(全国通用)2019年高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(一).doc
高中生物高频考点及答案37 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题
考点规范练37基因工程及生物技术的安全性与伦理问题一、选择题1.已知限制性内切核酸酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、Eco R Ⅰ(G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓GATC)。
若要利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA(图丙),下列分析合理的是()A.用Eco RⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和Eco RⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用Eco RⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体2.(不定项选择题)为使玉米获得抗除草剂性状,需进行下图所示的操作。
报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色。
转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化的愈伤组织也可能在选择培养基上生长。
下列叙述正确的是()A.筛选1需要用含抗生素的培养基筛选出成功导入基因表达载体的农杆菌B.筛选2需要用无色物质K处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织C.报告基因在玉米的愈伤组织和农杆菌细胞中均能正确表达D.诱导幼胚脱分化形成愈伤组织的培养基中需添加植物激素二、非选择题3.利用农杆菌转化法可培育转基因植物,请据此回答下列问题。
(1)培育转基因植物过程的核心步骤是,其目的是使目的基因在受体细胞中,并且遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)构建基因表达载体时,可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的键。
基因表达载体的组成部分包括启动子、终止子、目的基因、、复制原点等。
(3)组成基因表达载体的单位是。
基因表达载体中的启动子是识别和结合的部位,这种结合完成后才能驱动目的基因通过(填过程)合成mRNA。
(4)用两种限制酶XbaⅠ和SacⅠ(两种酶切出的黏性末端不同)切割某DNA,获得含目的基因的片段。
若利用该片段构建基因表达载体,应选用的Ti质粒是下图中的。
注图中箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位点。
4.下图为DNA的粗提取与鉴定实验的相关操作。
2019年高考生物考前回归课本—— 基因工程
牢记限制酶的作用结理解黏性末端和平理解并牢记作为运载体必须具备的四个条特别加强对载体具有的自我复制或能把目的基因转移体标记基因一般是抗生素的抗性基因。
当含有抗生素抗性基因的载体进入受体细胞并表达后，使受体细胞能够在含有该抗生素的培养基上生活而被筛选出来，而没有导入的则死亡。
理解并记住构建基因表达记住基因在体外构建且需限制酶和DNA聚合酶/掌握显微注射法的操受体细胞的选显微注射法的操作将含有目的基因的表达载体提纯，使DNA浓度保持在1~3ug/mL/早期胚胎培养和胚附表1：与DNA相关的五种酶的比较附表2：基因组文库与cDNA文库的比较附表3：蛋白质工程与基因工程的比较二、考向诊断1．有关工具酶的判断(1)限制酶只能用于切割目的基因()(2)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列()(3)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来()(4)E·coli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端()(5)限制酶也可以识别和切割RNA()(6)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶()2．有关载体的判断(1)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因()(2)每个质粒DNA分子上至少含一个限制酶识别位点()(3)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体()(4)载体的作用是将携带的目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达()(5)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制()3．有关基因工程原理与操作的判断(1)设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列()(2)用PCR技术扩增目的基因时不必知道基因的全部序列()(3)为培育抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体()(4)抗虫基因即使成功地插入植物细胞染色体上也未必能正常表达()(5)检测目的基因是否成功表达可用抗原—抗体杂交技术()(6)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其是否完全表达()4．有关基因工程的应用及蛋白质工程的判断(1)将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株()(2)利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中()(3)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用()(4)蛋白质工程的目的是改造或合成人类需要的蛋白质()(5)蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构()参考答案：1、（1）×.（2）×.（3）×.（4）×.（5）×（6）×。
