第二组第4组细胞生物学实验设计

合集下载

细胞生物学实验教学备课教案细胞实验的操作与观察

细胞生物学实验教学备课教案细胞实验的操作与观察

细胞生物学实验教学备课教案细胞实验的操作与观察细胞生物学实验教学备课教案前言:本教案旨在为细胞生物学实验的准备工作提供指导,包括实验的操作步骤和观察要点。

实验内容涵盖细胞培养、染色和观察等方面,旨在帮助学生了解细胞结构和功能,培养他们的实验技能和科学思维。

实验目的:通过本实验,使学生了解细胞的基本结构和功能,培养他们的实验能力和观察分析能力。

实验材料和仪器:1. 细胞培养物:如细菌培养物、动物细胞培养物等。

2. 细胞培养器具:如培养皿、离心管、移液器等。

3. 染色剂:如荧光染料、溴酶、乙酰酚染料等。

4. 显微镜和载玻片。

实验步骤:步骤一:准备工作1. 检查实验材料和仪器是否齐全。

2. 清洗工作台和实验器具,保持清洁。

步骤二:细胞培养1. 取出细胞培养物,根据需要进行适当的稀释。

2. 将细胞培养物分装到培养皿中,每个培养皿的细胞密度控制在适当水平。

3. 采用无菌操作,将培养皿放入恒温培养箱中,设定适当的温度和培养时间。

步骤三:细胞染色1. 取出培养皿中的细胞,使用适当的方法将细胞附着在载玻片上。

2. 准备染色溶液,根据实验需要选择合适的染色剂。

3. 将染色溶液滴在载玻片上,与细胞接触一定时间。

4. 用适当的方法将载玻片洗净,准备观察。

步骤四:观察和记录1. 将载玻片放置在显微镜上,调整镜头和光源,观察细胞的形态和染色效果。

2. 用目镜和物镜逐步调整焦距,获得清晰的细胞图像。

3. 用规定的倍率进行观察,并记录细胞的结构特征和染色的结果。

步骤五:数据分析与讨论1. 根据观察结果,总结细胞结构和功能的特点,并进行分析讨论。

2. 分析不同染色方式对细胞观察结果的影响。

3. 理解实验中可能出现的误差,并提出改进的方法。

步骤六:实验总结1. 总结实验的目的、步骤和观察结果,梳理实验过程中的关键点和问题。

2. 分析实验结果的意义和应用价值,并展望进一步的研究方向。

3. 总结实验中的收获和不足之处,提出改进的建议。

细胞生物学实验教程

细胞生物学实验教程

细胞生物学实验教程1. 细胞培养细胞培养是研究细胞生物学的重要工具。

其基本原理是将动植物等生物材料分离、挑选出优良细胞群体,通过合适的细胞培养基、培养条件、方法和设备,使细胞在体外生长和繁殖。

其常用培养细胞的类型有:肺、肝、胃肠、心肌、肌肉、神经、结缔组织、卵巢等。

2. 细胞分离将细胞组织挑选出来进行细胞分离,我们需要用到一般的分离试剂,如细胞酶、生物表面活性剂、离子液体、尼龙布、毛细管、细胞分选仪和细胞联合培养等,同时需要注意一些技术细节。

例如合适的分离环境和分离条件、合适的分离时间、细胞貌形的观察以及细胞去污的操作等。

3. 细胞染色细胞染色是存在于细胞的染色体、蛋白质和核酸等物质,借助不同染色剂使之显色的过程。

其优点是操作简便,速度快,结果直观且研究范围广。

根据它的使用范围和目的不同,一般分为核型分析、基因型分析、生化分析、免疫分析和化学分析等。

4. 免疫组化染色免疫组化染色是指利用抗体与细胞中的特定抗原之间的结合反应,使细胞中的抗原在细胞、组织切片或细胞培养物中可视化并得到定位的技术。

这种技术是现代生物技术与分子生物学的重要组成部分,也是研究细胞分子和生物学的密切联系。

5. 荧光标记技术荧光标记技术是指在一定条件下,荧光分子效应的物理特性。

将该技术运用于细胞生物学中,可以标记生物分子,如细胞内结构组分和生物分子中的蛋白质、核酸、糖等,以实现对其特性、运动和转化的动态和定量分析。

同时,它对于研究牛眼改良和细胞砂浆的研究、比较病理学和細胞生理学中细胞示踪标记的定位等过程中也有着积极的作用。

6. 电镜观察电子显微镜(EM)是一种利用电子束代替光束观察样品表面的高分辨率显微镜。

其操作方法较为复杂,需要像样的准备样本和设备,但提供的高分辨率和高对比度,使得研究者可以观察小于光学分辨率的细胞结构,并能发现小分子、细菌和病毒等细胞成分。

7. 分子生物学实验技术目前,分子生物学技术已经成为细胞生物学研究的重要手段之一。

细胞生物学设计性实验:细胞核的分离鉴定

细胞生物学设计性实验:细胞核的分离鉴定

医学细胞生物学设计型实验设计报告班级10级k-7班评分实验项目:细胞核的分离与鉴定实验原理:1、细胞内各种结构的比重和大小不同,在同一离心场内其沉降速度也不同。

所以,用差速离心法可将细胞内各种细胞器及组分分级分离出来。

差速离心法也是用来研究亚细胞成分的化学组成,理化特性及其功能的主要手段。

2、分离细胞核最常用的方法是将组织制成匀浆,在特定的条件下进行离心分离,然后分析鉴定。

3、匀浆是指在低温条件下,将组织放入匀浆器,加入等渗匀浆介质进行研磨,破碎细胞,使之成为各种细胞器及其包含物的匀浆液。

实验步骤:1、处死:断头处死小白鼠,手提尾部使其学业尽量流出。

2、取材:迅速开腹取肝,在盛有生理盐水的小烧杯中反复洗涤,称取湿重约为1g的肝组织放在烧杯中。

3、匀浆:加油8ml预冷的0.25mol/L蔗糖0.003mol/L绿化高永夜于烧杯中,尽量剪碎肝组织,将剪碎的刚组织倒入玻璃匀浆器,是匀浆器下端侵入盛有冰块的器皿(如冰盘)。

