蛹虫草母种培养基配方优化研究
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草，又称冬虫夏草，是一种珍贵的中草药材。
由于其价值高昂，人们对蛹虫草的研究和人工培养不断进行着。
本文将对蛹虫草人工培养的研究进展进行相关介绍。
蛹虫草主要分布在我国的青藏高原地区，由于生长环境的特殊性，使得蛹虫草资源的采集十分困难。
人工培养蛹虫草就成为了获取大量草药资源的有效途径。
蛹虫草的人工培养主要包括菌种繁殖、病虫害防治、培养基优化以及提高产量和品质等方面的研究。
菌种繁殖是蛹虫草人工培养的关键步骤之一。
通过对菌种培养基的优化，研究人员成功地获得了高活力的菌种，并且提高了菌种繁殖的效率。
研究人员还尝试了不同的菌株混合培养，从而提高了蛹虫草的产量和品质。
蛹虫草的人工培养过程中，病虫害的防治也是十分重要的。
由于蛹虫草的生长环境特殊，病虫害的防治更具挑战性。
研究人员通过改良培养基的配方，并且采用合适的病虫害防治方法，成功地解决了蛹虫草人工培养过程中的一系列病虫害问题。
培养基的优化也是蛹虫草人工培养研究的重要内容。
通过对培养基成分的调整，研究人员提高了蛹虫草的产量和品质。
添加适量的有机质和微量元素可以增加蛹虫草的产量，而调整培养基的pH值可以改善蛹虫草的品质。
蛹虫草人工培养研究在菌种繁殖、病虫害防治、培养基优化以及提高产量和品质等方面取得了一系列的进展。
这些研究成果为蛹虫草的大规模生产和利用提供了科学依据，并且为中草药资源的可持续利用做出了积极贡献。
未来，我们还需要继续深入研究蛹虫草的培养技术，进一步提高蛹虫草的产量和品质，促进蛹虫草产业的发展。
毕业论文答辩：蛹虫草菌丝体液体培养条件的优化
4.蛹虫草菌丝体生长曲线的绘制
图3-10 蛹虫草菌丝体生长曲线
➢ 由图3-10可知，菌丝体生长分为四个时期，5d之前 菌丝体属于调整期，主要用于适应培养基中环境并汲 取营养，第5天到第7.5天，为对数期，在此期间菌丝 体快速生长繁殖，而后在第8天进入相对稳定期，达 到最高产量。从第9天以后，菌丝体逐渐进入衰亡期。 因此，培养时间设为8d为保证菌丝体产量最高，质量 最好。
五、致谢
➢ 感谢本论文的指导老师王老师，在整个完成实验 和论文的过程中，不断地指导和关心，帮助我开 拓研究思路，精心点拨。感谢王老师的一直鼓励 帮助我顺利完成论文。
➢ 感谢在实验过程中提供实验场地及实验仪器的邱 教授。
➢ 感谢在实验过程中师兄师姐们的帮助与指导，感 谢大学同学们的帮助与鼓励，大家的帮助使我顺 利完成论文，对此感谢所有的老师同学们。
表3-2 L9（34）正交实验结果
因素
B
C
1
1
2
2
3
3
1
2
2
3
3
1
1
3
2
1
3
2
33.86
34.45
35.87
36.94
34.98
35.32
11.29
11.48
11.96
12.31
11.66
11.77
0.67
0.83
D 1 2 3 3 1 2 2 3 1 37.29 32.74 34.68 12.43 10.91 11.56 1.52
（2）培养温度的选择
图3-8 不同温度对菌丝体生长的影响
➢ 由图3-8可知，随温度从18℃升高到28℃，菌丝体 生长量先增加再减少，当温度达到24℃时，菌丝体产 量最高，生长最好。
蛹虫草菌液体培养基配方优化研究
蛹虫草菌液体培养基配方优化研究作者：张志瑾毛宁来源：《天津农业科学》2012年第04期摘要：利用L9（34）正交试验设计，研究了蛹虫草菌液体培养基不同营养成分对蛹虫草菌丝生长干质量的影响，以对蛹虫草液体培养基配方进行优化。
结果表明，蛹虫草液体培养基最佳配方为：玉米粉1%、麦麸1%、葡萄糖2%、蛋白胨2%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、维生素B1 10 mg•L-1。
蛹虫草菌最终菌体总干质量达到14.85 g•L-1。
关键词：蛹虫草菌；液体培养；碳源；氮源；最佳培养基中图分类号：R17 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006－6500.2012.04.030Optimization of Cordyceps sinensis Liquid MediumZHANG Zhi-jin，MAO Ning(Provincial Key Laboratory for Protection and Utilization of Longdong Bio-resources in Gansu Province, Qingyang, Gansu 745000, China)Ａｂｓｔｒａｃｔ: Different nutrient component in the liquid medium were used to study the effects on the dry weight of fruit body and to get the optimized medium. The results showed that the maxim fruit body yield（14.85 g•L-1） was obtained on the medium of corn starch1%, wheat bran 1%, glucose 2%, peptone 2%, yeast extract 0.5%, KH2PO40.1%, MgSO40.05%, vitamin B1 10 mg•L-1.Key words: Cordyceps sinensis; liquid fermentation; carbon source; nitrogen source; best medium蛹虫草（Cordyceps sinensis）也称北冬虫夏草、北虫草，属真菌门（Eumycota），子囊菌亚门（Ascomycotina），核菌纲（Pytenomy），肉座菌目（Cordycepsmilitaris），麦角菌科（Clavicipitaceae），虫草属（Cordyceps），与冬虫夏草是同属异种[1-3]。
