公卫执业医师-实践技能-操作技能-4.样品采集

公卫执业医师-实践技能-操作技能-4.样品采集
[问答题]1.食品样品采样数量和方法
正确答案：详见解析
参考解析：（一）采样的数量食品分析检验结果的准确与否通常取决（江南博哥）于两个方面：①采样的方法是否正确；②采样的数量是否得当。

因此，从整批食品中采取样品时，通常按一定的比例进行。

确定采样的数量，应考虑分析项目的要求、分析方法的要求和被分析物的均匀程度三个因素。

一般平均样品的数量不少于全部检验项目的四倍；检验样品、复验样品和保留样品一般每份数量不少于0.5kg。

检验掺伪的样品，与一般成分分析的样品不同，分析项目事先不明确，属于捕捉性分析，因此，相对来讲，取样数量要多一些。

鉴于采样的数量和规则各有不同，一般可按下述方法进行。

1.液体、半流体食品：如植物油、鲜乳、酒或其他饮料，如用大桶或大罐盛装者，应先行充分混匀后采样。

样品应分别盛放在3个干净的容器中，盛放样品的容器不得含有待测物质及干扰物质。

2.粮食及固体食品：应自每批食品的上、中、下三层中的不同部位分别采取部分样品混合后按四分法对角取样，再进行几次混合，最后取有代表性样品。

3.肉类、水产等食品：应按分析项目要求分别采取不同部位的样品或混合后采样。

4.罐头、瓶装食品或其他小包装食品：应根据批号随机取样。

同一批号取样件数：250g以上的包装不得少于6个，250g以下的包装不得少于10个。

掺伪食品和食物中毒的样品采集，要具有典型性。

由于食品数量较大，而且目前的检测方法大多数具有破坏作用，故不能对全部食品进行校验，必须从整批食品中采取一定比例的样品进行校验。

从大量的分析对象中抽取具有代表性的一部分样品作为分析化验样品，这项工作即称为样品的收集或采样。

食品的种类繁多，成分复杂。

同一种类的食品，其成分及其含量也会因品种、产地、成熟期、加工或保藏条件不同而存在相当大的差异；同一分析对象的不同部位，其成分和含量也可能有较大差异。

从大量的、组成成分不均匀的被检物质中采集能代表全部被检物质的分析样品（平均样品），必须采用正确的采样方法。

如果采取的样品不足以代表全部物料的组成成分，即使以后的样品处理、检测等一系列环节非常精密、准确，其检测的结果亦毫无价值，甚至导出错误的结论。

可见，采样是食品分析工作非常重要的环节。

（二）采样原则正确采样，必须遵循以下两个原则：第一，采集的样品要均匀一致、有代表性，能够反映被分析食品的整体组成、质量和卫生状况；第二，在采样过程中，要设法保持原有的理化指标，防止成分逸散或带入杂质。

（三）采样步骤样品通常可分为检样、原始样品和平均样品。

采集样品的步骤一般分5步，依次如下：1.获得检样：由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样。

2.形成原始样品：许多份检样综合在一起称为原始样品。

如果采得的检样互不一致，则不能把它们放在一起作成一份原始样品，而只能把质量相同的检样混在一起，作成若干份原始样品。

3.得到平均样品：原始样品经过技术处理后，再抽取其中一部分供分析检验用的样品称为平均样品。

4.平均样品三份：将平均
样品平分为三份，分别作为检验样品（供分析检测使用）、复验样品（供复验使用）和保留样品（供备查或仲裁）。

5.填写采样记录：采样记录要求详细填写采样的单位、地址、日期、样品的批号、采样的条件、采样时的包装情况、采样的数量、要求检验的项目以及采样人等资料。

（四）采样的一般方法采样通常有两种方法：随机抽样和代表性取样。

随机抽样是按照随机的原则，从分析的整批物料中抽取出一部分样品。

随机抽样时，要求使整批物料的各个部分都有被抽到的机会。

代表性取样则是用系统抽样法进行采样，即已经掌握了样品随空间（位置）和时间变化的规律，按照这个规律采取样品，从而使采集到的样品能代表其相应部分的组成和质量，如对整批物料进行分层取样、在生产过程的各个环节取样、定期从货架上采取陈列不同时间的食品的取样等。

