植物组织培养复习资料.doc
组培复习资料
植物组织培养复习资料（开卷考试）第一章导论【本章知识点】1.组织培养的含义2.组织培养的理论基础（细胞全能性）3.植物组织培养的类型及特点4.植物组培在农业生产上的应用一．组织培养的含义：用无菌的方法使植物离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有的培养技术的总称，也称为离体培养或试管培养。
二、植物组培的理论基础1、植物细胞全能性：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部的遗传物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
2、细胞分化：导致细胞形成不同结构、引起功能改变或者潜在发育方式改变的过程。
3、脱分化：将以分化的不分裂的静止细胞放在培养基上培养，细胞重新进入分裂状态。
一个成熟的细胞转化为分生状态的过程成为脱分化。
（形成愈伤组织）4、再分化：经脱分化形成的愈伤组织在一定培养条件下可转化为不同的细胞类型，形成完整植株的过程。
5、外植体：由活体植物上切去下来的，用于植物组织培养的各种接种材料。
包括各种器官、组织、细胞和原生质体等。
6、愈伤组织：外植体离体培养下经脱分化产生的无特定结构和功能的薄壁细胞。
三、组织培养的类型及特点【类型】1.按培养材料分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养等2.按培养器官分：叶培养、跟培养、花药培养等3.按培养成分分：固体培养、液体培养（也叫液体震荡培养）4.按是否有需要光分：光培养、暗培养5.按培养方法分：平板培养、微室培养、悬浮培养等6.按培养过程分：初代培养（外植体的最初培养）、继代培养（培养物在培养基上生长一段时间以后由于营养物枯竭，水分散失及代谢产物的积累，必须转移到新鲜的培养基上培养，这种反复多次移植的组织培养称为继代培养）【特点】1.培养条件人为可控2.培养生长周期短，繁殖效率高3.管理方便，便于工厂化生产和自动化控制四、植物组培在农业生产上的应用1．用于种苗的快速无性繁殖2．用于种苗的脱毒（EG马铃薯）3. 用于某些植物的远缘杂交4.用于突变育种5.用于单配体育种6.种质保存7.基因工程8．植物性药物和生物制品的生产第二章植物组培实验室的构建和基本操作技术【本章知识点】 1.植物组培实验室结构设计及主要实验设备2.常用培养基MS 、B5、White 、N6、KM-8P 等3.母液的配制方法4.培养基成分及其配制、分装和高压灭菌过程5.有关灭菌、接种、培养、驯化和移栽的相关技术6.接种的无菌操作程序要点7.试管苗的特点及其不能成活的原因8.试管苗的驯化和移栽应注意的问题一、植物组培实验室构建和主要实验设备【实验室构建】【仪器设备与用具】1、 仪器设备与器皿用具：超净工作台、空调、除湿机或加湿机、恒温培养箱、高压灭菌锅、冰箱、天平、显微镜、水浴锅、摇床与转床、蒸馏水发生器、酸度计、离心机等2、 各类玻璃器皿：培养器皿（试管、三角瓶、培养皿、圆形培养瓶或果酱瓶等）分注器、离心管、刻度移液管、细菌过滤器、实验器皿（量筒、烧杯、容量瓶、试剂瓶、塑料瓶、酒精灯等）3、 器械用具：镊子、尖头镊子、枪形镊子、剪刀、解剖刀、接种针、钻孔器等。
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1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。
2、外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）3、愈伤组织：在离体培养的条件下，经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。
4、玻璃化现象：在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明或半透明的水渍状现象。
5、脱分化：一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象6、再分化：指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下，又分化为胚状体，或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。
7、细胞的全能性：植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因，在一定条件下可以发育成完整植株的能力。
8、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位9、植物离体培养：利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
10、种子败育：是指由于植物自身的原因导致植物胚胎在发育过程中的任何一个阶段死亡或者即使幼胚发育为成熟种子胚、但在常规条件也不能萌发的现象。
11、双极性：表示具有双向极性电平的脉冲信号激素分类：生长素类细胞分裂素赤霉素脱落酸水杨酸植物组织培养{组织培养、器官培养？胚胎培养？细胞培养、原生质体培养}—--次生代谢物的生产、种植创新和品种选育、植物的快速繁殖、无病毒苗木的培育、人工种子的生产、种质资源的离体保存植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
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植物组织培养复习资料第一章绪论组织培养的类型植物组织培养的发展简史植物组织培养在技术上的发展植物组织培养在农业上的应用一．植物组织培养的意义(一)定义（Definition）：植物组织培养（Tissue culture）是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养（In vitro culture）。
是指分离一个或数个体细胞或植物体的一部分在无菌条件下培养的技术。
也可定义为：利用植物体的器官、组织或细胞，通过无菌操作接种于人工配制的培养基上，在一定的光照和温度条件下进行培养，使之生长发育的技术称为植物组织培养。
