石油烃对孔石莼生长及光合作用的影响

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石莼属海藻的环境增殖及生物质能开发潜力

石莼甲醇提取物可降低浒苔（Ｅｎｔｅｒｏｍｏｒｐｈａｐｒｏ－ｌｉｆｒａ）孢子附着率４０％；Ｚｈｅｎｇ等利［２３］用孔石莼中
提取的天然活性物质，对２种附着生物硅藻和贻贝的抑制作用进行了筛选试验，发现乙酸乙酯粗提取物对硅藻的克生活性作用很强；丁惠等通［２４］过试验检测了孔石莼不同提取物对海洋硅藻的克生活性，发现各提取物均明显地抑制了硅藻的附着及生长，尤其是乙酸乙酯提取物在１ｇ／Ｌ质量浓度下对硅藻附着生长的抑制率超过９９％。
１石莼属海藻的环境修复作用
１．１石莼属海藻的净水作用由于石莼属海藻能够吸收水中的无机氮、磷和
重金属污染物等，合理栽培不仅可净化水质、捕捉二氧化碳，还可收获经济性海藻。［２－３］近年来，国内外已有较多利用石莼净化水质的研究报道，１９８５年日本鹿儿岛大学曾开展孔石莼的净水试验，发现孔石莼对磷的吸收速度为０．３～０．６ｍｇ／（ｃｍ２ ·ｄ），每日的产氧量是自身耗氧的６倍，且在夏季生长还具有抑制赤潮和细菌的效果，对改善鱼类栖息环境有良好作用［４］；平田八郎开［５］展了孔石莼作植物滤池净化对虾养殖循环水的小规模试验，发现养殖水体中ＮＨ４＋－Ｎ、ＮＯ２－－Ｎ、ＮＯ３－－Ｎ和ＰＯ３４－－Ｐ质量浓度分别为０．４３７、０．０５２、０．２７０、０．３４７ｍｇ／Ｌ，而对照

石油烃污染对海洋浮游植物的影响

原因尚未确定，可能与石油烃中含有与浮游植物生长所需营养相同的成分［６ｌ有关。季节的不同，
浮游植物对石油烃的耐受能力也不同，水温和浮
（２）以乳化和溶解状态的方式溶解分散在海洋环境中；（３）未溶解的残余物沉积海底或以焦油球的
范围内，随着温度升高，浮游植物新陈代谢速率
也随之加快，加快了生物对有毒物质的的吸收，
化学氧化、溶解、乳化、颗粒物质的吸附沉降及
生物降解等过程【２ｌ。石油烃污染物的最后产品是焦油团块，主要成分为硬质的石蜡族碳氢复合
物，以球状小油块形态漂浮在海面上［３】。焦油团块被风干后，滞留下来的焦油、重油以及芳香族
系，海上石油开采中出现的漏油及井喷事故和钻井泥浆、钻屑及生产用水，港ＶＩ和船舶的作业含
油污水排放，河流石油污染物人海是近海石油烃
收稿日期：２ｏ１２ — １１－１２
图２２００６ — ２０１０年我国海上石油开采平台钻井泥浆、
２１世纪是海洋世纪，海洋经济开发也成为当代我国重要的经济增长点。但是海洋环境保护却未能跟上海洋经济开发的脚步，以至于目前出现相当面积的海洋环境污染。近年来，由于海上石油勘探、海上运输等行业的迅速发展，海上油田泄露、船舶溢油事故不断发生，港口和船舶的作
使浮游植物体内有毒物质富集，从而产生毒害作
用。
３．２对代谢活动的影响
石源于对
碳氢化合物成分越多，其毒性就越大。

石油烃污染土壤PPT精选文档

石油在土壤中的迁移转化及修复研究
1
目录
2
石油简介：
石油是现代社会的最主要能源之一,被称作“工业的血液”。石油又称原油，地壳上层部分地区有石油储存。
3
石油的物理性质：
• 石油的性质因产地而异，密度为0.8 1.0g/cm3，粘度范围很宽，凝固点差别很大（30 ~ -60摄氏度），沸点范围为常温到500摄氏度以上，可溶于多种有机溶剂，不溶于水，但可与水形成乳状液。原油的颜色非常丰富，有红、金黄、墨绿、黑、褐红、甚至透明；原油的颜色是它本身所含胶质、沥青质的含量，含的越高颜色越深。
分是主要的，即吸附等温即分配作用起主导作用，
线表现出明显的非线性吸吸附等温线表现线性吸附附特征，此时，表面吸附特征（楚伟华，06年）
占主导作用。
15
石油在土壤中的迁移：
存在于水相中随水流可以相对自由
•
地向土层深处迁移或发生平面的扩
石迁移态散运动
油
逸散于气态环境中可由空气携带漂
在
移,漂移过程中易于吸附在大气的粉
土
尘上,随着粉尘的降落而进入远离污
壤中的
染源的地表土壤,使污染物发生长距离的迁移
状
态
吸附于颗粒物上的部分在一定时间内可
滞留态
能迁移的可能性小,但是在适当的外界条件下,污染物会部分解吸,进入水相从而
发生迁移。
16
石油在土壤纵向的迁移：
石油烃在向下层迁移时,它的迁移速率以及可到达的深度与土壤质地和石油性质(尤其是粘滞性)有密切的关系。17
40
假单胞菌属
杆菌
41
菌株的生理生化特性与菌株对石油烃的降解能力：
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孔石莼脂溶性化学成分的分析

M arine S ciences/V ol.24,N o.5/20003孔石莼脂溶性化学成分的分析STU DIES O N THE L IPID COMPOSITIO N OF Ulva p ertusa吴志军熊慧萍李智恩徐祖洪(中国科学院海洋研究所青岛266071)关键词G C 2MS ,孔石莼,脂肪酸孔石莼(Ulva p ertusa K j ellm )是一种广泛分布于我国黄海、渤海的野生绿藻,其资源极为丰富。

据《中国海洋药物辞典》记载,其具软坚散结、利水消肿、降压之功效。

在我国民间用于治疗甲状腺肿大、水肿、高血压等症。

在我国沿海地区,除了传统上的少量食用和民间药用外,仅有一些作为饲料和肥料。

关于孔石莼化学成分的研究,已有不少文献报道[1,2]。

为了进一步开发利用我国丰富的绿藻资源,作者对青岛产的孔石莼的化学成分和生物活性进行了较深入系统的研究,现报道G C 2MS 2DS 测定其脂溶性化学成分的结果。

1材料与方法1.1样品的采集及提取孔石莼于1999年3月采自青岛太平角,自来水清洗,除去泥砂和其他杂草;样品自然阴干,塑料袋封口室温下保存。

取孔石莼60g ,粉碎,用氯仿2甲醇(1∶1)加热回流抽提3次(每次200m l ),在60℃温度下减压旋转回收有机溶剂,得黑色油状物2g ,得率为3.33%。

所得样品用硫酸二甲酯进行甲基化处理。

1.2仪器及分析条件所用仪器为F inni g an 4510G C/MS 联用仪。

气相色谱条件:色谱柱为AC 25石英毛细管柱,柱长30m ,柱内径为0.25mm 。

载气为高纯氦气。

分流压30∶1,柱前压力为14Pa 气化室温度为250℃,柱温150～240℃,以3℃/m in 的速度程序升温。

质谱条件:质谱电离方式为EI ,电离电压为70eV ,发射电流0.25m A ,倍增器电压1300V ,离子源温度为220℃,扫描周期为1s 。

数据处理及质谱检索:甲基化样品经气相色谱质谱分析,所得各组分峰的质谱数据运用计算机谱库自动进行检索,并参照标准图谱进行核对,最后对色谱峰用面积归一化法进行计算,得出各组分的百分含收稿日期:2000201217;修回日期:2000203201EXPRESS Letters快报上都在台湾海峡等深线50～80m 海区。

光照强度对孔石莼生长和藻体化学组成的影响

光照强度对孔石莼生长和藻体化学组成的影响王巧晗, 董双林, 田相利, 王芳, 董云伟, 张凯(中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室, 山东青岛 266003)摘要: 研究了光照强度2 500～20 000 lx对孔石莼(Ulva pertusa)生长和藻体生化组成的影响。