两种方法各有利弊。

随机抽样可以避免人为的倾向性，但是，在有些情况下，如难以混匀的食品（如黏稠液体、蔬菜等）的采样，仅仅使用随机抽样法是不行的，不如结合代表性取样，从有代表性的各个部分分别取样。

因此，采样通常采用随机抽样与代表性取样相结合的方式。

具体的取样方法，因分析对象性质的不同而异。

1.均匀固体物料（如粮食、粉状食品）(1)有完整包装（袋、桶、箱等）的物料：可先按(总件数/2)1/2确定采样件数，然后从样品堆放的不同部位，按采样件数确定具体采样袋（桶、箱），再用双套回转取样管插入包装容器中采样，回转180°取出样品；再用四分法将原始样品做成平均样品，即将原始样品充分混合均匀后堆集在清洁的玻璃板上，压平成厚度在3cm以下的形状，并画对角线或十字线，将样品分成4份，取对角线的2份混合，再按上述方法加上分为4份，取对角线的2份。

这样操作直至取得所需数量为止，此即是平均样品。

(2)无包装的散堆样品：先划分若干等体积层，然后在每层的四角和中心点用双套回转取样器各采取少量检样，再按上述方法处理，得到平均样品。

2.较稠的半固体物料：如稀奶油、动物油脂、果酱等，这类物料不易充分混匀，可先按(总件数/2)1/2确定采样件（桶、罐）数，打开包装，用采样器从各桶（罐）中分上、中、下三层分别取出检样，然后将检样混合均匀，再按上述方法分别缩减，得到所需数量的平均样品。

3.液体物料（如植物油、鲜乳等）(1)包装体积不太大的物料：可先按（总件数/2）1/2确定采样件数。

开启包装，用混合器充分混合（如果容器内被检物不多，可用由一个容器转移到另一个容器的方法混合）。

然后用长形管或特制采样器从每个包装中采取一定量的检样；将检样综合到一起后，充分混合均匀形成原始样品；再用上述方法分取缩减得到所需数量的平均样品。

(2)大桶装的或散（池）装的物料：这类物料不易混合均匀，可用虹吸法分层（大池的还应分四角及中心五点）取样，每层500ml左右，得到多份检样；将检样充分混合均匀即得原始样品；然后，分取缩减得到所需数量的平均样品。

4.组成不均匀的固体食品（如肉、鱼、果品、蔬菜等）：这类食品各部位组成极不均匀，个体大小及成熟程度差异很大，取样更应注意代表性，可按下述方法采样。

(1)肉类：根据分析目的和要求不同而定。

有时从不同部位取得检样，混合后形成原始样品，再分取缩减得到所需数
量的代表该只动物的平均样品；有时从一只或很多只动物的同一部位采取检样，混合后形成原始样品，再分取缩减得到所需数量的代表该动物某一部位情况的平均样品。

(2)水产品：小鱼、小虾可随机采取多个检样，切碎、混匀后形成原始样品，再分取缩减得到所需数量的平均样品；对个体较大的鱼，可从若干个体上切割少量可食部分得到检样，切碎、混匀后形成原始样品，再分取缩减得到所需数量的平均样品。