备战2019年高考生物 考点一遍过 考点87 生物技术的安全性和伦理问题(含解析)
考点87 生物技术的安全性和伦理问题1．转基因生物的安全性生物反应器——生产细胞产品（1）转基因成果转基因抗性农作物（2）对安全性问题的争论①转基因生物与食物安全a．反对“实质性等同”。
b．担心出现滞后效应。
c．担心出现新的过敏原。
d．担心营养成分改变。
e．侵犯宗教信仰者或素食者的权益。
②转基因生物与生物安全a．可能扩散到新的生态区域，破坏生态平衡。
b．成为“入侵的外来物种”，威胁其他生物的生存。
c．可能与某些细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体。
d．可能通过花粉传播进入杂草，形成“超级杂草”。
③转基因生物与环境安全：转基因生物可能会对生态系统的稳定性和人类生活环境造成破坏。
（3）理性看待转基因技术①正视转基因技术可能带来的安全性问题，要趋利避害，不能因噎废食。
②制定政策和法规，最大程度保证转基因技术和产品的安全性。
2．关注生物技术的伦理问题3（1）生物武器的种类(连线)（2）我国政府观点：在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。
考向一生物技术的安全性1．转基因生物的安全性引起人们争论的技术原因是①转移基因的功能往往未知②转移基因的结构往往未知③外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的④外源基因往往是异种生物的基因A．①② B．②③C．③④ D．①③【参考答案】C解题技巧1．转基因生物存在安全性问题的原因（1）目前对基因的结构、调控机制及基因间的相互作用了解有限。
（2）目的基因往往是异种生物的基因。
（3）外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的。
（4）转基因生物具有较强的生长优势，其他物种竞争力弱而大量死亡，引起生态危机。
2．安全性常见误区（1）引入外来物种≠增加生物多样性：如果引进的生物会破坏环境或者对当地生物的生存造成影响，可能会造成生物多样性的锐减。
（2）转基因生物具有危害≠阻止技术的发展：应用正确态度对待转基因技术，不能因为可能的危害而阻止技术的发展。
高三生物一轮复习知识清单第4章生物技术的安全性与伦理问题
第1节转基因产品的安全性一、转基因成果令人叹为观止1．争论的原因(1)原本是自然造就的生命形式被人为改造后出现了全新特征。
(2)人们所生活的国家或社会不同，具有不同的价值观取向，对转基因技术就会产生不同的见解。
2．争论的方面：在转基因食品的安全性等方面发生激烈的争论。
3．转基因生物的优缺点分析4.基因污染(1)概念：基因污染是指人工组合的基因通过转基因作物或家养动物扩散到其他栽培作物或自然野生物种并成为后者基因的一部分。
(2)途径：①转基因植物的相关基因通过花粉传播而进入附近的野生植物或邻近的非转基因农作物。
②转基因作物在自然条件下存活并发育成为野生的、杂草化的转基因植物。
③土壤微生物或动物肠道微生物吸收转基因作物后获得外源基因。
源于选择性必修 3 P102“相关信息”：我国科学家将来自玉米的α淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，由于α淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，因而可以防止转基因花粉的传播。
合作探究：(1)假如外源基因是转移到农作物的叶绿体DNA上的，能通过花粉传播吗？为什么？提示：不能。
因为叶绿体DNA存在于细胞质中，精原细胞通过减数分裂形成的精子几乎不含细胞质，不含有叶绿体DNA。
(2)科学家将玉米的α淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中能防止转基因花粉的传播，这是为什么？提示：由于α淀粉酶基因控制合成的淀粉酶能分解淀粉，阻止花粉中淀粉的储藏，使花粉失去活性。
三、理性看待转基因技术(1)理性看待转基因技术①清晰地了解转基因技术的原理和操作规程。
②看到人们的观点受到许多复杂的政治、经济和文化等因素的影响。
③靠确凿的证据和严谨的逻辑进行思考和辩论。
1．我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。
2．建立相应法规，如国务院颁布了《农业转基因生物安全管理条例》，国家有关部门制定实施了《农业转基因生物安全评价管理办法》《农业转基因生物标识管理办法》等，这些法规的制定既维护了消费者对转基因产品的知情权和选择权，又最大程度地保证了转基因技术和已经上市的转基因产品的安全性。
高一生物基因工程生物技术的安全性和伦理问题试题答案及解析
高一生物基因工程生物技术的安全性和伦理问题试题答案及解析1.下列不属于基因工程最基本工具的是( )A．限制酶B．mRNA C．DNA 连接酶D．运载体【答案】B【解析】基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体，故ACD正确，B错。
【考点】本题主要考查基因工程的工具，意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。
2.下列基因工程的操作顺序，正确的一组是()①目的基因的表达和检测②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞④目的基因的提取A．①②③④B．④③②①C．④②③①D．②③④①【答案】C【解析】基因工程的步骤包括：获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定，故C正确。
【考点】本题主要考查基因工程步骤，意在考查考生能理解所学知识的要点的能力。
3.斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。
