水貂绿脓杆菌的分离与鉴定

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_貂源绿脓杆菌分离株的鉴定、血清学分型及药敏试验

［１］张欠欠，惠清法．弓形虫病流行病学研究现状［Ｊ］．中国医疗前言，２００８，３（２０）：１１－１４．
［２］谢德华，翁亚彪，朱兴全．我国猪弓形虫病的研究概况［Ｊ］．中国兽医寄生虫病，２００４，１２（２）：３３－３５．
［３］陈永军，王权，蒋蔚，等．上海市猪弓形虫流行病学调查［Ｊ］．中国动物传染病学报，２０１０，１８（５）：５４－５８．
动物医学进展，２０１４，３５（７）：１２７－１３１ＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ
貂源绿脓杆菌分离株的鉴定、血清学分型及药敏试验
杨海燕１△ ，王颖２△ ，张传美１，秦志华１，张洪亮１，单虎１＊
（１．青岛农业大学动物科技学院，山东青岛２６６１０９；２．烟台市动物卫生监督所，山东烟台２６４０００）
使用抗菌药物是控制细菌性疾病的有效手段，但由于养殖过程中不科学、盲目的滥用抗菌药，且绿脓杆菌对很多药物具有天然耐药的特点，本身极易产生耐药性，使得抗菌药物对该菌耐药，治疗效果越来越差，致使病情得不到有效控制，给养殖户造成巨大经济损失［３］。本研究对采自山东各地暴发水貂出血性肺炎的病料分离得到的绿脓杆菌分离株进行生化和ＰＣＲ鉴定、血清学分型，并对分离株进行耐药性检测，以了解水貂感染的绿脓杆菌流行特点和耐药现状，为临床用药和更有效的治疗疾病提供依据和参考。

一例水貂绿脓杆菌病的诊治

通过以上发病情况、临床症状、病理变化和实验室检验，诊断该病为绿脓杆菌病。通过药敏试验发现，该病原对环丙沙星、氧氟沙星和诺氟沙星敏感，通常认为庆大霉素和
出血点；胃内容物中混有血液。
４实验室诊断
４．１犬疽热Ｒ．Ｔ－ＰＣＲ检测４．２细菌分离与鉴定
刮皮：做致病细菌分离培养和药敏试验
键。皮肤与营养的关系很重要，食物中不饱和脂肪酸、食物中
结果：葡萄球菌敏感药物；头孢噻肟钠、头孢曲松钠，头孢拉定。不敏感药物：林可霉素，红霉素，恩诺沙星。狗的皮肤病主要由传染性因素和非传染性因素引起，其中传染性皮肤病的发病率较高。在生理状态下，很多种类的
滑、边缘平坦、中央隆起的中等大小的菌落，菌落周围培养基
无菌采取病死貂的肺脏和肝脏病料，分别接种于普通琼
药，及时有效控制疫情。绿脓杆菌广泛存在于土壤、水和空气中，在正常动物肠
道和皮肤上亦有存在。每年８、９月，气候温暖湿润适于绿脓杆菌等细菌的繁殖，立秋后烟台地区昼夜温差大，此时正是
胁养貂业的重要疾病之一。近年来，烟台地区养貂业蓬勃发
展，饲养规模和饲养数量不断增加，而饲养管理水平却相对落后，造成该病的流行，给养殖户带来较大的经济损失。２０１３
年９月烟台某养殖场发生一种以出血性肺炎为典型特征的
４．４药敏试验
水貂换毛期，水貂抵抗力下降，为该病的发生创造了有利条

