薄层色谱小知识

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薄层色谱基础知识及斑点异常-图文

，灰尘或颗粒，透射光下薄层纹理均匀细腻）
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斑点异常与克服
边缘效应
3.预饱和
在薄层板上一般是边缘上的展开剂较容易挥发, 如果这几个有机溶剂的挥发性能差异比较大,那么就会造成薄层板上边缘和中间展开剂比例的差
异而产生展开速度不一致的现象
克服方法：展开前要充分饱和
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斑点异常
❖S形及波形斑点
波形斑点
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薄层板的制备
黏合剂 cmc-na溶液的存放注意放置时间太长的CMC-Na溶液可能会发黄，而且可能有霉菌出现，最好不要使用。
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薄层板的制备
制板操作：除另有规定外，是指将1份固定相和3份水溶液，研磨混合，置玻璃板上使涂布均匀，平台上于室温下晾干，活化后，置有干燥器中备用。
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薄层色谱的点样
❖ 点样的距离
自制板
高效板
直径不大于 4mm
宽度5－10mm
>8mm
10－15mm
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直径不大于 2mm
宽度4－8mm
>5mm
8－10mm
薄层色谱的点样
❖ 点样的注意点
1.不要弄破薄层板 2.点样量大时，少量多次， 3.点好样的薄层板用电吹风吹干或放入干燥器里晾干
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薄层色谱的展开
薄层色谱基础知识及斑点异常_图文.ppt
薄层色谱
操作的流程
薄层点样板
展开
显色
结果判定
2
薄层板的制备
❖ 固定相 ❖ 什么是固定相？
3
薄层板的制备
❖ 常用固定相
1、聚酰胺 2、硅胶 3、硅澡土
4、氧化铝 5、纤维素
6、其他
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薄层色谱(专业知识)

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9
2.点样
在薄板一端1cm处用笔轻轻画一横线作为起点线，用内径为1mm，管口平整的毛细管垂直点在起点线上。注意动作要轻，毛细管口不要碰到吸附剂。
如果溶液过稀，一次点样后样品量过少，可在前一次点样干燥后，在原处再点。点样的直径不要超过2mm。因为斑点过大，会造成拖尾、扩散，影响分离效果。
易被吸附的物质相对移动较慢，在薄层板上移动的距离就小；反之，较难被吸附的物质相对移动较快一些，在薄层板上移动的距离则大。
经过一段时间的展开，混合物中各组份在薄层板上连续不断地进行吸附和解吸附过程，从而使各组份移动的速度产生差异，不同物质就被彼此被分开，最后形成互相分离的斑点。
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3
薄层色谱法优点
薄层色谱
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1
实验原理
利用混合物中各组份的物理化学性质的差别，在层析过程中，在不相溶的两个相中分布的不同，达到分离目的。
两个相:一个是涂布在薄层板上的吸附剂，叫固定相 (吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶) ，另一个是在展开过程中流过固定相的展开剂（有机溶剂），叫流动相。
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2
由于吸附剂对混合物中不同物质的吸附力不同，对极性大的物质吸附力强，对极性小的物质吸附力弱。因此当溶剂流过时，不同物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附、解吸附、再吸附、再解吸附。
如果需要点多个样，点之间距离不小于1～1.5cm。
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3.展开
薄层色谱的展开是在密闭容器中进行的。
将展开剂（6mL环己烷和2mL苯的混合物）倒入层析缸中，待层析缸中充满溶剂蒸气后，将点好样的层析板放入缸中展开。
点样的位置必须在展开剂液面之上。当展开剂展开至距顶端0.5～1cm时，取出层析板用铅笔画出溶剂前沿位置，晾干。