(3)果蔬：体积较小的（如山楂、葡萄等），可随机采取若干个整体作为检样，切碎、混匀形成原始样品，再分取缩减得到所需数量的平均样品；体积较大的（如西瓜、苹果、菠萝等），可按成熟度及个体大小的组成比例，选取若干个个体作为检样，对每个个体按生长轴纵剖分4份或8份，取对角线2份，切碎、混匀得到原始样品，再分取缩减得到所需数量的平均样品；体积蓬松的叶菜类（如菠菜、小白菜等），由多个包装（一筐、一捆）分别抽取一定数量的检样，混合后捣碎、混匀形成原始样品，再分取缩减得到所需数量的平均样品。

5.小包装食品（罐头、袋或听装奶粉、瓶装饮料等）：这类食品一般按班次或批号连同包装一起采样。

如果小包装外还有大包装（如纸箱），可在堆放的不同部位抽取一定量（总件数/2）1/2大包装，打开包装，从每箱中抽取小包装（瓶、袋等）作为检样；将检样混合均匀形成原始样品，再分取缩减得到所需数量的平均样品。

（五）采样的注意事项1.一切采样工具（如采样器、容器、包装纸等）都应清洁、干燥、无异味，不应将任何杂质带入样品中。

例如，作3,4-苯并芘测定的样品不可用石蜡封瓶口或用蜡纸包，因为有的石蜡含有3,4-苯并芘；检测微量和超微量元素时，要对容器进行预处理；作锌测定的样品不能用含锌的橡皮膏封口；作汞测定的样品不能使用橡皮塞；供微生物检验用的样品，应严格遵守无菌操作规程。

2.设法保持样品原有微生物状况和理化指标，在进行检测之前样品不得被污染，不得发生变化。

例如，做黄曲霉毒素B1测定的样品，要避免阳光、紫外灯照射，以免黄曲霉毒素B1发生分解。

3.感官性质极不相同的样品，切不可混在一起，应另行包装，并注明其性质。

4.样品采集完后，应在4小时之内迅速送往检测室进行分析检测，以免发生变化。

5.盛装样品的器具上要贴牢标签，注明样品名称、采样地点、采样日期、样品批号、采样方法、采样数量、分析项目及采样人。

（六）采样实例1.罐头(1)按生产班次取样，取样量为1/3000，尾数超过1000罐者，增取1罐，但每班每个品种取样量基数不得少于3罐。

(2)某些罐头生产量较大，则以班产量总罐数20000罐为基数，取样量按1/3000。

超过20000罐以上，取样量按1/10000，尾数超过1000罐者，增取1罐。

(3)个别生产量过小的产品，同品种、同规格可合并班次取样，但并班总罐数不超过5000罐，每生产班次取样量不少于1罐，并班后取样基数不少于3罐。

(4)按杀菌锅取样，每锅检取1罐，但每批每个品种不得少于3罐。

2.瓶、袋、听装奶粉：按批号采样，自该批产品堆放的不同部位采取总数的1‰，但不得少于2件，尾数超过500件者应加取1件。

[问答题]2.水样的采集
正确答案：详见解析
参考解析：（一）采样器材采样前应准备好采样装置和盛放水样的器皿。

根据所要采集水样水体的情况，选出适宜的采样器。

用来盛放水样的容器应稳定，即在存放期间既不会将容器材质溶入样品中，而容器又不会吸附水样中的某些组分，考虑到运输和使用方便，最好易于密封和开启，不易破损，容易清洗并可反复多次使用。

聚乙烯塑料器皿和硬质玻璃器皿能基本上满足这些要求。

在多数情况下两者都适于盛放水样，但当水样含大量油类时不宜用塑料制品器皿，因为它会渗透某些碳氢化合物，测油类的水样宜用广口玻璃瓶存放。

由于玻璃吸附金属离子的能力比塑料制品强，而且还可能溶出一些金属离子，因此宜用塑料容器存放测定微量金属的水样。

监测项目不同，对盛放水样的容器的要求也不同，表1-2列出了各监测项目对存放容器和保存条件的要求。

（二）采样量水质检验所需的水样量取决于测定项目，不同的测定项目对水样用量及保存条件有不同的要求，因而应根据各个检验项目的实际情况分别计算，并适当增加20%～30%，作为实际采样量。