水貂绿脓杆菌的分离鉴定

关键词：绿脓杆菌；分离鉴定；致病性；水貂中图分类号：￥８５２．６１７文献标识码：Ｂ文章编号：１６７２ — ９６９２（２０１５）０８ — ００１１－０５
ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｎＭｉｎｋｓ
（１．ＧｅｎｅｒａｌＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇＳｔａｒｉｏｎｆｏｒＷｉｉｄｌｉｆｅ — ｂｏｒｎｅＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＤｉｓｅａｓｅｓ，ＳＦＡ，ＬｉａｏｎｉｎｇＳｈｅｎｙａｎｇ１１００３４
２．ＡｎｉｍａｌｈｕｓｂａｎｄｒｙｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｏｆＢａｉｃｈｅｎｇｃｉｔｙ，ＪｉｌｉｎＢａｉｃｈｅｎｇ１３７０００：
３．ＣｈａｎｇｃｈｕｎＷｉｌｄｌｉｆｅ — ｂｏｒｎｅＤｉｓｅａｓｅｓＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＳＦＡ，ＪｉｌｉｎＣｈａｎｇｅｈｕｎ１３０１２２：
ｌｏｎｇｅｄｔｏＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｆｒｅｓｈｓａｍｐｌｅｓｂｙｃｉｉｎｉｃａｌａｎａｌｙ —

水貂绿脓杆菌病的诊断与治疗

2019年第2期（总第259期）疾病防治31水貂绿脓杆菌病的诊断与治疗马晓卉（山东省阳谷县畜牧局 252300）中图分类号：S858.92 文献标识码：B 文章编号：1007-1733(2019)02-0031-02水貂绿脓杆菌病又称出血性肺炎，是由绿脓杆菌引起的以出血性肺炎和肺水肿为特征的高度传染性急性传染病，常呈地方性流行，病程短，死亡率高。

1 临床症状病貂食欲减退或废绝，精神沉郁，体温升高，鼻镜干燥，行动迟缓，流泪，流鼻液，咳嗽，呼吸困难，呈腹式呼吸，并发出呼噜声，有时伴发异常的尖叫声。

有些病貂可见咳血，死后口鼻有血样泡沫流出。

临床上绿脓杆菌常可引起尿路感染、烧伤创面及褥疮感染、败血症和肺部感染等。

2 剖检变化剖检可，见主要病变在胸腔。

胸腔充满浆液性渗出液，胸壁有大量出血点;肺脏肿大，大面积出血，肺泡及支气管充满出血性泡沫，投入水中下沉;胸腺布满大小不等的出血点或出血斑，呈暗红色;心脏冠状动脉沟有出血点;脾脏肿大，有出血点，呈暗红色;肝脏、肾脏均有出血点;胃肠黏膜充血、出血。

3 病原3.1 流行性绿脓杆菌( Bacillus pyocyaners )，也称铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，1882年首先由Gersard 氏从伤口脓液中分离到。

