藻种培养方法
螺旋藻的培养技术
螺旋藻的培养技术的一般步骤有:
1.培养基准备:制备适合螺旋藻生长的培养基,通常包括碳源、
氮源、磷酸盐等营养物质。
pH值通常在7-9之间。
2.接种螺旋藻:将一定量的螺旋藻接种到培养基中,通常使用前
期培养的螺旋藻菌种。
3.光照条件:提供适当的光照条件,螺旋藻需要光合作用进行生
长。
一般情况下,使用连续光照或间歇光照的方式。
4.温度控制:螺旋藻适宜的生长温度一般在20-30摄氏度之间,
需要根据具体种类进行调控。
5.搅拌和通气:保持培养液的搅拌和适当的通气,以促进螺旋藻
的生长和养分吸收。
6.控制营养盐浓度:根据需要调整培养基中的营养盐浓度,以维
持螺旋藻的生长速度和生物量。
7.控制污染:定期检查和清除可能的污染物,保持培养环境的清
洁。
8.收获和分离:当螺旋藻生长到一定程度时,可以进行收获和分
离。
收获时,可以使用离心等方法分离螺旋藻细胞。
微藻培养的工艺流程
1. 牟氏角毛藻
(1)分类地位 属硅藻门,中心纲,盒形藻目, 角毛藻科,角毛藻属。
(2)形态特征 牟氏角毛藻细胞小,细胞壁薄。 大多数单个细胞,也有2~3个细胞相连组成群体。 壳面椭圆形至圆形,中央略凸起或少数平坦。壳
环面呈长方形至四角形。角毛细而长,末端尖, 自细胞壁四角生出,几乎与纵轴平行。色素体1 个,呈片状,黄褐色。
毛之间。一个色素体裂成二大片围绕着细胞。细胞核在细
胞上部。无蛋白核和眼点。群体细胞成淡黄绿色至绿色。 有微弱趋光性。
(3)生态条件:
最适盐度约在10‰~40‰之间
最适温度范围为15~30℃
最适光照强度约在4000~10000勒克斯之间
pH 5~9范围内都可生长
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二、微藻培养需要的培养设施
1、一级保种室 环境条件: 低温 弱光照 洁净
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3.固定化保种法
将藻液与褐藻酸钠凝胶溶液充分搅匀后制成胶-藻 混悬液,将悬液滴入CaCl2溶液中,约30min后形 成固化的褐藻酸钙胶珠,置于培养液保存。
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(二)消毒
主要利用物理消毒法和化学消毒法。
(1)物理消毒法包括:加热消毒法和紫外线消毒 法
(2)化学消毒法包括:酒精、高锰酸钾、石炭酸、 盐酸、漂白粉、洗液等常用化学药品消毒
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2、二级培养室
透明尼龙袋、白色塑料桶、水泵一台、小型鼓风机等。
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3、三级培养车间 在生产中配有培养池、砂滤装置、 消毒池、鼓风机等。
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4、供气系统 一般育苗场都设有供气系统, 统一使用。
5、采收工具 在生产中常用的有:水泵一台、 收藻架、500目收藻袋、500L塑料桶等。
藻类的养殖方法和注意事项
藻类的养殖方法和注意事项摘要:藻类是一类非常重要的生物资源,不仅在食品工业、药物研发和环境治理等领域有着广泛应用,还可以促进水质改良和能源开发。
本文将介绍藻类的养殖方法和注意事项,包括培养基配制、光照和温度调控、污染物处理、收获和贮存等方面,旨在帮助读者了解如何成功地养殖藻类,实现高产和优质。
正文:一、培养基配制藻类的培养基非常重要,对于藻类的生长和发育起着关键的作用。
一般来说,藻类培养基主要包含碳源、氮源、磷源、微量元素等基本组分。
不同种类的藻类对培养基的需求也不同,因此,在进行养殖之前,需首先了解清楚所选藻类对培养基的要求,并根据具体情况进行配制。
二、光照和温度调控光照和温度是影响藻类生长的重要因素。
光照对藻类的光合作用至关重要,通常需要提供适宜的光强和光周期。
一般情况下,藻类需要较长的光周期(12-16小时),而光强度则因不同藻类而异。
此外,温度也是藻类生长的关键因素,一般藻类的生长温度为20-30摄氏度,但不同种类的藻类对温度的要求也有所不同,因此,在养殖过程中需根据具体种类调节光照和温度。
三、污染物处理藻类养殖过程中,水质要保持清洁。
富营养化是藻类养殖过程中常见的问题,其首要原因是过多的氮、磷等营养物质存在于培养基中。
为了解决这一问题,我们可以通过加强光照、增加藻类种植密度和选择适量的培养基配制方式来减少污染物的积累。
此外,还要避免培养基受到有机污染、重金属和杀虫剂等有害物质的污染,以保证藻类的健康生长。
四、收获和贮存藻类的收获和贮存是藻类养殖过程中不可忽视的环节。
一般来说,藻类可通过离心、滤网过滤等方式进行收获。
为了保持藻类的新鲜度和质量,应尽量避免暴露在阳光下,防止光照和高温对藻类造成不良影响。
在贮存方面,可以选择将藻类进行干燥贮存或用清洁的水贮存在适当的温度下。
同时,为了确保藻类的持续供应,我们还可以采取定期复制和传代的方式进行繁殖和扩增。
总结:藻类的养殖方法和注意事项涉及到培养基配制、光照和温度调控、污染物处理、收获和贮存等多个方面。
藻类的接种培养和生长曲线的绘制实验目的
藻类的接种培养和生长曲线的绘制实验目的实验目的:研究藻类的接种培养和生长曲线的绘制,以了解藻类的生长规律和适宜环境条件。
一、藻类的接种培养实验步骤及方法1. 实验材料准备- 藻类培养物:选择适合实验目的的藻类菌株,如绿藻、硅藻等。
- 培养基:根据不同藻类的需求,选择合适的培养基,如液体培养基或固体培养基。
- 培养器具:包括试管、烧杯、移液管、显微镜等。
2. 准备培养基- 按照培养基配方准确称取所需药品,并按比例溶解于适量去离子水中。