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展蛹虫草是一种传统的中药材，具有多种功效，如增强免疫力，抗氧化，抗肿瘤等。
蛹虫草的天然资源有限，采集困难，价格高昂。
人工培养蛹虫草成为许多研究者关注的重点之一。
本文将对蛹虫草人工培养的研究进展进行综述。
蛹虫草的人工培养主要分为液体培养和固体培养两种方式。
液体培养是将蛹虫草菌种接种到液体培养基中，通过调整培养基配方和培养条件来促进菌丝生长和子实体形成。
固体培养是将蛹虫草菌种接种到含有适宜营养物质的固体基质中，如米糠、木屑等，使菌丝在固体基质上生长并形成子实体。
在液体培养方面，研究者主要关注培养基的配方和培养条件的优化。
培养基的配方包括碳源、氮源、无机盐和添加剂等。
碳源可以是葡萄糖、麦芽糖等，而氮源可以是蛋白胨、酵母粉等。
无机盐主要包括硫酸镁、磷酸二氢钾等。
添加剂可以是维生素、激素等，用于促进菌丝生长和子实体形成。
培养条件的优化也非常重要，如温度、pH值、光照等。
研究表明，适当的温度和pH值可以促进菌丝的生长和子实体的形成，而光照对菌丝形态和生理代谢有一定影响。
在固体培养方面，目前主要关注的问题是固体基质的选择和菌种的接种方式。
固体基质的选择应具有适宜的饲养性能和营养成分，可以提供足够的营养物质，同时保持适宜的水分和通气性。
常用的固体基质包括米糠、木屑、豆壳等。
菌种的接种方式可以是点状接种、均匀接种或层状接种等。
调控培养条件和添加适宜的营养物质，可以促进菌丝的生长和子实体的形成。
蛹虫草的人工培养还面临一些挑战和争议。
蛹虫草的人工培养成本较高，需要保持适宜的温度、湿度和通气等环境条件，消耗大量的能源和资源。
蛹虫草的人工培养技术尚未完全成熟，存在一定的技术难题，如菌种的选育、子实体的质量控制等。
人工培养的蛹虫草与野生蛹虫草在化学成分和药效上可能存在差异，需要进一步的研究和验证。
蛹虫草的人工培养是一个具有挑战和前景的研究领域。
通过优化培养基的配方和培养条件，选择适宜的固体基质和接种方式，可以促进蛹虫草的菌丝生长和子实体形成。
蛹虫草母种培养基配方优化研究
关键Байду номын сангаас词 ： 蛹虫 草 ； 母种 培养基 ； 配方 ； 优化
中 图分类 号 ： ￥ ６ ４ ６ 文献标 识码 ： Ａ Ｄ Ｏ Ｉ 编码 ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ６ — ６ ５ ０ ０ ． ２ ０ １ ３ ． １ ０ ． ０ ０ ４
（ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｌ ｉ ｆ ｅ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｌ ｏ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｑ ｉ ｎ ｙａ ｇ ｎ ｇ ， Ｇ ａ ｎ ｓ ｕ ７ ４ ５ ０ ０ ０， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｆ Ｏｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ Ｍｏ ｔ ｈ ｅ ｒ Ｓ ｅ ｅ ｄ Ｍｅ ｄ ｉ ｕ ｍ Ｆｏ ｒ ｍｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｃｏ ｒ ｄ ｙ ｃ ｅ ｐ ｓ ｍｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｒ ｉ ｓ
Ｚ ＨＡ Ｎ Ｇ Ｚ ｈ ｉ － ｊ ｉ ｎ ， ＭＡ Ｏ Ｎ ｉ ｎ ｇ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ａ ｉ － ｘ ｉ ａ ， Ｚ Ｈ Ａ ＮＧ Ｈｏ ｎ ｇ — ｙ ａ ｎ ， Ｙ Ｕ Ａ Ｎ Ｘｉ — ｚ ｈ ｕ
ｍｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ｓ ｅ ｅ ｄ ｍ ｅ ｄ ｉ ｕ ｍ ｗ ａ ｓ ２ ０ ％ｐ ｏ ｔ ａ ｔ ｏ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｎ ｌ ％ｇ ｌ ｕ ｃ ｏ ｓ ｅ ， １ ％ｐ ｅ ｐ ｔ ｏ ｎ ｅ ， ２ ％ａ ｇ ａ ｒ ， ０ ． ５ ％Ｋ Ｈ ２ Ｐ ０ ４ ， ０ － ３ ％ Ｍｇ Ｓ ０ ４ ， Ｖ Ｂ Ｉ（ １ ０ ｍ ｇ ‘ Ｌ － ） ， ｐ Ｈ ５ ． ８ ． Ｉ ｎ
蛹虫草菌丝体液体培养条件的优化大学本科毕业论文
摘要蛹虫草，也称北冬虫夏草，具有补虚损、益精气、保肺、益肾、止血化痰、滋补强壮等功效，是我国的名贵中草药材。
本论文采用沈阳微生物研究所提供的蛹虫草优质菌种，通过斜面培养、液体培养等过程，获得优质的蛹虫草菌丝体，并以菌丝体重量为指标，对培养温度、初始pH 值、培养箱转速、最佳碳源、最佳氮源、最佳无机盐等液体培养条件进行单因素分析，通过正交试验法确立了蛹虫草菌丝体的最佳培养基配方。
实验结果表明，蛹虫草菌丝体培养最佳碳源是葡萄糖，最佳氮源是蛋白胨，最佳无机盐是KH2PO4和MgSO4；最佳培养基配方是葡萄糖20g/L，蛋白胨10g/L，KH2PO4 1.0g/L，MgSO4 0.5g/L，V B1 50mg/L；最佳培养温度是24℃，最佳初始pH值是6.0，最佳培养箱转速时150r/min；并在最佳培养条件下绘制了蛹虫草菌丝体生长曲线，其对数期为第5～7.5天，菌丝体平均重为7.07g，稳定期为第7.5～9天，菌丝体重为14.63g，从第9天后，蛹虫草菌丝体开始衰退。