该菌在自然界中分布广泛，可引起多种动物的脏器脓肿，如奶牛的子宫炎和乳房炎等。

近年来，随着集约化的不断扩大，该菌导致的疾病表现为群体的急性暴发，死亡率增高。

动物绿脓杆菌病调查结果表明，绿脓杆菌是鹌鹑化脓性肝炎、水貂出血性肺炎、獐子麝囊化脓、长臂猿化脓性角膜炎等病的原发性或并发性病原。

绿脓杆菌对牛、羊兔大熊猫、鸭等动物的感染也都有了大量的报道。

3.2 形态和培养特性绿脓杆菌属假单胞菌属，中等大小的革兰氏阴性杆菌，单在、成双或成短链。

所有菌株均能运动。

电子显微镜下可以见到菌体一端有一根很长的鞭毛和很多绒毛巴。

该菌最适宜的生长温度为30~37 °C ，41 9C 可生长，4 C 不生长。

一起水貂绿脓杆菌性肺炎的诊治

鼻孔流出红色泡沫性液体，翻滚挣扎而死亡。粪便稀薄，粪便呈黄色、绿色、黑色或者灰色，尿液呈酱
油色或称为铁锈色。
４病理变化
剖检死亡貂的尸体，发现特殊的病变主要在鼻腔和肺脏，鼻腔有血样的泡沫，肺脏有明显的充血、
条件下３０分钟可被杀灭。
一
般的消毒药按比例配置，在有效的时间里都
５
实验室诊断
会将绿脓杆菌杀死。如百毒杀、碘仿、次氯酸钠、火碱、煤酚皂、生石灰等。
无菌取新鲜病死水貂肝脏和脾脏分别进行直接涂片，革兰氏染色后在千倍油镜下检查，见有数量不等的革兰氏阴性单个、成双或呈短链状的大小
Ｊ疾病防治
Ｔ
ｉｂｉｎｇｆａｎｇｚｈｉ发病水貂用头孢噻呋钠肌肉注射，每只０．１ｇ，每天１次，连续注射３次为１个疗程。６．３．１全群拌料饲喂中敖生物科技有限公司生产的硫酸粘菌素可溶性粉，每袋ｌＯＯｇ拌料５０ｋｇ，
到中心就诊。
致、０．５—０．８ｕｍ×１．５ —３．０ｕｍ细长的小杆菌，动
力试验阳性，有鞭毛和荚膜。
６治疗措施
６．１彻底消毒切断传播途径
将发病水貂进行隔离饲养，对笼舍、地面环境、粪便等进行喷雾消毒，食槽及饮水槽、碗或杯用百度杀进行浸泡消毒，每天２次，连续１周；环境空气

一例由绿脓杆菌引起的水貂出血性肺炎的诊治

不易凝固。
４实验室诊断
４１检测犬瘟热和细小病毒采用韩国安捷胶体金．试纸对病例进行犬瘟热和细小病毒检测，果均阴结性，除了犬瘟热和细小病毒两种疾病。排
之一。１５，Ｋｏ９３年ｎｘ首先在丹麦报道了该病，１８４２细菌分离和鉴定取肺脏组织涂片后革兰氏染９２．年，Ｇｓｏｄ从貂体内首先分离出病菌。病在瑞典、色镜检，ｅｓｒ该能见大量革兰氏阴性杆菌。病死水貂肝、取肺
２临床症状发病急促，有些水貂毫无症状，突然死亡。貂体
温升高，欲废绝，吸困难，式呼吸，些甚至呈食呼腹有
犬坐式呼吸，病程１２ｄ病程后期抽搐、叫，￣，尖部分水
肟、菌必治、氟苯尼考、左氧氟沙星耐药（抑菌环 ≤ １２
ｍｍ）。
貂死后口鼻中流出血样泡沫。
３病理变化
６治疗
全场用５的热火碱水进行喷洒消毒，％水槽、食槽
每天清洗，酸阿米卡星全群饮水和拌料，硫已发病的
病变主要集中于肺部，多呈弥漫性出血或充血，
中图分类号：￥６．文献标识码：ｃ文章编号：１０．４Ｘ（０１２０６．２８５２２０５９４２１）１．０３０
水貂出血性肺炎又称假单胞菌病或绿脓杆菌病，是由假单胞菌科假单胞菌属中的铜绿假单胞菌（又称绿脓杆菌）引起的一种急性传染病。以肺出血、肺水肿、吸困难，分水貂突然死亡，从口鼻中流呼部并出血样泡沫等为特征，是严重威胁养貂业的重要疾病

健康水貂肠道中拟杆菌的分离鉴定及药敏试验

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｒｅｅｂａｃｔｅｒｉａｌｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｈｅａｌｔｈｙｍｉｎｋｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｕｃｏｓａａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｓ，ｎａｍｅｄｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙａｓＢ１，Ｂ２ａｎｄＢ３；Ｐｕｉｒｉｆｅｄｃｕｌｔｕｒｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，Ｇｒａｍｓｔａｉｎｔｅｓｔａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗｅｒｅｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．Ｐｒｅｌｉｍｉ — ｎａｒｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ：Ｂ１ａｎｄＢ２ｂｅｌｏｎｇｅｄｔｏＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｑ，Ｂ３ｂｅｌｏｎｇｅｄｔｏＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏｎ．Ｓｕｓ —
叮、二甲嘧啶、硫酸红霉素、阿莫西林、硫酸庆大霉素、多粘菌素不敏感，对硫酸链霉素、氧氟沙星、头孢噻肟敏感。本试验为毛皮动物专用微生态制剂的研制奠定了理论基础。
关键词：水貂；拟杆菌；分离鉴定；药敏试验中图分类号：￥８５８．９２文献标识码：ＡＤＯＩ编码：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６ — ６５００．２０１３．０１．０１１