各检验项目的水样实际用量和其保存方法见表1-2。

如果采样器的容积有限，一次采样不能满足所需样品量时，就应多次采集，并在较大容器中将各次采集的样品混匀后再装入样品容器中。

为了防止样品在运输过程中溢出，装瓶时应保证容器中留有约1/10的空隙。

除测定溶解氧等气体的样品外，任何情况下容器都不能注满水样。

（三）采样方法1.天然水与生活饮用水水样的采集：采集自来水及具有抽水机设备的井水时，应先放水数分钟，使积留于水管中的杂质流出去，然后再收集水样。

采集湖泊或河流的表面水样时，可在距岸边1～2m处，将采集瓶浸入水中，使瓶口
位于水面下20～50cm但距水底10～15cm处，打开瓶塞，让水进入瓶中。

在这种情况下，要注意防止混入漂浮于水面的物质。

采集井、河流、湖泊或水库等较深处的水样时，宜用水样采集瓶采集。

供卫生细菌学检验用水样，采集方法与上述方法相近，但要注意进行无菌处理。

要用酒精灯将水龙头灼烧消毒。

采取含有余氯的水样时，应在水样瓶消毒前，按每500ml水样加2ml计，加入
1.5%硫代硫酸钠溶液。

(1)采样点的选择：采样点的设置应有代表性，应分别设在水源取水口、集中式供水单位出水口和居民经常用水点处。

管网水的采样点数，一般按供水人口每2万人设1个点计算，供水人口在20万以上、100万以下时，可酌量增减。

在全部采样点中，应有一定的点数选在易受污染的地点和管网系统陈旧部位。

具体采样点的选择，应由供水单位和当地卫生行政部门根据本地区具体情况确定。

(2)水样的体积：水样的体积，取决于所分析项目的多少以及选用的测定方法。

分析常规水质项目，只需要3～5L水样，取样量应能满足欲测项目的需要。

对于细菌与化学检验，由于采集、处理、容器等的不同，不能应用同一瓶水样。

(3)水样容器：样品瓶可用硼硅玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，必须能够用塞或盖紧紧密封。

选择容器的原则：①容器不能是新的污染源；②容器壁不应吸收或吸附某些待测组分；③容器不应与待测组分发生反应。

容器的清洗原则：按水样待测组分的要求来确定清洗容器的原则。

用于微生物检验样品的容器：容器及瓶塞、瓶盖应能经受热力灭菌的温度，并且在这个温度下不释放或产生任何能抑制生物活动或导致死亡或促进生长的化学物质。

为了除去余氯，在灭菌前向容器里加入硫代硫酸钠以还原余氯［每次125ml 水样加0.1ml硫代硫酸钠溶液(100g/L)］。

热力灭菌分干热和压力蒸汽灭菌两类。

压力蒸汽灭菌法要求121℃、15分钟即可杀死芽胞。

干热灭菌法杀死芽胞需160～180℃、维持2小时。

(4)样品保存：水样从采集到分析这段时间里，由于物理的、化学的、生物的作用会发生不同程度的变化，原则上应尽快测定。

影响水质变化的因素：生物作用、化学作用、物理作用。

水样保存措施：①通常将水样充满容器并密封，但对冷冻保存的水样不应充满容器。

②水样保存，应达到减慢生物或微生物作用，减慢化合物或络合物水解，避免分解，减少挥发与容器的吸附损失。

保存方法，可采用控制pH、加入化学剂、冷藏或冷冻。

应根据具体组分选定适宜的保存方法。

(5)现场采样和记录现场采样：采集井水时，须先用泵充分抽水，以保证样品真正代表地下水源的实况。

采集自来水时，应开启水龙头，适当放水数分钟后再取样，微生物样品应放水数分钟后关闭水龙头，用酒精棉球擦拭水龙头口并点燃酒精棉球灼烧水龙头口后迅速采样封口。

采样记录：在采样现场把采样记录用胶纸粘贴或悬挂标签于水样瓶上，注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等。

