百合组培实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除百合组培实验报告篇一：植物组织培养实验报告实验一植物组织培养实验报告一实验目的让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。

二实验原理植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA）和6–苄基氨基腺嘌呤（6–bA）的比例，决定了根和芽的分化。

三实验器材（一）试剂乙醇、IAA或2，4–D、hgcl2（或次氯酸钠）、6-苄基氨基腺嘌呤（6-bA）ms培养基（二）仪器设备培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等三实验步骤1.配制培养基（1）愈伤组织诱导培养基：ms培养基（蔗糖含量为10g/L，2,4–D含量为2mg/L，琼脂10g/L）。

（2）试验培养基：在ms培养基中按表33–1加入IAA和6–bA。

吲哚乙酸先用少量0.1mol/Lnaoh溶解，6-苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1mol/Lhcl溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。

2.培养基灭菌将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至ph5.8，趁热分装于100mL三角烧瓶中，每瓶约20mL。

待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121℃（1kg/cm2）下灭菌20min。

取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。

接种操作所需的一切用具（如长镊子、解剖刀、剪刀等）及灭菌水，需同时灭菌。

3.诱导产生愈伤组织（1）取健壮的玫瑰、菊花茎数段，每段约5cm长，于烧杯中用0.1%氯化汞（升汞）浸泡20min，取出用无菌水洗3～4次，置于无菌培养皿中，在接种箱中按无菌操作要求剥去外皮（接种箱事先用紫外灯灭菌30min），用解剖刀切成5mm厚的圆片（弃去开始一片和最后一片），用长镊子将它接种在诱导培养基上，注意圆片的切口朝向培养基，每瓶接种4片，接种后扎好瓶口。

（2）将已接入植物组织（外植体）的三角烧瓶，培养在25℃温室中，每星期检查l～2次，剔除材料已被杂菌污染的三角烧瓶，3～4周后产生愈伤组织。

（3）选取愈伤组织生长良好的三角烧瓶，用解剖刀将愈伤组织切下，转移到含有不同激素的试验培养基中（也可以连同原来的外植体一起转移），每瓶放1～2块，仍培养在25℃温室中，每周1～2次观察不同处理的三角烧瓶中，愈伤组织分化情况，直至长出根和芽。

长成的幼小植株即为“试管苗”，可移栽于花盆中。

四实验结果植物分生组织培养室指对植物体的分生组织进行离体培养。

因为时间有限及实验严密性等问题，大部分都失败了，但是仍然有小部分分化发育了出来。

已经证明了植物组织能够经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。

实验二三植物叶片与茎尖培养一实验目的离体叶培养是指包括幼叶片成熟叶片叶柄子叶叶鞘夜间组织叶原基等叶组织作为外植体的无菌培养。

由于叶片是植物进行光合作用的重要器官，又是某些植物的繁殖器官，因此离体培养在植物器官培养中占有重要地位。

二实验原理很多植物的叶具有强大的再生能力能从叶片产生不定牙，在离体培养基中，水稻小麦油菜番茄杨树菊花百合猕猴桃等百余种作物的叶组织已经再生并形成完整植株。

离体叶培养是指包括幼叶片成熟叶片叶柄子叶叶鞘夜间组织叶原基等叶组织作为外植体的无菌培养。

三实验材料要选用易培养成功的叶组织，如幼叶比成熟叶易培养，子叶比叶片易培养，个体发育的早期幼嫩叶片较成熟叶片分化能力较高。

例如，烟草成株期叶组织分化和再分化需要的时间较长，而且叶片膨大体积较大，多在刀口处形成大量的愈伤组织和分生细胞团。

四实验步骤1外植体的选取及预处理（1）外植体的选取选取生长健壮已发芽长势较好无病害的生姜根茎作为外植体。

（2）材料的预处理取带牙的枝条或鳞茎球茎，洗衣粉适量冲洗，然后用清洁剪刀剪取带牙部分，顶芽和腋芽大芽和小芽分开，继续用洗衣粉清洗10分钟，清洗时旭不停的晃动。

再用自来水冲洗干净，置空培养瓶备用。

超干净工作台无菌操作准备外植体消毒材料的处理接入培养基培养基瓶放入工作台中，将剥夺的材料分别用消毒的镊子放入培养瓶中，盖上瓶盖，置培养蓝内，写上培养时间操作人及培养品名，放入培养室培养。

