脆弱拟杆菌的分离

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厌氧菌培养与鉴定技术

厌氧菌培养与鉴定技术

ANAEROBIC/HYPOXEMIC WORKSTATION历史:所有这些罐子,其培养皿/样本操作均在有氧环境中进行,而仅在培养时才置于厌氧环境中。

ELECTROTEKELECTROTEK完善的厌氧培养技术始于适当的样本采集和运输。

适当地采集试样,并快速置于厌氧运输小瓶中ELECTROTEK厌氧罐由于不能提供操作过程的厌氧环境,并且因容量的限制而无法实现灵活的样本厌氧培养,故其应用也越来越受到限制。

一台允许所有操作与培养综合功能的厌氧工作站使厌氧菌实验避免了氧气暴露的风险。

因不当的制备或贮存,使培养介质含有氧气或氧化性物质,最终将抑制厌氧菌的生长。

任何时候都应当使用经预还原处理的厌氧培养介质。

ELECTROTEK专性厌氧菌培养最好是在经预还原处理且厌氧灭菌的培养基上(PRAS培养基)。

养肉汤。

预还原是指氧气通过培养基组分物质化学移除。

ELECTROTEK以下为常见的主要用于临床标本厌氧菌分离的培养基:1、布鲁氏菌血琼脂2、卡那霉素/万古霉素血琼脂(KVLB琼脂)3、拟杆菌属胆汁七叶甙琼脂(BBE琼脂)4、苯乙醇琼脂(PEA琼脂)5、硫乙醇酸钠肉汤ELECTROTEKELECTROTEK布鲁氏菌血琼脂:含有血细胞允许溶血试验,可使特定微生物快速生长非选择性培养基,所有厌氧菌均能很好生长同样,疾病预防控制中心的厌氧菌血琼脂也可被使用。

ELECTROTEK卡那霉素/万古霉素血琼脂(KVLB ):革兰氏阴性厌氧杆菌选择性培养基。

绝大多数的革兰氏阴性兼性厌氧杆菌被卡那霉素抑制,绝大多数革兰氏阳性菌被万古霉素抑制。

产色厌氧菌(如普雷沃菌属和卟啉单胞菌属)在KVLB 琼脂上产生许多色素。

ELECTROTEK 拟杆菌属胆汁七叶甙琼脂(BBE ):绝大多数厌氧菌被庆大霉素和胆汁抑制,只有脆弱拟杆菌群作为唯一的厌氧菌能在此琼脂上快速生长。

当细菌(如脆弱拟杆菌群)分解七叶甙而生长于此琼脂上时,将显现深棕色反应。

ELECTROTEK苯乙醇琼脂(PEA ):该介质支持绝大多数专性厌氧菌生长且抑制兼性厌氧菌生长(如肠杆菌科),专性厌氧菌可呈弥漫性或过度生长。

急性肠炎患者血培养检出脆弱拟杆菌1例

急性肠炎患者血培养检出脆弱拟杆菌1例

急性肠炎患者血培养检出脆弱拟杆菌1例
庄云菁;潘俊均;修宁宁;吴志俏;邓沛汶;温海生;隋洪
【期刊名称】《实验与检验医学》
【年(卷),期】2018(36)5
【摘要】脆弱拟杆菌是一种条件致病菌.常寄生于人体腔道内氧化还原电势较低的部位.如口腔、肠道和女性生殖道等.主要引起内源性感染。

可侵人血流引起菌血症或败血症.由于脆弱拟杆菌常在厌氧环境下生长.具有一定的隐匿性。

近几年来.对于脆弱拟杆菌引起的菌血症的也陆续地出现的报道.应引起临床和实验室人员足够的重视。

【总页数】2页(P802,804)
【作者】庄云菁;潘俊均;修宁宁;吴志俏;邓沛汶;温海生;隋洪
【作者单位】东莞康华医院检验科,广东东莞 523000;东莞康华医院检验科,广东东莞 523000;东莞康华医院检验科,广东东莞 523000;东莞康华医院检验科,广东东莞 523000;东莞康华医院检验科,广东东莞 523000;东莞康华医院检验科,广东东莞 523000;东莞康华医院检验科,广东东莞 523000
【正文语种】中文
【中图分类】R
【相关文献】
1.一例血培养脆弱拟杆菌的鉴定过程及思考 [J], 李慧敏;马清光
2.感染性心内膜炎患者血培养检出副嗜沫嗜血杆菌1例 [J], 张之烽;秦芳
3.从41例急性化脓性阑尾炎手术中检出脆弱拟杆菌、产黑色素类杆菌 [J], 刘继英
4.炎症性肠病是否与螺旋杆菌及肠产毒性脆弱拟杆菌感染有关? [J], Basset
C.;Holton J.;Bazeos A.;陈云茹
5.脆弱拟杆菌和大肠杆菌协同作用增加结肠癌发生风险 [J], 王丽
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简介美国临床实验室标准化委员会最新推荐厌氧菌药敏试验方法及评价