关键字：蛹虫草；液体培养；正交试验法AbstractCordyceps militaris , also known as the North Cordyceps, has the effect of completing deficiency, benefiting the essence, lung and kidney, haemostatic and resolving phlegm, nourishing and strong, It is a precious Chinese herbal medicine materials.Cordyceps militaris in this paper has high quality and is provided by the Shenyang Institute of Microbiology. After taking slant culture and liquid culture processes, we get high quality Cordyceps militaris mycelia. It takes mycelium weight as an indicator to make univariate analysis of the incubation temperature, initial pH value incubator speed, the best carbon source, the best nitrogen source and the best inorganic salts liquid culture conditions. With orthogonal test method, it’s established the optimum mycelia medium. The experimental results show that the best carbon source for the mycelia is glucose, the best nitrogen source is peptone, the best inorganic salt is KH2PO4 and MgSO4.A optimum medium includes glucose 20g/L, peptone 10g/L, KH2PO4 1.0g/L, MgSO40.5g/L,V B1 50mg/L.The optimal incubation temperature is 24℃, the optimal initial pH value is 6.0, the best incubator speed is 150r/min. The growth curve of Cordyceps militaris mycelia is drawn on the optimal culture conditions. The logarithmic phase turned up at the 5th to 7.5th day, the mycelium average weighted 7.07g, the stabilization period turned up at the 7.5th to 9th day. The mycelium weighted 14.63g and the recession began from the ninth day.Keywords: Cordyceps militaris; Liquid culture; Orthogonal method.目录摘要 (I)Abstract (II)第一章前言 (1)第二章文献综述 (2)2.1 蛹虫草简介 (2)2.1.1 形态特征 (2)2.1.2 生长条件 (3)2.1.3 功能成分 (3)2.1.4 药用价值 (5)2.2 蛹虫草培养基的作用 (7)2.2.1 碳源 (7)2.2.2 氮源 (7)2.2.3 无机盐 (7)2.3 蛹虫草培养条件的影响 (7)2.3.1 初始PH值的影响 (7)2.3.2 培养温度的影响 (8)2.3.3 摇瓶转速的影响 (8)2.4 菌种液体培养及优化 (8)2.4.1 单因素试验法 (8)2.4.2 正交试验设计法 (8)2.4.3 响应面优化设计法 (9)2.4.4 二次正交旋转组合法 (10)2.5 国内外研究现状 (10)2.6 本文研究意义 (12)第三章实验部分 (13)3.1 试验材料 (13)3.1.1 菌种 (13)3.1.2 培养基 (13)3.1.3 主要试剂 (13)3.1.4 主要设备 (13)3.2 试验方法 (14)3.2.1 蛹虫草菌丝体的培养 (14)3.2.2 蛹虫草菌丝体培养基的优化 (14)3.2.3 蛹虫草菌丝体培养条件的优化 (16)3.2.4 蛹虫草菌丝体生长曲线的绘制 (17)3.3 结果与分析 (17)3.3.1 蛹虫草菌丝体培养基的单因素分析与正交试验结果 (17)3.3.2 蛹虫草菌丝体培养条件的优化 (23)3.3.3 蛹虫草菌丝体生长曲线 (26)第四章结论与展望 (28)4.1 结论 (28)4.2 展望 (28)致谢 (29)参考文献 (30)第一章前言蛹虫草，又称北冬虫夏草，主要产自吉林、云南等地带的针阔叶林的鳞翅目昆虫蛹体上，是一种名贵的药用真菌。
培养蛹虫草的实验报告
培养蛹虫草的实验报告材料与方法一、材料1、菌种来源：蛹A，江苏铜山县七庙真菌厂；蛹B，武汉市新宇食用菌研究所；蛹C，河南清丰；蛹D，华中农大菌种中心；蛹Sc，华南师大生科院微生物研究室。
2、培养基：(1)斜面菌种培养基：综合PDA培养基。
(2)一级液体种培养基：玉米粉S0g，蔗糖10g，蛋白陈2g，KH PO0。
5g， KHPO40。
5g， MgSO4 1g，VitB微量，pH6-7，水1000ml(3)液体振荡发酵培养基：a综合PD培养基：马铃薯200g，蔗糖20g，蛋白陈5g，KHPO4 1g，KHPO41g，MgS04 1g， VitB微量，pH6-7，水1000ml。
