组培实验室设计
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组培实验室设计原则:
保证无菌操作,达到工 作方便,防止污染。
组培实验室组成:
• 标准组织培养室包括: • 洗涤室(区)
▼
• 制备室(区) • 灭菌室(区) • 储放室(区) • 操作室(区)
可以根据自 己的实际条 件进行合并
• 培养室(区)
• 观察室(区)
• 药品室(区)
❖ 准备室:完成所使用的各种药品的贮备、称 量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备: 药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、 天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配 制用玻璃仪器.
超 静 工 作 台
酸 度 计
培养室:
❖ 培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可 根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。 其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养 架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火的性能。主要设 备:培养架(控温控光控湿)、摇床、培养箱、紫外光 源等。培养材料放在由金属制成培养架上培养。培养架 一般设5层,最低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm 左右,培养架高1.7m左右。其长度根据日光灯长度而 设计, 如采用40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽 度一般为60cm。培养室最重要的因子是温度,一般保持 在20—27℃左右,具备产热装置,并安装窗式或立式空 调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温 度,最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒 定,相对湿度以保持在70%~80%为好,可安装加湿器。 控制光照时间可安装定时开关钟,一般需要每天光照1016h,也有的需要连续照明。现代组培实验室大多设计 为采用天然太阳光照作为主要能源,这样不但可以节省 能源,而且组培苗接受太阳光生长良好,驯化易成活。
第一章
植物组织培养实验室构建
第一节:商业性组织培养实验室和小 工厂的设计与主要设备
主要内容: ❖实验室的设计 ❖仪器设备和器皿用具
一、实验室设计
在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最 基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有 房屋,或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目 的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限 制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时,应按组织培 养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。植 物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条 件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温 度、光照、湿度等培养条件。
2 甘氨酸
NH2.CH2.COOH 2
3 盐酸硫胺素 C12H17CLN4OS. 0.1 HCL
4 盐酸吡哆醇 C8H11O3N.HCL 0.5
5 烟酸
NC5H4COOH 0.5
植物激素(植物生长调节剂)
❖ 1、生长素类:IAA,IBA,2,4-D,NAA等。 ❖ 2、细胞分裂素类:KT,6-BA,ZT等。 ❖ 3、赤霉素类;GA1-GA4,GA7,GA9-
接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天 花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配 置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2盏 紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空 调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界 空气对流。
接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作 室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。 缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
GA16,GA24,GA25等 ❖ 4、脱落酸:ABA ❖ 5、乙烯 ❖ 6、PH值:5.6-5.8
培养基的种类、配方及其特点
❖ 按性质分 ❖ 基本培养基 :MS、MT(Murashige and
Tucher)White
❖ 完全培养基 基本培养基+ 其它成分(激素、 有机物质等)
❖按状态分
固体培养基;液体培养基。 ❖ 按作用分:诱导培养基;增值培养基、
第二节:培养基及其配制
主要内容: ❖ 培养基的成分 ❖ 培养基的种类、配方及其特点 ❖ 培养基的配制
1、培养基母液的配Biblioteka Baidu 2、培养基的配制
一、培养基的成分
❖ 大量元素 ❖ 微量元素 ❖ 氨基酸和有机附加物 ❖ 植物激素(植物生长调节剂) ❖ 维生素类 ❖ 凝固剂
大量元素(以Ms培养基为例)
序号 化学式
❖ 洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、 保存、培养基的灭菌等。主要设备:水池、 操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱) 等。
卧 式 灭 菌 锅
❖ 无菌操作室(接种室):
主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、 试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行 无菌操作的技术程序。主要设备:紫外光源、超净 工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、 剪刀、解剖刀、接种针)等。
生根培养基。 ❖ 按培养过程分:初代培养基、继代培养
基。
培养基配方及特点
化学名称
用量mg/l
1
KNO3
2
NH4NO3
硝酸钾 硝酸铵
1900 1650
3
KH2PO4
磷酸二氢钾 170
4
MgSO4.7H2O 硫酸镁
370
5
CaCL2.4H2O
二氯化钙
440
微量元素(以MS培养基为例)
序号 化学名称
化学式
用量(mg/l)
1 碘化钾 2 硼酸 3 硫酸锰 4 硫酸锌 5 钼酸钠 6 硫酸铜 7 氯化钾
细胞学实验室
该室用于对培养物的观察分析与培养物的 计数等。主要设备:双筒实体显微镜、显微 镜、倒置显微镜等。小型仪器设备有:分注 器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电 炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心 机等。
显微镜
显微镜
玻璃器皿及用具
❖玻璃器皿
培养用的:试管、三角瓶、培养皿等; 显微镜下观察用的:细胞微室、载玻片、培养 皿等。 ❖ 微孔过滤器(细胞过滤器) :激素用于灭菌。 ❖ 一般用石棉滤膜
KI
H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCL2.6H2O
0.83 6.2 22.3 8.6 0.25 0.025 0.025
氨基酸和有机附加物(以MS培养基为例)
序 化学名称 化学式 号
用量 (mg/l)
1 肌醇
C6H12O6.2H2O 100