组培实验室的设计 PPT
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组织培养实验室仪器及操作技术ppt课件
10
二、仪器与设备
1、基本设备 冰箱、电炉、酸度计、纯水器、
天平、培养基分装器、搅拌器等。
精选ppt课件2021
11
冰箱 电炉
酸度计
精选ppt课件2021
12
纯 天水 平器
精选ppt课件2021
13
搅拌器
培养基分装器
精选ppt课件2021
14
2、灭菌设备
蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、 过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。
精选ppt课件2021
39
5、用沾有70%—75%酒精的纱布擦拭盛培养基 的培养器皿,放进工作台。
6、把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95%的 酒精中,再在火焰上消毒,放在器械架上。
7、在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。
8、打开瓶口,用火焰烧瓶口,转动瓶口使瓶口 各部分都烧到。
精选ppt课件2021
200
800
精选ppt课件2021
30
五、灭菌技术
1、灭菌方法
物理方法: 物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理
除菌、过滤、离心、沉淀等
化学方法: 消毒剂、抗菌素灭菌
精选ppt课件2021
31
2、灭菌
(1)培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法 压力在9.8×104—10.8×104Pa 温度在121℃ 灭菌20—30min
溴水
1~2
过氧化氢 10~12
升汞
0.1~1
酒精
70~75
抗生素 4~5(mg/L
硝酸银
1
易 易 易 易 最易 较难 易 中 较难
5~30 5~30 5~30 2~10 5~15 2~10 0.2~2 30~60 5~30
组织培养实验室仪器及操作技术ppt课件
1、灭菌方法
物理方法: 物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理
除菌、过滤、离心、沉淀等 化学方法:
消毒剂、抗菌素灭菌
31
2、灭菌
(1)培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法 压力在9.8×104—10.8×104Pa 温度在121℃ 灭菌20—30min
(2)玻璃器皿灭菌:蒸汽高压消毒灭菌 干热消毒灭菌
32
饱和蒸汽压力与其对应的温度
在植物中含量差别很大,同一元素在植物不同 时期、不同条件下含量也不同。
46
根据植物体内含量多少,可把这些元素分为 ※大量营养元素:占干物质重量的0.1%以上;
C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等9种 ※微量营养元素:占干物质重量的0.1%以下
有的只含0.1mg/kg Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种
饱和蒸汽压力
kg/cm2
1b/m2
温度(℃)
饱和蒸汽压力
kg/cm2
1b/m2
温度(℃)
0.0 0.141 0.281 0.442 0.563 0.703 0.844 0.984
0
100
2
103.6
4
106.9
6
109.8
8Leabharlann 112.610 115.2
12 117.6
14 119.9
15
121.0
1.055
缺点: ◆没有选择性
10、抗生素 ◆防止外植体内生菌造成的污染
活性炭
62
11、生长素类 ◆促进细胞伸长和分裂 ◆促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长
休眠、顶端优势、单性结实 ◆诱导愈伤组织形成 ◆溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中,后者
物理方法: 物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理
除菌、过滤、离心、沉淀等 化学方法:
消毒剂、抗菌素灭菌
31
2、灭菌
(1)培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法 压力在9.8×104—10.8×104Pa 温度在121℃ 灭菌20—30min
(2)玻璃器皿灭菌:蒸汽高压消毒灭菌 干热消毒灭菌
32
饱和蒸汽压力与其对应的温度
在植物中含量差别很大,同一元素在植物不同 时期、不同条件下含量也不同。
46
根据植物体内含量多少,可把这些元素分为 ※大量营养元素:占干物质重量的0.1%以上;
C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等9种 ※微量营养元素:占干物质重量的0.1%以下
有的只含0.1mg/kg Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种
饱和蒸汽压力
kg/cm2
1b/m2
温度(℃)
饱和蒸汽压力
kg/cm2
1b/m2
温度(℃)
0.0 0.141 0.281 0.442 0.563 0.703 0.844 0.984
0
100
2
103.6
4
106.9
6
109.8
8Leabharlann 112.610 115.2
12 117.6
14 119.9
15
121.0
1.055
缺点: ◆没有选择性
10、抗生素 ◆防止外植体内生菌造成的污染
活性炭
62
11、生长素类 ◆促进细胞伸长和分裂 ◆促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长
休眠、顶端优势、单性结实 ◆诱导愈伤组织形成 ◆溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中,后者