研究结果表明, 光照强度对孔石莼的生长率具有明显的影响(P<0.05), 孔石莼在光照强度为12 500 lx时有最大的生物量积累。

光照强度低于12 500 lx时, 孔石莼的生长率有随着光照强度的降低而减小的趋势; 光照强度高于12 500 lx时, 孔石莼的生长率随着光照强度的升高而降低(P<0.05)。

不同光照强度对孔石莼的叶绿素、可溶性糖和游离脯氨酸的含量具有明显的影响(P<0.05)。

随着光照强度的增加, 孔石莼的叶绿素a和叶绿素b的含量逐渐变小; 低光照条件也促进了孔石莼蛋白质的积累; 当光照强度超过17 500 lx时, 游离脯氨酸的含量明显增加。

光照强度对孔石莼化学组成也具有明显的影响(P<0.05)。

随着光照强度的升高, 藻体的N元素含量有所升高, 但光强达到17 500 lx后, 随着光强的增加, N元素含量反而降低; C元素的含量在光照强度达到17 500 lx后, 含量也明显升高; H元素的含量在光照强度2 500~20 000 lx范围内, 具有随着光照强度增加而增加的趋势。

关键词: 光照强度; 孔石莼(Ulva pertusa); 生长; 藻体组成中图分类号: S912 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2010)08-0076-05光是植物赖以生存的能量来源。

光照强度对植物的生长、光合作用和物质代谢均有调控作用[1]。

在对高等植物的研究中发现, 适当的光照强度能够促进植物细胞的分裂、组织器官的分化、花芽的增加和果实的成熟[2]。

在水生植物光生态的研究中发现, 光照强度是造成单细胞藻类种群变动和生化组成变化的主要因素[3], 并能调节单细胞藻类在水层中的垂直移动[4]。

浅谈石莼资源的开发与利用

实验与技术・EXPERIMENTS AND TECHNIQUES浅谈石莼资源的开发与利用DEVELOPING AND UTILIZATION OF Ulva p ertusa张起信(荣成市海洋与水产局264309) 石莼(U lva lactuca L.)与孔石莼(U.p er tusa K jellm)属绿藻门石莼属中的大型海洋经济藻类。

它广泛分布于西太平洋沿海。

是我国野生藻类中资源极为丰富的一种[1]。

它喜栖于中、低潮区及大潮干潮线附近的石砾、岩礁、贝壳上,水质肥沃的内湾生长更为旺盛。

其适温范围0～35℃,适盐范围为15～35,生长极泼辣,有很强的生命力,再生能力极强。

它不仅藻体鲜艳、味道鲜美,而且富含许多营养物质。

具有很高的经济价值。

所以,近年来对石莼的研究及开发利用引起了国内外的普遍重视。

1　石莼的成分组成及营养价值干石莼经化学分析表明,主要成分有粗纤维、碳水化合物、蛋白质及灰分,并含有少量脂肪。

因品种、产地、采集时间不同,其成分也略有差异。

石莼与孔石莼的成分组成极其相似(见表1)。

同时,分析表明石莼类还含有K,N a,Ca,M g,N i,Z n,M o,Cu,I,F等多种微量元素。

在粗蛋白中,已分析出12种氨基酸。

石莼还含有多种维生素,其中,V B12和V c的含量高于小球藻。

具有药用价值的脂醇酸等物质也很丰富。

毛文君曾作过12种海洋藻类中硒与蛋白质含量的分析[2]。

其中,石莼中的硒含量为5.980 g/g干品,明显高于海带、裙带菜、羊栖、礁膜、海萝和石花菜等其他11种海藻的硒含量。

石莼的蛋白质含量为17.67%,也明显高于其他绿藻和褐藻[2](见表2)。

所以,石莼资源的开发利用,将无疑会给人类带来福音。

表1　石莼、孔石莼的主要成分组成(%)海藻名称粗脂肪粗蛋白粗纤维粗碳水化合物灰分石　莼0.06～0.09 3.67～24.26 6.89～11.22 5.6413.73孔石莼0.07 5.86 6.2524.3013.55表2　12种海藻中硒及蛋白质含量海藻名称硒( g/g干品)蛋白质(%)绿藻刺松藻 3.72616.76浒苔 3.46415.19袋礁膜 3.23014.52石莼 5.98017.67褐藻羊栖菜 1.3688.03海蒿子 1.57610.12裙带菜 2.18212.52海带 1.9328.13红藻石花菜 2.34719.53叉枝藻 2.26815.24坛紫菜 3.12723.89海萝 2.31017.692　石莼资源开发利用的现状我国对石莼资源开发利用,有着悠久的历史。

孔石莼的6种溶剂提取物对3种赤潮微藻生长的影响

关键词赤潮微藻
孔石莼
抑制作用提取物
Ｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆ６ｋｉｎｄｓｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＵ．ｐｅｒｔｕｓａｔｏｔｈｒｅｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆｒｅｄｔｉｄｅｍｉｃｒｏａｌｇａｅＳＵＮＹｉｎｇｙｉｎｇ，ＺＨＡＮＧ
氏凯伦藻、中肋骨条藻和塔玛亚历山大藻的抑制率分别为７６．６７、６５．６５、５６．５２％。从对藻细胞形态的影响看，除蒸馏水提取物外，其余５种有机溶剂提取物均使赤潮微藻细胞出现不同程度的空洞、破碎和细胞色素减褪现象。甲醇提取物可明显降低３种赤潮微藻细胞内叶绿素、蛋白质和多糖的含量，乙酸乙酯和丙酮提取物对３种生理指标的含量也有一定影响。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕ．ｐｅｒｔｕｓａｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｓｉｘｓｏｌｖｅｎｔｓ（ｐｅｔｒｏｌｅｕｍｅｔｈｅｒ，ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ，ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ，ａｃｅｔｏｎｅ，ｍｅｔｈ — ａｎｏｌａｎｄｄｉｓｔｉｌｌｅｄｗａｔｅｒ）ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｏｂｔａｉｎｅｄ６ｋｉｎｄｓｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＵ．ｐｅｒｔｕｓａｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｔｈｅｔｈｒｅｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆｒｅｄｔｉｄｅｍｉｃｒｏａｌｇａｅ（Ｋ．ｍｉｋｉｍｉｔｏｉ，Ｓ．ｃｏｓｔａｔｕｍａｎｄＡ．ｔａｍａｒｅｎｓｅ）ｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆａｌｇａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆａｌｇａｌｎｕｍｂｅｒ，ａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ（ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ，ｐｒｏ — ｔｅｉｎａｎｄｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ）．ＲｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＵ．ｐｅｒｔｕｓａｈａｄｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｃｔｉｏｎ．

石油烃污染土壤(完整版).pptx

加大分子生态学技术在石油污染土壤修复中的应用
优选
45
优选
46
石油向周围环境的迁移：：
优选
18
石油在土壤中的光解：
• 对于在土壤环境中的石油类物质来说，光解反应主要在两个方面进行 :
• ①经过分配作用逸散在大气中的部分，由于受到直接的光照而发生有效的降解。
• ②在土层中的石油类物质，只有最表层的一小部
分可以受光照而发生降解。
绝大部分的石油类物质是滞留在土层的，一般不作为微生物的碳
源。（徐玉林，04年）优选
20
使土壤有机质含量增
石油污染土壤的危害：加全，氮、pH速升效高磷，、全速磷效、
氮含量降低，且不同
改变土壤理化性质
土层间有机质、pH、全氮、全磷、速效
磷、速效氮、速效钾
含量有显著差异
改变土壤微生物群落结构
对陆生植物的危害对陆生动物的危害
优选
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化学氧化法：
• 通过向石油污染土壤中喷洒或注入化学氧化剂，使其与污染物质发生化学反应来实现净化的目的。化学氧化剂有臭氧、过氧化氢、高锰酸钾、二氧化氯及Fenton 试剂等。
• 一般作为生物修复的预处理。
优选
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生物修复法：
微生物修复
植物修复
动物修复
优选
31
微生物修复：
• 微生物修复技术是指利用土壤中的土著微生物或补充经驯化的高效微生物，在优化的环境条件下，加速分解污染物，修复被污染的土壤的方法。
不溶于水，但可与水形成乳状液。原油的
颜色非常丰富，有红、金黄、墨绿、黑、
褐红、甚至透明；原油的颜色是它本身所含胶质、沥青质的含量，含的越高颜色越

柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长及抗氧化酶的影响

第53卷第7期 2023年7月中国海洋大学学报P E R I O D I C A LO FO C E A N U N I V E R S I T YO FC H I N A53(7):031~041J u l y,2023柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长及抗氧化酶的影响❋吴胜,任兰英,高旭,刘岩❋❋,宫庆礼(海水养殖教育部重点实验室(中国海洋大学),山东青岛266003)摘要: 为探究石油烃类对大型海藻生长及抗氧化酶应答机制的影响,并为利用藻类修复石油烃污染水域提供科学依据,本文以鼠尾藻(S a r g a s s u mt h u n b e r gi i )和孔石莼(U l v a p e r t u s a )为研究对象,探讨了不同浓度的柴油水溶性组分对大型海藻生长㊁净光合速率㊁呼吸速率以及生化指标的影响㊂研究显示,鼠尾藻在柴油水溶性组分浓度为8.599㊁25.770和41.285m g /L 处理组中的相对生长率(R G R )高于对照组,85.990m g/L 处理组中生长出现显著抑制现象㊂在24h 内,各浓度处理组的孔石莼R G R 显著高于对照组,72h 后,41.285和85.990m g/L 处理组的孔石莼R G R 显著降低㊂两种藻的净光合速率和叶绿素a 含量在各浓度处理组中的变化趋势与其R G R 相对应,而呼吸速率在各浓度处理组中要高于对照组㊂高浓度的柴油水溶性组分均引起两种藻的丙二醛含量上升㊂鼠尾藻的超氧化物歧化酶(S O D )和过氧化氢酶(C A T )活性分别在96和48h 显著上升,过氧化物酶(P O D )活性变化不显著,总抗氧化能力在96h 达到最高值㊂孔石莼的S O D ㊁C A T 和P O D 活性分别在48㊁72和48h 上升,总抗氧化能力在48h 达到最高值㊂实验结果表明,两种海藻对柴油水溶性组分的耐受性不同,但柴油水溶性组分对两种海藻的生长和生化组分的影响呈相同的变化趋势, 低促高抑现象明显㊂关键词: 鼠尾藻;孔石莼;柴油;水溶性组分;生长;光合作用;抗氧化酶中图法分类号: S 93 文献标志码: A 文章编号: 1672-5174(2023)07-031-11D O I : 10.16441/j.c n k i .h d x b .20220248引用格式: 吴胜,任兰英,高旭,等.柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长及抗氧化酶的影响[J ].中国海洋大学学报(自然科学版),2023,53(7):31-41.W uS h e n g ,R e n L a n y i n g ,G a oX u ,e t a l .E f f e c t o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n g r o w t h a n d a n t i o x i d a n t e n z ym e s o f S a r g a s s u mt h u n b e r g i i a n d U l v a p e r t u s a [J ].P e r i o d i c a l o fO c e a nU n i v e r s i t y o f C h i n a ,2023,53(7):31-41. ❋ 基金项目:国家重点研究发展计划项目(2020Y F D 0900201)资助S u p p o r t e d b y t h eN a t i o n a l K e y R e s e a r c h a n dD e v e l o p m e n t P r o gr a mo f C h i n a (2020Y F D 0900201)收稿日期:2022-04-28;修订日期:2022-07-10作者简介:吴胜(1995 ),男,硕士生,主要从事大型海藻类生理生态学研究㊂E -m a i l :1396721301@q q.c o m ❋❋ 通讯作者:E -m a i l :q d _l i u ya n @o u c .e d u .c n 随着海洋石油资源的大量开发利用,海上原油开采及运输过程中造成的泄漏问题愈发严重,对周边海洋环境造成了极大损害[1]㊂目前,石油类污染物已成为我国近海的第二大污染物[2]㊂石油类物质进入海洋后会形成漂浮油膜㊁溶解或分散乳化态和凝聚态残余物三种形式㊂漂浮油膜极不稳定,会受到环境因素㊁动力因素㊁油的数量以及油的性质等很多因素的影响而快速分解消失[3]㊂凝聚态残余物质不会对海洋生物产生明显的影响[4]㊂溶解或分散于水体的石油组分主要含有烷烃类㊁芳香烃类㊁酚类化合物及金属离子等多种复杂成分[5],对海洋生物产生直接危害,其组分性质及分散程度决定毒性的程度[6-7],通常会使生物发生组织改变,引起代谢异常的现象,从而进一步影响到物种的繁殖㊁群落结构,对整个生态系统产生影响㊂石油类水溶性组分还可以通过藻类㊁甲壳类和鱼类组成的食物链向人体转移,可能会导致生物发生可遗传的基因突变[8]㊂柴油是常用的石油类制品,广泛应用于轮船㊁货车和铁路机车等大型运输工具中,其水溶性组分中包含低分子量烷烃和多环芳烃(P A H s )㊁酚类㊁重金属等成分,是石油烃污染的主要形态㊂这些污染物能够通过船舱排污㊁城市径流以及海上船舶运输事故发生等途径进入到海洋环境中,对海洋生物产生影响㊂海藻作为海洋生态系统中的初级生产者,对整个海洋生态系统的能量流动和物质循环都具有重要作用㊂大量研究表明,不同浓度的石油烃会通过影响色素含量㊁R u b i s i c o 酶活性㊁抗氧化酶活性等重要因子而对藻类的生长产生影响[9-12],由其毒性所产生的活性氧自由基会刺激海藻体内抗氧化系统启动生理应答[13-15],长期的石油烃污染还会使海洋藻类群落的多样性㊁均匀度以及优势种等发生变化[16-19]㊂Copyright ©博看网. All Rights Reserved.中国海洋大学学报2023年鼠尾藻(S a r g a s s u mt h u n b e r g i i)是一种广泛分布于北太平洋潮间带的大型藻类,其对光照㊁温度㊁盐度等环境因子的适应性很强[20],是中国北方沿海潮间带生态系统中的重要组成部分,为很多潮间带动物提供了栖息㊁繁殖的场所㊂鼠尾藻具有较强的营养盐吸收能力和较强的重金属耐受能力[21-22],能够净化富营养水体,具有重要的生态价值㊂孔石莼(U l v a p e r t u s a)主要分布在中㊁低潮区及大干潮线附近的岩礁,叶片膜状,仅由两层细胞构成㊂孔石莼对环境的敏感性较高,具有较强的抗逆境胁迫能力[23],在修复和保护海洋生态系统中也发挥着重要的作用,可以作为海洋环境监测和评价的一种新手段[24-25]㊂本研究以鼠尾藻和孔石莼这两种处于相同生态位但具有不同形态结构的潮间带海藻为研究对象,探讨其生长㊁光合作用㊁呼吸作用和生化组分对不同浓度柴油水溶性组分的反应规律,以期探明石油烃类对大型海藻生长㊁生存的影响和藻体内部的生理应答机制,并为石油烃污染水域生物修复物种筛选提供科学依据㊂1材料与方法1.1实验材料1.1.1柴油水溶性组分母液制备柴油样品为在中国石化加油站购买的0#柴油,将过滤海水和0#柴油按照9ʒ1的比例混合,密封㊁避光㊁振荡24h后转移到分液漏斗中静置3h,取下层水相,即得0#柴油水溶性组分母液㊂将母液抽滤除菌后置于4ħ环境中避光密封保存㊂参照国标法测定母液浓度为85.990m g/L㊂1.1.2样品采集鼠尾藻㊁孔石莼采集自青岛太平角潮间带,置于低温避光容器中运回实验室㊂样品用海水清洗去除沉积物㊁附生植物㊁小型附生动物等㊂用手术刀切取鼠尾藻尖端2~3c m,将藻段放在含1/4P E S I 培养基的锥形瓶中,置于光照培养箱中暂养;用1c m 孔径打孔器打孔获得孔石莼藻片,将藻片放在含f/2培养基的锥形瓶中,置于光照培养箱中暂养㊂暂养条件为:温度13ħ㊁光照强度90μm o l㊃m-2㊃s-1㊁光暗周期12Lʒ12D㊂连续充气暂养3d㊂1.2实验方法1.2.1相对生长率测定分别选取暂养后健康的两种藻体进行实验,培养密度为1g/L㊂将灭菌过滤海水和0#柴油水溶性组分母液按一定比例混合,得到5个不同浓度的处理组,量级及其中柴油水溶性组分浓度分别为0(0m g/L)㊁10(8.599m g/L)㊁30(25.770m g/L)㊁50(41.285m g/L)和100(85.990m g/L),每组3个重复㊂光照培养箱设置条件与暂养相同㊂实验周期为96h,分别于24㊁48㊁72和96h收集样品,用吸水纸分别吸干藻体表面多余水分后称量鲜质量,计算相对生长速率(R e l a t i v e g r o w t h r a t e,R G R)㊂计算公式如下: R R G R=l n(W t/W0)ˑ100%/t㊂式中:W0为初始藻体鲜质量;W t为处理t小时后的藻体鲜质量;t为处理时间,单位为h㊂1.2.2析氧速率的测定分别于培养24㊁48㊁72和96h后,随机挑选藻体置于污水瓶(330m L)中,利用光纤测氧仪(M a n u a l F i r e S t i n g O2Ⅱ)分别测定在光照和黑暗条件下单位时间(h)每克藻体(鲜质量)所产生和消耗氧气的含量(μm o l),以此来计算净光合速率和呼吸速率㊂每个处理测定3个生物学重复㊂1.2.3生化组分指标的测定1.2.1中的藻体称重后投入液氮中速冻,并转移至超低温冰箱中,用于生化组分指标的测定㊂鼠尾藻的叶绿素a含量测定参照S e e-l y的方法进行[26],孔石莼叶绿素a含量的测定参照A l a n等的方法进行[27];丙二醛(M D A)㊁超氧化物歧化酶(S O D)㊁过氧化物酶(P O D)㊁过氧化氢酶(C A T)㊁总抗氧化能力(T-A O C)含量的测定均使用南京建成生物工程研究所的试剂盒进行测定,具体步骤按照试剂盒提供的方法进行㊂1.3数据分析通过E x c e l进行原始数据处理及绘图,S P S S26.0进行时间与浓度组分的双因素方差分析,对数据进行正态分布和方差齐性检验,使用邓肯多重比较法(D u n-c a n sm u l t i p l er a n g e t e s t)比较各组之间的差异,以P<0.05表示显著性差异㊂2结果与分析2.1柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长的影响柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长的影响如图1所示㊂从图1(A)可以看出,每个浓度处理组自身的鼠尾藻R G R在整个培养周期无显著差异㊂在96h 时,100量级处理组的鼠尾藻R G R要显著低于30和50量级处理组(P<0.05),所有处理组在整个培养周期未出现负增长㊂从图1(B)可以看出,低浓度处理组(10㊁30量级)的孔石莼R G R在整个培养周期无显著差异,而高浓度处理组(50㊁100量级)在72h后显著降低(P<0.05),且均出现负增长㊂2.2柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼净光合速率的影响柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼净光合速率的影响如图2所示㊂从图2(A)可以看出,每个浓度处理组自身的鼠尾藻净光合速率在整个培养周期无显著差异㊂在48h时,100量级处理组的鼠尾藻净光合速率要显著低于其他浓度处理组(P<0.05);在96h时, 10量级处理组的鼠尾藻净光合速率要显著高于其他浓度处理组(P<0.05)㊂从图2(B)可以看出,30量级处23Copyright©博看网. All Rights Reserved.7期吴胜,等:柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长及抗氧化酶的影响理组的孔石莼净光合速率在96h 要显著高于48和72h (P <0.05),50量级处理组的孔石莼净光合速率在72h 要显著高于48和96h ㊂在96h 时,高浓度处理组(50㊁100量级)的孔石莼净光合速率要显著低于其他浓度处理组(P <0.05)㊂(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图1 