艾滋病检测技术与应用 ppt课件
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艾滋病AIDSPPT课件-优秀医学PPT课件
艾滋病由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起
病原学
• 艾滋病病毒（HIV）是正链单股RNA病毒
–属于逆转录病毒（retrovirus）科
• 慢病毒（lentivirus）属
• HIV分为HIV-1型和HIV-2型
–世界各地的AIDS主要由HIV-1型引起 – HIV-2型仅在西非洲呈地方性流行。
HIV-1
1PI+2NRTIs
抗病毒治疗
• 药物种类
• 药物分类
–逆转录酶抑制剂 »核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI） »非核苷类逆转录酶抑制（NNRTI）
–蛋白酶抑制（PI） –膜融合抑制剂 –整合酶抑制剂
• 联合治疗（HAART）
–2 NRTI+1 NNRTI –2 NRTI+1 PI
2020/4/28
69
• 冷藏环境下，HIV可以长期存活
• 消毒剂浓度、作用时间、病毒数量及类型、 有无其它蛋白质杂质等影响灭活效果
下列成分中病毒微量---一般不会传播
• 尿液 • 大便 • 唾液 • 眼泪 • 汗液
2020/4/28
21
HIV in Body Fluids
Blood 18,000
Semen 11,000
预防
• 尚无药物可以彻底清除体内的HIV • 也无疫苗可以预防 • 监测
• 高危人群 • 指导行为干预， • 确定要干预的行为 • 采取正确有效的干预方法 • 普遍防护的意识和观念
预防
• 经性传播
• 洁身自爱、遵守性道德---预防经 性途径传染艾滋病的根本措施
• 提倡安全性行为 • 宣传安全套的正确使用，使感染
• 我国呈上升趋势
• 以异性为主 • 同性有所增加
病原学
• 艾滋病病毒（HIV）是正链单股RNA病毒
–属于逆转录病毒（retrovirus）科
• 慢病毒（lentivirus）属
• HIV分为HIV-1型和HIV-2型
–世界各地的AIDS主要由HIV-1型引起 – HIV-2型仅在西非洲呈地方性流行。
HIV-1
1PI+2NRTIs
抗病毒治疗
• 药物种类
• 药物分类
–逆转录酶抑制剂 »核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI） »非核苷类逆转录酶抑制（NNRTI）
–蛋白酶抑制（PI） –膜融合抑制剂 –整合酶抑制剂
• 联合治疗（HAART）
–2 NRTI+1 NNRTI –2 NRTI+1 PI
2020/4/28
69
• 冷藏环境下，HIV可以长期存活
• 消毒剂浓度、作用时间、病毒数量及类型、 有无其它蛋白质杂质等影响灭活效果
下列成分中病毒微量---一般不会传播
• 尿液 • 大便 • 唾液 • 眼泪 • 汗液
2020/4/28
21
HIV in Body Fluids
Blood 18,000
Semen 11,000
预防
• 尚无药物可以彻底清除体内的HIV • 也无疫苗可以预防 • 监测
• 高危人群 • 指导行为干预， • 确定要干预的行为 • 采取正确有效的干预方法 • 普遍防护的意识和观念
预防
• 经性传播
• 洁身自爱、遵守性道德---预防经 性途径传染艾滋病的根本措施
• 提倡安全性行为 • 宣传安全套的正确使用，使感染
• 我国呈上升趋势
• 以异性为主 • 同性有所增加
艾滋病检测的工作总结PPT
应对检测资源不足
积极争取政府和社会支持，扩大检测资金来源， 提高检测服务可及性。
提高公众认知度
开展艾滋病防治宣传教育活动，提高公众对艾滋 病的认知度和检测意识。
保障感染者权益
加强与相关部门的沟通协作，确保感染者得到公 平待遇，消除歧视。
05
未来工作计划与展望
明确下一年度检测目标
1 2
提高检测覆盖率
优化采样点布局
根据实际需求，合理调整采样点布局，方便群众就近检测。
加强宣传推广力度，提高社会认知度
开展宣传活动
01
利用世界艾滋病日等契机，组织宣传活动，提高公众对艾滋病
的认知度。
加强媒体合作
02
与主流媒体建立合作关系，定期发布艾滋病防治知识和工作动
态。
拓展宣传渠道
03
利用微博、微信等新媒体平台，发布艾滋病防治信息，扩大宣
早期发现
通过对高危人群进行筛查，我们成功发现了一名早期艾滋病患者 ，为其及时提供治疗，有效延缓病情进展。
精准干预
针对一名拒绝接受检测的艾滋病患者，我们联合心理专家进行心理 疏导，最终成功劝导其接受治疗。
启示
艾滋病检测工作需关注患者心理需求，加强跨学科协作，提高检测 率和治疗依从性。
挑战应对策略分享
结果判定
根据检测结果判定 受检者是否感染艾 滋病病毒。
采样
采集受检者的血液 、唾液或尿液等样 本。
检测
按照所选检测方法 进行操作，获取检 测结果。
咨询与告知
为受检者提供检测 结果咨询，告知后 续处理建议。
技术创新与优化
高通量检测技术
研发能够同时检测多个样本的 高通量检测技术，提高检测效
率。
自动化与智能化
积极争取政府和社会支持，扩大检测资金来源， 提高检测服务可及性。
提高公众认知度
开展艾滋病防治宣传教育活动，提高公众对艾滋 病的认知度和检测意识。
保障感染者权益
加强与相关部门的沟通协作，确保感染者得到公 平待遇，消除歧视。