左手握持匀浆器,右手将匀浆捣杆垂直插入管中匀浆,直至看不到明显的组织块。

4、过滤:用8层纱布(先用少量生理盐水或蔗糖液润湿纱布)过滤匀浆液于离心管中。

5、离心:在天平上平衡每对离心管,2500r/min离心15min,取上清液于另一离心管中。

6、涂片:取上清液制一张涂片(涂片1)。

将原离心管中剩余上清液吹打成沉淀成悬液,另制一张涂片(涂片2),自然干燥。

7 、染色:分别在涂片1和2上低价甲苯胺蓝染液,染色5到7分钟(即滴染)。

8、洗涤:冲去染液,晾干。

9、镜检:结合实验结果的描述,镜下观察分析。

注意事项:1.操作规范,防止试剂污染。

2.细胞悬液的涂片制作要轻柔。

3.使用离心机要注意平衡,转速从低到高。

预期结果:低倍镜下找到标本,再换高倍镜,可见肝细胞核已游离出来,被染成蓝紫色,圆形,中央有2到4个甚至更多个深蓝色的核仁。

实验用品:材料:小白鼠肝脏。

试剂:生理盐水、0.25mol/L蔗糖0.003mol/L氯化钙溶液、1%甲苯胺兰染液。

研究生生物科学教案:细胞生物学与分子遗传学

研究生生物科学教案:细胞生物学与分子遗传学

研究生生物科学教案:细胞生物学与分子遗传学一、引言在研究生阶段,学习细胞生物学与分子遗传学是生物科学领域的重要基础。

本教案旨在提供一份全面而系统的教学计划,涵盖了细胞生物学和分子遗传学的各个方面,帮助研究生掌握相关知识和实践技能。

二、课程目标1.理解和描述细胞结构、功能以及其在各种生物现象中的作用;2.掌握DNA及RNA结构、复制、转录和翻译过程,并理解相关调控机制;3.理解基因表达调控的原理,并能运用分子遗传学方法对基因表达进行调控;4.掌握常见的实验技术和设备应用于细胞生物学与分子遗传学研究。

三、教学内容安排第一章:细胞结构与功能1.细胞的起源和进化2.细胞膜结构与功能3.细胞器的结构与功能4.胞质骨架与细胞运动5.细胞分裂与细胞周期第二章:DNA结构、复制和修复1.DNA的化学结构2.DNA复制的机制和调控3.DNA损伤和修复第三章:基因转录和翻译1.RNA结构与功能2.基因转录的机制和调控3.mRNA剪接和RNA编辑4.蛋白质合成的机制和调控第四章:基因表达调控1.染色质结构与染色体重塑2.转录因子及其作用机制3.免疫调控和激素调控第五章:实验技术在细胞生物学与分子遗传学中的应用1.基本实验技术介绍:PCR、电泳、克隆技术等2.蛋白质检测技术:Western blotting、免疫组化等3.影像技术在细胞生物学与分子遗传学中的应用四、教学方法与评估方式1.授课形式主要为课堂讲解,重点讲解理论知识并结合案例进行展示;2.实验课程将涉及到细胞生物学与分子遗传学相关实验的设计与操作;3.课后会留作业,包括理论题、计算题以及实验报告;4.期末考试评估学生对于课程整体内容的掌握情况。

五、参考资料1.Alberts, Bruce, et al. "Molecular Biology of the Cell." GarlandScience, 2017.2.Lodish, Harvey, et al. "Molecular Cell Biology." W.H. Freeman andCompany, 2016.3.Griffiths, Anthony J., et al. "Introduction to Genetic Analysis." W.H.Freeman and Company, 2015.以上为《研究生生物科学教案:细胞生物学与分子遗传学》的基本框架,根据此教案,研究生可以系统地学习并掌握细胞生物学和分子遗传学的基本理论和实践技能。

细胞生物学实验材料

细胞生物学实验材料

实验一荧光显微镜的原理和使用实验二叶绿体的分离与荧光观察实验三线粒体的活体染色与观察实验四细胞膜的通透性实验五 DNA的细胞化学——Feulgen反应实验六植物染色体标本的制备和观察实验七细胞计数实验八植物细胞骨架的光学显微镜观察实验九植物原生质体的分离和活性鉴定实验十环境因素诱变染色体改组的观察实验一荧光显微镜的原理和使用一、实验目的了解荧光显微镜的构造及其维护方法;掌握荧光显微镜的使用方法和使用中的注意事项。

二、实验原理荧光显微镜是选择由高压汞灯或类似光源发出一定波长的激发光,激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后,观察细胞某种特异成分的分布状态的显微镜。

与普通光学显微镜一样,荧光显微镜也有物镜、目镜、调焦装置、光源、聚光器、载物台、镜身等组成部分。

所不同的是,荧光显微镜增加了激发光源和滤片系统,它投射到样品上的是特定波长的激发光而不是普通的可见光。

在激发光的作用下,样品中的荧光物质产生图1荧光显微镜发射光(即荧光)。

因此,荧光显微镜观察到的是样品中能产生荧光的部分所呈现的荧光映象,普通光学显微镜则是整个样品的可见光透射和折射影像。

某些物质在—定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态,从激发态回到基态时,就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如可见光),这种光就称为荧光。

若停止供能荧光现象立即停止。

有些生物体内的物质受激发光照射后直接发出荧光,称为自发荧光(或直接荧光),如叶绿素的火红色荧光和水质素的黄色荧光等。

有的生物材料本身不发荧光,但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光,这种荧光称为次生荧光(或间接荧光),如叶绿体吸附吖啶橙后可发桔红色荧光。

利用荧光显微镜对可发荧光物质进行检测时,将受到许多因素的影响,如温度、光、淬灭剂等。

因此在荧光观察时应抓紧时间,有必要时立即拍照。

三、实验用品荧光显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、解剖刀、0.01%吖啶橙染色液(acridine orange)、蒸馏水、水葫芦叶片四、实验内容与方法(一)荧光显微镜的构造1、基本装置荧光显微镜的基本装置是由普通光学显微镜加上一些附件(如荧光光源、激发滤片、二向色镜和阻断滤片等)的基础上组成的。

细胞生物学教案

细胞生物学教案

细胞生物学教案【篇一:细胞生物学教案】第一章绪论第一节细胞生物学研究的内容与现状一、细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科细胞生物学:是在显微、亚显微与分子水平等不同层次上研究细胞结构、功能及生命活动规律的科学。

