13043种苗工-植物组培实验(精)
组织培养实验报告
组织培养实验报告组织培养实验报告植物是大自然中最美丽的艺术品之一，而植物的生长和发育过程则是一个奇妙而复杂的过程。
为了更好地了解植物的生长规律和培养技术，我们进行了一项组织培养实验。
实验的目的是通过体外培养的方式，研究植物的生长和发育过程，探索植物组织培养技术的应用前景。
我们选择了茄子作为实验材料，因为茄子生长迅速，易于培养，并且在组织培养方面有一定的研究基础。
实验开始前，我们准备了一些必要的材料和设备，包括茄子种子、无菌培养基、培养瓶、显微镜等。
首先，我们将茄子种子进行消毒处理，以确保实验的无菌条件。
然后，将种子放置在无菌培养基上，通过培养瓶的密封，保持培养环境的湿度和温度。
在实验过程中，我们观察到了茄子的生长和发育过程。
最初，种子在培养基中发芽，并逐渐长出幼苗。
随着时间的推移，茄子幼苗逐渐长高，叶片也逐渐展开。
通过显微镜的观察，我们可以清晰地看到茄子的细胞结构和组织构成，这为我们深入研究植物的生长机制提供了便利。
在实验的后期，我们进行了一些处理，以探索不同因素对茄子生长的影响。
我们调整了培养基中的营养成分浓度，观察茄子生长的差异。
结果显示，适当增加培养基中的营养成分浓度可以促进茄子的生长速度和根系发育。
此外，我们还尝试了不同的光照条件和温度条件对茄子生长的影响。
实验结果表明，适宜的光照和温度条件对茄子的生长和发育有着重要的影响。
通过这次实验，我们不仅了解了植物的生长和发育过程，还掌握了一些植物组织培养的基本技术。
植物组织培养技术在农业生产和科学研究中具有广阔的应用前景。
通过培养出大量的植物组织和细胞，我们可以进行基因工程、病毒检测、新品种选育等研究工作，为农业生产的发展和改进提供有力的支持。
然而，植物组织培养技术也存在一些挑战和限制。
首先，培养过程中需要严格控制无菌条件，以防止细菌和真菌的污染。
其次，培养基的配方和培养条件的调整需要一定的经验和技巧。
最后，植物组织培养的成本较高，需要大量的设备和耗材支持。
植物组织培养的实验报告_实验报告_
植物组织培养的实验报告一、实验目的1.掌握无菌操作的植物组织培养方法；2.通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；3.通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4.通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；5.了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。
二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。
植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。
这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。
（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。
（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。
有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。
（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。
营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。
三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。
四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70% 酒精、0.1% 升汞、MS培养基、蒸馏水、NaOH、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。
六、实验步骤。
植物组培实验报告
植物组培实验报告植物组培技术是指利用植物体细胞分裂和分化的能力，通过体外培养的方法，使其成为整株植物的过程。
该技术已经广泛应用于植物育种、遗传工程、植物繁殖等领域。
实验目的：本实验旨在研究植物组培技术对不同植物品种的影响，探究其在植物育种中的应用价值。
实验材料：本次实验选用了四种不同的植物品种，分别为玉米、小麦、水稻和大豆。
实验所需的试剂包括MS培养基、植物生长素、植物生长素和细胞分裂素等。
实验步骤：1.植物材料的准备将四种植物的种子经过消毒处理后，将其在无菌条件下播种在MS 培养基上。
2.植物细胞的分离将培养基上生长的植物幼苗取出，进行细胞分离。
将其放入含有植物生长素和细胞分裂素的液体培养基中，进行震荡培养。
3.植物组织的培养将分离出来的细胞放入含有植物生长素的液体培养基中，进行组织培养。
待组织生长出来后，再将其移植到含有植物生长素和细胞分裂素的液体培养基中，进行细胞分裂和分化。
4.植物的生长与繁殖将培养好的植物幼苗移植到含有适量营养物质的液体培养基中，进行生长。