05
未来工作计划与展望
明确下一年度检测目标
1 2
提高检测覆盖率
优化采样点布局
根据实际需求，合理调整采样点布局，方便群众就近检测。
加强宣传推广力度，提高社会认知度
开展宣传活动
01
利用世界艾滋病日等契机，组织宣传活动，提高公众对艾滋病
的认知度。
加强媒体合作
02
与主流媒体建立合作关系，定期发布艾滋病防治知识和工作动
态。
拓展宣传渠道
03
利用微博、微信等新媒体平台，发布艾滋病防治信息，扩大宣
早期发现
通过对高危人群进行筛查，我们成功发现了一名早期艾滋病患者 ，为其及时提供治疗，有效延缓病情进展。
精准干预
针对一名拒绝接受检测的艾滋病患者，我们联合心理专家进行心理 疏导，最终成功劝导其接受治疗。
启示
艾滋病检测工作需关注患者心理需求，加强跨学科协作，提高检测 率和治疗依从性。
挑战应对策略分享
结果判定
根据检测结果判定 受检者是否感染艾 滋病病毒。
采样
采集受检者的血液 、唾液或尿液等样 本。
检测
按照所选检测方法 进行操作，获取检 测结果。
咨询与告知
为受检者提供检测 结果咨询，告知后 续处理建议。
技术创新与优化
高通量检测技术
研发能够同时检测多个样本的 高通量检测技术，提高检测效
率。
自动化与智能化
艾滋病最新学生版PPT课件
传播途径
主要包括性接触传播、血液传播和母婴传 播。
血液传播
输入被HIV污染的血液或血液制品，共用 注射器、针头等。
性接触传播
通过与已感染HIV的个体发生无保护性行 为而传播。
发病机制及临床表现
发病机制
HIV病毒主要攻击人体的CD4+T淋巴细胞，导致免疫系统逐渐崩溃。
临床表现
初期可能出现发热、头痛、肌肉关节痛等非特异性症状，随着病情发展，逐渐 出现淋巴结肿大、持续发热、腹泻、体重下降等，最终发展为各种机会性感染 和肿瘤。
社会责任
社会各界应共同关注青少 年性健康问题，营造良好 的社会环境，减少不良信 息对青少年的影响。
03 艾滋病检测与诊断方法
常见检测方法介绍
01
酶联免疫吸附试验（ELISA）
用于检测艾滋病病毒抗体，具有灵敏度高、特异性强的特点。
02
化学发光或免疫荧光试验
利用化学发光或免疫荧光技术检测病毒抗体，操作简便、快速。
学生对课程的满意度及建议
大多数学生对本次课程表示满意，认为课程内容丰富、实用，同时也提出了一些改进建议，如增 加案例分析、互动环节等。
教师点评及改进建议提
1 2
教师对学生表现的评价
教师认为大部分学生能够积极参与课堂互动，认 真听讲，表现出较好的学习态度和习惯。
课程中存在的问题及原因
教师指出部分学生在回答问题时不够自信、流畅， 可能是因为对知识点掌握不够熟练或紧张所致。
整合酶抑制剂（INSTIs）
如多替拉韦等，需注意与其他药物相互作用和肾功能监测。
治疗方案制定和调整原则
个体化治疗
根据患者病情、病毒载量、 CD4+T淋巴细胞计数等制定个体
化治疗方案。
主要包括性接触传播、血液传播和母婴传 播。
血液传播
输入被HIV污染的血液或血液制品，共用 注射器、针头等。
性接触传播
通过与已感染HIV的个体发生无保护性行 为而传播。
发病机制及临床表现
发病机制
HIV病毒主要攻击人体的CD4+T淋巴细胞，导致免疫系统逐渐崩溃。
临床表现
初期可能出现发热、头痛、肌肉关节痛等非特异性症状，随着病情发展，逐渐 出现淋巴结肿大、持续发热、腹泻、体重下降等，最终发展为各种机会性感染 和肿瘤。
社会责任
社会各界应共同关注青少 年性健康问题，营造良好 的社会环境，减少不良信 息对青少年的影响。
03 艾滋病检测与诊断方法
常见检测方法介绍
01
酶联免疫吸附试验（ELISA）
用于检测艾滋病病毒抗体，具有灵敏度高、特异性强的特点。
02
化学发光或免疫荧光试验
利用化学发光或免疫荧光技术检测病毒抗体，操作简便、快速。
学生对课程的满意度及建议
大多数学生对本次课程表示满意，认为课程内容丰富、实用，同时也提出了一些改进建议，如增 加案例分析、互动环节等。
教师点评及改进建议提
1 2
教师对学生表现的评价
教师认为大部分学生能够积极参与课堂互动，认 真听讲，表现出较好的学习态度和习惯。
课程中存在的问题及原因
教师指出部分学生在回答问题时不够自信、流畅， 可能是因为对知识点掌握不够熟练或紧张所致。
整合酶抑制剂（INSTIs）
如多替拉韦等，需注意与其他药物相互作用和肾功能监测。
治疗方案制定和调整原则
个体化治疗
根据患者病情、病毒载量、 CD4+T淋巴细胞计数等制定个体
化治疗方案。
解读全国艾滋病检测技术规范ppt课件
7
确证实验检测的流程
方法：免疫印迹试验（WB）条带免疫试验，放射免疫沉淀试 验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。 试剂选择：使用HIV-1/2混合型试剂进行检测。 结果：阴性反应，报告HIV抗体阴性（—） 阳性反应，报告HIV—1抗体阳性（+） 不是阴性反应，又不满足阳性判断标准，报告HIV抗体 不确定（±） 结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展 或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报 告阳性；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续 随访到8周。如带型没有进展或称阴性反应则报告阴性；满足 HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视 情况决定是否继续随访。
