杀菌抑菌基本知识课件0116127页PPT
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消毒、灭菌PPT演示课件
无菌物品管理
对手术室内使用的无菌物品进 行严格管理，确保在有效期内 使用，避免过期或污染。
手术器械处理
对手术器械进行严格的清洗、 消毒和灭菌处理，确保手术过 程中无菌操作。
医疗废弃物处理要求
分类收集 对医疗废弃物进行分类收集，包 括感染性废弃物、损伤性废弃物 、药物性废弃物和化学性废弃物 等。
环保要求 在处理医疗废弃物时，应符合环 保要求，避免对环境造成污染。
专用容器 使用专用的医疗废弃物容器进行 收集，容器应防渗漏、防破裂、 易于清洗和消毒。
安全处理 对收集的医疗废弃物进行安全处 理，包括高温焚烧、化学处理、 微波消毒等方法，确保废弃物中 的病原体被彻底杀灭。
THANKS
感谢观看
辐射灭菌法
原理
应用
利用放射性核素60Co发射的γ射线或电子 加速器产生的高能电子束（阴极射线）穿 透物品，杀死其中的微生物。
适用于不耐高温和不能用其他方法灭菌的 物品，如一次性使用的医疗器械和用品、 药品、食品等。
优点
缺点
灭菌效果可靠，不损伤物品，无残留毒性 。
设备费用高，操作技术要求高，需要专门 的安全防护措施。
消毒目的
消毒的目的是切断传播途径，防 止和控制传染病的传播和流行。
灭菌定义及目的
灭菌定义
灭菌是指用物理或化学方法杀灭外环 境中所有的微生物，包括细菌芽孢和 非芽孢菌、病毒、真菌等的过程。
灭菌目的
灭菌的目的是彻底消除外环境中的一 切微生物，以达到无菌状态，保证医 疗、科研等活动的安全进行。
消毒与灭菌关系
05
消毒与灭菌效果评价
消毒效果评价方法及标准
细菌学指标
消毒前后细菌数量对比，计算杀菌率。
化学指标
杀菌剂PPT教学课件
病性是可以遗传的。化学免疫是利用化 学物质使植物产生这种抗病性。有人把 高水平的抗病性称为免疫性，而新的观 点认为：植物抗病性的出现，是由于植 物细胞内潜在的抗性基因的表达结果。
第二节 杀菌剂的作用方式和机制
一、杀菌剂的作用方式 1、杀菌作用：含铜、汞重金属无机杀菌
剂 2、抑菌作用：内吸性的有机杀菌剂 3、增强植物的抗病力：新型杀菌剂
有那些方法可以引起遗传物质 改变呢？
染色体变异 基因的重组 基因突变
袁隆平,1930年9月7日生，中国 工程院院士，现任国家杂交水 稻工作技术中心暨湖南杂交水 稻研究中心主任、湖南省政协 副主席。中国研究杂交水稻的 创始人，世界上成功利用水稻 杂交优势的第一人。他于1964 年开始从事杂交水稻研究，用 九年时间于1973年实现了三系 配套，并选育了第一个在生产 上大面积应用的强优高产杂交 水稻组合----南优2号。亩产达 到623公斤，单产一般比常规 稻增产20%左右。被国际上誉 为“杂交水稻之父”。
第一节 植物病害化学防治
二、植物病害化学防治原理 1、化学保护：预防为主 2、化学治疗：渗透内吸、选择性农药 （1）局部化学治疗：外科治疗 （2）表面化学治疗：白粉病 （3）内部化学治疗：内吸作用
第一节 植物病害化学防治
二、植物病害化学防治原理
3、化学免疫 一种生物固有的周体抗病能力，这种抗
1、随机抽样，样品要有足够数量，不少于 ３０粒
2、测量果实的长轴长短，以毫米记，四舍 五入
3、选择适当的测量工具和测量方法
4、用坐标纸绘制曲线图，水平轴为果实的 长度，纵轴为样品的个数，依据两数的相 交点，连成曲线（测量结果也可以用直方 图表示）
第一种花生的数据
8
7
6
5
第二节 杀菌剂的作用方式和机制
一、杀菌剂的作用方式 1、杀菌作用：含铜、汞重金属无机杀菌
剂 2、抑菌作用：内吸性的有机杀菌剂 3、增强植物的抗病力：新型杀菌剂
有那些方法可以引起遗传物质 改变呢？
染色体变异 基因的重组 基因突变
袁隆平,1930年9月7日生，中国 工程院院士，现任国家杂交水 稻工作技术中心暨湖南杂交水 稻研究中心主任、湖南省政协 副主席。中国研究杂交水稻的 创始人，世界上成功利用水稻 杂交优势的第一人。他于1964 年开始从事杂交水稻研究，用 九年时间于1973年实现了三系 配套，并选育了第一个在生产 上大面积应用的强优高产杂交 水稻组合----南优2号。亩产达 到623公斤，单产一般比常规 稻增产20%左右。被国际上誉 为“杂交水稻之父”。
第一节 植物病害化学防治
二、植物病害化学防治原理 1、化学保护：预防为主 2、化学治疗：渗透内吸、选择性农药 （1）局部化学治疗：外科治疗 （2）表面化学治疗：白粉病 （3）内部化学治疗：内吸作用
第一节 植物病害化学防治
二、植物病害化学防治原理
3、化学免疫 一种生物固有的周体抗病能力，这种抗
1、随机抽样，样品要有足够数量，不少于 ３０粒
2、测量果实的长轴长短，以毫米记，四舍 五入
3、选择适当的测量工具和测量方法
4、用坐标纸绘制曲线图，水平轴为果实的 长度，纵轴为样品的个数，依据两数的相 交点，连成曲线（测量结果也可以用直方 图表示）
第一种花生的数据
8
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基础知识消毒与灭菌技术[可修改版ppt]
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干热消毒灭菌法
方法 要求
焚烧灭 将物品直接投入 菌法 点 燃的焚烧炉内
