天津科技大学2014-2015生物化学实验试卷-A
2014年天津科技大学生物化学真题
分析及简答：1、三种氨基酸溶液等电点分别为3.6 5.67.8，倒入PH为4.6的溶液的离子交换柱顶部（1）三种氨基酸带何种电荷（2）该法原理是什么（3）茚三酮跟氨基酸的什么基团反应，生成产物为什么颜色2、何为蛋白质高级结果？维持作用力有什么？维持蛋白质胶体性质的两个因素有什么？简述蛋白质沉淀方法。
3、什么是酶原激活？酶原激活有什么意义？4、氧化磷酸化的概念。
细胞液里的NADH如何进入线粒体，简述两种穿梭机制。
4、DNA 的一条链是-----，（1）以该条链为模板复制的另一条链是什么（2）以第（1）问链为模板复制的mRNA是什么
5、三羧酸循环的意义，糖酵解的意义。
6、何为复制，DNA复制需要的酶及蛋白质因子都有什么，具有什么作用
7、简述柠檬酸发酵机制及操作要点
8、蛋白质进行生物合成，氨基酸的活化过程及活化的重要性
9、什么叫操纵子？简述大肠杆菌乳糖操纵子酶诱导
合成机制
分析计算题1、算酶的总活力和比活力2、酶的底物浓度是米氏常数的四倍，酶反应速度是最大反应速度的多少倍3、油酸，十八碳一烯酸通过什么途径彻底氧化分解，生成二氧化碳和水生成的ATP摩尔数。
生物化学实验报告(实验五)
天津科技大学生物化学实验报告专业：班级：姓名学号组别第组实验项目同组人完成时间年月日【实验名称】《垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质》【实验目的】学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS—PAGE)测定蛋白质的分子量的原理和基本操作技术。
【实验原理】蛋白质的性质：三种物理效应：、、。
1、2、3、成绩：教师签字：批阅日期：聚丙烯酰胺凝胶电泳的四个不连续：、、、。
1、2、3、4、蛋白质的分子量与电泳迁移率之间的关系是：Mr=K(10-b·m)logMr=LogK—b·Rm式中Mr——蛋白质的分子量；logK——截距；b——斜率；Rm——相对迁移率。
实验证明，蛋白质分子量在15,000～200,000的范围内，电泳迁移率与分子量的对数之间呈线性关系。
蛋白质的相对迁移率Rm＝蛋白质样品的迁移距离／染料(溴酚蓝)迁移距离。
这样，在同一电场中进行电泳，把标准蛋白质的相对迁移率与相应的蛋白质分子量对数作图，由未知蛋白的相对迁移率可从标准曲线上求出它的分子量。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定蛋白质的分子量具有简便、快速、重复性好的优点，是目前一般实验室常用的测定蛋白质分子量的方法。
【材料与设备】1.仪器设备DYCZ-24D垂直板电泳槽(北京市六一仪器厂),电泳仪,微量移液器2.材料烧杯(250mL、500mL)、量筒(500mL、250mL)、培养皿3.主要试剂（1）标准蛋白混合液：内含磷酸化酶(Mw94,000)，牛血清蛋白(Mw67,000)，肌动蛋白(Mw43,000)，磷酸酐酶(Mw30,000)和溶菌酶(Mw14,000)（2）30％凝胶贮备液：Acr30g，Bis0.8g,加蒸馏水至100mL（3）分离胶缓冲液(1.5mol／L):Tris18.15g,加水溶解,6mol/L HCl调pH8.9,定容100mL（4）浓缩胶缓冲液(0.5mol／L):Tris6g,加水溶解，6mol/L HCl调pH6.8，并定容到100mL（5）5×电极缓冲液(pH8.3)：SDS lg，Tris6g，Gly28.8g，加水溶解并定容到1000mL。
2014年生化真题
2014年临床医学专业《生物化学》真题
1、操从子
2、糖异生
3、血糖来源与去路
4、受体的作用特点
、原发性肾小球肾炎根据病理分型不包括？
14、I型糖尿病致死的原因？
A 血管病
B 肾病
C 心脏
D 糖尿病酮
15、食管Ca下列说法错误？
A 易发生于上段 B
16、肺Ca易发生于肺尖部的Ca为Ca，压迫颈交感神经易发生。
17、“熊猫眼征”损伤?