3
样品保存
用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下， 短期（1周）内进行检测的样品可存放于2－8℃。 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃ 以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置 于-80℃。 用于CD4+/ CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存， 样品采集时间超过48h则不可检测。 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证 实验室，筛查阴性样品可根据具体需要决定保存时间，建 议至少保存1~2个月。特殊用途或专项项目的样品根据具 体要求确定保存时间。 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样品，无论确证结 果任何，均应将剩余的样品保存至少10年，特殊用途或专 项项目的样品根据具体要求确定保存时间。
6
HIV抗体检测
目的 ： 监测、诊断、及血液筛查的HIV抗体检测 要点： 筛查试验阳性不能出阳性报告； 严格遵守实验室标准操作程序； 严格按照试剂盒说明书操作； 注意防止样品间交叉污染。 HIV抗体筛查试验的方法 ELISA 快速检测（RT）：明胶颗粒凝集试验（PA）； 斑点EIA或斑点ELISA（dot-EIA）； 斑点免疫胶体金（胶体硒）快速试验； 艾滋病唾液检测卡；其他。
确证实验检测的流程
方法：免疫印迹试验（WB）条带免疫试验，放射免疫沉淀试 验（RIPA）及免疫荧光试验（IFA）等。 试剂选择：使用HIV-1/2混合型试剂进行检测。 结果：阴性反应，报告HIV抗体阴性（—） 阳性反应，报告HIV—1抗体阳性（+） 不是阴性反应，又不满足阳性判断标准，报告HIV抗体 不确定（±） 结合流行病学资料，可以在4周后随访检测，如带型没有进展 或呈阴性反应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报 告阳性；如随访期间带型有进展，但不满足阳性标准，应继续 随访到8周。如带型没有进展或称阴性反应则报告阴性；满足 HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳性判断标准可视 情况决定是否继续随访。
3
样品保存
用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下， 短期（1周）内进行检测的样品可存放于2－8℃。 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃ 以下，进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置 于-80℃。 用于CD4+/ CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存， 样品采集时间超过48h则不可检测。 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证 实验室，筛查阴性样品可根据具体需要决定保存时间，建 议至少保存1~2个月。特殊用途或专项项目的样品根据具 体要求确定保存时间。 艾滋病检测确证实验室收到的筛查阳性样品，无论确证结 果任何，均应将剩余的样品保存至少10年，特殊用途或专 项项目的样品根据具体要求确定保存时间。
6
HIV抗体检测
目的 ： 监测、诊断、及血液筛查的HIV抗体检测 要点： 筛查试验阳性不能出阳性报告； 严格遵守实验室标准操作程序； 严格按照试剂盒说明书操作； 注意防止样品间交叉污染。 HIV抗体筛查试验的方法 ELISA 快速检测（RT）：明胶颗粒凝集试验（PA）； 斑点EIA或斑点ELISA（dot-EIA）； 斑点免疫胶体金（胶体硒）快速试验； 艾滋病唾液检测卡；其他。
艾滋病检测技术规范ppt课件
其它实验：______
初筛结论
CONCLUTION
检测者
OPERATOR
全血□ 血浆□ 血清□ 唾液□ 尿□ 其它：_____
年龄 AGE 民族
ETHNICS
编号： NO.： 送检日期
DATE
送检人群
POPULATION
性别
GENDER
婚姻状况
MARRIAGE
□□□□□□□□□□□□□□□□□□
年月日
对样品进行初筛检测，
▪ 对呈阴性反应的样品，可出具HIV抗
体阴性（-）报告；对呈阳性反应的 样品，需要进一步做复检试验和确证 试验。
16
筛查程序
复检试验
▪ 对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一
种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
▪ 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包
现住址
