(江苏专用)2020版高考生物总复习 第34讲 微生物的培养与应用教案(选修1)
(江苏)高考生物总复习 第34讲 微生物的培养与应用教案(选修1)
第34讲微生物的培养与应用考纲考情——知考向核心素养——提考能最新考纲1.微生物的分离和培养（B）2.某种微生物数量的测定（C）3.微生物的应用（B）4.（实验）微生物的分离和培养（b）科学思维分析培养基的成分及其作用，比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同科学探究设计实验探究微生物培养的条件近三年江苏考情2018年T31（6分）；2017年T5（2分）、T31（3分）；2016年T10（2分）、T19（2分）、T25（3分）；2015年T13（2分）、T31（8分）社会责任关注有害微生物的控制及宣传健康生活1.培养基（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
（2）营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。
（3）种类①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
2.无菌技术（1）含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
（2）常用方法3.大肠杆菌的纯化培养（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→称量溶化灭菌→倒平板（2）纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
如图所示b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
（3）菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
（1）（人教版选修一P16“旁栏思考题”拓展）请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
高考生物总复习配套课件2微生物的培养与应用 选修一
②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过 统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少 活菌。
②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300 的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷ V)×M， 其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V 代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释 倍数。
3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的培养→ 观察并记录结果→细菌计数 4．课题延伸——菌种的进一步鉴定 (1)原因：由于分离分解尿素的细菌的选择培养基上 可能生长着以分解尿素的细菌的代射产物为氮源的其它 微生物。
脲酶 (2)原理：CO(NH2)2＋H2O ――→ CO2＋2NH3；由于 NH3的产生，培养基碱性增强，pH升高，因此可通过检 测pH的变化来判断该化学反应是否发生。 (3)方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指 示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明 该种细菌能分解尿素。
5．该实验中的注意事项 (1)设立重复组：统计某一稀释度下平板上的菌落数 时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说 服力与准确性。
(2)对照原则 ①判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培 养基同时进行培养。 ②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉 膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌 落数目，进行对比得出结论。
目的
在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的 子细胞群体——菌落 平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的
培养
2019版高考生物一轮复习第11单元生物技术实践第34讲微生物的培养和利用学案苏教版
第34讲微生物的培养和利用考试说明 1.微生物的分离和培养(实验与探究能力)。
2.某种微生物数量的测定(实验与探究能力)。
3.培养基对微生物的选择作用(实验与探究能力)。
4.微生物在其他方面的应用(实验与探究能力)。
点一微生物的实验室培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的。
(2)营养成分:水、、、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
(3)类型: 培养基含凝固剂, 培养基不含凝固剂。
2.无菌技术(1)目的:获得。
(2)关键:防止的入侵。
(3)无菌技术的主要方法及适用对象(连线)措施操作对象主要方法a消毒b.灭菌Ⅰ.培养基Ⅱ.接种环Ⅲ.操作者双手Ⅳ.培养皿Ⅴ.无菌室Ⅵ.牛奶①灼烧灭菌②干热灭菌③巴氏消毒④紫外线消毒⑤化学消毒⑥高压蒸汽灭菌3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)步骤:计算→→溶化→→倒平板。
(2)倒平板的过程①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手。
②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过。
③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上。
④待平板冷却凝固后,将平板放置,使皿盖在下、皿底在上。
4.纯化大肠杆菌(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