薄层色谱基础知识及斑点异常课件

特点
具有较高的分离效能、低成本、操作简便等优点，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
薄层色谱法的应用领域
01
02
03
化学分析
用于有机化合物、无机化合物的分离和检测，如金属离子、有机酸、碱等。
生物分析
用于生物样品中蛋白质、酶、核酸等大分子的分离和检测。
医药分析
用于药物成分、代谢产物、残留物的分离和检测，以及中药材的鉴别和质量控制。
案例二：食品中农药残留的薄层色谱检测
总结词
简便快速、经济实用
详细描述
薄层色谱法在食品中农药残留的检测中具有简便快速和经济实用的优势，能够同时分离和检测多种农药残留，提高检测效率，降低检测成本。
案例三：化妆品中重金属的薄层色谱检测
总结词
高准确性、高可靠性
详细描述
薄层色谱法在化妆品中重金属的检测中具有高准确性和高可靠性，能够有效地对化妆品中的重金属进行定性和定量分析，确保化妆品的安全性和有效性。
实验前的准备
仪器准备
确保薄层色谱仪正常工作，检查薄层板是否干净、无划痕。
试剂准备
根据实验需求，准备适量的展开剂、显色剂和样品。
安全准备
确保实验区域通风良好，避免有毒气体对实验人员造成危害。
实验操作步骤
01
02
03
04
薄层板制备
选择合适的薄层板，均匀涂布样品，自然晾干。
点样
用毛细管或自动点样器将样品点在薄层板的固定位置。
薄层色谱法的发展历程
起源
薄层色谱法起源于20世纪初，最初用于分离植物色素。
发展
未来
未来薄层色谱法将朝着更高效、更快速、更环保的方向发展，同时与其他技术联用，实现更复杂的样品分离和分析。

薄层色谱基础知识及斑点异常

调整薄层板：更换薄层板或调整薄层板的厚度、活性等参数优化展开系统：调整展开剂的比例、组成和浓度控制温度：在适宜的温度下进行薄层色谱分离，避免温度过高或过低增加展开时间：适当延长展开时间，使斑点充分展开
斑点拖尾：斑点在薄层板上延伸，形状不规则，可能是由于样品中杂质或溶剂残留导致的。
斑点异常是指薄层色谱中，斑点的颜色、形状、大小等特征与正常斑点存在明显差异的现象。
斑点异常可能是由于样品中某种组分的含量过高、杂质过多或溶剂不纯等原因引起的。
斑点异常的出现会影响薄层色谱的分离效果和定性定量分析的准确性，因此需要及时处理和解决。
常见的斑点异常包括拖尾斑点、前延斑点、后延斑点、杂质斑点等。
斑点拖尾：由于固定相的吸附或分离过程中溶剂不均一等原因导致斑点形状不规则
斑点扩散：由于薄层板的加工精度不够或操作过程中温度、湿度等因素影响导致斑点扩散
斑点重叠：由于样品中组分含量较高或薄层板分离效果不佳等原因导致斑点重叠
斑点拖尾与扩散同时存在：由于薄层板的质量和操作方法等多种因素综合影响导致斑点异常
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汇报人：XX
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薄层色谱法是一种常用的分离和分析方法，用于分离和鉴定有机化合物。
它利用固定相和流动相之间的相互作用，将不同成分的物质分离成不
同的斑点。
薄层色谱法的优点包括操作简便、分离效果好、灵敏度高和适用范围
斑点大小异常：斑点的大小与标准品不一致，可能是由于固定相或流动相的配比不当引起的。
斑点形状异常：斑点的形状不规则或出现拖尾现象，可能是由于固定相或流动相的配比不当引起的。

薄层色谱详细资料大全

薄层色谱详细资料大全薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。

待展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。

基本介绍•中文名：薄层色谱•外文名：(Thin Layer Chromatography)•别名：薄板层析•类别属性：快速分离少量物质的实验技术原理,实验流程,注意事项,趋势,胶板,原理基本原理色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。

薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱 ... 。

由于各种化合物的极性不同，吸附能力不相同，在展开剂上移动，进行不同程度的解析，根据原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值（Rf）：化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强，因此Rf值较小。

在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只与化合物本身的结构有关，因此可以根据Rf值鉴别化合物。

薄层色谱可适用小量样品（几到几十微克甚至0.01μg）的分离：也可用于多达500mg样品的分离，是近代有机化学中用于定性，定量的一种重要手段。

特别适用于那些挥发性小的化合物，以及在高温下易发生化学变化而不能用气相色谱分析的物质。

实验流程铺板点样展开显色计算Rf值铺板取7.5x2.5cm左右的载玻片5片，洗净晾干。

在50mL烧杯中，放置3g矽胶G，逐渐加入0.5﹪羧甲基纤维素钠水溶液(CMC)8mL，调成均匀的糊状，涂于上述洁净的载玻片上，用手将带浆的玻片在水平的桌面上做上下轻微的颠动，制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板，涂好的矽胶G的薄层板置于水平的玻璃板上，在室温放置0.5h后，放入烘箱中，缓慢升温至110℃，恒温0.5h后取出，稍冷后置于干燥器中备用。