- 调节pH值:使用pH计检测溶液pH值,并根据需要调节至合适范围。
- 灭菌处理:将溶液装入试管或烧杯中,进行高温高压灭菌处理。
3. 藻类接种- 选择健康活跃的藻类细胞进行接种。
可以通过显微镜观察藻类细胞形态和运动情况来判断。
- 使用无菌技术将藻类细胞转移到培养基中。
可以使用移液管或吸管等工具进行操作。
- 接种密度:根据实验需要和藻类特性,确定合适的接种密度。
4. 培养条件控制- 光照:根据藻类的光需求,选择适当的光照条件,如自然光、人工灯光等。
- 温度:根据藻类的耐温范围,控制培养环境的温度,一般在20-30摄氏度之间。
- 搅拌:对于一些需要较好氧化还原条件的藻类,可以提供适量搅拌以增加氧气供应。
5. 培养观察和维护- 定期观察培养物中藻类细胞的生长情况。
可以使用显微镜进行观察,并记录相关数据。
- 维持培养物状态良好:定期更换培养基、控制污染源、保持合适的环境条件等。
二、生长曲线的绘制实验步骤及方法1. 实验材料准备- 藻类培养物:根据实验需要,选择已经培养好的藻类菌株。
- 培养基:根据藻类特性和需求,选择合适的培养基。
- 培养器具:包括试管、培养皿、显微镜、计时器等。
2. 接种培养物- 从已经培养好的藻类菌株中取适量细胞,进行接种。
可以使用移液管或吸管等工具进行操作。
- 根据实验需要和藻类特性,确定合适的接种密度。
3. 培养条件控制- 光照:提供适当的光照条件,如自然光或人工灯光,并保持恒定。
藻类的实验室培养
微藻的实验室培养学生:林晓生学号:2120180414导师:杨缜教授一、藻类的概述藻类是原生生物界一类真核生物(有些也为原核生物,如蓝藻门的藻类)。
主要水生,无维管束,能进行光合作用。
藻类植物共约为2100属,27000种。
根据所含色素、细胞构造、生殖方法和生殖器官构造的不同,分为绿藻门、裸藻门、轮藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、甲藻门、蓝藻门、褐藻门和红藻门。
色素的颜色划分,藻可分为3类:绿藻、褐藻和红藻。
由于单胞藻具有利用太阳光能效率高、营养丰富、生长繁殖迅速、对环境的适应性强和容易培养等重要特性,因而受到重视。
微藻是一类在陆地、海洋分布广泛,营养丰富、光合利用度高的自养植物,细胞代谢产生的多糖、蛋白质、色素等,使其在食品、医药、基因工程、液体燃料等领域具有很好的开发前景。
二、微藻的营养模式和生长模式(二)、微藻的生长模式藻类在培养过程中,生长繁殖的速度,出现一定的起伏,这种生长模式可划分为五个时期(延缓期、指数生长期、相对生长下降期、静止期、死亡期)。
三、培养按培养的场所分室内培养和室外培养1)按培养基的形态分固体培养和液体培养 2)按培养的纯度分纯种培养和单种培养3)按藻液的流动情况分静止培养和循环流动水培养 4)按气体交换情况分充气培养和不充气培养 5)按藻液与外界接触程度分封闭式培养和开放式培养6)按培养规模和目的分小型培养、中继培养和大量培养方式简单介绍其中的四种方式:(1)纯培养和单种培养纯培养(axenic culture):是无菌培养,指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。
纯培养操作要求十分严格,要求有无菌室、超净台等设备,容器、工具、培养液等均须彻底灭菌。
培养成功率很高,是进行科学研究不可缺少的技术。
单种培养(single-species culture):指区别于纯培养的不排除细菌存在的培养(可以是生产性的,也可以是非生产性的)(2)封闭式培养和开放式培养封闭式培养(closed culture):指把培养液密封在透明的容器中,与外界空气隔离,暴露在阳光中,CO2完全采用人工供给的方法。
藻种培养注意事项
一、藻种的两种培养类型一般来说藻种的培养有两种方式:一种是长期保存所需要的培养方法,一种是以实验为目的,短期内保藏藻种的培养方法。
长期培养最主要的问题是选择一种合适的培养基,可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。
最适合长期培养藻种的培养基是agar(固体琼脂培养基),但是使用agar有一个弊端,即培养物保持无菌的问题;我们可以加一层蒸馏水(咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水)在agar上,这种做法可以保证在长期保种的过程中减少agar水分和营养的流失。
长期保种使用的培养基,不要选择营养过于丰富的,因为多数的藻,尤其是丝状藻,在营养丰富的环境生长,会发生形态结构上的变化,如果要做生理生态方面研究,实验材料的形态结构是不能异常的。
适合长期保种的贫营养的培养基有这些:Bold’s基础培养基,以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的a gar,适合长期培养绿藻;Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻;土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。
对于我库提供的藻种,由于藻种长期习惯的原因,建议使用我们提供的原配方来培养,在长期培养的时候,可以适当稀释原培养基,在藻种培养过程中,生长速率会变慢,可以保持其形态结构不变。
另外,长期培养的时候,除了选择适当的培养基,还可以降低温度5~8C(降温的过程最好能循序渐进,突然改变环境温度,可能会导致藻种不适应而死亡)。
光照强度可以减小为原先的一半。
在实验之前3到4周,将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基中(培养基必须灭菌),按照我们给予的培养条件培养,在实验前6天左右,再次接种。
短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。