焚烧
使用范围
注意事项
无保留价值的污染物品，如 注意安全，远离易燃、易 污染的纸张、特殊感染的敷 爆物品 料等
燃烧灭 用乙醇燃烧的火 菌法 焰进行灭菌
①急用的某些金属器械、盆 ①在燃烧过程中不能添加
的灭菌②微生物实验室接种 乙醇等易燃料②贵重器械
(三)化学消毒剂的使用方法
➢ 浸泡法 侵泡法是将物品洗净、擦干后，浸没在消 毒液中进行消毒灭菌的方法。
➢ 擦拭法 擦拭法是用消毒剂直接擦拭人体或物品表 面，如皮肤、桌椅等，达到消毒灭菌的方法。
➢ 喷雾法 喷雾法是利用喷雾器将消毒剂变成微粒气 雾弥散在空气中．对空气和物品表面进行消毒灭 菌的方法。
➢ 熏蒸法 熏蒸法是将消毒剂加热或加人氧化剂，使 其产生气体来进行消毒灭菌的方法。
(三)化学消毒剂的使用方法
(四)常用的化学消毒剂
碘酊 iodine tincture 过氧乙酸 peracetic acid 福尔马林 formalin （37 ～40%的甲醛溶液) 戊二醛glutaraldehyde 环氧乙烷 ethylene oxide
含氯消毒剂
乙醇 alcohol 碘伏 iodophor
(5)在使用前用无菌生理盐水冲净消毒后的 物品，避免消毒剂刺激人体组织
(二)化学消毒剂的分类
➢ l、高效消毒剂 高效消毒剂可杀灭一切 微生物，包括芽孢 (碘酊、福尔马林等)
➢ 2、中效消毒剂 中效消毒剂可杀灭细菌 繁殖体，不能杀灭芽孢(乙醇、碘伏等)
➢ 3、低效消毒剂 低效消毒剂可杀灭细菌 繁殖体，不能杀灭结核杆菌、亲水性病毒 或芽孢(苯扎溴铵、氯己定等)
杀菌抑菌基本知识PPT课件
4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
二、杀菌率试验
5、计算公式
A_B X=
A
X 100%
式中： X——杀菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 杀菌率≥90%，产品有杀菌作用。。
三、抑菌率试验
1、制备试验菌悬液 浓度为：用100μl滴于对照片上，回收菌落
剂中，将残留消毒剂迅速中 以消除对微生物的抑制作用。
和，使其不再持续抑制或杀
灭微生物的方法。
四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
4、评价标准
杀菌
抑菌
杀菌率≥90％，产品有 杀菌作用。
抑菌率≥50％～90％， 产品有抑菌作用，抑菌 率≥90％，产品有较强 的抑菌作用。
五、抗（抑）菌试验
1、目的 测定抗（抑）菌产品对细菌和真菌 的抗（抑）菌作用。
常使用的方法有抑菌环试验、最小抑制浓 度测定试验等等。
五、抗（抑）菌试验
2、抑菌环试验 1）原理 利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓
度梯度，以显示其抑菌作用。
五、抗（抑）菌试验
2）操作程序
（1）制备抑菌片 滴加实际使用浓度抑菌剂溶液的直 径为5mm,厚不超过4mm圆片。
（2）制备阴性对照片 不含抑菌成分的与实验组大小 相同的样片。
数为1×104～1×109cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和对
照样片上滴加100μl，作用20min。
三、抑菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml PBS 的试管内，充分混匀，作 适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取0.5ml， 只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养基(细菌) 或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿， 使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培养。
二、杀菌率试验
5、计算公式
A_B X=
A
X 100%
式中： X——杀菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 杀菌率≥90%，产品有杀菌作用。。
三、抑菌率试验
1、制备试验菌悬液 浓度为：用100μl滴于对照片上，回收菌落
剂中，将残留消毒剂迅速中 以消除对微生物的抑制作用。
和，使其不再持续抑制或杀
灭微生物的方法。
四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
4、评价标准
杀菌
抑菌
杀菌率≥90％，产品有 杀菌作用。
抑菌率≥50％～90％， 产品有抑菌作用，抑菌 率≥90％，产品有较强 的抑菌作用。
五、抗（抑）菌试验
1、目的 测定抗（抑）菌产品对细菌和真菌 的抗（抑）菌作用。
常使用的方法有抑菌环试验、最小抑制浓 度测定试验等等。
五、抗（抑）菌试验
2、抑菌环试验 1）原理 利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓
度梯度，以显示其抑菌作用。
五、抗（抑）菌试验
2）操作程序
（1）制备抑菌片 滴加实际使用浓度抑菌剂溶液的直 径为5mm,厚不超过4mm圆片。
（2）制备阴性对照片 不含抑菌成分的与实验组大小 相同的样片。