薄层色谱

不同类型的化合物需选用不同的显色剂。一些常用显色剂见表 1。
表 1 一些常用的显色剂
显色剂
配制方法
检出对象
浓硫酸
10%H2SO4
大多数有机化合物在加热后可显出黑色斑点
碘蒸气
将薄层板放入缸内被碘蒸气饱和数很多有机化合物显黄棕色
分钟
碘的氯仿溶液
0.5%碘的氯仿溶液
同上
5%磷钼酸乙醇溶液，喷后 120℃烘
硝酸铈铵
6%硝酸铈铵的 2mol／L 硝酸溶液显色剂，多元醇在黄色底色上有
棕黄色斑点
香兰素-硫酸
3g 香兰素溶于 100mL 乙醇中，再加高级醇及酮呈绿色
入 0.5mL 浓硫酸
茚三酮
0.3g 茚三酮溶于 100mL 乙醇，喷氨基酸、胺、氨基糖
后,110℃热至斑点出现
东北师范大学化学学院综合化学实验学习资料
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了荧光）。也可将展开完毕的薄层板烘干后用显色剂喷雾显色。常用的显色剂有碘和三氯化铁水溶液等。许多有机化合物能与碘生成棕色或黄色的络合物，利用这一性质，在一密闭容器中（一般用展开缸即可）放几粒碘，将展开并干燥的薄层板放入其中，稍稍加热，让碘升华，当样品与碘蒸气反应后，薄层板上的样品点处即可显示出黄色或棕色斑点。除饱和烃和卤代烃外，均可采用此方法。
有关，其活性随含水量的增加而下降。活化温度：硅胶板于烘箱中逐渐升温至 105～110℃ 烘 30min；氧化铝板于 150～160℃烘 4h。活化后的薄层板放在干燥器内保存备用。
（3）点样在距薄层板底端 8~10mm 处，划一条线，作为起点线。用毛细管（内径小于 1mm）吸取样品溶液（一般以氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、苯、乙醚或四氯化碳等作溶剂，配成 1%溶液），垂直轻轻地接触到薄层的起点线上。如溶液太稀，一次点样不够，第一次点样干后，再点第二次、第三次，多次点样时，每次点样都应点在同一圆心上。点样次数依样品溶液浓度而定，一般为 2~5 次。若样品量太少时，有的成分不易显出；若量太多时易造成斑点过大，互相交叉或拖尾，不能得到很好的分离。点样后的斑点直径以扩散成 1~2mm 圆点为度。若为多处点样时，则样点间距为 1~1.5cm。（4）展开薄层的展开需在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放在层析缸中，使层析缸内的空气饱和 5~10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中进行展开。样点的位置必须在展开剂液面之上。当展开剂上升到薄层的前沿（离顶端 5~10mm）或各组分已明显分开时，取出薄层板，立即用铅笔或小针划出溶剂前沿的位置，晾干或烘干后即可显色。根据标样对照或 Rf 值的不同对各组分进行鉴定。展开剂的选择主要是根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来综合考虑。溶剂的极性越大，则对化合物的洗脱力越大，即 Rf 值也越大。如发现样品各组分的 R f 值较大，可考虑换用一种极性较小的溶剂，或在原来的溶剂中加入适量极性较小的溶剂展开，如原用氯仿为展开剂，则可加入适量的苯。相反，如原用展开剂使样品各组分的 R f 值较小，则可加入适量极性较大的溶剂，如氯仿中加入适量的乙醇试行展开，以达到分离的目的。（5）显色展开完毕，取出薄层板, 划出前沿线，如果化合物本身有颜色, 就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可用显色剂法或紫外光照射法显色。用硅胶 GF254 制成的薄板层，由于加入

--薄层色谱基础知识及斑点异常[原创]

喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂朽
显色，或加热显色，在日光下检早
视。2.有荧光的物质或遇某些试剂种
可激发荧光的物质可在356nm紫第
外光灯下观察荧光色谱。3.对于可闺
脾
薄层色谱中斑点的异常
畜
砚
异常现象
滴
1、拖尾
冻
4、32、念、现效S珠边斑形象应状缘点及斑波点形 5、斑点与对照品
逞材柿
6、其对不上
看暗斑（荧光淬灭）
谗偶舀讥
蔗
蝉
斤
薄层板的制备
幽
埔
自制板
焕
腿
淖
无黏合剂
含黏
季
合剂
徘
苏
馏
态
育
薄层板的制备
咖
❖黏合剂 cmc-na溶液的配
已格
制
福
先将称好的CMC-Na加
碧
入所需水量的8/10,让其
休
充分溶涨后,再加热煮沸,
慰
然后将剩余水慢慢加入.
搐
这样在煮沸过程中不易
摇
形成颗粒,煮沸时间短.
罕
B.选用稍厚一点的板
趴
败
斑点异常与克服
睫
圈
❖拖
尾
2.点样圆心未重合
繁
琴
样点虽然在同一垂直线上但样沼
点上下圆心没有重合，致使样孺
克点服呈方近法椭：圆点形样，位也置是要形准成确拖，现巳
预先设计象好的点原样因的之位一置，然后妊
用铅笔作好标记，每次点样对戈
准圆点
找
褐
斑点异常与克服
九
品
❖拖
尾
3.展开剂的配制
茅

薄层色谱名词解释

薄层色谱名词解释薄层色谱（Thin-Layer Chromatography，简称TLC）是一种分离、鉴定和质量检测分子间差别的实验技术，是按照分子大小、结合强弱及极性差异来分离和鉴定有机物质的一种实验技术，是现代分析实验中经常所用的一种为主的技术。

一、基本原理薄层色谱是一种浸透分析方法，它利用分子结合性大小和极性的差异，使混合物在固体涂布的表面中分离。

它是将样品淋到固定相（薄层沉积物）上，集中并在表面形成握样带，然后溶剂沿固定相传播和扩散，物质磁通的距离随着溶剂的运动而不断增加而发生分离，形成多条相峰，且每种物质出现的位置不同，因此可以用来鉴定其组成及监测已知物质在混杂物中的含量。

二、相关仪器薄层色谱所使用的关键仪器包括色谱柜、柜内溶剂槽、棉球、料筒、制备紫外线的拉曼管、微波辐照仪等。

其中，色谱柜用于分离混合物；柜内溶剂槽用于储存溶剂，一般选用四甲基橡皮筋或过滤纸固定；棉球可以帮助溶剂从料筒释放；料筒用来储存混合物；拉曼管可以用来制备紫外线用来无刺激地检测样品；微波辐照仪可以使混合物在固体表面样品重新分离。

三、步骤（1）准备固体涂布溶剂：取一定体积的固定相（例如硅胶、石英粉、均质膏），用溶剂在玻璃容器中调节，使其形成涂布液。

（2）涂布：在检测板上加入涂布液，使其稳定形成涂布，以便将混合物分离和拖提形成斑点。

（3）测试：将样品加在涂布板上，经过加热处理，取出产物后进行光学或电子观察。

（4）分析：分析各物质形成的斑点和拖提线之间的距离，用以检测混合物中物质的含量。

四、应用薄层色谱可以应用于天然产物、制药、食品、生物学等领域，可以用来检测毒素、除草剂、营养素、激素、抗生素，用于鉴定医药制剂中有效成份、白蛋白活性型/氧化型分析、杂质检测，另外，还可以用来检测食品中的色素、添加剂等。

薄层色谱TLC(点板)的基本原理

薄层色谱(点板)的基本原理★★薄层色谱，或称薄层层析(thin—1ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。

这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。

(一)基本原理薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。

薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。

一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。

任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。

在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。

在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。

而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响，就会被吸引而停留下来。

吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。

在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。

吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。

例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。

当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。

薄层色谱知识与技巧

薄层色谱，或称薄层层析(thin—layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。

这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。

(一)基本原理薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。

一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。

任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。

在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。

在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。

吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。

在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。

吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。

例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。

当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。

由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。

药学专业知识一药物分析：薄层色谱法

薄层色谱法薄层色谱法(thin layer chromatography，TLC)系将供试品溶液点样于涂布有固定相的薄层板上，经展开、检视后所得的色谱图，与适宜的对照物按同法操作所得的色谱图进行比较，主要用于药品的鉴别或杂质检查。

考点1：薄层色谱法的操作方法制板——点样——展开——定位——结果制版：将固定相涂布在薄板上常用固定相：硅胶、硅藻土、氧化铝、微晶纤维素、聚酰胺涂布方法：研磨——除气泡——涂布——晾干——活化活化方法：在ll0℃加热30分钟(目的：使硅胶吸附力增强)点样：将样品点在薄层板上点样要求：一般为圆点圆点，点样基线距底边2cm，样点直径为2～4mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜，一般为1.0～2.0cm。