____________省__________市________县（区）_____________乡（镇、街道） ____________村__________（门牌号）
____________省__________市________县（区）_____________乡（镇、街道） 户籍地址
村__________（门牌号）
12
(3)快速检测（RT）及其它检测试验
▪ 明胶颗粒凝集试验（PA）：是HIV血清抗体检测的一种简便方法。
将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样 品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情 况判读结果。PA试剂有两种：同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分 别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。
初筛结论
CONCLUTION
检测者
OPERATOR
全血□ 血浆□ 血清□ 唾液□ 尿□ 其它：_____
年龄 AGE 民族
ETHNICS
编号： NO.： 送检日期
DATE
送检人群
POPULATION
性别
GENDER
婚姻状况
MARRIAGE
□□□□□□□□□□□□□□□□□□
年月日
对样品进行初筛检测，
▪ 对呈阴性反应的样品，可出具HIV抗
体阴性（-）报告；对呈阳性反应的 样品，需要进一步做复检试验和确证 试验。
16
筛查程序
复检试验
▪ 对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一
种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
▪ 如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包
现住址
____________省__________市________县（区）_____________乡（镇、街道） ____________村__________（门牌号）
____________省__________市________县（区）_____________乡（镇、街道） 户籍地址
村__________（门牌号）
12
(3)快速检测（RT）及其它检测试验
▪ 明胶颗粒凝集试验（PA）：是HIV血清抗体检测的一种简便方法。
将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样 品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情 况判读结果。PA试剂有两种：同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分 别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。
艾滋病诊断与治疗PPT
06 艾滋病研究进展
新药研发与临床试验
新药研发：针对艾滋病病毒（HIV）的新药研发，包括抗病毒药物、免疫调节药物等
临床试验：新药研发成功后，需要进行临床试验，以验证其安全性和有效性
临床试验阶段：包括I期、II期、III期和IV期临床试验，每个阶段都有不同的目的和要求
临床试验结果：临床试验结束后，需要对试验数据进行分析和评估，以确定新药的疗 效和安全性
注意事项：诊断过程中应遵循保密原则， 保护患者隐私
03 艾滋病治疗
抗病毒治疗
抗病毒药物：如核苷类逆转录酶抑制剂、非核苷类逆转录酶抑制剂等
治疗方案：根据患者病情和药物耐受性制定个体化治疗方案
治疗效果：抗病毒治疗可以降低病毒载量，提高免疫功能，延长生存期
副作用：抗病毒药物可能引起肝肾功能损害、骨髓抑制等副作用，需定期监测并调整治 疗方案
毒载量
核酸检测：通 过血液、唾液 等样本检测艾 滋病病毒核酸
免疫细胞检测： 通过血液样本 检测免疫细胞
数量和功能
基因检测：通 过血液样本检 测艾滋病病毒
基因序列
快速检测：通 过血液、唾液 等样本进行快 速检测，结果 可在短时间内
得出
检测结果解读
阳性结果：表示可能感染艾滋病病毒，需要进一步确诊 阴性结果：表示没有感染艾滋病病毒，但需要定期复查 弱阳性结果：表示可能感染艾滋病病毒，需要进一步确诊 强阳性结果：表示感染艾滋病病毒，需要尽快接受治疗
诊断技术改进
病毒载量检测：通过检测血液中的病毒载量，提高诊断准确性 快速检测技术：采用快速检测试剂，缩短检测时间 基因测序技术：通过基因测序，分析病毒变异情况，提高诊断准确性 免疫学检测：通过检测抗体和抗原，提高诊断准确性
治疗方法创新
HIV检测技术 ppt课件
复检试验
对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一 种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包 括一种抗原抗体联合试剂。
艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品， 确证实验室可以直接进行确证试验。
原有试剂＋另一 种原理初筛试剂
（3）快速检测（RT）及其它检测试验