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)相对生长率(鲜质量)的影响F i g.1 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n r e l a t i v e g r o w t h r a t e o f f r e s hw e i g h t i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B)(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图2 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)净光合速率的影响F i g .2 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n n e t p h o t o s y n t h e t i c r a t e i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B )2.3柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼呼吸速率的影响柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼呼吸速率的影响如图3所示㊂从图3(A )可以看出,每个浓度处理组自身的鼠尾藻呼吸速率在72h 后显著增高(P <0.05)㊂在24㊁48和72h 时,100量级处理组的鼠尾藻呼吸速率要显著高于其他处理组(P <0.05);在96h时,各浓度处理组的鼠尾藻呼吸速率无显著差异㊂从图3(B )可以看出,100量级处理组的孔石莼呼吸速率在72h 要显著低于24和48h (P <0.05),其他浓度处理组的孔石莼呼吸速率在整个培养周期无显著变化;在48h 时,30量级处理组的孔石莼呼吸速率要显著高于对照组(P <0.05),72h 时,100量级处理组的孔石莼要显著低于30和50量级处理组(P <0.05),其他时间各浓度处理组的孔石莼呼吸速率无明显变化㊂2.4柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生化组分的影响2.4.1叶绿素a 含量柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼叶绿素a 含量的影响如图4所示㊂从图4(A )可以看出,每个浓度处理组自身的鼠尾藻叶绿素a 含量在整个培养周期无显著差异㊂在48h 后,高浓度处理组(50㊁100量级)的鼠尾藻叶绿素a 含量显著降低(P <0.05)㊂从图4(B )可以看出,高浓度处理组的孔石莼叶绿素a 含量在96h 时显著降低㊂在24h 时,1033Copyright ©博看网. All Rights Reserved.中国海洋大学学报2023年和100量级处理组的孔石莼叶绿素a 含量显著低于对照组,而30量级处理组的孔石莼叶绿素a 含量显著高于对照组(P <0.05);在48和72h 时,各浓度处理组的孔石莼叶绿素a 含量与对照组相比无显著差异;在96h 时,高浓度处理组的孔石莼叶绿素a 含量与其他浓度处理组相比显著降低(P <0.05)㊂(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图3 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)呼吸速率的影响F i g .3 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n r e s pi r a t i o n r a t e i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B)(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图4 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)叶绿素a 含量的影响F i g.4 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n t h e c o n t e n t o f c h l o r o p h y l l a i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B )2.4.2丙二醛含量柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼M D A 的影响如图5所示㊂从图5(A )可以看出,10量级和30量级处理组的鼠尾藻M D A 含量在48h 要显著低于其他时间(P <0.05),而高浓度处理组的鼠尾藻M D A 含量在72和96h 要显著高于24和48h (P <0.05)㊂在72h 后,100量级处理组的鼠尾藻M D A 含量要显著高于对照组(P <0.05)㊂从图5(B )可以看出,每个浓度处理组自身的孔石莼M D A 含量在整个培养周期无显著变化㊂在24和96h 时,100量级处理组的孔石莼M D A 含量要显著高于对照组(P <0.05)㊂2.4.3超氧化歧化酶活性柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼S O D 活性的影响如图6所示㊂从图6(A )可以看出,除对照组外,每个浓度处理组自身的鼠尾藻S O D 活性在96h 要显著高于其他时间(P <0.05)㊂在24和48h 时,各浓度处理组的鼠尾藻S O D 活性要显著低于对照组(P <0.05);而在96h 时,100量级处理组的鼠尾藻S O D 活性要显著高于其他处理组(P <0.05)㊂从图6(B )可以看出,10和30量级处理组的孔石莼S O D 活性在48h 要显著高于其他时间(P <0.05)㊂在24h 时,各浓度处理组的孔石莼S O D 活性要显著高于对照组(P <0.05);在48h 时,除100量级处理组外,其他浓度处理组孔石莼S O D 活性要显著高于对照组(P <0.05);在72h 时,10量级处理组孔石莼S O D 活性要显著低于其他浓度处理组(P <0.05);在43Copyright ©博看网. All Rights Reserved.7期吴胜,等:柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长及抗氧化酶的影响96h 时,10量级处理组的孔石莼S O D 活性要显著高于其他浓度处理组(P <0.05)㊂(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图5 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)丙二醛含量的影响F i g.5 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n t h e c o n t e n t o f M D A i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B)(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图6 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)超氧化物歧化酶活性的影响F i g .6 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o n S O Da c t i v i t y i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B )2.4.4过氧化氢酶活性柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼C A T 活性的影响如图7所示㊂从图7(A )可以看出,10量级处理组的鼠尾藻C A T 活性在48h 要显著高于其他时间(P <0.05),其他各浓度处理组的鼠尾藻C A T 活性在整个培养周期无显著变化㊂每个浓度处理组自身的鼠尾藻C A T 活性在各时间无显著变化㊂从图7(B )可以看出,10和30量级处理组的孔石莼C A T 活性在72h 要显著高于其他时间(P <0.05)㊂在24和48h 时,30㊁50和100量级处理组的孔石莼C A T 活性要显著低于对照组(P <0.05);在72h 时,10量级处理组的孔石莼C A T 活性要显著高于其他浓度处理组(P <0.05),且100量级处理组的孔石莼C A T 活性在72和96h 均出现负值㊂2.4.5过氧化物酶活性柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼P O D 活性的影响如图8所示㊂从图8(A )可以看出,100量级处理组的鼠尾藻P O D 活性在24和96h要显著低于其他时间(P <0.05)㊂在96h 时,高浓度处理组的鼠尾藻P O D 活性要显著低于对照组(P <0.05),在其他时间各浓度处理组鼠尾藻P O D 活性与对照组相比无显著差异㊂从图8(B )可以看出,30和50量级处理组的孔石莼P O D 活性在48h 要显著高于其他时间(P <0.05)㊂在24h 时,各浓度处理组的孔石莼P O D 活性要显著低于对照组(P <0.05);在48h时,30和50量级处理组的孔石莼P O D 活性要显著高于其他浓度处理组(P <0.05);在72h 时,30量级处理组的孔石莼P O D 活性要显著高于其他浓度处理组(P <0.05);在96h 时,各浓度处理组间的孔石莼P O D 活性无显著差异㊂53Copyright ©博看网. All Rights Reserved.中国海洋大学学报2023年(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图7 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)过氧化氢酶活性的影响F i g.7 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o nC A T a c t i v i t y i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B)(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图8 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)过氧化物酶活性的影响F i g .8 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o nP O Da c t i v i t y i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B )2.4.6总抗氧化能力柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼总抗氧化能力的影响如图9所示㊂从图9(A )可以看出,30㊁50及100量级处理组的鼠尾藻总抗氧化能力在96h 要显著高于其他时间(P <0.05)㊂在96h 时,鼠尾藻的总抗氧化能力随着柴油水溶性组分浓度的增大而呈升高趋势(P <0.05),100量级处理组的鼠尾藻总抗氧化能力显著高于对照组(P <0.05),而其他时间各浓度处理组的鼠尾藻总抗氧化能力无显著变化㊂从图9(B )可以看出,30量级处理组的孔石莼总抗氧化能力在48和72h 时要显著高于24和96h (P <0.05),50量级处理组的孔石莼总抗氧化能力在48h 要显著高于其他时间(P <0.05)㊂在48h 时,50量级处理组的孔石莼总抗氧化能力要显著高于对照组(P <0.05),在96h 时,100量级处理组的孔石莼总抗氧化能力要显著低于对照组(P <0.05)㊂3 讨论从相对生长率的结果来看,两种海藻对柴油水溶性组分的耐受能力不同㊂96h 内,孔石莼能够在0~30量级处理组中生存,而鼠尾藻能够在0~100量级处理组中生存㊂孔石莼与鼠尾藻同属于潮间带物种,具有类似的栖息环境条件,但是其耐受范围低于鼠尾藻,这可能与藻体的形态结构有关㊂鼠尾藻和孔石莼均为多细胞藻体,但是孔石莼的藻体仅由两层细胞构成,这样的细胞结构可能加快了有毒物质进入藻体的过程,进而导致了相对较差的适应性㊂此外,实验结果还表现出对鼠尾藻和孔石莼相对生长率的低促高抑现象㊂鼠尾藻在10㊁30和50量级处理组中相对生长率均高于对63Copyright ©博看网. All Rights Reserved.7期吴胜,等:柴油水溶性组分对鼠尾藻和孔石莼生长及抗氧化酶的影响(图中大写字母不同表示不同时间相同处理组之间差异显著(P <0.05),小写字母不同表示相同时间不同处理组之间差异显著(P <0.05)㊂C a pi t a l l e t -t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)i n t h e s a m e e x p e r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t d i f f e r e n t t i m e s ,L o w e r c a s e l e t t e r s i n d i c a t e s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e (P <0.05)a m o n g d i f f e r e n t e x pe r i m e n t a l t r e a t m e n t s a t t h e s a m e t i m e .)