植物组培快繁实验室学时优秀课件
设备:无菌操作室安装有紫外 灯和空调,工作台和搁架,还有超 净工作台和整套灭菌接种仪器、药 品等。
3、培养室
功能:对接种到培养瓶等器皿中 的植物离体材料进行控制条件下的培 养。
要求:约需10-20平方米左右。应 保持清洁和适度干燥;安装排风窗和 换气扇等培养室的换气装置;配置适 宜的培养架,并安装日光灯照明。
尘建筑材料。 – 实验室内安装的洗手池、下水道的位置要适宜,不得对
培养带来污染。 – 实验室应有消防火栓、报警装置等安全设施。
+ 组织培养实验室布局的总体要求
+
功能齐全
+
布局合理
+
环境清洁
+
易于灭菌
植物组织培养实验室设计实例
基本实验室布局平面图
搁 水槽 架
搁
实
4.0m 架
验
台
电 炉
门
准备室 4.5m
+ 为了保证玻璃器皿的洁净干燥,还需要电热鼓风干燥 箱(烘箱) 。
贮存室
+ 贮存室用以对各类器皿和用具的存放和保管。
+ 植物组织培养需要较多的玻璃器皿,而且生产中使用 数量有一定的周期性,宜用专门房间和专门货架、货 柜等贮存,以免破损、脏污。
化学实验室或培养基配制室
+ 化学实验室主要用来完成培养基配制的各个环节的工作,如 药品的称量、溶解、培养基的配制和分装等。
+ 要有较大的平面工作台或实验台,低温冰箱或冰柜,各种橱 架、药品柜及化学药品,各种型号玻璃器皿或其他器皿,各 种型号的天平和称量器具,酸度计和搅拌器,蒸馏水器、离 子交换系统或其他过滤渗透系统。
灭菌室
+ 灭菌室用于对培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。
3、培养室
功能:对接种到培养瓶等器皿中 的植物离体材料进行控制条件下的培 养。
要求:约需10-20平方米左右。应 保持清洁和适度干燥;安装排风窗和 换气扇等培养室的换气装置;配置适 宜的培养架,并安装日光灯照明。
尘建筑材料。 – 实验室内安装的洗手池、下水道的位置要适宜,不得对
培养带来污染。 – 实验室应有消防火栓、报警装置等安全设施。
+ 组织培养实验室布局的总体要求
+
功能齐全
+
布局合理
+
环境清洁
+
易于灭菌
植物组织培养实验室设计实例
基本实验室布局平面图
搁 水槽 架
搁
实
4.0m 架
验
台
电 炉
门
准备室 4.5m
+ 为了保证玻璃器皿的洁净干燥,还需要电热鼓风干燥 箱(烘箱) 。
贮存室
+ 贮存室用以对各类器皿和用具的存放和保管。
+ 植物组织培养需要较多的玻璃器皿,而且生产中使用 数量有一定的周期性,宜用专门房间和专门货架、货 柜等贮存,以免破损、脏污。
化学实验室或培养基配制室
+ 化学实验室主要用来完成培养基配制的各个环节的工作,如 药品的称量、溶解、培养基的配制和分装等。
+ 要有较大的平面工作台或实验台,低温冰箱或冰柜,各种橱 架、药品柜及化学药品,各种型号玻璃器皿或其他器皿,各 种型号的天平和称量器具,酸度计和搅拌器,蒸馏水器、离 子交换系统或其他过滤渗透系统。
灭菌室
+ 灭菌室用于对培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。
组织培养实验室设计说明63页PPT
组织培养实验室设计说明
21、静念园林好,人间良可辞。 22、步步寻往迹,有处特依依。 23、望云惭高鸟,临木愧游鱼。 24、结庐在人境,而无车马喧;问君 何能尔 ?心远 地自偏 。 25、人生归有道,衣食固其端。
56、书不仅是生活,而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次,但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许,为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处, 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
拉
60、生活的道路一旦选定,就要勇敢地 走到底 ,决不 回头。 ——左
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
21、静念园林好,人间良可辞。 22、步步寻往迹,有处特依依。 23、望云惭高鸟,临木愧游鱼。 24、结庐在人境,而无车马喧;问君 何能尔 ?心远 地自偏 。 25、人生归有道,衣食固其端。
56、书不仅是生活,而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次,但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许,为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处, 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
拉
60、生活的道路一旦选定,就要勇敢地 走到底 ,决不 回头。 ——左
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
11商业性组织培养实验室的设计与主要设备.pptx
(五)、气体(必要条件)
2.培养基内氧气充足与否与培养基的种 类和培养方式有关。 ◆固体培养基可加进活性炭来增加通气 度,以利于发根。 ◆液体培养时,可考虑采取振荡培养的 方式,以增加通气性。
(六)、渗透压
1、1-2个大气压促进生长。 2、2个大气压以上就对生长有阻碍作用, 5-6个大气压生长就完全停止,6个大气 压细胞就不能生存。
• 14、Thank you very much for taking me with you on that splendid outing to London. It was the first time that I had seen the Tower or any of the other fam ous sights. If I'd gone alone, I couldn't have seen nearly as much, because I wouldn't have known my way about.