图11-34-1(2)平板划线法(图11-34-1中):通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(3)稀释涂布平板法(图11-34-1中):将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到的表面,进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的。
5.菌种的保藏(1)对于频繁使用的菌种,可以采用法。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用法。
1.消毒和灭菌的区别2.两种纯化细菌的方法的比较3.平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后,要冷却后再进行接种,以免温度太高杀死菌种。
2019-2020年高中生物 1.1《微生物的培养与应用》教案(1) 苏教版选修1
2019-2020年高中生物 1.1《微生物的培养与应用》教案（1）苏教版选修1重点知识归纳及讲解（一）微生物需要的营养物质及功能1、微生物需要的营养物质：碳源、氮源、生长因子、无机盐和水五大类。
2、碳源、氮源、生长因子的来源及功能。
（二）培养基的种类及配制原则（三）无菌技术1、无菌技术的内容(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
(3)已经灭菌处理的材料用具不与周围的物品接触。
(4)实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
2、消毒方法(1)煮沸消毒法：如在100℃煮沸5～6min。
(2)化学药剂消毒法：如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源。
3、灭菌方法(1)灼烧灭菌。
(2)干热灭菌。
(3)高压蒸汽灭菌。
（四）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、计算根据配方比例，计算配制一定量的培养基所需各种成分的用量。
2、称量3、溶化4、灭菌5、倒平板思考：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
（五）纯化大肠杆菌1、平板划线法——通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即菌落。
思考：（1）为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。
划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
最新江苏省灌南高级中学高三生物复习：微生物的培养与应用
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞
加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的 培养基:分离杂交瘤细胞
合成培养基:
根据细胞生存所需物质的 种类和数量，用人工方法模 拟合成的。
1.培养基的类型和用途
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、 半固体培养基。其中固体培养基用于菌种保存及 分离、鉴定菌落、活菌计数等，半固体培养基可 观察微生物的运动，液体培养基常用于发酵工业。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
江苏省灌南高级中学高三生物复 习：微生物的培养与应用
一、课题目标： 了解有关微生物及培养基的基础知识，
进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
无菌技术的操作。
三、技能目标：
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平 板划线法等基本操作技术，熟练、规范地 进行无菌操作，成功地培养微生物。
菌落
消毒与灭菌
消毒：指使用较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害 的微生物（不包括芽孢和孢子）。 灭菌：指使用强烈的理化因素杀死物体内 外所有微生物，包括芽孢和孢子。
灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普 通也是最重要的技术。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物
培养基的营养物质
2、培养基一般都含有哪些营养物质，此外 还要满足哪些要求？
高考生物一轮复习第11单元生物技术实践第34讲微生物的培养和利用学案苏教版
——————————新学期新成绩新目标新方向——————————第34讲微生物的培养和利用考试说明 1.微生物的分离和培养(实验与探究能力)。
2.某种微生物数量的测定(实验与探究能力)。
3.培养基对微生物的选择作用(实验与探究能力)。
4.微生物在其他方面的应用(实验与探究能力)。
点一微生物的实验室培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的。
(2)营养成分:水、、、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
(3)类型: 培养基含凝固剂, 培养基不含凝固剂。
2.无菌技术(1)目的:获得。
(2)关键:防止的入侵。
(3)无菌技术的主要方法及适用对象(连线)措施操作对象主要方法a消毒b.灭菌Ⅰ.培养基Ⅱ.接种环Ⅲ.操作者双手Ⅳ.培养皿Ⅴ.无菌室Ⅵ.牛奶①灼烧灭菌②干热灭菌③巴氏消毒④紫外线消毒⑤化学消毒⑥高压蒸汽灭菌3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)步骤:计算→→溶化→→倒平板。
(2)倒平板的过程①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手。
②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过。
③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上。
④待平板冷却凝固后,将平板放置,使皿盖在下、皿底在上。