A 眼眶
B 眶周
C 颅前窝
18、男，32岁，4小时前腹痛、压痛、反跳痛后转移至右下腹固定压痛点
①诊断为何病
②给予手术治疗、并发症
19、哪种抗结核药在酸性环境下效果良好？
A 利福平
B 吡咯
C 链霉素
20、夏柯氏三联征、、。
二、解答
1、受体的作用和特点
2、血糖的来源和去路。
生物化学实验习题及参考答案完整版
生物化学实验习题及参考答案HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】生物化学实验习题及解答一、名词解释1、pI；2、层析；3、透析；4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳；5、蛋白质变性；6、复性；7、Tm 值；8、同工酶；9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应二、基础理论单项选择题1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（）A、双缩脲反应B、凯氏定氮C、紫外吸收D、羧肽酶法2、下列哪组反应是错误的（）A、葡萄糖——Molish反应B、胆固醇——Libermann-Burchard反应C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应D、氨基酸——茚三酮反应3、Sanger试剂是（）A、苯异硫氰酸B、2，4-二硝基氟苯C、丹磺酰氯D、-巯基乙醇4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（）A、215nmB、260nmC、280nmD、340nm5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（）A、色氨酸的吲哚基B、酪氨酸的酚环C、苯丙氨酸的苯环D、半胱氨酸的硫原子6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同B、分子大小不同C、分子极性不同D、溶解度不同7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。
硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（）A、茚三酮试剂B、奈氏试剂C、双缩脲试剂D、Folin-酚试剂8、蛋白质变性是由于（）A、一级结构改变B、亚基解聚C、空间构象破坏D、辅基脱落9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（）A、胶体性B、粘性C、变性作用D、沉淀作用10、有关变性的错误描述为（）A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变B、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变C、加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀11、双链DNA热变性后（）A、黏度下降B、沉降系数下降C、浮力密度下降D、紫外吸收下降12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上（）A、天冬氨酸B、脯氨酸C、赖氨酸D、丝氨酸13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体（）A、His的咪唑基B、Arg的胍基C、Cys的巯基D、Trp的吲哚基三、填空1、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产生（）色的物质。
天津科技大学微生物和分子生物学
天津科技大学二零零五年攻读硕士学位研究生入学考试试题考试科目：微生物学一、名词解释（每题2分，共20分）1.L-型细菌2.烈性噬菌体3.光能自养型微生物4.无氧呼吸5.光复活作用6.原养型7.性导8.溶原转变9.外毒素10.Ames test二、填空（每空1分，50个空，共50分）1.在微生物学发展史上，微生物学和细菌学的奠基人分别是_____和_____。
2.微生物根据其结构和组成的区别，可将其分为______、______和______三大类。
3.革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖是由______、______和______组成。