植物组织培养技术又俗称植物克隆Totipotency （细胞全能性）Each cell of a multicellular organism contains all of the genes needed to form the whole plant.——指细胞能够发展成为一棵完整植株的潜能（二）植物组织培养的意义1、植物基础学科研究良好系统2、生物技术的基础3、经济高效、管理方便、便于自动化4、生长周期短、速度快、试验重复性好5、技术含量高、实验误差小、人工控制能力强6、试验材料经济、来源单一7、缺点：设备复杂、耗费和技术要求高二、植物组织培养的类型按材料的类别分：愈伤组织培养：最为常见的组织培养细胞培养：悬浮细胞培养、单细胞培养器官培养：胚（Embryo）、胚乳（Endosperm）、珠心（Nucellus）、子房（Ovary）、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养原生质体培养（Protoplast ）1、愈伤组织：愈伤组织（callus）在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。
几个概念：外植体（Explants）由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。
初代培养（Primary culture）指外植体的最初培养。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养（In vitro culture）。
愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。
玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
植物组织培养复习资料(精缩版)
绪论课程基本情况植物组织培养：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。
简称组培。
也称离体培养或试管培养。
理论依据——植物细胞全能性：任何有完整细胞核的植物细胞，具有全部的遗传信息，在一定条件下均具有发育成一个完整植株的潜在能力。
动植物细胞分化差异。
植物细胞全能性必须满足的条件：1、要使这些细胞处于离体条件下，解除植物体其余部分对这些细胞的抑制性影响；2、要给予它们适当的刺激，就是给予它们一定的营养物质和激素的作用。
植物组织培养过程（无菌环境操作）：外植体→（脱分化）→愈伤组织→（再分化）→试管苗→→植株外植体（离体器官）：由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官（包括胚、芽茎尖、叶、花瓣等）。
初代培养：指外植体的最初培养。
继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中进行再培养，称为继代培养脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞经过离体培养，产生无结构的愈伤组织或细胞团的过程。
再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化出根或芽等器官的过程。
组织培养类型：根据所培养的植物材料的不同：组织培养；细胞培养；器官培养；胚胎培养；原生质体培养愈伤组织：原来是指植物在受伤之后，在伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组织培养中，它是指在培养基上由培养物产生的无序的薄壁细胞团。
愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形成愈伤组织，并在体外培养使之再分化成植株的技术。
（最常用）悬浮细胞培养：不断搅动或摇动的液体培养基中培养单细胞或小细胞团的培养方式。
（主要目的生产有用产物）。
器官培养：对植物的根、茎、叶片、花器等各个器官进行离体培养。
（用于苗木快速繁殖）。
茎尖分生组织培养：使用茎尖无病毒分生组织为材料进行培养。
（脱毒培养）。
原生质体培养：去除细胞壁、裸露的原生质体的培养。
（创建种间或属间新品种）。
根据培养过程：初代培养；继代培养；生根培养：根据培养基的物理状态（培养条件）：固体培养；液体培养；半固体培养；双层培养：器官再分化两种方式：器官发生型；胚胎发生型器官发生型：由愈伤组织不同部位产生不定芽或不定根，通常是单极性。
植物组织培养复习
复习要点题型：选择、填空、名词解释、问答各章主要内容第一章组培中的各种概念、术语、分类及组培的研究及应用进展第二章组培室的构成、培养基的组成成分及作用、培养基的种类、配制（基本培养基、激素的配制、pH、琼脂、糖等的影响）；培养基灭菌基本的程序、消毒过程、接种操作过程；消毒剂的使用及作用。
第三章组培快繁过程中芽和体胚发生（再生）的方式、定芽、不定芽、体胚的概念、影响体胚发生的内外因素、体胚的辨认、人工种子的优点、污染、褐变、玻璃化的概念及影响因素、措施。
组织培养快速繁殖（芽再生）的一般程序。
第四章脱毒培养的原理、步骤，茎尖培养、病毒在植物体内分布规律、病毒的检验方法。
第五章愈伤组织类型、悬浮细胞培养特点、生长曲线、测定指标；细胞的同步培养法、单细胞的分离方法。
第六章原生质体培养：原生质体概念、细胞壁降解的酶及条件、渗透压稳定剂、原生质膜稳定剂。
主要概念1.细胞全能性：指植物体的每一个细胞都携带着一套完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
2.分化：细胞在分裂过程中，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程，形成各种组织和器官。
3.脱分化：原已分化的细胞，失去原有的形态功能，又恢复到没有分化的无组织的细胞团和愈伤组织（即转变为分生状态）这个过程称为脱分化。
4.再分化：在一定的培养条件下，经脱分化的组织和细胞，经重新分化而产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官（如由愈伤组织形成芽、根或胚状体）称为再分化。