优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急 诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在 10～30分钟内得出结果。
缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保 存。
快速诊断试剂
（1）明胶颗粒凝集试验（PA） 将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作
用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有 HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗 原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判 读结果。
加样 温育 洗板 显色
标准化操作及流程
试剂准备、标本收集、测定方法和仪器操 作写出正确的“标准操作程序”(SOP)，所有 的实验技术人员在进行相关测定时，必须严格 按相应的SOP进行操作。
ELISA法结果判断
临界值概念: 将检测的阳性和（或）阴性对照的 OD值代入计算公式计算出来的判断阳性和阴性 结果的界值
吸附－穿入－脱壳－生物合成－组装成熟和释放
HIV-1通过gp120与靶细胞表面CD4分子和趋化因子受体结合
HIV感染后的血清学改变
HIV抗体检测目的
诊断：确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检 测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体 检等。
监测：了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检 测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。
对初筛呈阳性反应的样品，应使用原有试剂和另外一 种不同原理（或厂家）的试剂，或另外两种不同原理 或不同厂家的试剂进行复检试验。
如果初筛检测使用抗原抗体联合试剂，则复检必须包 括一种抗原抗体联合试剂。
艾滋病检测筛查实验室复检判定为阳性反应的样品， 确证实验室可以直接进行确证试验。
原有试剂＋另一 种原理初筛试剂
（3）快速检测（RT）及其它检测试验
优点:试验简便快速，适用于应急检测、门诊急 诊检测。不需专门设备和人员培训,一般可在 10～30分钟内得出结果。
缺点:肉眼判断较主观、价格较贵、结果不易保 存。
快速诊断试剂
（1）明胶颗粒凝集试验（PA） 将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作
用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有 HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗 原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判 读结果。
加样 温育 洗板 显色
标准化操作及流程
试剂准备、标本收集、测定方法和仪器操 作写出正确的“标准操作程序”(SOP)，所有 的实验技术人员在进行相关测定时，必须严格 按相应的SOP进行操作。
ELISA法结果判断
临界值概念: 将检测的阳性和（或）阴性对照的 OD值代入计算公式计算出来的判断阳性和阴性 结果的界值
吸附－穿入－脱壳－生物合成－组装成熟和释放
HIV-1通过gp120与靶细胞表面CD4分子和趋化因子受体结合
HIV感染后的血清学改变
HIV抗体检测目的
诊断：确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检 测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体 检等。
监测：了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检 测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。
HIV感染的实验室检测(共36张PPT)
• （3）实验结果
• ①阴性对照（NC），HIV-1阳性对照（PC1），HIV-2阳性对照 （PC2）
NC 必须＜0.25方可用，排除NC≥0.25的值，计算NC平均 值。
NC界限范围：0.6倍NC均值＜NC＜1.4倍NC均值。
• 竞争法、捕获包被法等 4、严格遵守实验室标准操作规程（SOP）。
为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的，比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV感染 （4）艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶 免疫间接法。 监测(为了知晓人群流行状况) Introduction to HIV Testing ⑥在2h内置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。 常用HIV抗体检测方法: 加受检标本，保温反应。 （1）明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后 保温（一般为室温）。
