蛋白质的提取和分离 专题训练
蛋白质的提取和分离 专题训练
蛋白质的提取和分离专题训练一．选择题1．下列有关蛋白质的提取和分离的操作，其中排序正确的是()。
A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定2．下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是()。
A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱3．在蛋白质的提取和分离中，下列对样品处理过程的分析正确的是()。
A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果C．洗涤过程选用质量分数0.1%的NaCl溶液(生理盐水)D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质4．下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是()。
A．可采集猪血作为实验材料B．用蒸馏水重复洗涤红细胞C．血红蛋白释放后应低速短时间离心D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液5．蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。
下列叙述不正确的是()。
A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质6．凝胶色谱法分离蛋白质时使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG—75)，其中G、75的含义分别是()。
A．G表示凝胶的使用量，75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度，75表示需加热75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5 g D．G表示凝胶的膨胀体积，75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm37．用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质()。
一轮复习：蛋白质的提取与分离作业2
1、血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。
请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
(1)将实验流程补充完整：A为________，B为________。
凝胶色谱法是根据______________________而达到蛋白质分离的有效方法。
(2)洗涤红细胞的目的是去除________，洗涤次数过少，无法除去________；离心速度过高和时间过长会使________一同沉淀，达不到分离的效果。
洗涤干净的标志是__________。
释放血红蛋白的过程中起作用的是__________。
(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是__________________。
如果红色区带__________，说明色谱柱制作成功。
2、凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。
据图回答下面的问题。
(1)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是______，原因是________________________。
(2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由________替代。
(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是_______________。
(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体______(填“相同”或“不同”)，洗脱时，对洗脱液的流速要求是________。
3、(2012·太原模拟)试回答下列“蛋白质提取与分离实验”和“叶绿体中色素提取和分离实验”的有关问题：(1)为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是_____。
人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题
人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题一、单选题1. 蛋白质提取过程中有关透析的叙述，错误的是A．用于透析的薄膜要具有选择透过性B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析可用于更换样品的缓冲液2. 在采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是（）A．调节pH B．维持红细胞的能量供应C．防止微生物生长D．防止血液凝固3. 凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶（Sephadex G75）,其中G、75的含义分别是（）A．G表示凝胶的使用量,75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度,75表示需加热至75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示每克凝胶及膨胀时吸水7.5 gD．G表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm34.用某种药物饲养动物一段时间，测得实验组比对照组动物血浆中血红蛋白含量明显偏高。
该药物的作用最可能是A ．增加血红蛋白的合成能力C ．对红细胞有破坏作用5. 血红蛋白由____________个肽链组成（ ）A ．2B ．4C ．3D ．56. 分离血红蛋白溶液时,离心后试管中的溶液分四层,血红蛋白在第__________层（ ）A ．一B ．二C ．三D ．四7. 洗涤红细胞时，离心所采用的方法是A ．低速长时间离心B ．低速短时间离心C ．高速长时间离心D ．高速短时间离心8. SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS 的作用是A ．增大蛋白质的相对分子质量B ．改变蛋白质的形状C ．掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D ．减少蛋白质的相对分子质量9. 随着人类跨入蛋白质组时代,对蛋白质的研究和应用越来越深入,首先要做的一步是（ ）A ．弄清各种蛋白质的空间结构B ．弄清各种蛋白质的功能C ．弄清各种蛋白质的合成过程D ．获得高纯度的蛋白质10. 制作凝胶色谱柱时,橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是（ ）A ．移液管头部5 cmB ．移液管尾部5 cmC ．移液管头部3 cmD ．移液管尾部3 cmD ．增加红细胞的合成数量B ．提高血浆蛋白的含量二、非选择题11. 蛋白质的各种特性的差异,可以用来分离不同种类的蛋白质,下列对这种特性的描述中正确的一项是……（ ）A ．分子的形状、大小和溶解度B ．所带电荷的性质和多少、吸附性质C ．对其他分子的亲和力D ．以上三项都是12. 使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）A ．