数为1×104～1×109cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和对
照样片上滴加100μl，作用20min。
三、抑菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml PBS 的试管内，充分混匀，作 适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取0.5ml， 只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养基(细菌) 或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿， 使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培养。
杀菌抑菌基本知识PPT课件
常使用的方法有抑菌环试验、最小抑 制浓度测定试验等等。
五、抗（抑）菌试验
2、抑菌环试验 1）原理 利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不
同浓度梯度，以显示其抑菌作用。
五、抗（抑）菌试验
2）操作程序
（1）制备抑菌片 滴加实际使用浓度抑菌剂溶液的 直径为5mm,厚不超过4mm圆片。
（2）制备阴性对照片 不含抑菌成分的与实验组大小 相同的样片。
菌落数为1×104～1×109cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和
对照样片上滴加100μl，作用20min。
三、抑菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml PBS 的试管内，充分混匀，作 适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取0.5ml， 只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养基(细菌) 或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿， 使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培养。
4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
三、抑菌率试验
5、计算公式 A_B
X= A
X 100%
式中： X——抑菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 抑菌率≥50%-90%，产品有抑菌作用。 抑菌率≥90%，产品有较强抑菌作用。
一、名词解释
7、cfu——在活菌营养计数时，由单个菌体或 聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖 所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达 活菌的数量。
一、名词解释
8、试验菌 金黄色葡萄球菌（ATCC6538）
细菌繁殖体中化脓性代表。
一、名词解释
大肠杆菌（8099或ATCC259922） 细菌繁殖体中肠道菌的代表。
五、抗（抑）菌试验
2、抑菌环试验 1）原理 利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不
同浓度梯度，以显示其抑菌作用。
五、抗（抑）菌试验
2）操作程序
（1）制备抑菌片 滴加实际使用浓度抑菌剂溶液的 直径为5mm,厚不超过4mm圆片。
（2）制备阴性对照片 不含抑菌成分的与实验组大小 相同的样片。
菌落数为1×104～1×109cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和
对照样片上滴加100μl，作用20min。
三、抑菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml PBS 的试管内，充分混匀，作 适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取0.5ml， 只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养基(细菌) 或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿， 使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培养。
4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
三、抑菌率试验
5、计算公式 A_B
X= A
X 100%
式中： X——抑菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 抑菌率≥50%-90%，产品有抑菌作用。 抑菌率≥90%，产品有较强抑菌作用。
一、名词解释