1例水貂犬瘟热继发绿脓杆菌感染的诊治

1例水貂犬瘟热继发绿脓杆菌感染的诊治戴秀美，王秋菊，常维山*（山东农业大学动物科技学院，山东泰安271018）1发病情况2013年11月22日，山东省临朐县某大型水貂养殖场出现发病症状。

该养殖场饲养水貂3600只，连续数天出现水貂死亡，每天死亡近20只，死亡迅速。

经了解，该貂场曾进行过一次犬瘟热疫苗的接种，但接种时操作不规范，不能保证每只水貂有足够的接种剂量。

水貂发病初期，场主曾对病貂进行连续3d的药物治疗，使用盐酸大观霉素和林可霉素进行拌食饲喂，但收效甚微，不能控制病情的发展，遂来诸城市皮毛动物研究所进行化验。

2临床症状经问诊与观察，病貂出现精神沉郁，拒绝采食，部分出现极度消瘦，鼻镜发绀，鼻孔流出红色泡沫性液体，并伴有异常叫声，眼周围出现眼眦，有的病貂出现四肢抽搐、口吐白沫的神经症状，排黑色或绿色粪便，死后水貂倒提后口吐血水的临床症状。

3剖检变化肺脏呈弥漫性出血，呈暗红色，压之出现气泡；气管中有大量血样泡沫；心外膜有出血点；肝脏肿大淤血发黑，呈樱桃红色，充满血液；胆囊肿大，内有大量绿色胆汁；脾脏肿大出血并呈黑色；肾脏出血；胃黏膜潮红；小肠及大肠黏膜有散在出血点；直肠黏膜出血；膀胱黏膜有条状出血。

4实验室诊断4.1犬瘟热病毒、犬细小病毒和阿留申病毒检测采用韩国进口BIT快速胶体金试纸条对病貂病料进行犬瘟热病毒和犬细小病毒检测，结果犬瘟热病毒呈现阳性，犬细小病毒呈现阴性。

病貂进行心脏采血，离心后获得血清，分别进行碘凝集和研究所建立的对流免疫电泳试验（CIEP）检测送检的6只黑白色水貂中的阿留申，结果碘凝集试验均为阴性，对流免疫电泳试验均未出现沉淀线，即为阴性。

排除了犬细小病毒和阿留申病毒感染。

4.2细菌分离与鉴定取肺脏组织直接涂片，革兰染色后镜检，可见大量革兰阴性杆菌。

无菌取肝脏接种于普通琼脂、绵羊血琼脂，37ħ培养24h。

结果在普通琼脂上长出表面光滑、湿润、圆形、中等大小、微微隆起的蓝绿色菌落，且有特殊芳香味，整个培养基被染成青绿色；在血液琼脂上菌落呈灰褐色，出现红细胞溶解现象；单菌落进行肉汤培养，可见肉汤呈青绿色，且表面可见菌膜。