简介美国临床实验室标准化委员会最新推荐厌氧菌药敏试验方法及评价
美国nccls2001?最新厌氧苗药敏试验方法第5版对何时擞常规药敏试验和耐药监测时提出?一定对所有分离的厌氧菌均做药敏试验但遇特殊感染如脑脓肿心内膜炎关节感染修复装置感染血管移植和菌血症无菌部位分离的厌氧菌均应擞药敏试验
维普资讯
中华检 暄医学杂志 20 年 5 02 旦箜 堑 堂萋 塑
脆弱 拟 杆 菌 是 临床 标 本 中分 离 率 最 高 的厌 氧菌 之 一 , 耐 药 发 生率 最 高 的 是对 青 霉 素 类 和 克 林 霉 素 。因 产 内 酰 胺 酶或 其 他 酶 使 抗 生 素 失 活 , 致 对 青 霉 素 和 氪 苄 西 林 耐 导 药 。 大 多数 脆 弱 拟杆 菌 产 目内 酰 胺 酶 , 阳性 率 为 9 %L 4 I。 L J 2 年 来 . 弱 拟 杆 菌 对 克 林 霉 素 耐 药 率 从 1 上 升 至 0 脆 %
属 , 梭 杆 菌 、 胆 菌 和 S t rl 。 棱 嗜 u ee a t l
厌氧 菌 耐 药 机 制 的 形 成 主 要 是 产 酶 ; 胞 壁 通 透 性 改 细 变 , 抗 生 素 不 能 穿 透 细 胞 壁 , 降低 抗 生 素摄 取 ; 抗 生 素 使 或 使
外排 ; 线粒体突变和耐药基因传递等几种类型 ” 。 J

通过 接 台 方 式 在 厌 氧菌 之 间传 递 耐 药 因 子 , 厌 氧 菌 耐 致
药。革兰阳性厌 氧菌如产气 荚膜梭菌 和难辨 梭菌等, 通过 接
台方 式 . 携 带 耐 药 基 因 的 质 粒 传 递 给 另 一 些 菌 株 。 拟 杆 菌 将 属对 克林 霉 素耐 药 机 制 与 之 相 似 , 座 子 将 染 色 体 上 的 耐 药 转 基 因 传递 给 敏 感 菌 株 。 转 座 子 T5 3 no 0是 染 色 体 上 一 段 450b +/ 0 p 可 转 移 基 因 , 它 不 象 典 型 的 革 兰 0 p 一500b 的 但 阴 性 菌 转 座 子 , 有 可 被 检 测 的 终 端 重 复 序 列 。T S 3 具 n00将 其 携带 的克 林 霉 素 耐 药 基 因 e F/ 同 源 序 列 转 移 到 质 粒 上 r a及 m 的 tF基 因 . 敏 感 菌 株 产 生 耐 药 性 e t 使 耐药 基 因 的转 移 与 环 境 有 关 , 杆 菌 属 内 传 递 的 耐 药 基 拟 因 的接 台 转 座 子 . 具有 少 见 特 征 . 即低 浓 度 抗 生 素 可 极 大 刺