b番薯培养基：番薯200g，其他同a。
玉米粉培养基：玉米粉50g，其他同a。
(4)液体静止培养基：d综合PD培养基：成分同a。
e综合PD +3g琼脂。
f 综合PD+5g蚕蛹粉。
g综合PD + 5g蚕蛹粉+3g琼脂。
1。
2方法。
二、一级液体菌种培养方法及条件将培养两周、长满的斜面菌种接种于母种培养基中，25℃，140r/min，摇床振荡培养5天。
液体发酵培养方法和条件250m1三角瓶，培养基65ml，接入一级液体种7ml。
每个菌种，分别接入a、 b、c、3种培养基，每组设3个重复；在25℃，140r/min 进行振荡培养，3天后长满，测定菌丝干重和粗多糖产量。
1、2、3 菌丝干重测定。
深层培养液经3000r/min离心，去上清液后得菌丝体，置60-70℃烘箱中烘干达恒重，称重。
1、2、4粗多糖产量的测定。
深层培养液离心后的滤液，常压蒸发浓缩为 10m1-15ml 粘稠状液体，加入三倍体积的95%乙醇沉淀，4℃冰箱中静置24小时，过滤后置60-70℃烘干至恒重，称重。
结果与分析蛹虫草的液体振荡培养菌种在不同液体培养基上生长的情况在马铃薯液体培养基上，5个菌种的生长势最好，生成的菌球最多。
而在玉米粉培养基上培养的菌种的生长势最差，生成的菌粒较少或小。
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展蛹虫草，又称冬虫夏草，是一种珍贵药材，被誉为“天然的珍珠”。
蛹虫草在民间被广泛使用，并以其名称著称。
近年来，由于采摘难度大、资源稀缺、价格昂贵等原因，人工培养蛹虫草成为研究的热点。
本文就蛹虫草人工培养的研究进展进行简要介绍。
一、蛹虫草人工培养技术综述蛹虫草人工培养技术是通过对红虫的寄生和蛹化过程进行控制，从而实现人工合成蛹虫草。
蛹虫草人工培养方法主要包括培养基的制备、红虫的寄生、蛹化以及干燥等步骤。
1. 培养基的制备：蛹虫草人工培养时所使用的培养基一般以黄豆制成，同时需要添加一些营养物质，如甘露醇等。
2. 红虫的寄生：红虫寄生是人工培养蛹虫草的第一步，需要选用成熟健康的红虫粘在培养基上，并保持适宜的温度和湿度条件，同时也要注意防治病虫害。
3. 蛹化：在寄生适宜的时间，红虫会逐渐蜕皮，然后形成蛹。
人工培养蛹虫草的关键是掌握好蛹化过程的温度、湿度、光照等条件。
4. 干燥：蛹虫草人工培养完成后需要进行干燥处理，以保证蛹虫草的质量和保存期。
1. 稳定产量：野生蛹虫草的产量受到自然环境因素的限制，而人工培养蛹虫草可以保证稳定的产量和供应。
2. 控制质量：由于采摘野生蛹虫草往往受到当地风俗习惯、采摘方式、时间及保存等方面的限制，因此其品质存在较大的差异。
而人工培养的蛹虫草可以根据不同需求进行针对性的栽培和管理，从而控制产品的品质。
3. 保护自然资源：采摘野生蛹虫草会影响自然资源的平衡和调节，而人工培养蛹虫草可以从根源上避免对自然资源的过度破坏，保护生态环境。
三、发展趋势蛹虫草具有很高的药用价值和市场价值，在国内外市场需求量大。
因此，蛹虫草人工培养技术的研究和开发具有非常广阔的前景。
1. 优化培养技术：人工培养蛹虫草的工艺流程和细节还有待进一步完善和优化。
2. 研究蛹虫草生理生化机制：为更好地控制红虫的寄生、蛹化和形成蛹虫草等过程提供理论基础。
3. 强化品质管控：建立健全的蛹虫草品质检测体系，制定行业标准，并加强技术培训，将茁壮成长的蛹虫草推向市场。
用于蛹虫草蛋白发酵的微生物培养基优化
用于蛹虫草蛋白发酵的微生物培养基优化在蛹虫草制备蛋白发酵过程中，微生物培养基的优化是关键因素之一。
通过准确调控培养基的成分和条件，可以提高蛋白发酵的产量和质量。
本文将探讨用于蛹虫草蛋白发酵的微生物培养基优化的相关内容。
一、引言蛹虫草是一种珍贵的药材，其富含丰富的蛋白质。
蛹虫草蛋白的发酵制备可提高蛋白质的含量和生物活性。
而微生物培养基的合理优化是蛹虫草蛋白发酵成功的关键之一。
二、微生物培养基成分的优化微生物培养基的成分直接影响蛹虫草蛋白发酵的效果。
其中，碳源、氮源、矿物质和其他诸如生长因子等物质都需要合理配置。
1. 碳源优化在蛹虫草蛋白发酵过程中，合适的碳源可提供微生物的能量和有机物质基础。
常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糊精等。
不同微生物对碳源的利用能力存在差异，因此需要通过试验确定最适宜的碳源种类和浓度。
2. 氮源优化氮源是微生物合成蛋白质的重要组成部分。
常用的氮源包括酵母粉、蛋白胨等。
在氮源选择上，需要考虑到其对微生物生长的促进作用和对产物合成的影响。
3. 矿物质和生长因子微生物生长所需的矿物质和生长因子对蛹虫草蛋白发酵也有重要影响。
锌、铁、镁等矿物质，以及维生素B族等生长因子，都应在一定范围内进行优化。
三、微生物培养条件的优化除了微生物培养基成分的优化外，培养条件的合理设定也是蛹虫草蛋白发酵的关键之一。
1. 温度微生物的生长和代谢活动与培养温度密切相关。
对于蛹虫草蛋白发酵，需要在合适的温度下进行培养。
不同菌株对温度的适应能力存在差异，因此需要根据具体情况确定最佳的培养温度。
2. pH值pH值是微生物生长的另一个重要因素。
蛹虫草蛋白发酵过程中，合适的pH值可促进微生物的生长和产物合成。
通过调节培养基的pH 值，可以保持适宜的微生物生长环境。
3. 氧气供应氧气是微生物进行呼吸和产物合成必需的物质。
根据不同微生物对氧气需求的差异，需要合理控制培养器的通气条件，以确保充足的氧气供应。
四、优化策略的研究进展为了进一步优化蛹虫草蛋白发酵的微生物培养基，研究人员提出了多种策略。
蛹虫草的优化栽培及其成分分析