具体纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。
利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。
未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。
用个体M和N进行如下杂交实验⑴在上述转基因实验中，将G基因与质粒重组，需要的两类酶是和。
将重组质粒显微注射到斑马鱼受精卵中,整合到染色体上的G基因表达后，使胚胎发出绿色荧光。
根据上述杂交实验推测：⑵M的基因型是（选填选项前的符号）a. DDGGb. DDggc. Ddggd. DdGg⑶杂交后，出现红·绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代（填“M”或“N”）的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中，同源染色体的__________发生了交换，导致染色体上的基因重组。
【答案】⑴限制性核酸内切酶 DNA连接酶选择性⑵ C ⑶N 非姐妹染色单体【解析】（1）基因工程操作过程中需要两类工具酶：限制性核酸内切酶DNA连接酶。
动物细胞工程的受体细胞一般是受精卵。
（2）根据性状可以判断亲本的基因型是D_gg和D_ G_，因为子代出现了绿色荧光（D_G_）和红色荧光（ddgg）的子代胚胎，则亲代M中必定均含有d基因，同时可推出M的基因型是：Ddgg。
新高考生物第十四单元 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题(A卷新题基础练)(解析版)
第十四单元基因工程及生物技术的安全性与伦理问题A卷新题基础练中，只有一项是符合题目要求的。
1．T4DNA连接酶可将任意2个具有相同粘性末端的DNA片段连接在一起。
该反应过程需消耗ATP，其水解产生的腺苷一磷酸（AMP）通过共价键与酶相连，随后AMP转移至DNA片段，进而完成连接反应。
下列叙述正确的是（）A．T4DNA连接酶的底物种类较多，故其无专一性B．T4DNA连接酶催化反应后，其组成成分已改变C．ATP在该反应过程中可能打开两个高能磷酸键D．T4DNA连接酶需保存于最适温度和pH条件下【答案】C【解析】A、T4DNA连接酶有专一性，A错误；B、酶在催化反应前后性质不变，故T4DNA连接酶催化反应后，其组成成分不变，B错误；C、APT水解产生ADP需要打开两个高能磷酸键，结合题干“该反应过程需消耗ATP，其水解产生的腺苷一磷酸（AMP）通过共价键与酶相连”可推测A TP在该反应过程中可能打开两个高能磷酸键，C正确；D、T4DNA连接酶需在低温和最适pH条件下保存，D错误。
故答案为：C。
2．下列有关生物技术安全性的叙述，错误的是（）A．生物技术可造福人类但也会威胁社会B．从某些实例来看，人们对转基因食品的担心并非是多余的C．转基因生物安全性的争论主要在食物安全、生物安全和环境安全三个方面D．转基因农作物肯定不会将目的基因传给杂草【答案】D【解析】A、生物技术既可造福人类，使用不当又能威胁社会，A正确；B、人们对转基因食品的担心，从某些实例来看并非是多余的，B正确；C、转基因生物带来的安全性问题主要包括食物安全、环境安全、生物安全，C正确；D、转基因植物的外源基因可通过花粉传播到近缘植物，可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”等，D错误。
故答案为：D。
3．世界上最后一批天花病毒至今仍保存在美国和俄罗斯的研究机构里。
世界卫生组织曾举行会议，考虑限期销毁这批病毒，以杜绝潜在的危险。
下列关于天花病毒的叙述，正确的是（）A．具有细胞膜、细胞质等结构B．通过无丝分裂进行繁殖C．具有高致死性和高传染性，可被制成生物武器D．属于自养型生物【答案】C【解析】AD、天花病毒无细胞结构，只有寄生在宿主细胞内才能进行生命活动，没有独立代谢的能力\，AD错误；B、病毒可以在宿主细胞内增殖，但不是进行无丝分裂，B错误；C、天花病毒具有高致死性和高传染性，可被制成生物武器，对军队和平民造成大规模杀伤后果，C正确。
2018年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(一)(含答案)
2019年全国卷高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》专题演练(一)1．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。
下列选项中能说明目的基因完成表达的是（）A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因B．山羊乳腺细胞中检测到人的生长激素基因C．大肠杆菌中检测到人的胰岛素基因转录出的mRNAD．酵母菌细胞中提取到人的干扰素【答案】D2．下列关于基因工程中有关酶的叙述不正确的是（）A．限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNAB．DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接C．DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或RNAD．逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA【答案】C3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。
下列叙述不正确的是（）A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的【答案】D4．下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。