4.决定革兰氏染色的关键成分是______与______，革兰氏染色的关键步骤是______。
5.细菌的特殊结构包括______、______、______和菌毛等。
6.观察细菌动力最常用的方法是______。
7.分离纯化的常用方法有______、______和______。
8.链霉菌的菌丝分为______、______和______。
9.根据生长因子的化学结构和它们在机体中生理功能的不同，可将生长因子分为______、______和______三大类。
10.营养物质进入细胞的方式有四种，即单纯扩散、促进扩散、______和______。
11.两类不同原理的连续培养装置包括______和______。
12.EMB培养基是一种鉴别性培养基，大肠杆菌由于能够发酵______产酸，因此菌落呈______色，而沙门氏菌和志贺氏菌的菌落为______色。
13.防腐的措施很多，主要有______、______、______、高渗、高酸度和添加防腐剂。
14.按照突变对遗传物质的影响程度，可将突变分为______和______两大类。
15.真核微生物基因重组的主要方式有______、______、原生质体融合和转化等。
16.我国CCCCM（China Committee for Culture Collection of Microorganisms）采用3中保藏法，即斜面传代法、______、______保藏菌种。
2015年天津大学生物化学基础考研真题,考研重点,真题解析,考研心态
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生物化学基础一、考试的总体要求生物化学研究生入学考试是为招收与生物化学有关专业硕士研究生而实施的具有选拔功能的水平考试。
要求考生全面地掌握生物化学的基本概念、基本理论和基本实验方法；并具备运用其基本理论和具体分析方法以解决科学研究中具体问题，能综合运用所学的知识分析问题和解决问题。
要求试卷书写清楚、专业术语运用准确，答题完整。
二、考试的内容1.蛋白质化学：蛋白质的化学组成，氨基酸的理化性质及化学反应蛋白质分子的结构（一级、二级、高级结构的概念及形式）,掌握蛋白质一级结构的测定的一般步骤和方法,了解氨基酸、肽的分类,理解氨基酸的通式与结构蛋白质的理化性质及分离纯化和纯度鉴定的方法,掌握氨基酸与蛋白质的物理性质和化学性质,蛋白质的变性作用,蛋白质结构与功能的关系理解蛋白质二级和三级结构的类型及特点，四级结构的概念及亚基.掌握肽键的特点,掌握蛋白质的变性作用,掌握蛋白质结构与功能的关系2..核酸化学：核酸的基本化学组成及分类,全面了解核酸的组成、结构、结构单位以及掌握核酸的性质核苷酸的结构,全面了解核苷酸组成、结构、结构单位以及掌握核苷酸的性质DNA 和RNA 一级结构的概念和二级结构特点；DNA 的三级结构RNA 的分类及各类RNA 的生物学功能,掌握DNA 的二级结构模型和核酸杂交技术核酸的主要理化特性核酸的研究方法3..糖类结构与功能糖的主要分类及其各自的代表,掌握糖的概念及其分类糖聚合物及其代表和它们的生物学功能,掌握糖类的元素组成、化学本质及生物学功用,理解旋光异构糖链和糖蛋白的生物活性,掌握糖的鉴定原理掌握单糖、二糖、寡糖和多糖的结构和性质4.脂质与生物膜生物体内脂质的分类，其代表脂及各自特点甘油脂、磷脂以及脂肪酸特性。
[考研类试卷]2014年研究生入学考试(生物化学)真题试卷.doc
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[考研类试卷]2014年研究生入学考试（生物化学）真题试卷一、单项选择题下列各题的备选答案中，只有一个是符合题意的。
1 下列科学家中，对揭示蛋白质α-螺旋结构做出显著贡献的是( )。
（A）D．E．Atkinson（B）J．B．Sumner（C）H．A．Krebs（D）L．C．Pauling2 在下列构成蛋白质分子的氨基酸残基中，能够被磷酸化的是( )。
（A）缬氨酸残基（B）丝氨酸残基（C）丙氨酸残基（D）亮氨酸残基3 在一个米氏酶催化的单底物反应中，当[S]远小于K m时，该反应的特点之一是( )。
（A）反应速度最大（B）反应速度与底物浓度成正比（C）反应速度达到最大反应速度的一半（D）反应速度与底物浓度成反比4 下列辅助因子中，既能转移酰基，又能转移氢的是( )。
（A）NAD+（B）NADP+（C）硫辛酸（D）四氢叶酸5 下列维生素中，属于酰基载体蛋白组成成分的是( )。