7、cfu——在活菌营养计数时，由单个菌体或 聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖 所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达 活菌的数量。
一、名词解释
8、试验菌 金黄色葡萄球菌（ATCC6538）
细菌繁殖体中化脓性代表。
一、名词解释
大肠杆菌（8099或ATCC259922） 细菌繁殖体中肠道菌的代表。
杀菌剂的杀菌作用原理PPT课件
主要影响有：对细胞壁组分合成的影响；对细 胞膜上甾醇合成的影响；对核酸合成的影响；对蛋 白质合成的影响。
24
（1）对核酸合成的影响
A. 掺假核酸的作用 杀菌剂与菌体内核酸碱基化学结构相似，因 而代替了核苷酸的碱基，造成所谓“掺假核酸”。 如多菌灵，苯来特的结构与嘌呤很相似，因 而干扰了磷酸腺苷或磷酸鸟苷的合成，起到“掺 假核酸”的作用。
吗啉类是抑制甾醇生物合成过程Δ8-Δ7 的双键异构 化，打击点是Δ14异构酶；而其它5类都是抑制甾醇生物合成 过程中由多功能氧化酶细胞色素P450催化进行的甾醇C14上的 脱甲基，使真菌麦角甾醇脱甲基不能进行。
14
（3）杀菌剂破坏菌体内多种细胞器或其他结构 杀菌剂破坏细胞器如线粒体，核糖体或其他
细胞结构如纺锤体等，这些细胞器和细胞结构的破 坏是各种杀菌剂不同作用的不同结果，这些作用会 导致菌体细胞代谢的深刻变化，与药剂对代谢过程 的干扰有密切的关系。
例如，敌克松会强烈地抑制辅酶Ⅰ（NADH）与细 胞色素C之间的电子传递，萎锈灵是作用于复合物2 中琥珀酸脱氢酶系到辅酶Q之间的非血红铁硫蛋白。
23
3.干扰病原菌的生物合成
病菌的生长，繁殖，需要许多特定的物 质，以便形成新细胞，这是病原菌生命过程的基本 活动，有许多杀菌剂可干扰病原菌的生物合成过程 。
30
（2）抑制蛋白质的合成
A.药剂对蛋白质合成的直接影响 如在植物 细胞内 ，Na+ 可以阻止植物细胞 内
mRNA 的复制，从而影响蛋白质合成； 如放线菌素D可以作用于多种真菌，破坏DNA模
板功能，阻止肽链伸长。 病毒侵染植物之后，改变植物细胞膜的结构，
使Na+大量进入植物细胞内，刺激病毒蛋白质的合 成。
15
24
（1）对核酸合成的影响
A. 掺假核酸的作用 杀菌剂与菌体内核酸碱基化学结构相似，因 而代替了核苷酸的碱基，造成所谓“掺假核酸”。 如多菌灵，苯来特的结构与嘌呤很相似，因 而干扰了磷酸腺苷或磷酸鸟苷的合成，起到“掺 假核酸”的作用。
吗啉类是抑制甾醇生物合成过程Δ8-Δ7 的双键异构 化，打击点是Δ14异构酶；而其它5类都是抑制甾醇生物合成 过程中由多功能氧化酶细胞色素P450催化进行的甾醇C14上的 脱甲基，使真菌麦角甾醇脱甲基不能进行。
14
（3）杀菌剂破坏菌体内多种细胞器或其他结构 杀菌剂破坏细胞器如线粒体，核糖体或其他
细胞结构如纺锤体等，这些细胞器和细胞结构的破 坏是各种杀菌剂不同作用的不同结果，这些作用会 导致菌体细胞代谢的深刻变化，与药剂对代谢过程 的干扰有密切的关系。
例如，敌克松会强烈地抑制辅酶Ⅰ（NADH）与细 胞色素C之间的电子传递，萎锈灵是作用于复合物2 中琥珀酸脱氢酶系到辅酶Q之间的非血红铁硫蛋白。
23
3.干扰病原菌的生物合成
病菌的生长，繁殖，需要许多特定的物 质，以便形成新细胞，这是病原菌生命过程的基本 活动，有许多杀菌剂可干扰病原菌的生物合成过程 。
30
（2）抑制蛋白质的合成
A.药剂对蛋白质合成的直接影响 如在植物 细胞内 ，Na+ 可以阻止植物细胞 内
mRNA 的复制，从而影响蛋白质合成； 如放线菌素D可以作用于多种真菌，破坏DNA模
板功能，阻止肽链伸长。 病毒侵染植物之后，改变植物细胞膜的结构，
使Na+大量进入植物细胞内，刺激病毒蛋白质的合 成。
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一、名词解释
1、抗菌剂——能够在一定时间内，使某些微生物 （细菌、真菌、酵母菌、藻类及病毒等）的生长或繁 殖保持在必要水平以下的化学物质。抗菌剂是一类具 有抑菌和杀菌性能的新型助剂
2、杀菌——指杀灭物体中的致病菌，物体中还含有 芽孢、嗜热菌等非致病菌。
3、抑菌——采用化学或物理方法抑制或妨碍细菌生 长繁殖及其活性的过程。
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四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
1、含义不同
杀菌
抑菌
消毒剂对微生物的 杀灭能力。
消毒剂抑制或妨碍细 菌生长繁殖及活性的 能力。
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四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
2、作用时间不同
杀菌
抑菌
2min
20min
杀菌的作用时间可为2min、 5min、10min、20min，相同条 件下，作用时间越短，杀菌率 越低，所以选择最短的作用时 间来检测杀菌性能更具有代表
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一、名词解释
