链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型

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链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型

ｔｅＤｃｎｒｌｇｏｐｗｒｄｗｔｏｍａｄｅｏｅｋ．ＲｔｉｈｏｍｌｇｏｐｗｒｎｅｔｈＭｏｔｒｕｅｅｆｉｎｒｌｉｆ４ｗｅｓｏｅｈｔｒａｎｔｅｎｒａｒｅｅｊｃｄｓｕｉｅ
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Ｍｅｈｄ４ｅｌｙｍａｅＳａｓｗｅｅｒｎｏｙｄｖｄｄｉｔｈｉｈｆｔｄｅｒｕｔｏｓ０ｈａｔｌＤｒｔｈｒａｄｍｌｉｉｅｎｏｔｅｈｇ — ｉｔｇｏｐ，ｔｅＤＭｏｔｏｒｕｎａｈｃｎｒｌｇｏｐａｄ
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高脂饲料喂养时间及链脲佐菌素剂量对实验型2型糖尿病大鼠造模的影响

高脂饲料喂养时间及链脲佐菌素剂量对实验型2型糖尿病大鼠造模的影响一、本文概述本文旨在探讨高脂饲料喂养时间及链脲佐菌素剂量对实验型2型糖尿病大鼠造模的影响。

糖尿病作为一种全球性的健康问题，其发病率逐年上升，严重影响着人们的生活质量。

深入研究糖尿病的发病机制和防治措施显得尤为重要。

近年来，实验性糖尿病动物模型在糖尿病研究中发挥着重要作用，其中2型糖尿病大鼠模型是研究糖尿病发病机制和治疗策略的重要工具。

本文首先介绍了实验型2型糖尿病大鼠造模的重要性，并阐述了高脂饲料喂养和链脲佐菌素诱导在造模过程中的关键作用。

随后，通过综述相关文献，分析了不同高脂饲料喂养时间和链脲佐菌素剂量对实验型2型糖尿病大鼠造模的影响，旨在为糖尿病研究提供更为准确、可靠的动物模型。

在此基础上，本文还讨论了造模过程中可能存在的干扰因素及改进措施，以期提高实验型2型糖尿病大鼠模型的稳定性和可靠性。

总结了目前关于高脂饲料喂养时间及链脲佐菌素剂量对实验型2型糖尿病大鼠造模的影响的研究进展，并对未来的研究方向进行了展望。

本文旨在通过系统分析高脂饲料喂养时间及链脲佐菌素剂量对实验型2型糖尿病大鼠造模的影响，为糖尿病的基础研究和临床应用提供有益的参考和借鉴。

二、材料与方法选用健康雄性SD大鼠，体重在180220g之间，购自某实验动物中心。

所有大鼠均在恒温、恒湿、光照黑暗周期12小时12小时的环境中饲养，并可自由获取食物和水。

高脂饲料由某饲料公司提供，其成分包括：基础饲料、猪油、胆固醇、胆酸钠等。

高脂饲料的脂肪含量为60，是普通饲料的10倍以上。

链脲佐菌素购自某生物化学试剂公司，纯度大于98。

STZ是一种常用的糖尿病诱导剂，可选择性破坏胰岛细胞，导致胰岛素分泌不足。

每组大鼠的STZ剂量分别为：低剂量（30mgkg）、中剂量（40mgkg）和高剂量（50mgkg）。

注射STZ后72小时，通过尾静脉取血测定血糖水平。

血糖水平7mmolL的大鼠被认为是糖尿病大鼠。

大鼠糖尿病造模成功的标准

大鼠糖尿病造模成功的标准大鼠糖尿病造模成功的标准糖尿病是一种常见的代谢性疾病，其特点是血糖水平异常升高。

为了更好地研究糖尿病的发病机制和寻找新的治疗方法，科学家们常常使用动物模型进行实验研究。

而大鼠作为一种常用的实验动物，其糖尿病模型的建立和评价就显得尤为重要。

大鼠糖尿病模型的建立主要有两种方法：化学诱导和基因突变。

化学诱导法是通过给予大鼠某些化学物质，如链脲佐菌素（STZ）或高脂饮食，来诱导其发生糖尿病。

而基因突变法则是通过基因工程技术改变大鼠体内某些基因的表达，使其模拟人类糖尿病的发生过程。

无论是哪种方法，大鼠糖尿病模型的建立都需要满足一定的标准才能被认为是成功的。

下面将介绍大鼠糖尿病模型成功的标准。

1. 血糖水平异常升高：大鼠糖尿病模型的核心特征就是血糖水平异常升高。

正常情况下，大鼠的空腹血糖水平应该在3.9-6.1 mmol/L之间，而糖尿病模型大鼠的空腹血糖水平应该明显高于正常范围。

2. 葡萄糖耐量异常：正常情况下，大鼠在葡萄糖负荷后，血糖水平会在一定时间内迅速上升，然后逐渐恢复到正常范围。

而糖尿病模型大鼠在葡萄糖负荷后，血糖水平上升明显较高，并且恢复较慢。

3. 胰岛功能异常：胰岛是调节血糖水平的重要脏器，而胰岛功能异常是导致糖尿病发生的主要原因之一。

在大鼠糖尿病模型中，胰岛功能异常表现为胰岛细胞数量减少、胰岛素分泌减少或胰岛素抵抗增加等。

4. 病理学变化：糖尿病是一种慢性代谢性疾病，其发展过程中会引起一系列的组织和器官损伤。

在大鼠糖尿病模型中，可以观察到胰岛组织结构异常、肝脏脂肪变性、肾小球硬化等病理学变化。

5. 症状表现：大鼠在发生糖尿病后会出现一系列的临床表现，如多饮、多尿、消瘦等。

这些临床表现也是评价大鼠糖尿病模型是否成功的重要指标之一。

综上所述，大鼠糖尿病模型成功的标准主要包括血糖水平异常升高、葡萄糖耐量异常、胰岛功能异常、病理学变化和临床表现。