（A）核黄素（B）叶酸（C）泛酸（D）钴胺素6 tRNA结构中，携带氨基酸的部位是( )。
（A）DHU环（B）3'末端CCA-OH（C）TψC环（D）反密码子环7 下列酶中，能催化葡萄糖转变为6-磷酸葡萄糖的是( )。
（A）丙酮酸激酶（B）果糖磷酸激酶（C）葡萄糖磷酸酯酶（D）己糖激酶8 将乙酰CoA从线粒体转运至胞浆的途径是( )。
（A）三羧酸循环（B）磷酸甘油穿梭（C）苹果酸穿梭（D）柠檬酸穿梭9 下列反应过程中，发生氧化脱羧的是( )。
（A）乳酸→丙酮酸（B）α-酮戊二酸→琥珀酰CoA（C）丙酮酸→草酰乙酸（D）苹果酸→草酰乙酸10 下列三羧循环的酶中，以草酰乙酸为底物的是( )。
（A）柠檬酸合酶（B）琥珀酸脱氢酶（C）异柠檬酸脱氢酶（D）顺乌头酸酶11 软脂酸β-氧化分解途径中，丁酰辅酶A脱氢酶存在的部位是( )。
（A）线粒体的外膜上（B）线粒体的内膜上（C）胞浆中（D）线粒体的基质中12 下列化合物中，直接参与丁酰ACP合成己酰ACP过程的是( )。
15年生化真题
08年天津医科大学生化
一。名词解释
1，consensus sequence
2, apolipoprotein
3, palindrome
4, operon
5, allosteric regulation
6,无义突变
7，乳酸循环
8，超氧化物歧化酶
9，密码子简并行
10，支链氨基酸
二、简答题
1.何谓启动子，原核生物启动子的结构特点及作用是什么？（5分）
2.什么叫酶的别构调节？举两例说明别构调节的作用原理。（5分）
3.比较大肠杆菌DNA复制与RNA合成过程的异同点。（5分）
4.试述葡萄糖-6-磷酸在代谢中的重要性。（5分）
5.写出下列符号的中文名称及作用：（10分）
⑴HMGCoA ⑵UDPG ⑶VLDL ⑷cAMP ⑸GSH
天津医科大学2001年生物化学（基础）（硕士）
一、名词解释：（30分）
1.Tm值2.联合脱氨基作用3.限制性内切核酸酶4.胆色素5.终止子
6.Protein denaturation 7.bioloical oxidtion 8.glutathine 9.point mutation
10.ketone bodies
二、简答题
1 5，核苷酸酶可催化AMP生成腺苷，但是由于生成的腺苷在组织液中其他酶作用下继续分解，试问通过那些方法可以反映5，核苷酸酶的活性
2脂肪动员以满足机体能量代谢的需求，请说明甘油三酯与能量代谢之间的联系
3写出下列物质生成的简要路线（可用文字表示，不写出酶的名称）
（1）UTP—dTTP（2）乙酰辅酶A—酮体（3）乳酸—磷酸烯醇式丙酮酸
天津医科大学2005年2非竞争性抑制3混合功能8乳酸循环9呼吸链10激素反应原件11conformation 12 lagging strand 13 degeneracy 14 oncogene 15 key enzyme 16 receptor 17 salvage pathway 18 gene coloning 19 synthase 20 β-oxidation
2015考研天津科技大学338生物化学考研真题解析参考书
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2015考研天津科技大学338生物化学考研真题解析参考书338生物化学（仅限报考生物工程专业学生参考）基础：一、了解生物化学的研究内容和根本任务及其方法。
二、了解生物化学发展史、主要代表人物的贡献和我国取得的代表性成就。
2/14【育明教育】中国考研考博专业课辅导第一品牌官方网站： 2要求内容：一、蛋白质的概念、组成特点；氨基酸的定义与分类、必需氨基酸定义与种类；20种编码氨基酸的分子结构式、组成分类特点、三字母缩写；氨基酸的两性解离和等电点及其应用；氨基酸分离方法及其原理；氨基酸常用检测方法与原理；蛋白质的一级结构与空间各级结构定义、类型、特点、维持的化学键；蛋白质的变性与沉淀关系；蛋白质分离纯化方法及其原理；蛋白质含量测定方法及其原理；蛋白质结构与功能的关系。
二、生物催化剂酶的定义、化学本质；酶与一般催化剂的共性及其作为生物催化剂的特性；酶蛋白与辅助因子定义与功能；活性中心与必需集团；酶具有高催化效率的因素；酶的催化作用机理；影响酶活性的因素及其作用机理；酶促反应动力学；米氏方程及其应用；可逆抑制与不可逆抑制特点与类型判断；酶活力与比活力的概念和计算。
三、辅酶与维生素的关系及其在代谢中的功能。
四、生物氧化、无氧氧化和有氧氧化、高能键概念；高能磷酸化合物概念与种类；氧化磷酸化偶联学说；呼吸链种类与P/O 比关系；底物水平磷酸化概念，氧化磷酸化的抑制剂和电子传递抑制剂。
