选修三--专题2第二节(2)单克隆抗体
高中生物选修3精品学案：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【目标导航】 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。
2.结合图2－24，归纳单克隆抗体的制备过程及应用。
一、动物细胞融合(阅读P 52－53)1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2．原理：细胞膜的流动性。
3．诱导融合的方法：(1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。
(2)生物方法：灭活的病毒。
4．过程：不同遗传信息的两个或多个细胞――――→灭活的病毒PEG 、电激等杂交细胞。
5．结果：形成杂交细胞。
6．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
如：利用动物细胞融合技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
二、单克隆抗体(阅读P 52－54) 1．传统抗体的获得(1)方法：①向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；②从动物血清中分离所需抗体。
(2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。
2．单克隆抗体的制备 (1)制备原理①浆细胞特点：一种B 淋巴细胞产生一种单一抗体，B 淋巴细胞在体外不能(能/不能)无限增殖。
②骨髓瘤细胞特点：能无限增殖。
③杂交瘤细胞特点：B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，既能无限增殖，又能产生特异性抗体。
(2)制备过程制备特异性B 淋巴细胞⎩⎪⎨⎪⎧①向小鼠注射特定抗原蛋白②从小鼠脾脏中获取相应B 淋巴细胞⇓获得杂交瘤细胞⎩⎪⎨⎪⎧①将鼠的骨髓瘤细胞与脾中形成的B 淋巴细胞融合②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞 既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体⇓克隆化培养和抗体检测 ⇓将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔中增殖 ⇓提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取 (3)单克隆抗体优点：特异性强、灵敏度高、并可大量制备。
(4)单克隆抗体的应用①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物。
《单体克隆抗体》名师教案
单克隆抗体教学设计一、教材分析《动物细胞融合与单克隆抗体》是人教版高中生物选修3专题2第2节第2部分内容。
制备单克隆抗体是动物细胞工程应用的典型实例，涉及动物细胞培养、动物细胞融合技术等多方面技术，其原理还涉及特异性免疫、细胞癌变等知识。
知识跨度大，综合性强。
整个制备过程既需要复杂的实验条件，又具有特定的技术步骤（尤其是杂交瘤细胞的筛选），是学生学习的重点和难点。
二、学情分析学生已经学习了植物体细胞杂交的有关内容，动物细胞融合与植物原生质体融合比较相似，有利于新内容的学习。
学生学习制备单克隆抗体时，距离学习特异性免疫和细胞癌变等知识的时间比较久，学生对这部分知识遗忘较多，教师必须采用合适的方法引导学生回忆起这部分内容。
三、教学目标1.知识目标：举例说出单克隆抗体的原理和应用2.能力目标：（1）尝试设计实验（2）学会实验过程的分析，尝试解决问题3、情感目标：（1）在合作与交流中分享解决问题后的愉悦（2）介绍单克隆抗体技术的发展及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。
四、教学重点与难点1、教学重点：单克隆抗体的制备和应用。
2、教学难点：单克隆抗体的制备过程。
五、教法与学法1、教法：讲授法、问答法。
2、学法：学生主要采用自学、讨论相结合的方法，进行本节课的学习。
六、课时：1课时七、教学过程制备过程【小组合作学习】然后回答问题，总结出制备单克隆抗体的流程图。
（见学案注：第4个问题后，提供一种选择性培养基的资料，让同学们筛选出杂交瘤细胞。
补充资料：已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。
人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。
鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。
教师讲解：用有限稀释法筛选出所需抗体的杂交瘤细胞。
补充资料：有限稀释法：通过适当的稀释达到分离单个细胞进行培养的目的。
高中生物人教版选修3配套课件：专题2 第2节 第2课时 动物细胞融合与单克隆抗体
• 5．特点：克服了有性杂交方法的局限性，打破了物种界限。