5.外植体：从植物体上分离下来用于离体培养的材料。
6.组织培养：指通过无菌操作，把植物体的一个器官、一种组织或单个细胞（甚至原生质）接种到培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其成为完整植株的过程。
7.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。
8.定芽：包括顶芽、腋芽、胚芽连接处的萌蘖等均在一定部位生出的芽，称为定芽。
9.不定芽：除叶腋或茎尖以外，任何部位（非正常部位）产生出来的芽叫不定芽。
植物组织培养期末复习资料
11.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。
其最大的特征是失去分裂能力。
3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。
其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。
4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。
5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。
6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。
通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。
7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。
8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。
9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。
10.无菌操作：亦称接种。
指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。
由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。
11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。
这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。
植物组织培养理论复习资料
四、合子胚与体细胞胚发生的比较
A. 相同点：
a.
b. c. B.不同点：
胚胎发育过程一致；
发育中都有极性与生理隔离； 功能一致，都可发育成植株；
（一个胚代表一个植株）
a. 结构不同：胚状体存在多子叶现象； 无典型胚柄结构。 b. 生理特征：干物质含量不同（糖、脂、蛋白质）；
生活力不同。
五、影响体细胞胚发生的因子
2 植物激素
细胞分裂素：
常用：BA、KT、BAP、ZT、2-ip
浓度范围：0.5-30 mg/L，
一般适应浓度为1-2 mg/L
生长素
常用：NAA、IBA
适宜浓度：0.1-1 mg/L
注：2，4-D在以茎尖或腋芽诱导芽时不宜使用
2、常见问题
⑴褐变
⑵ 玻璃化苗
⑴褐变
酚类物质
多酚氧化酶
1、植物激素（P74）
（1）生长素 胚状体诱导过程分为增殖培养与成胚培养两阶段 i、增殖培养： 使用含生长素的培养基，多用2,4-D; ii、成胚培养： 去（降）生长素的培养基;
2、N源 培养基中N的供给形式对体细胞胚的发生 有重要影响。
NH4
+
—N
NO3 —N
-
①单独添加某一种N源： i. 单NO3- ，必须高浓度才能成胚，且数量少； 如：White＋2,4-D2.0 （差）； (好)。 White＋2,4-D2.0+KNO3 1700 则大量成胚；
TJ（番茄汁）、香蕉、马铃薯等。
植物激素：指一些在植物体内合成，对生长发育产
生显著作用的微量有机物
生长素（auxin）
诱导细胞分裂，促进根分化；并与细胞分裂素互作
植物组织培养复习资料付答案(仅供参考)
植物组织培养复习材料一、名词解释。
1、植物组织培养(plant tissue culture)：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术2、脱分化（dedifferentiation）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化（redifferentiation）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant)：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）5、愈伤组织(callus)：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性（cell totipotency）：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性：细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株。
12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
植物组织培养复习
一、什么叫植物组织培养技术？它有哪些类型？其理论依据是什么？（1）广义的植物组织培养（plant tissue culture）是指在无菌和人工预知的控制条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织或细胞进行离体培养，使其再生细胞或生长、分化成完整植株的技术。
狭义的植物组织培养仅指对植物的组织（如分生组织、表皮组织、薄壁组织等）及培养产生的愈伤组织（callus）进行离体培养的技术。
（2）类型：植株的培养；胚胎培养；器官培养；组织培养；细胞培养；原生质体培养。
（3）植物细胞全能性（totipotency）是植物组织培养的理论基础。
它是指一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的全部遗传信息，在适当的条件下，这些信息可以表达，再生成一个完整植株。