4.纯化大肠杆菌(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
图11-34-1(2)平板划线法(图11-34-1中):通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(3)稀释涂布平板法(图11-34-1中):将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到的表面,进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的。
5.菌种的保藏(1)对于频繁使用的菌种,可以采用法。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用法。
1.消毒和灭菌的区别2.两种纯化细菌的方法的比较3.平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后,要冷却后再进行接种,以免温度太高杀死菌种。
(人教版)2020版高考生物一轮复习第11单元生物技术实践第34讲微生物的培养和利用学案苏教版
第34讲微生物的培养和利用考试说明 1.微生物的分离和培养(实验与探究能力)。
2.某种微生物数量的测定(实验与探究能力)。
3.培养基对微生物的选择作用(实验与探究能力)。
4.微生物在其他方面的应用(实验与探究能力)。
考点一微生物的实验室培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的。
(2)营养成分:水、、、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
(3)类型: 培养基含凝固剂, 培养基不含凝固剂。
2.无菌技术(1)目的:获得。
(2)关键:防止的入侵。
(3)无菌技术的主要方法及适用对象(连线)措施操作对象主要方法a消毒b.灭菌Ⅰ.培养基Ⅱ.接种环Ⅲ.操作者双手Ⅳ.培养皿Ⅴ.无菌室Ⅵ.牛奶①灼烧灭菌②干热灭菌③巴氏消毒④紫外线消毒⑤化学消毒⑥高压蒸汽灭菌3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)步骤:计算→→溶化→→倒平板。
(2)倒平板的过程①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手。
②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过。
③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上。
④待平板冷却凝固后,将平板放置,使皿盖在下、皿底在上。
4.纯化大肠杆菌(1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
图11-34-1(2)平板划线法(图11-34-1中):通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
(3)稀释涂布平板法(图11-34-1中):将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到的表面,进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的。
5.菌种的保藏(1)对于频繁使用的菌种,可以采用法。
(2)对于需要长期保存的菌种,可以采用法。
1.消毒和灭菌的区别条件结果消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子2.两种纯化细菌的方法的比较比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线①一系列的梯度稀释②涂布平板操作优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂,需要涂布多个平板适用范围适用于好氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌3.平板划线操作3个易错点(1)灼烧接种环之后,要冷却后再进行接种,以免温度太高杀死菌种。
高中生物《微生物的培养与应用》复习课优质课教案
⾼中⽣物《微⽣物的培养与应⽤》复习课优质课教案《微⽣物的培养与应⽤》复习课教学设计⼀、⾼考说明：微⽣物的分离与培养（B）某种微⽣物数量的测定（B）微⽣物的应⽤（B）⼆、教学⽬标1、知识⽬标（1）掌握培养基的制备、⾼压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术；（2）微⽣物的选择及数量测定。
2、能⼒⽬标（1）学会⼀般的消毒、灭毒的⽅法，进⾏⽆菌技术的操作；（2）进⾏微⽣物的分离、纯化和数量测定；（2）培养学⽣的判断推理能⼒、分析综合能⼒。
3、情感态度和价值观（1）体验微⽣物与现代⽣物技术之间的密切的关系；（2）形成勇于探索合作的的科学态度和科学精神。
三、教学重点培养基的制备、微⽣物的培养的操作。
四、教学难点接种技术和微⽣物的分离。
五、学法指导⾃主回答、合作讨论法、分类归纳法等。
六、教学过程1、创设情境、引⼊新课教师播放视频：《科学⼤爆炸之微⽣物是如何为⼈类服务的》（设计意图：激发学⽣的学习兴趣和求知欲）教师活动：学情调查学⽣活动：在⽩板上列出微⽣物的培养与应⽤这节课存在的疑问并交流展⽰（设计意图：学⽣⾃⼰暴露出问题所在，让教师更好地把握学情，使课堂教学更有针对性）2、培养基学⽣活动：⾃主回忆完成培养基知识体系学⽣活动：⼩组合作完成培养的分类(设计意图：通过概念图、表格给学⽣建⽴知识体系，并让学⽣⾃主学习归纳，达到温故⽽知新的⽬的） 3、⽆菌技术教师提问：微⽣物实验室培养的前提是什么？学⽣活动：完成⽆菌技术概念图并向同学汇报师⽣共同活动：教师举例（接种环、培养⽫、培养基、操作者的⼿）让学⽣分析是采⽤哪种⽆菌技术。
（设计意图：学⽣通过学习⽆菌技术，并且将课本知识与⽣活实际相结合，了解⽆菌技术在⽣活上的应⽤，培养学⽣的学科素养。
） 4、⼤肠杆菌的纯化培养学⽣活动：完成纯化⼤肠杆菌的概念图【倒平板】教师活动：播放实验室倒平板的视频并设置疑问：（1）平板冷凝后，为什么要将平板倒置？（2）在倒平板的过程中，如果不⼩⼼将培养基溅在⽫盖与⽫底之间的部位，这个平板还能⽤来培养微⽣物吗？学⽣活动：学⽣⾃主思考后回答（第⼀问答案：平板冷凝后，⽫盖上会凝结⽔珠，凝固后的培养基表⾯的湿度也⽐较⾼，将平板倒置，既可以使培养基表⾯的⽔分更好地挥发，⼜可以防⽌⽫盖上的⽔珠落⼊培养基，造成污染。
苏教版生物选修1第一节《微生物的培养和应用》word学案