栽培育种ZAIPEIYUZHONG种植技术蛹虫草的优化栽培及其成分分析王 哲1 王升厚2 柳叶飞2 王 泽1 赵洪新3 赵晓云4 徐方旭2（1.沈阳师范大学生命科学学院，辽宁沈阳 110034；2.沈阳师范大学实验教学中心，辽宁沈阳 110034； 3.浙江理工大学生命科学与医药学院，浙江杭州 310018；4.沈阳药科大学生命科学与生物制药学院，辽宁沈阳 110016）摘 要 蛹虫草是一种药用和食用真菌，又被称为北虫草，主要包含虫草素、腺苷、乙酰基虫草素等多种核苷。
通过对10种碳源培养基料水比的优化试验，得到适宜的料水比：燕麦为1∶1.4，小米为1∶1.1，高粱米为1∶1.4，玉米为1∶1.7，糙米为1∶1.1，荞麦为1∶1.4，薏米为1∶1.6，黑米为1∶1.1，大米为1∶1.1，小麦为1∶1.6。
关键词 蛹虫草；优化栽培；特色成分野生蛹虫草主要分布在我国的东北地区及河北、广西等省区，辽宁省在1986年便发现蛹虫草[1]，其化学成分和药理作用与冬虫夏草相近，是冬虫夏草的最理想替代品[2]。
近年来，蛹虫草经过人工驯化培育，技术手段趋向成熟，已经实现规模化生产。
沈阳市是我国最早人工栽培蛹虫草的地区[3]，经分析证实，人工培育的蛹虫子实体中含有丰富的：虫草素、腺苷等活性物质，虫草素作为一种核苷类似物，有着广泛的生物学功能，不仅可以作为抗癌的药物[4]，还对治疗白血病有显著功效[5]，目前开发前景广阔[6]。
１ 材料与方法１．１ 试验材料 供试菌种的编号为C02，是实验过程中筛选出来的菌种之一，由沈阳市农业科学院食用菌研究所提供。
培养基分为3种，即母种培养基、液体菌种培养基和栽培种培养基。
１．２ 测定方法1.2.1 母种制作 （1）将新鲜无芽无病变的马铃薯去皮，切成0.3～0.8 cm的条状，加水煮汁，约10 min后，煮至熟而不烂状，用8层纱布进行过滤。
（2）将滤液定容后加入琼脂粉搅拌均匀，再加入葡萄糖、磷酸二氢钾、无水硫酸镁、维生素B1等，加热煮沸，分装到试管中。
蛹虫草菌液体培养基配方优化研究
・作 物 栽 培 与 设 施 园艺
２ １ ，８ ４ ：２ — ２ ０ ２ １ （ ）１ ０ １２
蛹 虫草 菌 液 体 培 养 基 配 方优 化研 究
张志 瑾 ， 宁 毛
（ 甘肃 省高 校陇 东生物 资源保 护与 利用省 级重点 实验 室 ， 甘肃 庆 阳 ７ ５ ０ ） ４０ ０
摘
要： 利用 Ｌ（ 正交试验设计 ， ９３） 研究了蛹虫草菌液体培养基 不同营养成分对蛹虫草菌丝生 长干质量 的影 响， 以对蛹虫草液
体培养 基配方进 行优化 。结果表 明 ， 蛹虫草 液体 培养基 最佳 配方为 ： 米粉 １ 麦麸 １ 葡 萄糖 ２ 蛋 白胨 ２ 酵母膏 玉 ％、 ％、 ％、 ％、
０５ 磷酸二氢钾 ０１ 硫酸镁 ００ ％、 生素 Ｂ ０ｍ ・一 ． ％、 ．％、 ． ５ 维 １１ ｇ Ｌ 。蛹虫草菌最终菌体 总干质量 达到 １ ．５ ・一 ４８ Ｌ 。 ｇ
关 键词 ： 蛹虫 草菌 ； 液体 培养 ； 源 ； 源 ； 碳 氮 最佳 培养基
中 图 分 类 号 ： １ Ｒ７ 文 献 标 识 码 ： Ａ Ｄ Ｉ 码 ：０３ ６／．ｓ ． ０ — ５ ０２ １ ．４０ ０ Ｏ 编 １ ．９ ９ｊ ｓ １ ６ ６ ０ ．０ ２０ ．３ ｉｎ ０
二氢 钾 ０１ 硫 酸 镁 ００ ％ ， ．％， ．５ 维生 素 Ｂ ０ｍ ・一 １１ ｇ Ｌ ，
自来 水 １０ｍＬ Ｈ值 ６ ６５ ０ ，ｐ ～ ．。
体 上 ， 成 分 、 用 价 值 等 同于 资 源 稀 少 、 长 条 其 药 生 件苛 刻 的冬 虫 夏 草 ， 是冬 虫 夏 草 的理 想代 用 品＿ 。 ４ ＿ 然 而 蛹 虫 草 菌 种 容 易 变 异 ， 定 性 差 ， 色 调 控 稳 转 不 易 掌握 ， 工 栽 培 形 成 子 座 难 度 大 【 人 ６ 。为 了 解 ＿ 决 这 个 难 题 ， 者 以蛹 虫 草 菌 液 体 培 养 获 得 最 大 笔 菌 体 量 为 响 应 值 ［１， 究 确 定 蛹 虫 草 菌 液 体 培 ８０ 研 －］ 养 基 最 佳 配 方 ， 蛹 虫 草 产 业 开 发 利 用 提 供 新 的 为
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展蛹虫草，又称冬虫夏草，是一种珍稀药用真菌。
它具有多种药理活性成分，被广泛用于治疗各种疾病。
由于野生蛹虫草数量稀少，价格昂贵，因此人工培养蛹虫草已成为研究的热点。
本文将介绍蛹虫草人工培养的研究进展。
蛹虫草的人工培养起源于20世纪50年代，但直到70年代才取得了重要突破。
在人工培养过程中，关键的一步是选择适宜的培养基。
目前常用的培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂培养基、土壤培养基和液体培养基等。
不同培养基的配方和制备方法会影响到蛹虫草的生长和产量。
研究人员通过多次试验和不断优化，逐渐提高了蛹虫草的人工培养效果。
人工培养蛹虫草的关键技术之一是菌丝体的分离和培养。
菌丝体分离是指从蛹虫草子实体中分离出单个的菌丝体，用于繁殖和培养。
由于采集到的蛹虫草子实体中可能含有其他真菌的孢子，因此需要通过特定的处理方法，如消毒、分离等，来保证分离的菌丝体是纯种的。
菌丝体培养则是将分离得到的菌丝体接种在适当的培养基上，通过提供适宜的条件，如温度、湿度、光照等，促进其生长和繁殖。
人工培养蛹虫草的关键技术还包括菌种的选育和繁殖。
菌种的选育是指通过筛选和优化，选择出具有良好生长性能和药用成分含量的菌种。
常用的选育方法包括单菌隔离、菌株筛选和优化培养条件等。
菌种的繁殖是指通过培养和传代，不断扩大菌种的数量。
常用的繁殖方法包括菌丝体接种、分生孢子接种和菌种液体培养等。
人工培养蛹虫草还需要解决一些问题和挑战。
其中一个重要问题是蛹虫草的产量和质量。
目前虽然已经取得了一定的进展，但仍然不能满足市场需求。
如何进一步提高蛹虫草的产量和质量，是人工培养的一个重要方向。
另一个挑战是保持蛹虫草的药用成分和药理活性。
研究人员需要通过调控培养条件和优化处理方法，来保证蛹虫草的药用价值不受影响。
蛹虫草的人工培养研究已经取得了一些重要的进展，但仍然面临一些挑战和困难。