下列相关叙述错误的是（）A．图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同B．图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异C．图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与D．图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质【答案】D5．下图为利用转基因技术将控制人α一抗胰蛋白酶基因导入受体细胞，最终培育出能在乳腺细胞表达人α－抗胰蛋白酶的转基因羊的过程简图，图中GEP基因为绿色荧光蛋白基因。
下列相关叙述错误的是（）A．α—抗胰蛋白酶基因和GEP基因的基本组成单位相同B．GEP基因可作为标记基因C．图中受体细胞为羊的乳腺细胞D．可用显微注射法将重组质粒导入受体细胞【答案】C6．玫瑰有5000多年的人工栽培历史，迄今已培育出2500多个品种。
第3章基因工程、第4章生物技术的安全性与伦理问题(背诵版)-备战2025年高考生物必背知识清单
第3章基因工程、第4章生物技术的安全性与伦理问题第1节重组DNA技术的基本工具[必备知识]1．基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。
(P67)2．1944年，艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。
(P68“科技探索之路”)3．切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，简称限制酶，这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。
它们能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，产生黏性末端或平末端两种形式的末端。
(P71)4．DNA连接酶主要有两类，一类是E.coli DNA连接酶，另一类是T4 DNA连接酶。
后者既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对较低。
(P72)5．质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。
(P72)6．载体必须具备的条件：(1)能在受体细胞中保存下来并能自我复制；(2)具有一个或多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接；(3)具有标记基因。
(P72)7．在基因工程中使用的载体除质粒外，还有噬菌体、动植物病毒等。
它们的来源不同，在大小、结构、复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差别。
(P73)8．DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。
DNA 在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2 mol/L的NaCl溶液。
在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
(P74“探究·实践”)[重要图解]1．限制酶切割DNA分子产生两种不同末端的示意图(箭头表示酶的切割位置)(P71)下图中的图1和图2分别表示的是Eco RⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图，从图示可以看出，Eco RⅠ限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切割位点在G和A之间；SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是CCCGGG，切割位点在G和C之间。
高考生物一轮复习 配套试题汇编 专题21 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题 新人教版
专题21 基因工程、生物技术的安全性和伦理问题基因工程的原理及工具命题剖析考向扫描1 以选择题的形式考查基因工程的基本概念,考查学生识记和应用知识的能力2结合实例考查基因工程的操作工具,如根据限制酶的切割位点分析限制酶的应用,考查学生理解和综合分析的能力,多以选择题形式出现命题动向命题会结合新的背景材料考查基因工程操作的各种工具,多数情况下会综合基因工程的步骤共同考查,形式多以文字描述、图示等形式出现,选择题、非选择题均会出现202X年全国理综卷Ⅱ下列叙述符合基因工程概念的是淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素高产菌株上解析:A项B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,属于细胞工程;C项用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,进而筛选出青霉素高产菌株,属于人工诱变;D项自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,并没有进行人为的加工,属于自然状态下的基因重组。
答案:B。
基因工程的操作步骤及应用命题剖析考向扫描1借助背景材料以非选择题的形式考查基因工程的操作程序,考查学生理解和应用知识的能力2通过流程图的形式,结合基因工程的工具考查基因工程操作的过程,如基因表达载体的构建、基因导入受体的方法、目的基因的检测与鉴定等,考查学生获取及处理信息的能力和综合分析的能力,多以非选择题形式出现命题动向命题将会结合生产实际或最新科研材料考查基因工程的操作方法及技术手段,有时会结合细胞工程、胚胎工程综合命制试题,多以文字描述、图示等形式出现,题型主要以非选择题为主1202X年四川理综卷,2,6分将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后,重新置入大肠杆菌的细胞内,通过发酵就能大量生产人生长激素。
下列叙述正确的是A发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等连接酶解析:本题考查基因工程的有关知识。
高考生物二轮复习第一部分专题 基因工程与生物技术的安全性新人教