• 6．应用：应用于细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等， 特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆 抗体开辟了新途径。
典例评析
• 典例 1 下列关于动物细胞融合的说法，错误的B是( ) • A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形
_______血；清b.从动物⑬_______中分离所需抗体。 • (2)特点：⑭___产__量_低__、__纯__度_低__、__制__备_的__抗__体_特__异__性__差______。
3．单克隆抗体的制备 制备克隆抗体的技术流程是：用羊的红细胞对小鼠进行注射，使小鼠产生免 疫反应。然后，把⑮_B__淋__巴___细胞和骨髓瘤细胞融合，再用⑯___选__择__性__培__养__基__ 进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和⑰__融__合__的__具__有__同__种__核___细胞都 会死亡，只有⑱___融__合__的__杂__种__细胞才能生长。这种杂种细胞的特点是既能⑲ __迅__速__大__量__繁__殖___又能产生专一的抗体。对上述经选择性培养的杂交瘤细胞，还 需进行克隆化培养和⑳__抗__体__检__测___，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌 所需抗体的细胞。最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小
结合，可制成生物导弹。
• 思考 • 1．诱导动物细胞融合与植物体细胞杂交融合有什么不同？ • 提示：动物细胞融合能用灭活的病毒进行诱导。 • 2．若不采用动物细胞融合的方法，能否生产出单克隆抗体？试简
要说明。 • 提示：能。可从经免疫的B淋巴细胞中获取决定所需抗体的基因(目
的基因)，导入骨髓瘤细胞，然后培养骨髓瘤细胞并从培养液中提 取分泌物，便可得到单克隆抗体。
高二生物人教版选修3课件专题2第2节第2课时 动物细胞融合与单克隆抗体
杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的抗体一定是化学性质单一、 特异性强的单克隆抗体。 4．应用。 (1)诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克
隆抗体定位诊断。
(2)用于治疗疾病和运载药物：运用药物与单克隆抗体连接在一 起制成“生物导弹”。 (3)分离和纯化抗原分子。
例2 关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是(
►变式迁移 1．以下四种细胞工程技术中，培育出的新个体(或细胞)同时具有两
个亲本遗传特性的是(
)
①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞融合 ④核移植
A．①②③ B．①②④
C．②③④ D．①③④ 解析：①是通过细胞脱分化、再分化和有丝分裂形成新个体的过程， 只具有一个亲本遗传特性。②③④不同程度地都具有双亲遗传特性。 答案：C
7.已成功的动物细胞融合实例。
生物种类 酵母菌—鸡 人—胡萝卜
细胞来源 原生质体—血红细胞 腹水癌细胞—原生质
成功年份 1975 1976
体 纤维肉瘤细胞—畸胎 人—小鼠 瘤细胞 1978
例1 (
动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 )
A．诱导融合的方法完全相同 B．所用的技术手段完全相同
正Hale Waihona Puke 判断1．动物细胞培养前要用胃蛋白酶处理分散成单个细胞。( 2．动物细胞培养的目的是为了获得动物新个体。( 3．经促融处理后的细胞就是符合要求的杂交细胞。( ) ) )
4．杂交瘤细胞既有瘤细胞无限增殖的特点又具有B淋巴细胞产 生特定抗体的特点。( )
1．× 提示：不能用胃蛋白酶处理，只能用胰蛋白酶处理，因为胃蛋白酶 的适宜pH为1.5左右。
本节小结
核心归纳 1 ．动物细胞融合也称细胞杂交，其优点是使远源杂交成为可 能。 2 ．动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，融合完成的标志 是细胞核融合成一个核。 3．经过免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞
高中生物选修3优质教学设计15：2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 教案
动物细胞融合和单克隆抗体一、教材分析本节内容属于新人教版选修3专题2的内容，共分两部分：动物细胞融合和单克隆抗体的制备。
由于动物细胞融合在必修一第四章第二节中已经用“荧光标记的小鼠细胞和让细胞融合实验示意图”向学生渗透了细胞融合的概念，并且与前面章节《植物体细胞杂交技术》中的原生质体融合基本相同，所以本节课呈现的比较简洁，教材仅用了三段话进行描述。