只有同时满足这些标准，才能认定大鼠糖尿病模型的建立是成功的。

链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病模型的建立及肾脏病理结构改变

［ｂｔｃ］０ｂｅｔｅＴｘｌｒｐｔｏｇｃｌｔｃｕａｃａｇｓｉｔｉｎｙｏｉｅｃｒｔａｄｅｔｌｈｔｅｒｔｄｌｆｉｅｃＡｓｒｔａｊｃｉ：ｏｅｐｏｅａｈｌｉａｓｕｔｒｌｈｎｅｅｋｅｆａｔａｎｓｂｉａｍｏｅｏａｔｖｏｒｎｈｄｄｂｉｓａｓｈｄｂｉ
蚌埠医学院学报２１００年９月第３５卷第９期
［文章编号］１０ —２０２１）９０６ —４００２０（０００－８９０
・
８９６
基础医学・
链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病肾病模型的建立及肾脏病理结构改变
ｎｐｒａｙＭｅｈｄ：ｏｔｅｈａｅＳｒｇｅＤｗｅａｅｅｒｎｏｌｄｉｅｔｃｎｒｒｕｎｘｅｉｅｔｒｕ（４ｆｅｈｏｔ．ｔｏｓＦｒｉｔｌｐａｕ — ａｌｙｒｔｗｒｄｍｙｉｄｄｉｏｏｔｌｏｐａｄｅｐｒｎａｇｏｐ２ｒｐｈｙｇｍｓａｖｎｏｇｍｌｏｅｃ）Ｔｅｔ— ｕａｅｅｐｒｅｔｒｕｅｔｐｒ０ｅｌｊｃｅｉｔｐｏｏｃｎｔｓｔｐａｉａｍｄｌｆｉｅｓＡａｈ．ｗｎｙｆｒｔｉｔｅｉｎｏｐｗｒｉｒｅｉｎａｙｉｅｔｄｗｔｓｅｔｔｉｏｅｕｎｍｌｏａｏａｔ．ｔｏｒｓｎｈｘｍｇｅｎａｔｌｎｈｒｚｏｄｂｅ
ａｄｐｔｌｇａｃａｇｓｆｉｅ．ｓｌ：ｈｉｂｔｒｕａｅｅｔ．ｈｉｈｒｅｅＰ＜００）ｏｌｏｌｃｓ，ｏｅ２ｎａｏｏｉｌｈｎｅｄｙＲｅｕｔＴｅｄａｅｃｇｏｐｗｓｄｔｃｄＴｅｈｇｅｖｌ（ｈｃｏｋｎｓｉｅｌ．１ｆｏｄｇｏｅｍｒ４ｂｕ

糖尿病大鼠模型

［10］周敏.实验性糖尿病动物模型研究及其进展［J］.浙江中医学院学报,2001,25(5)：79.
［13］郑里翔.STZ和alloxan联合使用复制实验性糖尿病大鼠模型［J］.中国病理生理杂志,1999,15(8)：758
2.2.1 链脲佐菌素（streptoxolocin,STZ）
STZ是一种广谱抗菌素，具有抗菌、抗肿瘤的性能和致糖尿病的副作用，对实验动物的胰岛β细胞具有高度选择性的毒性作用【5】。STZ诱导的糖尿病因给药方式不同，其成模效果也有所差别，如采用小剂量分次给药的方法，则建立与人类1型糖尿病表现相似的大鼠模型，如采用较大剂量一次性注射的给药方法，则建立与人类2型糖尿病表现相似的大鼠模型，其原理可能与胰岛的损伤程度有关【6】。
1型糖尿病模型（IDDM模型）：静脉或腹腔一次大剂量注射STZ所制得的速发型糖尿病系胰岛β细胞直接受损害所致：按55mg/kg给大鼠腹腔内注射STZ，由于STZ对胰岛β细胞的直接损害，胰岛的分泌减少而致血糖升高，出现糖尿病的各种表现【6】。多次小剂量注射所制得的迟发型糖尿病模型则与T淋巴细胞介导的β细胞不断破坏有关：应用30mg/kg多次注射STZ诱导大鼠DM，逐渐加重胰岛功能损伤，终达失代偿，可有效模拟糖尿病病程及发病机理，并降低动物模型的死亡率【7】。这样建立的动物模型与人类IDDM更接近。
［6］黄波,刘学政,庞东渤.不同途径注射链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型的研究［J］.锦州医学院学报,2003,24(1):19.
［8］司晓晨，尚文斌，卞慧敏，等.链脲佐菌素加高脂膳食诱导2型糖尿病大鼠模型［J］.安徽中医临床杂志,2003,15(5)：383.
［9］郭啸华，刘志红，李恒，等高糖高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠模型及其肾病特点［J］.中国糖尿病杂志,2002,10(5)：290.

STZ致大鼠Ⅰ型糖尿病模型稳定性探讨

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４４・３
西部医学２１年３月第２０２４卷第３期ＭｅＷｅｔｈｎ，ｒｈ２１，１２，．ｄＪｓｉａＭａｃ０２Ｖｏ．４性探Ｔ
．
＊
文晓红，张仁东，圆字，赵郭洋
ｎｒｌＤｒｔｒａｄｍｌｉｉｅｎｏｃｎｒｌｇｏｐａｄｅｐｒｍｅｔｌｒｕ．ＲａｓｉｈｘｅｉｎａｒｕｅａｙｍａｅＳａｓｗｅｅｒｎｏｙｄｖｄｄｉｔｏｔｏｒｕｎｘｅｉｎａｏｐｇｔｎｔｅｅｐｒｍｅｔｌｇｏｐｒ —
【中图分类号】Ｒ５７１８．【献标识码】Ａ文【章编号】ＩＩ１．９９Ｊｉｎ１７— ５１２１．３０４文３：０３６／．ｓ．６２３１．０２０．００ｓ
ＳｕｙｏｈｅｓａｉｉｙｏｙｅＩｄａｅｉｏｅｎｒｔｎｕｃｄｂｔｅｔｚｔｃｎｔｄｎｔｔｂｌｔｆｔｐｉｂｔｃｍｄｌｉａｓｉｄｅｙｓｒｏｏｏｏｉ
成模标准的大鼠（０只），１中８只ＩＧＰＴＴ异常，中３只分别在第１、８和第４ｄ血糖达成模标准；其４２２２只ＩＧＰＴＴ各天血
糖均正常。未成模大鼠有的胰岛似对照组胰岛的形态结构，的胰岛似成模大鼠胰岛的形态结构。结论Ｓ有Ｔｚ诱导大鼠Ｉ型糖尿病模型的稳定性良好；始未达成模标准的大鼠大部分糖耐量已减退，中的小部分以后可达成模标准。开其【键词】链脲佐菌素；糖尿病模型；糖；腹腔葡萄糖耐量试验；大鼠关血