由于试验的需要,常常要求在短期时间内获得大量的培养物,我们可以采用通气培养和摇床培养。
通气培养可以通CO2或洁净的空气,视培养物的多少来决定通气泵的大小,在通气的硅胶管中设置一个缓冲瓶,塞上灭菌后的脱脂棉,帮助净化空气,如果对通气有更高的要求,可以在通气管中加上一层滤膜。
藻种培养:
藻种培养:1.藻种培养设施:藻种的培养要在保种室中进行,保种室要求通风条件好,光线条件好,温度可控性好,保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。
培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等,容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。
保种室要严格消毒,防止病菌的侵入。
2.容器、工具的消毒:进行单细胞藻类的纯培养,容器、工具、培养基都要进行严格灭菌,但一般生产性的单种培养,则只须达到消毒目的就可以了。
常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。
高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。
不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。
a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌操作。
b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中,加水煮沸消毒,一般煮沸10-20分钟。
大型锥形瓶消毒,可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗,再在漏斗上放一称量瓶盖,在锥形瓶内加少量淡水,置电炉上加热煮沸5-10分钟,可使整个瓶壁消毒。
消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。
此法适合消毒小型的容器工具。
c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后,放入烘箱。
关闭烘箱门,打开通气孔,接通电源加热。
当温度上升到120℃时,关闭通气孔,停止加热。
如果进行纯培养,容器必须灭菌,当温度上升到105℃时,关闭通气孔,继续加热至160℃,保持温度,恒温2小时,然后停止加热。
必须要等到温度下降到60℃以下,才能打开烘箱门。
有棉塞和纸包扎的容器、工具灭菌,不能超过180℃,以免烘焦。
化学药品消毒主要用于生产性大量培养中,大型容器、工具、水泥池等常用化学药剂消毒。
a、漂白粉消毒工业用漂白粉一般含有效氯25%~35%,消毒时按万分之1-3的含量配成水溶液,把容器、工具在溶液中浸泡半小时,再用消毒水冲洗3~4次即可。
b、酒精消毒酒精消毒常用于中小形容器和工具,方法是用纱布蘸70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可。
微藻培养方法汇总
微藻的培养方式,有多种类型,现介绍一些主要的培养方式。
(一)纯培养与单种培养纯培养与单种培养是按培养的纯度来划分的。
纯培养:是指排除了细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。
纯培养要求有无菌室、超净工作台等设备条件,容器、工具、培养液等必须严格灭菌。
纯培养是科研工作中不可缺少的技术。
单种培养:生产性的培养中,是不排除细菌存在的,为了区别于纯培养而称之为单种培养。
(二)一次培养、连续培养和半连续培养该类培养是按采收方式划分的。
一次培养:又称有限培养,是在一定的容器中,根据藻类需要加入无机和有机营养,配成培养液,把少量的藻种接种进去,然后在适宜于藻类生长的环境条件(温度、盐度、光照、PH值等)下培养,待藻液达到一定的密度后,便一次性采收或作进一步扩大培养。
连续培养:一般在室内进行,采用自动控温、人工光源、封闭式通气培养。
在培养容器内,新的培养液不断流入,达到一定密度的培养液不断流出。
培养液的流入量和流出量可根据微藻的生长情况及需要进行人不控制,并保持平衡。
在培养过程中,营养物质浓度和藻类细胞相对稳定,产量高,在国外应用较多,我国目前生产上很少采用。
半连续培养:是指在一次培养的基础上,当藻类细胞达到一定密度后,每天收获一部分浓藻液,并加入新的营养液继续培养。
半连续培养是生产中常用的方法,每天的收获量根据育苗的需要及藻液的生长情况确定。
(三)藻种培养、中继培养和生产性培养该类培养是按培养的规模和目的来划分的。
藻种培养:在室内进行,一般采用一次性培养法。
培养容器为100-3000毫升的三角烧瓶,瓶口用消毒的纸或纱布包扎。
目的是培养和供应藻种。
中继培养:目的在于培养较大量的高密度纯种藻液,供应生产性培养接种使用。
中继培养一般在室内用大的玻璃容器或塑料大袋中进行。
根据需要可分为一级中继培养和二级中继培养。
一级中继培养的容器为10升的大口玻璃缸(南方各省多用)、10-20升的细口瓶或鱼苗袋,以封闭式不通气培养为主。
藻种培养:
藻种培养:1.藻种培养设施:藻种的培养要在保种室中进行,保种室要求通风条件好,光线条件好,温度可控性好,保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。
培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等,容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。
保种室要严格消毒,防止病菌的侵入。