苏教版生物选修1第一节《微生物的培养和应用》word学案第一节微生物的培养和应用自学提纲1、培养基：。
2、按照培养基的物理性质不同可分三类划分标准培养基种类特点用途物理性质3、按照培养基中的化学成分不同，可分：、和等。
4、天然培养基：。
优点：；缺点：。
5、合成培养基：。
优点：；缺点：。
6、半合成培养基：。
兼有的一些优点。
7、消毒和灭菌的区别条件结果常用的方法消毒灭菌８、细菌培养基的配制（1）是常用的细菌基础培养基。
（2）配制过程：、、、、和。
（3）配制培养液：在200ml烧杯中加入100ml蒸馏水，再加入0.5g 、1g 、0.5g NaCl、1g 琼脂，边加水边，配制成培养基。
（4）细菌培养基PH应调至。
分装时约为试管高度的。
是常用的灭菌方法。
温度为，气压为，灭菌分钟。
搁置斜面，长度不超过试管总长的。
巩固练习——单项选择题1 ．下列不属于微生物范畴的是A 、原核生物B 、原生生物C 、真菌D 、微小动植物2 ．质粒是细菌中的一种专门结构，它属于细菌的A 、染色体B 、核糖体C 、细胞器D 、环形DNA 分子3．下列生物中不属于原核生物的是A．乳酸菌B．酵母菌C．大肠杆菌D．放线菌4．煮沸过的肉汤放置过久会腐败变质，要紧缘故是A．蛋白质破坏变性B．细菌大量繁育C．肉汤中水分过多D．空气使肉氧化分解5、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是专门有前途的。
如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的A．温度 B．PH值 C．水分 D．营养6．通常用来作为菌种鉴定的重要依据是A．菌落B．细菌形状C．细菌体积D．细菌结构7．在噬菌体的增殖过程中，子代噬菌体的蛋白质外壳是A．在细菌DNA的指导下，用细菌的物质合成的B．在噬菌体DNA的指导下，用噬菌体的物质合成的C．在细菌DNA的指导下，用噬菌体的物质合成的D．在噬菌体DNA的指导下，用细菌的物质合成的8．细菌、放线菌属于原核生物的要紧依据是A．单细胞B．无核膜C．二分裂生殖D．对抗生素敏锐9．细菌抗药性基因存在于A．核区的DNA B．RNA C．质粒D．小的直线型DNA10．乳酸菌与酵母菌相比，前者最显著的特点是A．无各种细胞器B．无成形的细胞核C．无DNA D．不能进行无氧呼吸11．下列与微生物的代谢活动专门旺盛无关的缘故是A．表面积与体积比大B．相对表面积大C．对物质的转化利用快D．数量多12.关于放线菌的叙述中，不正确的是A．产生抗菌素种类最多的类群 B．细胞内有核区而无核膜C．细胞壁坚强含纤维素 D．菌体呈丝状分枝13、.外科手术器械和罐装食品的消毒，都要以能杀死（）为标准A．球菌B．杆菌 C．螺旋菌 D．芽孢14.冠状病毒一定不包括的结构是A．核衣壳 B．有刺突的囊膜C．质粒 D．RNA15、下列哪项说明病毒属于生物A．具有细胞结构 B．由有机物构成C．能独立完成新陈代射D．能在寄主体内繁育16．下列不属于微生物的是Ａ．蓝藻和蘑菇Ｂ．葫芦藓和铁线蕨Ｃ．噬菌体和黄曲霉Ｄ．放线菌和变形虫17．谷氨酸棒状杆菌异化作用方式是需氧型，它的有氧呼吸的酶要紧存在于Ａ．线粒体Ｂ．细胞质基质Ｃ．细胞膜Ｄ．内质网18．下列不属于细菌的差不多结构是Ａ．鞭毛Ｂ．核糖体Ｃ．质粒Ｄ．细胞壁19．有关放线菌的叙述，正确的是Ａ．由分枝状菌丝构成，与霉菌完全相同Ｂ．与细菌相同，是单细胞的原核生物Ｃ．通过有丝分裂产生孢子，形成新个体，因此属于无性生殖Ｄ．要紧生活在动植物的细胞中可致病20．细菌繁育过程中不．可能发生的是A．有氧呼吸B．染色体复制C．细胞壁形成D．蛋白质合成21．下列对HIV 的描述错误的是A ．专性寄生B ．衣壳粒上具有抗原特异性C ．要紧在人的T细胞中增殖D．攻击人体后会引起自身免疫反应22．对病毒的叙述，错误的是A．由蛋白质与核酸组成的一种结构B．高度寄生C．有时会产生突变D．复制所需化学成分由自己供给。
高中生物 选修一 第34讲 微生物的培养与应用
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考点一
考点二
澄清易错易混·强化科学思维
@《创新设计》
③常用的微生物接种方法有两种 a.平板划线法：是通过__接__种__环_在琼脂固体培养基表面_____连__续__划_的线操作，将聚集的菌种逐步 稀释分散到培养基的表面。如图所示：
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考点一
考点二
澄清易错易混·强化科学思维
@《创新设计》
b.稀__释__涂__布__平__板___法：是将菌液进行一系列的_____梯__度__稀，释然后将________不__同__稀__释__度的菌液分别 涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种，可以采用_____临__时__保__藏_的方法。 ②对于需要长期保存的菌种，可以采用_____甘__油__管__藏_的方法。
@《创新设计》
走出微生物培养的5个误区 （1）不是所有微生物培养基中均需加入特殊营养物质。碳源、氮源、水分、无机盐是微 生物生长必需的四大营养成分，有些微生物可自行合成特殊营养物质，而对那些合成能力 有限或不能合成特殊营养物质的微生物（如乳酸菌），则需在培养基中添加诸如维生素等 物质。 （2）平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同 ①第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。 ②每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上 次划线的末端。
，这种接种方法是
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（2）若培养基上平均有40个菌落，则1 g样品中大致的活菌数量是
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考点一
考点二
澄清易错易混·强化科学思维
@《创新设计》
2022版新教材高考生物一轮复习第10单元生物技术与工程第34课微生物的培养技术及应用学案新人教版
第34课微生物的培养技术及应用一、微生物的基本培养技术 1．培养基的配制(1)培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)培养基的种类按物理性质划分⎩⎪⎨⎪⎧液体培养基↓添加凝固剂（如琼脂）固体培养基(3)培养基的组成成分①主要营养物质：水、碳源、氮源和无机盐。