改良链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型及其饲养方法

Ａｓｒｃ：ｅｍｔｏｆｔｐｚｔｉ（Ｔ）ｉｕｉｉｅｃｒｔｏｅｉｓｐｅｅａｌａｄｓｌ．ＴｉｂｔｔＴｅｈｄｏｒｔｏｏｎＳＺｎｃｇｄａｔａｍｌｓｉｌ，ｒｌｂｎｔｅｈａｈＳｅｏｃｄｎｂｉｄｍｉｅｂａｓ
Ｋｙｒｓ：ｔｐｏｏｏｉ；ｄｅｆｉｂｔａｓｆｅｉｇｅｗｏｄｓｅｔｚｔｃｎｍｏｌｏａｅｉｒｔ；ｅｄｎｒｄｃ
糖尿病是一种古老的疾病。近几十年来，随着生活水平的提高和人口的老龄化，尿病患病率出现出世界性的糖
应用于糖尿病的基础研究中。本实验通过对正常组和模型组两组大鼠的观察，发现：造模成功的大鼠在７ｈ内体２重比造模前普遍减少，多精神萎靡，皮毛缺少光泽，色灰黄，摄食量、水量、饮尿量明显增加。尾静脉采血法测量血糖时，要注意采血部位的局部消毒。
溶液，装入无菌玻璃瓶中避光，用（配现用）备现。
上升趋势，对人群总体健康的危害程度已居慢性非传染性
疾病的第３位。ｌ因此提供一种稳定、靠的糖尿病大鼠模【可
维普资讯
第２６卷
第４期
中
华
中
医
药
学
刊
Ｖｏ．６Ｎｏ４１２．
２００８年４月
ＣＨＩＳＥＡＲＣＨＩＮＥＶＥＳ０ＦＴＲＡＤＩ０ＮＡＬＣＨＩＳＥＭＥＤＩＮＥＴ１ＮＥＣＩ

链脲佐菌素诱导MSG大鼠糖尿病心脏病模型的研究

临用前用无菌注射用水配成所需浓度的溶液备用；大鼠胰岛素检测试剂盒（ＲａｔＩｎｓｕｌｉｎＥｌｉｓａ，批号：２１４３１，Ｍｅｒｃｏｄｉａ生产）；低密度胆固醇（ＬＤＬ）检测试剂盒（批号：２０１２０７６）、高密度胆固醇
衰在５年内的致死率仍然非常高：男性为５９，女性为４５＿５］。
链脲佐菌素（ＳＴＺ，批号：Ｌ２７４５３，Ａｌｅｘａ公司），临用前用ｐＨ４．２柠檬酸盐缓冲液配制成所需浓度的溶液备用；谷氨酸钠
（ＭＳＧ，ＬＲ，批号：０９０４１２，中国惠世生化试剂有限公司生产ｌｌｓｃａｎＭＫ２，芬兰Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ生产）；ＭＰ１５０十六道
生理记录仪（美国ＢＩＯＰＡＣ公司）。血糖测定仪及配套试纸（罗氏卓越型血糖测定仪，试纸批号：４７１３２１）。
部皮下注射Ｌ＿谷氨酸钠５ｇ・ｋｇ～，隔天一次，共三次；正常对照组于皮下注射等体积无茵注射用水。ＭＳＧ组于６周龄时再随机分
为４个小组，腹腔注射链脲佐菌素０ｎａｇ・ｋｇ～，２０ｒａｇ・ｋｇ～，３０ｍｇ・ｋｇ－，４０ｍｇ・ｋｇ～。于注射ＳＴＺ４ｗ后测定各心脏血流动
（ＨＤＬ）检测试剂盒（批号：２０１３００４）、总胆固醇（ＴＣ）检测试剂盒（批号：２０１３００１）以及甘油三酯（ＴＧ）检测试剂盒（批号：

糖尿病大鼠模型的建立

糖尿病大鼠模型的建立101实验动物SD大鼠，体重200-250克，8周龄。

02实验试剂1）STZ(链脲佐菌素)无色固体2-8℃干燥避光保存，115℃可分解为气体水溶液不稳定，溶于双蒸水或盐溶液。

但在低温下pH4-4.5是较为稳定。

2）柠檬酸钠，柠檬酸用于调制缓冲溶液。

03实验器材1ml注射器，大鼠固定器。

04试剂配制1）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（pH=4.5.0.1mol/L）配制0.1mol/L柠檬酸钠溶液，在用柠檬酸和氢氧化钠调节pH至4.5。

2）称量140mgSTZ溶解于10ml柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，配制成14mg/mlSTZ溶液。