水貂绿脓杆菌(PASD03株)鞭毛蛋白的提取与分析

ＴｈｅｕｔｈｗｅｈｔｔｅｘｅｉｎａｕｃｓｆｌｅａａｅｈａｅｌｆＰｅｄｍｏａｅｕｉｏａａｄｔｅｏｉｉａａｅｌｅｒｓｌｓｏｄｔａｅｐｒｍｅｔｄｓｃｅｓｕｌｓｐｒｔｄｔｅｆｇｌｎｏｓｕｏｎｓａｒｇｎｓｎｈｒｇｎｌｇｌｎｓｈｈｙｌｉｌｆｉ
ＡｂｔａｔＩｈｔｄｓｒｃ：ｎｔｅｓｕｙ，ｔｅｅｔｃｉｎｏａｅｌｒｍｓｕｏｎｓａｒｇｎｓ（ｔｉＡＳ３ｗａｔｄｅ，ＦａｅｌｓｐｅａｅｈｘｒｔｆｇｌｎｆａｏｌｆｉｏＰｅｄｍｏａｅｕｉｏａＳａｎＰＤ０）ｓｓｕｉｄｌｇｌｎｗａｒｐｒｄｒｉ
～
３６
中国动物检疫２１第２０２年９卷第８期
目主持人：胡藕祥
ｇｗｙｉａ。ｄｊ＠ｓ．ｍｎｃ
水貂绿脓杆菌（ＡＤ３）ＰＳＯ株鞭毛பைடு நூலகம் 白的提取与分析
吴娟，秦晓冰，单虎
（岛农业大学动物科技学院，青山东青岛２６０）６１９
ｔｒｕｈａｉｙｒｌｓｓｄｆｒｎｉｌｅｔｆｇｔｎａｄａｉｙｒｌｓｓｉｏｉａｉｎｗｉｃａｉａｓｉａｉｎＴｅｆｇｌｒｐｏｅｎｈｏｇｃｄｈｄｏｙｉ，ｉｅｅｔｎｒｕａｉｎｃｄｈｄｏｙｉｃｍｂｎｔｔｍｅｈｎｃｌｏｃｌｔ．ｈａｅｌｒｔｉａｃｉｏｎｏｈｌｏｌａｓｒｃｕｅｆｏＰｅｄｍｏａｅｕｉｏａｗａｅａａｅｎｕｉｅｙｍｅｎｆＳｔｔｒｒｍｓｕｏｎｓａｒｇｎｓｓｓｐｒｔｄａｄｐｒｄｂａｓｏＤＳＰｕｉｆ－ＡＧＥ，ｎｄｎｉｅｙｅｅｔｏｉｍｉｒｓｏｙａｄｉｅｔｄｂｌｃｒｎｃｉｆｃｏｃｐ．

水貂球虫与绿脓杆菌病混合感染的诊治

丽
有许多球虫侵蚀的病块或充满煤焦油状血
养殖技术顾问２１．０２１
水肿，器组织出血性病理变化。脏
圆形，２有层轮廓的卵囊壁。采取肺组织作触（）后，兰氏染色镜检，涂片革
可见到一端有１根细长鞭毛，能运动的革兰氏阴性
杆菌。
无菌采取心血或肝组织，接种营养琼脂、普通肉汤、血琼脂和麦康凯琼脂平皿。营养琼脂平皿上经３ ℃培养２，－，长迅速，成的菌落为圆形，７４４Ｂ生，ｔ形中等大小，隆起，润粘稠，绿色，落周围的培养基湿淡菌为蓝绿色，有芳香气味；在普通肉汤中培养２，，４Ｊａ呈ｌ－ｔ
均匀浑浊，继续培养至７２小时可产生菌膜，培养液呈
蓝绿色糊状；琼脂平板上，落周围有Ｂ溶血环；血菌在麦康凯琼脂平皿上生长良好，培养基呈棕绿色。本菌在三糖铁培养基上不产生硫化氢，斜面部呈粉红色，部不变黄，菌能分解葡萄糖、底本甘露醇和木糖，产酸不产气，分解乳糖、芽糖、糖。不麦甘露采用药敏纸片进行药敏试验，果恩诺沙星、结丁胺卡那高度敏感，奇霉毒、苯尼考中度敏感，阿氟复
３病理变化
水貂尸体普遍贫血、瘦。皮下有出血性胶冻样消浸润，管环出血呈桃红色，血肿大，气充整个肺叶呈