电荷的多少B ．分子的大小C ．肽链的多少D ．分子形状的差异13. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是（ ）A ．相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B ．相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C ．相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D ．二者根本无法比较14. 蛋白质的提取和分离一般分为四步,符合要求的一项为（ ）A ．粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B ．粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C ．样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D ．纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理15. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是 A ．对其他分子的亲和力C ．所带电荷多少D ．相对分子质量的大小B ．溶解度（）入烧杯,加入五倍体积的__________缓慢搅拌__________min,低速短时间离心,重复洗涤__________次,至上清液中无__________，则表明红细胞洗16.采集血样后,及时分离红细胞。
4.2 蛋白质的提取和分离 学案(含答案)
4.2 蛋白质的提取和分离学案（含答案）第第14课时课时蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离学习导航1.阅读教材P7475内容，理解电泳.同工酶和蛋白质组学。
2.结合教材P7375内容，进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。
3.结合教材P7375内容，总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。
重难点击1.进行乳酸脱氢酶同工酶的提取和电泳分离。
2.总结在琼脂糖凝胶电泳中影响蛋白质迁移率的因素。
一一..电泳电泳..同工酶和蛋白质组学同工酶和蛋白质组学带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。
电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。
1电泳1概念带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
2原理带电粒子许多重要的生物大分子，如多肽.核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
迁移动力与方向在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
分离依据电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小.形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
3常用的电泳方法琼脂糖凝胶电泳在电泳缓冲液和凝胶中加入琼脂糖，蛋白质分子的迁移速率主要取决于其所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。
变性胶电泳在电泳缓冲液和凝胶中加入二烷基硫酸钠SDS变性剂，蛋白质都变为椭圆形，SDS带有大量的负电荷，掩盖了不同蛋白质的电荷差异，因此变性胶电泳中影响蛋白质的迁移速率的主要因素是蛋白质分子的大小。
2同工酶同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构.理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
乳酸脱氢酶一般含有5种同工酶，其相对分子质量相同，但所带电荷不同。
3蛋白质组学蛋白质组学指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征，包括蛋白质的氨基酸组成分析.立体结构研究和蛋白质的人工合成等。
由此获得蛋白质水平上的关于疾病发生.细胞代谢等过程的整体而全面的认识。
酶的研究与应用+蛋白质的提取和分离练习题(教师)
一、酶的研究与应用1．（2015春•沭阳县期中）如下是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞（1）在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态，一般是将干酵母放在蒸馏水中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时体积会增大．（2）影响实验成败的关键步骤是配制海藻酸钠溶液．（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目少．（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明海藻酸钠浓度偏高，制作失败．（5）固定化细胞技术一般采用包埋法固定化，原因是细胞个体大，不易从包埋材料中漏出．（6）该实验中CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉．（7）将海藻酸钠与酵母细胞混合时要等海藻酸钠冷却至室温，再加入活化的酵母细胞．2．（2015春•雨城区校级月考）工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率。
为研究温度对果胶酶活性的影响，某学生设计了如下实验：①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在100C水浴中恒温处理10min（如图A）。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴恒温处理10min（如图B）。
③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。
（1）果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以促进细胞壁中的果胶水解。
（2）实验结果表明，在上述8组实验中，当温度为40℃时果汁量最多，此时果胶酶的活性最高。
当温度再升高时，果汁量降低，说明酶活性降低。
（3）实验步骤①的目的是避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度，从而影响果胶酶活性。
实验操作中，如果不经过步骤①的处理，直接将果胶酶和苹果泥混合，是否可以？请解释原因。