细胞生物学研究的对象是细胞。

细胞分子生物学是当前细胞生物学发展的主要方向。

细胞生物学研究的主要内容是细胞的形态与结构、代谢与调控、增殖分化、遗传变异、衰老与死亡、起源与进化、兴奋与运动以及细胞的传递等。

细胞生物学不同于细胞学主要表现在:第一,深刻性。

它从细胞整体结构,超微结构和分子结构对细胞进行剖析,并把细胞生命活动同分子水平和超分子水平联系起来。

第二,综合性。

这所研究的内容广泛涉及到许多学科领域,同生理学、遗传学、生物化学、发育生物学等融合到一起。

二、细胞生物学的主要研究内容大致可分为以下几个方面:(一)细胞核、染色体以及基因表达的研究(二)生物膜与细胞器的研究(三)细胞骨架体系的研究(四)细胞增殖及其调控(五)细胞分化及其调控(六)细胞的衰老与程序死亡(七)细胞的起源进化(八)细胞工程三、当前细胞生物学研究的总体趋势与重点领域(一)当前细胞生物学研究中的三大基本问题1、细胞内的基因组是如何在时间与空间上有序表达的?2、基因表达的产物如何逐级装配成基本结构体系及各种细胞器?3、基因表达的产物如何调节细胞最重要的生命活动过程的?(二)当前细胞基本生命活动研究的若干重大课题1、染色体dna与蛋白质相互作用关系——主要是非组蛋白对基因组的作用。

2、细胞增殖、分化、凋亡(程序性死亡)的相互关系及调控3、细胞信号传导的研究4、细胞结构体系的装配第二节细胞学与细胞生物学发展简史一、细胞的发现英国学者胡克于1665年制造了第一台有科研价值的显微镜,第一次描述了植物细胞的构造,细胞的发现是在1665年。

1677—1683年,荷兰人列文胡克用自己设计好的显微镜第一次观察到活细胞。

二、细胞学说的建立及其意义建立:1838—1839年德国植物学家施莱登和动物学家施旺提出:一切植物、动物都是由细胞组成的,细胞是一切动植物的基本单位,这就是著名的“细胞学说”。

xu《细胞生物学实验》教案

xu《细胞生物学实验》教案

实验一细胞形态结构的观察与显微测量(必做)一、实验目的:1.熟悉动物细胞、植物细胞的基本形态结构2.掌握临时装片的制作方法3.掌握显微测量的原理和方法4.掌握生物绘图的方法。

二、实验原理:细胞是生物体结构功能的基本单位,其形态与功能相适应。

不同类型的细胞具有不同的大小、形态和结构,以适应其功能。

通过制作临时装片,可以观察很多细胞的结构,并借助测微尺测量细胞直径,进而获得细胞的体积。

三、实验仪器、试剂及材料:仪器:光学显微镜(每人1台),载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、牙签、滴管测微尺(镜台测微尺;目镜测微尺)试剂:1%碘液、瑞氏染液(如果观察血细胞,则需瑞氏染液)材料:洋葱、红辣椒、紫色落葵(或紫罗兰)、血细胞悬液、口腔上皮细胞四、实验步骤:1.洋葱鳞茎表皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用剪刀在洋葱鳞茎叶内表面画一个1mm2的方框用镊子撕下表皮在碘液中铺平盖上盖玻片用吸水纸吸去多余碘液(也可帮助排除气泡)显微镜下观察(同法制红辣椒表皮细胞装片)2.人口腔黏膜上皮细胞的观察在载玻片中央滴一滴1%碘液用牙签刮取上皮细胞在1%碘液中搅动分散细胞染色1分钟盖上盖玻片观察3.血细胞观察(见《细胞生物学实验教程》第9页)在载玻片右端滴一滴血用另一张载玻片以30~45度角(两玻片夹角)推移血液成均匀薄膜滴一滴瑞氏染液染色1~3分钟自来水冲洗染液,吸水纸吸干镜检4.显微测量(1)原理: 测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成,目镜测微尺位于目镜内,为玻璃圆片,上有一条带刻度的直线,精确度较镜台测微尺的低;镜台测微尺是一块载玻片,中央圆形区域内有一带刻度的直线,精确度较目镜测微尺高。

(2)测量:用目镜测微尺的格数度量细胞的大小,目镜测微尺每格代表的实际长度用镜台测微尺来校定。

A 、将镜台测微尺放入载物台上,转动目镜,使二者平行。

选择一处让二者重合,然后向右侧寻找再次重合处,记下二者的数值,并按照目镜测微尺和镜台测微尺的精度关系换算目镜测微尺每小格实际代表的刻度值。

高中生物实验设计题教案

高中生物实验设计题教案

高中生物实验设计题教案
实验目的:通过显微镜观察植物组织的细胞结构,了解植物细胞的特点及组织结构,促进学生对细胞结构的理解和认识。

实验材料:显微镜、盐水、叶片样本(如百合叶片等)。

实验步骤:
1. 将叶片样本浸泡在盐水中,使细胞膜膨胀并变得透明。

2. 将处理后的叶片样本放在显微镜玻片上,加盖玻片。

3. 用显微镜观察叶片样本的细胞结构,包括细胞壁、细胞质、细胞核等。

4. 让学生观察并绘制所见的细胞结构图。

实验要求:
1. 学生需在实验前阅读相关的教材知识,了解植物细胞结构的基本概念。

2. 学生需要按照实验步骤进行操作,注意实验仪器的使用方法。

3. 学生需要认真观察细胞结构,并准确绘制细胞结构图。

4. 学生需注意实验安全,避免损坏实验仪器或叶片样本。

实验总结:
1. 学生在实验中应该对植物细胞的结构有更加深刻的认识,能够观察到细胞的基本组成部分。

2. 学生应该能够准确地描述和绘制出观察到的细胞结构。

3. 通过实验,学生能够培养观察和绘图能力,以及实验操作的技能和安全意识。

拓展实验:
1. 对比观察不同植物组织的细胞结构,比较它们的异同点。

2. 观察不同处理方法下细胞结构的变化,如漂白叶片、加热等处理方法。

3. 了解其他类型的细胞结构,如动物细胞、细菌细胞等,进行对比和分析。

细胞生物学教案

细胞生物学教案

《细胞生物学》教案保定师范专科学校生物系张筱梅目录第1章绪论第2章细胞基本知识第3章细胞生物学研究方法第4章生物膜第5章细胞表面与细胞外基质第6章细胞内膜系统第7章线粒体第8章叶绿体第9章核糖体第10章细胞核与染色体第11章细胞骨架第12章细胞增殖及其调控第13章细胞分化第14章细胞衰老与凋亡第一章绪论教学目的:使学生了解细胞生物学研究的对象,任务及总趋势与主要领域。