4、中和剂——在微生物杀灭试验中，用以消除试验 微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消 毒剂，使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。
5、PBS——磷酸盐缓冲液，0.03mol/L,pH=7.2。 6、MIC——最小抑菌浓度。
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三、抑菌率试验
1、制备试验菌悬液 浓度为：用100μl滴于对照片上，回收菌落
数为1×104～1×109cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和对
照样片上滴加100μl，作用20min。
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三、抑菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml PBS 的试管内，充分混匀，作 适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取0.5ml， 只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养基(细菌) 或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿， 使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培养。
4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
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二、杀菌率试验
5、计算公式
A_B X=
A
X 100%
式中： X——杀菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 杀菌率≥90%，产品有杀菌作用。。
一、名词解释
7、cfu——在活菌营养计数时，由单个菌体或 聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖 所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达 活菌的数量。
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一、名词解释
8、试验菌 金黄色葡萄球菌（ATCC6538）
细菌繁殖体中化脓性代表。
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性。
抑菌的作用时间可为2min、 5min、10min、20min， 相同条件下，作用时间越长， 抑菌率越低，所以选择最长的 作用时间来检测抑菌性能更具 有代表性。
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四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
3、残留消毒剂的去除方法不同
杀菌
中和剂法（化学中合法）
抑菌
稀释法
指在消毒剂与微生物作用到 将经消毒剂作用过的微生物 达规定时间的终点时，取样 样本，用稀释液（PBS）稀 加于适宜种类和浓度的中和 释，降低残留消毒剂浓度，
五、抗（抑）菌试验
1、目的 测定抗（抑）菌产品对细菌和真菌 的抗（抑）菌作用。 常使用的方法有抑菌环试验、最小抑制浓 度测定试验等等。
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五、抗（抑）菌试验
2、抑菌环试验 1）原理 利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓
度梯度，以显示其抑菌作用。
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4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
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三、抑菌率试验
5、计算公式 A_B
X= A
X 100%
式中： X——抑菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 抑菌率≥50%-90%，产品有抑菌作用。 抑菌率≥90%，产品有较强抑菌作用。
一、名词解释
大肠杆菌（8099或ATCC259922） 细菌繁殖体中肠道菌的代表。
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一、名词解释
白色念珠菌（ATCC10231） 空气中细菌的代表。
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一、名词解释
铜绿假单胞菌（ATCC15442） 医院感染中最常分离的细菌繁殖体的代表。
五、抗（抑）菌试验
2）操作程序
（1）制备抑菌片 滴加实际使用浓度抑菌剂溶液的直 径为5mm,厚不超过4mm圆片。