05动物分组及造模1）大鼠自由摄食，饮水，动物房保持室温20-25℃，并维持一定的光照。

三天后，将大鼠随机分为实验组和对照组。

2）所有大鼠实验开始前12小时开始禁食但不禁水，禁食时间可根据情况顺延至18小时，但不要超过24小时。

3）将配置好的STZ溶液用锡箔纸包裹做避光处理并保存在冰水中，并在配制成功后30分钟内完整注射造模。

4）称量大鼠体重，采用腹腔注射给药进行造模，剂量为70mg/kg。

对照组注射等量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。

06模型指标检测血糖测定：实验过程中腹腔注射STZ 48小时和72小时分段测定大鼠血糖并记录，采用剪尾采血法，使用血糖试纸进行检测。

※两次检测血糖浓度均高于16.8mmol/ml，即可认为造模成功。

07后期饲养糖尿病大鼠会有很明显的“三多一少”症状，所以尽量分笼饲养，勤换垫料，并保证足够的饲料和饮水供给。

糖尿病大鼠慢性溃疡伤口模型201实验动物SD糖尿病大鼠（八周以上大鼠，并糖尿病造模时间超过1周并少于2周）普通SD大鼠（八周以上，时间相近）。

02实验试剂1）水合氯醛（或戊巴比妥钠）用于麻醉实验大鼠。

2）医用酒精，表层消毒。

3）龙胆紫（或苦味酸，碘酊）创口标记染液。

4）试纸，标记创口，提前裁成直径为2cm的小圆片，并浸入标记染液中。

不同剂量链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型

第３５卷
第１期
２１００年２月
贵阳医学院学报
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＵＩＹＡＮＧＥＤＩＭＣＡＬＣｏＬＬＥＧ０１２
不同剂量链脲佐菌素建立１型糖尿病大鼠模型
［ｓｒｃ］ＯｊｃｉｅＴｏｐｒｔｅｄｆｒｃｓｆｙｅ１ｄａｅｅｌｔｓ（１Ｍ）ＳｔｏｅｓＡｂｔａｔｂｅｔ：ｏｃｍａｅｈｉｅｅｅｐｉｔｍｅｉＴｖｆｎｏｔｂｓｌｕＤＤｒｄｌａｍ
ｉｄｃｄｂｉｅｅｔｏｅｆｔｐｏｏｃＳＺｎｐｉｚｅｄｓｒｓｂｉｍｎｏ１ＭｎｕｅｙｄｆｒｎｄｓｓｒｔｔｉＴ）ａｄｔｏｔｅｈｏｅｆｔｌｈｅｔｆｆｏｓｅｚｏｎ（ｏｍｉｔｏｅａｓＴＤ
模的最佳剂量。方法：０只雄性Ｓ大鼠随机分为４组，实验组分别一次性尾静脉注射４、０６ｓｋ８Ｄ３个０５、０ｍ／ｇ的
ＳＺ，Ｔ对照组注射等量的枸橼酸盐缓冲液；监测各组大鼠空腹血糖、尿糖、饮水量、采食量、尿量和体重等指标。排
ｔｅｓｍｅｖｌｍｅＴｈａｔｎｌｏｌｃｓｈａｏｕ．ｅｆｓｉｇｂｏｄｇｕｏｅ，ｕｉｅｇｕｃｓｒｎｌｏｅ，ａｄｄｉｙｗａｅｎａｅ，ｕｒｎｒｕｐｔｎａｌｔｒｉｔｋｉａｙｏｔｕ，
结果：）０组（０ｍ／ｇＳＺ组）Ｄ０组（０ｍ／ｇＳＺ组）１０组（０ｍｇｋＴ１４４ｇｋＴ、５５ｇｋＴ和９６６／ｇＳＺ组）成模率分别为的

链脲佐菌素诱导SD和Wistar大鼠糖尿病模型的影响因素

法设置共同的正常对照组，Ｗｉａ大鼠随机分为中剂量组（５ｍ／ｇ和高剂量组（５ｍ／ｇ；Ｓ ① ｓｒｔ５ｇｋ）６ｇｋ） ② Ｄ大鼠一次性
腹腔注射ｓ（５ｍ／ｇ，忆５ｇｋ）与① 中的Ｗｉａ大鼠作对比；Ｓｓｒｔ ③ Ｄ大鼠随机分为一次给药组和两次给药组，射剂量均注
【要】目的通过注射链脲佐菌素（Ｔ）作ｓ摘ＳＺ制Ｄ和Ｗｉａ大鼠糖尿病模型，ｓｒｔ观察大鼠 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 系、给药剂量、药给
次数对大鼠成模率、亡率的影响，死同时研究利用口服葡萄糖耐量试验（ＧＹ判断大鼠糖尿病成模率的意义。方ＯＴ）
（．ａｏａｒｉｌＣｎｅ，ｕｎｚｏｉｅｓｙｏｒｄｔｎｌｈｎｓｄｃｎ，Ｇｕｎｚｏ１４５ｈｎ１ＬｂｒｔｙＡｎｍａｅｔＧａｇｈｕＵｎｖｒｉｆａｉｏａｉｅｅＭｅｉｉｅｏｒｔＴｉＣａｇｈｕ５００，Ｃｉａ２ＰｗｅＩｓｉｔ，ａｇｈｕＵｎｖｒｉｆＣＭ，Ｇｕｎｚｏ４５．ｉｉｎｔｕｅＧｕｎｚｏｉｓｔｏｔｅｙＴａｇｈｕ５００，Ｃｈｎ）１ｉａ
ｍｇｋ）ａｄｍｏｅａｅｄｓｒｕｓＳＺ，５ｇｋ）／ｇｎｄｒｔｏｅｇｏｐ（Ｔ — ５ｍ／ｇ．② Ｃｍｐｒｉｓｒｒｔ，ＳａｅｎｅｔｎｒｐｒｏｅｌｗｔｏａｅｗｔＷｉａａｓＤｒｔｗｒｉｃｅｉｔｅｉｎａｙｉｈｔｓｅｊｄａｔｌｈ

不同剂量链脲佐菌素腹腔注射制备大鼠糖尿病心肌病模型的病理学观察

ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔ０ｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎｄｉｆｅｒｅｎｔｄｏｓｅｓｏｆＳＴＺ
ＬＩＵＸｉｎ．ｐｉｎｇ，ＺＨＡＮＧＫａｉ，ＣＨＵＱｕａｔｒ．ｇｅｎ，ＷＵＹｕａｎ－ｊｉｅ，ＢＩＨｕａ－ｊｉａｎ
增多，排列紊乱，分布不均。５５ｍ／ｋｓｇ剂量的ＳＴＺ单次注射大鼠腹腔，造模３周可以建立较明显的ＤＣＭ模型，可为
ＤＣＭ的组织病理学和实验研究提供一个较好的动物模型。关键词：糖尿病性心肌病；链脲佐菌素；组织病理学变化；大鼠
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｍｙｏｃａｒｄｉｕｍａｎｄｐａｎｃｒｅａｓｉｎｒａｔｓｔｈｒｏｕｇｈｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｄｉａｂｅｔｉｃｃ￣ｄｉｏｍｙｏｐ —
中图分类号：Ｒ３６１．２文献标识码：Ａ文章编号：２０９５—１７３６（２０１３）０６— ００１４— ０４
Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｄｉａｂｅｔｉｃｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙｗｉｔｈｒａｔｓｂｙ