天津科技大学20100624-生物化学实验试卷--答案
2. 你实验所使用过的垂直板聚丙稀酰胺凝胶电泳系统具有四个不连续性，是哪四个？请说明这四个不连续性如何形成了浓缩效应？（20分）四个不连续性指：缓冲液离子成分不连续缓冲液pH值不连续电位梯度不连续凝胶层不连续缓冲液成分的不连续性和pH值的不连续性：电极缓冲液为pH8.3的Tris-Gly，可解离出的带有负电荷的是Gly－；浓缩胶的凝胶缓冲液为pH6.7的Tris-HCl，带有负电荷的是Cl－。
电泳开始后，来自于电极缓冲液的甘氨酸进入浓缩胶，由于Gly的等电点为6.0而浓缩胶的pH为6.7接近与该等点点，所以甘氨酸在进入浓缩胶后的解离程度变小，带有的负电荷少，泳动率低，成为慢离子；氯离子解离程度最大，泳动率最快，成为快离子；蛋白质为中速离子。
电位梯度不连续：电泳开始后，由于快离子泳动率最大，在快离子后面形成一个离子浓度低的低电导区，产生较高的电位梯度，使蛋白质样品被进一步浓缩，蛋白质和慢离子加速移动。
凝胶层不连续：蛋白样品进入浓缩胶时有一个堆积浓缩效应，从浓缩胶进入分离胶时再有一个堆积浓缩效应。
4. 请从紫外分光光度法、考马斯亮蓝法、双缩脲法、福林-酚法、凯氏定氮法等五种蛋白质测定方法中任选两种，说明其实验原理。
（20分）紫外分光光度法：蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值，在一定的范围内，蛋白质溶液的吸光值与其浓度成正比，可作定量测定。
考马斯亮蓝法：考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。
考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色，当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色，前者最大光吸收在465nm，后者在595nm。
在一定蛋白质浓度范围内（0～100μg/ml），蛋白质－色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质含量成正比。
故可用于蛋白质的定量测定。
双缩脲法：具有两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应，蛋白质在碱性溶液中能与Cu２＋络合呈紫红色，颜色深浅与蛋白质浓度成正比，故可用比色法进行测定，根据标准曲线进行计算可以确定蛋白质浓度。
2014高考试题天津卷理科综合(化学、生物部分)答案解析
2014年普通高等学校招生全国统一考试（天津卷）理科综合能力测试化学部分第I卷1．化学与生产、生活息息相关，下列叙述错误的是A．铁表而镀锌可以增强其抗腐蚀性B．用聚乙烯塑料代替聚乳酸塑料可减少白色污染C．大量燃烧化石燃料是造成雾霾天气的一种重要因素D．含再金属离子的电镀废液不能随意排放2．实验室制备下列气体时，所用方法正确的是A．制氧气时，用Na2O2或H2O2作反应物可选择相同的气体发生装置B．制氯气时，用饱和NaHCO3溶液和浓硫酸净化气体C．制乙烯时，用排水法或向上排空气法收集气体D．制二氧化氮时，用水或NaOH溶液吸收尾气3．运用相关化学知识进行判断，下列结论错误的是A．某吸热反应能自发进行，因此该反应是熵增反应B．NH4F水溶液中含有HF，因此NH4F溶液不能存放于玻璃试剂瓶中C．可燃冰主要甲烷与水在低温高压下形成的水合物晶体，因此可存在于海底D．增大反应物浓度可加快反应速率，因此用浓硫酸与铁反应能增大生成H2的速率4．对右图两种化合物的结构或性质描述正确的是A．不是同分异构体B．分子中共平面的碳原了数相同C．均能与溴水反应D．可用红外光谱区分，但不能用核磁共振氢谱区分5．下列有关电解质溶液中粒子浓度关系正确的是A．pH=1的NaHSO4溶液：c(H+)=c(SO42-)十c(OH-)B．含有AgCl和AgI固体的悬浊液：c(Ag+)>c(C1-)=c(I-)C．CO2的水溶液：c(H+)>c(HCO3-)=2c(CO32-)D．含等物质的量的NaHC2O4和Na2C2O4的溶液：3c(Na+)=2[c(HC2O4-)+ c(C2O42-)+c(H2C2O4)]6．已知：锂离子电池的总反应为：Li x C+Li1-x CoO2放电充电C+LiCoO2锂硫电池的总反应为：2Li+S 放电充电Li2S有关上述两种电池说法正确的是A．锂离子电池放电时，Li+向负极迁移B．锂硫电池充电时，锂电极发生还原反应C．理论上两种电池的比能量相同D．右图表示用锂离子电池给锂硫电池充电【答案】B第II卷7．（14分）元素单质及其化合物有广泛用途，请根据周期表中第三周期元素相关知识回答下列问题：（1）按原子序数递增的顺序（稀有气体除外），以下说法正确的是。