点样时必须注意勿损伤薄层板表面。

展开剂：可以是单一溶剂，可以用是不同试剂按一定比例组成的混合溶剂。

浸入展开剂的深度为距薄层底边0.5～1.0cm(切勿将样品点浸入展开剂中)定位：记录展开剂前沿，及各斑点的位置结果检视：光学法：有色斑点、荧光淬灭、发射荧光：254nm，365nm化学法：显色剂显色考点2：色谱系统适用性试验包括：检测灵敏度、比移植、分离效能1.检测灵敏度采用对照溶液稀释若干倍的溶液与供试品溶液和对照溶液在规定的色谱条件下，在同一块薄层板上点样、展开、检视，前者应显示清晰的斑点。

2.比移植实践中，Rf值的范围是0.3～0.5，可用范围是0.2～0.8。

3.分离效能分离效能以分离度表示，分离度(R)系指两个相邻斑点中心距离与两斑点的平均宽度(直径)的比值。

R = 2d/(W1+W2)考点3：薄层色谱的应用1.定性分析：供试品、对照品点在同一薄层板上→展开显色后→供试品、对照品比移值一致→可认为供试品与对照品是同一物质。

2.纯度检查：对照法：供试品、杂质、对照品点在同一薄层板上→…→杂质斑点颜色与对照品斑点比较，不得更深→可认为未超过规定的含杂质限量。

自身稀释对照法：以供试品溶液的稀溶液作为对照液，方法同上判断：A、供试品所显杂质斑点与对照液主斑点比较，不得更深B、规定供试品杂质斑点的个数硅胶薄层板使用前在110℃加热30分钟，这一过程称为A.去活化B.活化C.再生D.饱和E.平衡『正确答案』B关于薄层色谱的点样与展开，以下叙述正确的是A.点样的样点必须为圆点B.点样基线距底边越近越好，一般小于1.OcmC.样点直径一般为2～4cmD.每块板只能点1个样点，以防斑点间干扰E.展开时，薄层板浸入展开剂的深度为距薄层底边0.5～1.0cm 『正确答案』E多项选择题薄层色谱系统适用性试验的内容有A.检测灵敏度B.精密度C.比移值D.拖尾因子E.分离效能『正确答案』ACE斑点定位法常用的显色剂有A.碘B.硫酸溶液C.荧光黄溶液D.茚三酮E.四氮唑盐『正确答案』ABCD『答案解析』显色剂有通用型和专用型两种。

薄层色谱小知识

薄层色谱小知识选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂，往往不能达到很好的分离效果，往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂，高极性的溶剂还有增加区分度的作用，展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂，就首先尝试使用该类展开剂，然后不断尝试比例，直到找到一个分离效果好的展开剂。

展开剂的选择条件：①对的所需成分有良好的溶解性；②可使成分间分开；③待测组分的Rf在0.2~0.8之间，定量测定在0.3～0.5之间；④不与待测组分或吸附剂发生化学反应；⑤沸点适中，黏度较小；⑥展开后组分斑点圆且集中；⑦混合溶剂最好用新鲜配制。

一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离；中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离；强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。

很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。

我们在实验中，为了实现一个配体与其他杂质有效分离，曾经尝试了很多种的溶剂组合，最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH （5.5：3.5：0.1）混合溶剂。

一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例（或者加入第三种溶剂）,达到最佳效果；如果没有分开的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。

对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质，在展开剂里往往加一点点三乙胺，氨水，吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸性。

TLC薄层色谱法

TLC薄层色谱法
包括介绍原理原理、原理图示、步骤介绍、优缺点、应用等
薄层色谱法（Thin Layer Chromatography, TLC）是一种在溶剂中进行二次溶剂不相溶混合物体色谱分离的方法，它是一种具有《小量样品，大量应用》的理想体色谱分离方法。

一、薄层色谱（TLC）原理
薄层色谱是一种属于液-液色谱分离技术的一种，它是溶剂在平板上水平运动，混合物在溶剂的作用下而被分离的。

薄层色谱是根据混合物中各成分在不同溶剂中的挥发速率不同而决定的。

各成分在溶剂的等张边界上逐渐散开，最后各个成分分散在溶剂中的位置不同，在同一溶剂中反映出各自的条带图象，这就是分离反应现象。

二、薄层色谱（TLC）步骤
1、膜制备：在平板上涂布膜，将膜沾湿液。

2、样品加样：将被分离物质溶液（样品或样品混合溶液）通过滴移管滴在膜上，形成一个小胶斑，然后以热风吹干。

3、烘干：将膜放在干燥无油的金属箱内，将恒温烘箱或水浴中，均匀加热干燥膜，以保持平地。

薄层色谱基础知识及斑点异常[原创]

