邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

课程名称：仪器分析

指导教师：李志红

实验员：张丽辉李国跃崔凤琼

刘金旖普杰飞赵宇

时间: 2003年5月12日

一、实验目的：

（1）掌握研究显色反应的一般方法。

（2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。

（3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。

（4）学会制作标准曲线的方法。

（5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。

二、原理：

可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。

（1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。

（2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。

（3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。

（4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。

（5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。

邻二氮菲与Fe2+在溶液中形成稳定橙红色配合物。配合无的ε = ×104 L· mol ·cm-1。

配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。此方法选择性高Br3+、Ca2+、Hg 2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。

三、仪器与试剂：

1、仪器：721型723型分光光度计

500ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支

5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，烧杯2 个，吸尔球1个，天平一台。

2﹑试剂：（1）铁标准溶液100ug·ml-1,准确称取铁盐NH4Fe(SO4)2·12H2O置于烧杯中，加入盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。

（2）铁标准溶液10ug·ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。

（3）盐酸羟胺溶液100g·L-1(用时配制)

（4）邻二氮菲溶液·L-1先用少量乙醇溶液，再加蒸馏水稀释至所需浓度。

（5）醋酸钠溶液·L-1μ

四、实验内容与操作步骤：

1.准备工作

(1) 清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。

(2) 配制铁标溶液和其他辅助试剂。

(3) 开机并试至工作状态，操作步骤见附录。

(4) 检查仪器波长的正确性和吸收他的配套性。

2. 铁标溶液的配制

准确称取铁盐NH4Fe(SO4)·12H2O置于烧杯中，加入10mlHCL加少量水。溶解入500ml 容量瓶中加水稀释到容量瓶刻度。

3 .绘制吸收曲线选择测量波长

取两支50ml干净容量瓶，移取100µg m l-1铁标准溶液容量瓶中，然后在两个容量瓶中各加入盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min后各加入邻二氮菲溶液，醋酸钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度线摇匀，用2cm吸收池，试剂空白为参比，在440——540nm间，每隔10nm测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，确定最大吸收波长

Λnm440450460470480490

A0．290．380．440．4850．500．52

Λnm500510*********

A0．540．570．5020．3690．257

4.工作曲线的绘制

取50ml的容量瓶7个,各加入µɡml-1铁标准,,,,,,，然后分别加入邻二氮菲溶液，醋酸钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度线摇匀，用2cm吸收池，以试剂空白为参比溶液，在选定波长下测定并记录各溶液光度，记当格式参考下表：

编号1#2#3#4#5#6#7#

V（铁溶液）ml0．000．200．400．600．801．001．20 A

5.铁含量的测定

取1支洁净的50ml容量瓶,加人含铁未知试液,按步骤(6 )显色,测量吸光度并记录.

编号1#2#3#

V(未知液)ml

K= B= R*R=

CONC. =K *ABS+B

C = ml-1

6.结束工作

测量完毕,关闭电源插头,取出吸收池, 清洗晾干后人盆保存.清理工作台,罩上一

仪器防尘罩,填写仪器使用记录.清洗容量瓶和其他所用的玻璃仪器并放回原处.

五、讨论：

（1）在选择波长时，在440nm——450nm间每隔10nm 测量一次吸光度，最后得出的λmix=510nm,可能出在试剂未摇匀，提供的λmix=508nm，如果再缩减一点进程，试齐充分摇匀，静置时间充分，结果会更理想一些。

（2）在测定溶液吸光度时，测出了两个9，实验结果不太理想，可能是在配制溶液过程中的原因：a、配制好的溶液静置的未达到15min；b、药剂方面的问题是否在期限内使用（未知）因从溶液显色的效果看，颜色有点淡,要求在试剂的使用期限内使用；c、移取试剂时操作的标准度是否符合要求，要求一个人移取试剂。（张丽辉）

在配制试样时不是一双手自始至终，因而所观察到的结果因人而异，导致最终结果偏差较大，另外还有实验时的温度，也是造成结果偏差的原因。（崔凤琼）

本次实验阶段由于多人操作，因而致使最终结果不精确。（普杰飞）

（1）在操作中，我觉得应该一人操作这样才能减少误差。

（2）在使用分光计时，使用同一标样，测同一溶液但就会得出不同的值。这可能有几个原因：a、温度，b、长时间使用机器，使得性能降低，所以商量得不同值。（李国跃）在实验的进行当中，因为加试样的量都有精确的规定，但是在操作中由于是手动操作所以会有微小的误码率差量，但综合了所有误差量将成为一个大的误差，这将导致整个实验的结果会产生较大的误码率差。（赵宇）

在配制溶液时，加入拭目以待试剂顺序不能颠倒，特别加显色剂时，以防产生反应后影响操作结果。（刘金旖）

六、结论：

（1）溶液显色，是由于溶液对不同波长的光的选择的结果，为了使测定的结果有较好的灵敏度和准确度，必须选择合适的测量条件，如：入射波长，溶液酸度，度剂使用期限。

（2）吸收波长与溶液浓度无关，不同浓度的溶液吸收都很强烈，吸收程度随浓度的增加而增加，成正比关系，从而可以根据该部分波长的光的吸收的程度来测定溶液的浓度。

（3）此次试验结果虽不太理想，但让我深有感触，从中找到自己的不足，并且懂得不少试验操作方面的知识。从无知到有知，从不熟练到熟练使用使自己得到了很大的提高。（张丽辉）

附录：

723型操作步骤

1、插上插座，按后面开关开机

2、机器自检吸光度和波长，至显示500。