图9 不同浓度柴油水溶性组分对鼠尾藻(A )和孔石莼(B)总抗氧化能力的影响F i g.9 E f f e c t o f d i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f d i e s e l w a t e r a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n o nT -A O C i n S a r g a s s u mt h u n b e r gi i (A )a n d U l v a p e r t u s a (B )照组,100量级处理组出现抑制现象㊂24h 内各处理组对孔石莼生长均有促进作用,在处理72h 后50和100量级处理组的相对生长率开始显著下降,这可能是因为前期柴油水溶性组分被藻类吸收利用,为生长提供所需要的碳源和氮源,而长时间高浓度的柴油水溶性组分处理超出了藻体自身的防御能力,对内部细胞结构造成了不可逆的损伤,从而对生长产生抑制㊂王修林等认为,在低于0.5m g/L 的石油烃处理组中,旋链角毛藻(C h a e t o c e r o s c u r v i s e t u s )与的生长受到显著的促进[28],王悠在研究多环芳烃蒽对球等鞭金藻(I s o c h -r ys i s g a l b a n a )和中肋骨条藻(S k e l e t o n e m ac o s t a t u m )的影响中也发现类似的低促高抑现象[14]㊂赵红梅等的实验证明海带(L a m i n a r i a j a p o n i c a )能够吸收和降解多环芳烃,在藻体内形成二硫二巯基物质,对机体进行解毒效应[29],但是目前关于藻类对石油烃类物质的吸收和代谢的机理并不完全透彻,该理论的证实还需要进一步的研究㊂鼠尾藻和孔石莼的叶绿素a 含量与相对生长率的变化趋势大致相同,高浓度的柴油水溶性组分会导致其叶绿素a 含量下降,而低浓度柴油水溶性组分(10和30量级处理组)的作用,则会增加其细胞内叶绿素a 的含量㊂这一结果与田继远发现的小新月菱形藻(N i t z s c h i a c l o s t e r i u m )在受到蒽胁迫时叶绿素a 含量会下降[30]㊁徐梦发现的低浓度多环芳烃(小于等于10μg/L )会增加裙带菜幼孢子体细胞内叶绿素的含量[11]的结果相一致㊂造成光合色素含量的下降的原因可能为以下两种情况:(1)柴油水溶性组分降低了藻体营养盐吸收速率,导致体内营养成分供应的不足㊂R e i l l e y 等认为陆生植物叶片色素含量下降的原因是由于多环芳烃类物质堵塞了植物根系上具有吸收能力的细胞,吸收养分和水分的能力受到破坏,造成色素合成能力下降[31]㊂(2)柴油水溶性组分透膜进入细胞后会直接对叶绿体结构造成损伤㊂在研究柴油对钩沙菜(H y p n e am u s c i fo r m i s )的影响时通过透射扫描电镜以及荧光显微镜观察到叶绿体结构受损[32]㊂但本实验的具体影响因素有哪些还需要进一步研究㊂本研究中净光合作用速率与色素含量㊁相对生长速率相对应,鼠尾藻在48h 时出现低促高抑的现象㊂陈莲花研究表面活性剂对铜绿微囊藻(M i c r o c ys t i s a e r u g i n o s a )光合作用的影响时,表明20m g /L 浓度的A E O 9可以对铜绿微囊藻的光合作用产生明显的促进[33]㊂王珊研究三种石油烃种类对孔石莼光合速率影响的结果表明,在不同石油烃浓度下,孔石莼的光合速率表现出先增加后下降的趋势[10]㊂这些研究进一步验证了低浓度污染物可以刺激机体的自我防御系统,通过加快光合速率和呼吸速率的方式为机体制造有机物,加快能量供应㊂孔石莼在24h 表现出低浓度促进,在48h 表现出50和100量级处理组净光合作用速率下降,但随时间的延长有一定的恢复,这表明柴油水溶性组分在48h 内对孔石莼光合作用造成的损伤有可能是可逆转的㊂倪妍等在研究硝磺草酮对微囊藻(M i -c r o c ys t i s s p .)细胞造成的影响时也出现类似的恢复现象,在硝磺草酮浓度为5m g/L 时,微囊藻细胞最大光化学量子产量在最初受到的损伤会随着时间的延长出现恢复现象,10m g/L 处理组的藻细胞则没有出现类似的现象[34]㊂本研究中高浓度处理组中孔石莼的净光合速率在96h 又出现了的显著下降,这表明高浓度的柴油水溶性组分作用较长时间所带来的胁迫加重了藻体的损伤程度㊂柴油水溶性组分除了对两种藻类净光合速率产生影响外,也对黑暗呼吸速率产生影响㊂本研究表明柴油水溶性组分的处理会促进藻体的呼吸速率㊂研究表明,当植物受到胁迫后,呼吸速率会增加,73Copyright ©博看网. All Rights Reserved.中国海洋大学学报2023年这可能与藻类自身的防御系统有关,当藻体遇到不利环境时,为了保证更好的生长,需要更多的能量来启用各种代谢活动,因此会导致呼吸速率升高㊂在受到有机污染时,由于细胞膜具有磷脂双分子层结构,石油烃中的污染物质能够迅速地进入细胞,首先对植物体的第一道防线细胞膜造成损伤,发生膜脂过氧化作用,其产物丙二醛含量越高说明植物细胞膜受到的损伤程度越大[35]㊂张木清在研究低温影响甘蔗叶片的活性氧变化时发现丙二醛的含量与膜脂过氧化程度呈正相关[36]㊂吕娓娓研究发现条斑紫菜(P o r-p h y r a y e z o e n s i s)丝状体受到铜㊁镉胁迫时,铜㊁镉的浓度越高,M D A升高的幅度越大[37]㊂除了有机污染物胁迫,侯和胜等在进行高温对条斑紫菜的胁迫实验时也出现了相同的结果,温度越高,M D A的含量越高[38]㊂蔡恒江在研究U V-B辐射对孔石莼的影响时发现孔石莼在U V-B辐射处理第12天时M D A含量达到最高值,相对应的特定生长率显著低于对照组,说明M D A 含量上升可能会抑制机体的生长[39]㊂同样地,朱琳在研究U V-B辐射对龙须菜(G r a c i l a r i a l e m a n e i f o r m i s)的影响时也发现辐射强度的增加会导致M D A含量升高,并引起生长率下降[40]㊂本实验中,高浓度的柴油水溶性组分均会引起两种藻类的丙二醛含量上升,表明高浓度的柴油水溶性组分对其长时间的处理加剧了藻类细胞膜脂质过氧化的程度,对细胞结构造成了损伤㊂在96h高浓度组中藻体M D A含量大幅升高而相对生长率却下降,这表明细胞膜脂质过氧化程度过高会抑制藻体的生长㊂鼠尾藻在应对柴油水溶性组分处理时,藻体中的S O D活性在96h显著上升,C A T则在48h显著上升, P O D活性则变化不显著,总抗氧化能力在96h时达到最高值㊂总抗氧化能力的变化能够调节M D A的含量,保证藻体的正常生长㊂孔石莼在应对柴油水溶性组分的逆境环境时,也会激活体内的抗氧化防御系统,但是高浓度的长期污染会造成C A T酶的失活,总抗氧化能力下降,与之对应的相对生长率也出现最低值㊂这些结果表明,抗氧化酶能够调节藻体的损伤,但是超过某个阈值后,调节能力便会降低,同时出现相对生长率下降的现象㊂王晓艳在研究温度对裙带菜(U n d a r i a p i n-n a t i f i d a)幼孢子体的影响时也发现了类似的现象,裙带菜幼孢子体中的抗氧化酶在28ħ的高温处理下,活性均处于较低水平[41]㊂侯和胜在研究条斑紫菜丝状体对高温的响应时,也发现适宜的高温刺激可以促进抗氧化酶活性,但是温度在28~30ħ时抗氧化酶活性都处于较低水平[38]㊂赵宇瑛在研究机械损伤对黄瓜(C u c u m i s s a t i v u s)抗氧化系统的影响时也发现随着损伤时间的延长,抗氧化酶呈先升高后下降的趋势,与此相对应的是活性氧含量先升高后降低随后又升高的过程[42]㊂本研究中还发现不同的抗氧化酶对胁迫的响应程度不同㊂张莹等在研究硼胁迫对龙须菜生理的影响时表明体内的S O D与对照组无显著差异,C A T在受到影响后则会显著下降[43],崔相东研究发现裙带菜受到机械损伤后,三种抗氧化酶对机械损伤胁迫都具有强烈的反应[44],徐群在研究温度对鼠尾藻的影响时发现当温度为35ħ时,C A T活性会显著上升,S O D活性会显著下降[45]㊂鼠尾藻和孔石莼虽然对柴油水溶性组分表现出不同的耐受能力,但两种藻的生长和生化组分的变化趋势相同㊂低浓度的柴油水溶性组分能够被两种藻吸收利用,促进了藻体的生长㊁增加了叶绿素含量㊁光合作用速率升高㊂高浓度的柴油水溶性组分能够对藻体产生不可逆转的伤害,导致生长收到抑制㊁叶绿素含量减少㊁光合作用速率降低㊂而低浓度和高浓度的柴油水溶性组分均会造成两种藻的呼吸速率上升,以此抵御柴油水溶性组分所带来的影响㊂两种藻在应对柴油水溶性组分处理时所表现出的总抗氧化能力不同,鼠尾藻的总抗氧化能力随着柴油水溶性组分处理时间的增加而呈现增加的趋势,而孔石莼的抗氧化能力随着柴油水溶性组分处理时间的增加呈现先增加后降低的趋势,说明抗氧化酶只能在有限范围内调节柴油水溶性组分对藻体造成的损伤㊂4结语本文研究结果表明低浓度柴油水溶性组分对两种大型海藻的生长具有促进作用,高浓度则会产生抑制作用㊂藻体的抗氧化酶对柴油水溶性组分胁迫的响应也表现出了与浓度和作用时间的相关性㊂鼠尾藻与孔石莼均为潮间带大型海藻,所处生态位接近,鼠尾藻对高浓度的污染环境耐受性较强,适宜作为工具藻在污染早期开展生物修复,而孔石莼在低浓度条件下表现出更高的生长速度,可在修复后期与鼠尾藻协同应用㊂目前,在利用大型海藻修复石油烃污染的过程中还有许多未解释的问题,如大型海藻对石油烃的吸收方式,大型海藻对石油烃类物质的代谢通路,大型海藻对石油烃类物质基因水平上的响应等问题,这些将是今后利用大型藻类进行石油烃污染修复需要解决的问题㊂参考文献:[1] Y a n g BL,X i o n g DQ,J i a n g LL,e t a l.T h e c h r o n i c t o x i c e f f e c t o fw a t e r-a c c o m m o d a t e d f r a c t i o n s o f0#d i e s e l o i l o n s p l o x g e n e o f s e a u r c h i n[J].A p p l i e d M e c h a n i c sa n d M a t e r i a l s,2012,256-259: 1998-2003.[2]张军,王修林,韩秀荣,等.海洋浮游植物对0号柴油水溶组分的生物富集动力学模型[J].环境科学,2004(1):14-19.83Copyright©博看网. 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石油污染对植物种子发芽和早期生长的影响