三、试述目前植物组织培养的应用。
答：（1）植物离体快繁、（2）无病毒苗木培育、（3）培育新品种或创制新物种、（4）次生代谢物生产、（5）种质资源保存（6）人工种子。
一、简述培养基和器具的灭菌方法和技术。
培养基的灭菌方法：高压蒸汽灭茵法：培养基消毒灭菌时间不宜过长，也不可超过灭菌锅规定的压力范围（1.15kgf·cm-2或O.15MPa ，温度126 ℃)；否则，培养基中的蔗糖、有机物质，特别是维生素类物质就会分解，导致培养基变质、变色，甚至难以凝固。
过滤除菌法：过滤灭菌的原理是溶液通过滤膜后，细菌的细胞和孢子等因大于滤膜孔径而被阻。
器具的灭菌方法：（1）干热灭菌法干热灭菌法是将器具长时间放在高温下消除杂菌的一种方法。
其具体做法是将需要灭菌的器具(玻璃器皿或器械)先用铝箔包好，放入温度设定为150℃的恒温干燥箱内，保温2h，取出冷却后便可以使用。
（2）高压蒸汽灭茵法高压蒸汽灭菌法是将需灭菌的玻璃器皿、器械或培养基等放在高压蒸汽灭菌锅内，通过高温高压进行灭菌的一种方法。
一般在1.06 kg／cm2的压力下(121 ℃)下保持15～20min，就可达到灭菌效果。
组培复习资料
组培复习资料【名词解释】1、组织培养：无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体等，应用于人工培养基，创造适宜的培养条件，使其长成完整植株的过程。
2、细胞全能性：植物体每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传物质，在一定条件下具有发育成完整植株的潜在能力。
3、组培四个阶段：初代培养（愈伤）—继代培养（增殖）—生根培养—驯化移栽4、外植体：由植物体切取下来以进行培养的组织或器官叫做外植体5、组培实验室：准备室、缓冲室、接种室、培养室。
6、愈伤组织：人工培养基上由外植体形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。
7、脱分化：失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞团。
8、再分化：经脱分化的组织或细胞在一定培养条件下转变为各种不同的细胞类型，形成植株。
【选择、填空】1、植物组织培养基的类型：根据培养基的形态：固体培养、液体培养，基本培养基，完全培养基，诱导培养基，增值培养基，生根培养基2、组培条件：光照12h/d，温度25°度左右，湿度70%~80%3、植物组织培养的应用：1、良种快繁2、种苗脱毒3、突变育种4、挽救濒危植物4、培养基成分：无机营养、氨基酸、维生素类、糖类、有机附加物、植物生长调节物质、琼脂5、MS培养基：大量元素【NH4NO3、KNO3、CaCL2、MgSO4、KH2PO4】微量元素【KI、H3BO3、MnSO4、ZnSO4、Na2MoO4、CuSO4、CoCL2】铁盐【FeSO4、Na.EDTA】有机成分【肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸】6、组培途径：1.以芽繁芽：继代生根、稳定性强速度快，用在良种快繁2.愈伤组织：脱分化、易变异，用于研究。
3.原球茎：兰科类特有方式。
4.体胚：一步成苗7、营养器官的组培：植物额根、茎、叶、花器、种子、果实的无菌培养。
（芽眼朝上、叶背贴于培养基表面）【问答题、解析题】1、组培污染如何产生，怎样预防？来源：细菌、真菌及其它微生物。
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植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____. A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90% 2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养复习资料
1、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基，对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原生质体等进行离体培养，使其再生发育成完整植株的过程。
由于外植体已脱离了母体，植物组织培养又叫植物离体培养。
2、植物组织培养的特点：无菌条件下进行；多数情况下是利用成分完全不确定的人工培养基进行时；材料为离体状态；可以不断增殖，并通过调整成分控制实验的目的；在封闭的容器中进行，气体通过封口材料进行交换；环境、温度、光照强度都可人为控制。
3、植物组织培养的类型：按培养对象分：植株培养：对完整植株材料的离体无菌培养；胚胎培养：从果实或子房中分离出成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养的技术；器官培养：以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养技术；组织培养：对植物体的各部分组织如茎尖分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮组织、胚胎组织和薄壁组织等，或对植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株；细胞培养：对植株器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很小的细胞团进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术；原生质体培养：对用酶、物理等方法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原生质体团进行培养的技术；按培养过程分：初代培养、继代培养；按培养基的物理状态分：固体培养、液体培养。
4、植物组织培养在农林中的应用：植株离体快繁、无病毒苗木培育、次生代谢物的产生、培育新品种或创造新品种、植物种质资源的离体保存、人工种子、基因工程的应用。