而单克隆抗体的制备是动物细胞工程的新技术，是基于动物细胞培养、动物细胞融合技术实现的，是综合了细胞结构、细胞分裂、细胞免疫等知识的高考热点，因此也是本节课的重点和难点。
二、教学目标1．知识目标（1）理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。
（2）理解和掌握单克隆抗体制备过程的步骤和应用。
2．过程与方法通过本节课的教学活动，培养学生比较、分析问题的能力以及认识事物实质的思维能力。
3．情感态度与价值观（1）让学生认同细胞学基础理论研究与技术开发之间的关系。
（2）使学生体验科学研究是一个过程，了解科学、技术和社会三者之间的关系。
三、教学重难点重点：单克隆抗体的制备和应用。
难点：单克隆抗体制备过程中两次筛选的作用。
四、教学准备多媒体课件、导学案。
五、课时安排1课时。
六、教学过程回顾旧知，引入新课多媒体展示植物体细胞杂交的过程图，让学生简要描述该过程。
进一步用多媒体展示动物细胞与植物细胞的结构图，教师提出问题，引入新课：动物细胞没有细胞壁、明显液泡和叶绿体，与植物细胞的结构不同，那么，动物细胞能否融合或杂交呢？如果可以，两者的融合方法、过程是否相同呢？植物细胞融合后的杂种细胞可以发育成新的植物体，动物细胞融合后形成的杂交细胞是否也可以发育成新的动物体呢？（一）动物细胞融合首先展示必修一中的“荧光标记的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图”，让学生回忆动物细胞是可以融合的。
然后让学生阅读教材P52第二段，理解动物细胞融合的概念，并填写表格，比较植物体细胞杂交和动物细胞融合。
人教版高中生物选修三专题二第2节 2 .2动物细胞融合与单体克隆抗体 课件(共23张PPT)
只筛有选杂出种杂细 胞交才瘤能细活胞
（多种）杂交瘤细胞
问题6：如何筛选出能够产生所需的单一抗体的杂 交瘤细胞？ 思路：稀释、培养、检测
多孔培养板
细胞克隆化培养 单克隆有单个杂交瘤细胞克隆的含义
抗体检测（抗原—抗体杂交）
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（多种）杂交瘤细胞
第二 次筛选：
。
分泌抗体
注射到 小鼠腹腔
吞噬 细胞
①产生抗体细胞：浆细胞
②化学本质：蛋白质
T细胞
淋巴 因子
B细胞
浆细胞
抗体
记忆B细胞
返回
杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，
通常用“有限稀释法”来选择能分泌所需抗体
的杂交瘤细胞。
Hale Waihona Puke 返回将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，
使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。
然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。
阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，
挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需
进行3～4次，直至每个孔中增殖的细胞为单克
隆细胞。该过程为杂交瘤细胞的克隆化培养。
获得产生相应 目的 抗体的已免疫 的B淋巴细胞
动物细胞培养
（多种）
（已免疫的）
脾脏
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（已免疫的）
动物细胞 融合技术
B 、BB 、杂交瘤 、 瘤瘤 、瘤
问题4：如果仅考虑2个细胞之间发生融合，有多少类
情况？哪类是需要的？
5
1.制备单克隆抗体的操作过程：
（多种）
已免疫的
问题5：如何筛 选杂交瘤细胞？
人教版生物选修三《现代生物科技专题》《动物细胞融合与单克隆抗体》教案
《动物细胞融合与单克隆抗体》一、教材分析《动物细胞融合与单克隆抗体》是人教版高中生物选修3专题2《细胞工程》第2节《动物细胞工程》第2部分内容。
单抗的制备是动物细胞工程中一个重点，也是一个难点，在高考中也经常出现。
同时它也是一个学科内的综合内容，综合了免疫及动物细胞工程的相关知识。
二、学情分析本节课之前学生已经学习了植物体细胞杂交的有关内容，动物细胞融合与植物原生质体融合比较相似，有利于新内容的学习。
本节内容是一个典型的学科内综合，综合了细胞培养、免疫、等知识点，但很多同学难以将这些内容联系起来，以及难以将制备过程中的筛选准确理解。
三、教学目标、重难点知识与能力目标1、通过预习教材，教师引导，学生能说出动物细胞融合的原理、诱导融合的方法、融合后细胞的类型、作用；并能列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。
2、通过教师引导、合作学习，学生能总结单克隆抗体制备的过程，说出两次筛选的方法和目的，单克隆抗体的优点和应用。