2.容器、工具的消毒:进行单细胞藻类的纯培养,容器、工具、培养基都要进行严格灭菌,但一般生产性的单种培养,则只须达到消毒目的就可以了。
常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。
高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。
不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。
a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌操作。
b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中,加水煮沸消毒,一般煮沸10-20分钟。
大型锥形瓶消毒,可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗,再在漏斗上放一称量瓶盖,在锥形瓶内加少量淡水,置电炉上加热煮沸5-10分钟,可使整个瓶壁消毒。
消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。
此法适合消毒小型的容器工具。
c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后,放入烘箱。
关闭烘箱门,打开通气孔,接通电源加热。
当温度上升到120℃时,关闭通气孔,停止加热。
如果进行纯培养,容器必须灭菌,当温度上升到105℃时,关闭通气孔,继续加热至160℃,保持温度,恒温2小时,然后停止加热。
必须要等到温度下降到60℃以下,才能打开烘箱门。
有棉塞和纸包扎的容器、工具灭菌,不能超过180℃,以免烘焦。
化学药品消毒主要用于生产性大量培养中,大型容器、工具、水泥池等常用化学药剂消毒。
a、漂白粉消毒工业用漂白粉一般含有效氯25%~35%,消毒时按万分之1-3的含量配成水溶液,把容器、工具在溶液中浸泡半小时,再用消毒水冲洗3~4次即可。
b、酒精消毒酒精消毒常用于中小形容器和工具,方法是用纱布蘸70%酒精在容器、工具的表面涂抹即可。
藻类养殖方法和注意事项
藻类养殖方法和注意事项摘要:藻类是一类广泛分布于淡水和海水中的微生物,具有丰富的营养价值和广泛的应用前景。
本文将介绍藻类养殖的方法和注意事项,包括选择合适的品种、提供适宜的生长环境、控制水质参数、合理施肥和防止病虫害等方面的内容,帮助读者更好地进行藻类养殖。
正文:一、选择合适的藻类品种藻类种类繁多,常见的藻类有硅藻、绿藻、红藻、蓝藻等。
在选择养殖品种时,需要考虑生长速度、抗逆性、生物产物等因素。
硅藻适合浮游和附着培养,适合用于海洋、河流等环境;绿藻生长快速,适合水培方式;红藻含盐量较高,适合在盐度适中的水培系统中培养;蓝藻适合于陆生培养及其运营配置类型。
根据实际需求和资源条件,选择适合的藻类品种进行养殖。
二、提供适宜的生长环境藻类对生长环境的要求较高,如光照、温度和营养物质等。
光照是藻类光合作用的基础,水培藻类通常需要提供足够的自然光照或人工光源。
温度对藻类的生长速度和代谢活性有重要影响,不同藻类对温度的适应能力不同,因此需要根据具体品种来控制水温。
营养物质除了常规的氮、磷、钾等元素外,还需考虑微量元素的补充。
合理配置生长环境,可以促进藻类的健康生长。
三、控制水质参数水质是影响藻类生长的关键因素之一,需要控制水体中pH值、溶解氧含量、氨氮浓度等参数。
一般来说,藻类对中性或弱酸性环境适应性较高,但不同藻类对pH值的适应范围有所不同。
溶氧对于藻类的呼吸代谢和产物生成有重要影响,藻类养殖时需要保持适宜的溶氧含量。
氨氮是藻类生长的重要营养物质,但过高的氨氮浓度会对藻类的生长造成不利影响,因此需要控制好水中的氨氮含量。
四、合理施肥合理的施肥可以增加藻类的生长速度和养分含量,但过量施肥会导致养分浓度过高,影响藻类的生长和水质稳定。
藻类对氮、磷等养分的需求较大,可通过添加有机肥料或矿物肥料来提供养分。
施肥时需要注意养分的浓度和施用方式,可选择循环施肥或定时定点进行,以减少浪费和污染水体。
五、防止病虫害藻类养殖过程中,可能会遭受病虫害的侵袭。
藻种培养
藻种培养一、藻种的两种培养类型一般来说藻种的培养有两种方式:一种是长期保存所需要的培养方法,一种是以实验为目的,短期内保藏藻种的培养方法。
长期培养最主要的问题是选择一种合适的培养基,可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。
最适合长期培养藻种的培养基是agar(固体琼脂培养基),但是使用agar有一个弊端,即培养物保持无菌的问题;我们可以加一层蒸馏水(咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水)在agar上,这种做法可以保证在长期保种的过程中减少agar水分和营养的流失。
长期保种使用的培养基,不要选择营养过于丰富的,因为多数的藻,尤其是丝状藻,在营养丰富的环境生长,会发生形态结构上的变化,如果要做生理生态方面研究,实验材料的形态结构是不能异常的。
适合长期保种的贫营养的培养基有这些:Bold’s基础培养基,以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的a gar,适合长期培养绿藻;Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻;土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。
对于我库提供的藻种,由于藻种长期习惯的原因,建议使用我们提供的原配方来培养,在长期培养的时候,可以适当稀释原培养基,在藻种培养过程中,生长速率会变慢,可以保持其形态结构不变。