ELISA的原理
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗 体复合物与液体中的其他物质分开。再 加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应 而结合在固相载体上。此时固相上的酶 量与标本中受检物质的量呈一定的比例 。
ELISA的原理
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有 色产物，产物的量与标本中受检物质的量 直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性 或定量分析。由于酶的催化效率很高，间 接地放大了免疫反应的结果，使测定方法 达到很高的敏感度。
ELISA
酶联免疫吸附试验 + ve
HIV
包被了HIV 抗
原的检测板
患者的抗体
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HIV
HIV-1
Types
HIV-2
M N O Groups
A, B, C, D, E, F, G, H, I, J CRF01-16
Clades
ANT 70, MVP5180,
VAU
ROD
NIH2
Guidelines for Classification
Types: Subtypes/Groups: Clades:
艾滋病检测技术与应用
艾滋病检测技术与应用
艾滋病确认中心实验室
HIV检测的病毒学基础
人免疫缺陷病毒
Human Immunodeficiency Virus HIV
HIV感染的 细胞过程的
动画演示
T he R eplication of H IV
Ad so rb tio n to C D 4 and co-receptor
CM240 IbNG Kall53 94CY032 VI1310 BFP90 CN54 GX-6F 96GH2911 TZBF061 GR17 ARMA159 96CM－1849 X397 99TH.MU2079 KISII5009
A、E A、G A、B A、G、H、K、U D、F A、G、J、K B'、C B'、C 尚未发表
估计HIV-1平均每一代的时间大约为2.5天。这意 味着病毒复制的速率是每年140代或更多，从 HIV感染到诊断AIDS，病毒已经更新了上千代。
HIV 毒粒 血浆 活跃感染的细胞 潜伏感染的T细胞 潜伏感染的巨噬细胞
T1/2(半衰期) 6 小时 1.1 天 8.5 天 14 天
HIV 的型和亚型
C、D A、G、J、CRF01_AE B、F
A, CRF01_AE, G, J, U B、G
CRF01_AE, B A2、D
循环重组毒株（Circulate Recombinant Forms, CRF）
全国第二次HIV分子流调不同传播途径HIV-1亚型的分布
采供血
吸毒
吸毒和性途径
性途径
母婴传播
不详
◆ 检测的目标: HIV抗体、HIV－1P24抗原,HIV RNA,HIV基因组
◆ 检测的标本:血清/血浆，唾液、尿液 ◆ 检测的模式：ELISA、WB、IFA、快速法、核
酸扩增等 ◆ 检测的用途：病原学诊断、监测病程和疗效、
监测病毒变异
检测HIV抗体
◆是常规使用的诊断方法 ◆方法学: ELISA试剂, 快速试剂(金标记, 锡
HIV-1 and HIV-2 50% homology
HIV-1 group M, N and O 60-70% homology
HIV-1 Clades A-J >70% homology
名称
参考毒株
重组的亚型
CRF01_AE CRF02_AG CRF03_AB CRF04_cpx CRF05_DF CRF06_cpx CRF07_BC CRF08_BC CRF09_cpx CRF10_CD CRF11_cpx CRF12_BF CRF13_cpx CRF14_BG CRF15_01B CRF16_A2D
C
2 20.00 0 0.00
0
0.00 4 40.00 1 10.00 3 30.00 10
CRF-BC 4 0.96 245 58.89 108 25.96 28 6.73 1
CRF01-
AE
2 1.52 57 43.18 15 11.36 25 18.94 2
CRF02-
AG
0 0.00 0 0.00
合
亚型 例数 % 例数 %
例数
% 例数 % 例数 % 例数 %
计
A
0 0.00 0 0.00
1 20.00 3 60.00 0 0.00 1 20.00 5
BLeabharlann 0 0.00 0 0.00
0
0.00 7 77.78 0 0.00 2 22.22 9
B'
192 62.54 1 0.33
0
0.00 23 7.49 3 0.98 88 28.66 307
标记), 家庭用试剂. ◆检测的标本:血清和血浆, 唾液, 尿液
检测HIV抗体(ELISA法)
◆原理:间接法 (第1代,第2代试剂), 双抗原夹 心法(第3代试剂).