链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型

表 2 各组大鼠空腹血糖情况比较
第1周 4．32 ± 2．23 9．35 ± 4．32* 15．28 ± 1．39*
第4周 4．34 ± 2．02 12．47 ± 4．42* 17．75 ± 2．65*
第8周 4．38 ± 1．17 17．26 ± 6．83* 21．16 ± 2．70*
组别
正常组糖尿病对照组高脂组
关键词糖尿病，2 型；链脲佐菌素；动物模型；血糖
Establishment a rat model for non-insulin-dependent diabetes mellitus induced by streptozotocin in combination with high-sugar and high-fat diets HUANG-Yan*， CHEN En-yu， CHEN Ya-fen， YANG Xiaomei． *Department of Optometry and Ophthalmology， Fujian Medical University， Fuzhou 350004， China
中 2 s，立即取出并开始计时，计时到比色表上规定的比色时间即将试纸片与瓶贴上的比色表进行比较判断结果。依据尿液中葡萄糖的含量由低到高而依次呈现出米白（＋）、浅蓝（＋＋）、蓝色（＋＋＋）或深蓝色（＋＋＋＋）。本试纸的灵敏度很高，葡萄糖含量在 10 mg ／ dL 即可发生阳性反应，且不受尿中维生素 C 的影响。 1．5 统计学方法计量资料采用 x ± s 表示，组间和组内比较用单因素方差分析，尿糖阳性例数用半定量资料卡方检验，P ＜ 0．05 为差异有统计学意义。统计软件为 SPSS 13．0 软件包。 2 结果 2．1 各组大鼠体重比较造模 1 个月内，高脂组体重比糖尿病对照组、正常组明显增加，差异有显著性（P ＜ 0．05）。成模 1、2 个月后，高脂组体重较成模前明显下降，逐渐出现消瘦、毛发发黄粗糙、多饮多食多尿等表现，正常组毛发光亮顺滑。见表 1。

高脂喂养联合链脲佐菌素诱导大鼠2型糖尿病模型研究

现糖尿病 “ 多一少 ” 型症状，Ｂ值未达成模标准；三典ＦＧＣ组（脂喂养＋５ｍ／ｋＴ）现糖尿病典型症状、Ｂ值显著升高且高４ｅｇＳＺ出ＦＧ
达成模标准；盐酸二甲双胍（０ｓｋ）格列美脲（ｇｋ）２０ｍｇ、／２ｍ／ｇ对此方法诱导出来的糖尿病大鼠有显著的降糖作用。结论：高脂喂养联合ＳＺ４／ｋ）Ｔ（５ｍｓｇ诱导大鼠２型糖尿病的方法有效且模型长期稳定。
［键词］２型糖尿病；关高脂喂养；脲佐菌素；鼠链大
Ｔｙｅ２ｒｉｂｔｃｍｏｌｎｄｅｙｇ — ｆｅｄｎｇｃｍｂｉｅ、ｐａｔｄａｅｉｄｅｓｉｕｃｄｂｈｉｈａｔｆｅｉｏｎｄ ⅡｌＳｔｅｏｏｉｒｐｔｚｃｎＷＡｉＮＧＪａ—ｈｉＳｕ．ＨＥＮ５Ｘ一
大鼠２型糖尿病方法制备模型，续给予糖尿病大鼠治疗２型糖尿病药物盐酸二甲双胍（０／ｋ）、来酸罗格列酮（、、连２０ｍｓｇ … 马３６
１ｇｋ）格列美脲（＿、、ｇｋ），２ｍ／ｇ、２３４８ｍ／ｇ５ｄ研究该模型的有效性。结果：］注射ＳＺｌＴ周后Ｂ组（高脂喂养＋０ｍｋＴ）出３ｓｇＳＺ没／
ａ —ｌｇＦｈｎｏｉ，ＵＣｏｇ—ｗｉｅａ（ｒｉｌｄｃｅＩｓｔｔｏｎｎｚｏｎｅｉｈｅｅｄｉｅＧａｇｈｕ５００，ｈｎ）ｎｅ，ｔｌＴｏｃｉｎｔｕＧｇｈｕＵｗ￣ｔｏｉｓＭｅ￣ｎ，ｕｎｚｏ１４５ＣｉａｐａＭｅｉｎｉｅｆａｙｆＣｎ

链脲佐菌素和高脂高糖饲料在大鼠2型糖尿病造模中的应用

链脲佐菌素和高脂高糖饲料在大鼠2型糖尿病造模中的应用*张本天1，安全1，费敏1，丁雨蒙1，袁维刚1，徐华容1，李军1，谢静1，谢航1，丁未尧1，罗浩1，张敢1，郭莹莹1，蔡飞1，2＊＊（1．湖北科技学院药学院，湖北咸宁437100；2．湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室）摘要：目的研究2型糖尿病的高效造模方案。

方法采用高糖高脂与链脲佐菌素联用制作糖尿病模型，通过大鼠血糖和生活表现来评定方案的优缺性。

结果高糖高脂饲料按比例喂养后，加用链脲佐菌素腹腔注射多次，可很好的在大鼠中建立2型糖尿病模型。

结论高糖高脂联合链脲佐菌素可成功制作糖尿病模型。

关键词：糖尿病；高糖高脂饲料；链尿佐菌素中图分类号：R965文献标识码：A文章编号：2095-4646（2012）06-0468-02Application of Streptozotocin and High-fat，High-sugar Diet in Rat Model of Type2DiabetesZHANG Ben-tian，CAI Fei，AN Quan，et al（College of Pharmacy，Hubei University of Science and Technology，Xianning Hubei437100，China）ABSTRACT：Objective To explore the efficient method for establishment of type2diabetic model．Methods The diabetic model was established by feeding high-sugar，high-fat diet，combined with intraperitoneal injection of streptozotocin．Blood glucose and general living performance were used to assess the method．Re-sults High-sugar，high-fat diet in combination with multiple intraperitoneal injection of STZ can establish suc-cessfully the model of type2diabetes in rats．Conclusion The diabetic model can be successfully produced by high-sugar，high-fat diet combined with streptozotocin．KEY WORDS：Diabetes；High-sugar and High-fat diet；Streptozotocin近年来，人民生活水平的提高、人口老化、生活方式改变，2型糖尿病患者正逐年增加，且趋于年轻化［1］。