了解细胞生物学发展简史。

教学重点:细胞生物学及其研究对象、任务和发展趋势教学方式:讲述、多媒体课件教学过程:§1.1 细胞生物学研究的对象、任务与现状一、细胞生物学研究的对象与任务细胞——是生物形态结构和生命活动的基本单位。

细胞生物学,就是研究细胞生命活动基本规律的科学。

细胞生物学研究的任务是1961年在第一次国际细胞生物学大会上确定的,它的任就是:以动态观点,采用现代科技手段,从三个层次或水平上(细胞水平、亚细胞水平、分子水平——即显微水平、亚显微水平、分子水平)研究细胞的生命活动规律或细胞的整合功能。

细胞生物学研究的主要内容是在不同层次上研究细胞结构与功能、细胞的增殖分化、衰老与凋亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控,细胞起源与进化。

细胞生物学是目前生物科学中发展最快的学科之一。

细胞分子生物学是目前细胞生物学的重点。

细胞工程是21世纪生物工程发展的重要组成部分。

可以预见细胞的结构与基本生命活动的研究将越来越深入,并将成为21世纪初生命科学研究的重要领域之一。

由于分子生物学概念、方法与技术的引入,使细胞生物学取得了突破性的进展,产生了许多新的生长点。

如细胞核、染色体及基因表达的研究,生物膜与细胞器的研究,细胞骨架体系的研究,细胞增殖、分化及其调控细胞的衰老与凋亡、细胞起源与进化等等,这些研究正逐渐形成新的概念与新的领域。

很多学者认为,在21世纪,细胞生物学将继续迅猛发展,并成为生命科学研究的主流。

二、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域从发展趋势看,细胞生物学与分子生物学联系将更加密切,它们相互渗透、相互交融已形成一种新的趋势。

细胞生物学实验

细胞生物学实验

1、渗透压:水从低渗溶液穿过半透膜进入高渗溶液时产生的压力。

溶液促使膜外水分子向内渗透的力量即为渗透压。

以血浆的正常渗透压(7.6个大气压或5776毫米汞柱)为标准,与血浆正常渗透压很相似的溶液成为等渗溶液,高于血浆正常渗透压的溶液成为高渗溶液,低于血浆正常渗透压的溶液则称为低渗溶液。

高渗:体内的渗透压高于体外,水由环境中向体内扩散,体内的盐分向外扩散。

通过排泄作用排出多余的水,盐分通过食物和组织摄入。

低渗:体内的渗透压低于体外,水由体内向环境中扩散,环境中的盐分向内扩散。

水和钠同时缺失,但缺水少于缺钠,血清钠低于正常范围,细胞外液呈低渗状态细胞膜吸收:疏水的小分子或小的不带电电荷的极性分子(简单扩散),水分子(水孔蛋白),各种极性分子和无机离子(协助扩散)细胞膜屏蔽哪些:盐、无机离子、极性大分子。

2、凝集素:一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

血细胞浓度越大,细胞凝集的时间越短,凝集现象也越明显。

3、荧光:某些物质在一定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态,从激发态回到基态时,就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如可见光),这种光就称为荧光。

自发荧光:有些生物体内的物质受激发光照射后可直接发出荧光,称为自发荧光。

如叶绿素的火红色荧光和木质素的黄色荧光等。

次生荧光:有的生物材料本身不发荧光,但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光,这种荧光称为次生荧光,如叶绿体吸附吖啶橙后可发桔红色荧光。

差速离心:利用不同物质沉降速率的差异,在不同离心速度下分离和收集不同颗粒的离心技术。

常用于分离细胞匀浆中的各种细胞器。

差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器。

起始的离心速度较低,让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。

细胞生物学实验手册

细胞生物学实验手册

细胞生物学实验手册授课教师:毛晓霞(一)成绩1、实验占期末总成绩30%,即30分;取七个实验的平均成绩为实验最终成绩2、分组名单:分AB两班,每班5组,每组6人3、请假:辅导员签字的假条+提前一天电话请假(二)实验要点实验一光学显微镜使用及显微摄影技术一、实验目的1、了解光学显微镜结构原理并熟练掌握其操作方法;2、掌握显微摄影技术操作流程3、了解部分细胞生物学中所使用的大型仪器设备的操作流程及用途。

二、实验原理显微镜的放大效能是由其照明系统所使用光的波长和透镜系统的数值孔径决定,缩短使用的光波长或增加数值孔径可以提高分辨率。

可见光的光波振幅较窄,因此使用较短波长的紫外光作为光源系统,可以提高分辨率。

三、实验内容1、双目显微镜的操作规范:2、NIKON80i显微摄影系统的操作流程3、胶片放大洗印技术流程4、部分大型仪器设备介绍荧光显微镜 Fluorescence microscope暗视野显微镜 dark field microscope相差显微镜微分干涉差显微镜倒置显微镜 inverse microscope显微操作仪透射电子显微镜 TEM四、作业1、双目显微镜操作流程规范五、思考题1、暗视野显微镜的定义与应用2、相差显微镜的定义与应用实验二血涂片的制备及细胞大小的测量一、实验目的:1、掌握血涂片的制备技术2、认识血液中红细胞和各类白细胞的形态3、掌握目镜测微尺的使用方法二、实验原理:将血液样品制成单层细胞的涂片标本,经瑞氏-吉姆萨染液染色后,不同白细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。

碱性粒细胞的颗粒呈蓝紫色,酸性粒细胞的颗粒呈7橘红色,中性粒细胞的颗粒呈粉红色。

根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少,再结合细胞的大小及细胞核的形态,就可以将白细胞进行分类计数。

三、实验步骤(一)血涂片的制备1、消毒与取血消毒先按摩取血部位,使血流通畅;再用酒精消毒采血针和取血部位(如指尖). 取血待酒精干后,刺破皮肤,使血自然流出,勿挤.2、推片取一块边缘光滑的载片做推片.将其一端置于血滴前方,向后移动到接触血滴,使血液均匀分散在推片与载片的接触处.然后使推片与载片呈30°~40°角,向另一端平稳地推出 ,迅速在空气中摇,使之自然干燥.3、染色加瑞氏-吉姆萨A染液1-2滴,染色1分钟,再将瑞氏-吉姆萨B染液滴加于A液上面(滴加之量为A液的2-3倍),染色5-10分钟。