3．（2018•未央区校级模拟）果胶酶能分解果胶等物质，可以用来澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用．回答下列问题：（1）果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶．食品工业中之所以使用果胶酶澄清果蔬饮料，是因为果胶酶能破坏植物的细胞壁结构．（2）微生物是生产果胶酶的优良生物资源．分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应该以果胶为唯一碳源；为了纯化该生物，需要在固体（填“固体”或“液体”）培养基上接种菌种，最常用的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板法．（3）在榨汁果汁前，要将果胶酶和果泥混匀保温，目的是提高出汁率；过滤后要用果胶酶处理果汁，目的是使果汁变澄清．（1）霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂．某科研小组为了筛选出果胶酶的高产菌株，进行了相关实验．第一步：取样．如果你是该小组的成员，你最好从果园中的土壤或腐烂的水果中去取样分离产果胶酶的菌株．第二步：制备培养基．筛选果胶酶高产菌株的培养基，主要营养成分有：水、果胶、硝酸钾、高碘酸（果胶的降解产物可以溶于高碘酸而在培养基上形成透明圈）等．在该配方中，硝酸钾是微生物需要的氮源和无机盐．为了便于分离纯化目的菌株，培养基中除了加入上述物质外，还必须加入琼脂．培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法．第三步：培养及筛选．培养基上接种后，在300C恒温箱中培养48h，挑选出周围形成透明圈最大的菌落作为生产果胶酶的菌种．从筛选出的微生物中分离提取的果胶酶通常需要检测酶的活性，以确定其应用价值．（2）在利用筛选出的霉菌进行生产时，科研人员发现影响果胶酶生产的因素很多，并且它们之间还可能相互影响．他们首先研究了温度对酶产量的影响，实验结果如图甲，然后又分别研究了碳源、氮源浓度（各五个水平）对生产的影响，得到图乙和丙．①科研人员在研究碳源浓度对酶产量的影响时，应设定的培养温度是30℃，如果将温度控制在5．C，能否到的图乙所示图象：不能，原因是温度太低导致酶的活性过低．②在生产中他们根据上述研究结果，将各个变量都设定为最适条件，却发现酶的产量不是最高的，要想继续探究最佳的培养条件，他们该如何进一步进行实验：将各种影响因素的不同水平逐一组合，依次实验．5．（2010•浙江）“生物技术实践”模块请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上。
高考生物一轮复习 每日一题 蛋白质的提取与分离 新人教版高三全册生物试题
蛋白质的提取与分离高考频度：★★★☆☆难易程度：★★★☆☆典例在线下列关于蛋白质的纯化方法的叙述，错误的是A．纯化主要是根据蛋白质以及蛋白质与其他物质之间的理化性质的差异进行的B．透析法可去除小分子化合物杂质，原理是不同分子所携带净电荷不同C．通过控制离心速率，可使分子大小、密度不同的蛋白质沉降分层，从而分离不同的蛋白质D．不同的物质在同一电场中的移动速度不同，因此可用电泳法分离蛋白质【参考答案】B的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质，D项正确。
解题必备蛋白质提取与分离的实验操作的注意事项1．红细胞的洗涤：洗涤次数不能过少；低速、短时离心。
2．色谱柱的装填：装填尽量紧密，降低颗粒间隙；无气泡；洗脱液不能断流。
3．凝胶的预处理：沸水浴法时间短，还能除去微生物和气泡。
4．色谱柱成功标志：红色区带均匀一致地移动。
学霸推荐1．红细胞中含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。
下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是A．血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C．样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白D．可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定2．相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个3．红细胞内含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
请回答下列有关问题：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：________、粗分离、纯化和________。
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行处理、离心后，收集血红蛋白溶液。
以上所述的过程即是样品处理，它包括红细胞的洗涤、____________________、____________________。
蛋白质的提取和分离练习题
蛋白质的提取和分离练习题【基础达标】1．选用猪、牛、羊成熟的红细胞作分离蛋白质的实验材料,下列是其优点的是（）A.血红蛋白是无色蛋白B.红细胞有细胞核C.红细胞蛋白质含量高D.红细胞DNA含量高【答案】C【解析】哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,核物质也消失,所以红细胞内几乎没有DNA；血红蛋白是有色蛋白，红细胞蛋白质含量高。
故选C。
2．血红蛋白释放时，红细胞破裂的原因不包括（）A.红细胞吸水膨胀B.磁力搅拌器的充分搅拌C.血红蛋白变性D.甲苯对细胞膜的溶解【答案】C【解析】血红蛋白释放时，红细胞破裂的原因是红细胞吸水膨胀、甲苯对细胞膜的溶解、磁力搅拌器的充分搅拌等，血红蛋白不会变性。
故选C。
3．蛋白质分离和提取的步骤可分为（）A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定【答案】C【解析】蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。
故选C。
4．将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，第2层是（）A.甲苯B.血红蛋白水溶液C.脂溶性物质的沉淀层D.其他杂质的沉淀【答案】C【解析】A项错误：甲苯层位于第1层；B项错误：血红蛋白水溶液位于第3层；C项正确：第2层是脂溶性物质的沉淀层；D项错误：其他杂质的沉淀物位于第4层。
5．下列有关提取和分离血红蛋白的程序叙述错误的是（）A.样品处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B.通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取C.可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化D.可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度【答案】BA项正确：样品处理是洗涤红细胞,使血红蛋白释放出来,通过离心法得到血红蛋白溶液； B项错误：透析的原理是透析袋能使小分子物质自由进出,而袋内的大分子物质留在袋内即可除去样品中相对分子质量较小的杂质； C项正确:凝胶色谱法中的凝胶内部通道只允许相对分子质量较小的蛋白质通过,而相对分子质量较大的蛋白质则被排阻在凝胶颗粒之外，即达到样品纯化的目的；D项正确：判断纯化的蛋白质是否达到要求,通常用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法对蛋白质的纯度进行鉴定。
高中生物蛋白质的提取和分离