◆判断结果有客观依据(临界值).可自动化操 作.
◆可检测多种标本(血清,血浆,唾液,尿液) ◆是使用最广泛的方法
HIV ELISA试剂的发展
◆HIV变异的频率是真核细胞DNA基因组的100万倍。真核 细胞DNA多聚酶的错误率大约是10-10-10-9，而HIV-1逆转 录酶平均每一个位点的错误率是10-4-10-3
◆估计每一轮HIV-1的复制都会引入10个错误的碱基
HIV-1具有高度变异性
◆HIV的快速复制速率加上高突变率 ◆HIV从原发感染时的状态进化为一群遗传差异很大的病毒， 每一个成员都保存了生存所必需的基因，但是在不妨碍复制 的基因位点上有细小的差异 ◆高度分化的病毒群体。每一个复制周期都产生基因序列彼 此不同的HIV毒株的混合物，通常称为准种quasispecies）
固相
标记物
特异性检测
第一代 病毒裂解物
抗人IgG
HIV-1IgG抗体
第二代
重组抗原或 合成多肽
0
0.00 1 100.00 0
0.24 30 7.21 416 1.52 31 23.48 132 0.00 0 0.00 1
合计 200 22.73 303 34.43 124 14.09 91 10.34 7 0.80 155 17.61 880
HIV检测方法的进展和应用
多种HIV检测方法
Reverse T ran scrip tio n
In tegratio n
Fu sio n P en etratio n
T ran slatio n
T ran scrip tio n P rovirus
C ap sid Assem b ly
M aturatio n B u d d in g
HIV的主要结构基因和相应的抗原
结构基因 包膜(env) 多聚酶(pol) 核心(gag)
HIV-1 (HIV-2)
Gp160/gp120,gp41 (gp140/gp105,gp36)
P66, p55 (P68,P56)
P24, p17 (P26,p16)
HIV-1具有高度变异性
◆逆转录酶的忠实性较差，缺乏3’—5’外切核酸的校读功 能，RNA转录为DNA时经常出现错误
HIV-1
Types
HIV-2
M N O Groups
A, B, C, D, E, F, G, H, I, J CRF01-16
Clades
ANT 70, MVP5180,
VAU
ROD
NIH2
Guidelines for Classification
Types: Subtypes/Groups: Clades:
艾滋病检测技术与应用
艾滋病检测技术与应用
艾滋病确认中心实验室
HIV检测的病毒学基础
人免疫缺陷病毒
Human Immunodeficiency Virus HIV
HIV感染的 细胞过程的
动画演示
T he R eplication of H IV
Ad so rb tio n to C D 4 and co-receptor
CM240 IbNG Kall53 94CY032 VI1310 BFP90 CN54 GX-6F 96GH2911 TZBF061 GR17 ARMA159 96CM－1849 X397 99TH.MU2079 KISII5009
A、E A、G A、B A、G、H、K、U D、F A、G、J、K B'、C B'、C 尚未发表
估计HIV-1平均每一代的时间大约为2.5天。这意 味着病毒复制的速率是每年140代或更多，从 HIV感染到诊断AIDS，病毒已经更新了上千代。
HIV 毒粒 血浆 活跃感染的细胞 潜伏感染的T细胞 潜伏感染的巨噬细胞
T1/2(半衰期) 6 小时 1.1 天 8.5 天 14 天
HIV 的型和亚型
C、D A、G、J、CRF01_AE B、F
A, CRF01_AE, G, J, U B、G
CRF01_AE, B A2、D
循环重组毒株（Circulate Recombinant Forms, CRF）
全国第二次HIV分子流调不同传播途径HIV-1亚型的分布
采供血
吸毒
吸毒和性途径
性途径
母婴传播
不详
◆ 检测的目标: HIV抗体、HIV－1P24抗原,HIV RNA,HIV基因组
