应用酶联免疫吸附试验快速诊断猪囊虫、旋毛虫的研究
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试 验 研 究
应 用酶联 免疫 吸 附试 验快 速 诊 断猪 囊 虫
旋 毛 虫的研 究
乔 墨
（ 宁夏石 嘴 山市 动物 卫 生监 督所 ，石 嘴 山 ７ ３ ０ ５ ０ ０）
摘 要： 猪囊虫、 旋毛 虫病严重威胁着人体健康 ， 传统的检验 方法是屠 宰后剖检 、 片镜检 ， 出病猪销毁 处理 ， 压 检 造成
根据《 动物疫病检测方法 》 检测范 围， 对猪囊 虫散发区 ２ ％ 屠 宰猪进行病 原学调查 ， 检测猪囊 虫生猪 ５ ０头份 ， 毛虫 ６ 旋
５ ０头 份 ， ６ 共计 １ ２ 份 。 １０头 ４ 试 验 器 械 、 剂 准 备 试 ４１ 器 械 聚 苯 乙 烯 板 （０孔 或 ４ ． ２ ０孔 ） 定 量 加 样 器
置 ４ ｎ。 ｍｉ
宰前采用酶联免疫吸附试验 ， 宰后采用剖检 、 压片镜检 。
２ 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 原 理
酶联 吸附试 验是根据被 本病感染 的血 清中的抗体 能特
５ 加终止液 ， ． ５ 底物显色时 ， 每孔 加 １ 滴终止液 。
６ 结 果 判定
异性地吸附到经抗原致敏 的聚苯乙烯板上 ， 与酶标抗 体结 再
５ 试验方法 、 步骤 ５１ 采 ． ５２ 包 ． 血 被 对待宰生猪进行编号 ， 静脉采血 ２ Ｌ 静止 ， ｍ ， 血 取４ Ｌ Ｏ孑 聚苯 乙烯反应板 ，每次每孑 注 ０１ Ｌ ． ｍＬ 凝后取 出血清 ， 待检 。血清样与生猪编号一致 。 包被液， 静置 ２ ｉ， ｍ ｎ 重复 ３次 ， 甩干后加诊 断抗 原 ０１ Ｌ ５ ％ ．ｍ ，０ 恒温水浴 １ ， ４ ｈ 置 ℃冰箱过夜 。 ５３ 加 被检血样 ． 每孑 加 ０１ Ｌ ． ｍＬ被检血 样 ，每 头份 只加 １ 孔， 按照血清 样本编号依 次加入 ， 每块 反应板 留下 １ 孔加 阳 性对照血清 ， 孑 加 阴性对照血清 ， 孑 空 白， １Ｌ １Ｌ 室温下放置 ４～
了很 大积极损失 。应 用酶联免疫吸 附试验活体检验猪 囊 虫、 旋毛 虫病 ， 对病猪进行有效 治疗 ， 少经济损 失。 减
关键词 ： 生猪 ；猪 囊 虫 ；旋毛 虫 ；酶 联 免 疫 吸 附试 验
猪囊虫 、 毛虫病是一 种人畜 共患 的寄 生虫病 ， 发现 旋 从 至今 已有 １０多年历 史 ， ６ 开展检验 至今 已 １０多年 ， 至今 ３ 但
检、 漏检 。我们与兰州兽医研究所 寄生虫 病防治专家联系提
出采用 酶联免疫 吸附试验活体检验猪囊虫 、 旋毛虫 。
１ 试 验 方 法
５ 加酶 标抗 体 ， ． ４ 弃去 被样 血样 及 阳性 和 阴性对 照 血样 ， 加稀 释液 洗涤 ３次 ， 干后 加 酶标抗 体 ， 甩 每孔 ０１ Ｌ， ．ｍ 室温
８ ｉ ａ ｒ ｎｏ
