36种常用微生物培养基配制汇总
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36种常用微生物培养基配制汇总
36种微生物常用培养基配制
1、牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)
牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7、4~7、6.
2、高氏1号培养基(用于放线菌培养)
可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl0、5g,K2HPO4?3H2O 0、5g,MgSO4?7H2O0、5g,FeSO 4?7H2O0、01g,水1000mL,pH7、4~7、6。
配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中.
3、马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)
K2HPO41g,MgSO4?7H2O0、5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min.待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL).
4、马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)
马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:
将马铃署去皮,切成约2cm2得小块,放入1500mL得烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖.
5、察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)
蔗糖30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4?7H2O0、5g,KCl 0、5g,FeSO4?7H2O0、1g,水1000mL,pH7、0~7、2。
6、Hayflik培养基(用于支原体培养)
牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂15g,pH7、8~8、0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2、5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位
以上)0、5mL,以上混合后倾注平板。
*注意:醋酸铊就是极毒得药品,需特别注意安全操作。
7、麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)
葡萄糖0、1g,KCl 0、18g,酵母膏0、25g,醋酸钠0、82g,琼脂l、5g,蒸馏水l00mL。
溶解后分装试管,1l5℃湿热灭菌15min。
8、葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V、P、反应与甲基红试验)
蛋白胨0、5g,葡萄糖0、5g,K2HPO4 0、2g,水100mL,pH7、2,1l5℃湿热灭菌20min。
9、蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)
蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7、2~7、4,121℃湿热灭菌20min。
10、糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)
蛋白胨0、2g,NaCl0、5g,K2HPO40、02g,水100mL,溴麝香草酚蓝(1%水溶液)0、3mL,糖类lg。
分别称取蛋白胨与NaCl溶于热水中,调pH至7、4,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%水溶液),加入糖类,分装试管,装量4~5cm高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液).115℃湿热灭菌20min。
灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。
常用得糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖得用量常加大为1、5%)。
11、RCM培养基(强化梭菌培养基)、(用于厌氧菌培养)
酵母膏3g,牛肉膏l0g,蛋白胨10g,可溶性淀粉lg,葡萄糖5g,半胱氨酸盐酸盐0、5g,NaCl 3g,NaAc 3g,水l000mL,pH8、5,刃天青3mg/L,l2l℃湿热灭菌30min.
12、TYA培养基(用于厌氧菌培养)
葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g,醋酸铵3g,KH2PO4 0、
5g,MgSO4?7H2O0、2g,FeSO4?7H2O0、01g,水1000mL, pH6、5,121℃湿热灭菌30min.
13、玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)
玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮10min成糊状,自然pH,121℃湿热灭菌30min. 14、中性红培养基(用于厌氧菌培养)葡萄糖40g,胰蛋白胨6g,酵母膏2g,牛肉膏2g,醋酸铵3g,KH2PO45g,中性红0、2g,MgSO4?7H2O0、2g,FeSO4?7H2O0、01g, 水1000mL,pH6、2,121℃湿热灭菌30min。
15、CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)
麦芽汁(6波美)1000mL,水1000mL,CaCO310g,明胶10g,p H6、8,121℃湿热灭菌30min。
16、BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)
(A)溶液:
脱脂乳粉100g,水500mL,加入1、6%溴甲酚绿(B、C、G)乙醇溶液1mL,80℃灭菌20m in。
(B)溶液:
酵母膏10g,水500mL,琼脂20g, pH6、8,121℃湿热灭菌20min。
以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。
17、乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)
牛肉膏5g,酵母膏5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳糖5g,Na Cl5g,水1000mL,pH6、8,121℃湿热灭菌20min。
18、酒精发酵培养基(用于酒精发酵)
蔗糖10g,MgSO4?7H2O 0、5g,NH4NO30、5g,20%豆芽汁2mL,KH2PO40、5g,水100mL,自然pH。
19、柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)
优质蛋白胨0、4g,NaCl 0、7g,KCl 0、02g,NaHCO3 0、01g,CaCl0、02g,KH2PO40、09g,NaH2PO40、48g,蒸馏水500mL,无菌兔血清40mL。
制法:
除兔血清外得其余各成分混合,加热溶解,调pH至7、2,121℃湿热灭菌20min,待冷却后,加入无菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分装试管(5~10mL/管),56℃水浴灭活lh后备用。
20、豆芽汁培养基
黄豆芽500g,加水1000mL,煮沸lh,过滤后补足水分,121℃湿热灭菌后存放备用,此即为50%得豆芽汁;
用于细菌培养:
10%豆芽汁200mL,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7、2~7、4。
用于霉菌或酵母菌培养:
10%豆芽汁200mL,糖50g,水800mL,自然pH.霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
21、LB(Luria—Bertani)培养基(细菌培养,常在分子生物学中应用)
双蒸馏水950mL,胰蛋白胨l0g,NaCl l0g,酵母提取物(bac to-yeast extract)5g,用lmol/LNaOH(约l mL)调节pH值至7、0,加双蒸馏水至总体积为1L,121℃湿热灭菌30min。
含氨苄青霉素LB培养基:
待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素,至终浓度为80~100mg/L。
22、复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)、(用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,琼脂20g,乳糖10g,K2HPO40、5g,无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红
乙醇溶液20mL,蒸馏水1000mL.