通过不断的研究和创新，相信人工培养蛹虫草的技术将不断完善，为保护和利用蛹虫草资源做出更大的贡献。
蛹虫草液体培养基的优化试验研究
Ｓ ｅｉ ｉ ｃ ｎ ｍｉ Ａｎｍａ ａ ｄＰａｔ ｓａｃ ｐ ｃ ｌ ｌ Ｅ ｏ ｏ ｃ ｉ ｌ ｎ ｌ ｅｒｈ ａＷ ｄ ｎ Ｒｅ
Байду номын сангаас特 产 研 究
文 章编 号 ：０ １ ４ ２ （ ０ ０ ０ － ０ ０ ０ １ ０ — ７ １ ２ １ ）３ ０ ３ － ３
蛹虫草液体培养基 的优化试验研 究
Ｑ ＮＸ ｕ ｌ ，Ｚ Ｏ ＧＳ ｕ ｒｎ２ Ｉ ｉ－ｉ Ｈ Ｎ ｈ －ｏｇ
（ ．ｌ ｒ ｕｔｒ ｃ ｎ ｅ ｎ ｅ ｈ ｏ ｇ ｏ ｅ ｅＪ ｉ １ ２ １Ｃ ｉａ １ ｉｎ ｉ ｌ ｅＳ ｉ ｃ ｄ ｃ ｎｌ ｙＣ ｌ ｇ ，ｉｎ ｈｎ ； Ｊ ｉ Ａｇ ｃ ｕ ｅ ａ Ｔ ｏ ｌ ｌ ３ １ ， ０
关键词 ： 蛹虫草 ； 液体培养 ； 培养基 ； 菌丝体 中图分类 号： ９５３ Ｑ ４． 文献标识码 ： Ａ
Ｏｐ ｉ ｉａ ｉ ｎ Ｔｅ ｔ ｆ ｑ ｉ ｅ ｉ ｍ ｆＣｏ ｄ ｃ ｐ ｉ ｔ ｒｓ ｔｍ ｚ ｔ ｓ ｕ ｄ Ｍ ｄ ｕ ｏ ｒ ｙ ｅ ｓＭ ｌ ａ ｉ ｏ ｏ Ｌｉ ｉ
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Ｋ ｅ ｒ ｓ： ｌ ａ ｉ ； ｑ ｉ ｕ ｔ ｒ Ｍ ｅ ｉｍ ； ｃ ｌ ｍ ． ｙ ｗｏ ｄ Ｍｉｔ ｒｓ Ｌｉｕ ｄｃ ｌｕ ｅ； ｄ ｕ Ｍｙ ｅｉ ｉ ｕ
蛹虫草又称北冬虫夏草 ， 是著名 的食药用菌 ， 具有 较高的食药用价值ｌ 其菌体内蛋 白质含量高达 ４ ％ 以 ｌ １ 。 Ｏ 上 ，氨基酸种类齐全 （ 中含有人 体必需的 ８ 其 种氨基
ｈ ｇ ｎ ｌｔｓ ： ｔ ｏ ｏ ａ ｅ ｔ ３ ％ ｓ ｃｏ ｅ， ％ ｙ ａ ｔｅ ｔａ ｔ ０ １ ％ ＫＨ２ Ｏ４０ １ ％ ｏ Ｓ ． ｅ ｓｕ ｙ ｐ ｏ ｉｅ ｈ ｏ ｅｉａ ａ ｉ ｒ ｕ ｒｓ ３ ｅ ｓ ｘｒｃ ， ． Ｐ ， ． ５ ｆＭｇ Ｏ４ Ｔｈ ｔ ｄ ｒ ｖｄ ｓ ａｔ ｅ ｒｔ ｌｂ ｓｓｆ ｃ ｏ
蛹虫草液体菌种培养基的正交设计优化
用菌 ， 始载 于《 新 华 本草 纲要 》 ， 称其“ 味甘 ， 性平” ， 有 “ 益肺肾 、 补精 髓 。 止 血 化痰 ” 的功 效【 ２ Ｊ （ 。 ” 。现 代 中 医 学 著作 《 中华药 海》 也记 载其 “ 性 味甘 、 平， 入肺 、 肾二
经” ｆ ３ １ （ ２ ０ ２ ４ ） ， 《 全 国中草 药 汇 编》 记载 “ 蛹虫草（ 北虫草 ）
中 图分 类 号 ： ￥ ５ ６ ７ ． ３ ５ 文献标识码 ： Ａ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ９ １ ６ １ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ４ — ０ ０ ７ ４ — ０ ３
蛹虫草『 Ｃ ｏ ｒ ｄ ｖ ｃ ｅ ｐ ｓ ｍｉ ｌ ｉ ｔ ａ ｒ ｉ ｓ （ Ｌ ． ） Ｌ ｉ ｎ ｋ ］ 又 名 北 冬 虫 夏草 、 北虫 草 、 虫草 花 等 ， 与著 名 药 用 菌 冬虫 夏 草 同
的子 实体 及虫 体也 可作 为冬 虫 夏草 入药 ” ［ ４ １ （ ２ ７ ５ ） 。 现代 研 究 发现 ， 蛹 虫草 含虫 草素 、 虫 草酸 、 虫 草 多糖 、 核 苷
腺 苷 、超 氧化 物歧 化 酶等 多种 生物 活性 成 分 ，以及
白胨 １ ％， ＫＨ ２ Ｐ ０ ４ ０ ． ２ ％， Ｍｇ Ｓ ０ ４ ０ ． １ ％， ｐ Ｈ 自然 。
硒、 钙、 铁、 锌 等有益 微 量元 素 ， 具有 消炎 、 抗 肿瘤 、 降 血糖 、 抗衰老 、 抗病毒 、 提 高机体 免 疫 力 等作 用 【 ５ １ 【 。
大量 的药 理及 临 床试 验证 明 ，蛹虫 草 的功 效成 分 和
接到 Ｐ Ｄ Ａ平 板培 养 基 中央 。 于２ ５ ｃ ｃ 恒 温箱 中倒 置 培 养， 待 菌丝 长满 平板 后备 用 。
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展蛹虫草是一种具有珍贵药用价值的药食两用真菌，最早发现于中国西南地区。
近年来，随着蛹虫草市场的扩大和需求的不断增加，蛹虫草的自然种群数量急剧下降，已经成为濒危物种。
因此，为了保护和合理利用蛹虫草资源，人工培养技术已成为研究的重点。
蛹虫草的人工培养技术在基础研究和应用领域都有较大的进展。
目前，人工培养技术主要分为两类：基于固体培养和基于液体培养。
在固体培养中，研究人员通过改良培养基配方、培养条件等措施，使蛹虫草的菌丝生长速度增强、子实体产量提高等。
而液体培养通过提高酵母质量和增加营养物质的供应，可以稳定地控制蛹虫草的生长和发育，以实现高效产出。
已有多种培养基配方被证实能促进蛹虫草的生长。
例如，Liu等人(2013)通过对蛹虫草子实体培养基中成分的优化，使得子实体的干重比对照组提高了50%以上。
Shentu等人(2014)使用一种新的培养基实现了蛹虫菌株的高效增殖和子实体产生。
此外，一些其他的成分也被证明对蛹虫草的生长有着重要的影响，例如植物提取物、微生物菌剂、酵母粉等等。
同时，掌握合适的生长条件也对蛹虫草的人工培养至关重要。
Ding等人(2017)研究表明，控制温度和湿度是蛹虫草成功培养的关键。
他们发现，将温度控制在22到28摄氏度之间、湿度控制在75%到85%之间可以促进菌丝的生长和子实体的形成。
除了基础研究，蛹虫草的人工培养技术在应用方面也得到了广泛的发展。
目前，蛹虫草被广泛应用于中药、保健品和化妆品等领域。
通过人工培养技术，蛹虫草的产量得到了显著提高，成本也得到了降低，从而更加为广大消费者所接受。
总的来说，蛹虫草的人工培养技术在过去几十年中得到了快速的发展，为保护和合理利用蛹虫草资源提供了有力的手段。