2.生活污水和工业废水水样的采集：生活污水的成分十分复杂，变化很大，它既与人们的起居作息有关，又与季节性食物的种类有关，一天之内乃至一小时之内水质的情况也不相同。

工业废水是指生产过程中排出的各种废水，它包括工艺过程用水，机器设备冷却水，设备和场地清洗水等。

由于生产工艺过程不同，原材料不均以及工艺的间
歇性等，在不同时间内，即使是同种工业废水，其水质情况的变化也十分明显。

对于这种变化很大的水样，需仔细设置采样点和采样方法，才能使所取样品有代表性。

为了使所设置的采样点合适，布点前应进行必要的调查研究。

例如，查清工业的用水量（主要包括工业用水量、工业用水中的循环用水量、废水排放量），查明工业废水的类型和排污去向（车间、工厂或地区排污口数量和位置，工业废水是直接进入还是通过渠道排入江河湖海中等）。

一般在工厂总排污口处布点取样，这种水样适于监测悬浮物、硫化物、挥发性酚、石油和铜、锌、氟及其无机化合物等二类污染物。

为了监测汞、镉、砷、铅及其无机化合物，六价铬，有机氯和强致癌物等一类污染物，则应在车间或车间设备出口处布点取样。

对于有处理设施的工厂，还应在处理设施的进口和出口处布点取样，这样可了解处理效果。

采集废水样品的方式主要有以下几种：(1)间隔式等量取样：通常在一昼夜内每隔一定的时间采集相等量的水样混匀，这种方式适于废水流量比较恒定的情况。

(2)平均比例取样：如果废水流量不恒定，则需根据不同流量按比例采集样品，即流量大时多取，流量小时少取，混匀后装瓶。

如设有总废水池，也可在废水池一次采集混合均匀的水样进行分析。

(3)瞬间采样：如要了解废水在每天各个不同时间内成分的变化，应每隔一定时间，如1小时、2小时……有时甚至几分钟采集一次水样，并立即分析。

(4)单独取样：有些污染物，如悬浮物、油类等在废水中的分布极不均匀，很难取到代表性的均匀水样，而且样品在放置过程中又易浮于表面或沉于容器底部，如从全分析水样中取出一部分用来分析这些项目，必然会影响到结果的正确性，在这种情况下就应单独取样，全量分析。

采样点应设在排污总管口或车间污水出口处。

3.对河流湖泊等进行污染调查时水样的采集：对河流湖泊等进行污染调查时，应从整个水域来考虑，合理设置采样点，建立起水体污染监测网，才能及时而准确地报告污染情况和水域中各种有害物质的动态变化。

为了合理地确定采样点，首先应做好调查研究和收集资料工作。

需要了解水体的水文、气候、地质、地貌特征；了解水体沿岸的城市分布和工业布局情况，污染源分布及排污情况，城市的给水情况；了解水体沿岸的资源现状，水资源的用途和重点水源保护区；收集原有的水质检验资料。

必要时，还可在需要设置采样点的河段上设置一些调查点进行采样分析。

然后根据检验的目的、项目和样品类型，并按上述调查研究和对有关资料的综合分析结果来确定采样点。

[问答题]3.食品样品制备的前处理
正确答案：详见解析
参考解析：采集的样品多数不能直接检测，样品要进行前处理，再制备成样品溶液进行分析。

样品前处理一般分为：粉碎、过筛、匀浆、干燥、脱脂等。

1.粉碎：粉碎样品常用乳钵、药碾和粉碎机。

用乳钵和药碾粉碎样品是实验室常用的老办法，该法使样品全部微粉化，主要适用于含水分少、油脂少的干燥样品。

粉碎机有电动和手动两种，较常用电动一种，有滚筒式、球磨式和切削式等，粉碎效果较好。

无论使用哪种粉碎方法，都应注意以下几个问题：(1)粉碎
时间不宜过长，否则产生的热量大，可能会引起某些成分变化或水分减少，样品粉碎到最大颗粒不影响平均组成，最小颗粒不影响成分特点为度。