长。因为其黏着力强且乳化能力低，容易黏附在土壤颗粒和根系表面，影响土壤的通透性，阻碍根系的
源，石油产品更是被广泛地应用在国民经济的各个环节。然而在石油的开采、运输、加工及储存过程中，
由于各种原因造成的环境污染也是十分严重的，尤
庆油田）开始采取铺膜防渗漏和污油回收等措施积极防止污染，但一些陈旧性污染、回收后的污泥处
理、各种原因造成的少量残留、石油副产品污染等问题仍亟待解决。石油对土壤的污染多集中于２０ｃｍ左右的表层，主要成分是多种烃类和其他有机物，除能少量挥发外，不能自由降解，有强烈的致癌和致畸作用，能通过食物链在动植物体内逐级富集和放大，危害极大【一。石油类物质进入土壤后，能直接影响植物生
石油污染对植物种子ຫໍສະໝຸດ 芽和早期生长的影响鞠世杰，刘昊，郑剑，慕庆峰
（黑龙江八一农垦大学农学院，黑龙江大庆１６３３１９）
摘
要：修复植物筛选是植物修复研究的重要组成部分。试验以５种植物种子为研究对象，观察其在不同石油污染模拟
ｔｉｎｃｔｏｒｉａｂｙｐｅｔｒｏｌｅｕｍｐｏｌｌｕｔａｎｔｓ．Ｔｈｅｙｄｉｓｐｌａｙｅｄｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｒｅｍｅｄｙｉｎｇｐｅｔｒｏｌｅｕｍｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｓｏｉｌｓ．