链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型稳定性观察

［ｓｒｃ］ＯｂｅｔｅＴｂｅｖｈｔｉｔｏｐｉｅｅａｄｌ（１Ｍ）ｉｄｃｄｂＡｂｔａｔｊｃｖ：ｏｏｓｒｅｔｅｓｂｌｙｆｔｅ１ｄａｔｒｔｉａｉｙｂｓｍｏｅＴＤｎｕｅｙ
ｓｅｔｏｏｉＳＺ。ｎｘｌｅｓｎａｄｆＳｃｅｓｌｏｅｉｇｔｐｏｔｎ（Ｔ）ａｄｔｅｐｏｔｄｒｓｏｕｃｓｆｄｌ．Ｍｅｈｄ：ＴＭｍｏｅｗｓｒｚｃｏｒａｕｍｎｔｏｓ１ｄｌａＤ
ｌ．Ｆｓｎｌｄｇｃｓｙａｔｇｂｏｌｏｅ≥１．ｍｏＬｋｐｒ３ｗｅｓｔｊｃｏｆＳＺａｈｔｎａｄｆｒｉｏｕ６７ｍｌｅｔｅｋｅｉｅｔｎｏＴｓｔｅｓｄｒ／ｏｆｆａｒｎｉａｏ
的标准。方法：型组采用ＳＺ５ｇｋ的剂量进行腹腔注射复制ＴＤ大鼠模型，模Ｔ按０ｍ／ｇ１Ｍ对照组ｓ鼠则腹腔Ｄ大
注射等量的ｐ４２０１ｍＬＬ柠檬酸— Ｈ．、．０／柠檬酸钠缓冲液，分别在腹腔注射后７、、周、、、、、２ｈ１周２３周４周５周６周
第３７卷第１期２１０２年２月
贵
阳医学
院
学报
ＪＯＵＲＮＡＬ０ＦＧＵＩＹＡＮＧＥＤＩＭＣＡＬＣＯＬＬＥＧＥ
Ｖ０．７ＮＯ．１３１２２．０１２
链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型稳定性观察木
为建模成功的标准。
［关键词］链脲佐菌素；糖尿病，胰岛素依赖型；模型，动物；标准［中图分类号］Ｒ８．５７１［文献标识码］Ａ［文章编号］１０－０（０２０－４－００２７２１）１００３７００

STZ糖尿病模型(来自丁香园)

造模方法（1）链脲佐菌素（Streptozotocin）诱导大鼠糖尿病模型方法将大鼠禁食12h，按60mg/kg体重腹腔注射STZ，每日1次，连续2次，成功制备Ⅰ型糖尿病大鼠模型，并且该模型具有高血糖、体重减轻、多饮多食多尿的特点，与临床Ⅰ型糖尿病吻合；但在此实验中，若造模组只腹腔注射STZ一次，并给予高热量饲料饲养12周，则可制备Ⅱ型糖尿病动物模型，且按该法制备出的模型具有超重、糖耐量减低、血脂升高、血清胰岛素升高及胰岛素受体结合力降低伴胰岛素抵抗的特点，类似于Ⅱ型糖尿病病人的临床特征。

Ⅰ型糖尿病与Ⅱ型糖尿病动物模型的制备可能与STZ注射的剂量有关系：大剂量（常为120mg/kg）注射时，由于直接引起胰岛β细胞的广泛破坏，可造成Ⅰ型糖尿病模型；而注射较少量STZ时，由于只是破坏一部分胰岛β细胞的功能，造成外周组织对胰岛素不敏感，同时给予高热量饲料喂养，两者结合便诱导出病理、生理改变都接近于人类Ⅱ型糖尿病的动物模型。

/bbs/actions/archive/post/5636508_0.html（2）你还是采用腹腔的比较好！按65或是70给都可以。

最好是给STZ后7天开始测定血糖分组为好，这样血糖已经稳定了！我给我的一个朋友用ALLOXAN，尾静脉。

大鼠，50mg/kg,全都死亡了！给STZ前有的说禁食，有的说不用，但还是禁的好些，给STZ后，也不要立即给予食物，1小时后再给。

还有腹腔注射的手法要正确！！给STZ要快，最好在冰水中冷却溶液！/bbs/actions/archive/post/672237_0.html（3）链脲霉素（STZ）诱导的高血糖动物模型STZ水溶液不稳定，对小鼠的生物半衰期仅有5min左右，需要快速静脉注射。