5、外植体：植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。
在继代培养时，将培养的组织切段移入新的培养基时，这种切段也称外植体。
6、愈伤组织：指在植物受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处产生的一团不定形的薄壁组织。
7、脱分化：指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂，逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料植物组织培养知识点一：《植物组织培养概述》概述一、名语解释植物组织培养细胞全能性细胞分化细胞脱分化细胞再分化器官发生状体发生二、填空1、组织培养的理论依据是：（）2、植物组织培养的类型有：（）、（）、（）、（）、（）等。
3、1943年，（）提出了植物细胞（），并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养为一门新兴学科。
答案：1、细胞全能性学说2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养，原生质体培养3、white，“全能性”学说三、简答题1、简述植物组织培养的理论依据？2、植物组织培养的类型？答案：1、植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养、原生质体培养。
四、论述题论述组织培养在农业上的应用。
知识点二：植物组织培养实验室的基本设备和操作技术一、名词解释植物生长调节物质外植体外植体污染外植体褐变玻璃化现象二、填空1、组织培养实验室必要的设备有（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。
2、实验室中常用移液管容量有（）、（）、（）、（）、（）、（）。
3、培养基成分主要包括（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。
4、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的（），而且还能（）。
5、琼脂在固体培养时，是作为培养基的（），一般用量为（）。
6、常用的生长素有（）、（）、（）、（）等，常用的细胞分裂素（）、（）、（）。
7、外植体污染原因从病源分面主要有（）和（）两大类。
8、防褐变的措施有（）、（）、（）、（）。
9、驯化的目的（）。
10、外植体灭菌一般先用（），再用（）浸泡（） min。
答案：1、超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。
2、0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml、5ml、10ml3、无机营养、维生素类、氨基酸、有机附加物、植物生长调节物质、糖类、水和琼脂等。
植物组织培养复习资料概要
第一章绪论第一节植物组织培养的一般概念一、植物细胞组织培养的概念（P1）植物细胞组织培养（Plant Cell and Tissue Culture）：是指在离体（in vitro）条件下利用人工培养基（medium）对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使其长成完整的植株。
通过无菌操作分离植物体的一部分（外植体explant），接种到培养基上，在人工控制的条件下（包括营养、激素、温度、光照、湿度）进行培养，使其产生完整植株的过程。
主要有:原生质体（Protoplast）培养悬浮细胞培养组织（愈伤组织Callus、茎尖分生组织）培养器官（胚，花药，子房，根和茎）培养其中最常见的是愈伤组织培养。
植物细胞组织培养范畴：（广义）又叫离体培养：指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
（狭义）组织培养：指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
愈伤组织（callus）：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。
外植体（explant）：在植物细胞组织培养中，由活体（in vivo）植物体上取下来的，接种在培养基上无菌细胞、组织器官等用于离体培养的材料。
二、植物组织培养的分类1、培养基：固体培养、液体培养2、组织培养按培养对象可分为（外植体）植株培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养A植株培养(plant culture)：对完整植株材料的培养。
扦插苗培养、种子苗培养B器官培养(organ culture)：即离体器官的培养。
根据作用和需要的不同，可以包括分离茎尖、茎段、根尖、叶片、叶原基、子叶、花瓣、雄蕊、雌蕊、胚珠、胚、子房、果实等外植体的培养。
植物组织培养复习笔记
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官，组织，细胞以及原生质体，培养在人工培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料。
培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿着正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞。
二、组织培养的类型，不同分类依据。
（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养，细胞或原生质体培养5类；（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等；（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等；（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养；（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物。