当植物幼苗长大后，可以进行繁殖试验，检测组培植物在遗传性状上的变化。
实验结果：经过实验，我们发现不同植物品种对组培技术的适应性不同。
在四种植物品种中，水稻和大豆的组培效果最好，生长速度较快，成活率较高；而小麦的组培效果较差，生长速度较慢，成活率较低。
在遗传性状上，我们也发现组培植物与自然生长的植物有一定的差异，但并不影响其在植物育种中的应用。
结论：植物组培技术是一种高效、快速的植物育种方法。
通过本实验，我们发现植物品种对组培技术的适应性不同，需要根据具体品种加以调整。
虽然组培植物与自然生长的植物在遗传性状上存在差异，但并不影响其在植物育种中的应用。
植物组培技术的不断发展和完善，将会对植物育种和植物繁殖领域带来更多的变革。
植物组培实验报告
植物组培实验报告一、实验目的本实验旨在通过植物组培技术培育出按需选择的完整植株，并探究植物组培技术的应用。
二、实验材料试验材料：百香果种子、消毒酒精、无菌培养基、干燥器、灭菌器、显微镜、组织培养器具。
三、实验方法1.种子外壳处理将百香果种子先用消毒酒精处理5min，再用盐酸（1~2mL/L）处理1min，最后用净水清洗3~5次，使种子壳子软化。
2.种子表面消毒将处理后的种子放入75%乙醇，浸泡2mins，在无菌条件下进行消毒处理。
然后在滤纸上用双倍浓度的漂白粉水溶液进行消毒2~4min，之后用无菌水洗3次，每次20~30s。
3.种子萌发将消毒处理好的种子放入含有生长调节剂的MS培养基中进行培育。
培养条件为25℃，光照强度为1500lx，每天进行16小时的光照和8小时的黑暗，培养30天之后，进行观察和筛选。
4.植株分化将萌发出来的幼苗转移到含有植物生长调节剂和培养素的组织培养基上。
在培养的过程中，由于组织培养的原理是通过植物生长调节剂和培养素激活其分裂能力，以实现大规模繁殖，因此在培养时一定要注意调节生长调节剂和培养素的浓度。
5.植株转化和生长将组织培养出来的未成熟小植株转移到含有特定基因和生长调节剂的培养基上进行转化培育，并在之后进行细胞壁硬化，以使小植株具备专门应用的性状。
之后，将已转化和生长成熟的植株经过移栽成功地种植到土壤中。
四、实验结果分析1.种子处理是组织培养成功的关键处理好了种子，百香果的发芽率可达65%～80%。
可见，用酒精消毒、盐酸处理和漂白粉消毒的方法可有效控制种子的杀菌，同时软化外壳，达到提高发芽率的预期目的。
2.多种因素会影响百香果的组培成功率影响百香果组培成活率的因素很多，包括培养条件、培养液质量、培养基配方、营养成分等。
调整不同参数来探究其合理性，比如控制不同光照强度，不同的基质等。
3.尝试不同的分化方法以提高分化率在组织培养出来的小植株进行分化时，可以通过一些策略来提高分化度，如预处理再接种、生长调节剂和营养因子酵素等，以及锌、铜等金属元素。
组培实验报告
一、实验简介实验名称：植物组织培养实验目的：通过植物组织培养技术，了解植物细胞生长、分化和再生的过程，掌握组培技术的操作方法，并应用于植物繁殖和遗传改良。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性，通过特定的培养基和外界条件，使植物组织在体外进行生长、分化和再生，最终形成完整的植株。
该技术广泛应用于植物繁殖、遗传改良、基因工程等领域。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：植物外植体（如叶片、茎段、愈伤组织等）培养基（MS培养基、改良MS培养基等）诱导培养基（1/2MS培养基、添加生长调节剂的培养基等）细菌培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）灭菌剂（如75%酒精、1%次氯酸钠溶液）其他：超净工作台、接种针、酒精灯、移液器、培养皿、培养箱等2. 实验仪器：电子天平高压蒸汽灭菌器移液器超净工作台培养箱显微镜四、实验步骤1. 材料预处理：选择健康、无病虫害的植物材料，用流水冲洗干净。
将外植体浸泡在1%次氯酸钠溶液中消毒5-10分钟，然后用无菌水冲洗3-5次。
将消毒后的外植体用无菌滤纸吸干水分。
2. 培养基制备：称取适量的培养基粉末，加入少量蒸馏水溶解。
将溶解后的培养基过滤除菌，加入适量的琼脂和生长调节剂。
将培养基倒入培养皿中，待凝固后备用。
3. 外植体接种：在超净工作台中，用无菌接种针将外植体接种到培养基上。
每个外植体接种3-5个，确保接种密度适宜。
4. 培养与观察：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制适宜的温度、光照和湿度。
定期观察外植体的生长情况，记录愈伤组织形成、芽生长和根生长等过程。
5. 培养基调整与继代培养：当外植体形成愈伤组织或芽生长到一定长度时，可进行培养基调整和继代培养。
将愈伤组织或芽切割成小块，重新接种到新的培养基上。
根据生长情况，适时调整培养基成分和生长调节剂浓度。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成：在适宜的培养基和条件下，外植体可形成愈伤组织。
愈伤组织是细胞增殖和分化的基础，是组织培养成功的关键。
