患者1 例
一项爱尔兰研究，累积113例均由其它FVIII（包括血源性及重组）换用百因止治疗的患者，其 中85%接受百因止给药达到或超过100天，监测并分析抑制物的出现情况。
大于150个暴露日的成年患者
– 6–12个月检测一次
– 从前用适量因子浓缩物替代治疗有反应，而现在不出现反应的患者，有必要做抑制
物评估
de Moerloose P, Fischer K, Lambert T et al. Recommendations for assessment, monitoring and follow-up of patients
Bacon CL,Singleton E,Brady B, et al. Low risk of inhibitor formation in haemophilia A patients following en masse switch in treatment to a third generation full length plasma and albumin-free recombinant factor VIII product. Haemophilia 17(3): 407-411. 2011
Samantha C. Gouw et al .N Engl J Med 2013;368:231-9.
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药物因素
血源性与重组FⅧ抑制物的发生率无显著差异
95% CI, 8–25
95% CI, 13–20
一项对25篇前瞻性研究的meta分析，共收集了800名甲型血友病患者的信息，363名应用血源性 FⅧ，437名应用重组FⅧ，评价初治患者应用两类FⅧ的抑制物发生情况。
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治疗方案
预防治疗可能较按需治疗的抑制物发生风险低
一项对316例初治重症甲型血友病患者进行的多中心，前瞻性队列研究，药物暴露为50EDs
累 积 抑 制 物 发 生 率
30
Cum incidence inhibitors
按需治疗
Crude RR: 0.4 (95% CI 0.2-0.8) Adjusted RR: 0.5 (95% CI 0.2-0.9)
暴露日
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大量输注
手术 一次性大量输注 凝血因子浓缩物 危重出血
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药物因素
虽然不同研究显示药物的抑制物发生风险有不同，但目前学术 界的主要观点是：药物之间免疫原性没有显著差异。
一项回顾性研究分析了574例2-12岁的重度甲型血友病初治患者应用与转换不同凝血因子 产品的抑制物发生率
20
预防治疗