微生物分离鉴定步骤

微生物分离鉴定步骤

微生物分离鉴定步骤
微生物的分离和鉴定是微生物学研究中非常重要的步骤,它可
以帮助我们了解微生物的种类和特性。

通常,微生物的分离和鉴定
包括以下步骤:
1. 样品收集,首先需要收集来自环境、生物体表面或其他来源
的微生物样品。

这可能涉及到采集土壤、水样、食品、空气或生物
体组织等样品。

2. 稀释和接种,将样品进行适当的稀释,然后在培养基上进行
接种。

这有助于分离出单一的微生物菌落,以便进行后续的鉴定。

3. 培养,接种后,将培养皿放入恒温培养箱中进行培养。

不同
类型的微生物可能需要不同类型的培养条件,如温度、氧气含量等。

4. 分离,在培养一段时间后,可以观察到菌落的形成。

选择单
一的菌落,进行分离培养,以获得纯培养物。

5. 形态学特征观察,观察微生物的形态学特征,包括细胞形态、大小、颜色等,可以初步了解微生物的特征。

6. 生理生化特性测试,进行一系列生理生化特性测试,如对不同营养物质的利用、酶活性、氧气需求等,以进一步了解微生物的特性。

7. 分子生物学鉴定,利用分子生物学方法,如16S rRNA序列分析,可以对微生物进行更精确的鉴定,包括确定其属种和种的分类位置。

以上是常规的微生物分离和鉴定步骤,通过这些步骤可以全面地了解微生物的特征和分类位置。

值得注意的是,不同的微生物可能需要不同的鉴定方法,有时可能需要结合多种手段进行鉴定,以确保鉴定结果的准确性。

脆弱拟杆菌荚膜多糖a 单糖组成

脆弱拟杆菌荚膜多糖a 单糖组成

脆弱拟杆菌荚膜多糖a 单糖组成脆弱拟杆菌(Bacillus subtilis)是一种常见的革兰氏阳性细菌,广泛存在于自然环境中,如土壤、水体和空气中。

它以其多样的代谢途径和生理特性在生物学研究中扮演着重要角色。

而脆弱拟杆菌荚膜多糖A作为脆弱拟杆菌荚膜的主要成分之一,具有重要的生物学功能和应用潜力。

脆弱拟杆菌荚膜多糖A的单糖组成主要包括葡萄糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖等。

这些单糖以特定的比例和排列方式连接在一起,形成复杂的多糖结构。

这种多糖结构赋予了脆弱拟杆菌荚膜多糖A许多独特的性质和功能。

脆弱拟杆菌荚膜多糖A具有良好的生物相容性和生物降解性。

它可以被人体内的酶降解,不会对人体产生毒性和过敏反应。

这使得脆弱拟杆菌荚膜多糖A成为一种理想的生物材料,在医学领域有着广泛的应用前景。

例如,它可以作为药物传递系统的载体,帮助药物准确地传递到靶位,提高治疗效果。

脆弱拟杆菌荚膜多糖A具有优异的抗氧化和抗炎活性。

研究表明,脆弱拟杆菌荚膜多糖A可以清除自由基,减少氧化应激对细胞的损伤,具有抗衰老和抗肿瘤的潜力。

此外,它还可以抑制炎症反应,缓解炎症引起的组织损伤。

这些活性使得脆弱拟杆菌荚膜多糖A成为一种重要的天然药物资源,有望应用于预防和治疗各种疾病。

脆弱拟杆菌荚膜多糖A还具有良好的附着性和保护性。

研究发现,脆弱拟杆菌荚膜多糖A可以与细胞表面的受体结合,形成稳定的膜结构,增强细胞的抗外界环境的能力。

同时,它还可以防止细菌和其他微生物的侵入,起到保护细胞的作用。

这使得脆弱拟杆菌荚膜多糖A在食品工业和生物防治领域有着广泛的应用前景。

脆弱拟杆菌荚膜多糖A作为脆弱拟杆菌荚膜的主要成分之一,具有多样的生物学功能和应用潜力。

它的单糖组成包括葡萄糖、半乳糖、甘露糖和鼠李糖等,这些单糖以特定的比例和排列方式连接在一起,形成复杂的多糖结构。

脆弱拟杆菌荚膜多糖A具有生物相容性、生物降解性、抗氧化活性、抗炎活性、附着性和保护性等特点,有望在医学、食品和生物防治等领域得到广泛应用。

一例血培养脆弱拟杆菌的鉴定过程及思考

一例血培养脆弱拟杆菌的鉴定过程及思考

一例血培养脆弱拟杆菌的鉴定过程及思考李慧敏;马清光【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】2页(P775-776)【关键词】脆弱拟杆菌;血培养;结肠癌【作者】李慧敏;马清光【作者单位】上海市大场医院,上海200444;上海市大场医院,上海200444【正文语种】中文【中图分类】R446.5脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)作为一种条件致病菌,当宿主黏膜受损时,可侵犯黏膜下层,引起感染,对结肠癌、直肠癌的发生也有促进作用[1]。

大场医院在一例直肠癌晚期患者血样本中培养出脆弱拟杆菌,现报道如下。

一、病例资料患者,男,65岁,2014年10月17日以“升结肠癌T4NxM1(肝)IV期KPS50,并脑梗死后”诊断入院。

入院当天患者发热(体温38.6℃),白细胞(white blood cell,WBC)计数8.59×109/L,中性粒细胞百分比79.4%。

住院后,患者呈间断性发热,中性粒细胞百分比一直较高。

11月17日患者WBC计数13.69×109/L,中性粒细胞百分比93.0%,体温高达42℃,遂从双侧肘静脉无菌采集血样本送检血培养,均为需氧瓶(安图公司生产的双相需氧瓶)。

置35℃培养24h观察,双瓶均有明显浑浊,略产汽。

涂片镜检,查见少量较粗、长短不均的革兰阴性杆菌;同时转种血平板和巧克力平板(上海科玛嘉公司),并做直接药物敏感性试验,上西门子NC50鉴定和药物敏感性复合板条,鉴定并做直接药物敏感性试验,10%CO2环境35℃培养24h后,血平板、巧克力平板和NC50均未见细菌生长。

后重新涂片,革兰染色竟未查见细菌;而同一份血样本行瑞士染色,可见大量的清晰的较粗大的紫色杆状细菌。

但是巧克力平板和血平板继续放置10%CO2环境48和72h 仍未见细菌生长。

20日与临床医生联系并告知涂片结果时,得知患者已于当日死亡。

因大场医院鉴定条件有限,遂于11月21日将此血培养瓶直接送至长征医院检验科细菌室急性进行分离鉴定。

拟杆菌

拟杆菌

(一)生物学特性革兰阴性杆菌,长短不一,呈多形性,菌体常有不规则的膨胀,能形成荚膜,无芽孢、无鞭毛。

专性厌氧,在牛心脑浸液血琼脂平板上厌氧培养48-72h,菌落圆形,中心稍凸,灰白色半透明。

大多数菌株不溶血,在含20%胆汁培养基中生长良好,氯化血红素有促进生长作用。

能分解葡萄糖、乳糖和蔗糖。

本属模式种为脆弱拟杆菌。

(二)致病性在拟杆菌引起的各种感染中,以脆弱拟杆菌最常见。

1、致病物质有内毒素、荚膜、菌毛以及所产生的肝素酶和胶原酶。

拟杆菌的内毒素活性比其他革兰阴性菌的弱,原因是脂多糖结构不完整。

荚膜多糖是非常重要的致病因子,能引起腹腔及各器官的化脓性病变。

如将脆弱拟杆菌中提取的荚膜多糖注射到小鼠腹腔,可形成脓肿;而从其他细菌(肺炎链球菌和大肠埃希菌)提取的荚膜多糖,不形成脓肿。

肝素酶可降解肝素,促进凝血,有利于血栓性静脉炎和迁徙性脓肿的形成,胶原酶则有利于细菌的扩散。

拟杆菌主要引起颅内、腹腔和盆腔的等部位感染。

2、致病条件拟杆菌和其他无芽孢厌氧菌引起的感染,一般只有在特定条件下才能发生;促进感染的可能因素有:①屏障作用受损:手术、拔牙和穿孔等使细菌侵入非正常寄居的部位。