猪囊 虫主要 寄生部位为咬肌 、 肌 、 腰 肩胛外侧肌等 。 毛 旋 虫主要 寄生部位 为膈肌 。 传统检验方 法是 宰后 剖检猪胴体 的 咬肌 、 腰肌 、 肩胛 外侧 肌检验猪囊虫 ； 采膈 肌角压片镜检旋毛 虫， 对检 出病猪胴体进 行无 害化处理 （ 高温 炼油 ）造 成 了很 ， 大 的经 济损失 ， 同时检验 费时 费事 ， 准确率 低 ， 易造 成误 容
（．ｍ 及其吸嘴 、 ０１ Ｌ） 酶标 检测仪 、 普通 滤纸 条 、 微量注射器 、 电
冰箱
死亡 ， 响了养猪业生产的健康发展。 影
近年来我国也经常发生人感染旋毛虫病 。 人感 染主要是 摄食 了生的或未熟透 的含有虫体包囊 的猪 肉 ， 或是食入被幼 虫污染的食 品 ， 引起 多种 病症 ， 可 严重 的导致 死亡 ， 对人体健 康带来 了威胁。 １８ 年 ｌ 如 ９６ ２月河南平顶山发生人体旋 毛虫 病流行 ， １８ 仅 ９ ７年 ３月就发病 １３例 。１９ ０ ９ ５年 １ ６日广 月 西德保县一村庄发 生一起旋毛虫病流 行 ， 发病 ５ 人 ， ３ 死亡 ４ 人， 给人体健康造成危害。因此猪囊虫 、 毛虫的检 验被列入 旋
肉品 卫 生 检 验 的 重要 检 验 项 目之 一 。
４２ 试剂 ．
抗原 ， 、 阴 阳性血清 ， 酶标抗体 （ 均有 兰州兽医研
Байду номын сангаас
究所提供 ） 。 包被液 ： 碳酸钠缓 冲液 ｐ ． Ｈ９ ５—９６ ． 稀释液 ： 磷酸盐缓 冲液 ｐ ． Ｈ７ ４
底 物 液 ： 酸 柠檬 酸缓 冲液 ｐ ５０ 磷 Ｈ． 终 止 液 ：ＭＨＳ ２ ２Ｏ 液
不 但 未 得 到 控 制 ， 且 发 病 范 围在 逐 渐 扩 大 ， 为 全 球 性 疾 而 成
该试 验操作 简便 、 敏感性 高 ， 目前 国内较先进 的检验方法 ， 是
属农 业 部 推广 的检 测 方 法 。
３ 试验数量
病， 给畜牧业及食 品工业带 来 了很 大的经济 损失 ， 严重危 害 着人体健康 。 猪 由于吞食生活泔水 、 吃死老 鼠、 吃人的粪便 、 吃某 些昆 虫等引起感染囊虫 、 毛虫 病。猪患囊虫病时表现 为营养不 旋 良， 生长发育受 阻 ， 贫血 ， 肿等 ， 水 如囊尾 蚴侵害肺 及喉 时则 出现呼吸困难 ， 声音嘶 哑 ， 吞咽 困难 ， 寄生在眼 内可使视 觉障 碍甚至 失明 ； 寄生 在大脑时 ， 出现癫 痫 ， 急性脑 炎 ， 甚至 突然
合， 加入底物 后 ， 呈现颜色反应 ， 根据颜色 的深浅作 出判定 。
６１ 眼观判定 ．
有色 ， 阳性 ； 色 ， 无 阴性。
・ 目圜翟蓄暇嫡 Ｏ ・ ｏ
２ ０ 年 第 ４期 ０９
试 验 研 究
鸡传 染牲 支笺管 炎病 毒 地方流行株的分 离鉴定及免疫试验
吉文汇，闫 芳 ，李绪英，赵宇军，刘 娟 ，刘风波 ，吴 倩 ， 家琰 ，化丽珍 任
（ 山西农 业大 学动物 科技 学院 ，太 谷 ０ ０ ０ ） ３ ８ １
摘 要 ： 山西疑似 Ｉ 从 Ｂ的病料 中， 离到 １ ＩＶ分 离株 ， 分 株 Ｂ 该分 离株在 电镜下可见到直径为 ６ — ２ ｎ 有 囊膜及 纤 ０ １０ ｍ，