造型剂量犬50mg/kg，静注，可引起糖尿病，动物死亡率较高；如15mg/kg，连续3天也可。

大鼠60-80mg/kg，iv或ip，小鼠100-200mg/kg，iv或ip。

实验三大鼠糖尿病模型的复制

3 载玻片和盖玻片的处理：（1）清洗：新载玻片上有油污，必须经过清洁液浸泡 12～24h，流水充分漂洗后用蒸馏水清洗5遍以上，浸泡在95%酒精内2h，用绸布擦干或用红外线烤箱烤干均可，贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄，以上处理程序必须缩短，清洁液浸泡只需2h，流水冲洗注意勿损伤玻片等。（2）载玻片上涂粘附剂：多聚赖氨酸液：多聚赖氨酸 0.1g，加蒸馏水10ml，混合后即可涂片。
冰冻切片前处理
1取材：组织标本主要取之于活组织检查标本、手术切除标本、动物模型标本以及尸体解剖标本等。前三者均为新鲜组织，后者是机体死亡2h以上的组织，可能有不同程度的自溶，其抗原可能有变性消失，严重弥散现象，因此，尸检组织应尽快固定处理， 2固定：为了更好的保持细胞和组织原有的形态结构，防止组织自溶，有必要对细胞和组织进行固定。固定液：4%多聚甲醛磷酸缓冲液pH7.4（多聚甲醛 40g,0.1mol/L PBS液pH7.4500ml，两者混合加热至60℃，搅拌并滴加1n NaOH至清晰为止，冷却后加PBS液至总量 1000ml）。方法：浸入法，将组织浸泡在固定液中
操作方法：
Ⅰ型糖尿病造模方法：
1. 链脲佐菌素(stz)建模，造模前的喂养 Ⅰ型糖尿病模型成模比较快，通常大鼠在普通饲料适应性喂养2周后即可开始造模。禁食12小时以上(一般过夜禁食，不禁水)。禁食的时间越长， STZ对胰岛β细胞的破坏力越明显，即药效越高。所以相对禁食时间延长，可以降低STZ的用量。 2. 测正常大鼠血糖，给药，链脲菌素溶于枸缘酸缓冲液或柠檬酸缓冲液（pH值为4.0－4.5）中， 70~65mg/kg给大鼠腹腔注射；35、45、55、 65mg/kg（0.35、0.45、0.55、0.65ml/100g）。

链脲佐菌素诱导建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型

关键词：链脲佐茵素；糖尿病；动物模型
１４实验动物分组和模型建立．
近年来，随着人们生活水平的提高，糖尿病的发
膜等并发症日趋严重，由于其发病机理、因尚未完病全阐明，糖尿病已成为当今医学三大难症之一，目前
全社会在糖尿病的研究上投入巨大的人力和财力。
维普资讯
动物医学进展．０６２（）１４１６２０，７８：１ —１
ＰｒｇｅｓｉｔｒｎｒｅｉｉｏｒｓｎＶｅｅｉａｙＭｄｃｎｅ
蔷
袋
口
瞩临床资料
链脲佐菌素诱导建立Ｉ糖尿病大鼠模型型
吴清洪，为望，顾袁进
（南方医科大学实验动物中心，广东广州５０１）１５５
摘．：了建立工型糖尿病动物模型，要为通过１２主要试剂和设备．对Ｗｉａ大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素ｓｒｔ链脲佐菌素（Ｔ）Ｓｇ公司；ｓｚ，ｉｍａ微量血糖测定
将４只Ｗｉａ大鼠随机分为试验组（只）Ｏｓｒｔ２和０
性腹腔注射ＳＴＺ液（５ｍｇｋ）对照组注射等量的６／ｇ，柠檬酸三钠一檬酸缓冲液，使用代谢笼单只喂柠并
养。
．
病率呈逐年上升的趋势，伴随心血管、并肾脏、网对照组（０只）试验前动物禁食１，验组一次视２；２ｈ试

[感悟]stz造模

链脲佐菌素(Streptozocin,STZ )诱发糖尿病动物模型的原理:STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用，能诱发许多动物产生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。

国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。

1型糖尿病与2型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系：大剂量注射时，由于直接引起胰岛β细胞的广泛破坏，可造成1型糖尿病模型；而注射较少量STZ时，由于只是破坏一部分胰岛β细胞的功能，造成外周组织对胰岛素不敏感，同时给予高热量饲料喂养，两者结合便诱导出病理、生理改变都接近于人类2型糖尿病的动物模型。

造膜前的喂养:Ⅰ型糖尿病模型成模比较快，通常大鼠在普通饲料适应性喂养2周后即可开始造模。

Ⅱ型糖尿病模型：高脂饮食诱导加小剂量STZ。

造模前喂以高脂(高糖)饲料，诱发出胰岛素抵抗。

高脂(高糖)饲料：高脂(高糖)饲料成分：其中含10蔗糖，10猪油，5胆固醇。

由基础鼠饲料加蔗糖、炼猪油和蛋黄按比搭配制作高脂高糖饲料：其比例为猪油18 ,蔗糖20 ,蛋黄3 ,基础饲料59 。

预实验的重要性：很重要。

实验时STZ的给药量应参照预实验的结果，尽量不要盲目按照文献上或他人的给药量来直接使用，鼠均重和空腹(低糖状态)抗药力、禁食时长、注射选时、以及之前饲养过程、测糖选时等都不相同，通过预实验来确定符合自己实验鼠的给药计量，才是最科学的。

常用给药剂量：Ⅰ型糖尿病模型：大鼠剂量为70～65mg/KgⅡ型糖尿病模型：高糖高脂喂养1～2 个月的大鼠,STZ 剂量在25～40mg/Kg 。

或参考文献（鼠均重不同，本剂量以200克均重为例）。

配置STZ液：柠檬酸缓冲液的配制：柠檬酸(FW:210.14) 2.1g加入双蒸水100mL中配成A液；柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成B液。

用时将A、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1:1的），PH计测定ph值,调节ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。