威海地区水貂绿脓杆菌的血清型鉴定及药敏试验

收稿日期：２０１４— １１ — ２７基金项目：山东省现代农业产业技术体系毛皮动物创新团队潍坊综合试验站项目（编号：ＳＤＡＩＴ一１８一Ｏ１ｌ一１３）。作者简介：葛爱民（１９７２一），男，河北滦县人，讲师，主要从事动物疫病防治与动物检疫研究。Ｔｅｌ：（０５３６）３０８６４１９；Ｅ— ｍａｉｌ：ｓｄｍｘｇａｍ＠
落，进行革兰染色、镜检。
表３结果显示，８６株水貂绿脓杆菌分离株对１５种药物均出现不同程度的耐药性。其中对阿米卡星、强力霉素、氧氟沙
１．２．２生化试验
挑取８６株待检菌株单菌落接种葡萄糖、
星敏感度较高；对环丙沙星、硫酸妥布霉素、硫酸庆大霉素敏感
威海地区水貂绿脓杆菌的血清型鉴定及药敏试验
葛爱民，姜八一，崔晓娜，刘新勃
（山东畜牧兽医职业学院，山东潍坊２６１０６１）
摘要：从山东威海地区多个水貂养殖场和养殖户采集到疑似出血性肺炎的病死貂肺、肝、脾等组织病料９的病死貂肺、心血、肝、脾等组织，共９ｌ份。
１．１．２试剂
普通营养琼脂、兔鲜血琼脂，购自上海医药试
剂公司，按常规方法自制平板；葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇等
微量生化发酵管，购自杭州天和微生物试剂有限公司；绿脓杆菌血清分型用标准阳性血清（日本生研株式会社）；多黏菌素

貂源C型绿脓杆菌的分离鉴定及其药敏试验

中图分类号：Ｓ８５２．６１文献标识码：Ａ文章编号：１００７・１７３３（２０１４）０１ — ００１４ — ０２
板，加入１０ｘＥｘＴａｑＢｕｆｅｒ２．５ｌ，上、下游引物各０．２ｌ，
貂出血性肺炎的水貂，水貂换毛期间，口鼻流血死亡，
血清平板细菌分离获得菌株。
１．８分离菌的毒力试验
从固体培养基上挑取单菌落，
接种于马丁肉汤培养基，３７￣Ｃ恒温培养箱中培养２４ｈ，细
菌计数，１００倍稀释腹腔注射１６－２０ｇｄｘ白鼠３只，０．３ｍｌ／只，对照注射生理盐水２只，观察７ｄ。
敏试验、血清凝集、动物试验等，最终确诊为Ｃ型绿脓杆菌，经综合防治，最后控制病情。
绿脓杆菌，是引起水貂出血性肺炎的主要病原菌。
该病多发于温暖潮湿的夏秋两季，最适宜生长温度为
ｄＮＴＰ２￣Ｉ、最后加ＥｘＴａｑ酶０．２ｕｌ，用灭菌纯水补足到
型、Ｂ型、Ｃ型一滴，滴于载玻片上，用接种环取营养琼
脂上菌落与血清混合，１ａｉｒｎ过后观察有无凝集。１．７分离茵的药敏试验从固体培养基上挑取单菌落，
ｌ材料与方法１．１菌株采集来自山东诸城某一水貂养殖场暴发的水
均匀密集划线接种于血清营养琼脂培养基，按Ｋ－Ｂ纸片法测定该菌其对常用抗菌药物的敏感性。