植物组织接种实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握植物组织培养的无菌操作技术。
2. 熟悉植物组织培养的基本原理和过程。
3. 通过实验，了解植物细胞脱分化、再分化以及器官形成的过程。
4. 培养实验操作能力和观察能力。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性，通过特定的培养条件，使离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，再分化为具有根、茎、叶等器官的完整植株。
该实验依据以下原理：1. 植物细胞的全能性：每个植物细胞都含有该植物的全套遗传信息，在一定条件下可以发育成一个完整的植株。
2. 脱分化：在适宜的培养条件下，已分化的细胞可以恢复分裂能力，形成无定形的愈伤组织。
3. 再分化：愈伤组织在适宜的激素和营养条件下，可以分化形成具有特定功能的器官。
三、实验材料与仪器材料：1. 植物外植体（如叶片、茎段、芽等）2. MS培养基母液3. 琼脂4. 灭菌水5. 70%酒精6. 碘伏7. 无菌操作台8. 显微镜9. 灭菌锅仪器：1. 离心机2. 高压蒸汽灭菌器3. 电子天平4. 移液器5. 培养皿6. 移植针四、实验步骤1. 外植体消毒：将植物外植体用70%酒精消毒30秒，然后用碘伏消毒1分钟，最后用无菌水冲洗3次。
2. 制备培养基：按照MS培养基配方配制母液，然后用琼脂制成固体培养基。
3. 接种：将消毒后的外植体切成小块，接种到固体培养基上。
4. 培养：将接种后的培养基放入培养箱中，培养条件为：温度25℃、光照12小时/天。
5. 观察：定期观察愈伤组织的形成和器官的分化情况。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织形成：接种后3-5天，外植体表面出现白色愈伤组织。
2. 再分化：愈伤组织在培养过程中逐渐分化出根、茎、叶等器官。
3. 器官形成：经过一段时间培养，愈伤组织分化出完整的植株。
六、实验讨论1. 外植体消毒是植物组织培养成功的关键环节，消毒效果直接影响愈伤组织的形成和植株的再生。
2. 培养基的配方和培养条件对愈伤组织的形成和器官的分化有重要影响。
植物组培实验报告
植物组织培养实验报告实验名称：葡萄柚的扩繁组织培养学院：园林学院专业：2012级园林小组成员：指导老师：实验日期：2014.9.1—2014.10.14实验一：葡萄柚扩繁培养基的制备（1L)实验时间：9月1日实验地点:西南林业大学六楼实验室实验步骤：1．量取液体。
大量元素100 ml（用100 ml的量筒量），微量元素、有机元素、铁盐均10 ml（用10ml的量筒量），将上述量取的溶液混合于1L大烧杯中。
2.加纯水至500-600 ml刻度线稀释。
3.称取蔗糖30 g，用玻璃棒搅拌至溶解。
4.定容。
用1000 ml量杯定容后转移至大烧杯5.用移液枪取6-BA100μml,IBA 40μml。
6.混匀，调PH至5.9。
7.称取琼脂7g于塑料盆。
将调好PH的培养基倒入塑料盆，置于微波炉煮14min。
8．分装，封口，标记。
9. 121℃高温灭菌20min。
1000ml约一共分装33个瓶，加上实验老师给予的3个培养基我们组一共有36个瓶。
实验二：葡萄柚组培接种工作实验时间：9月3日实验地点：西南林业大学A栋六楼接种实验室实验过程：准备材料及器材：葡萄柚脱毒苗、超净工作台，手套、剪刀（3把）、镊子（3把）、酒精灯两盏、无菌皿。
实验步骤：1.接种前准备工作：用酒精棉球将超净工作台台面擦拭一遍，然后将所需物品放入超净工作台。
2.接种操作：⑴将超净台的门打开至1/3，带上手套，用酒精将双手进行消毒，反复揉搓双手使手上酒精挥发完全，将手伸入超净台。
⑵点燃酒精灯。
点燃前要确保手上的酒精已完全挥发，否则容易造成危险打开无菌皿。
⑶镊子消毒。
先用手将报纸打开，后在酒精灯上灼烧（除手捏的地方不烧，其余的均要烧，烧到烫为止。
镊子用完都要放到特定放镊子的架子中，且每次用时均要灼烧消毒）。
⑷挑拣材料。
先将盛放葡萄柚脱毒苗的瓶子上的塑料膜取下。
拿取镊子和剪刀（注意取放剪刀与镊子时要绕过培养基的瓶口，防止污染）。
用镊子将所需脱毒苗从玻璃瓶中夹到无菌皿上。
组培实验报告结果(3篇)
第1篇一、实验简介实验名称：植物组织培养实验实验目的：通过植物组织培养技术，探究植物细胞分裂、分化和再生能力，掌握植物组织培养的基本操作流程，并观察培养过程中植物组织的生长变化。
实验材料：水稻、玉米、小麦等植物叶片、茎段、愈伤组织等。
实验方法：采用植物组织培养技术，对植物叶片、茎段、愈伤组织进行体外培养，观察其在不同培养基、激素浓度、光照条件下的生长和分化情况。
二、实验结果与分析1. 培养基对植物组织生长的影响实验结果表明，不同培养基对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中，MS培养基（Murashige and Skoog培养基）对植物组织的生长和分化效果较好，愈伤组织诱导率和再生植株数量较高。
（1）MS培养基在MS培养基中，水稻叶片愈伤组织诱导率为80%，玉米叶片愈伤组织诱导率为75%，小麦叶片愈伤组织诱导率为70%。
再生植株数量分别为：水稻40株，玉米30株，小麦20株。