未来，我们将继续探索新的能够增加蛹虫草产量和提高品质的技术手段，以更好地满足市场需求和人民健康的需要。
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展蛹虫草，又称虫草菌，是一种珍贵的中药材，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理活性，被广泛用于中医药学和保健食品等领域。
由于蛹虫草起源于自然环境中，自然采集量有限，很难满足市场需求。
人工培养蛹虫草成为了研究的重点之一。
本文将介绍蛹虫草人工培养的研究进展。
蛹虫草的人工培养主要分为植物基质培养和液体培养两种方式。
植物基质培养是将蛹虫草菌孢接种在适宜的植物基质上，通过提供适当的养分和环境条件，使其生长繁殖并产生虫草子实体。
常见的植物基质包括糠醛、木屑、胚乳等。
液体培养是将蛹虫草菌种直接培养在液体培养基上，通过摇床或搅拌发酵罐等设备进行培养。
在植物基质培养方面，研究者通过优化基质配比、添加适宜的氮源、磷源等营养物质，调控培养温度、湿度、通气等环境条件，改进接种方法，提高了蛹虫草子实体的产量和质量。
研究发现添加稻草和玉米秸秆等植物基质，可以更好地促进虫草的子实体生长。
添加适量的氨基酸和蛋白质可以提高虫草菌菌丝生长速度和产子实体能力。
通过优化液体培养基的配方和培养条件，也能够实现蛹虫草菌丝的快速繁殖和高产子实体。
蛹虫草的人工培养已经取得了巨大的进展。
通过优化植物基质培养和液体培养的条件，可以实现蛹虫草菌菌丝的高产和高质量的子实体。
研究者还利用生物技术手段，如遗传改良、基因工程等，来提高蛹虫草的培养效果。
蛹虫草的人工培养仍然面临一些挑战，如培养成本高、生产规模小等问题，需要进一步的研究和改进。
相信随着科学技术的不断进步和人们对蛹虫草需求的增加，蛹虫草的人工培养将会有更好的发展前景。
蛹虫草培养基配方
蛹虫草培养基配方蛹虫草培养基配方2.4.1斜面培养基PDA培养基:去皮马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、琼脂18g、水1000mL，pH自然。
2.4.2液体种子培养基去皮马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20 g、MgSO4;1.0 g、KH2PO4;1.0 g、定容至1000mL，pH自然。
2.5实验方法2.5.1蛹虫草固体培养2.5.1.1固体培养基配制固体培养基为大米培养基，即每瓶分别加入40 g大米与50mL营养液，然后于压力0.12MPa、温度121℃下灭菌20min。
原营养液成分如下:葡萄糖5g/L、黄豆8g/L、奶粉5g/L、柠檬酸三铵 1.0g/L、磷酸二氢钾 1.0g/L、硫酸镁 1.0g/L、维生素B110mg/L。
2.5.1.2菌种的活化将保存的原始菌株接种到PDA培养基上，23℃暗培养7d，得到活化的菌种。
2.5.1.3制备液体菌种将活化的菌种块(lcm-1cm)接入液体培养基中，静止培养24h后置于摇床上进行悬浮培养(转速为110r/min)，在23℃的条件下暗培养6d，得到液体菌种，将液体菌种用磁力搅拌器打碎后即可用于接种。
2.5.1.4接种在无菌条件下，往每瓶大米培养基中接种15ml稀释了250倍的液体菌种。
2.5.1.5菌丝体培养将接种好的培养瓶置于温度22℃、湿度55一60%条件下暗培养6d左右，直至菌丝体长满整个培养基表面和吃透整个培养基。
2.5.1.6子实体培养将菌丝体已长好的培养瓶置于有光照的适宜环境下培养至形成原基及子实体成熟。
2.5.1.7子实体采收待子实体成熟后，进行采收并称取每瓶子实体鲜重，然后于45℃条件下烘干至恒重，称每瓶子实体干重。
蛹虫草人工培养研究进展
蛹虫草人工培养研究进展蛹虫草是中药材中的一种珍品，具有抗肿瘤、免疫调节、抗炎解毒等多种药理作用，在临床上得到广泛应用。
然而，野生蛹虫草资源日益稀缺，种植成本高昂，因此人工培养蛹虫草已经成为一个研究热点。
本文将介绍蛹虫草人工培养的研究进展。
一、基础培养技术人工培养蛹虫草的基础是菌种培养、种子培养和培养条件的优化。
蛹虫草是由蛹草菌侵染蝴蝶的幼虫形成的，因此，先要培养蛹草菌。
蛹草菌的培养需要用到固体培养基和液体培养基。
种子培养是人工培养蛹虫草的关键，种子的质量和数量直接决定了蛹虫草的产量和质量。
种子培养的条件包括温度、湿度、营养和光照等。
优化培养条件可以提高种子发芽率和成活率。
二、种植技术人工培养蛹虫草的种植技术包括箱式种植和袋式种植。
箱式种植是将种子埋在培养土中，放在箱子里培养，袋式种植是将种子放在壳膜袋中，加入培养基，随后培育。
袋式种植的优点是方便管理、容易掌握和适应性强。
种植前要对土壤酸碱度、水分和肥料进行合理调节，保证蛹草的正常生长。
三、发酵技术发酵技术是人工培养蛹虫草的核心技术。
主要分为液体发酵和固体发酵两种。
液体发酵是将种子放入发酵罐中，加入培养基，利用培养基中各种成分为蛹草提供营养，控制发酵温度、湿度、通气等条件，使生长的蛹草在罐中快速繁殖。
固体发酵是将种子放在发酵袋中，加入培养基，将发酵袋密封好，然后放置在适当温度、湿度和光照条件下进行发酵。
固体发酵适用于少量生产，表面不容易产生异味。
四、气候控制技术气候控制技术是一种可调节环境温度、湿度、光照等参数的技术，是保证人工培养蛹虫草成功的重要保障。
温度是影响人工培养蛹虫草的关键环境因素，通常在20~25度的范围内控制。
湿度是影响蛹虫草发芽、生长和发育的重要因素，因此对人工培养蛹虫草的湿度也需要进行精细控制。
光照可以影响蛹草菌、一培种和蛹虫草等的生长和发育，需要根据不同阶段对光照时间和强度进行调节。
总之，蛹虫草人工培养技术的研究是医药领域的重要课题，未来将有更多的研究突破和创新。
人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化