细胞原代培养 细胞生物学实验报告

细胞原代培养 细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞原代培养姓名:学号:班级:专业:同组成员:一、实验原理细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。

原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养。

由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。

这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。

同时也为以后传代培养创造条件。

原代培养的方法:1、组织块法在平皿中用弯头剪把组织尽量剪碎,每个组织块小于1mm3大小。

用Hanks 液洗涤2—3次,自然沉淀。

用吸管吸去上清液。

将组织块贴于培养瓶进行培养。

2、酶消化法将1mm3大小的组织块放入1个三角瓶内加入10—30ml的0.125%的胰蛋白酶。

370C磁棒搅拌消化20-30分钟。

然后终止消化。

用几层无菌纱布过滤。

取过滤液,离心800rpm 5—10分钟收集细胞。

弃上清,加入带有双抗的培养基,放入培养瓶培养。

取材注意事项:取材要注意新鲜和保鲜。

取材应严格无菌。

取材和原代细胞制作时,要用锋利的器械,如手术刀或剃须刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损伤。

要仔细去除所取材料上的血液(血块)、脂肪、坏死组织及结缔组织,切碎组织时应避免组织干燥,可在含少量培养液的器皿中进行。

取材应注意组织类型、分化程度、年龄等,一般来讲,胚胎组织较成熟个体组织容易培养,分化低的较分化高的组织容易生长,肿瘤组织较正常组织容易培养。

二、实验目的1、理解细胞原代培养原理2、熟悉细胞原代培养方法与过程3、了解细胞原代培养的应用4、独立进行细胞原代培养操作三、实验材料手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶、试管、移液管、巴斯德吸管、废液缸、75%酒精棉球、酒精灯。

动物:9-12日龄的鸡胚蛋四、实验步骤1、购买9-12日龄鸡胚蛋。

放入孵化箱中孵养待用。

2、取鸡胚蛋一枚放入超净工作台中,用酒精棉球擦拭鸡蛋壳后,气室处擦拭两遍,用镊子小心去除气室部分的蛋壳。

细胞生物学实验

细胞生物学实验

究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。

体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内,染
料的胶粒固定、堆积在细胞内某些持殊结构里,达到易于识
别的目的。体外活染又称超活染色,它是由活的动、植物分
离出部分细胞或组织小块,以染料溶液浸染,染料被选择固
定在活细胞的某种结构上而显色。
Janus green B
电镜下的红细胞
实验原理
▪ 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透 性屏障。它是一种半透膜,可选择性控制物质进出 细胞。水是生物界最普遍的溶剂,水分子可以按照 物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透 压高的一侧扩散,这种现象就是渗透。
▪ 将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到 细胞内,可使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中, 由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶 液,这种现象称为溶血。
4、显微镜观察方法
▪ 标本置于载物台上-----先于低倍镜(10×)观察------高倍镜(40×)------上抬1cm --------加香柏油到标本上------调节镜头(100×), 并使之埋入油中 --------适量调节粗、微调焦螺旋至看清材料--------镜 下观察,并绘图;
▪ 实验结束,上升镜筒-------滴加二甲苯----用擦镜纸 擦拭镜头--------将显微镜恢复原位,放入镜箱
【实验材料】
▪ 1、主要设备:普通离心机、组织捣碎机、扭 力天平、光学显微镜。
▪ 2、小型器材:500m1烧杯2个,250m1量筒1 个,滴管10支,10m1刻度离心管20支,纱布 若干,载玻片和盖片各4片。
▪ 3、 0.35mol/L NaCl溶液。 ▪ 4、 新鲜菠菜。
【操作方法】
▪ A、游离叶绿体的制备与观察

细胞生物学实验--设计性实验方案--二组

细胞生物学实验--设计性实验方案--二组

设计性实验方案课程名称细胞生物学题目名称 DNA的原位显示专业生物科学学号学生姓名指导教师时间邯郸学院生命科学与工程学院说明一、实验设计的目的实验设计是培养学生综合运用所学知识与技能,初步训练学生获得分析和解决实际问题的能力的实践性教学环节之一。

通过实验设计培养学生运用所学知识设计课题的能力,为毕业论文的开展,以及今后从事生产、教学、科研等相关工作打下坚实基础。

二、实验设计的要求1、以小组为单位,提出与专业、课程有关的课程设计题目。

命题要求既有代表性,又有实际意义。

2、设计应包括以下几个部分构成:(1)研究的目的与意义。

应说明此项研究在生产实践上或对某些技术进行改革带来的经济、生态与社会效益。

有的课题过去曾进行过,但缺乏研究,现在可以在理论上做些探讨,说明其对科学发展的意义。

(2)国内外同类研究的概况综述。

在广泛查阅有关文献后,对该类课题研究已取得的成就与尚存在的问题进行简要综述并提出自己对一些问题的看法。

(3)课题研究方案:包括研究内容、研究方法和技术路线。

研究内容要重点突出;研究方法要具有科学性、先进性;技术路线有清晰。

(4)研究的预期结果和创新性。

3、格式要求(1)表格内容,字号用小4号,中文字体用宋体,英文字体、数字用Times New Roman;(2)正文字数1500字以上。

4、内容要求(1)立题依据充分(实验目的明确、意义定位准确,对拟解决的问题有合理预测,对国内外研究现状阐述全面);(2)研究方案(包括实验的技术路线、实验的进程安排、具体操作过程、设立的实验指标和指标的检测手段)可操作性强;(3)实验结果的记录及分析方法可行性强;(4)对实验中可能发生的问题有正确预测并提出相应的解决方法;(5)经费预算合理;(6)附有5篇以上主要参考文献。

三、实验设计题目(自拟)一、选题依据(拟开展研究项目的目的、意义)实验目的1、掌握孚尔根反应和Brachet反应的原理。

2、掌握孚尔根反应和Brachet反应显示细胞内DNA的方法。

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告实验一、二实验名称石蜡包埋切片技术和苏木精-伊红染色1、为什么生物体的组织要经过如此繁琐的步骤才能观察其组织结构?①首先,生物体是一个非常复杂的组合体。

②其次,这个复杂的组合体是比较脆弱的;作为一个生物研究者,想要观察一个生物体的组织,就必须尽量观察其完整形态,步骤繁琐,并不是在浪费时间,而是为了保证看见的是最真实的,最接近想要看到的结果。