另外,长期培养的时候,除了选择适当的培养基,还可以降低温度5~8C(降温的过程最好能循序渐进,突然改变环境温度,可能会导致藻种不适应而死亡)。
光照强度可以减小为原先的一半。
在实验之前3到4周,将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基中(培养基必须灭菌),按照我们给予的培养条件培养,在实验前6天左右,再次接种。
短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。
由于试验的需要,常常要求在短期时间内获得大量的培养物,我们可以采用通气培养和摇床培养。
通气培养可以通CO2或洁净的空气,视培养物的多少来决定通气泵的大小,在通气的硅胶管中设置一个缓冲瓶,塞上灭菌后的脱脂棉,帮助净化空气,如果对通气有更高的要求,可以在通气管中加上一层滤膜。
藻类培养
一、基本培养方式(一)纯培养和单种培养(据种的纯度)1、纯培养(axenic culture)纯培养即无菌培养,是指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。
纯培养要求有无菌室、灭菌锅、超净工作台等设施,容器、工具、培养液等彻底灭菌,操作严格,培养成功率高,是进行生物科学研究不可缺少的环节。
2、单种培养(unialgal culture)在生产性培养中不排除细菌存在而有别于纯培养的一种培养方式称为单种培养。
(二)一次性培养、连续培养和半连续培养1.一次性培养(batch culture)在各种容器中,配制培养液,把少量的藻种接种进去,在适宜的环境下培养,经过一段时间(一般5~7 d),藻细胞生长繁殖达到较高的密度,一次全部收获。
一次性培养是微藻培养最常用的方法。
2.半连续培养(semi-continuous culture)半连续培养是在一次性培养的基础上,当培养的藻细胞达到或接近收获的密度时,每天收获一部分藻液并补充等量的培养液,继续培养。
半连续培养也是微藻饵料生产性常用的培养方法,每天的收获量根据育苗的需要来确定。
微藻培养的工艺流程包括:➢工具、容器、水的消毒➢培养液的制备➢接种➢培养过程的管理➢采收等主要环节一、容器、工具的消毒(一)物理消毒法1.加热消毒法加热消毒法是利用高温使蛋白质变性以杀死微生物的方法。
不能耐高温的容器和工具,如塑料、橡胶制品等不能用此法消毒。
(1)直接灼烧灭菌接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧灭菌。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌工作。
该方法可以直接把微生物烧死,灭菌彻底。
优点是简单、方便、快速、高效,但只适用于小型金属或玻璃工具。
(2)煮沸消毒把容器和工具用纱布包好,放入锅中,加水煮沸消毒,一般约煮沸15~30 min,可杀死细菌的营养体,如果在水中加入2%碳酸钠可促使芽孢死亡,亦可防止金属器械生锈。
藻类培养方法
2.3培养方法
(1)培养设备:采用冷白荧光灯为光源、可控温的生物光照培养箱进行藻种培养。
(2)接种方法:在无菌操作环境下,将5~10 ml藻液转接至血清瓶或三角玻璃瓶中,转接前必须进行显微检查确定藻种是否为纯种培养。
用脱脂棉作塞,外面以酒精灯火焰附近加热灭菌的铝箔纸封口,注意铝箔纸不可重复使用。
(3)通气培养方法:将培养瓶放置在生物光照培养箱中,乳胶通气管和空气泵相连,中间有0.22 µm的过滤空气装置。
培养基信息、接种日期应该标记在培养瓶上,并编号。
(4)培养条件:培养温度25±1℃,光照强度4000Lux,光周期14h:10h(光照:黑暗)。
(5)培养时间:经14天培养的藻液达到对数生长期,浓度适宜,可接种于藻类在线水体生态毒性监测系统藻培养罐中。
藻类养殖方法及注意事项
藻类养殖方法及注意事项摘要:藻类作为一种重要的水生生物资源,被广泛应用于食品、药物、环境治理等领域。
藻类的养殖方法与注意事项对于藻类养殖的成功与否起着至关重要的作用。
本文将介绍主要的藻类养殖方法,包括培养基调配、光照和温度控制、营养物质添加等方面,并探讨了养殖过程中需要注意的事项。
正文:一、培养基的调配藻类培养基的调配是藻类养殖中至关重要的一环。
培养基的主要成分包括水源、盐类、微量元素和有机碳源等。
水源应使用去离子水或经过高效过滤处理的水体,以避免因水质不纯导致培养的藻类受到不良影响。
盐类的添加应根据养殖藻类的品种和要求调整,常用的盐类有硝酸铵、亚硝酸钠、磷酸盐等。
微量元素的添加也很关键,例如铁离子对藻类养殖起到重要的促进作用。
有机碳源的添加可以是葡萄糖、琼脂糖等,但需要控制适当的浓度,以免影响藻类的生长和代谢。
二、光照和温度控制藻类对光照的需求较高,光照不足会使藻类细胞凋亡,生长受阻。
在养殖过程中,可以通过利用自然光或人工光源来保持适当的光照强度。
一般来说,日照时间应控制在10-12小时,光照强度在5000-10000勒克斯之间。
温度是藻类生长的另一个关键因素,不同品种的藻类对温度的要求也不同。
在常见的养殖藻类中,蓝藻对温度的适应范围最宽,一般在20-30摄氏度之间;绿藻和硅藻的适宜温度为15-25摄氏度。
不同季节,温度变化较大,应根据具体情况及时调整。
三、营养物质的添加藻类的生长和繁殖所需的营养物质包括氮、磷、钾等元素。
在藻类养殖过程中,营养物质的添加需要根据藻类的生理特性和生长阶段确定。
一般来说,基础培养基中的氮源和磷源的浓度偏低,需要通过外部添加来提供足够的营养。
添加的量要根据藻类养殖密度和生长速率来决定,避免过度添加导致水体富营养化。
四、注意事项1.保持养殖环境的稳定性:养殖藻类需要提供稳定的生长环境。
养殖池具备良好的通风和渗透能力,并定期清洗和消毒,避免杂质和病菌的污染。
2.防止污染和寄生虫侵袭:采自自然水体的藻类容易受到污染和寄生虫的侵袭,因此应定期进行监测和筛选,保持培养物的纯度。