整理工作清洁整理超干净工作台和实验室23456组织培养与设施栽培试验报告姓名：陆海洋学号：20XX011811班级：资环1124月14日篇二：组织培养实验报告植物组织培养实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置ms培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生植株的过程,加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。

有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。

（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。

营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。

三、实验器材高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。

四、实验材料豌豆种子五、实验药品药品、70%酒精、0.1%升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、84消毒液、蔗糖、琼脂等。

六、实验步骤（一）培养基母液的配制表1.ms培养基个成分的含量（单位：mg/l）表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数名称大量元素微量元素ca盐mg 盐fe盐有机肌醇激素扩大倍数5050505050100100100定容体积(ml)50050050050050020XX0XX0吸取毫升数/l2020202020XX105（注：吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积）表3.配制母液所需的药品及称取量（注：根据表1与表2计算各物质的称取量）药品名称nh4no3kno3kh2po4称取量（mg）41250475004250药品名称kina2mno4?2h2ocuso4?5h2o称取量（mg）20.756.250.625cacl2?2h2o11000cocl2?6h2o0.625mgso4?7 h2o9250肌醇2000feso4?4h2o695甘氨酸40na-edta932.5盐酸硫胺素8mnso4?7h2o557.5盐酸吡哆醇10znso4?7h2o215烟酸10h3bo3155（1）ms大量元素母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml存放于冰箱中备用。

名称重量（mg）名称重量(mg)nh4no3kno34125047500kh2po4cacl2·2h2o425011000（2）ms微量元素母液参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml存放于冰箱中备用。

名称kih3bo3mnso4·7h2oznso4·7h2o重量(mg)20.75155557.5215名称na2moo4·2h2ocuso4·5h2ococl2·6h2o重量(mg)6.250.6250.625（3）ms有机母液参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至200ml存放于冰箱中备用。

名称肌醇烟酸盐酸吡哆醇重量(mg)名称盐酸硫胺素甘氨酸重量(mg)20001010840（4）ms铁盐母液的配制参考表3称取一定量的下列药品用蒸馏水溶解，定容至500ml存放于冰箱中备用。

名称edta二钠重量(mg)932.5名称feso4·4h2o重量(mg)695（5）ms钙盐母液的配制参考表3称取11000mg的cacl2?2h2o用蒸馏水溶解定容至500ml，保存于冰箱备用。

（6）ms镁盐母液的配制参考表3称取9250mg的mgso4?7h2o用蒸馏水溶解定容至500ml，保存于冰箱备用。

（7）ms肌醇母液的配制参考表3称取2000mg的肌醇用蒸馏水溶解定容至200ml，保存于冰箱备用。

（8）ms激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的naoh溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。

一般取100mg配成100ml 母液。

（二）培养基的配制以配制1l的ms培养基为例进行如下操作：（1）取1l的大烧杯，加入适量的蒸馏水在电磁炉上加热至沸腾；（2）分别取（一）中配制的8种母液放入小烧杯中，然后加入，边加边搅拌；（3）称取30g蔗糖加入，边加边搅拌；（4）称取8g琼脂加入，边加边搅拌，知之琼脂粉溶解；（5）定容至1l，加入激素母液，用naoh调ph6.0左右；（6）将培养基分别分装于洗好的三角瓶中，塞上棉塞包上牛皮纸用绳子扎紧；（7）放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右；（8）灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。

（三）高压蒸汽灭菌锅的使用方法具体操作步骤：（1）高压锅放水至平把架；（2）把包扎好的培养基装入高压锅；（3）盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀；（4）然后接通电源；（5）压力计升至0.05mpa时，打开放气阀,排除冷空气(此步很重要)；（6）排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到0.11mpa 位置时，开始计算灭菌时间，具体方法：当压力锅指针升至0.12mpa时，关闭电源，待指针下降至0.11mpa时接通电源，不断重复此操作过程，维持20分钟；（7）灭菌时间达到20分钟后，除去电源，打开放气阀(注意要逐渐放气)待篇二：组培实验报告植物组织培实验报告学院：生命科学技术学院班级：10级生物技术植物班学号：20XX193042姓名：高学深养植物组织培养实验报告实验一母液的配制与保存一、实验目的1.学习母夜的配制方法和母液的保存方式。