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链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型血清胰岛素和血清C-肽的变化及探讨
田毅
杜家忠,李宝龙,李松滨
黑龙江中医药大学哈尔滨 150040
摘要目的建立链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型观察其血清胰岛素Ins 和血清C-肽C-P
变化情况
方法腹腔注射链脲佐菌素
制作大鼠糖尿病模型
用放射免疫分析法测定Ins 和C-P
结果成功建立糖尿病大鼠模型实验动物用放射免疫分析法测定Ins 结果比较无显著性差异C-P
结果比较差异显著结论 RIA 法检测链脲佐菌素所导致的大鼠糖尿病模型C-P 较Ins 更能反映胰岛细胞分泌功能
关键词
链脲佐菌素
糖尿病
大鼠/动物模型
放射免疫分析法
RIA
血清胰岛素
血
清C 肽
Abstract
Object To establish the rat model of diabetes mellitus by STZ. Observe the Insulin and C-P of rat model. Methods Make the model by the STZ Injection. Observe the the Insulin and C-P by the RIA. Results Establish the model rat of diabetes mellitus successfully. The Ins between rat model team and contrast team is no significance. The C-P between rat model team and contrast team is significance. Conclusions The C-P is more useful to observe the model rats
-cell funcion than Ins by RIA.
根据WHO 公布的数据显示糖尿病已经成为全球第3位威胁人类健康的慢性非传染性疾病在发达国家中45岁以上人群中糖尿病患病率已经高达10%20%且不论是发达国家还是发展中国家
糖尿病患病率均呈逐年增加的趋势
并有随年龄增长患病率上升的高龄高患病率的特点
过去
5年糖尿病的发病率以11%的速度增长目前全世界已有l.5l 亿患者预计到2025年患病人数将达3亿中国发病率1996年为3.2%目前已超过3000万预计到2010年将增至14%城市发病率是农村和其它低收入区的3倍
1.材料和方法 1.1材料
1.1.1动物健康Wistar 大鼠雄性体重250-300g 由黑龙江中医药大学实验动物中心提供合格证号
黑动字第P0*******
1.1.2药物及试剂链脲佐菌素Streptozocin STZ
美国sigma 公司产品柠檬酸柠檬酸钠
上海化工试剂公司血清C-肽C-P 放射免疫分析测定盒血清胰岛素Ins 放射免疫分析测定盒
北京北方生物技术研究所
1.1.3仪器会好III型全自动血糖仪及试纸美国会好医疗设备有限公司生产FJ-2003PS型
放射免疫计数器西安核仪器厂
1.2方法
从正常大鼠群中随机抽取23只禁食不禁水12小时尾静脉取血测空腹血糖FBG实验组STZ用柠檬酸柠檬酸纳缓冲液pH4.0配制成2%浓度溶液一次性腹腔注射40mg/kg空白组单纯注射缓冲液3小时后恢复饮食4天后,禁食12小时,测FBG FBG测定完毕以20%浓度的氨基甲酸乙酯溶液腹腔注射7ml/kg麻醉动物剪开颈部皮肤钝性剥离各层组织游离颈动脉取颈动脉血置于加有3.8%柠檬酸钠0.5ml的硬质试管中3600转离心5分钟取血清检测Ins和C-P
2.结果
见表12
表1实验动物处理前后FBG水平的比较x S
组别N
1 处理前mmol/L N
2 处理后mmol/L
空白组 10 5.89 1.185 10 5.73 1.179
实验组 13 5.88 1.222 9 23.46 5.732与处理前比较P<0.01与空白组比较P<0.01
表2治疗后Ins和C-P水平的比较x S
组别例数 Ins C-P
空白组 10 42.7013.367 2.390.263
实验组 9 44.7025.006 1.220.525
P<0.01
3.讨论
放射免疫分析RIA是测定血中超微量生物活性物质的方法临床对胰岛细胞功能的了解一
般是通过RIA法测定外周血液中由细胞分泌的诸激素的浓度变化而间接获得的目前采用平衡放射
免疫分析法测定样本中微量物质含量测定时在反应管中先加入一定量抗体及标记抗原使其与非标
记抗原进行竞争性结合当非标记抗原少时抗体结合标记抗原就多反之则少应用免疫分离剂分
离结合相和游离相使结合相沉淀测定沉淀物的的放射性计数根据结合率绘制标准曲线根据标
准曲线查得样品中Ins C-P含量
由胰岛细胞分泌的激素有胰岛素Ins胰岛素原或胰岛素前体PI C-P及其中间代谢产物
用RIA测定出来的胰岛素中有一部分并非是胰岛素而是PI用此方法难以排除PI免疫交叉反应的影
响故以RIA测定的胰岛素又称为免疫反应性胰岛素IRI在糖尿病患者及实验性糖尿病动物血
液中由于胰岛细胞的功能异常胰岛素原大量存在于血液中胰岛素原在IRI中的比例可高达50%正常为5%-15%从而干扰了RIA对胰岛素的准确测量故用IRI来计算的细胞功能指数及胰岛素分泌率等参数的可靠性令人置疑这种由于胰岛素原对胰岛素RIA测定的干扰使得RIA
的可比性差各实验室结果比较较为困难
C-P是由31个氨基酸残基组成的由胰岛细胞分泌的分子量为3020左右的单链多肽由于C-P 和胰岛素以等克分子的比例从胰岛细胞释放至血液因此测定血清C-P可以反映细胞的功能此外由于胰岛素抗体和C-P没有交叉反应而药用胰岛素中又不含C-P所以外源性胰岛素胰岛素原和胰岛素抗体均不影响C-P的测定因此测定C-P对于接受胰岛素治疗的患者更能精确地判断
细胞的分泌功能而且对于糖尿病的分型治疗和预后估计以及对于糖代谢有关疾病的科学研究都具有十分重要的意义
实验结果显示实验动物成模后Ins水平比较结果无显著性差异且离散度较大实验组和空白组C-P水平有显著性差异P<0.01
由于Ins的RIA测定受到的干扰因素十分复杂测定值无显著性差异的原因可能与以下几个因素有关首先由于实验性糖尿病大鼠的胰岛细胞受到破坏其分泌的胰岛素PI比例与正常大鼠不同PI的比例过高对RIA法的干扰过强造成差异的不显著其次由于受到破坏的胰岛细胞成分进入血液作为抗原激活免疫应答反应生成相关抗体干扰RIA的测定另外实验性糖尿病大鼠存在的胰岛素抗体也是干扰RIA测定的因素之一以上几个因素综合作用可能使Ins测定受到的干扰过大造成测定结果间差异不显著
同时我们看到实验动物的C-P检测指标较Ins理想从C-P的分泌特性上看检测实验动物的C-P更能有效地反映出链脲佐菌素所导致的实验性糖尿病大鼠胰岛细胞的分泌功能试验结果提示我们在对由链脲佐菌素造成的实验性糖尿病大鼠模型的检测和应用过程中应当
充分考虑到实验动物本身激素的分泌水平的变化特征以及测定方法的原理及其特点选取相应的检测
方法和指标合理应用链脲佐菌素造成的实验性糖尿病大鼠模型
参考文献
1.第60届美国糖尿病协会ADA年会大会报道.中国糖尿病杂志200086374
2.郭妮.胰岛细胞功能检测方法及评价,广西医学,2001;423293。