高中生物蛋白质的提取和分离2019年3月21日（考试总分：100 分考试时长： 120 分钟）一、单选题（本题共计 20 小题，共计 100 分）1、（5分）红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是A．血红蛋白的提取和分离一般按照“样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定→处理”B．纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C．粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D．可经SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定2、（5分）如表为某培养基的配方，有关叙述正确的是B．能在此培养基上生长的是大肠杆菌C．此培养基上生长的菌落不一定是黑紫色D．此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准3、（5分）根据以下腐乳制作的流程图，判断下列说法中错误的是豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
A．毛霉为好氧菌，为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要注意留出一定的缝隙B．加盐腌制可以析出豆腐中的水分使之变硬，同时也能抑制微生物的生长C．加卤汤、密封腌制过程中，毛霉不断增殖，并产生大量的酶，分解蛋白质D．用胶条密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染4、（5分）为了保证结果准确，一般选择菌落数在何种范围的平板进行计数A．30～100 B．30～200C．30～300 D．30～6005、（5分）在制作泡菜时，乳酸菌产生的乳酸可以抑制异种微生物的生长，但乳酸积累到一定程度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖．这些现象中包括A．竞争和种内斗争 B．捕食、竞争C．竞争和寄生 D．互利共生和竞争6、（5分）下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是A．制果酒时瓶口先通气后密封，而制果醋时需要通入氧气B．使用加酶洗衣粉时用温水洗涤效果比用冷水洗涤效果好C．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法D．制备单克隆抗体所涉及到的生物技术包括动物细胞融合、动物细胞培养和胚胎移植7、（5分）下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法，不正确的是A．植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素B．同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向C．先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化D．先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化8、（5分）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上D．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上9、（5分）下表为某微生物培养基的配方，相关说法错误的是B．该培养基属于固体培养，选择培养基C．该培养基可以用来培养异养型微生物D．该培养基除去（CH2O），加入纤维素粉即可用来培养纤维素分解菌10、（5分）在果酒的制作过程中，下列说法正确的是A．为避免污染，在处理葡萄时应先除去枝梗再冲洗B．红葡萄酒中的红色是红葡萄皮中的色素进入发酵液产生的C．果酒制作所需要的酵母菌属于异养厌氧型微生物D．果酒暴露在空气中容易产生酸味主要是因为产生了乳酸11、（5分）细胞破碎后，各种蛋白质就会释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。
生物中图选修课后训练：第六章第一节蛋白质的提取和分离 含答案
蛋白质的提取和分离练习1 蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。
下列有关叙述不正确的是（）。
A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过层析技术分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心技术分离蛋白质2 各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。
可以比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。
下列各种实验方法中，不能采用的方法是（）。
A．测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列B．测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列C．用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带D．检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的pH3 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（）方向的电极移动的现象。
A．相同B．相反C．相对 D．相向4 使用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（）。
A．电荷的多少 B．分子的大小C．肽链的多少 D．分子形状的差异5 蛋白质提取和分离分为哪几步？（）A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定6 对凝胶电泳的相关认识中，错误的是（）。
A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率不取决于分子的大小B．蛋白质在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率取决于分子的大小C．SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响参考答案1 解析：蛋白质分子不能透过半透膜，据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质。
答案：A2 解析：生物是由共同的原始祖先进化而来的。
各种生物之间具有或近或远的亲缘关系。
亲缘关系越近，则其对应的基因的碱基序列相似程度也越高。
酶的研究与应用+蛋白质的提取和分离练习题
④
在恒温水浴中保温，并用玻璃棒不时搅拌
10min
10min
（3）取出两个烧杯，同时进行过滤．观察（或比较）
，并记录结果．
实验结果的预测及结论：
如果是
，则说明果胶酶对果胶的水解具有催化作用．
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高中生物选修一
[课题二]探索果胶酶催化果胶水解适宜的 pH
（1）本课题实验步骤中，在完成“烧杯中分别加入苹果泥、试管中分别注入果胶酶溶液、
组．
（3）微生物是生产果胶酶的优良生物资源．分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培
养基应以
为唯一碳源；如需进一步纯化果胶酶，可根据果胶酶分子的
（至
少写出两点）等特性进行分离提纯．由于果胶酶的活性容易受到外界环境因素的干扰，
所以应利用
技术减少影响从而保护酶的活性．
（4）该兴趣小组进一步探究了一定浓度的果胶酶制剂乙在不同浓度果汁下的作用，实验结
（1）在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复
状态，一般是将干酵母放在
中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母
细胞活化时
．