②菌群失调:长期使用抗生素使体内一种或几种厌氧菌得到优势增长,破坏了正常菌群的平衡。

如脆弱拟杆菌对氨基糖苷类抗生素有耐药性。

③机体抵抗力降低:在治疗中使用激素、免疫抑制剂或X线,恶性肿瘤、糖尿病和大面积烧伤等均可造成免疫功能下降;局部组织供血障碍,如血管损伤,造成局部厌氧微环境,有助于厌氧菌生长繁殖。

3、感染特点拟杆菌等无芽孢厌氧菌引起的感染有如下特征,可作为临床诊断厌氧菌感染的参考:①感染部位接近黏膜表面,发生在口腔、鼻窦、鼻咽部、胸腔、腹腔和肛门会阴附近的炎症、脓疡及其他深部脓疡;②分泌物为血性或黑色,并有恶臭;③分泌物直接涂片镜检可见到细菌,而一般培养则无细菌生长;④长期使用氨基糖苷类抗生素如链霉素、卡那霉素、新霉素、庆大霉等治疗无效。

16SrRNAPCR鉴定脆弱类杆菌

16SrRNAPCR鉴定脆弱类杆菌

卞广林等: #,4 5&67 $%& 鉴定脆弱类杆菌
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高级结构 及 功 能 在 生 物 进 化 的 历 史 上 保 糖体 &67 的一级结构、 即 持相对恒定。细菌中编码 5&67 操纵子的基因由 8 部分组成,
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结果与讨论
电泳结果的检测 琼脂糖凝胶电泳 法 分 析 $%& 产 物 , 以 ’(!))) 为 分 子 量 标
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讨论 脆弱类杆菌的传统培养鉴定方 法 是 先 进 行 厌 氧 培 养 , 后 根
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技术方法
2:% ?$’@ A*$ 鉴定脆弱类杆菌
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河南 郑州 BC99C8 ; 81 郑州大学 基础医学院, 河南 郑州 BC99C8 21 河南省医学科学研究所, [摘要] 目的: 应用 2:% ?$’@ 序列设计 A*$ 引物鉴别脆弱类杆菌。 方法: 通过脆弱类杆菌 2:% ?$’@ 序列特异性位点设计 引物, 对 B 株脆弱类杆菌及大肠杆菌、 乳酸杆菌、 嗜热链球菌等进行 A*$ 扩增。应用琼脂糖电泳法对 A*$ 扩增产物进行特 脆弱类杆菌在 23: DE 左右出现特异性条带, 而其他细菌均未出现特异性条带。结论: 通过 2:% ?$’@ 序列 异性检测。结果: 中特异位点设计引物进行 A*$ , 可特异性鉴定脆弱类杆菌。 [关键词] 脆弱类杆菌; 2:% ?$’@; A*$ [中图分类号] FC9GH F;G;128G [文献标识码] (

河北医科大学第四医院临床分离厌氧菌分布及耐药性分析

河北医科大学第四医院临床分离厌氧菌分布及耐药性分析

近年来,随着临床微生物检验的发展,厌氧菌的检出率逐步提高,由厌氧菌引起的机会性感河北医科大学第四医院临床分离厌氧菌分布及耐药性分析冯军花, 何 京, 唐 杰, 李蓉蓉, 邓艳丽, 张金艳摘要: 目的 分析厌氧菌的临床分布情况及耐药程度,对比琼脂稀释法与E 试验法在脆弱拟杆菌药敏试验中的差异,探讨E 试验的应用价值。

方法 收集2017年1月—2019年12月河北医科大学第四医院临床分离的137株厌氧菌,采用16S rRNA 测序技术、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术、传统生化反应卡鉴定菌株,琼脂稀释法和E 试验法进行药物敏感性试验。

结果 137株厌氧菌中分离自血液样本居多,占67.2%(92/137),其中感染菌种主要为脆弱拟杆菌,占79.3%(73/92)。

脆弱拟杆菌行琼脂稀释法对甲硝唑、氯霉素、亚胺培南、美罗培南、阿莫西林-克拉维酸、四环素、克林霉素的耐药率分别为1.2%、6.1%、22.0%、22.0%、41.5%、79.3%、96.3%,脆弱拟杆菌行E 试验法对以上药物的耐药率分别为1.2%、6.1%、22.0%、22.0%、41.5%、85.3%、96.3%。