生物化学实验报告(实验四)
天津科技大学生物化学实验报告
专业：班级：
姓名学号组别第组
实验项目同组人
完成
时间
年月日
【实验名称】
《碱性蛋白酶活力的测定（福林-酚试剂法）》
【实验目的】
1、学习测定蛋白酶活力的方法。
2、学习并掌握标准曲线的绘制方法。
【实验原理】
常见酶活性酶活力测定的方法有终点法和动力学方法两类。
本实验使用终点法简便易行，是很多植物酶活力测定的常用方法。
福林—酚试剂是磷钼酸盐与磷钨酸盐的混合物。
它在碱性条件下不稳定，能被酪氨酸中的酚基还原，生成钼蓝、钨蓝的混合物。
酪蛋白在蛋白酶作用后产生的酪氨酸可与福林—酚试剂反应，所生成的蓝色化合物可用比色法测定。
【材料与设备】
1、仪器设备
分光光度计,恒温水浴锅,冷凝器
2、材料
市售的碱性蛋白酶制剂
3、主要试剂
（1）0.4mo/L碳酸钠
（2）4mo1/L三氯醋酸
（3）2%酪蛋白：2.0g加40mL水，另加5滴浓氨水，沸水浴溶解。
（4）福林—酚试剂
成绩：教师签字：批阅日期：
DL-酪氨酸标准曲线示意图：酶活力计算：
【注意事项】
1、注意水浴时试管内溶液易倾洒
2、比色时做好空白对照
【思考题】
1、0.4mol/L碳酸钠和0.4mol/L三氯醋酸溶液的作用是什么?
2、为什么要把反应条件控制在pH值为11和温度为40℃?
3、稀释的酶溶液是否可以长期使用?为什么?。
天津科技大学2014-2015生物化学实验试卷-A
1、填空题（共20分，每空1分）1. 按层析原理分类，纸层析是属于（ ）层析，纸层析的支持物为（ ），固定相是（ ）。
2. 蛋白质含量测定的常用方法有（ ）、（ ）、（）、（ ）和紫外分光光度法。
3. 凝胶电泳的一般操作步骤：制胶，加入电泳缓冲液，（ ），电泳，（ ），（ ），脱色。
4. 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有浓缩效应、（ ）效应和（ ）效应。
5. 通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（ ）、（ ）、（ ）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力，使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值，在一定范围内，蛋白质溶液的吸光度值与其浓度成正比。
6. 在糖酵解中间产物的鉴定实验中，利用（ ）对糖酵解过程中3-磷酸苷油醛脱氢酶的抑制作用，使3-磷酸苷油醛不再向前变化而积累。
（ ）作为稳定剂，用来保护3-磷酸苷油醛是不自发分解。
然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性条件下形成（ ）的棕色复合物，其棕色程度与2-磷酸苷油醛含量成正比。
7. 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（ ）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产生（ ）色的物质。
2、简答题（共7题，共80分）1. （10分）实验室测得某物质标准溶液系列浓度0、0.2、0.4、0.6、0.8g/L的吸光度依次为0、0.15、0.35、0.45、0.6，样品稀释100倍后的吸光度为0.5，求样品的浓度是多少？2. （10分）如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？3. （10分）为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？4. （10分）考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质含量的原理是什么？5. （10分） 简述福林—酚试剂法测定碱性蛋白酶活力的原理。
6、（15分）在糖酵解中间产物鉴定实验中，各管内颜色有何不同？哪一管最后生成的颜色最深？为什么？如果2号、3号试管颜色差别不明显？试分析其原因。
2015年天津科技大学071010生物化学与分子生物学考研参考书专业课考研真题考录比复试线