藻种培养方法
藻种培养方法一、藻种的两种培养类型一般来说藻种的培养有两种方式:一种是长期保存所需要的培养方法,一种是以实验为目的,短期内保藏藻种的培养方法。
长期培养最主要的问题是选择一种合适的培养基,可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。
最适合长期培养藻种的培养基是agar(固体琼脂培养基),但是使用agar有一个弊端,即培养物保持无菌的问题;我们可以加一层蒸馏水(咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水)在agar上,这种做法可以保证在长期保种的过程中减少agar水分和营养的流失。
长期保种使用的培养基,不要选择营养过于丰富的,因为多数的藻,尤其是丝状藻,在营养丰富的环境生长,会发生形态结构上的变化,如果要做生理生态方面研究,实验材料的形态结构是不能异常的。
适合长期保种的贫营养的培养基有这些:Bold’s基础培养基,以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的a gar,适合长期培养绿藻;Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻;土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。
对于我库提供的藻种,由于藻种长期习惯的原因,建议使用我们提供的原配方来培养,在长期培养的时候,可以适当稀释原培养基,在藻种培养过程中,生长速率会变慢,可以保持其形态结构不变。
另外,长期培养的时候,除了选择适当的培养基,还可以降低温度5~8C(降温的过程最好能循序渐进,突然改变环境温度,可能会导致藻种不适应而死亡)。
光照强度可以减小为原先的一半。
在实验之前3到4周,将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基中(培养基必须灭菌),按照我们给予的培养条件培养,在实验前6天左右,再次接种。
短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。
由于试验的需要,常常要求在短期时间内获得大量的培养物,我们可以采用通气培养和摇床培养。
通气培养可以通CO2或洁净的空气,视培养物的多少来决定通气泵的大小,在通气的硅胶管中设置一个缓冲瓶,塞上灭菌后的脱脂棉,帮助净化空气,如果对通气有更高的要求,可以在通气管中加上一层滤膜。
藻类养殖技术
藻类养殖技术藻类养殖技术是近年来在农业领域广受关注的新兴技术。
随着环境问题和能源危机的日益严峻,藻类的高效利用和养殖技术成为了人们探索的热点。
本文将详细介绍藻类养殖技术的相关知识和应用,以帮助读者更好地了解和利用这一技术。
一、藻类概述藻类是一类原生生物,广泛分布于淡水、海水和土壤等环境中。
它们具有较高的光合作用效率,并且能够吸收二氧化碳和释放氧气,从而在环境净化和气候调节中发挥重要作用。
藻类不仅可以作为食品和饲料资源,还具有生物能源、生态修复和环境保护等多方面的应用潜力。
二、藻类养殖技术的分类根据养殖对象的不同,藻类养殖技术可分为微藻类和大型藻类的养殖技术。
1. 微藻类养殖技术微藻类养殖技术是目前研究的重点之一。
微藻类包括绿藻、蓝藻、硅藻和红藻等,其在食品、饲料、生物能源和生物制药等方面的应用潜力巨大。
2. 大型藻类养殖技术大型藻类主要指海藻,如海带、裙带菜和紫菜等。
它们在食品加工、药物制剂、肥料及农药生产、生态修复等方面具有重要价值。
三、藻类养殖技术的关键因素1. 光照条件藻类的生长需要充足的光照,一般来说,适宜的光照强度是每天8-12小时,光照强度为5000-10000勒克斯。
养殖场所的选址应充分考虑光照条件,避免光线不足或过强的问题。
2. 温度藻类的生长温度范围较广,但不同种类的藻类对温度的要求略有差异。
一般来说,20-30摄氏度是适合大多数藻类生长的温度范围。
3. pH值藻类对不同的pH值有不同的生长适应性。
如海藻适应碱性环境,而硅藻适应弱酸性环境。
因此,在养殖过程中要根据不同种类的藻类合理调整水体的pH值,以促进其生长和繁殖。
4. 养殖介质和养分养殖介质和养分的选择对藻类的养殖效果起着关键作用。
一般来说,采用适当的培养基和合理的养分供应可以提高藻类的生长速率和产量。
四、藻类养殖技术的应用1. 生物能源藻类是生物柴油和生物气的重要原料。
通过合理的养殖技术,可以大量培养藻类,并从中提取油脂,进一步制备生物燃料,以替代传统的化石燃料。
绿水的培养
绿水的培养最重要的是藻种的取得,这个就要看个人所需来培养了,一般来说,藻类可以分淡水以及海水,通常淡水以绿藻以及蓝绿藻最多,培养方式如下:1.采集:可以利用10 Micro的浮游生物网,或者是筛网等来捞取采集,也可以使用马达来抽水过滤。
2.分离并纯化藻种:纯化藻种就是把单一的藻类分离出来。
可以在大量稀释后用毛细管来挑选所需的藻种做纯化培养,也可以先培养在洋菜培养基上来挑选所需的藻种做纯化培养。
3。
培养:(1)必须先从小量培养开始,所谓的小量培养,就是在纯化藻种后先以小烧杯做培养,等到培养到一定数量时,再依次放到更大的容器培养.(2)培养时必须添加营养盐,营养盐可以用鸡粪、猪粪等等发酵后使用,另外有一种比较卫生的方法,就是用台肥加黑糖经过发酵后使用。
(3)照光:每日应固定时间照光约10~12个小时.(4)控制温度:温度应该控制在26度C上下.(5)定期抽换一半的绿水,并且添加营养盐.还有一种更简单的培养方式,但培养出来的藻种会不纯,方法如下:1。
将饲料洒在水中;2.添加硝化菌类以增加水中的营养盐;3。
照太阳光;4。
其它的条件如同第一个方法所示。
经过一段时间后,就可以看到水中已经出现绿藻了。