态度严谨了,就不觉得繁琐了。

③石蜡包埋是用于样本固定,方便切片。

切片的目的是方便观察,样本如果厚的话,不利于透光,而且组织重叠,是无法有效观察的。

④染色的目的是也是为了更直观的观察,原始样本不染色的话,在显微镜下是近乎透明的,无法区分细胞或细胞器。

2、查阅文献,有哪些文章采用石蜡包埋切片和H.E染色?请列出这些文献(至少10篇)。

(1)王慧丰,徐亦辰,赵文婧,陈维平.微小组织结构石蜡切片的制备[J].临床与实验病理学杂志,2020,36(08):997-998.(2)赵学影,肖慧,胡子豪,陈云帆,王黎源,隋东莉.HE和免疫组化染色观察人体结肠系膜淋巴管构筑[J].赣南医学院学报,2020,40(01):54-57.(3)万慧颖,徐敏燕,李芳华,胥颖,谢震.荧光原位杂交技术快速鉴定石蜡包埋组织中的曲霉菌感染[J].实用医院临床杂志,2020,17(01):43-46.(4)张晓恒,姚佳,秦冬梅.毛菊苣提取物对小鼠肝纤维化的保护作用[J].世界华人消化杂志,2020,28(03):86-91.(5)连国亮,陈东,商建峰,李彦玮,李倩.胸腔积液凝集物在组织脱落细胞学诊断中的应用[J].医学研究杂志,2019,48(05):152-155+161.(6)张彩丽,张俊霞,刘湘花,孙丽敏,李瑞琴.实验动物多脏器组织石蜡切片统一制做流程及影响条件[J].临床与实验病理学杂志,2019,35(01):108-109.(7)张强,解植伟,尹昊锋,王君,马昊,马福顺.A型肉毒毒素对兔脂肪组织影响的实验研究[J].中国美容整形外科杂志,2019,30(08):467-469.(8)焦哲,王鑫坤,霍军,阴正兴,吴凤笋,吴玉臣,康静静.3例犬淋巴瘤和1例猫淋巴瘤的病理组织学诊断[J].动物医学进展,2019,40(11):137-140.(9)罗晓舟,金小千,温小鹏,罗伦,唐纯志.针刺太冲、太溪对自发性高血压大鼠下丘脑病理形态的影响[J].中华中医药学刊,2019,37(04):781-787+1025.(10)尚宏伟,路欣,郭晓霞.褪色胃组织标本再染色后在教学中的应用[J].继续医学教育,2019,33(03):25-26.3、通过你自己所查阅的文献,谈一下石蜡包埋切片和H.E染色的用途。

细胞冻存 细胞生物学实验报告

细胞冻存 细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告细胞冻存姓名:学号:班级:专业:同组成员:一、实验原理在低于-70℃的超低温条件下,由机体内部的生化反应极其缓慢,甚至终止,因此采用适当的方法将生物材料降至超低温条件,即可使生命活动固定在某一阶段而不衰老死亡。

当以适当的方法将冻存的生物体恢复至常温时,其内部的生化反应可恢复正常。

冷冻保存就是将体外培养物悬浮在加有或不加冷冻保存液的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其进行长期保存的过程。

水在低于零度的条件下→结冰→细胞死亡。

如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。

在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。

贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。

目前常用的保护剂为二甲亚砜(DMSO)和甘油,它们对细胞无毒性,分子量小,溶解度大,易穿透细胞。

最适冷冻速度:不同细胞的最适冷冻速度不同。

标准冷冻的开始速度为-1至-2℃/min,当温度低于-25℃时,可加速,到-80℃时可直接加入液氮中(-196℃)。

复苏细胞时则直接将细胞的冻存管放到40℃热水中迅速解冻。

二、实验目的1、掌握无菌操作技术。

2、.掌握细胞冻存的一般方法与步骤。

3、掌握培养细胞的消化方法。

4、了解在倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态和生长状况。

三、实验仪器、材料、试剂及用品1、仪器:超净工作台、CO2培养箱、倒置相差显微镜2、材料:人宫颈癌HeLa 细胞3、试剂:胰酶、DMEM培养基、血清、DMSO、抗生素4、用品:培养瓶,试管,移液管,巴斯德吸管,废液缸,75%酒精棉球,酒精灯四、实验步骤1、穿好实验服,进入无菌室前穿鞋套、洗手。

2、倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。

将培养用液置370C下预热。

3、无菌室及超净台紫外线照射,关闭超净台紫外灯, 打开可见光灯开关,打开抽风机,用75%酒精擦双手消毒,再用酒精棉擦拭桌面。

4、点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。

高中生物教学备课教案细胞生物学实验设计总结

高中生物教学备课教案细胞生物学实验设计总结

高中生物教学备课教案细胞生物学实验设计总结一、实验目的本次实验旨在通过细胞生物学实验,让学生了解细胞的结构和功能,并掌握一些基本的实验技巧和操作方法。

二、实验器材和试剂1. 显微镜2. 盖玻片和载玻片3. 小刀和剪刀4. 移液管和滴管5. 草鱼鳃、洋葱鳞片、人类口腔上皮组织等样本6. 酒精、甲醇、甘油等溶剂7. 甲酸溴蓝和甲醛溶液三、实验步骤1. 准备工作:清理显微镜和玻片,准备好所需材料和试剂。