(2)选用粉碎机应根据测定目的、样品种类不同来选择。

例如，粉碎含纤维多的样品不宜选研磨式粉碎机，而选用冲击式切削式较好。

测定金属含量的样品选用瓷的粉碎装置，否则会造成某种金属量偏高。

(3)对于含水分或含油脂多的样品，要在不影响测定的情况下预先干燥除水分或预先脱脂后再粉碎。

(4)所有的粉碎机使用完后都应清扫干净，用前应处理干净、干燥。

2.过筛：经粉碎后的样品由于粒度不一致，会造成取样不均匀，因此粉碎后的样品要过筛，将大颗粒筛出来再行粉碎，再过筛，直至全通过。

一般过20～35目筛即可。

过筛时，一定要上面有盖下面有底，使整个过筛在密闭的状态下进行，否则一些细微粉末会损失。

使用过的筛子应该用小毛刷轻轻清扫，清除样品剩余粉末和残渣，如果孔目较细的可将筛反过来进行清除。

如果筛过含盐分多的样品，用过的筛子应用水洗净，然后干燥。

3.匀浆：对于含水分或油脂多的样品，往往不适合用粉碎方法处理，可用匀浆机进行匀浆或组织捣碎。

匀浆之前需将样品切成小块，匀浆时要注意下列问题：(1)对一些含水分较少的样品在匀浆时要加一定量的水，以便上下层翻动、冲击，其加水量视样品而异，一般可加1～5倍。

(2)所用匀浆器材应清洁，无污染。

用后必须清洗干净，特别是含酸类样品，如不及时处理，将腐蚀匀浆器金属部件，使其生锈。

清洗后，干燥。

4.干燥（风干物的制备）：含水分多、脂肪少、被测成分对热稳定的样品，可进行预干燥。

取样品适量，将之切细或切薄，称取200～300g，平铺在珐琅盘中，于60～80℃条件下加热干燥后置于室温下1～2日，使其与大气温度达到动态平衡，称重，计算出和未预干燥前样品的关系。

5.脱脂：油菜籽、芝麻等种子及其制作的食品含油脂较多，粉碎时由于脂肪出来了而影响粉碎。

如果少量损失油脂不影响测定结果，可选用尽可能减少油脂损失的机器，粉碎成粗块。

如若将油脂全部除去，则称取适量样品于乳钵中粗碎，然后进行脱脂，供分析用。

[问答题]4.医院消毒效果
正确答案：详见解析
参考解析：一、采样的原则与要求（一）采样时应注意无菌操作采样人员应做好个人防护，并按无菌技术操作，防止人员、标本和环境的污染；并正确处理采样及污染的废弃物。

（二）样品的采取和送检注意样品采取的正确时段，并将采取的样品在6小时内送实验室检测，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24小时。

（三）样品标识应对采取的样品进行唯一性标记，在样本上注明样品编号，并附详细的采样单，注明样品编号、样品名称、采样地点、采样时间、单位名称、来源、数量、检测项目和采样人信息。

二、采样器材和采样液常用的采样工具主要包括：含营养琼脂平板(直径为9cm)、10ml磷酸盐缓冲液采样管、含0.1%硫代硫酸钠10ml磷酸盐缓冲液采样管、含3%(W/V)吐温80和0.3%卵磷脂10ml磷酸盐缓冲液采样管、含0.3%甘氨酸10ml磷酸盐缓冲液采样管、9ml普通营养肉汤采样管、含0.1%硫代硫酸钠9ml营养肉汤采样管、。