专题19 基因工程与生物技术的安全性1．基因工程是通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性。
2．基因工程的目的是按照人们的愿望，进行严格地设计，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
3．DNA重组技术的基本工具有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。
4．限制性核酸内切酶主要从原核生物中提取，具有专一性，使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
5．载体的种类有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
6．基因工程的基本操作程序：目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。
7．获取目的基因的方法有从基因文库中获取，利用PCR技术和人工合成法获取。
8．基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
9．目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
10．目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法，常用的受体细胞是受精卵。
11．蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。
12．面对转基因技术的利弊，正确的做法是趋利避害，而不能因噎废食。
13．基因身份证是把个人的致病基因和易感基因检测出来，记录在磁卡上，做成个人基因身份证。
14．生物武器的种类包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌。
1．(2012·浙江高考)天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是( )A．提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经过逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB．利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC．利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D．将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞[命题立意] 本题考查基因工程及其应用的相关知识。
[知识依托] ①目的基因的获取可通过逆转录获得。
2024届高考生物一轮总复习选择性必修3第十四单元基因工程及生物技术的安全性与伦理问题第2讲重点研
[解析] (1)启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，能驱动基因的转录。为 使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子，因此应优先选用BamHⅠ和 SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中Ti质粒上的TDNA可 转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此TDNA在该实验中 的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。(2) 由图可知，标记基因是G418抗性基因，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌 后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗 生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所， 线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此其可使植物的光合作用和呼吸作用(能量 代谢)受到干扰，从而引起植物细胞死亡。(3)愈伤组织是一种相对没有分化的薄 壁细胞团，经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单 细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。
知能集成(一) 探讨基因工程操作中限制酶的选择方法 1．根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类
(1)应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。 (2)不能选择切点位于目的基因和标记基因内部的限制酶 ，如图甲、乙不能选择 SmaⅠ。 (3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的 基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种 酶的切点)。
第 2 讲 重点研究“基因工程操作中限制酶的选择和 P C R 技术”
基因工程操作中目的基因的获取和基因表达载体的构建都离不开限制性内切 核酸酶，只有选取合适的限制酶才能准确切取目的基因，因此限制酶的选取是基 因工程操作的重点也是难点，近年来较难的高考试题大都围绕限制酶的选取进行 考查。PCR技术既可以用于获取目的基因，又可以用于目的基因的检测与鉴定， 是基因工程中重要技术之一，其应用较强，因此对PCR技术的考查也成为命题的 热点。
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（全国通用）2019年高考生物总复习《基因工程及转基因技术的安全性问题》
专题演练（一）