结论 该院临床分离厌氧菌主要以脆弱拟杆菌为主,对甲硝唑的耐药率最低,对克林霉素的耐药率最高,E 试验法与琼脂稀释法在抗菌药物对脆弱拟杆菌的MIC 分布上无差异。

关键词: 厌氧菌; 脆弱拟杆菌; 流行病学; 耐药性中图分类号:R378 文献标识码:A 文章编号:1009-7708 ( 2021 ) 03-0340-06DOI: 10.16718/j.1009-7708.2021.03.017Distribution and antibiotic resistance of clinical anaerobic isolates in the Fourth Hospital of Hebei Medical UniversityFENG Junhua, HE Jing, TANG Jie, LI Rongrong, DENG Yanli, ZHANG Jinyan (Department of Laboratory Medicine, the Fourth Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050011, China )Abstract: Objective To survey the distribution and antibiotic resistance of anaerobic isolates, and analyze the results of antimicrobial susceptibility tests of Bacteroides fragilis by agar dilution versus Etest method. Methods A total of 137 strains of anaerobic bacteria were isolated from January 2017 to December 2019 in the Fourth Hospital of Hebei Medical University. These strains were identified by 16S rRNA sequencing, matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight-mass spectrometry, and traditional biochemical card. The antimicrobial susceptibility was tested by both agar dilution and Etest methods. Results Most of the anaerobic bacteria were isolated from blood (67.2%), primarily B. fragilis (79.3%). Agar dilution test reported that 1.2%, 6.1%, 22.0%, 22.0%, 41.5%, 79.3%, and 96.3% of the B. fragilis isolates were resistant to metronidazole, chloramphenicol, imipenem, meropenem, amoxicillin-clavulanic, tetracycline, and clindamycin, respectively. Etest results showed that 1.2%, 6.1%, 22.0%, 22.0%, 41.5%, 85.3%, and 96.3% of the B. fragilis isolates were resistant to the above antibiotics, respectively. Conclusions Most of the anaerobic pathogen isolated from patients are B. fragilis . Among the antibiotics tested, metronidazole is the most active anti-anaerobic agent, but clindamycin is the least active one. No difference is found in the MIC results between Etest and agar dilution methods.Keywords: anaerobes, Bacteroides fragilis , epidemiology, antibiotic resistance·论著·作者单位: 河北医科大学第四医院检验科,石家庄 050011。

益菌抑菌含有BF839脆弱拟杆菌BF839活性益生菌

益菌抑菌含有BF839脆弱拟杆菌BF839活性益生菌
• 抵抗细菌病毒的感染:提高免疫力,清除有害菌 对身体的伤害
• 预防和治疗某些疾病:如肠道综合症、妇科疾病、 呼吸道感染、过敏、口臭、胃溃疡等。
双歧杆菌益处多多
• 是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出 的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌,末端常常分叉,故名双歧 杆菌,且对人体具有如下营养作用:
• 1、维护肠道正常细菌菌群平衡,抑制病原菌的生长,防 治便秘、下痢和胃肠障碍等;
• 2、抗肿瘤; • 3、在肠道内合成维生素、氨基酸和提高机体对钙离子的
吸收; • 4、降低血液中胆固醇水平,防治高血压; • 5、改善乳制品的耐乳糖性,提高消化率; • 6、增强人体免疫机能,预防抗生素的副作用,抗衰老,
• 双歧杆菌和乳酸杆菌只能通过补充人体所需的部 分有益菌来平衡人体微生态平衡,而不能修复人 体先天出现的免疫缺陷和后天药物、疾病造成的 免疫紊乱,无法全方位地提高人体免疫力。
BF-839脆弱拟杆菌独具优势三:功效多 • BF839脆弱拟杆菌能
调节免疫、抑制肿瘤、 抑制病菌、促进消化 吸收、提高机体免疫 力、增加免疫球蛋白 的产生、促进婴儿的 生长发育等。这是双 歧杆菌和乳酸杆菌远 远达不到的。

3.增强免疫系统的功能

能够自动识别并激发巨噬细胞的吞噬能力,能靶向作用于有害毒
素,将其包裹并吞噬,恢复人体菌群平衡,修复免疫系统。。

4.防治妇科疾病

能快速恢复阴道内菌群平衡,增强生殖系统巨噬细胞的吞噬能力,
杀灭念珠菌、滴虫、大肠杆菌等有害菌,恢复阴道PH酸性值,恢复
ห้องสมุดไป่ตู้
生殖系统的免疫力,防止有害菌再次入侵,从而达到康复妇科炎症的
BF-839脆弱拟杆菌——第三大新菌种

脆弱拟杆菌在炎症性肠病、结直肠癌促进、调控及防治中的作用

脆弱拟杆菌在炎症性肠病、结直肠癌促进、调控及防治中的作用

徼咳物学番志2020年8月第40卷第4期JOURNAL OF MICROBIOLOGY Aug.2020Vol.40No.41•大家专版•吕志堂,博士,河北大学生命科学学院教授,河北省微生物多样性研究与应用实验室主任,河北大学“毓秀名师”,兼任河北省微生物学会理事长、中国研究型医院学会空间微生物与感染专业委员会常务委员、《微生物学杂志》编委、河北省生物科学类教指委委员、河北大学教指委委员等。

长期从事微生物资源与系统学、空间微生物学及肠道菌研究。

成功实现微生物转化法生产5-軽基色氨酸,在国际上独家实现产业化生产,已基本取代传统的以加纳籽为原料的化学提取生产工艺,具有显著的经济和社会效益,占全球市场的80%。