（2）制备阴性对照片 不含抑菌成分的与实验组大小 相同的样片。
（3）接种试验菌 蘸取浓度为 5×105～5×10-9cfu/ml 试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板均匀涂抹。
（4）抑菌样片和对照片贴放
（5）培养温度： 37 ℃±2 ℃，
培养时间：16～18小时
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二、杀菌率试验
1、制备试验菌悬液 浓度为：用100μl滴于对照片上，回收菌落
数为1×104～1×109 cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和对
照样片上滴加100μl，作用2min。
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二、杀菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml相应中和剂的试管内，充分混 匀，，作适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取 0.5ml，只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养 基(细菌)或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动 平皿，使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培 养。
剂中，将残留消毒剂迅速中 以消除对微生物的抑制作用。
和，使其不再持续抑制y
四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
4、评价标准
杀菌
抑菌
杀菌率≥90％，产品有 杀菌作用。
抑菌率≥50％～90％， 产品有抑菌作用，抑菌 率≥90％，产品有较强 的抑菌作用。
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1、抗菌剂——能够在一定时间内，使某些微生物 （细菌、真菌、酵母菌、藻类及病毒等）的生长或繁 殖保持在必要水平以下的化学物质。抗菌剂是一类具 有抑菌和杀菌性能的新型助剂
2、杀菌——指杀灭物体中的致病菌，物体中还含有 芽孢、嗜热菌等非致病菌。
3、抑菌——采用化学或物理方法抑制或妨碍细菌生 长繁殖及其活性的过程。
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四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
1、含义不同
杀菌
抑菌
消毒剂对微生物的 杀灭能力。
消毒剂抑制或妨碍细 菌生长繁殖及活性的 能力。
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四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
2、作用时间不同
杀菌
抑菌
2min
20min
杀菌的作用时间可为2min、 5min、10min、20min，相同条 件下，作用时间越短，杀菌率 越低，所以选择最短的作用时 间来检测杀菌性能更具有代表
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一、名词解释
4、中和剂——在微生物杀灭试验中，用以消除试验 微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消 毒剂，使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。
5、PBS——磷酸盐缓冲液，0.03mol/L,pH=7.2。 6、MIC——最小抑菌浓度。
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三、抑菌率试验
1、制备试验菌悬液 浓度为：用100μl滴于对照片上，回收菌落
数为1×104～1×109cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和对
照样片上滴加100μl，作用20min。
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三、抑菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml PBS 的试管内，充分混匀，作 适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取0.5ml， 只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养基(细菌) 或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿， 使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培养。