应 用酶联 免疫 吸 附试 验快 速 诊 断猪 囊 虫
旋 毛 虫的研 究
乔 墨
（ 宁夏石 嘴 山市 动物 卫 生监 督所 ，石 嘴 山 ７ ３ ０ ５ ０ ０）
摘 要： 猪囊虫、 旋毛 虫病严重威胁着人体健康 ， 传统的检验 方法是屠 宰后剖检 、 片镜检 ， 出病猪销毁 处理 ， 压 检 造成
根据《 动物疫病检测方法 》 检测范 围， 对猪囊 虫散发区 ２ ％ 屠 宰猪进行病 原学调查 ， 检测猪囊 虫生猪 ５ ０头份 ， 毛虫 ６ 旋
５ ０头 份 ， ６ 共计 １ ２ 份 。 １０头 ４ 试 验 器 械 、 剂 准 备 试 ４１ 器 械 聚 苯 乙 烯 板 （０孔 或 ４ ． ２ ０孔 ） 定 量 加 样 器
置 ４ ｎ。 ｍｉ
宰前采用酶联免疫吸附试验 ， 宰后采用剖检 、 压片镜检 。
２ 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 原 理
酶联 吸附试 验是根据被 本病感染 的血 清中的抗体 能特
５ 加终止液 ， ． ５ 底物显色时 ， 每孔 加 １ 滴终止液 。
６ 结 果 判定
异性地吸附到经抗原致敏 的聚苯乙烯板上 ， 与酶标抗 体结 再
５ 试验方法 、 步骤 ５１ 采 ． ５２ 包 ． 血 被 对待宰生猪进行编号 ， 静脉采血 ２ Ｌ 静止 ， ｍ ， 血 取４ Ｌ Ｏ孑 聚苯 乙烯反应板 ，每次每孑 注 ０１ Ｌ ． ｍＬ 凝后取 出血清 ， 待检 。血清样与生猪编号一致 。 包被液， 静置 ２ ｉ， ｍ ｎ 重复 ３次 ， 甩干后加诊 断抗 原 ０１ Ｌ ５ ％ ．ｍ ，０ 恒温水浴 １ ， ４ ｈ 置 ℃冰箱过夜 。 ５３ 加 被检血样 ． 每孑 加 ０１ Ｌ ． ｍＬ被检血 样 ，每 头份 只加 １ 孔， 按照血清 样本编号依 次加入 ， 每块 反应板 留下 １ 孔加 阳 性对照血清 ， 孑 加 阴性对照血清 ， 孑 空 白， １Ｌ １Ｌ 室温下放置 ４～
了很 大积极损失 。应 用酶联免疫吸 附试验活体检验猪 囊 虫、 旋毛 虫病 ， 对病猪进行有效 治疗 ， 少经济损 失。 减
关键词 ： 生猪 ；猪 囊 虫 ；旋毛 虫 ；酶 联 免 疫 吸 附试 验
猪囊虫 、 毛虫病是一 种人畜 共患 的寄 生虫病 ， 发现 旋 从 至今 已有 １０多年历 史 ， ６ 开展检验 至今 已 １０多年 ， 至今 ３ 但
检、 漏检 。我们与兰州兽医研究所 寄生虫 病防治专家联系提
出采用 酶联免疫 吸附试验活体检验猪囊虫 、 旋毛虫 。
１ 试 验 方 法
５ 加酶 标抗 体 ， ． ４ 弃去 被样 血样 及 阳性 和 阴性对 照 血样 ， 加稀 释液 洗涤 ３次 ， 干后 加 酶标抗 体 ， 甩 每孔 ０１ Ｌ， ．ｍ 室温
８ ｉ ａ ｒ ｎｏ