在肠道菌群重建与慢性病辅助治疗方面提出了菌群重建中不同微生物时序定殖的理论,拥有2项发明专利。

建立了养殖废水资源化利用技术,拥有3项发明专利。

脆弱拟杆菌在炎症性肠病、结直肠癌促进、调控及防治中的作用吕志堂,许晓娜,张怡君(河北大学生命科学学院生命科学与绿色发展研究院河北省微生物多样性研究与应用实验室,河北保定071002)摘要近年来人们越来越重视肠道菌群在肠源性疾病的发生、发展及防治中所发挥的作用脆弱拟杆菌(Bacteroides fragile,BF)是定殖于人体肠道中的共生菌,对肠道健康有多种影响,是健康人群及腹泻、腹膜炎、腹内脓肿、败血症、炎症性肠病等临床病例最常见的肠道微生物"随着人们对脆弱拟杆菌的深入研究,发现脆弱拟杆菌与炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD),结直肠癌(colorectal cancer,CRC)有密切关系通过对脆弱拟杆菌与IBD.CRC之间的关系进行综述,探究脆弱拟杆菌在IBD、CRC促进、调控及防治中的作用,为IBD、CRC的早期干预和治疗提供新思路,为开发基于脆弱拟杆菌的药物提供数据与思路关键词脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis,BF);炎症性肠病炎症性肠病(inflannnatory bowel disease,IBD);结直肠癌(colorectal cancer,CRC);肠道菌群中图分类号Q939.93文献标识码A文章编号1005-7021(2020)04-0001-08doi:10.3969/j.issn.1005-7021.2020.04.001Role of Bacteroides fragilis in The Promotion,Regulation andPrevention of Inflammatory Bowel Disease and Colorectal CancerLYU Zhi-tang,XU Xiao-na,ZHANG Yi-jun(College of Life Sciences,Institute of Life Science and Green Development,Hebei Universityand Key Laboratory of Microbial Diversity Research and Application of Hebei Province、Banding071002) Abstract In recent years,people have paid more and more attention to the role of gut microbiota in the occurrence development process and prevention of enterogenous diseases.Bacteroides fragilis(BF)is a commensal bacterium col­onized in the human intestine,which has various effects on intestinal health.It is the most common intestinal microbe isolated from healthy people and clinical cases of diarrhea,peritonitis,intra-abdoniinal abscess,sepsis,and inflam­matory bowel disease etc.With the intensive study of BF,it is found that it has an very closed relationship with in-基金项目:国家科技重大专项子课题(2015ZX09J15102-002);生物科学与绿色发展学科群一一生物学重点建设项目(050001-502000101)作者简介:吕志堂男•教授研究方向为微生物资源与系统学、肠道菌群与慢性病关系E-mail:l Z************收稿日期:2020-07-212微生物学杂志40卷flammatory bowel disease(IBD)and colorectal cancer(CRC).This paper reviewed the relationship between BF and IBI)and CRC to explore the role of BF in the promotion,regulation and prevention of IBD and CRC.It provides a more systematic,data-based,and scientific reference for the treatment of IBD and CRC,provides new ideas for the early intervention and treatment of IBI)and CRC,and provides data and ideas for the development of BF based drugs.Keywords Bacteroides fragilis;inflammatory bowel disease;colorectal cancer;gut microbiota炎症’性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是慢性复发性炎症,分为两种主要的临床表型:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD),病因尚不明确。

生产中常用菌种的分离、选育和保藏

生产中常用菌种的分离、选育和保藏

生产中常用菌种的分离、选育和保藏在生产中,分离、选育和保藏常用菌种是非常重要的步骤,这些菌种可以用于各种不同的应用,如发酵过程中的生物转化、抗生素的生产以及食品工业中的乳酸发酵等。