4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
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二、杀菌率试验
5、计算公式
A_B X=
A
X 100%
式中： X——杀菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 杀菌率≥90%，产品有杀菌作用。。
一、名词解释
7、cfu——在活菌营养计数时，由单个菌体或 聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖 所形成的集落，称为菌落形成单位，以其表达 活菌的数量。
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一、名词解释
8、试验菌 金黄色葡萄球菌（ATCC6538）
细菌繁殖体中化脓性代表。
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性。
抑菌的作用时间可为2min、 5min、10min、20min， 相同条件下，作用时间越长， 抑菌率越低，所以选择最长的 作用时间来检测抑菌性能更具 有代表性。
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四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
3、残留消毒剂的去除方法不同
杀菌
中和剂法（化学中合法）
抑菌
稀释法
指在消毒剂与微生物作用到 将经消毒剂作用过的微生物 达规定时间的终点时，取样 样本，用稀释液（PBS）稀 加于适宜种类和浓度的中和 释，降低残留消毒剂浓度，
五、抗（抑）菌试验
1、目的 测定抗（抑）菌产品对细菌和真菌 的抗（抑）菌作用。 常使用的方法有抑菌环试验、最小抑制浓 度测定试验等等。
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五、抗（抑）菌试验
2、抑菌环试验 1）原理 利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓
度梯度，以显示其抑菌作用。
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4、培养时间、温度 细菌：35 ℃±2 ℃，48小时 酵母菌： 37 ℃±2 ℃，72小时
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三、抑菌率试验
5、计算公式 A_B
X= A
X 100%
式中： X——抑菌率，% A——对照样片平均菌落数 B——被试样片平均菌落数
6、评价标准 抑菌率≥50%-90%，产品有抑菌作用。 抑菌率≥90%，产品有较强抑菌作用。
一、名词解释
大肠杆菌（8099或ATCC259922） 细菌繁殖体中肠道菌的代表。
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一、名词解释
白色念珠菌（ATCC10231） 空气中细菌的代表。
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一、名词解释
铜绿假单胞菌（ATCC15442） 医院感染中最常分离的细菌繁殖体的代表。
五、抗（抑）菌试验
2）操作程序
（1）制备抑菌片 滴加实际使用浓度抑菌剂溶液的直 径为5mm,厚不超过4mm圆片。
（2）制备阴性对照片 不含抑菌成分的与实验组大小 相同的样片。
（3）接种试验菌 蘸取浓度为 5×105～5×10-9cfu/ml 试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板均匀涂抹。
（4）抑菌样片和对照片贴放
（5）培养温度： 37 ℃±2 ℃，
培养时间：16～18小时
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二、杀菌率试验
1、制备试验菌悬液 浓度为：用100μl滴于对照片上，回收菌落
数为1×104～1×109 cfu/片。
2、制备染菌样片 取上述菌悬液，分别在每个被试样片和对
照样片上滴加100μl，作用2min。
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二、杀菌率试验
3、操作步骤 分别将样片投入含5ml相应中和剂的试管内，充分混 匀，，作适当稀释，取其中2-3个稀释度，，分别吸取 0.5ml，只要两个平皿中，用40-50℃的营养琼脂培养 基(细菌)或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动 平皿，使其充分混匀，琼脂凝固后翻转平板，倒置培 养。
剂中，将残留消毒剂迅速中 以消除对微生物的抑制作用。
和，使其不再持续抑制y
四、杀菌性能与抑菌性能的不同点
4、评价标准
杀菌
抑菌
杀菌率≥90％，产品有 杀菌作用。
抑菌率≥50％～90％， 产品有抑菌作用，抑菌 率≥90％，产品有较强 的抑菌作用。
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