玻璃棒、酒精灯
2、器械用具
(1)、镊子类:接种、转 移材料或分离茎尖用,以 100ml三角瓶为培养瓶, 可用20cm长。
2、器械用具
(2)、剪刀类:医用剪刀, 剪切割外植体或继代培养 时分离材料。
(3)、解剖刀:切割芽、 茎段、愈伤组织等,继代 时分离材料,也可用于微 小外植体的接种等。
(4)、解剖针:转移细胞或 愈伤组织,微茎尖分离及 接种等。
(四)、pH值
1.培养基适宜PH值5.0-6.5,一般为5.6-5.8; 可用0.1M的NaOH和HCl溶液进行调整。
2.pH值影响培养基的硬度。
PH>6.5 PH<5.0
培养基会变硬 培养基不易凝固
组织培养实验室设计说明63页PPT
23、一切节省,归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰,决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
25、学习是劳动,是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢!Biblioteka 组织培养实验室设计说明51、山气日夕佳,飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣,泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿,帝乡不可期。 54、雄发指危冠,猛气冲长缨。 55、土地平旷,屋舍俨然,有良田美 池桑竹 之属, 阡陌交 通,鸡 犬相闻 。
21、要知道对好事的称颂过于夸大,也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。——韩愈
25、学习是劳动,是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢!Biblioteka 组织培养实验室设计说明51、山气日夕佳,飞鸟相与还。 52、木欣欣以向荣,泉涓涓而始流。
53、富贵非吾愿,帝乡不可期。 54、雄发指危冠,猛气冲长缨。 55、土地平旷,屋舍俨然,有良田美 池桑竹 之属, 阡陌交 通,鸡 犬相闻 。
21、要知道对好事的称颂过于夸大,也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。——韩愈
植物组培实验室设置条件及器具.39页PPT
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人,越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智,自知者明。胜人者有力,自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
植物组培实验室设置条件及器具.
21、没有人陪你走一辈子,所以你要 适应孤 独,没 有人会 帮你一 辈子, 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候,留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运,首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首,因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿. 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ,它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ,以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
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基、生根培养基。 • 按培养过程分:初代培养基、继代
培养基。
大家好
22
培养基配方及特点
• 参见课本p17~18
大家好
23
培养基的配制
• 母液(储备液)的配制与保存 • 培养基配制
大家好
24
Ms母液(储备液)的配制与保存
大家好25大家好来自26培养基的配制
1、在洁净的不锈钢锅里放入750ml蒸馏水,加入 所需要的琼脂和糖,加热熔化。
第一章
植物组织培养实验室构建
大家好
1
第一节:商业性组织培养实验 室和小工厂的设计与主要设备
主要内容: • 实验室的设计 • 仪器设备和器皿用具
大家好
2
一、实验室设计
在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要 哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制 宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的 大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的, 实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计 组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免 某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是 在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需 要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温 度、光照、湿度等培养条件。
• 准备室:完成所使用的各种药品的贮备、称 量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备: 药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、 天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配 制用玻璃仪器.