以下是常用菌种的分离、选育和保藏的基本步骤:1. 分离:分离菌种是指从自然环境中分离出纯种菌株的过程。

首先,需要选择合适的样品来源,如土壤、水样或食品样品等。

然后,将样品进行稀释、接种到固体培养基上,培养出菌落。

最后,从菌落中挑选单一菌株,并进行纯化培养,得到纯种菌株。

2. 选育:选育是指对已有菌种进行进一步培养和筛选,选出优良品系。

在选育过程中,可以根据所需特性进行筛选,如产量高、抗性强或代谢产物优良等。

通过连续传代培养和筛选,可以逐步培育出符合要求的优良品系。

3. 保藏:保藏是为了长期储存和保存已经分离和选育得到的菌种。

常用的保藏方法包括冷冻保存和冷冻干燥等。

冷冻保存是将菌种保存在低温 (-80℃或液氮温度下),可以长期保存并保持菌株的生物学性状。

而冷冻干燥则是在低温下将菌种先冷冻,然后通过真空蒸发使其脱水,最后用密封容器保存。

冷冻干燥具有长期保存时间和较小的储存体积的优点。

在菌种的分离、选育和保藏过程中,需要注意的是严格遵守无菌操作规范,以防止杂菌污染。

另外,应该建立相应的菌种信息管理系统,记录并标注每个菌株的来源、特性以及保藏条件等重要信息,以便日后使用和查询。

菌种的分离、选育和保藏在生产中扮演着极其重要的角色。

下面将进一步探讨这些过程,并介绍一些常用的菌种及其应用领域。

在分离菌种的过程中,重要的是选择适当的样品来源。

不同的环境中存在着各种微生物,如土壤、水体、植物、动物及其制品等。

通过采集不同来源的样品,可以获得不同类型和特性的微生物,从而得到多样性的菌株资源。

在接种前,样品经过稀释,使微生物适当分散。

然后将稀释液均匀接种于固体培养基上,并进行孵育。

在培养过程中,微生物通过分裂繁殖形成菌落,而每个菌落代表一个菌株。

菌种分离纯化的方法

菌种分离纯化的方法

菌种分离纯化的方法以菌种分离纯化的方法为标题,本文将介绍菌种分离纯化的方法及其步骤。

菌种分离纯化是微生物学研究中常用的一种技术手段,通过分离和纯化菌株,可以获得单一的菌种用于后续的研究和应用。

一、菌种分离的基本原理菌种分离的基本原理是将混合的微生物菌群分离成单一的菌株。

菌种分离的方法有很多种,常用的有单菌落分离法、稀释涂布法、稀释液滴法等。

这些方法都是基于微生物菌株的生长特性和培养条件的不同,通过合理设计实验步骤和培养基,使目标菌株能够单独生长并形成可见的菌落。

二、菌种分离纯化的步骤1. 样品采集:首先需要从环境中采集到含有目标菌株的样品。

样品可以是土壤、水样、食品、动植物组织等,根据研究目的和样品特点选择合适的采集方法。

2. 制备培养基:根据目标菌株的特性和需求,选择合适的培养基配方,并进行消毒和制备。

培养基的选择应考虑到菌株的营养需求、生长条件和特殊要求。

3. 稀释涂布法:取少量样品加入到培养基中,经过适当的稀释后,用移液管或铁环在培养基表面均匀涂布,使菌落能够单独生长。

4. 单菌落分离法:根据菌落的形态、颜色和大小等特征,选择单一的菌落转移到新的培养基上。

可以使用鉴别培养基或显微镜观察菌落的特征,以确保分离的菌株纯度。

5. 重复分离:为了确保分离得到的菌株的纯度,可以进行多次的分离操作。

将单一菌落进行二次分离或多次传代培养,直到得到纯种的菌株。

6. 菌种保存:分离纯化后的菌种可以进行保存,常用的保存方法有冷冻保存和冷冻干燥保存。

冷冻保存需要将菌种在液氮中冷冻保存,冷冻干燥保存则是将菌种在低温下干燥保存。

三、菌种分离纯化的注意事项1. 采集样品时要注意卫生和无菌操作,避免外源菌的污染。

2. 制备培养基时要严格按照配方和操作规程进行,确保培养基的质量和无菌性。

3. 分离过程要注意避免交叉污染,使用无菌操作和无菌工具。

4. 分离后的菌株要进行鉴定和鉴别,确保其为目标菌株。

5. 分离纯化后的菌株要进行保存,以备后续使用。

分离菌种的方法范文

分离菌种的方法范文

分离菌种的方法范文分离菌种是微生物学中的一个重要实验技术,通过该技术可以将混合菌群中的不同菌种分开,单独培养和研究。

本文将介绍几种常用的分离菌种的方法。

1. 稀释平板法(Dilution plate method)稀释平板法是最常用的分离菌种的方法之一、首先将混合菌液用无菌生理盐水或培养基稀释到一定浓度,然后将其均匀涂布在含有固体培养基的平板上,培养一段时间,单个菌落可以形成单菌种的菌落。

然后将单菌种的菌落分离种植到新的培养基上。

2. 悬液均匀法(Spread plate method)悬液均匀法也是一种常用的分离菌种的方法。

首先将混合菌液用无菌生理盐水或培养基进行稀释,然后将其均匀涂布在含有固体培养基的平板上,通过新颖的方案将单个菌种的菌落分离种植到新的培养基上。

3. 筛网过滤法(Mesh filtration method)筛网过滤法适用于一些难以通过稀释平板法和悬液均匀法分离的微生物,如真菌和放线菌等。

该方法使用特制的网状滤膜过滤混合菌液,将微生物困集在滤膜上形成菌落,然后将菌落分离种植到新的培养基上。

4. 琼脂半固体培养法(Semi-solid agar medium method)琼脂半固体培养法适用于一些具有较长延伸子菌丝或芽孢状细胞的微生物,如放线菌等。

