常用抗凝剂的原理及其实际运用

草酸盐溶解后解离的草酸根离子与血液中
的钙离子形成草酸钙沉淀，使钙离子失去
凝血功能，阻止凝血过程。常用的草酸盐
抗凝剂有草酸钠，草酸钾和草酸铵。
配制方法及用量


草酸盐合剂：草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔 马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐 合剂0．1ml (即相当草酸铵1．2mg，草酸钾 0．8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入 玻璃容器内烤干备用。如取0．5ml于试管，烘干 后每管可使5ml血不凝固。 草酸钾：取草酸钾10g，加蒸馏水少许使溶解，再 加蒸馏水至100ml。配制成10％水溶液，如每管加 0.1ml则可使5~10ml血不凝。
血功能测定。测定血沉用3.8%枸橼酸钠抗
凝，抗凝剂与血液比例为1：4，凝血试验
需用3.2%枸橼酸钠抗凝，比例为1：9。

2.另外，因为枸橼酸盐作为抗凝剂的细胞毒
性小，常作为血液保养液的成分之一。
缺点

枸橼酸钠6mg才能抗凝1ml血液，碱性强，
不适用于血液化验和生化测验。
氟化钠的抗凝原理

氟化钠中的氟离子可与钙结合形成螯合物 而发挥抗凝作用，但其抗凝能力较其他抗 凝剂弱， 氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化 酶，防止糖酵解，若未加氟化钠，血标本 中的葡萄糖含量将以每小时6%的速度下降， 而在有氟化钠存在 的条件下，血糖浓度在 25摄氏度的条件下可以稳定24h，4摄氏度 可以稳定48h。
常用抗凝剂的原理及运用
主要内容
. 抗凝剂的概念
. 临床上常用的抗凝剂
. 问题

概念：
抗凝：应用物理或化学的方法除去或抑制血液中 的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。 抗凝剂：阻止血液凝固的化学试剂就称为抗凝剂。 对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影 响测定。生化检验常用的抗凝剂有以下几种：
氟化钠的临床运用

临床上常用氟化钠—草酸钠混合抗凝剂作
血糖测定的抗凝剂，氟化钠可以抑止烯醇
化酶，它可避免血细胞葡萄糖酵解酶的作
用，延长标本的保存时间。
物理抗凝法

原理：将血液注入含有适量玻璃珠的三角 瓶中徐徐摇动, 使纤微蛋白全部粘附在玻璃 珠上. 亦可使血液不再凝集, 用本法分离的 抗凝血为脱纤维蛋白血.
枸橼酸盐的抗凝原理
枸橼酸盐能与血液中的钙离子结合形成螯合物，
使钙离子失去凝血功能，从而阻止血液凝固，常 用的枸橼酸盐的抗凝剂时枸橼酸三钠，又称柠檬 酸三钠。 常配成3～5%水溶液。也可直接加粉剂，每毫升 血加3～5mg，即可达到抗凝目的。
枸橼酸盐的临床运用

1.枸橼酸盐抗凝剂常用于红细胞沉降率和凝
EDTA盐作为抗凝剂的缺点

1.EDTA盐抗凝剂能影响血小板的聚集和白
细胞的吞噬功能，不适合用于凝血的检查
和血小板功能试验。

2.EDTA钠盐 的溶解度明显低于钾盐，有时 会影响抗凝效果。

3. EDTA盐不能用于钙、钠、及含氮物质的 测定，对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ALP、 5’-核苷酸酶等可抑制，对丙酮酸激酶有明 显升高的作用。
临床运用




1.常用肝素抗凝剂是肝素的钠、钾、锂、铵 盐，其中以肝素锂最好，但其价格较贵 2.肝素抗凝剂不引起溶血，血液成分干扰较 少，可以保持红细胞的自然形态，是红细 胞渗透脆性试验、血浆渗透量的理想抗凝 剂 3.低分子肝素可应用于溶栓和防栓治疗，如 外科手术后的溶栓和DIC。 4.常用于电解质、血气分析、血氨等测定。 抗凝剂比例为50～61u肝素/5ml血。
4.EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼 疮因子，故不适于制作组化染色和检查红 斑狼疮细胞的血涂片。