1．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需的产品。
下列选项中能说明目的基因完成表达的是（）
A．棉花细胞中检测到载体上的标记基因
B．山羊乳腺细胞中检测到人的生长激素基因
C．大肠杆菌中检测到人的胰岛素基因转录出的mRNA
D．酵母菌细胞中提取到人的干扰素
【答案】D
2．下列关于基因工程中有关酶的叙述不正确的是（）
A．限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNA
B．DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接
C．DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或RNA
D．逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA
【答案】C
3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。
下列叙述不正确的是（）
A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体
B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染
D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
【答案】D
4．下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。
下列相关叙述错误的是（）
A．图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同
B．图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异
C．图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与
D．图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质
【答案】D
5．下图为利用转基因技术将控制人α一抗胰蛋白酶基因导入受体细胞，最终培育出能在乳腺细胞表达人α－抗胰蛋白酶的转基因羊的过程简图，图中GEP基因为绿色荧光蛋白基因。
下列相关叙述错误的是（）
A．α—抗胰蛋白酶基因和GEP基因的基本组成单位相同
B．GEP基因可作为标记基因
C．图中受体细胞为羊的乳腺细胞
D．可用显微注射法将重组质粒导入受体细胞
【答案】C
6．玫瑰有5000多年的人工栽培历史，迄今已培育出2500多个品种。
玫瑰没有生成蓝色翠雀花素所需的“黄酮类化合物3，5—氢氧化酶”的基因，因此蓝玫瑰被认为是不可能培育成功的。
但日本科研人员将蓝三叶草中的蓝色素基因植入普通玫瑰而成功培育出了蓝玫瑰，这株玫瑰的花瓣中所含的色素为蓝色。
下列有关叙述正确的是（）
A．蓝色翠雀花素分布于蓝玫瑰花瓣细胞的液泡和叶绿体中
B．培育蓝玫瑰用到的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶
C．蓝色素基因在所有玫瑰细胞中都能控制合成蓝色翠雀花素
D．蓝玫瑰的培育成功意味着人类创造了一个新的物种
【答案】B
7．下列有关质粒的叙述，正确的是（）
A．质粒是存在于细菌中的一种细胞器
B．质粒改造后可用作基因工程的载体
C．质粒上基因的表达不遵循中心法则
D．质粒必须具有抗生素基因以便筛选
【答案】B
8．若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ（A↓GATCT）、EcoR Ⅰ（G↓AATTC）和Sau3A Ⅰ（↓GATC）。
下列分析合理的是（）
A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
【答案】D
9．利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，试图培育出耐寒能力强的番茄。
下列相关说法，错误的是（）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．将抗冻蛋白基因与相应载体连接构建基因表达载体
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入受体细胞
D．检测到番茄细胞中具有抗冻蛋白基因，培育出的番茄一定具有杭寒能力
【答案】D
10．在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。
这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。
由于含有可以生成维生素A的β胡萝卜素，它呈现金黄色泽，故称“金色大米”。
“金色大米”的培育流程如图所示，请回答下列问题。
（已知酶Ⅰ的识别序列
和切点是—G↓GATCC—，酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—）。
（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是＿＿＿＿＿，通过该操作形成了图中的＿＿＿＿（填字母），它的构成至少包括＿＿＿＿＿等。
（2）在研究过程中获取了目的基因后采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术进行扩增。
在构建c的过程中目的基因用＿＿＿＿＿（填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）进行了切割。
检验重组载体导入能否成功，需要利用＿＿＿＿＿＿＿作为标记基因。
（3）过程d通常采用＿＿＿＿＿法，过程e运用了＿＿＿＿＿技术，在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。
【答案】（1）基因表达载体的构建 c 目的基因、启动子、终止子、标记基因
（2）PCR 限制酶Ⅱ 基因I
（3）农杆菌转化植物组织培养脱分化再分化。