制作过程:
先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏与琼脂加入到900mL水中,加热溶解,再加入K2PO4,溶解后补充水至l000mL,调pH至7、2~7、4。
随后加入乳糖,混匀溶解后,于115℃湿热灭菌20min.再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10m in后,立即滴加于20mL 5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变为淡粉红色为止。
将此混合液全部加入到上述已灭菌得并仍保持融化状态得培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若
颜色由淡红变为深红,则不能再用.
23、乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定)
蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母膏5g,乳糖10g,琼脂5g,蒸馏水1000mL,pH7、2~7、4,分装试管(l0mL/管),115℃湿热灭菌20min。
24、乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)
蛋白胨10g,牛肉膏3g,乳糖5g,NaCl5g,蒸馏水l000mL,1、6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。
调pH至7、2,分装试管(l0mL/管),并放入倒置杜氏小管,l15℃湿热灭菌20min。
25、三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中大肠菌群测定)
将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中,制法同上,分装于放有倒置杜氏小管得试管中,每管5mL,1l5℃湿热灭菌20min。
26、伊红美蓝培养基(EMB培养基)(用于水体中大肠菌群测定与细菌转导)
蛋白胨l0g,乳糖10g,K2HPO4 2g,琼脂25g,2%/伊红Y (曙红)水溶液20mL,0、5%美蓝(亚甲蓝)水溶液l3mL,pH7、4。
制作过程:
先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4与琼脂混匀,加热溶解后,调pH至7、4,1l5℃湿热灭菌20mi n,然后加入已分别灭菌得伊红液与美蓝液,充分混匀,防止产生气泡.待培养基冷却到50℃左右倒平皿.如培养基太热会产生过多得凝集水,可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。
在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖,其余成分不变。
27、加倍肉汤培养基(用于细菌转导)
牛肉膏6g,蛋白胨20g,NaCl10g,水1000mL,pH7、4~7、6.
28、半固体素琼脂(用于细菌转导)琼脂1g,水100mL,121℃湿热灭菌30min。
29、豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)
豆饼100g加水5~6倍,煮出滤汁100mL,汁内加入KH2PO4
0、1%,MgSO4 0、05%,(NH4)2SO4 0、05%,可溶性淀粉2%,pH6,琼脂2%~2、5%。
30、酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)
分别配制A液与B液.
A液:
称取Na2HPO4?7H2O 1、07g。
干酪素4g,加适量蒸馏水,并加热溶解。
B液:
称取KH2PO40、36g,加水溶解。
A、B液混合后,加入酪素水解液0、3 mL,加琼脂20g,最后用蒸馏水定容至1000mL。
酪素水解液得配制:
1g酪蛋白溶于碱性缓冲液中,加入1%得枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL加水至100mL,30℃水解l h。
用于配制培养基时,其用量为1000m L,培养基中加入100mL以上水解液。
31、细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型)
Na2HPO4?7H2O1g,MgSO4?7H2O0、2g,葡萄糖5g,N aCl 5g,K2HPO4lg,水l000mL,pH7、0,1l5℃湿热灭菌30min.
32、YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)
酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH6、0,115℃湿热灭菌20min.
33、YEPD高渗培养基(用于酵母原生质体融合)
在YEPD培养基中加入0、6mol/L得NaCL,3%琼脂.
34、YNB基本培养基(用于酵母原生质体融合)
0、67%酵母氮碱基(YNB,不含氨基酸,Difco),2%葡萄糖,3%琼脂,pH6、2。
另一配方为:
葡萄糖10g(NH4)2SO41g,K2HPO40、125g,KHPO40、875g,KI 0、0001g,MgSO4?7H2O0、5g,CaCl2?2H2O0、lg,NaCl0、1g,维量元素母液lmL,维生素母液lmL(母液均按常规
配制),水1000mL,pH5、8~6、0。
35、YNB高渗基本培养基(用于原生质体融合)
在YNB基本培养基中加入0、6mol/LNaCl.
36、酚红半固体柱状培养基(用于检查氧与菌生长得关系)
蛋白胨1g,葡萄糖10g,玉米浆10g,琼脂7g,水1000mL,p H7、2。
在调好pH后,加入1、6%酚红溶液数滴,至培养基变为深红色,分装于大试管中,装量约为试管高度得1/2,1l5℃灭菌20min.细菌在此培养基中利用葡萄糖生长产酸,使酚红从红色变成黄色,在不同部位生长得细菌,可使培养基得相应部位颜色改变,但注意培养时间太长,酸可扩散以致不能正确判断结果。
以上各种培养基均可配制成固体或半固体状态,只需改变琼脂用量即可,前者为1、5%~2、0%,后者为0、3%~0、8%。