29
脾
薄层色谱中斑点的异常
畜
砚
异常现象
滴
1、拖尾
冻
4、32、念、现效S珠边斑形象应状缘点及斑波点形 5、斑点与对照品
逞材柿
6、其对不上
诲
它
敛
摧
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公
斑点异常
即
拖尾原因
豹
绳
1.点样量
坎
2.点过样载圆点未
独
3.展重开合
苞
4.薄剂层析 5.其他
矮啪
洒
雁
31
畔
斑点异常与克服
白
处
v拖
尾
1.点样量过载
茅
13
萨
薄层板的制备
蔚
v 黏合剂 cmc-na溶液的浓
烛牵
度
楞
溶液的浓度0.3-0.7%比
灵
较合适，实际操作中0.4
蝇
％～0.5％最为实用，浓
廖
度高了将来显色时如果
刑
有加热过程稍不小心板
睦
子容易发黑，浓度低了
型
14
泉
薄层板的制备
嘴
v 黏合剂 cmc-na溶液的存
毗齿
放
脉
注意放置时间太长的
睫
CMC-Na溶液可能会发
玲诵国
4、氧土化
忙
5、纤铝维素6、其他
束
料
治
4
肚
薄层板的制备
漠
v 聚酰胺适合那些化合物的分离？摇
鹤
适用于多元酚类化合物分离，
西
如黄酮，醌类，酚酸，含羰基
偏
的化合物等
示
5
散
薄层板的制备

薄层色谱方法总结

2、展开将点好样品的薄层板放入展开
缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至规定距离（一般为8～15cm），取出薄层板，晾干，待检测。注：展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，密闭，一般保持15－30分钟。
3、显色与检视供试品含有可见光下有
3.类极性大的小分子有机酸
没食子酸：氯仿－醋酸乙酯－甲酸(5:4:1)、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸、异绿原酸。例如下面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的增加，总体的极性就增加，展开剂极性也增加了。依次为肉桂酸、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸。相应展开剂分别为：正己烷—乙醚—冰醋酸(5:5:0.1)、苯－冰醋酸－甲醇(30:1:3)、氯仿－甲醇－甲酸（9:1: 0.5）、石油醚－乙酸乙酯－甲酸（3:6: 1）、醋酸丁酯－甲酸－水(7:2.5:2.5)。
纯”，溶剂组成采用体积量比（如正丁醇冰乙酸 - 水= 4：1：1，V/V/V），或者绝对量（如18ml 甲苯 + 2 ml 甲醇）。其总量应足以使TLC/HPTLC 板的浸入深度约为 5mm。展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用，如需分层，则按要求放置分层后取需要的一相（上层或下层），备用。
六、薄层层析和纸色谱操作注意事项
1、点样点样器点样于薄层板上,一般
为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。点样时必须注意勿损伤薄层表面
二、展开剂的选择条件
1.对所需成分有良好的溶解性 2.可使成分间分开 3.待测组分的Rf在0.2-0.8之间，定量测定

薄层色谱鉴别

薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别是一种广泛应用于化学实验室的分析技术，它适用于许多领域，如有机化学、药物分析等。