水貂绿脓杆菌病的诊治

菌引起的，以出血性肺炎和肺水肿为特征的高度急
性传染病。
余只发病，以当年幼貂为主，患貂食欲废绝，流泪，出现典型肺炎症状，个别咳血。发病后，场主曾用氨苄青
霉素、庆大霉素进行治疗，有一定的疗效，但效果不明显。解剖发现肺出血、水肿，切开有大量血样液体流出，严重病例肺脏呈大理石样外观。脾肿大，肾脏有出血点。无菌采集肝脏进行细菌培养，２４小时后，在琼脂平皿上，长出边缘整齐的波状菌落，上面染成青绿色，并发出特殊的生姜气味。作药敏试验，氧氟沙
５诊断
根据流行病学、临床症状、病理变化可做初步诊断。无菌采集肝脏接种肉汤培养基，进行需氧培养，２４～４８小时后，在培养基表面形成绿色，出现淡褐色
本病主要是侵害３～１５日龄的雏鸭，此时期的雏鸭发病率和死亡率最高。在本病开始流行时，发病雏鸭多在ｌ０ — １４日龄之间。随着本病的流行，
１病原
本病病原为绿脓杆菌，又称绿脓假单胞菌，革兰
氏染色阴性，广泛存在于土壤、水、空气以及动物的
肠道内，是动物体内常在菌，当动物机体抵抗力降低
时，绿脓杆菌大量繁殖引起感染。绿脓杆菌对外界环
境抵抗力较强，能长时间存在于潮湿环境中。使用０．２％的福尔马林溶液或０．５％的氢氧化钠溶液或０．５％～１．０％的醋酸均可杀死本菌。
眄经济动物
水貂绿脓杆菌病的诊治
王向阳刘新江吕艳艳（山东省文登市畜牧兽医技术服务中心山东文登２６４４００）

水貂绿脓杆菌(山东株)血清分型和ERIC-PCR分型的研究

现多样性。
Байду номын сангаас
关键词：水貂；绿脓杆菌；血清分型；ＥＲＩＣ — ＰＣＲ中图分类号：￥８５８．９２文献标志码：Ａ文章编号：０５２９ — ６００５（２０１６）０９ — ００９１ — ０４
ｂａｃｔｅｒｉａｌｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃｃｏｎｓｅｎｓｕｓＰＣＲ（Ｅｒｉｃ — ＰＣＲ）．Ｔｈｅ１９ｉｓｏｌａｔｅｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｓｅｒｏｔｙｐｅｓ：ｇｒｏｕｐＧ（１５／１９），ｒｏｇｕｐＢ（２／１９），ｇｒｏｕｐＥ（１／１９）ａｎｄｇｒｏｕｐＩ（１／１９）．Ｔｈｅ１９ｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｔｏ７ｇｅｎｏｔｙｐｅｓｂｙＥｒｉｃ — ＰＣＲ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｇｒｏｕｐＧｅｘｉｓｔｅｄｉｎｓｐｅｃｔｒａｌｔｙｐｅＩ～ＶＩＩ（ｅｘｃｅｐｔＶＩ），ｇｒｏｕｐＢｅｘｉｓｔｅｄｉｎｓｐｅｃｔｒａｌｔｙｐｅＩＩ，ｇｒｏｕｐＩｅｘｉｓｔｅｄｉｎｓｐｅｃｔｒａｌｔｙｐｅ１ＶａｎｄｇｒｏｕｐＥｅｘ・

水貂源乳杆菌及双歧杆菌的分离鉴定

水貂源乳杆菌及双歧杆菌的分离鉴定下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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一例水貂流感病毒与绿脓杆菌混合感染的诊断

一例水貂流感病毒与绿脓杆菌混合感染的诊断•赵会光（安丘市畜牧业发展中心山东安丘262100）摘要：2020年8月，山东省潍坊市某水貂养殖场出现水貂急性死亡，发病水貂口鼻出血，并伴有神经症状，解剖症状以肺严重出血、脑膜出血为主。

通过细菌分离鉴定和PCR检测等方法，最终诊断为流感病毒与绿脓杆菌混合感染。

经更换饲料、给予抗菌治疗一段时间后，病情得到基本控制。

关键词：水貂；流感；绿脓杆菌；混合感染1临床症状与剖检病变主诉水貂发病半个月左右，有尖叫、咬笼等神经症状，死亡水貂口鼻流血。

经调查，该养殖场的水貂在分窝后正常免疫水貂肠炎与犬瘟热疫苗，未免疫肺炎疫苗；水貂饲料中包括未熟制的鸭架、鸭肠等，且发病之前更换过饲料。

病死水貂外观口鼻处有鲜红色血液，营养状况良好。

剖检发现：肺严重出血、水肿，呈黑红色，气管环出血；脾脏肿大，有出血斑；肝脏肿大、质脆；肾肿大出血；脑膜出血。

部分水貂胃底有溃疡灶，肠道黏膜出血。

2检测方法2.1细菌分离鉴定取病死水貂的肺脏及肝脏组织，接种于TSA （胰蛋白豚大豆琼脂）平板，置于37弋恒温培养箱培养18h。

取单菌落接种于PDP（绿脓菌素测定培养基）斜面，置于37七恒温培养箱培养，观察斜面有无色素，在试管内加入氯仿提取液，然后加浓度为lmoLZL的盐酸ImL,振摇后静置并观察颜色变化。