• 洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、 保存、培养基的灭菌等。主要设备:水池、 操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱) 等。
大家好
6
卧 式 灭 菌 锅
大家好
7
• 无菌操作室(接种室):
主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、 试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行 无菌操作的技术程序。主要设备:紫外光源、超净 工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、 剪刀、解剖刀、接种针)等。
接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天 花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配 置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
大家好
3
组培实验室设计原则:
保证无菌操作,达到工 作方便,防止污染。
大家好
4
组培实验室组成:
• 标准组织培养室包括: • 洗涤室(区)
▼
• 制备室(区) • 灭菌室(区) • 储放室(区) • 操作室(区)
可以根据自 己的实际条 件进行合并
• 培养室(区)
• 观察室(区)
• 药品室(区)
大家好
5
细胞学实验室
该室用于对培养物的观察分析与培养物的 计数等。主要设备:双筒实体显微镜、显微 镜、倒置显微镜等。小型仪器设备有:分注 器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电 炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心 机等。
大家好
12
显微镜
显微镜
大家好
13
玻璃器皿及用具
• 玻璃器皿
培养用的:试管、三角瓶、培养皿等;
大家好
16
大量元素(以Ms培养基为 例)
大家好
17
微量元素(以MS培养基为 例)
大家好
18
氨基酸和有机附加物(以MS培养 基为例)
大家好
19
植物激素(植物生长调节 剂)
• 1、生长素类:IAA,IBA,2,4-D, NAA等。
• 2、细胞分裂素类:KT,6-BA,ZT等。
• 3、赤霉素类;GA1-GA4,GA7, GA9-GA16,GA24,GA25等
显微镜下观察用的:细胞微室、载玻片、 培养皿等。
• 微孔过滤器(细胞过滤器) :激素用于 灭菌。
• 一般用石棉滤膜
大家好
14
第二节:培养基及其配制
主要内容: • 培养基的成分 • 培养基的种类、配方及其特点 • 培养基的配制
1、培养基母液的配制 2、培养基的配制
大家好
15
一、培养基的成分
• 大量元素 • 微量元素 • 氨基酸和有机附加物 • 植物激素(植物生长调节剂) • 维生素类 • 凝固剂
要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2盏 紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空 调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界 空气对流。
接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作 室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。 缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
大家好
8
超 静 工 作 台
大家好
9
酸 度 计
大家好
10
培养室:
• 培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可 根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。 其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养 架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火的性能。主要设 备:培养架(控温控光控湿)、摇床、培养箱、紫外光 源等。培养材料放在由金属制成培养架上培养。培养架 一般设5层,最低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm 左右,培养架高1.7m左右。其长度根据日光灯长度而 设计, 如采用40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽 度一般为60cm。培养室最重要的因子是温度,一般保持 在20—27℃左右,具备产热装置,并安装窗式或立式空 调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温 度,最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒 定,相对湿度以保持在70%~80%为好,可安装加湿器。 控制光照时间可安装定时开关钟,一般需要每天光照1016h,也有的需要连续照明。现代组培实验室大多设计 为采用天然太阳光照作为主要能源,这样不但可以节省 能源,而且组培苗接受太阳光大家生好 长良好,驯化易成活11 。
2、加入储备液1-40ml,储备液2、3、4 各10ml,按需要量加入植物激素。
3、用蒸馏水定容到1L。
4、调pH值。PH一般5.8
5、培养基的分装。
6、包扎。
7、培养基的高压灭菌。
大家好
27
培养基的灭菌
• 高温高压蒸汽灭菌:121℃,1.1Kg/c㎡, 15-20芬,时间过长,培养基成分易变性 失效
• 4、脱落酸:ABA
• 5、乙烯
• 6、PH值:5.6-5.8
大家好
20
培养基的种类、配方及其 特点
• 按性质分 • 基本培养基 :MS、MT(Murashige
and Tucher)White
• 完全培养基 基本培养基+ 其它成分 (激素、有机物质等)
大家好
21
• 按状态分
固体培养基;液体培养基。 • 按作用分:诱导培养基;增值培养
培养基。
大家好
22
培养基配方及特点
• 参见课本p17~18
大家好
23
培养基的配制
• 母液(储备液)的配制与保存 • 培养基配制
大家好
24
Ms母液(储备液)的配制与保存
大家好25大家好来自26培养基的配制
1、在洁净的不锈钢锅里放入750ml蒸馏水,加入 所需要的琼脂和糖,加热熔化。
第一章
植物组织培养实验室构建
大家好
1
第一节:商业性组织培养实验 室和小工厂的设计与主要设备
主要内容: • 实验室的设计 • 仪器设备和器皿用具
大家好
2
一、实验室设计
在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要 哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制 宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的 大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的, 实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计 组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免 某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是 在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需 要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温 度、光照、湿度等培养条件。
• 准备室:完成所使用的各种药品的贮备、称 量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备: 药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、 天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配 制用玻璃仪器.