学科素养（1）基础知识（动物细胞融合的原理、诱导融合的方法、融合后细胞的类型、作用；动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同；单克隆抗体制备的过程，以及两次筛选的方法和目的，单克隆抗体的优点和应用）；（2）基本技能（让学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力）；（3）基本思想（收集单克隆抗体药物在世界和中国的发展、应用情况，使学生认同生物科学发展前景广阔，人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识）；（4）基本活动经验（通过联系知识与生产实践的关系，激发学生对生物学科的兴趣热爱）。
教学重点、难点：单克隆抗体的制备过程，尤其是两次筛选过程。
四、教法、学法动物细胞融合这一部分内容比较简单，学生已有植物原生质体融合过程作为基础，针对这一部分让学生阅读后展示动物细胞融合的概念、原理、方法、意义及应用。
人教版高二生物选修三同步课件-专题2 2.2 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 (共44张PPT)
4． (重庆高考)下面是单克隆抗体制备流程的简明示意图。 下列有 关叙述正确的是 ( )
A． ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应 T 淋巴细胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
解析：图中①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应 B 细胞(浆 细胞)； 胰蛋白酶常用在动物细胞培养过程中， 其作用是使组织 分散成单个细胞，图示②中应使用促融剂如聚乙二醇(PEG)； 图示③为杂交瘤细胞，其同时具有浆细胞产生抗体的特性和骨 髓瘤细胞无限增殖的特性；图示④是经筛选获得的能分泌特异 性抗体的杂交瘤细胞。 答案：D
[跟随名师· 解疑难]
1．血清抗体与单克隆抗体的比较
项目
产生
特点
血 清 抗 由 B 淋 巴 细 一般从血清中分离，产量低
体 胞分泌 、纯度低、特异性差
单 克 隆 由杂交瘤细 特异性强、灵敏度高，能大
抗体 胞分泌 量制备
2．制备单克隆抗体过程中两次筛选的目的不同 (1)第一次筛选是将未融合的 B 淋巴细胞、骨髓瘤细胞 以及 B—B 融合、瘤—瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰， 筛选出杂交瘤细胞。 (2)第二次筛选是将产生特定抗体的 B—瘤细胞通过细 胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。 因为从体内取免疫 过的 B 淋巴细胞时会取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很 多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。
1．为什么要对小鼠注射抗原？
提示：以获得能产生相应抗体的 B 淋巴细胞(浆细胞)。
2．根据单克隆抗体制备过程思考下列问题： (1)制备单克隆抗体时， 为什么要选用 B 淋巴细胞和 骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？ (2)B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞经聚乙二醇处理后，培 养液中存在哪几种细胞？ (3)选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？
【高三一轮 选修三】专题2 2.2.2 单克隆抗体(公开课)
分析回答问题。 分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的 诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析 回答问题。
(1)制备单克隆抗体过程中用到_ 动__物__细__胞__培__养_和
动物__细__胞__融_ 合
技术。
_抗_原__(_2，)制使备小单鼠产克生隆抗分体泌相过应程中_抗_，_体_给__小_的鼠淋注巴射细的胞HC，G相此当过于程
B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 克隆上述杂交细胞
分开不同杂交细胞，克隆专一抗
注射到小鼠体内
第2次筛体选，目检的验：阳在性杂细交胞瘤细胞中筛
（从腹水中提取）
选出能产生体所外需培抗养体（的从杂培交瘤细胞。
单克隆抗体 方法：抗原-抗养体液杂中交提取）
单克隆抗体:克隆单一杂交瘤细胞得到的抗体
孕三的、考诊题讲断练 。如图是抗 HCG 单克
优点：能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌 细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量
四、课堂小结：
一个过程 单克隆抗体制备过程
制备已免疫的B淋巴细胞、培养 骨髓瘤细胞
诱导细胞融合
两次筛选
单抗的扩大化培养
两次筛选
第1次筛选
目的：得到杂交瘤细胞（多种） 方法：用特定的选择培养基筛选