石油烃对海洋浮游植物生长的影响

2020.22科学技术创新结合虫情适当的增加杀虫次数。

2.3.2建立烟草甲虫的预防机制为了有效预防烟草甲虫出现，应注重从源头预防，保证生产过程深度清洁，选择合适的存储方式来避免烟草甲虫滋生；定期清理环境卫生和保养设备，适度减少杀虫剂用量；在车间电控柜底部、墙角、设备柱脚和墙壁开关缝隙等区域，重点清理，烟垢、杂质清理干净后使用无毒硅胶密封处理，减少积尘情况出现，破坏烟草甲虫繁殖环境；不同区域的物品柜深度清理，合并后适度减少物品柜数量，在现场集中保养来减少烟草甲虫滋生几率；对于车间的门窗出口位置，充分密封处理，可以规避各个区域发生虫情交叉感染现象；在容易滋生烟草甲虫的区域，设置驱虫板用于驱除烟草甲虫，分隔各个区域基础上，对各区域环境、设备深度清理，以期满足烟草甲虫预防要求。

综上所述，预控技术下的烟草甲虫防控模式，相较于以往的治理模式优势突出，坚持预防为主、治理为辅原则，发挥预控技术形成科学合理的烟草甲虫防控模式，梳理工作流程，及时发现异常和控制异常，避免虫情进一步恶化，提升烟草甲虫的防控效果，对于提升烟草企业经营效益提升具有重要作用。

参考文献[1]胡逸超，雷薇，孙建生，等.一株具有烟草甲幼虫毒杀作用苏云金芽孢杆菌的遗传多样性分析及cry 基因鉴定[J].西南农业学报，2020，33（2）：319-324.[2]吉莉，赵科文，吴梅苑，等.烟草甲虫在不同温湿度条件下的发育历期研究[J].现代园艺，2019（14）：9-10.[3]李华.充氮气调及低温储存对成品卷烟储存期烟草甲虫的防治效果[J].山西农经，2018（11）：65.[4]罗军，赵科文，张庆春，等.充氮气调及低温储存对成品卷烟储存期烟草甲虫的防治效果[J].安徽农业科学，2018，46（4）：166-168.[5]彭涛，刘师伟，谭琳，等.磷化氢-二氧化碳混合熏蒸对烟草甲虫卵灭杀效果研究（英文）[J].Agricultural Science &Technology ，2015，16（12）：2730-2732.石油烃对海洋浮游植物生长的影响赵菲1，2于洪贤2*（1、哈尔滨市水文水资源勘测总站，黑龙江哈尔滨1500002、东北林业大学野生动物与自然保护地学院，黑龙江哈尔滨150000）石油烃污染发生的主要原因是因为海上石油勘探、海上运输等行业的发展，船舶漏油、海岸工厂排放污水等，这些都是造成海洋石油烃污染的主要因素。

孔石莼多糖抗氧化作用的初步研究

孔石莼多糖抗氧化作用的初步研究
孙煜煊;常建波
【期刊名称】《现代农业科学》
【年(卷),期】2009(000)004
【摘要】研究了孔石莼的多糖提取物对O2-、OH·的清除作用、抑制脂质过氧化
作用、对油脂的抗氧化作用，结果表明，孔石莼多糖提取物对O2-、OH·具有直接清除作用，对亚油酸脂质过氧化反应有抑制作用，对油脂具有抗氧化作用，并且随着孔石莼多糖浓度的增加，其清除、抑制作用也增强，呈现明显的量效关系。

结论：孔石莼多糖有一定的抗氧化活性，其添加浓度与抗氧化活性呈正相关。

【总页数】3页(P6-8)
【作者】孙煜煊;常建波
【作者单位】集美大学水产学院,福建厦门361021;厦门市饲料检测与安全评价重
点实验室,福建厦门361021
【正文语种】中文
【中图分类】Q539
【相关文献】
1.孔石莼多糖铁复合物的合成及其性质研究 [J], 姜峻;牟谦;陈嘉;綦慧敏;张忠山
2.霍山石斛与铜皮石斛多糖体外抗氧化作用的初步研究 [J], 汪曙;魏凤娟;蔡永萍;
林毅
3.茶籽多糖对食用油脂抗氧化作用的初步研究 [J], 张勇;周丽明;郭庆
4.复合枸杞灵芝菌丝体多糖体外抗氧化作用初步研究 [J], 王宏勋;张雯;颜克亮;张
晓昱
5.不同磷酸根含量的孔石莼多糖体外抗氧化活性研究 [J], 蒋南芳;李炳玺;李伟达;刘效磊;王晓倩;常新涛;綦慧敏
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赤潮异弯藻对孔石莼生长及其某些生理特性的影响

收稿日期：2012-03-15修回日期：2012-04-01基金项目：海洋公益性行业科研专项（200805069）；国家自然科学基金（41171389）；辽宁省博士启动基金（20081076）；辽宁省教育厅高校科研项目（2009A174）作者简介：蔡恒江（1978—），男，副教授，博士，主要从事海洋生态学研究。

E-mail ：caihj@dlou．edu．cn 赤潮异弯藻对孔石莼生长及其某些生理特性的影响蔡恒江1，2，李博1，刘长发1，2（1大连海洋大学海洋科技与环境学院，辽宁大连116023；2辽宁省高校近岸海洋环境科学与技术重点实验室，辽宁大连116023）摘要：通过实验生态学和生物化学的方法，研究了赤潮异弯藻［Heterosigma akashiwo （Hada ）Hada ］对孔石莼（Ulva pertusa Kjellman ）生长及其叶绿素a （Chl-a ）含量、丙二醛（MDA ）含量、总抗氧化能力（T-AOC ）、过氧化氢酶（CAT ）活力、超氧化物歧化酶（SOD ）活力和谷胱甘肽过氧化酶（GPX ）活力的影响。