（2）改良MS培养基在改良MS培养基中，水稻叶片愈伤组织诱导率为70%，玉米叶片愈伤组织诱导率为65%，小麦叶片愈伤组织诱导率为60%。
再生植株数量分别为：水稻25株，玉米20株，小麦15株。
2. 激素对植物组织生长的影响实验结果表明，激素对植物组织的生长和分化具有显著影响。
其中，生长素（IAA）和细胞分裂素（KT）对植物组织的生长和分化效果较好。
（1）生长素和细胞分裂素浓度对愈伤组织诱导率的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时，水稻叶片愈伤组织诱导率达到最高，为80%。
玉米叶片愈伤组织诱导率达到最高，为75%。
小麦叶片愈伤组织诱导率达到最高，为70%。
（2）生长素和细胞分裂素浓度对再生植株数量的影响当生长素和细胞分裂素的浓度分别为0.5mg/L和0.1mg/L时，水稻再生植株数量为40株，玉米再生植株数量为30株，小麦再生植株数量为20株。
3. 光照条件对植物组织生长的影响实验结果表明，光照条件对植物组织的生长和分化具有显著影响。
植物组培 实验二
植物组培实验报告实验二、培养基的配制及灭菌一、实验目的1、熟悉植物组织培养的一般工作流程。
2、了解培养基的成分、类型及特点。
3、能正确进行培养基的配制及灭菌操作。
二、实验原理植物组织培养是一项技术性强、无菌条件要求高的工作，对场地有一定的要求，需配备必要的仪器设备和器皿、器械，还必须熟练掌握每个环节的操作技术。
植物组织培养的一般程序包括拟定培养方案、初代培养、继代扩繁、生根壮苗培养及驯化移栽，其基本操作技术包括培养基的配制及灭菌、外植体的选择与消毒、无菌接种与培养、试管苗生根与驯化移栽等。
三、实验内容1、培养基的成分以MS培养为例，其成分可以分为水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。
１．水作用：原生质体的组成成分，代谢过程的介质和溶媒。
它是生命活动过程中。
配制：培养基母液时要用蒸馏水：配培养基时可用自来水。
但在少量研究上尽量用蒸馏水。
２．无机元素大量元素，指浓度大于0.5mmol/l的元素，有Ｎ、Ｐ、Ｋ、Ｃa、Ｍg、Ｓ等。
其作用是：(1)N功能：是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，是生命结构和功能物质不可缺少的。
供应形式：含有ＮＯ3－N又含ＮＨ4－N。
ＮＨ4－N对植物生长较为有利。
在制备培养基时以这两种形式供应。
供应的物质有ＫＮＯ3、、ＮＨ4ＮＯ3等。
有时，也添加氨基酸。
(2)P功能：是磷脂的主要成分，而磷脂又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。
磷也是核酸、ＡＴＰ、辅酶等的组成成分。
组织培养中，磷不仅增加养分、提供能量，而且也促进对Ｎ的吸收，增加蛋白质在植物体中的积累。
供应形式：常用的物质有ＫＨ2ＰＯ4或ＮaＨ2ＰＯ4等。
(3)K功能：Ｋ对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系，它具有活化酶的作用。
Ｋ增加时，蛋白质合成增加，维管束、纤维组织发达，对胚的分化有促进作用。
但浓度不易过大，一般为１～３mg/l 为好。
供应形式：制备培养基时，常以ＫＣl、ＫＮＯ3 等盐类提供。
植物组织培养实验
实验一植物组织培养实验室的构造和功能一、目的要求：掌握如何组建植物组织培养实验室，熟悉组培中设计的各种仪器设备和器皿用具。
二、仪器与用具超净工作台、空调机、蒸馏水发生器、高压灭菌锅、低温冰箱、普通冰箱、电磁炉、各种电子天平、pH仪器等设备，以及各种试验器皿和器械用具等。
三、方法步骤1.了解组织培养实验室守则以及有关注意事项。
2.掌握仪器设备和器皿用具的名称与用途以及实验室的构造。
3.参观组培实验室的构建情况，包括准备室（化学实验室）、缓冲室、无菌操作室（接种室）和培养室的设计要求，以及内部仪器设备的名称及其作用。
四.实验报告1.将本次实验内容整理成实验报告2.设计一个植物组织培养实验室的组建方案。
实验二 MS培养基母液的配制与保存一、目的要求通过MS培养基母液的配制与保存，掌握配制与保存培养基母液的基本技能。
二、材料与用具配制MS培养基所需的药品（见附表）。
植物生长调节物质、各类天平、烧杯、容量瓶、蒸馏水、0.1mol/L的NaOH、0.1mol/L的HCl、母液瓶、标签、冰箱等。
三、方法与步骤1.母液的配制(将MS母液配置表画在黑板上，举例讲解母液的配制过程，包括称量、溶解、定容三步，再将班级分为五个组进行配制)2.植物生长调节物质母液的配制①称量：用微量0.001或0.0001的分析天平或由电子天平准确称取生长素（或细胞分裂素）50mg。
②溶解：生长素（如IAA、IBA、NAA、2、4-D）可用少量的0.1mol/LNaOH溶解，细胞分裂素（如KT、ZT、6-BA）可用0.1mol/L的HCl加热溶解。
③定溶：将溶解的植物生长调节物质倒入50ml容量瓶，用水冲洗小烧杯数次，最后加蒸馏水定容至50ml，配制成浓度为1mg/ml的溶液。
3.母液的保存①装瓶：将配好的母液分别倒入瓶中，贴好标签，注明培养基名称、母液号、配制倍数（或浓度）以及配制日期。