（2）影响实验成败的关键步骤是
．
（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目
．
（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明
的检测。
（3）制作葡萄酒时，温度应该控制在
。在酸性条件下，可用
来检测发酵产
物中是否有酒精产生。若想进一步获得纯化的酵母菌，可采用
甚。
（4）发酵完成后，某小组制作葡萄酒品质非常好，为方便后续年级使用该菌种，可将菌液
用
的方法长期保存。另一组的同学用葡萄制做的果酒酒味醇正，放置一段时间后，
高二生物每课一练： 蛋白质的提取和分离中图选修
第六章蛋白质和DNA技术第一节蛋白质的提取和分离(时间：30分钟满分：50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难提取和分离蛋白质的方法原理1、2、6 3、4提取和分离蛋白质的过程 5 7 8一、选择题(共6小题，每小题4分，共24分)1．带电荷的蛋白质在电场中移动的速度主要取决于()。
A．所带的电荷多少B．蛋白质的分子大小C．蛋白质相对分子质量D．蛋白质的分子大小和所带的电荷多少答案 D2．使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于()。
A．电荷的多少B．分子的大小C．肽链的多少D．分子形状的差异答案 B3．下列不是蛋白质的提取和分离的实践意义的是()。
A．可以更加快速、简便、准确地对细胞癌变作出诊断B．发现和提纯了胰岛素，救助了数千万的糖尿病患者C．绘制蛋白质指纹图谱D．更好的参与“人类基因组计划”答案 D4．下列说法错误的是()。
A．蛋白质分离提纯技术，包括离心技术、层析技术和电泳技术等B．电泳技术的特点是快捷灵敏、简便易行C．聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGED．不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹，每一种带纹就是一种蛋白质答案 D5．下列有关血清蛋白的提取和分离叙述中，不正确的是()。
A．分离胶和浓缩胶单独存在时具有神经毒性，应避免接触皮肤B．如果待测洗脱液不能再分离，则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质C．将已脱色的凝胶板自然干燥，即可获得电泳谱带D．脱色时用体积分数为7%的醋酸溶液浸泡漂洗数次答案 C6．分离纯化蛋白质的技术包括()。
A．电泳法B．离心沉降法C．透析D．以上方法皆可以答案 D二、非选择题(共2小题，共26分)7．(10分)红细胞中含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2。
实验室中常选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验、提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题。
生物中图版课后训练：第六章第一节蛋白质的提取和分离
蛋白质的提取和分离练习1 蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。
下列有关叙述不正确的是( ）。
A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等,可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过层析技术分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心技术分离蛋白质2 各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。
可以比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。
下列各种实验方法中,不能采用的方法是（）。
A．测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列B．测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列C．用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带D．检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的pH3 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷（)方向的电极移动的现象。
A．相同B．相反C．相对D．相向4 使用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（)。
A．电荷的多少B．分子的大小C．肽链的多少D．分子形状的差异5 蛋白质提取和分离分为哪几步？（)A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定6 对凝胶电泳的相关认识中，错误的是（)。
A．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率不取决于分子的大小B．蛋白质在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率取决于分子的大小C．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响参考答案1 解析：蛋白质分子不能透过半透膜，据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质。
答案：A2 解析:生物是由共同的原始祖先进化而来的.各种生物之间具有或近或远的亲缘关系。
亲缘关系越近，则其对应的基因的碱基序列相似程度也越高。
【生物】6年高考题按知识点分类汇编WORD版5蛋白质的提取和分离
蛋白质的提取和分离2012广东29 ．（16分）食品种类多，酸碱度范围广。
生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋白酶，查阅相关文献，得知：（1）pH对不同蛋白酶的活力影响有差异。
据图12可知，_________更适宜作为食品添加剂，理由是________。
蛋白酶的活力可用________的量来表示。
11.该蛋白酶的提取工艺流程如下：兴趣小组分别对酶保护剂浓度、提取液pH进行了探究实验。
结果显示，酶保护剂浓度在0.02～0.06mol/L范围内，酶活力较高；提取液pH在6.0～8.0范围内，酶活力较高。
他们认为，要进一步提高粗酶制剂的酶活力，以达到最佳提取效果，还需对酶保护剂浓度和提取液pH进行优化，并确定以此为探究课题。
请拟定该课题名称，设计实验结果记录表。
【答案】（1）木瓜蛋白酶由图可以看出，木瓜蛋白酶的活性不随pH的变化而变化单位时间内底物消耗（产物产生）（2）课题：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH【解析】（1）审题结合图形和文字，在题目中已经提供了信息“食品种类多，酸碱度范围广”，所以选择的食品添加剂应该有较广的酸碱适应范围。
从图形中，可以看出木瓜蛋白酶的适应范围最广，所以可以选作食品添加剂。
酶的活力，一般用酶催化的底物消耗量或者产物生成量来表示。
（2）实验设计，应该明确实验目的：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH值，所以可以将酶保护剂的浓度和提取液的pH值作为自变量，因变量为单位时间内底物的消耗量。
【试题点评】本题以蛋白酶在食品方面的应用为背景，考查了蛋白酶的应用、活力测定、蛋白酶的提取流程等内容和学生绘制表格的能力，难度不大。