结果表明：孔石莼的克生作用会明显抑制赤潮异弯藻的生长，同时赤潮异弯藻也会抑制孔石莼的生长，且孔石莼生理生化特性对其有明显的响应。

赤潮异弯藻会使孔石莼CAT 活力和MDA 含量呈现升高的趋势；GPX 活力呈现下降的趋势；T-AOC 和T-SOD 活力呈现先下降后升高趋势；Chl-a 含量并无明显变化。

推测赤潮异弯藻克生作用诱导孔石莼产生活性氧自由基，是藻体受损伤的主要原因。

关键词：赤潮异弯藻；孔石莼；生理特征；活性氧自由基doi ：10．3969/j．issn．1007-9580．2012．02．004中图分类号：S968．41+1文献标识码：A 文章编号：1007-9580（2012）02-016-05赤潮是全球性的海洋生态灾害。

近年来，我国近岸海域赤潮发生的频率、波及范围和危害程度均呈上升趋势。

生态毒理学海水中的石油烃

生态毒理学海水中的石油烃海洋中的石油烃研究综述目录海洋中的石油烃研究综述 (1)1海洋中的石油烃污染现状 (3)1.1海洋中的石油烃来源 (3)1.2海洋中石油烃的组成 (3)1.3海洋中石油烃分布 (3)1.4海洋中石油烃的迁移转化 (4)1.5我国海洋中石油烃污染现状 (4)2海洋中石油烃污染的危害 (5)2.1 海洋中石油烃的生态危害 (5)2.2 海洋中石油烃的社会危害 (5)3 海洋中石油烃的检测方法 (6)3.1 紫外分光光度法 (6)3.2 重量法 (6)3.3 荧光分光光度法 (6)3.4 气相色谱法 (7)4石油烃污染物的风险评价及管理法规 (7)4.1石油烃污染的生态风险 (7)4.2石油烃污染的健康风险 (7)4.3海洋石油烃污染的风险控制 (7)4.4海水石油烃污染相关法律法规 (8)5.总结及展望 (8)6.参考文献 (9)摘要石油及其衍生产品在开采、炼制、贮存运输和使用过程中进入海洋环境而带来污染。

随着石油工业和海上船舶运输业的发展，海上溢油事故正在不断发生且还有加剧的趋势，海洋石油污染已引起各国的关注。

多年来，在中国海域和国际上，船舶溢油事故时有发生，而且发生的频率不断加快，这些事故给事故发生海域和沿岸造成了严重的环境污染和破坏。

本文就海洋中石油烃的污染现状、危害、检测方法等方面进行了系统的综述.关键词:石油烃;污染现状;危害;检测方法1海洋中的石油烃污染现状1.1海洋中的石油烃来源海洋中的石油污染按照其来源分为两种：天然源和人为源。

其中天然源主要是指含有岩层的自然渗漏和沉积岩层的侵蚀等，而石油污染物通过此途径进入海洋环境中的含量极低。

人为源主要包括陆上炼油厂污水排放、石油输送管道破裂、游轮事故、油井井喷、城市污水排放以及油轮洗舱水的排放等[1]。

海洋石油污染按石油输入类型可分为突发性输入和慢性长期输入。

突发性输入包括油轮事故和海上石油开采的泄漏与井喷事故，而慢性长期输入则有港口和船舶的作业含油污水排放、天然海底渗漏、含油沉积岩遭侵蚀后渗出、工业民用废水排放、含油废气沉降等[2]。

利用石油污染海水培养的小球藻和盐藻生化成分分析

利用石油污染海水培养的小球藻和盐藻生化成分分析摘要将小球藻和盐藻在含终浓度为0.5 μmol/L的石油培养液中连续培养21 d，利用血球计数法、紫外分光光度法、考马斯亮蓝法和蒽酮比色法，分别测定其生长曲线、叶绿素a含量、胞内外蛋白和胞内外多糖含量。

结果显示：2种微藻的细胞密度均在培养第21天达最大值，小球藻生长受到抑制，盐藻与对照组无明显差别；小球藻叶绿素a含量为对照组的48%，而盐藻叶绿素a含量却明显增加，培养第21天是对照组的2.5倍；2种微藻的胞内外蛋白含量均高于对照组，均在培养第10天达最大值，随后逐渐降低，但降低幅度和速度均低于对照组；2种微藻的胞内外多糖含量均低于对照组。

研究表明，在含低浓度石油的海水培养液中，小球藻和盐藻都具较好的耐受性，且盐藻比小球藻具有更强的生长能力，更适合在含低浓度石油的海水中大规模培养，具有更高的开发价值。

该研究为利用石油污染海水大规模培养微藻的藻种开发奠定了理论基础。

关键词小球藻；盐藻；石油污染；微藻培养；生化分析近年来，由于化石能源资源逐渐枯竭，原油价格几度上涨，世界各国都考虑用其他资源来代替石油，生物柴油作为一种可再生能源越来越受到重视[1]。

我国能源专家认为：可大量生产的可再生能源——生物柴油（biodiesel），对增加中国石油安全系数具有非常重要的战略意义[2]。

某些微藻（microalgae）因含有较高的油脂、易于大规模培养、单位面积产量比大豆等作物高等因素，被视为最新的甚至是唯一能实现可以替代石化柴油的生物柴油原料。

微藻又称单细胞藻类，是指只有在显微镜下才能观察和辨别其形态的微小藻类。

和高等植物相比，它们利用太阳能有更高的效率，将水和CO2等无机物质转化合成为有机物质[3]。

在20世纪80年代，美国等发达国家率先开展了微藻燃料研究，筛选了3 000余种微藻，从这3 000多种微藻中选取了300多种用于提取可燃性油脂，结果发现绿藻门中的海洋微藻油脂含量比其他门中的微藻高，具有开发的价值[4]。

海洋石油污染生物修复技术

海洋信息年2008生物修复是指生物催化降解环境污染物，减少或最终消除环境污染的受控或自发过程。

生物修复的基础是自然界中微生物对污染物的生物代谢作用，由于自然界生物修复过程一般较慢，难以推广应用，因此一般指人为条件下的生物修复。

20世纪90年代以来，生物修复技术在石油污染治理方面逐渐成为核心，取得了理论突破和重要成果[1]。

国内学者也做了大量工作，但主要为石油污染土壤和地下水的生物修复研究[2]，对海洋石油污染的生物修复研究相对较少。

海洋环境中石油的归宿和转化过程1石油烃在海洋环境中的转化过程和归宿受物理、化学和生物作用的影响。

低分子烃类（C15以下）受蒸发影响进入大气，在大气中受光化学氧化、降解后，能以原来的形式回到海洋的数量极少。

进入海洋的石油烃经海空输移，可减少一半以上。

海面油膜能进行光氧化作用，而表面海水中油组分也可进行光氧化降解，这种转化对于芳烃和杂环芳烃有较大作用。

生物转化可分为两个方面：一是海洋微生物对石油的降解作用；二是海洋生物对石油烃的摄取作用。

微生物降解石油烃的速率主要与微生物的种类、数量及其介质温度有关，与石油组分的性质和分散程度有关，分散程度大，降解速率大。

海洋植物也能富集和降解海水中的部分石油烃。

吸附和沉淀作用可使海洋中的石油进入沉积物中，途径常有3种：由于轻组分挥发和溶(1)解使残留物密度增加，从而生成固态小球下沉。

油膜或分散的油滴附着在悬浮颗粒上而沉降(2)到海底。

溶解的石油烃吸附在固体颗粒物上(3)沉积。

向海底迁移的速度主要与海水中固体颗粒物的沉积速度有关。

进入沉积物的石油烃又会受底泥微生物的降解。

然而，由于沉积物中缺氧，又不易受到阳光照射，降解速率比海水中慢。

石油降解微生物主要分布于近海、海湾等石油污染严重地区，这些地区石油降解微生物的数量多。

石油降解微生物的数量和石油的多少无关，而与细菌数量有关，即海水中养分多，则细菌数量多，相应地石油降解微生物也多。

因此，在远洋由于营养贫乏，石油降解微生物很少，一旦受污染，不易消除，后果严重。