薄层色谱鉴别是一种分析技术，它通过样品与色谱介质之间的相互作用来分离和鉴别各种化合物。

薄层色谱鉴别的原理是利用样品与色谱介质的相互作用力的差异来实现分离。

色谱介质一般是一种吸附剂，常用的有硅胶、活性炭、氧化铝等。

样品溶液通过毛细管往薄层色谱板上流动，称为展开。

在展开过程中，样品中的各种化合物会根据它们与色谱介质的相互作用力的不同而在色谱板上分离开来。

最后，通过使用染色剂或化学试剂，可以使各种化合物形成可见的斑点，从而实现鉴别。

薄层色谱鉴别的步骤如下：1.准备色谱板：选择适当的色谱介质，并将色谱介质涂覆在色谱板上。

常用的色谱板有玻璃板、铝板等。

2.准备样品溶液：将待分析的样品溶解在合适的溶剂中，使得样品溶解度适中，并使样品能够在色谱板上展开。

3.展开样品：将样品溶液使用毛细管均匀地涂覆在色谱板的起点上，待样品溶剂挥发后，在通风处或使用加热器加热。

样品溶液会随着溶剂的挥发，在色谱板上展开，并在展开过程中分离。

4.评估展开效果：等待展开完成后，可以使用紫外灯或其他凸显试剂将分离的化合物可视化。

根据斑点的位置、颜色和强度，可以初步评估展开效果。

5.鉴别化合物：根据实验需要，可以进行更进一步的鉴别。

例如，可以使用标准品和样品进行比对，根据斑点的位置和颜色来确定化合物的身份。

6.记录结果和分析数据：将实验结果记录下来，并进行数据分析和解释。

薄层色谱鉴别的优点是简单易行、操作方便、分析速度快、所需设备和材料价格相对较低。

此外，该方法对于非常小的样品量也可以进行分析。

然而，它也存在着一些局限性，例如无法分离高极性分子和对于无色化合物的分析能力相对较弱。

总而言之，薄层色谱鉴别是一种非常实用的分析技术，可以在化学实验室中应用于许多领域。

它通过样品与色谱介质的相互作用力来实现分离和鉴别各种化合物。

薄层色谱鉴别的优点是简单易行，操作方便，所需设备和材料价格相对较低，但也存在一些局限性。

薄层色谱的原理和应用

薄层色谱的原理和应用1. 薄层色谱的简介•薄层色谱是一种分离技术，用于分离和鉴定化合物的混合物。

•薄层色谱基于物质在固定相和流动相之间的相互作用进行分离。

•薄层色谱主要用于分析和监测食品、药物、环境污染物等领域。

2. 薄层色谱的原理•色谱板：薄层色谱使用一张薄而平坦的玻璃或塑料板作为固定相的载体。

•固定相：固定相是一种吸附剂，涂在色谱板的一端，通常是硅胶或活性氧化铝。

•流动相：流动相是一种溶液，通过色谱板时与固定相发生相互作用。

•样品施加：样品由移液器或微量注射器在色谱板的起始点施加。

•色谱发展：色谱板在被施加了样品的位置上，沿固定相移动，以便分离样品。

•显色检测：分离后的样品通常通过加色剂或暗室中使用紫外线或其他检测方法进行显色。

3. 薄层色谱的步骤•准备色谱板：准备一张干净的色谱板，通常需要在玻璃或塑料板上涂上固定相。

•建立起始线：使用直尺和铅笔在色谱板上标记起始线。

•施加样品：使用移液器或微量注射器在起始线上滴加样品。

•开始发展：将色谱板放入合适的容器中，向容器中加入流动相溶液。

•发展过程：流动相沿固定相上升，带动样品分子向上运动。

•停止发展：当流动相在色谱板上移动到所需的距离后，停止发展。

•检测结果：使用适当的检测方法检测分离后的样品。

4. 薄层色谱的应用•食品分析：薄层色谱可用于检测食品中的添加剂、农药残留物和重金属。

•药物分析：薄层色谱用于药物的分离和鉴定，包括抗生素、激素和中药成分的分析。

•环境监测：薄层色谱可用于检测环境中的有机污染物和污染物的来源。

•生物化学研究：薄层色谱在生物化学研究中用于分离和纯化蛋白质、核酸和其他生物分子。

•物质鉴别：薄层色谱可用于鉴别不同样品中的物质成分。

5. 薄层色谱的优势和局限性5.1 优势•快速分离：薄层色谱的分离过程通常只需要几分钟到几小时。

•简单操作：薄层色谱的操作相对简单，不需要专门的仪器设备。

•灵敏检测：薄层色谱可以使用各种检测方法进行分离样品的检测。

薄层色谱(TLC)详细介绍及制作

薄层色谱，或称薄层层析（thin-layer chromatography），是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。

这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。

一、基本原理薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板（常用玻璃板，也可用涤纶布等）上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。

薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析（吸附剂）、薄层分配层析（纤维素）、薄层离子交换层析（离子交换剂）、薄层凝胶层析（分子筛凝胶）等。