2. 制备洋葱鳞片:取一个洋葱,削去外皮后,用剪刀剪下一小块中央组织,用刀刮成薄片,加入甲醇溶液中浸泡几分钟。

3. 制备人类口腔上皮组织样本:用棉签轻轻擦拭口腔黏膜,将口腔黏膜涂抹在载玻片上。

4. 制备草鱼鳃样本:取一片鳃,用酒精清洗后,用剪刀剪成细小块,加入甲酸溴蓝溶液中浸泡几分钟。

5. 实验观察:将制备好的样本放在盖玻片下,加入一滴甘油溶液后,覆盖载玻片,放入显微镜下观察细胞结构和形态。

6. 实验记录:通过观察,绘制所见细胞的示意图,并记录细胞的特点、形状以及有无细胞器等信息。

四、实验结果与分析1. 洋葱鳞片:观察到洋葱鳞片上的细胞具有较大的长方形形状,细胞质内含有许多小颗粒状的细胞器,并且细胞壁明显可见。

2. 人类口腔上皮组织:口腔上皮细胞密集排列,形状规则,细胞质内含有较多的细胞器,如线粒体和高尔基体等。

3. 草鱼鳃:观察到鳃细胞的形状呈长方形,细胞内可见许多红色的粒状物质,这是为了适应水生环境而进化出的特殊结构。

根据实验结果,可以总结出以下几点:1. 不同组织和生物的细胞形态和结构存在差异,这是因为它们的功能和环境需求不同而导致的。

2. 细胞是生物体的基本结构和功能单位,细胞内部的细胞器负责不同的生物学功能。

3. 细胞的结构与功能密切相关,不同类型的细胞在形态和功能上呈现出适应其所处环境和生理需要的特点。

五、实验总结与反思通过本次实验,学生对细胞生物学有了初步的了解。

在实验过程中,学生通过仔细观察和记录,提高了实验技能和操作能力。

生物细胞实验教学设计

生物细胞实验教学设计

生物细胞实验教学设计细胞是生物学中的基本单位,对于学习生物学的学生来说,深入了解细胞结构和功能是至关重要的。

通过实验教学的方式,可以帮助学生更好地理解和掌握细胞相关的知识。

本文将为您设计一节具有实践性的生物细胞实验教学活动。

实验目的:通过实验,学生能够掌握细胞的基本结构和功能,并理解细胞是生命的基本单位。

实验材料和器材:1. 高倍显微镜和普通显微镜2. 盖玻片、载玻片和移液管3. 牛肝、洋葱和酵母等生物细胞样本4. 生理盐水和染色剂(如伊红、甲苏红等)实验步骤:1. 准备洋葱样本:a. 取一块新鲜的洋葱,切下相对较小的一块。

b. 将洋葱块放在载玻片上,用刀片切成薄片,并在其上滴几滴生理盐水。

c. 将盖玻片轻轻覆盖在载玻片上,用手指稍微按压一下,将洋葱细胞均匀涂布在载玻片上。

2. 准备牛肝样本:a. 取一小块新鲜的牛肝组织,用刀片切成较薄的片段。

b. 将切好的牛肝片放在载玻片上,并滴上一些生理盐水。

c. 轻轻覆盖盖玻片,并略微按压使细胞均匀分布在载玻片上。

3. 准备酵母样本:a. 取一小勺酵母,将其放入一滴生理盐水中,并用移液管充分搅拌溶解。

b. 将溶解好的酵母液滴在载玻片上,并轻轻覆盖盖玻片。

4. 观察细胞结构:a. 将准备好的洋葱、牛肝和酵母样本依次放置在显微镜下进行观察。

b. 先使用普通显微镜进行初步观察,然后使用高倍显微镜进行更加详细的观察。

c. 观察细胞的外形、大小、核的位置和其他细胞器的分布情况。

5. 染色观察细胞:a. 取一片洋葱样本,滴上一滴伊红染色剂,并静置2-3分钟。

b. 用纸巾轻轻吸干多余的染色剂,然后将盖玻片覆盖在样本上。

c. 使用高倍显微镜观察染色后的细胞结构,比较染色前后的差异。

6. 讨论和总结:a. 由学生自主讨论、总结观察到的洋葱、牛肝和酵母细胞的异同。

b. 引导学生理解细胞是生物体的基本构成单元,不同类型的细胞具有不同的结构和功能。

通过以上实验设计,学生可以亲自操作显微镜和载玻片,观察并比较不同类型的细胞样本。

高中生物细胞实验课程设计与教学方案

高中生物细胞实验课程设计与教学方案

高中生物细胞实验课程设计与教学方案导言:生物是高中阶段的一门重要学科,细胞是生物学研究的基础单位。

为了提高学生对细胞的理解和掌握,本课程设计了一系列生物细胞实验,旨在通过实践活动,使学生对细胞的结构、功能和特性有更深入的认识。

本教学方案将详细介绍实验的内容、安排和教学方法,以帮助教师有效地进行课程设计和教学安排。

实验一:细胞观察和测量实验目的:通过使用光学显微镜观察不同类型的细胞,学生将能够掌握细胞的形态和结构,并通过测量细胞的大小来加深对细胞的了解。

实验步骤:1. 准备细胞样品:将洋葱切片装在注射器中,滴入一些碘液,覆盖载玻片,并使用封口胶固定样品。

2. 使用显微镜:将载玻片放置在显微镜平台上,利用光学显微镜进行观察。

3. 细胞观察与测量:在显微镜下,观察细胞的形态、细胞壁、细胞核等结构,并使用目镜上的标尺对细胞大小进行测量。

实验结果:学生应观察到洋葱细胞的透明质壁、细胞核和细胞质等特征。

通过测量,学生应该能够确定细胞大小的范围。

实验二:细胞膜通透性实验实验目的:通过实验,学生将了解细胞膜对不同物质的通透性,并进一步了解细胞膜结构和功能。

实验步骤:1. 准备试验材料:将鸡蛋壳清洗干净,将醋倒入容器中,将鸡蛋放入容器中浸泡。

2. 观察实验过程:学生应每隔一段时间观察、记录蛋壳的变化情况,特别是蛋壳中的气泡产生情况。

3. 结果分析:学生应该观察到蛋壳表面出现气泡,这表明醋分解了蛋壳中的钙,进而说明鸡蛋的蛋壳对醋有通透性。

实验结果:通过这个实验,学生应该了解到细胞膜是半透性的,可以控制物质的进出。

实验三:细胞分裂观察实验目的:通过观察和记录细胞的分裂过程,学生将加深对细胞分裂的理解。

实验步骤:1. 准备细胞样品:从洋葱根尖中取一小段,放入显微镜载玻片上,滴入少量甘露醇,覆盖载玻片,并加一滴甘露醇增溶。

2. 使用显微镜观察:将载玻片放入显微镜平台上,使用高倍镜观察细胞,并记录不同阶段的细胞分裂情况。

实验结果:学生应观察到洋葱根尖细胞在显微镜下的分裂过程。

细胞生物学实验教程:细胞运动性检测实验详细介绍

细胞生物学实验教程:细胞运动性检测实验详细介绍

一、细胞生物学实验教程:细胞运动性检测实验详细介绍细胞的运动是机体新陈代谢与基本生命特征之一。

在低等生物中,原始细胞通过变形与伪足活动趋近食物与远离伤害。

在高级生物体的生命活动中,细胞的定向迁移与胚胎形成、神经发育、免疫应答、器官成熟等密切有关。

人类的许多重大疾病及其治疗,如肿瘤转移,神经修复、干细胞功能再生等等都与细胞运动息息有关。

细胞的运动依靠于细胞骨架(Cytoskeleton),细胞骨架除了承担胞内的物质运输之外,也是构成细胞运动性的物质基础,比如肌动蛋白是细胞运动伪足中最要紧的结构单位。