第2次筛选 目的：得到能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 方法：抗原-抗体杂交
(4)此过程生产的单克隆抗体可以与 __人__绒_毛__膜__促__性__腺_激__素__(_或__H_C__G_)_特异性结合，从而诊断早孕。
知识梳理二：单克隆抗体的优点与应用：
优点： 特异性强，灵敏度高，可大量制备 应用： （1）作为诊断试剂：
人教版高中生物选修3课件22动物细胞融合与单克隆抗体课件
（3）两个 ①B细胞和瘤细胞融合 关键 ②两次筛选
环节：
（4）优点： 特异性强、灵敏度高、可大量制备。
（5）应用： ①作为诊断试剂（单抗诊断盒） ②用于治疗疾病和运载药物（生物导弹）
一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞
生物法：灭活的病毒（如仙台病毒） （5）意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
（6）应用： 制备单克隆抗体
四、单克隆抗体
背景知识：B淋巴细胞与抗体
１．哺乳动物感染病原体后，体内会形成相应 的B淋巴细胞（浆细胞） ，B淋巴细胞能分泌抗体杀 死病原体。
２．动物在免疫过程中产生的特异性抗体多达 百万种以上。
整个制备过程为何要经过两次筛选 ?
第一次筛选得到 _杂__交__瘤__细___胞__（__多__种__）__
第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂 交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出 _能__产__生___特__异__性__抗__体___的__细__胞__群__。
四、单克隆抗体
（1）概念： 由单个B淋巴细胞无性繁殖形成的细胞群， 产生的化学性质单一、特异性强的抗体。
灭活病毒 杂交瘤细胞
一个优势
单克隆抗体特异性强、 灵敏度高的优势
３．每一个 B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
四、单克隆抗体
传统血清抗体的制备途径：
某抗原
反复 输入
动物体内
浆细胞 某抗体
如何获得大量化ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
再从动物血清中分学离抗性体质单一、特异性
传统血清抗体的制备的缺强陷的：抗体？
特异性差、纯度低、产量低、反应不够灵敏。
人教版高中生物选修3课件 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
获得产生相应抗 体的B淋巴细胞
√ BB 、B瘤 、
瘤瘤 选择性培养基
先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞 的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体 的细胞群。
动物细胞融合 动物细胞培养
获得产生相应抗 体的B淋巴细胞
√ BB 、B瘤 、
瘤瘤 选择性培养基 克隆化培养
抗原抗体杂交法
免疫小鼠
问题2：怎样让细胞既能大量繁殖，又能产生专一 抗体呢？
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆 抗体
动物细胞培养技术
动物细胞融合技术
杂交瘤细胞
（一）单克隆抗体的概念
由一个浆细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生 的化学性质单一，特异性强的抗体，即单克隆抗体。
单： 单个B淋巴细胞 克隆：无性繁殖 抗体：化学性质单一，特异性强
特异性强、灵敏度高、产量大
（四）单克隆抗体的制备原理
◆ 利用___B_淋__巴__细__胞___产生特异性抗体的功能。 ◆ 利用__骨__髓__瘤__细__胞___无限增殖的特性。 ◆ 利用_动__物__细__胞__融__合__技术将两种细胞融合获得
杂交瘤细胞。
◆ 利用_动__物__细__胞__培__养__技术大量培养杂交瘤细胞。
课堂小结
两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法——灭活病毒 三个“一” 一个新细胞——杂交瘤细胞
一个优势——
单克隆抗体特异性强、灵敏度高
思考与探究1
植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术 基本相同，不同的是植物体细胞融合前需去掉 细胞壁，然后再融合；动物细胞融合是两个体 细胞直接融合。
前情回顾：植物体细胞杂交过程
生物选修Ⅲ人教新课标2-2-2动物细胞融合与单克隆抗体课件(44张)
D．目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了
同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的性状全部得以体现
[思路点拨]
[精讲精析] A 项中动物细胞融合可用灭活的病毒诱 导，而植物原生质体是不能的；C 项中杂交瘤技术是细胞 工程技术，而试管婴儿则是胚胎工程内容；D 项生物性状 的体现是基因型与环境共同作用的结果，“超级植物”具 有两个亲本的遗传物质，但性状不一定能全部表达。