②其他条件：pH 、特殊营养物质(如维生素)和O 2。
2．无菌技术(1)目的：获得纯净的微生物培养物。
(2)关键：防止杂菌污染。
(3)两种无菌技术的比较 比较项目条件结果常用方法 应用X 围 消毒较为温和的物理、化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物煮沸消毒法日常用品 巴氏消毒法不耐高温的液体 化学药物消毒法操作空间、操作者的衣物和手等 紫外线消毒法 接种室、接种箱或超净工作台 灭菌 强烈的杀死物体内湿热灭菌法培养基、容器等①避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触；②实验操作都应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。
二、微生物的纯培养1．相关概念(1)培养物：在微生物学中，接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。
(2)纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体。
(3)纯培养：获得纯培养物的过程。
(4)菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
2．酵母菌纯培养的实验步骤(1)制备培养基(2)接种和分离酵母菌操作步骤操作内容①接种环灭菌将接种环放在酒精灯火焰上灼烧直至烧红②取菌种a 在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞b 将试管口通过火焰，以防止试管口杂菌污染c 将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液d 将试管口通过火焰，并塞上棉塞③平板划线a左手将皿盖打开一条缝隙，右手把接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。
注意不要划破培养基b灼烧接种环，冷却后从第一次划线的末端开始作第二次划线。
重复上述操作，作第三、四、五次划线。
2022届高考生物一轮复习第十单元生物技术实践第34讲微生物的培养与应用学案苏教版
第34讲微生物的培养与应用[新高考复习目标]1．生命观念：掌握选择培养基的原理，理解适者生存的含义。
2．科学思维：通过分析培养基各成分在微生物培养中的作用，得出可以通过调整培养基的配方，有目的地培养某种微生物的结论。
3．科学探究：通过微生物的相关实验，学会培养、别离微生物，以与微生物计数的实验设计。
4．社会责任：关注有害微生物的控制与宣传健康生活方式等。
授课提示：对应学生用书第250页考点一培养基与微生物的纯化培养技术1．培养基2．无菌技术3．大肠杆菌的纯化培养1．教材选修1 P14“侧栏小资料〞：琼脂是一种怎样的物质？它在培养基中有怎样的作用？提示：琼脂是一种从红藻中提取的多糖。
琼脂在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态，所以常作为固体培养基的凝固剂。
2．教材选修1 P15“侧栏小资料〞：牛肉膏和蛋白胨含有哪些营养物质？提示：牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
3．教材选修1 P18“侧栏小资料〞：微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？提示：不是。
微生物的接种方法还包括斜面接种、穿刺接种等，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
1．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。
(×)2．消毒的原如此是既杀死材料外表的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。
(√)3．无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进展灭菌。
(×)4．配制培养基时应先灭菌再调pH。
(×)5．平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧。
(√)6．用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基外表形成单个菌落。
(√)条件结果常用方法应用X围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体外表或内部的局部微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基与容器项目平板划线法稀释涂布平板法平板示意图纯化原理通过连续划线操作实现将菌液进展一系列的梯度稀释和涂布平板操作实现须知事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高菌体获取在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优点可以根据菌落的特征获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板(1)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。
(江苏专用)2020版高考生物总复习 考点加强课7教案
考点加强课7重点题型1 目标微生物的筛选与鉴定1.分离微生物的原理与措施（1）原理：自然环境中的微生物是混杂在一起的，因此分离获得纯培养物应首先采用的方法是将单个的微生物与其他微生物分离，再给该微生物提供合适的营养和条件，使其生长成为可见的群体。
（2）常用措施①接种过程中尽量使微生物分散开来，如平板划线法、稀释涂布平板法。
②运用选择培养基的作用特点，在培养基中添加某种特定的物质，抑制不需要的微生物的生长，促进所需微生物的生长。
2.选择培养基四种常见制备方法或实例【例证】（2017·全国卷Ⅰ，37）某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。