老绿水又称“肥水”,水质不透明,能见度仅为3~4Cm,初形成时呈鲜艳绿色,看上去油绿油绿的十分舒服,一段时间后变为黄绿色,水中藻类异常丰富,发展到了顶峰阶段,但到达顶峰的同时水质败坏的过程也已经开始,此时必须加大换水量防止崩溃“返青”(水突然变的清澈透底,绿藻变绿藻渣子,透着腥味,这时就该大量换水了).透明的嫩绿水在春夏秋三季很容易转化为老绿水,如果已经转化,通过大量换水是难以使水变回清澈的,只能维持不“返青”即可。
现在用玻璃缸在室内养鱼的鱼友越来越多,要求水质清澈,故老绿水多用于露天渔场、庭院、阳台养鱼的场合。
老绿水是传统养法的最佳用水之一,但这种水具有两面性。
如果你的水已经成为或有可能成为老绿水,劝你了解一下.老绿水的优点这种水中的藻类含量很多,在白天进行光合作用,产生氧,并分解粪便等污物,形成良性循环,作用类似于西方养鱼理论中的硝化菌。
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藻种培养方法一、藻种的两种培养类型一般来说藻种的培养有两种方式:一种是长期保存所需要的培养方法,一种是以实验为目的,短期内保藏藻种的培养方法。
长期培养最主要的问题是选择一种合适的培养基,可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。
最适合长期培养藻种的培养基是agar(固体琼脂培养基),但是使用agar有一个弊端,即培养物保持无菌的问题;我们可以加一层蒸馏水(咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水)在agar上,这种做法可以保证在长期保种的过程中减少agar水分和营养的流失。
长期保种使用的培养基,不要选择营养过于丰富的,因为多数的藻,尤其是丝状藻,在营养丰富的环境生长,会发生形态结构上的变化,如果要做生理生态方面研究,实验材料的形态结构是不能异常的。
适合长期保种的贫营养的培养基有这些:Bold’s基础培养基,以及该培养基加上蛋白胨或者琼脂制成的a gar,适合长期培养绿藻;Allen及其改良后的配方可以长期培养一般常见的蓝藻和绿藻;土水培养基和它的一个改良的系列也实用培养多数藻种。
对于我库提供的藻种,由于藻种长期习惯的原因,建议使用我们提供的原配方来培养,在长期培养的时候,可以适当稀释原培养基,在藻种培养过程中,生长速率会变慢,可以保持其形态结构不变。
另外,长期培养的时候,除了选择适当的培养基,还可以降低温度5~8 C(降温的过程最好能循序渐进,突然改变环境温度,可能会导致藻种不适应而死亡)。
光照强度可以减小为原先的一半。
在实验之前3到4周,将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基中(培养基必须灭菌),按照我们给予的培养条件培养,在实验前6天左右,再次接种。
短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。
由于试验的需要,常常要求在短期时间内获得大量的培养物,我们可以采用通气培养和摇床培养。
通气培养可以通CO2或洁净的空气,视培养物的多少来决定通气泵的大小,在通气的硅胶管中设置一个缓冲瓶,塞上灭菌后的脱脂棉,帮助净化空气,如果对通气有更高的要求,可以在通气管中加上一层滤膜。
使用摇床培养,需要注意藻种的生理周期。
二、培养基的选择和配制1、培养基的选择① BG11是我库培养蓝藻使用最广泛的培养基。
除了极少部分蓝藻,大部分都使用BG11。
按照我们给的配方配制好后高压灭菌,BG11经常会产生絮状沉淀。
这是因为其中有Ca+和CO32-,我们可以在灭菌后再超净台上用灭菌过的注射器来加两者之中的另外一种。
通常我们建议将氯化钙的母液单独灭菌后在无菌室保存,在配置好BG11的工作液并灭菌之后,在超净台上用注射器将氯华钙加入。
② SE是我库用来培养常见的绿藻所使用的培养基。
一般来说,如果配制了母液,用母液来配培养基,灭菌后是不会产生沉淀的。
配置的时候注意先将所需要的蒸馏水准备好,将需要的药品逐个加入,等到一种药品充分溶解之后再加入第二种。
另外,土水在蒸馏过滤后,是不需要灭菌的,因为高压灭菌的过程会让其中的一些营养成分损失。
③水是培养基成分中很重要的一个方面。
配培养基,可以取蒸馏水、自来水、去离子水,也可以取藻种采集地的水。
使用经过处理的水,如双蒸水、去离子水,有时候并不合适培养,因为仪器在处理过程中会带入微量的有毒物质。
采集藻种采集地的水来培养是最理想的,但是需要经过一些处理,处理的手段和过程要尽可能保持其营养成分不变。
如果是咸水或者海水的藻类采集地采集的水,应将其置于5℃的黑暗中,保持6个月。
如果是泉水或者湖水等淡水的水源,水样置于20℃的室温,立即通过活性炭方法处理:每升水加2g活性炭,搅拌一小时后,过滤,并重复此过程3~4次。
④咸水和微咸水的藻类需要的人工咸水的合成效果关键在于如何蒸馏;还有一些水华蓝藻难以培养,主要原因是因为在野外生长时,通常底泥提供的营养元素可以溶在水中,但是在实验室培养,经过高压灭菌,很多营养都损失了。
所以我们建议不用高压灭菌法,使用巴斯德(pasteur)灭菌方法:加热到73~78 ℃,保持15~20分钟,间隔24小时灭菌一次,一共三次。
2、培养基的配制主要介绍一下培养基的配制方法和灭菌方法:1. 配制贮液。
培养基一般由三个方面组成:微量元素、大量元素、维生素。
准备100ml~200ml的试剂瓶若干,洗净,灭菌。
按照我们提供的培养基配方中贮液的浓度,配制大量元素和微量元素的贮液放在以上准备的试剂瓶(遇光易反应的药品,请放在棕色试剂瓶),置于4℃左右的冰箱保存。
将需要使用的维生素(最好是针剂),也置于4℃左右的冰箱保存。
2. 配制培养基。
一般可以配制1000ml左右的培养基留待使用。
先准备1000ml大烧杯,洗净。
按照我们培养基配方中的wo rking solution,先加入需要的蒸馏水,然后用移液管向其中加配制好的贮液(注意,不可先加贮液,最后加蒸馏水)。