◆ 检测的标本:血清/血浆，唾液、尿液 ◆ 检测的模式：ELISA、WB、IFA、快速法、核
酸扩增等 ◆ 检测的用途：病原学诊断、监测病程和疗效、
监测病毒变异
检测HIV抗体
◆是常规使用的诊断方法 ◆方法学: ELISA试剂, 快速试剂(金标记, 锡
HIV-1 and HIV-2 50% homology
HIV-1 group M, N and O 60-70% homology
HIV-1 Clades A-J >70% homology
名称
参考毒株
重组的亚型
CRF01_AE CRF02_AG CRF03_AB CRF04_cpx CRF05_DF CRF06_cpx CRF07_BC CRF08_BC CRF09_cpx CRF10_CD CRF11_cpx CRF12_BF CRF13_cpx CRF14_BG CRF15_01B CRF16_A2D
C
2 20.00 0 0.00
0
0.00 4 40.00 1 10.00 3 30.00 10
CRF-BC 4 0.96 245 58.89 108 25.96 28 6.73 1
CRF01-
AE
2 1.52 57 43.18 15 11.36 25 18.94 2
CRF02-
AG
0 0.00 0 0.00
合
亚型 例数 % 例数 %
例数
% 例数 % 例数 % 例数 %
计
A
0 0.00 0 0.00
1 20.00 3 60.00 0 0.00 1 20.00 5
BLeabharlann 0 0.00 0 0.00
0
0.00 7 77.78 0 0.00 2 22.22 9
B'
192 62.54 1 0.33
0
0.00 23 7.49 3 0.98 88 28.66 307
标记), 家庭用试剂. ◆检测的标本:血清和血浆, 唾液, 尿液
检测HIV抗体(ELISA法)
◆原理:间接法 (第1代,第2代试剂), 双抗原夹 心法(第3代试剂).
◆判断结果有客观依据(临界值).可自动化操 作.
◆可检测多种标本(血清,血浆,唾液,尿液) ◆是使用最广泛的方法
HIV ELISA试剂的发展
◆HIV变异的频率是真核细胞DNA基因组的100万倍。真核 细胞DNA多聚酶的错误率大约是10-10-10-9，而HIV-1逆转 录酶平均每一个位点的错误率是10-4-10-3
◆估计每一轮HIV-1的复制都会引入10个错误的碱基
HIV-1具有高度变异性
◆HIV的快速复制速率加上高突变率 ◆HIV从原发感染时的状态进化为一群遗传差异很大的病毒， 每一个成员都保存了生存所必需的基因，但是在不妨碍复制 的基因位点上有细小的差异 ◆高度分化的病毒群体。每一个复制周期都产生基因序列彼 此不同的HIV毒株的混合物，通常称为准种quasispecies）
固相
标记物
特异性检测
第一代 病毒裂解物
抗人IgG
HIV-1IgG抗体
第二代
重组抗原或 合成多肽
0
0.00 1 100.00 0
0.24 30 7.21 416 1.52 31 23.48 132 0.00 0 0.00 1
合计 200 22.73 303 34.43 124 14.09 91 10.34 7 0.80 155 17.61 880
HIV检测方法的进展和应用
多种HIV检测方法
Reverse T ran scrip tio n
In tegratio n
Fu sio n P en etratio n
T ran slatio n
T ran scrip tio n P rovirus
C ap sid Assem b ly
M aturatio n B u d d in g
HIV的主要结构基因和相应的抗原
结构基因 包膜(env) 多聚酶(pol) 核心(gag)
HIV-1 (HIV-2)
Gp160/gp120,gp41 (gp140/gp105,gp36)
P66, p55 (P68,P56)
P24, p17 (P26,p16)
HIV-1具有高度变异性
◆逆转录酶的忠实性较差，缺乏3’—5’外切核酸的校读功 能，RNA转录为DNA时经常出现错误