回答下列问题：（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是__________________________________________________________________________________________________________________________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是______________________________________________________（答出两点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有___________________________________________________________________________________________________________________________（答出两点即可）。
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第34讲 微生物的培养与应用1.培养基（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
（2）营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外，还需要满足微生物生长对pH 、氧气以及特殊营养物质的要求。
（3）种类①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
2.无菌技术（1）含义：在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。
（2）常用方法3.大肠杆菌的纯化培养（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→溶化（2）纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
如图所示b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
（3）菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。
（1）（人教版选修一P16“旁栏思考题”拓展）请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
①培养细菌用的培养基与培养皿②玻棒、试管、烧瓶和吸管③实验操作者的双手提示①②需要灭菌；③需要消毒。
（2）（人教版选修一P17“倒平板操作”）为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
（人教版选修一P18“旁栏”）微生物的接种方法除了平板划线法和稀释涂布平板法外，还包括斜面接种、穿刺接种等方法。
微生物接种的核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。
1.（2018·全国卷Ⅱ，37）[生物——选修1：生物技术实践]在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
回答下列问题：（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_______________________________________________________________________________________________________________________。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能。
在照射前，适量喷洒，可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是。
解析（1）在实验室中，能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属材质的实验器具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相比，其优点表现为在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少。
（3）紫外线照射能消毒的原因是其能够破坏微生物细胞中的DNA分子。
在利用紫外线照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒效果。
（4）自来水通常采用氯气消毒。
（5）采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求，最可能的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。
答案（1）可以（2）在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少（3）破坏DNA结构消毒液（4）氯气（5）未将锅内冷空气排尽2.（2018·扬州一模）在白酒发酵的窖池中，当培养液的pH≤4.5时，酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制，甚至停止。
耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，适宜作白酒发酵生产用菌种，为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌，研究者进行了相关实验。
请回答下列有关问题：（1）在发酵过程中，窖池中培养液的pH会逐渐下降，原因是_________________。
（2）取窖底泥，溶于10 mL无菌水中，再取1 mL上清液接入一定量的麦芽汁培养基中培养，其目的是，2天后分别接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上，培养结果见下表。
为选择合适的菌种，根据培养结果，可从表格中pH范围为的培养基中获得菌种（“＋”越多表示菌体长得越好）。
（3）通过下图所示法进行纯化培养，取最终的酵母菌稀释液滴在培养基上进行涂布，要将涂布器后才能进行操作。
在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的3个平板上菌落数分别为99个、92个、94个，则可以推测酵母菌液中每毫升含菌数为个。
运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是_________________________________________________。