一边加,一边搅拌,依次加入所有组分,最后留下维生素不加。
摇匀。
三、灭菌①、对培养器材的灭菌:灭菌在藻种的培养中,是十分重要的一个环节。
藻种培养、转接、培养基制备等等,任何一个环节都必须使用灭菌的器械,否则藻种都会染菌,甚至染上其它的藻类。
所有的培养藻种所需要的三角瓶、试管,烧杯,接种环,吸管,注射器,针头等培养,转接藻种所需要的器材都必须经过高压灭菌,配制培养基所需要的移液管、用来装培养基所需要的瓶也必须经过灭菌,转接藻种需要的滴管、接种环、涂布所需要的玻璃棒、培养皿等都必须灭菌。
培养所需要的三角瓶、试管、培养皿,灭菌前洗净,三角瓶可以用牛皮纸内衬粗滤纸来包住瓶口,用棉线缠紧;或者自做棉塞,外部再加上牛皮纸包住;试管必须和棉塞或者试管塞一起用牛皮纸包好灭菌。
培养皿可以5~10个一起用牛皮纸包好灭菌。
移液管、滴管、接种环都可以分别用牛皮纸包好灭菌。
所有玻璃器皿都采用高压灭菌:在1.5大气压下保持30分钟。
使用之前不能在敞开的环境打开,只能在超净台打开。
灭菌结束后,放在烤箱烘干。
所有灭菌后的器皿、培养基只能在超净台打开使用。
使用巴斯德灭菌法灭菌的原水,也不能在超净台之外的地方打开使用。
长期没有使用了但曾经灭菌过的器材或培养基,如果需要使用,必须重新灭菌一次。
②、培养基灭菌注意事项:配制培养基的时候一些经过高压灭菌成分会发生改变的微量元素,应在灭菌后在超净台上用灭菌的注射器添加。
如维生素,但是维生素的灭菌也必须很严格,往往藻种污染到细菌都是因为维生素引起的,可以使用0.22µm或0.45µm的滤膜来过滤维生素溶液。
土水(土壤侵出液)在蒸馏过后只能使用过滤的方法灭菌,不能经过高温高压灭菌。
洗净若干带橡皮塞的盐水瓶(800ml或500ml),将培养基注入,塞上橡皮塞。
然后剪一小块纱布,包在橡皮塞外面,用棉线将塞子和瓶子缠紧,这样保证在灭菌的过程中,培养基不会把橡皮塞冲开。
最后在橡皮塞头上插一个小针头,这个做法可以在灭菌的时候放气,也是为了保证培养基不会在灭菌的时候把橡皮塞冲开。
然后开始灭菌。
灭菌结束后,立即降针头拔出。
将培养基放置在洁净的地方,免受污染。
四、藻种培养条件1、光照培养一个藻种最初,先将少量的藻种转接到新鲜的培养基中,放在冷白荧光灯管(200-400footcandle)保持7~10天,观察最初的生长状况。
生长较好以后,移到低光照区域(50-100footcandle),保持低速率的生长。
实验需要的藻种的培养中,我们推荐使用冷白荧光管来作为光照来源。
因为如果使用白炽灯泡和直射的日光作为光源的话,光照会产热,改变培养的温度。
在阳光照射下培养温度通常可以上升10℃,如果一定需要日光作为光源,应将培养物放置在窗前,窗上用纸挡住。
培养的时候,光照与培养物的细胞密度也有关,一般密度比较小的时候,不适合使用较强烈的光照。
我库提供的藻种,在细胞密度在105数量级左右时,我们推荐在2000lux的光照下培养。
接种后,细胞密度很低的情况下,需要放置在弱光照下培养,随着细胞密度增大,逐渐加强光照。
培养藻类,每天要定期给一段时间的置于黑暗中培养。
大多数藻种的光暗比都是12h:12h,也有16h:8h。
2、温度大多数淡水藻都可以在20~25℃左右生长,高于30℃有些蓝藻不能坚持到24小时就会死亡。
一般所有的绿藻生长的温度相对比较广一些。
在10℃左右会几乎停止生长,但是不会死亡。
非水华类的蓝藻更加可以耐低温的环境,低于10℃还可以生存。
但是水华类的蓝藻对温度要求更加精确一些,过高或者过低的温度都会死亡,即使留下待萌发的孢子,但是在实验室不具有底泥萌发的条件,藻种是不会再萌发出来的。
我库的大部分藻种,没有特别说明,其培养温度都是20~25℃。
3、特殊藻种培养要求衣藻如果在营养丰富的培养基中生长,都会有变成类似四集藻型的趋势。
所以建议培养的时候稀释一下SE 培养基,或者用土水培养基来保持它的形态结构。
团藻属的藻类需要勤接种,使用营养太丰富的培养基,它可能会由群体散开成为单个游动的细胞。
培养含有叶绿素的鞭毛藻,可以用土水培养基加上一粒豌豆;无色的鞭毛藻,可以用土水培养基加上一两粒谷粒或者小麦。
硅藻可以使用很多种培养基来培养,但是培养基中必须含有硅,建议硅藻的培养基中Na2SiO3 . 9H2O达到10-30mg/l。
藻种的采集、分离技术浮游藻类定性样品可以用浮游生物网25#网采集,在自然水体中采集藻类的时候,如果为了分离和检验藻类生活水体的相关指标,通常还需要采集自然水体作分析用。
浮游藻类定量样品用采水器采集1升水,装瓶加入5~10ml鲁哥氏液固定,并贴上标签,并需要记录水体pH值,气温和水温,地点和日期附着生长的藻类和丝状藻类可以从碎石,碎叶或者其它一些可能供藻类着附生长的植物上刮下采集,装瓶。
采集到的活体样品,应在短期内观察,分离;很多种类,尤其是鞭毛类的藻会在很短的时间内死亡。
要确定所培养的藻种是一个纯的品系,必须从样品中分离出单克隆。
一个纯的藻的单克隆必须是由一个单细胞繁殖而来。
丝状藻的纯品系,必须来自一根丝体上的几个连续的细胞。
介绍几种分离的技术:1.毛细管清洗技术选择直径为3~4mm的软玻璃管,或者其它任何适合拉成毛细管的巴氏滴管,用镊子夹住滴管的前端,放在酒精喷灯的外焰上,直到玻璃变软,迅速移离火焰,同时快速拉成毛细管。
由于拉的时候的力度和掌握时机的不同,毛细管的口径会有不同,所以经常练习,达到熟练,可以将毛细管拉成自己需要的口径,即刚刚适合要挑取的藻细胞进入的大小。
然后用镊子把毛细管头端夹断,注意夹断的时候的用力均匀,尽量要保证毛细管口平滑,避免成为锯齿状边缘。
在管的另一段加上胶吸头或者软的橡皮管。
用滴管吸取少量采集样品滴在灭菌后的点滴板上的凹陷上,置于解剖镜下观察。
如果样品中藻细胞浓度很大,种类繁多,可以将样品用蒸馏水或者培养基稀释。
然后在至少6~12个凹陷上滴入蒸馏水和培养基。