人乳头瘤病毒16型E6蛋白真核表达载体pGADT7-E6的构建与鉴定
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第３ ５卷 第 １ 期
Ｖｏ ． ５ Ｎｏ． １３ １
南华 大 学学报 ・ 医学版 Ｊｕ ａ ｏ Ｎ ｎ ｕ ｎ ｅｓ ＴＭ ｄｃｌ ｄｔ ｎ ｏｒ ｌ ｆ ａｈ ａＵ ｉ ｒｔ（ ｅｉ ｉ ｎ ｖ ｉ ３ ａＥ ｉ ｏ
２０ ０７年 １ 月
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Ｊｎ ２ ０ ａ ．０７
人乳头瘤病毒 １ ６型 Ｅ 蛋 白真核表达载体 ６ ｐ Ａ 一Ｅ 的构建 与鉴定 Ｇ Ｄ７ ６
周 艺 ， 王 鑫 朱 翠 明 蒋 永林 粟盛梅 尹卫 国 万 艳平 ， ， ， ， ，
（． １南华 大学 病原 生物 学研 究所 ， 南 衡 阳 ４ １０ ； ． 华大 学 公 共卫 生学 院） 湖 ２０ １２ 南 摘 要 ：目的 构建 Ｈ Ｖ１ ６基 因的真 核 表达 载 体 ， Ｐ ６Ｅ 为在 酵母 菌 中表 达 以及进 一 步探 讨 Ｈ Ｖ１ Ｐ ６
Ｅ ６基 因与 宫颈癌发 生 的关 系奠 定前期 实验 基 础 。方 法 用 Ｐ Ｒ扩 增含 Ｅ ｏ Ｃ ｅＲ Ｉ和 Ｂｍ ａ Ｈ Ｉ酶切 位 点 的 Ｅ 基 因序列 ， ６ 双酶切 ｐ Ａ Ｔ 载 体与 Ｅ Ｇ Ｄ７ ６基 因 Ｐ Ｒ产 物 ， Ｃ 纯化 回 收后 ， 用连 接 酶将 二 者 连接 并转 化 大肠
关键 词 ： 人乳 头瘤病毒 ； Ｅ ６基 因； Ｅ ６蛋 白
中 图分类 号 ： ３ ３ Ｒ ７ 文献 标识 码 ： Ａ 文章编号 ：６ ２ ４４ ２０ ）１ ０ ０ —０ １７ —７ ４ （０ ７ Ｏ — ０ １ ３
Ｃｏ ｓｒ ｃｉ ｎ ａ ｄ Ｉ ｅ ｔ ｃ ｔ ｎ ｏ ｋ ｒ ｏ ｉ ｐ ｅｓｏ ｎ ｔｕ ｔ ｎ ｄ ｎ ｉ ａ ｉ ｆＥｕ ａ ｙ ｔ Ｅｘ ｒ ｓｉｎ ｏ ｉ ｆ ｏ ｃ Ｖｅ ｔ ｒ ｐ ｃｏ ＧＡＩＴ７— Ｅ６ ｏ Ｖ１ ６ Ｐ ｏ ｅｎ ） — ｆ ＨＰ ６ Ｅ ｒ ｔｉ
处 。Ｄ Ａ测序 结果 经与 Ｇｎ ａｋ登 录 的序 列 做 Ｂ ＡＴ分析 ， 示 重 组 质 粒 含 有 ４７ｂ Ｎ ｅＢｎ ＬＳ 显 ７ ｐ的 目的基 因片
段 ， 码框 正确 ， 读 无碱 基错 配和移码 突 变。 结论
Ｅ６。
成 功构 建 了 Ｈ Ｖ ６Ｅ Ｐ １ ６基 因真 核 表 达 载体 ｐ Ａ Ｔ 一 Ｇ Ｄ７
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杆菌 Ｊ ０， Ｍ１９ 筛选 阳 性 克 隆 ， 对 其 进 行 双 酶 切 和 测 序 鉴 定 ， 建 Ｈ Ｖ ６Ｅ 并 构 Ｐ １ ６基 因 的 真 核 表 达 载 体
ｐ Ａ Ｔ 一Ｅ 。结 果 Ｇ Ｄ７ ６ 双酶切 ｏ Ａ Ｔ Ｇ Ｄ ７一Ｅ ６后 ， 脂糖凝胶 电泳显 示 ２个 片段 ， 别在 约 ５０ｂ 琼 分 ０ ｐ与 ８０ｋ ． ｂ
Ｋｅ ｒ ｓ： ＨＰ Ｅ６ ｇ ｎ Ｅ６ ｐ ｏｅｎ ｙ ｗｏ ｄ Ｖ； ｅ ｅ； ｒｔｉ
人乳头瘤病毒 （ｕ ａ ａｉ ｍ ｖ ｓＨ Ｖ 属 ｈｍ ｎｐｐ ｌ ａ ｍ ， Ｐ ） ｌ ｉ ｏ
乳多空 病毒 科乳 头 瘤 病 毒属 ， 是一 种 嗜 上 皮组 织
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第３ ５卷 第 １ 期
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