• 洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、 保存、培养基的灭菌等。主要设备:水池、 操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱) 等。
大家好
6
卧 式 灭 菌 锅
大家好
7
• 无菌操作室(接种室):
主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、 试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行 无菌操作的技术程序。主要设备:紫外光源、超净 工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、 剪刀、解剖刀、接种针)等。
接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天 花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配 置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。
大家好
3
组培实验室设计原则:
保证无菌操作,达到工 作方便,防止污染。
大家好
4
组培实验室组成:
• 标准组织培养室包括: • 洗涤室(区)
▼
• 制备室(区) • 灭菌室(区) • 储放室(区) • 操作室(区)
可以根据自 己的实际条 件进行合并
• 培养室(区)
• 观察室(区)
• 药品室(区)
大家好
5
细胞学实验室
该室用于对培养物的观察分析与培养物的 计数等。主要设备:双筒实体显微镜、显微 镜、倒置显微镜等。小型仪器设备有:分注 器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电 炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心 机等。
大家好
12
显微镜
显微镜
大家好
13
玻璃器皿及用具
• 玻璃器皿
培养用的:试管、三角瓶、培养皿等;
大家好
16
大量元素(以Ms培养基为 例)
大家好
17
微量元素(以MS培养基为 例)
大家好
18
氨基酸和有机附加物(以MS培养 基为例)
大家好
19
植物激素(植物生长调节 剂)
• 1、生长素类:IAA,IBA,2,4-D, NAA等。
• 2、细胞分裂素类:KT,6-BA,ZT等。
• 3、赤霉素类;GA1-GA4,GA7, GA9-GA16,GA24,GA25等
显微镜下观察用的:细胞微室、载玻片、 培养皿等。
• 微孔过滤器(细胞过滤器) :激素用于 灭菌。
• 一般用石棉滤膜
大家好
14
第二节:培养基及其配制
主要内容: • 培养基的成分 • 培养基的种类、配方及其特点 • 培养基的配制
1、培养基母液的配制 2、培养基的配制
大家好
15
一、培养基的成分
• 大量元素 • 微量元素 • 氨基酸和有机附加物 • 植物激素(植物生长调节剂) • 维生素类 • 凝固剂
要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2盏 紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空 调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界 空气对流。
接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作 室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。 缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
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超 静 工 作 台
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酸 度 计
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培养室:
• 培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。其大小可 根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。 其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养 架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火的性能。主要设 备:培养架(控温控光控湿)、摇床、培养箱、紫外光 源等。培养材料放在由金属制成培养架上培养。培养架 一般设5层,最低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm 左右,培养架高1.7m左右。其长度根据日光灯长度而 设计, 如采用40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽 度一般为60cm。培养室最重要的因子是温度,一般保持 在20—27℃左右,具备产热装置,并安装窗式或立式空 调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温 度,最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒 定,相对湿度以保持在70%~80%为好,可安装加湿器。 控制光照时间可安装定时开关钟,一般需要每天光照1016h,也有的需要连续照明。现代组培实验室大多设计 为采用天然太阳光照作为主要能源,这样不但可以节省 能源,而且组培苗接受太阳光大家生好 长良好,驯化易成活11 。
2、加入储备液1-40ml,储备液2、3、4 各10ml,按需要量加入植物激素。
3、用蒸馏水定容到1L。
4、调pH值。PH一般5.8
5、培养基的分装。
6、包扎。
7、培养基的高压灭菌。
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培养基的灭菌
• 高温高压蒸汽灭菌:121℃,1.1Kg/c㎡, 15-20芬,时间过长,培养基成分易变性 失效
• 4、脱落酸:ABA
• 5、乙烯
• 6、PH值:5.6-5.8
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培养基的种类、配方及其 特点
• 按性质分 • 基本培养基 :MS、MT(Murashige
and Tucher)White
• 完全培养基 基本培养基+ 其它成分 (激素、有机物质等)
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• 按状态分
固体培养基;液体培养基。 • 按作用分:诱导培养基;增值培养