同时取单菌落过夜摇菌后，以通用引物⑴进行16S rDNA的PCR扩增，预期扩增片段大小为1428bp,将扩增产物送至测序公司测序，测序结果在NCBI网站进行BLAST比对。

2.2可疑病毒病检测采集病死水貂的肺、肝、脑、淋巴结等组织,用组织研磨仪研磨后，12000rpm/min离心5min,取上清液按照核酸提取试剂盒的操作说明提取核酸。

参照文献何及国家标准《犬瘟热诊断技术》（GB/T27532-2011）、国家标准《犬细小病毒病诊断技术XGB/T27533-2011）,使用特异性检测引物进行PCR扩增，分别检测流感病毒、犬瘟热病毒、水貂肠炎病毒，预期扩增片段大小分别为229bp、455bp、609bp o3结果3.1细菌分离鉴定病死水貂肺脏和肝脏组织均在TSA平板上分离得到中等大小、圆形、黄绿色、有特殊芳香的菌落，绿脓菌素测定试验为阳性（盐酸溶液呈粉红色）。

水貂源绿脓杆菌的分离鉴定及致病性试验

水貂源绿脓杆菌的分离鉴定及致病性试验戴秀美;张永兵;惠涌泉;王秋菊;常维山【摘要】In order to identify the main bacterial pathogens that caused the death of minks in a farm ,we dissected five dead minks that submitted by one farmer of Zhucheng ,Shandong province .These isolates belonged to Pseudomonas aeruginosa according to the examination of fresh samples by clinical analysis , pathological observation ,and then the bacteria were identified by morphological characteristics ,drug sus-ceptibilitytest ,pathogenicity test and 16 S rRNA sequencing .Drug sensitivity test indicated that the bac-terial isolates were highly sensitive to ciprofloxacin and levofloxacin ,intermediate sensitive to polymyxin , doxycyclin and cefotaxime ,resistant totimicosin ,sulfamethoxazole ,trimethoprim ,oxytetracycline ,me-quindox and so on .Pathogenicity tests indicated the isolates could cause high morbidity or death in healthy mice and its median lethal dose was 3 .2 × 107 cfu/mL .%为确诊引起某养貂场的主要细菌性疾病，对山东省诸城市某水貂养殖户送检的5只病貂进行剖检，根据病貂的临床症状、病理剖检变化及对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16 S rRNA PCR鉴定、药物敏感试验、致病性试验，确诊为绿脓杆菌感染。

一株貂源绿脓杆菌的分离和鉴定

一株貂源绿脓杆菌的分离和鉴定
杨朋欣;丁国杰;刘可姝;张春媛;王彬
【期刊名称】《中国动物保健》
【年(卷),期】2016(18)9
【摘要】为鉴定一株引起水貂发病的致病菌,本研究从患病水貂肺脏中分离获得一株优势菌,分别对该分离株进行形态、生化和培养特性研究;分子生物学和血清型鉴定;半数致死量测定.结果表明,该分离株为血清G型水貂源绿脓杆菌;分离株16S rRNA基因序列与已知的绿脓杆菌相应序列同源性为99.16%;分离菌对小鼠的半数致死量(LD50)为1.17×106CFU,对水貂的LD50为1.5×108CFU.
【总页数】3页(P75-77)
【作者】杨朋欣;丁国杰;刘可姝;张春媛;王彬
【作者单位】哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069;哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069;哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069;哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069;哈药集团生物疫苗有限公司黑龙江哈尔滨150069
【正文语种】中文
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