（4）实验获得了三个耐酸性较强的酵母菌菌株，特点如下表。
依据菌株特点，研究者认为菌株更适合作为白酒发酵菌株，作出这一判断的理由是______________________________________________________。
解析（1）在发酵过程中，酵母菌细胞呼吸产生CO2，可形成碳酸，可能还产生其他酸性代谢产物，所以窖池中培养液的pH会逐渐下降。
（2）麦芽汁培养基中含酵母菌生长的各种物质，可以使酵母菌大量繁殖；需要选育的是耐酸性强的酵母菌，而耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，所以根据培养结果，可从表格中pH为2～3的培养基中获得菌种。
（3）图示纯化培养的方法为稀释涂布平板法；在培养基上进行涂布时，要将涂布器灼烧冷却后才能进行操作；根据图解可知菌液被稀释了106倍，该稀释度下平板上生长的平均菌落数为（99＋92＋94）÷3＝95个，涂布平板时所用的稀释液的体积是0.1 mL，所以该酵母菌液中每毫升含菌数为95÷0.1×106＝9.5×108个；由于有的菌落可能是由2个或多个菌体形成的，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。
（4）根据表格分析可知，C菌对pH的耐受范围更大，发酵初期pH近中性，C菌种适合此环境，更易于形成优势菌群；发酵后期pH逐渐降低，C菌种依然能正常生长，所以C菌株更适合作为白酒发酵菌株。
答案（1）细胞呼吸产生CO2，可形成碳酸，代谢过程还产生了其他酸性物质（2）使得酵母菌大量繁殖2～3 （3）稀释涂布平板灼烧冷却9.5×108有的菌落可能是由2个或多个菌体形成的（4）C 该菌对pH的耐受范围更大，发酵初期pH近中性，C菌种适合此环境，更易于形成优势菌群；发酵后期pH逐渐降低，C菌种依然能正常生长（答案合理即可）走出微生物培养的5个误区（1）不是所有微生物培养基中均需加入特殊营养物质。
碳源、氮源、水分、无机盐是微生物生长必需的四大营养成分，有些微生物可自行合成特殊营养物质，而对那些合成能力有限或不能合成特殊营养物质的微生物（如乳酸菌），则需在培养基中添加诸如维生素等物质。
（2）平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同①第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。
②每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。
③划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
（3）倒平板的温度一般在50 ℃左右适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。
平板冷却凝固后需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。
考点二微生物的筛选和计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（1）原理与流程（2）统计菌落数目时，培养基表面生长的1个菌落，来源于样品稀释液中1个活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
（3）从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是（平均菌落数C÷涂布的稀释液体积V×稀释倍数M）点悟：利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的稀释度（4）实验结果分析与评价2.分解纤维素的微生物的分离（1）纤维素酶及纤维素分解菌筛选原理、方法（2）实验流程（3）分离纤维素分解菌所用的两种培养基比较分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。
①选择培养基为液体培养基，以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长。
②鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，细菌可在该培养基上形成肉眼可见的菌落。
③刚果红染色法应用于鉴别（选择、鉴别）培养基。
（2018·南京、盐城一模）多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，污染土壤后，很难清除。
研究发现，部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用。
为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分离多氯联苯的菌株。
请回答问题：（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品，接种到以为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）对初步提取到的菌株要进行培养，一般操作方法有两种，其中之一是下图所示的法。
（3）将酵母菌溶液分别稀释10倍、100倍、1 000倍。
每个浓度都接种三个平板，每个平板均接入0.1 mL稀释菌液，该接种方法是法。
培养时，需将培养皿培养，以防冷凝水造成污染。
经适当培养后，平板上的菌落数如上表所示。
据此可得出，每升菌液中酵母菌活菌数为个。
解析（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上。
这样的培养基只有能分解多氯联苯的菌株才能生存，因此从功能上讲，该培养基属于选择培养基。
（2）对初步提取到的菌株要进行纯化，纯化方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法。
图示是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
（3）将酵母菌溶液进行稀释后接种到平板上的方法是稀释涂布平板法。
微生物培养时，为了防止皿盖上的冷凝水滴入培养基造成污染，需将培养皿倒置培养。
计数时，应该选择菌落数为30～300之间的平板进行统计，据表中数据可以判断稀释100倍的符合要求。
由表中数据可以计算出三个平板的平均菌落数为（45＋57＋51）÷3＝51，每个平板均接入0.1 mL稀释菌液，故每升菌液中酵母菌活菌数为51÷0.1×1 000×100＝5.1×107个。