育明教育中国考研专业课辅导第一品牌育明教育官方网站： 1育明教育天津分校2015年天津地区15所高校考研辅导必备天津分校地址南京路新天地大厦2007专注考研专业课辅导8年天津地区专业课辅导第一品牌天津分校赵老师与大家分享资料育明教育，创始于2006年，由北京大学、中国人民大学、中央财经大学、北京外国语大学的教授投资创办，并有北京大学、武汉大学、中国人民大学、北京师范大学复旦大学、中央财经大学、等知名高校的博士和硕士加盟，是一个最具权威的全国范围内的考研考博辅导机构。
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育明教育中国考研专业课辅导第一品牌育明教育官方网站： 22015年天津科技大学071010生物化学与分子生物学考研参考书专业课考研真题考录比复试线考研政治每年平均分在4，50分，不是很高，政治取得高分除了靠记忆力还要有一定的技巧，今天我就考研政治中的一些答题技巧，来和同学们分享一下。
选择题分值为50分。
其中单选题16道，满分16分;多选题17道，满分34分。
选择题由于考查范围广，涉及的知识点零散，这种题型很需要考生对教材和大纲有系统而熟练的掌握。
选择题中，多选题的难度较大，它是拉开政治分数的一个题型之一。
071010生物化学与分子生物学学院、学科、专业名称（代码）及研究方向导师考试科目同等学力加试复试笔试内容1.食品生化与分子生物学王艳萍教授华泽田研究员杜欣军副教授刘常金副教授白小佳副教授朱振元副教授郭红莲副教授阎瑞香副研究员①101统考政治②201英语一③302数学二或601自命题数学或612分子生物学④804微生物学或805生物化学食品化学及④中未选考的一门专业课专业综合含：食品化学、生物化学等2.酶的结构、功能与制备王志伟副研究员王稳航副教授3.功能因子调控与抗肿瘤机制刘安军教授罗成教授曹东旭副教授胡祥正副教授育明教育中国考研专业课辅导第一品牌育明教育官方网站： 3单项选择题政治单选是属于必得的高分题型。
天津科技大学生化实验思考题参考答案
实验原理见讲义思考题（只是给出了简单答案）：1、大孔吸附树脂法分离纯化果蔬花青素1.1一般提取率随提取温度的升高而提高，但是温度提高色素受到的破坏也增加。
1.2 因为色素易溶于水和在酸性条件下稳定。
1.3 防止色素被空气氧化，影响测定结果。
2、植物组织中DNA和RNA的提取和鉴定2.1 因为在核酸提取分离过程中是使用浓的高氯酸来提取RNA，而小分子物质一般多是酸溶性的，所以要在分离核酸时用冰冷的稀三氯乙酸或高氯酸溶液将小分子物质去掉。
此外，核酸中如果混有小分子或者脂类物质或者其他杂质都是有可能对后续步骤产生影响，比如说使限制酶失活或者改变特异性，所以还要在分离核酸时用有机溶剂如丙酮、乙醇去除脂溶性的磷脂类物质。
2.2 不能2.3苔黑酚法可快速鉴别RNA，二苯胺法可快速鉴定DNA。
3、碱性蛋白酶活力的测定3.1 碳酸钠作用是使反应体系为碱性。
三氯醋酸的作用是使反应体系为酸性。
3.2在碱性条件下福林－酚试剂不稳定，能被酪氨酸中的酚基还原，生成钼蓝、钨蓝的混合物，所生成的蓝色化合物才可以用比色法测定。
40℃则是加速反应的进行。
3.3 不能，酶是蛋白质，放置久了会发生降解导致变质。
4、垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质4.1 凝胶系统的不连续性，即上层胶的孔径大，下层胶的孔径小；缓冲体系的不连续性，即上层胶pH为6.7-6.8，下层胶pH为8.9。
4.2 浓缩效应，分子筛效应，电荷效应，怎样造成的答案详见讲义。
4.3可以，缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。
电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应，负极发生的是还原反应，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。
但电泳结束后，将上下槽缓冲液混合在一起后只要具有缓冲能力就可以再次使用。
4.4 主要目的是增加溶液的粘稠度，加样的时候更加容易操作。
4.5 30%丙烯酰胺贮液配制时要注意：将丙烯酰胺和N,N’-亚甲双丙烯酰胺要溶于热水中，并验证其pH值不大于7.0。
生物化学实验报告32学时(实验七)
天津科技大学生物化学实验报告专业：班级：姓名学号组别第组实验项目设计型同组人完成时间年月日【实验名称】《蛋白质的制备及其含量测定》【实验目的】通过学习的生物化学知识和实验技术，学会自行设计一种含蛋白质的样品处理方法、蛋白质制备方法和测定方法。