[答案] B
动、植物细胞融合技术的比较 动、植物细胞融合技术基本原理相同，都是细胞膜的流 动性；诱导融合的方法基本类似。不同点是：①植物细胞融 合前需先去掉细胞壁；②动物细胞融合除物理法、化学法外， 还用到生物方法，即灭活病毒；③培养基成分不同，动物细 胞培养是用液体培养基，其成分中有动物血清。另外还有培 养目的和结果等方面的区别。
细胞融合
[例 1] 下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，描述正确的
是
()
A．动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合
的方法也完全相同
B．两者都可以跨越种属间的生殖隔离，突破有性杂交方法的局限，
使远缘杂交成为可能
C．利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为试管婴儿
的诞生开辟了新途径
单克隆抗体的制备
[例 2] 下图是制备分泌抗 X(H1N1 流感病毒)抗体的过 程，根据图解回答问题：
(1)给小鼠注射抗原的目的是____________________。 (2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用 B 淋巴细胞和骨 髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有__________ 的特性。 (3)由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了_________ 和________的动物细胞工程技术手段。 (4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无 机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是还含有 ________。
人教版高中生物选修3-现代生物科技专题：单克隆抗体
Bn-瘤 定细胞类型
注射到小鼠体
B1-瘤
体外培养
内
单克隆抗体优点：特异性强，单灵克敏隆度抗高，体可大量制备（指向目标2）
课堂小结
两次筛选：
第1次筛选的方法： 特定选择性培养基
目的：筛选出杂交瘤细胞
杂交瘤细胞特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体
第2次筛选的方法： 克隆化培养和抗体检测
课后作业：完成练习案14
谢谢！欢迎批评指正！
思路：
单个B淋巴细胞 克隆
资料2：每一个B淋巴细 胞只能分泌一种 特异性
抗体 。
细胞群 生产
资料3：在体外培养条件下，
一个B淋巴细胞是不可能 化学性质单一，特异性强，
无限增殖的。
纯度高的单克隆抗体
实验方案
理清思路
一个B淋巴细胞（浆细胞）
具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞
融合形成杂交瘤细胞 大量增殖
的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓
瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体
的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能
产生所需抗体的细胞群，培养后提取 单克隆抗体
课堂检测
3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是( ) A．可以制成诊断盒，用于疾病的诊断 B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C．可以利用基因工程技术生产 D．可以在生物体内生产，不能体外生产
多种 获得杂交瘤细胞 产生B的2-抗瘤体是
同种B抗3-体瘤吗？
合作探究2：如何进行第二次筛选？
多种杂交瘤 细胞
B1-瘤 B2-瘤 B3-瘤
抗体1 抗原1 抗体2
抗体3
多孔培养板
生物选修三单克隆抗体
免疫小鼠
注射特定 抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞
单
骨髓瘤细胞
克
B淋巴细胞
隆
融合
抗
体
制
多种杂交细胞
备
过
选择培养基上培养
程
专一抗体
示
检验阳性
体外培养
注射到
5、C过程指细胞培养，该过程包括
小鼠腹腔
_原__代__培养和_传__代__培养两个阶段。
教学参考
1萝卜 人—小鼠
细胞来源 原生质体—血红细胞 腹水癌细胞—原生质体 纤维肉瘤细胞—畸胎瘤细胞
成功年代 1975年 1976年 1978年
①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A． ②④ C． ①②③④
B．①③⑤ D．②③
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗 体实验方案
A