1，haberlandt---于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2，white---于1943年出版《植物组织培养手册》。
3，murashine和skoog---在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养脱分化再分化培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效，管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复杂，投入资金多，电能消耗大；对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
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1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。
2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。
4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。
6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。
7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“脱分化”。
8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时_________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。
9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。
1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。
2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。
3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中，6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。
7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。
8、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。
1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和丿、'、/「用阶段。
2、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%・5%常用_3_%o3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基，其火菌方法一般采用壷热消毒灭菌方法。
4、pll的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pll大于6.0时，，培养基将会 ___________ ,低于5.0时，琼脂不能很好地凝同。
5、一般情况下，生长索/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成:比值低有利于芽的形成。
6、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宣的大小。
7花药和发粉培养的共同特点是利用花粉（小泡了）染色体数目的单倍性,培育出单倍体植株。
8、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。
1.器官培养、愈伤组织培养、细胞培养、原生质体培养、茎尖分生组织培养；T2.分生、愈伤组织；”,“3.普通培养、暗培养；”,“4.固体、液体；”,”5.植物脱毒、离体快繁「，”6.不定器官形成、体细胞胚胎发生；”,“7.无菌操作，在人工培养基上培养；T&器官、组织、细胞、去除细胞壁的原生质体；T9.胚状体、器官；”,T0.脱分化、再分化；VII.细胞全能性;VI2. 全部遗传信息、形成完整植株；”,T3.培养条件可以人为控制、生长周期短，繁殖率高、管理方便，利于T厂化生产和H动化控制「，“14.植物脱毒、离体快繁:T15.细胞：”,T6.机械法、酶解法；”,”17.愈伤；浅层培养、深层培养；T9.成批培养、连续培养；”,”20.腋芽萌发、不定芽发生、体细胞胚胎发生;丁21.糖的浓度;T22.高;T23.CTK/ IAA； T24.GA、GA浸种；”,”25.单核靠边期；丁26.器官、细胞、单倍体植株；”27.自然释放法、研磨过滤收集法、剖裂释放法;T28.正比、反匕T29.高温钝化、组织培养；T30.普通茎尖、微茎尖培养；T31.指示植物法、抗血清鉴定法、电子显微铳鉴定法、酶联免疫测定法:-V-32.砧木培养、茎尖准备、嫁接、嫁接苗培养、移栽；丁33.细胞分裂素、脱分化；”「34.无菌外植体的建立、芽的增殖、中间繁殖体的增殖、诱导生根、移栽；T35.脱毒、0.2・0.5mm、热处理、病毒检定;”36.反比；","37.无性繁殖；“,”38.营养体；”39.50；“）;1植物组织培养按培养对象分为（）、（）、（）、（）、（）等儿种类型。
2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为（）状态，并形成（）的现象称为“脱分化”。
3.植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为（）培养和（）培养。
4 植物组织培养按培养的方式分为（）培养和（）培养。
5.目前植物纟R织培养应用最广泛的方面是（）和（）。
6.由脱分化的细胞再分化出完敕植株有两种途径，一种叫做（），另一种叫做（）。