猪囊 虫主要 寄生部位为咬肌 、 肌 、 腰 肩胛外侧肌等 。 毛 旋 虫主要 寄生部位 为膈肌 。 传统检验方 法是 宰后 剖检猪胴体 的 咬肌 、 腰肌 、 肩胛 外侧 肌检验猪囊虫 ； 采膈 肌角压片镜检旋毛 虫， 对检 出病猪胴体进 行无 害化处理 （ 高温 炼油 ）造 成 了很 ， 大 的经 济损失 ， 同时检验 费时 费事 ， 准确率 低 ， 易造 成误 容
（．ｍ 及其吸嘴 、 ０１ Ｌ） 酶标 检测仪 、 普通 滤纸 条 、 微量注射器 、 电
冰箱
死亡 ， 响了养猪业生产的健康发展。 影
近年来我国也经常发生人感染旋毛虫病 。 人感 染主要是 摄食 了生的或未熟透 的含有虫体包囊 的猪 肉 ， 或是食入被幼 虫污染的食 品 ， 引起 多种 病症 ， 可 严重 的导致 死亡 ， 对人体健 康带来 了威胁。 １８ 年 ｌ 如 ９６ ２月河南平顶山发生人体旋 毛虫 病流行 ， １８ 仅 ９ ７年 ３月就发病 １３例 。１９ ０ ９ ５年 １ ６日广 月 西德保县一村庄发 生一起旋毛虫病流 行 ， 发病 ５ 人 ， ３ 死亡 ４ 人， 给人体健康造成危害。因此猪囊虫 、 毛虫的检 验被列入 旋
肉品 卫 生 检 验 的 重要 检 验 项 目之 一 。
４２ 试剂 ．
抗原 ， 、 阴 阳性血清 ， 酶标抗体 （ 均有 兰州兽医研
Байду номын сангаас
究所提供 ） 。 包被液 ： 碳酸钠缓 冲液 ｐ ． Ｈ９ ５—９６ ． 稀释液 ： 磷酸盐缓 冲液 ｐ ． Ｈ７ ４
底 物 液 ： 酸 柠檬 酸缓 冲液 ｐ ５０ 磷 Ｈ． 终 止 液 ：ＭＨＳ ２ ２Ｏ 液
不 但 未 得 到 控 制 ， 且 发 病 范 围在 逐 渐 扩 大 ， 为 全 球 性 疾 而 成
该试 验操作 简便 、 敏感性 高 ， 目前 国内较先进 的检验方法 ， 是
属农 业 部 推广 的检 测 方 法 。
３ 试验数量
病， 给畜牧业及食 品工业带 来 了很 大的经济 损失 ， 严重危 害 着人体健康 。 猪 由于吞食生活泔水 、 吃死老 鼠、 吃人的粪便 、 吃某 些昆 虫等引起感染囊虫 、 毛虫 病。猪患囊虫病时表现 为营养不 旋 良， 生长发育受 阻 ， 贫血 ， 肿等 ， 水 如囊尾 蚴侵害肺 及喉 时则 出现呼吸困难 ， 声音嘶 哑 ， 吞咽 困难 ， 寄生在眼 内可使视 觉障 碍甚至 失明 ； 寄生 在大脑时 ， 出现癫 痫 ， 急性脑 炎 ， 甚至 突然
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６１ 眼观判定 ．
有色 ， 阳性 ； 色 ， 无 阴性。
・ 目圜翟蓄暇嫡 Ｏ ・ ｏ
２ ０ 年 第 ４期 ０９
试 验 研 究
鸡传 染牲 支笺管 炎病 毒 地方流行株的分 离鉴定及免疫试验
吉文汇，闫 芳 ，李绪英，赵宇军，刘 娟 ，刘风波 ，吴 倩 ， 家琰 ，化丽珍 任
（ 山西农 业大 学动物 科技 学院 ，太 谷 ０ ０ ０ ） ３ ８ １
摘 要 ： 山西疑似 Ｉ 从 Ｂ的病料 中， 离到 １ ＩＶ分 离株 ， 分 株 Ｂ 该分 离株在 电镜下可见到直径为 ６ — ２ ｎ 有 囊膜及 纤 ０ １０ ｍ，