2012安徽31．（24分）甲型血友病是由X染色体上的隐性基因导致的遗传病（H对h为显性）。
图1中两个家系都有血友病发病史，III2和III3婚后生下一个性染色体组成是XXY的非血友病儿子（IV2），家系中的其他成员性染色体组成均正常。
图1（1）根据图1，（填“能”或“不能”）确定IV2两条X染色体的来源；III4与正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是。
【高考复习】高考生物复习血红蛋白的提取与分离实验同步训练(含答案)
【高考复习】高考生物复习血红蛋白的提取与分离实验同步训练（含答案）血红蛋白是高等生物体内负责运载氧的一种蛋白质(缩写为hb或hgb)。
以下是血红蛋白的提取与分离实验同步训练，请大家认真进行练习。
判断正误(1)利用凝胶色谱法拆分蛋白质时，相对分子质量大的先洗清出()。
(2)在电泳过程中，蛋白质分子的移动速度，与分子本身的大小和形状无关，而与所带电荷的差异有关()。
(3)在sds-共聚丙烯酰胺凝胶电泳中，电泳迁移率为全然依赖于分子的大小()。
答案(1)(2)(3)血红蛋白抽取和拆分过程的考查(广东理综，5)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是()。
a.冲洗红细胞时，采用生理盐水可以避免红细胞断裂b.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少c.血红蛋白的颜色可以用作凝胶色谱法拆分过程的监测d.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析猪明朗红细胞中缺乏细胞器和细胞核，纯化时杂蛋白较太少，就是纯化血红蛋白的理想材料。
纯化血红蛋白分后四步：红细胞的冲洗、血红蛋白的释放出来、拆分血红蛋白溶液、输血，其中冲洗红细胞时，必须用生理盐水反反复复冲洗，既要将红细胞冲洗整洁，又必须不毁坏红细胞，然后再用蒸馏水和甲苯并使红细胞断裂，放出血红蛋白。
拆分纯化的血红蛋白时用凝胶色谱法，就是根据相对分子质量的大小去拆分蛋白质，相对分子质量小的蛋白质移动速度较慢;血红蛋白的颜色可以用作观测红色区带的移动情况，并据此推论拆分效果。
答案d[对点加强]红细胞中含有大量的血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。
下列关于血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是()。
a.血红蛋白抽取和拆分通常按照样品处置―细拆分―提纯―纯度鉴别的顺序展开b.纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液c.细拆分中输血的目的就是除去相对分子质量较小的杂质d.可经sds聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定解析蛋白质的抽取和拆分通常分成四步：样品处置、细拆分、提纯和纯度鉴别。
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蛋白质的提取和分离专题训练一．选择题1．下列有关蛋白质的提取和分离的操作，其中排序正确的是()。
A．样品处理、凝胶色谱操作、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳B．样品处理、凝胶色谱操作、纯化C．样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定2．下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是()。
A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱3．在蛋白质的提取和分离中，下列对样品处理过程的分析正确的是()。
A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果C．洗涤过程选用质量分数0.1%的NaCl溶液(生理盐水)D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质4．下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是()。
A．可采集猪血作为实验材料B．用蒸馏水重复洗涤红细胞C．血红蛋白释放后应低速短时间离心D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液5．蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。
下列叙述不正确的是()。
A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质6．凝胶色谱法分离蛋白质时使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG—75)，其中G、75的含义分别是()。
A．G表示凝胶的使用量，75表示加75 g水B．G表示凝胶的交联程度，75表示需加热75 ℃C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5 g D．G表示凝胶的膨胀体积，75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm37．用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质()。
A．路程较长，移动速度较慢B．路程较长，移动速度较快C．路程较短，移动速度较慢D．路程较短，移动速度较快8．下列关于蛋白质提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是()。
A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌C．分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心，过滤后，用分液漏斗分离D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h 9．下列各项中不属于电泳使样品中各分子分离的原因的是()。
A．分子带电性质的差异B．分子的大小C．分子的形状D．分子的变性温度10．下列有关提取和分离血红蛋白的程序叙述错误的是()。
A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B．通过透析可以去除样品中相对分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取C．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化D．可通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度11．下列有关蛋白质提取和分离的叙述中，错误的是()。
A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极移动12．()。
A．α1—球蛋白B．α2D．γ—球蛋白13．释放血红蛋白时，下列有关红细胞膜破裂的原因中，不包括的是()。
A．红细胞吸水膨胀B．磁力搅拌器的充分搅拌C．血红蛋白的变性D．甲苯对细胞膜的溶解14．细胞破碎后，各种蛋白质就会被释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。
下列关于蛋白质提取的措施中，不正确的是()。