5.用EDTA抗凝血制备的涂片对粒细胞形态 有影响，其影响程度与抗凝血放置时间和 抗凝剂浓度有关。EDTA的使用浓度为1.4～ 1.6g/L血液，迅速制备涂片，粒细胞形态特 征有微小的改变，有时细胞核分叶不见， 细胞肿胀。如果用放置时间较长的血液制 备的涂片可出现细胞浆内颗粒消失，胞浆 和细胞核有空泡，染色质模糊不清。用大 于1.5g/L血液浓度制备的血涂片，粒细胞可 完全变性，对淋巴细胞和单核细胞也有影 响，尤其是血小板，可出现肿胀、破裂而 产生碎片，影响其计数，造成结果偏高。

3.常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定

缺点：草酸盐浓度过高会导致溶血、改变血液pH，
干扰血浆钾、钠、氯和某些酶活性的测定。
草酸盐对LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑
制作用。由于生成草酸钙沉淀，红细胞会出现锯
齿状，白细胞出现空泡，淋巴细胞及单核细胞会 变形，不宜做血片检查。草酸盐可使血小板聚集， 并影响白细胞形态，不能用于白细胞和血小板分 类计数。
草酸盐的临床运用


1.草酸盐常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵草 酸钠或草酸钾可以使细胞缩水邹缩，而草酸铵则 可以使血细胞膨胀，故临床上测定血细胞比容和 网织红细胞计数时常使用草酸铵和草酸钾两者 按适当比例混合形成的“双草酸盐”抗凝剂，恰 好不影响红细胞的自然体积。 2.草酸盐作为抗凝剂的优点是溶解度好，草酸钠 的常用浓度为0.1 mol/L与血液按1：9的比例使用， 常用于血液生化测定，可用于凝血的检查。但因 为草酸盐对于凝血因子V的保护力差，目前已不 使用该抗凝剂作为凝血的检查，取而代之的是枸 橼酸盐。
临床应用：制作血液培养基

问题

1.EDTA盐抗凝管，肝素抗凝管，枸橼酸盐用于血
沉测定管和用于凝血功能测定管各试管的管盖的 颜色是什么？

2.枸橼酸钠用于血沉测定时其抗凝浓度是多少？ 与全血的比例是多少？

3.试述临床上测定血细胞比容用什么抗凝？
谢 谢 大 家 ！

临床上常用的抗凝剂：

肝素 草酸盐Fra bibliotek乙二胺四乙酸盐


枸橼酸盐 氟化钠 物理抗凝法
肝素抗凝原理：

是一种含有硫酸基团的粘多糖，其抗凝机
理主要是加强抗凝血酶（AT）灭火丝氨酸
蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶的形成，
并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。
配制和用量

纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg 等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。但由 于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长 短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般 可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫 升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～ 10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素 湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使 血液不凝。市售的肝素钠溶液每毫升含肝 素12500U，相当于100mg。
缺点

肝素具有抗凝血酶作用，不适合做血凝试 验。另外，肝素过量可引起白细胞聚集和 血小板减少，所以不适合做白细胞分类和 血小板计数，更不能用于止血检验。此外， 肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因为瑞 士染色后出现深蓝色背景，影响显微镜减 产。肝素抗凝血应于短时间内使用，否则 放置过久血液又可凝固。
草酸盐的抗凝原理
乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）抗凝原理

EDTA盐能与血液中的钙形成螯合物，使钙 失去凝血作用，从而阻止血液凝固。常用 的 EDTA盐有二钠盐，二钾盐和三钾盐。

抗凝能力：每0.8mg EDTA盐可抗凝1ml血
液。
EDTA盐的临床运用



因为EDTA对于血细胞的形态和血小板计数 影响很小，适用于多项血液学检验。也适 用于糖化血红蛋白检测项目 1.EDTA—K2抗凝血液在室温下6h其红细胞 体积不变，故特别适合做血液分析仪 所需 全血。血细胞比容测定和血小板计数用血 的抗凝剂。抗凝剂比例为1.0～2.0mg/1ml血。 2.国际血液学标准化委员会（ICSH）建议， 血细胞计数用EDTA—K2 作抗凝剂时用量为 EDTA—K2.2H2O 1.5—2.0mg/ml.