②储藏：将母液瓶储放在4℃冰箱内备用。
四、实验报告将本次实验内容整理成实验报告（叙述母液配置过程）。
组织培养实验(植物部分)
组织细胞培养技术实验实验一植物组织培养的培养基的配制、灭菌与仪器操作培训实验二植物的离体培养实验三植物离体培养中的形态观察和愈伤组织继代培养实验一植物组织培养的培养基的配制、灭菌与仪器操作培训【目的要求】学习并掌握植物组织常用培养基的组成、配制与灭菌方法。
培养基能够提供植物生长、繁殖所必须的各类营养物质，以及生长因子，是开展植物组织培养研究的基础和前提。
植物的种类不同，研究的目的不同，所需要的培养基的种类也各不相同。
【实验用品】1.实验用具：电子天平、烧杯、量筒、三角瓶或培养瓶、移液管、药匙、玻棒、pH试纸、吸耳球、牛皮纸、皮筋等。
2.药品：蔗糖、琼脂、0.1mol/L NaOH、 0.1mol/L HCL、各种培养基母液、激素母液【内容与方法】1.分组配制培养基激素用分析天平称取生长素或细胞分裂素50-100mg。
生长素用少量95%的酒精或0.1mol/L 的NaOH溶解，细胞分裂素用0.1mol/LHCL加热溶解。
加蒸馏水定容至100ml配制成0.5-1mg/L 的溶液。
∨激素﹦∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度2.湿热灭菌培养基称取规定数量的琼脂，加水到培养基最终容积的3/4，水浴或电炉使之加热溶解。
根据配方要求，把按顺序量取的各种母液以及称取的蔗糖，都加入煮好的琼脂中，然后加水定容。
用0.1mol/L的NaOH或者HCl调pH。
分装培养基，包好或盖好，标明编号。
121℃(103kPa)灭菌15-20min。
3.作好植物组织培养的各项准备工作制备无菌水：121℃ (103kPa) 灭菌40min；配制0.1% HgCl2溶液（放置棕色瓶中）；准备接种用培养皿、金属器械等用具。
注意：1.实验前1天，无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。
然后紫外线消毒。
2.实验中所用的各种容器一定要洗净、烘干。
3.用电子天平称量药品时，一定要用称量纸，对于有腐蚀性的药品，应将其放置在小烧杯中称量。
植物组织培养技术基础实验
实验一植物组织培养技术基础实验首先介绍本学期共有5个小实验，分为2大类，三项实验，1类是植物组织培养，另1类是动物细胞培养。
第一项实验是植物组织培养，包含3个小实验，即实验一：植物组织培养技术基础实验；实验二：MS培养基的配制与灭菌；实验三：愈伤组织的诱导。
在动物细胞培养的实验中包含2个小实验，分别第二项实验，是实验四：动物细胞培养液的配制与灭菌；第三项实验，实验五：动物细胞的组织块培养。
提出实验要求，注意实验各项内容的安全，包括实验试剂的使用，实验室的使用，实验仪器的使用，实验动物的处理等。
下面开始学习实验一。
一、实验目的：了解植物组织培养实验室的设置及基本设备，学习基本仪器设备的使用原理与方法，掌握植物组织培养的一些基本技术。
二、实验内容：（一）组培实验室的设置一个标准的组织培养实验室应当包括：准备室、接种室、培养室、驯化室等，准备室又称为化学实验室或通用实验室，可由洗涤室、培养基配制室和灭菌室构成。
在实际中可结合可行条件，合并一部分。
各分室能满足实验准备（器皿的洗涤与存放、培养基制备和无菌操作、用具的灭菌）、无菌操作和控制培养三项基本工作的需要。
1、准备室由洗涤室、培养基配制室和灭菌室构成。
（1）洗涤室(cleaning room)用于玻璃器皿和实验用具的洗涤、干燥和贮存；培养材料的预处理与清洗；组培苗的出瓶、清洗与整理等。
室内应配备大型水槽，最好是白瓷水槽。
为防止碰坏玻璃器皿，可铺垫橡胶。
上下水道要畅通。
备有塑料筐，用于运输培养器皿。
备有干燥架，用于放置干燥涮净的培养器皿。
（2）培养基配制室用于培养基的配制。
要求房间宽敞明亮、通风、干燥、清洁卫生，便于多人同时操作；有电源、自来水和水槽（池），保证上下水道畅通。
有时可将配制室内部间隔为称量分室和配制分室。
规模较小时，配制室可与洗涤室合并为准备室。
仪器与用具配置：电子分析天平、托盘天平、磁力搅拌器、蒸馏水器、酸度计、恒温水浴锅、电炉（或微波炉、电饭煲、液化气炉灶等）、冰箱等仪器设备；移液管（或微量移液器）、移液管架、培养瓶（包括试管）、棕色或透明试剂瓶、烧杯（带或不带刻度）、量筒、容量瓶、培养皿、吸管、打孔器、玻璃棒、标签纸、记号笔、耐高温高压塑料薄膜等封口材料、周转筐、尼龙绳、脱脂棉、纱布、工作台、蒸馏水桶、医用小推车等用品和用具。
植物组织培养实验讲义
植物组织培养是60年代以来植物细胞生物学中发展起来的一项生物技术。
它是借用无菌操作方法，培养植物的离体器官、组织或细胞，使其在人工合成的培养基上，通过细胞的分裂、增殖、分化、发育，最终长成完整再生植株的过程。
植物组织培养技术的研究，不仅具有重大的理论意义，而且在生产实践中也已显示了广阔的应用前景。
例如，组织分化与形态建成问题，快速繁殖与去除病毒，花药培养与单倍体育种、幼胚培养与试管受精，抗性突变体的筛选与体细胞无性系变异，悬浮细胞培养与次生物质生产以及超低温种质保存等方面的深入研究和实际应用，都必须借助植物细胞组织培养技术的基本程序和方法。