7.不同组织培养类型Z间的相同点是（）。
8.进行植物组织培养时，外植体可以是（）、（）、（）、（）o9.组织培养植株的再生途径有两条：一是（）发生，另一是（）发生。
1（）・细胞的全能性，可以通过成熟细胞的（）和（）过程得以体现。
11・植物组织培养的理论基础是（）O12.细胞全能性是指植物的毎个细胞都具有该植物的（）和（）的能力。
13.组织培养的特点是：（）、（）、（）。
14.（）和（）是目前植物细胞组织培养应用最多.最有效的方面。
15.（）培养和组织培养、器官培养并称为三种最基木的、传统的离体培养方式。
16.单细胞分离的方法有（）、（）。
17.常从离体培养的（）组织分离单细胞。
18.浮培养根据培养的目的分为（）和（）两种方式。
19.悬浮培养根据继代培养时是否将培养细胞转移到另一容器分为（）和（）。
20.外植体器官发生的三种途径包括（）、（）、（）。
21.幼胚培养与成熟胚培养在培养基成分上最大的不同点是（）。
22.进行再生培养（如叶片）时，通过诱导培养基诱导出愈伤组织后应更换分化培养基，分化培养基的特点是细胞分裂素的浓度应比诱导培养基（23.（）控制着植物离体器官的发育方向。
24.种了培养时打破休眠可在培养基屮添加（），或在接种前进行（）处理。
25.大多数植物花药培养所要求的花粉发育适宜时期是在（）。
26.花药培养属（）培养，花粉培养属于（）培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成（）。
27.分离花粉的方法有（），（），（）。
28在无毒苗的组织培养屮，外植体的大小与其成活率成（），而与脱毒效果成（）。
29.去除植物病毒的主要方法是（）和（）两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。
30.茎尖培养根据培养日的和取材大小分为（）和（）两种类型。
31.脱毒苗鉴定与检测的主要方法有（）、（）、（）、（）。
32.应用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病毒苗，主要程序为（）一（）一（）一（）f （）。
33.“微型抒插”的主要原理是利用（）来抑制植物原有的顶端优势，而使侧芽和顶芽能共同生长，因为这种方法不通过（）而再生，是最能使无性系示代保持原品质特性的一种方法。
34.茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段，即（）、（）、（）、（）、（）。
35.茎尖分生组织培养的目的主要是（）,其茎尖一般取（）毫米。
为了使脱毒效果更好，可以将茎尖分生组织培养与（）结合起来。
脱毒处理的试管苗，在用于生产Z前，必须进行（）。
36.茎尖外植体的大小与脱毒效果成（）。
37.危害植物的病毒主要是靠（）的作物。
38.无性繁殖的种类由于病毒通过（）进行传递，在母株内逐代积累。
39.温汤浸溃处理是在（）°C左右的温水屮浸溃10分钟至数小时。
1、组织培养植株再生的途径：体细胞胚胎发化途径和器官发化途径。
2培养基的主耍成分包括①无机营养成分（大量元素、微最元素和铁盐）、②冇机营养成分（包括维生素、氮基酸等）、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤H它物质o 3在同体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝I古I剂和支持物，一般用量为6-10g/L 间。
4、一般情况下，生长索/细胞分裂索的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成:比值低有利于芽的形成。
5、试管苗的生态坏境：高温且恒温、高湿、弱光、无菌。
6、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式。
7、无病毒苗的保存分：隔离保存和长期保存两种方法。
8、爪片染色法是检测划分发育时期的简便有效方法,常用染色剂为醋酸洋红。
1、 ____________________________ 在植物组织培养屮，多用于诱导外植体脱分化，但当诱导再分化，即诱导体细胞胚时，则应去除培养基中的________________________________________ ，而选用 _______________ 、_________________ 、 _____________ 。
2、 ____________ _______________ 和________________________ 的比值大时，有利于的形成，比值小时，则促进 ______________ 的形成。
（激素模式）。
3、 _____________________________________________________ 1902年徳国植物生理学家Haberlandt提___________________________________________ 概念。
1962年，Murashige和Skoog发表的一种改良培养基，后來被称为_________________ 培养基，现已经广泛应用于植物组织培养。
4、 __________________________ 普通培养室要求每LI光照________________ h,光照强度lx,温度____________________ °C之间。
5、 ______________________________________ 植物组织培养的三大难题:、_____________________________________ 、______________ o6、 ___________________________________ 培养基的成分主要包括、____________ 、、等。
1、 ___________________________________ 植物热处理脱毒有两种方法：一种是处理；另一种是 ______________________________ 处理。
2、 _____________________________________ 大多数植物组织培养的适宜温度范囤是°C,培养基的pH值范|制是 ____________________ 。