一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。

任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。

在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子（离子或原子）和固体内部分子所受的吸引力不相等。

在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。

吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。

在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。

吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。

例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。

当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。

由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。

薄层色谱总结

薄层色谱总结简介薄层色谱（Thin Layer Chromatography，简称TLC）是一种常用的分离技术，广泛应用于化学、生化、药学等领域。

相比于其他分离方法，薄层色谱具有操作简便、分离效率高以及成本低廉等优点。

本文将对薄层色谱的原理、实验操作和应用进行总结。

原理薄层色谱的原理是通过样品组分在薄层固体质粒上的相互分配行为来实现分离。

在薄层色谱中，固定相通常为一层薄薄的固体，被涂刷或吹扩在一种称为色谱板的玻璃、铝或塑料基质上。

而液相则以毛细吸附相的形式存在，填充在固定相的孔隙中。

当样品溶液通过色谱板时，不同组分会在固定相和液相之间发生分配。

这是由于不同组分对固定相和液相的亲疏水性或极性的差异导致的。

根据样品组分与固定相和液相的相互作用力强度的不同，不同组分会在色谱板上发生分离。

实验操作材料准备进行薄层色谱实验需要准备的材料有：•薄层色谱板：选择合适的基质，可以根据需要选择不同的涂层（例如硅胶、氨基硅胶等）。

•涂层溶液：根据需要选择不同的涂层溶液，将其涂抹或吹扩在色谱板上。

•样品溶液：将待分离的化合物溶解在适当的溶剂中，使得其浓度适宜。

•原色标记剂：用于判定实验进展，一般为毒性较小的化合物。

实验步骤1.准备薄层色谱板：将涂层溶液涂抹或吹扩在色谱板上，注意均匀涂布以确保实验结果的准确性。

2.样品点样：使用微量注射器或毛细玻璃管，在色谱板上点样品溶液。

3.色谱板开发：将色谱板放入封闭的薄层色谱槽中，注入适当液相溶剂，待其上升至一定高度后取出。

4.开发结果观察：使用荧光灯、紫外灯或显色剂观察点样的位置、颜色和形态，并将其标记出来。

5.数据处理：根据开发结果，计算各组分相对迁移率（Rf值）或保留因子（k值）等参数。

应用领域薄层色谱在许多领域都有广泛的应用，包括但不限于：1.药学：用于药物的质量控制、药物纯度分析等。

2.化学：用于化合物的鉴定、定量分析以及分离纯化。

3.生物化学：用于蛋白质、核酸等生物大分子的分离和鉴定。

薄层色谱基础知识

薄层色谱基础知识第一篇基础部分第一章绪论薄层色谱是色谱分析技术中的一项重要分支。

由于这一方法具有简单、迅速、灵敏高度、分离效能好等优点，因此已广泛一应用于化学分析的多种领域。

目前在食品卫生化学分析中，也多采用薄层色谱技术，特别是对食品中的微量有机毒物的分离和分析，更显出薄层色谱的优越性，故已成为食品卫生化学分析中的一项重要技术。

第一节色谱分析的发展色谱分析是分离混合物组分的一种方法。

这种方法是借助于混合物中的组分，在互不相容的两组间进行吸附或分配，以达到分离的目的。

本世纪初，植物学家茨维特（Tsw-ett）用菊根粉柱及石油醚分离植物叶子提取物，结果在菊根粉柱上形成了几种植物色素的色谱带，从而分离出植物叶子中的各种色素。

这种分离分析的方法，被称为色谱分析法，茨维特因此而被认为是色谱分析的奠基人。

但这一方法在较长的时期内并没有被人们所重视。

直至1931年以后，人们在应用色谱分析方法分离类胡萝卜素等工作中，提出了色谱分析的原理及其实用价值的报告，于是才逐步完善了这一技术方法，促进了色谱分析的发展。

茨维特所建立的色谱分析方法，被称为液一固吸附色谱法。

这种方法是将溶解了的待分离组分的溶液，通过固体吸附剂柱，进行分离。

1941年马丁（Wartin）等人，用含有水份的惰性支持剂（如含水硅胶）代替液一固吸附色谱中的固体吸附剂，将样品溶于不溶于水的有机溶剂中，并使通过装有含水的惰性支持剂柱，由于被分离的各组分在有机溶剂及水之间的溶解度不同，从而在两相间进行分配分离，这就诞生了液一液分配色谱。

此后，康斯登（Consden）用滤纸代替含水硅胶作隋性支持剂，称之为纸色谱。

马丁等进一步将色谱分离系统中的流动相由液体改为气体，并在涂有硅铜油液体的硅藻土支持剂上成功地分离了脂肪酸，创建了一种新型的色谱分析方法。

由于这一方法具有分离效能高、速度快等优点，因而得到了迅速的发展，成为目前色谱分析中的一项重要的技术——气相色谱法。

五十年代中期，斯塔尔（Stahl）发展了一种新型的色谱分析技术——薄层色谱法。