此外，植物细胞组织培养技术也有助于我们深刻理解植物细胞的全能性。
实验一母液及培养基的制备一、实验目的1．了解植物外植体离体培养所需各种营养成分及激素种类。
2．初步掌握培养基母液配制方法。
3．学习掌握培养基配制方法与灭菌操作。
4．制备部分后续实验用的培养基。
二、实验原理现在配制培养基的最简单的方法是用市售培养基干粉，其中含有无机盐、维生素和氨基酸。
把这种干粉溶解在蒸馏水里（要比培养基的最终容积少10％），加上蔗糖、琼脂和其他必要的补加物，最后再加入蒸馏水使之达到最终的容积。
调节pH，高压灭菌，于是制成所需要的培养基。
干粉培养基可用于常规的实验目的，如植物的快速繁殖等，在这类实验中所需的培养基就可以节省时间和金钱。
然而，如果在一项实验中必须对培养基中的有机或无机成分做一些较大的定性和定量的改动，或者当买不到干粉培养基或嫌干粉培养基价钱太贵的时候，有两种可能的方法配制培养基。
一个方法是按照配方规定的数量分别称量出各种成分，分别使它们溶解于水，然后再将它们混合在一起。
但这样操作非常繁琐，而且容易出错。
在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差，常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液，置于冰箱内保存。
植物组织培养实验报告
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号17130208 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 2016.3-6指导老师实验名称植物组织培养综合实验一、实验目的1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法；3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法；4.了解组织培养的基本程序；5.掌握接种的方法和材料的培养过程；6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术；7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体；8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别二、实验原理1.植物细胞的全能性一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。
植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。
2.植物细胞表现出全能性的条件1.离体状态；2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）；3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型3.无菌条件把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。
用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。
在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。
组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。
4.脱分化与愈伤组织已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。
脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。
所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。
5.培养基植物组织培养常用的培养基为MS培养基。
常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。
植物组培的实习报告
一、实习目的本次植物组培实习旨在通过实际操作，让学生了解植物组织培养的基本原理、技术流程和实验方法，掌握植物细胞培养的基本技能，提高学生的实践操作能力和科研思维能力。
同时，通过实习，使学生认识到植物组织培养在植物繁殖、品种改良、遗传育种以及植物基因工程等领域的重要应用。
二、实习内容1. 植物组织培养概述实习首先介绍了植物组织培养的基本概念、发展历程、应用领域以及实验室的基本设备。
2. 植物组织培养技术（1）植物材料的选择与预处理介绍了植物材料的选择标准、预处理方法（如消毒、切割等）以及预处理过程中需要注意的问题。
（2）培养基的配制与灭菌详细讲解了培养基的配方、配制方法、灭菌方法以及注意事项。
（3）植物细胞的诱导与增殖介绍了植物细胞诱导与增殖的方法，如愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织的诱导、不定芽的诱导等。