A．酸性蛋白质可用稀碱性溶液提取B．水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)提取C．脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取D．碱性蛋白质可用强酸性溶液提取15．凝胶柱的制作常用玻璃管，在选择玻璃管时应该考虑的因素有()。
①玻璃管的高度②玻璃管的直径③样品的体积④缓冲溶液的pHA．①②③B．②③④C．①②④D．①③④16．利用凝胶色谱法先洗脱出来的蛋白质是()。
A．相对分子质量大的B．溶解度高的C．相对分子质量小的D．所带电荷多的17．将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是()。
A．血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层B．甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层C．脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D．甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层18．下列关于电泳的说法不正确的是()。
A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少D．用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小19．已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如下图所示。
下列叙述正确的是()。
A．将样品装入透析袋中透析B．若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快C．将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子丙也存在于沉淀中D．若五种物质为蛋白质，用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近20．下面说法不正确的是()。
A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸、碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程二、非选择题21．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的功能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
根据材料回答下列问题。
(1)实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
加入柠檬酸钠的目的是____________________。
(2)在对样品进行处理时，主要包括________、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。
其中透析技术的原理是________________________。
(3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的________、________以及分子的形状等。
(4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白分离(如图)，他在操作中加样的正确顺序是________，在执行图一中②所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该________(打开或关闭)图一加样示意图图二图三(5)图二、图三分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果，则图三中与图二中蛋白质P对应的是________。
22．红细胞含有大量血红蛋白，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题。
(1)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是____________________________________________②以上所述的过程即是样品处理，它包括_____________________________________、________、收集血红蛋白溶液。
(2)洗涤红细胞的目的是___________________________________________。
(3)你如何知道红细胞已洗涤干净？________________________________________________________。
(4)分离红细胞时的离心速度及离心时间分别是_____________________________________________________________。
(5)若离心速度过高和时间过长结果会怎样？__________________________________________________________________________________________________________________________。
(6)将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，即样品的粗分离。
①透析的目的是_____________________________________。
②透析的原理是______________________________________________________________。
(7)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
样品纯化的目的是___________________________________________________________________。
23．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或C O2的运输。
请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
(1)将实验流程补充完整。
凝胶色谱法是根据______________________而达到蛋白质分离的有效方法。
(2)洗涤红细胞的目的是去除________，洗涤次数过少，无法除去________；离心速度过高和时间过长会使________一同沉淀，达不到分离的效果。
洗涤干净的标志是__________。
释放血红蛋白的过程中起作用的是__________。
(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L 的磷酸缓冲液(pH 为7.0)的目的是__________________。
如果红色区带__________，说明色谱柱制作成功。
24．凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。
据图回答下面的问题。
(1)a 、b 均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是______，原因是________________________。
(2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d 位置相当于多孔板的结构可由________替代。
(3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是________________________。