1、该实验方案的目的是_制__备__单__克__隆_ 抗体 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？
３．每一个B淋巴细胞只能产生一种 抗体。
二. 单克隆抗体
1、概念 由单个B淋巴细胞经过无性 繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞 群，这一细胞群所产生的化学性质单一、 特异性强的抗体称为单克隆抗体。
2、 特点： 特异性强、灵敏度高
二、单克隆抗体
设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖
骨髓瘤细胞 B
杂交瘤细胞
3、A是从小鼠的脾脏中取得
人教版高中生物选修3-现代生物科技专题：动物细胞融合与单克隆抗体(选修3 专题2 细胞工程)
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二.单抗的制备： 4、杂交瘤细胞的培养
阳性细胞
体内和体外培养产生
的单抗可以分别从 _腹__水___和_培__养__液___中
提取
腹腔
体外培养
单抗的特点？ 特异性强 灵敏度高 能大量制备
SCF 教学模式的研究与应用
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课堂反馈
2. 某同学列表比较了动植物细胞工程的有关内容， 不正确的有（ A ）
植物细胞工程
动物细胞工程
技术手段
植物组织培养、 植物体细胞杂交
动物细胞培养和融合、 单克隆抗体的制备
特殊处理 酶解法去除细胞壁
胰蛋白酶处理、 制细胞悬浮液
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抗埃博拉病毒的单克 隆抗体制备成功了吗？
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三.单抗的应用：
1、诊断试剂
2、治疗疾病和运载药物
最广泛的应用
生物导弹
准确、高效、简易、 癌细胞靶向治疗 快速
产目的抗体 无限增殖的 的浆细胞 骨髓瘤细胞
动物细胞融合
杂交瘤细胞
1975年英国科学家 米尔斯坦和柯勒的实验
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二.单抗的制备： 1、诱导动物细胞融合的方法和原理：
两两融合后形成的细胞种类？3种:BB/瘤瘤/B瘤
一.单抗的概念： 头脑风暴2：若你是一名生物研究员，你有什么
人教高中生物选修三提分教程：专题2 2 2 第2课时 动物细胞融合与单克隆抗体 Word版含解析
第2课时 动物细胞融合与单克隆抗体[学习目标] 1.动物细胞融合的方法。
2.单克隆抗体的制备过程。
3.单克隆抗体的原理和应用。
知识点一 动物细胞融合知识梳理1.概念：□01两个或□02多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称□03细胞杂交。
2．原理：□01细胞膜的流动性。
3．过程：包括细胞膜融合和□01细胞核的融合。
A 细胞B 细胞――→诱导融合□02杂交细胞――→有丝分裂多个杂交细胞 4．诱导方法(1)化学方法：□01聚乙二醇(PEG)。
(2)□02物理方法：电激、离心、振动等。
(3)生物方法：□03灭活的病毒(失去感染力，保留融合活性)。
5．结果：形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，这种细胞称为□01杂交细胞。
6．动物细胞融合的优点与应用(1)优点：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
(2)应用：是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。
特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造□01单克隆抗体开辟了新途径。
[问题探究] 1.融合后的细胞能否直接用于培养，为什么？提示：不可以，还需要进一步筛选。
因为诱导融合后形成的融合细胞有多种，需要筛选出所需要的杂交细胞。
2．细胞融合完成的标志是什么？提示：细胞核融合。
3．动、植物细胞融合时，所用诱导方法有何不同？提示：动物细胞可用灭活的病毒进行诱导。
4．不灭活的病毒能否作为诱导剂？提示：不能。
用病毒作为诱导剂时，必须事先灭活，使病毒失去感染和增殖能力，但不破坏病毒的抗原结构。
而不灭活的病毒会感染细胞，不能诱导细胞融合。
5．归纳生物技术产生后代个体的遗传物质或基因来源。
提示：①转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两个亲本。
②杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。
③经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。
④动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。
⑤克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。