该方法在培养基中加入适量的琼脂,并均匀混合,然后将混合菌液转移到琼脂半固体培养基上,等菌落生长后,可通过菌落根部的单菌种分离种植到新的培养基上。

5. 微滴法(Micropipette method)微滴法是一种高效的分离菌种的方法。

该方法使用微量移液器将混合菌液分别吸取并滴入含有固体培养基的小孔板中,每个孔中仅有一个细胞。

随后,孔中细胞生长形成单菌种的菌落,然后将菌落分离种植到新的培养基上。

分离菌种方法的选择取决于待分离菌种的特点和实验目的。

这些方法可以大大提高单个菌种的纯度和分离效率,有助于后续的菌种鉴定和研究。

临床常见厌氧菌及

临床常见厌氧菌及
b- lactam
抑制PBP
细胞壁被破坏
b -内酰胺类抗生素
β-内酰胺类抗生素通过与细菌细胞膜上PBP结合,使 PBP失活,从而达到抑制细菌细胞壁合成的目的。
细胞膜
细胞壁
细胞浆
PBP PBP
PBP
b-lactamase b-内酰胺酶
-lactamase bb-lactamase
-lactamase b
厌氧菌感染的部位---腹腔感染特点
• 腹腔感染的病原菌主要是消化道的正常菌群,多以 慢性迁延性炎症或脓肿为主。 • 腹腔作为人体最大的一个体腔,其中有很多实体脏 器及胃肠管道处于低氧或无氧环境,为厌氧菌的生 长提供了一个天然场所。 • Hao 和Lee 研究胃肠道中存在的正常微生物菌群, 发现胃肠道中厌氧菌的数量自上而下递增,胃内仅 含少量乳酸杆菌, 其中大部分都是厌氧菌。
[1]
小结
• 我院具有抗脆弱拟杆菌的抗菌药物: 甲硝唑、替硝唑、克林霉素、阿莫西林克 拉维酸钾、阿莫西林舒巴坦、头孢哌酮舒 巴坦、哌拉西林舒巴坦、头孢西丁、头孢 美唑等
患者自诉于2天前无明显诱因出现左侧上第二前磨牙疼痛后出现左侧面部肿大并发热体温372378给予替硝唑注射液抗感染治疗后症状缓解不明显且觉颜面部口唇肿较前加重伴有疼痛皮肤发红并左侧面部见有疖肿一处自发病以来较前有所增长其上可见少量脓性分泌物并觉左侧胸锁乳突肌一枚淋巴结略肿大及疼痛无明显咳嗽咳痰胸痛胸闷腹痛腹泻等
厌氧菌感染的部位---盆腔及泌尿生殖道感染
• 女性因其阴道的微生态失调,致阴道固有细 菌上行而致的内源性机会感染易致盆腔炎, 盆腔炎是危害妇女健康的常见疾病。 • 尽管尿道口、会阴、阴道和外生殖道可有 许多需氧菌和厌氧菌寄殖,且细菌也易进入 膀胱,但厌氧菌较少引起尿路感染。

脆弱拟杆菌粘附特性的研究

脆弱拟杆菌粘附特性的研究

脆弱拟杆菌粘附特性的研究
陈锦英;石福珉
【期刊名称】《中国微生态学杂志》
【年(卷),期】1995(7)3
【摘要】对45株脆弱拟杆菌进行试验,及电镜检查,受检菌株对硫酸铵的盐凝试验及对人、兔和豚鼠红细胞的血凝试验全部阴性;HeLafo胞粘附试验有15.6%阳性,电镜下4/6株可见到菌毛结构,该菌毛不同于一般肠道菌,与血凝和粘附试验无一致的关系。

【总页数】2页(P39-39)
【关键词】脆弱拟杆菌;粘附特性;肠道菌
【作者】陈锦英;石福珉
【作者单位】天津医科大学微生物学教研室,天津医科大学附属医院
【正文语种】中文
【中图分类】R378.2
【相关文献】
1.脆弱拟杆菌β—内酰胺酶的纯化及免疫学特性 [J], 陈锦英;包幼迪
2.脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)产肠毒素菌株和非产肠毒素菌株的抗原特性[J],
3.脆弱拟杆菌β—内酰胺酶的理化及酶学特性 [J], 陈锦英;包幼迪
4.脆弱拟杆菌耐药性及耐药机制研究进展 [J], 曹钰然; 胡佳丽; 张菁
5.产肠毒素型脆弱拟杆菌促进结直肠癌发生发展的机制研究进展 [J], 何秋月;杜艳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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脆弱拟杆菌的分离
1 材料与方法
1.1 试验用培养基
本试验采用固体MRS肉汤增殖培养基。

配制方法:准确称量下列各种成分,补水至原来体积,用lmol/L NaOH溶液调整pH至7.2—7.4,115℃灭菌30min。


培养基:牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母浸粉5g、葡萄糖20g、吐温80 lmL、磷酸氢二钾2g、乙酸钠4g、柠檬酸氢二铵2g、水合硫酸镁0.2g、水合硫酸锰0.2g、琼脂20g、半胱氨酸0.3g、蒸馏水1 000mL
1.1.2 生化鉴定用培养基
参考《伯杰氏细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》配制。

1.2 试验动物
断奶仔兔和青年兔
1.3 试验方法
1.3.1 样品采集及细菌培养
样品采集:用兔回肠和盲肠粘膜上的内容物分别划线接种于普通培养基和特殊培养基上培养,每个样3个平行。

厌氧培养
采用干燥器法。

计算好容器体积,根据其体积(1 000mL空间用焦性没食子酸10g,用10%氢氧化钠溶液100 mL)称取焦性没食子酸和配制氢氧化钠溶液;然后将氢氧化钠溶液倒人干燥器底部,盛有焦性没食子酸的平皿轻轻浮于液面之上,放好隔板,将接种好的平板置于隔板上,并在隔板上点燃一支蜡烛,把干燥器盖盖上密封。

轻轻摇动干燥器,使焦性没食子酸和氢氧化钠溶液混合作用。

待蜡烛熄灭后置于37℃温箱培养2—3d,取出观察。

1.3.2 菌落观察与挑纯
观察各种培养基上菌落生长的形态,结合镜检,对菌落进行归类计数,筛选出优势菌株,进一步用划线分离法对优势菌株进行分离纯化,直到分离到纯菌为止。

1.3.3 菌种保存
厌氧菌用厌氧肉肝汤保存。

I.3.4 细茵的鉴定
根据菌落形态、镜检和生化试验结果,参照《伯杰氏细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》,综合判断,确定分离纯化菌株的种属。

拟杆菌属:
严格厌氧培养,革兰氏染色阴性,镜检菌体长短不一,多形性的杆菌。

生化反应结果:葡萄搪(+,产酸)、乳糖(+,产酸)、麦芽糖(+,产酸)、甘露醇(+,产酸)、淀粉水解(+)、尿素酶活性(一)、硫化氢气体产生(+)、硝酸盐还原反应(一)、触酶(+)。

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