（4）植物胚胎发生与植株再生讲解了植物胚胎发生的过程、影响因素以及植株再生的技术要点。
3. 实验操作（1）植物材料的消毒与切割在指导老师的指导下，学生进行了植物材料的消毒与切割操作，掌握了消毒液的配置、消毒时间、切割工具的使用等技能。
（2）培养基的配制与灭菌学生亲自参与了培养基的配制、分装、灭菌等过程，了解了培养基的配方、配制方法、灭菌方法等。
（3）植物细胞的诱导与增殖学生在指导老师的指导下，进行了愈伤组织的诱导、胚性愈伤组织的诱导、不定芽的诱导等实验，掌握了相关技术。
（4）植物胚胎发生与植株再生学生进行了植物胚胎发生与植株再生的实验，了解了植物胚胎发生的过程、影响因素以及植株再生的技术要点。
三、实习收获1. 理论知识与技能的提升通过本次实习，学生对植物组织培养的基本原理、技术流程和实验方法有了更深入的了解，掌握了植物细胞培养的基本技能。
2. 实践操作能力的提高学生在实习过程中，亲自参与了植物材料的消毒、切割、培养基的配制、灭菌、细胞诱导与增殖、胚胎发生与植株再生等实验操作，提高了实践操作能力。
3. 科研思维的培养通过实习，学生学会了如何分析实验现象、解决问题，培养了科研思维。
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（5） 将配制好的培养基分装于50ml三角瓶中，盖上封口膜， 并用牛皮纸包扎。
铁盐单独配制，其配法为5.57g 的硫酸亚铁（Fe SO4.7H2O）和 7.45g乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA）溶于1L水中，用时每配1L培 养基，取该溶液5ml。
IAA 、 IBA 、 NAA 等可用少量的乙醇溶解，然后在加水定容。 2,4-D可用1 N的Na OH 溶解然后再定容； KT和6-BA应先定容于少 量的1 mol/L 的HCl中，再加水定容。玉米素应该溶于95% 的乙醇中 再定容。 pH值对培养基的凝固情况和植物材料的生长有很大的影响，因 此，等培养基配好后，应该立即调整培养基的pH ,最好用酸度计， 既快又准。培养基配好后应该立即分装，体积一般为容器的 1/4 或 者1/3为好。
表.1 MS培养基储备液的配制
MS 培养基储备液的配制 成分 20×储备液 1（大量元素） NH4NO 3 KNO3 CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 200×储备液 2（微量元素） KI H 3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4 .7H2O Na2MoO 4.2H2 O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 200*储备液 3（铁盐） FeSO4.7H2 O Na2.EDTA.2H2O 200*储备液 4（有机成分） 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇 盐酸硫胺素 甘氨酸 1 升储 备液 用量 每 升 培 养 基 取 用 量 （mg） （ml ）
组织培养的特点是： 取材少，培养材料经
济；人为控制培养条件，不受自然条件影响；生 长周期短，繁殖率高；管理方便，利于自动化控 制。组织培养不但是进行细胞学、遗传学、育种 学、生物化学和药物学等学科研究的重要手段； 而且在农学、园艺、林业和次生代谢产物工程等 生产领域得到广泛的应用。
贰 培养基
培养基是植物组织培养中的主要部分， 除了培养材料本身因素外，培养基的种类和 成分等直接影响培养材料的生长和发育，应 根据培养材料的种类和培养部位选择适宜的 培养基。培养基的种类很多，不同的培养基 有其不同的特点。
4 水稻成熟胚组织培养
（1） 取成熟种子，用 70％乙醇浸l min，转至l.5％次氯酸 钠溶液（ 含有0.01%吐温20）浸泡l.5—2 h后，用无菌水冲 洗4～5次，置无菌滤纸上吸干多余水分。 （2） 将成熟胚置于含 2 mg／L 2，4－D的 MS固体培养基 上，27 ℃暗培养诱导愈伤组织 10天后（成熟胚）继代一次。
叁 器材和药品
高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式 真空泵、电子天平、酸度测定仪、光照培养箱, 搪瓷杯、搪瓷盘、100 ml三角烧瓶（12个/组）、 250 ml三角瓶（2个/组）、试剂瓶、解剖刀柄 与刀片、单面刀片、剪刀、长镊子、培养皿、 移液管、漏斗、量筒、烧杯（50、100、500、 1000 m1），酒精灯、火柴、玻璃棒、吸耳球、 封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、 滤纸、pH试纸（5.4-7.0）、标签纸、称量纸、 药勺等。
伍 注意事项：
1. 配制培养基时，一定要注意调节pH。 2. 外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形 成。
陆 实验结果
外植体经过20天的培养后，长出淡黄色的愈伤 组织。
• 次氯酸钠消毒液, 75%的酒精 ,0.2％的升汞溶液. • 1 N 盐酸,1 N NaOH,0.8%的琼脂,3%的蔗糖.