【蛋白质的制备】一、所选原料名称：查阅相关文献资料可知，该原料总蛋白含量大约为，主要蛋白质种类为等。
二、制备方法：选择此制备方法的依据（原理）：三、实验器材成绩：教师签字：批阅日期：四、实验试剂（含配制方法）五、实验步骤六、制备结果准确称重，计算蛋白质含量，并和理论含量相比较，求出实际产率。
【蛋白质的含量测定】一、测定方法：选择此制备方法的依据（原理）：二、实验器材三、实验试剂（含配制方法）四、实验步骤1、样品液的制备2、标准曲线制作（绘制试剂添加表）3、待测样品的测定三组平行样品OD值分别为：、、，平均值为。
五、结果处理1、以为横坐标，为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。
2、取未知样品吸光度平均值在标准曲线上查出相应的标准蛋白浓度。
（绘制标准曲线）3、计算所提取生物材料中蛋白质的含量。
蛋白质含量（mg/g）=m0×1.0×V× × 香香香式中m0---由标准曲线查得蛋白质的质量，μg；1.0---吸取未知样品体积，mL；V---未知样品总体积，mL；m---称取未知样品质量，g；1000---μg换算成mg的系数。
【思考题】1、查阅相关资料，制备生物材料中蛋白质的方法有哪些？原理分别是什么？2、查阅相关资料，生物材料中蛋白质含量测定的方法有哪些？原理分别是什么？。
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一、填空题（共20分，每空1分）
1. 按层析原理分类，纸层析是属于（）层析，纸层析的支持物为（），
固定相是（）。
2. 蛋白质含量测定的常用方法有（）、（）、（）、（）
和紫外分光光度法。
3. 凝胶电泳的一般操作步骤：制胶，加入电泳缓冲液，（），电泳，（），
（），脱色。
4. 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有浓缩效应、（）效应和（）效应。
5. 通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的
（）、（）、（）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力，使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值，在一定范围内，蛋白质溶液的吸光度值与其浓度成正比。
6. 在糖酵解中间产物的鉴定实验中，利用（）对糖酵解过程中3-磷酸苷油醛
脱氢酶的抑制作用，使3-磷酸苷油醛不再向前变化而积累。
（）作为稳定剂，用来保护3-磷酸苷油醛是不自发分解。
然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性条件下形成（）的棕色复合物，其棕色程度与2-磷酸苷油醛含量成正比。
7. 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（）色物质，而其他氨基酸与茚三酮
产生（）色的物质。
二、简答题（共7题，共80分）
1. （10分）实验室测得某物质标准溶液系列浓度0、0.2、0.4、0.6、0.8g/L的吸光度依次为0、0.15、0.35、0.45、0.6，样品稀释100倍后的吸光度为0.5，求样品的浓度是多少？
2. （10分）如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？
3. （10分）为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？
4. （10分）考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质含量的原理是什么？
5. （10分）简述福林—酚试剂法测定碱性蛋白酶活力的原理。
6、（15分）在糖酵解中间产物鉴定实验中，各管内颜色有何不同？哪一管最后生成的颜色最深？为什么？如果2号、3号试管颜色差别不明显？试分析其原因。
7. （15分）简述离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质? 如果选用阴离子交换树脂，并将实验所用缓冲液的pH值选择为6.5，分析在此条件下天冬氨酸和赖氨酸的分离结果？（天冬氨酸的等电点为2.77，赖氨酸的等电点为9.74）。