当细胞感受到外界的刺激信息(如食物信号等),会伸出扁平的片层伪足,通过其前沿的不断延展与基部的收缩,与细胞与支撑物之间的吸附、解吸附的动态循环,朝向刺激源运动。

细胞的运动还具有粘附性(Adhesion)与趋向性(Polarization)的特点,不一致的粘附因子与细胞外基质(Extracellular Matrix)相互作用一方面决定了细胞运动的分子信号调控,同时与大量的趋化因子共同决定了不一致细胞的特定组织转移与偏好。

图1:细胞的定向迁移运动图2:细胞的运动性与细胞骨架蛋白图3:神经干细胞分化与神经元的定向迁移图4:原生癌细胞的迁移与侵袭图5:一个正在穿孔的肿瘤细胞的运动图6:恶性黑色素瘤细胞侵入机体正常组织图7:上皮细胞在伤口部位增殖,运动迁移,进行组织修复二、细胞运动性常用检测方法细胞运动性研究在发育生物学、神经生物学、癌症与干细胞生物学等诸多前沿科学领域具有重大研究意义。

然而长期以来细胞运动性检测是一个技术难点,目前常规可用于细胞运动性评估的要紧方法有:基于显微镜的形态观察(含荧光标记)、体外组织移植、细胞集落划痕与Boyden Chamber法,这些方法各有千秋,但都无法实现定量检测细胞定向迁移、癌细胞侵袭性与细胞粘附性等,最近罗氏公司推出的基于Boyden Chamber原理的微电子细胞芯片检测技术(xCELLigence)实现了定量、动态、无标记关于大规模细胞迁移、侵袭、粘附性的检测,同时还可同步检测包含细胞增殖、凋亡等多项细胞生理学功能。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

Cu2+对豆芽遗传物质的影响
实验方案:
一、实验原理:环境的三致性,即指环境对生物的致畸、致癌、致突变性,是目前环境污染中最主要的问题。

三致的根本在于致突变,致畸、致癌常常是致突变的结果。

微核是无着丝点的染色体断片,在有丝分裂后期不能向两极移动,所以游离于细胞质中,在间期细胞核形成时,即可在它附近看到一到几个很小的圆形结构,直径大约是细胞直径的1/20-1/5,这就是微核(micronucleus)。

微核是常用的遗传毒理学指标之一,指示染色体或纺锤体的损伤。

由于这种损伤会因细胞受到的外界诱变因子的作用而加剧,而微核产生的数量又可与诱变因子剂量的强弱呈正比。

根据植物E. haichowensis 在低浓度Cu污染的环境下(250µmol/l),Cu似乎对种子萌发有一定的刺激作用,但是当浓度超过750µmol/l时,萌发率就随着Cu浓度的增加而降低了,当浓度增至2000µmol/l时,萌发率则低于40%,与对照相比降低了一半[3]。

设计相应的五个浓度梯度Cu处理,并设计一个用蒸馏水处理的对照实验组。

二、实验材料:
1.器材光学显微镜、500ml烧杯1个、10ml试管12个、试管塞12个、发芽盒6个、洗瓶、镊子、载玻片12个、盖玻片6个、滤纸、培养皿6个、托盘或解剖盘1个。

2.材料豆芽种子
3.试剂
硫酸铜(6mmol/l、3mmol/l、1.5mmol/l、0.75mmol/l、0.375mmol/l)
卡诺氏固定液:由3:1的乙醇和冰醋酸配制;
水解分离液:盐酸与酒精1:1混合;
改良苯酚品红染液
蒸馏水
三、实验步骤:
1、种子处理选取30~50颗饱满的豆芽种子,洗净后在室温下用蒸馏水浸泡发芽24小时,然后移入铺有纱布的托盘内培养。

一天观察一次,当初生根长到2cm时,取发育良好的,大小与根长近似的幼根。

将选好的豆芽分别放入六个发芽盒中,每个发芽盒中放5棵豆芽,使根尖完全浸入处理水样中,室温下培养48小时后,用蒸馏水洗根尖2次,每次2min,把洗净的豆芽放在新铺滤纸的培养皿中,25℃恒温培养使根尖细胞恢复24小时,设蒸馏水处理为空白对照。

2、固定借助于卡诺氏固定液的作用,迅速透入组织和细胞将之杀死,并且使其结构和内含物如:蛋白质,脂肪,糖类以及核物质与细胞器等,在形态结构上尽可能保持生活时的完整和真实状态,同时更易于染色,可以较清楚的显现细胞在生活时不易看清的结构。

固定时在10ml试管内放入卡诺氏固定液约5毫升,用刀片或小剪刀切取经过处理的长约0.5—1厘米的根尖5—10条,放入试管内,用塞盖紧,在室温下固定2—24小时。

3、水解分离水解分离的作用是去除未固定的蛋白质, 同时使胞间层的果胶类物质解体,细胞分散而易于观察。

取处理好的材料,放在试管内加水解分离液2毫升,室温下处理8—20分钟,倒去水解分离液,再加入固定液2毫升,进行软化5min,软化对细胞壁起腐蚀作用。

然后倒去固定液,用蒸馏水反复冲洗使材料呈白色微透明,以镊子柄能轻压碎好。

4、染色压片改良苯酚品红染色法:切取根尖分身组织放在载玻片上纵横切成几段,放在载玻片上,覆以载玻片,用镊子柄或铅笔头轻敲几下,再用拇指用力下压,注意不要使玻片移动,分开两玻片,滴上1—2滴染液,20—30 分钟后加上盖玻片,注意不要有气泡产生,
用吸水纸吸去多余染液。

5、观察每组根尖细胞观察至少100个细胞,记录出现微核的细胞个数,计算微核率。

1 2 3 4 5 6
出现微核细胞数
细胞总数
四.实验结果
1.预计结果用蒸馏水处理的豆芽根尖细胞正常。

用较高浓度硫酸铜处理的出现微核现象,且随着浓度的升高,微核率变高。

结果记录表格:
浓度(mmol/l)蒸馏水 6 3 1.5 0.75 0.375
出现微核数
细胞总数
微核率。

相关文档
最新文档