0.1 mg/ml的2,4-D溶液：取25 mg的 2,4-D，加 入少量95%的酒精和1 N的NaOH溶解，再加蒸 馏水定容至250 ml。 • 0.1 mg/ml 的6-BA溶液：取25 mg的6-BA，用 少量1 N的盐酸溶解，再加蒸馏水定容至250 ml。
（3）MS基本培养基的配制：分别吸取MS贮备液30.0 ml（ 大量元素）、3.0 ml微量元素、 3.0 ml铁盐、 3.0 ml有机, 加 入1 L的搪瓷缸中，然后称取蔗糖18.0g, 加入琼脂4.8g，加蒸 馏水约550 ml，在电炉上加热，煮沸，融化琼脂，然后加水 至560ml。
（4）不同激素浓度培养基的配制：取200ml烧杯3个，分别
33000 38000 8800 7400 3400
50
166 1240 4460 1720 50 5 5 5560 7460
5
5
20000 100 100 20 400
5
肆 实验步骤
1 培养基的配制 （1）母液配制： 按照表 1分别配制，并在4 ℃冰箱中保存。 （2） 植物激素配制：称取10 mg NAA,加入少量酒精，并加水 定容50 ml (浓度为0.2 mg/ml), 用同样的方法配制2，4-D母液。 称取 50 mg 6-BA, 加少量的1 mol/L HCl，使其充分溶解，然后 加水至50 ml (浓度为1 mg/ml) 。 4
培养基的主要成分：
水 无机成分： 无机大量元素 氮： 铵态氮、硝态氮混合 磷： 磷酸盐 钾： 钾盐 钙、硫、镁
无机微量元素 主ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ有：铁、硼、锰、锌、铜、钼、钴、氯 有机成分： 糖、 维生素、肌醇、氨基酸及有机附加物。 植物生长调节物质： 生长素类：NAA、IAA、IBA、2,4-D 细胞分裂素类：BAP, KT，TDz，ZT 其他类： GA3, ABA， PP333 琼脂 pH值
种苗工：植物组培实验
COURSE NAME
编号：13043
总框架
壹 贰 叁
实验原理 培养基 器材和药品
肆 伍 陆
实验步骤 注意事项 实验结果
壹 实验原理
植物组织培养是指植物的任何器官、 组织或细 胞，在人工预知的控制条件下，放在含有营养物质和 植物生长调节物质等组成的培养基中，使其生长、分 化并形成完整植株的过程。其理论依据是植物细胞具 有全能性。
5
2 培养基灭菌 （1） 打开灭菌锅盖，向锅内加水。 （2）加水后，将待灭菌的物品放入锅内，不要放 的太多，以免影响灭菌效果。物品不要近靠锅壁， 以免冷凝水顺壁流入物品中。 （3） 加盖旋紧螺旋。 （4） 打开放汽阀，加热，自开始产生蒸汽后5分 钟，再关紧放汽阀，此时锅内的冷空气已由排气 孔排尽，让温度随蒸汽压力的增高而上升。
（5） 待压力逐渐上升到所需压力时（一般为15磅/时， 1.034×10 5Pa）, 灭菌20分钟。
（6） 灭菌后，待压力降至0时，开盖，取出灭菌物品。 （在压力未完全下降前，切勿打开锅盖）。
3 胡萝卜组织培养
（1） 取两个50ml的小烧杯,分别倒入25ml的70%的酒精 和0.2%的升汞。 （2） 取胡萝卜贮藏根，洗净，然后将胡萝卜根于70％ 酒精中浸泡数秒钟。 （3） 浸于0.2％氯化汞（升汞）液中消毒灭菌10 min后, 再用无菌水冲洗3—4次。 （4） 将灭菌材料放在灭菌的滤纸上,吸干水分。 （5） 用解剖刀将胡萝卜切去表皮和中柱，取皮层，切 成0.5cm见方的小块，接种于MS附加 2.0mg/L 2，4D 培养基内,于 25℃，黑暗或漫射光下培养,14—21 天后继代一次。
配制培养基最方便的方法是预先配制不同组分 的培养基母液，贮藏在冰箱，待配制培养基时取出， 按比例稀释。 配制母液时为了减少工作量可以把几种药品配 在同一母液中，但是应该注意各种化合物的组合以 及加入的前后顺序，应该把钙离子、锰离子、钡离 子和硫酸根和磷酸根例子错开，以免发生沉淀。 把每种试剂单独溶解后再加入后一种化合物。 混合已溶解的各种矿质盐时还应该注意加样顺序。