人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化
蛹虫草是一种珍贵的中草药，具有重要的药用价值。
在传统的人工栽培过程中，蛹虫
草的发酵工艺是非常关键的环节，可以影响蛹虫草的产量和质量。
为了优化蛹虫草液体菌
种的发酵工艺，提高产量和质量，本文将从菌种培养基、培养条件等几个方面进行优化。
我们需要选取适宜的菌种培养基。
蛹虫草的菌种培养基主要由碳源、氮源、微量元素
和调节剂等组成。
对于蛹虫草的菌种培养基优化，可以选择蔗糖、麦芽糖、玉米浆等为碳源；酵母提取物、玉米浆蛋白等为氮源；Na2HPO4、MgSO4·7H2O等为微量元素。
还需要添加适量的调节剂，如亚洲指南洋参甙等，以提高菌种的生长和发酵效果。
调节培养条件也是优化菌种发酵工艺的重要步骤。
菌种的培养温度和pH值都会对发酵效果产生影响。
通常情况下，适宜的培养温度为25-30℃，而适宜的pH值为5-7。
光照条
件也是需要优化的因素之一。
适度的光照可以促进菌种的生长和发酵，但过强的光照会对
菌种的生理代谢产生不利影响。
需要合理控制光照条件，以提高菌种的产量和质量。
发酵时间也是优化菌种发酵工艺的关键因素之一。
蛹虫草的发酵时间一般在15-20天
左右。
在发酵过程中，需要定期检测菌种的生长情况和代谢产物的积累情况，以确定最佳
的发酵时间。
还可以通过添加适量的促进剂，如麦芽糖、酵母提取物等，来加速发酵过程，提高菌种的产量。
蛹虫草液体培养基的研究
蛹虫草液体培养基的研究顾寅钰 张亚平 施新琴 刘志斐 李化秀(山东省蚕业研究所) 蛹虫草与冬虫夏草同属异种,是我国分布最广的具有药用价值的两种虫草菌。
蛹虫草(Cordyce p sm ilitarisL L ink)亦称北虫草或北冬虫夏草,属于真菌门(Eum ycota),子囊菌亚门(A seom ycotina)、肉座菌目(Hypocreales)、麦角菌科(C lavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps),寄生于夜蛾科等蛹体上,分布于世界各地,是一种国内外公认的既可食用又可药用的真菌。
研究表明蛹虫草与冬虫夏草具有相同的属性,相似的药理功能及相近的临床效果,可替代冬虫夏草入药。
野生虫草资源有限,因此人们开始转而研究蛹虫草的人工栽培。
蛹虫草对于生长环境的要求相对较低,人工培养相比之下较为容易,除了可经液体发酵形成菌丝体外,还可通过人工大规模固体培养获得子实体,另外通过活体培养进行规模化蛹虫草生产也成为现实。
而且现有的多数文献认为人工培养的蛹虫草其有效成分和含量与冬虫夏草相仿,有的甚至更高。
所以,近年来蛹虫草的研究取得了迅速的发展。
培养基的成分对蛹虫草的生长影响较大,碳源、氮源、无机盐和PH值等都是影响蛹虫草生长的重要因素,因此本文对其液体培养基进行了研究。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌种 菌种为来自锦州的草头6-1。
1.1.2 药品 葡萄糖、土豆、蛋白胨、硫酸、氢氧化钠、磷酸二氢钾和硫酸镁。
1.1.3 基础培养基 葡萄糖(适量)、蛋白胨(适量)、硫酸镁1g、磷酸二氢钾2g、水l000 mL,制备方法同常规。
1.1.4 设备和仪器 恒温培养箱、高压灭菌锅、超净工作台、电子称、光电显微镜、高温干燥箱、血球计数板、滤纸等。
1.2 方法1.2.1 接种与培养 每个三角瓶内培养基为100m l,接种时按无菌操作要求,向各三角瓶中央接入菌悬液0.1m l,孢子液的浓度用血球计数板测定。
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蛹虫草母种培养基配方优化研究作者：张志瑾等来源：《天津农业科学》2013年第10期摘要：采用6种不同配方的固体培养基对蛹虫草菌株的菌丝体进行培养，以菌种初萌发时间、菌丝长速、菌丝长势、菌丝长满斜面所需时间为指标，筛选出蛹虫草母种最佳培养基。
结果表明：母种培养基的最佳配方为：20%马铃薯提取液中加入1%葡萄糖、1%蛋白胨、2%琼脂、0.5%KH2PO4、0.3%MgSO4、VB1（10 mg·L-1）， pH值5.8。
在该培养基上，菌种的初萌发时间最短，为2 d；菌丝长速最快，为6.3 mm·d-1；长势最强；菌丝满管时间最短，为10 d。
关键词：蛹虫草；母种培养基；配方；优化中图分类号：S646 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.10.004蛹虫草[Cordyceps militaris （L.）Link.]又称北冬虫夏草，北虫草，与冬虫夏草同属异种，隶属真菌门、子囊菌亚门、核菌纲、麦角菌科、虫草属，是蛹虫草真菌寄生在鳞翅目夜蛾科昆虫蛹体上形成的子座与蛹体的结合体[1-2]。
蛹虫草是著名的食药用菌，具有较高药用价值，具有补肺益肾、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老、美容养颜等保健作用，以及显著增强免疫力的功能[3-4]。
其菌体内蛋白质含量高达40%以上，氨基酸种类齐全（其中含有人体必须的8种氨基酸），并含有锌、铜、硒等多种微量元素，其维生素不但种类多，且含量极为丰富。
虫草属真菌的深层培养，主要目的是大批量生产菌丝体，并从培养液中提取虫草素、虫草酸、虫草多糖、甘露醇、SOD等多种有效成分[5-6]。
经中国中医研究所等权威机构检测发现，蛹虫草中各种有效成分的含量均接近甚至超过冬虫夏草。
近年来，人们把人工培育的蛹虫草作为冬虫夏草的替代品，以替代天然冬虫夏草的不足。
研究表明，蛹虫草的菌丝体和子实体具有基本相同的有效成分及药用与滋补功效[7]。
蛹虫草母种培养基的研究已有一些报道，但所述培养基各有不同，产量与品质也高低不一，这种情况严重影响其产业发展。
在蛹虫草的母种培养中，培养基的配方是否优良，直接影响菌丝体的生长。
因此，对蛹虫草母种培养基进行优化研究，筛选出适合蛹虫草菌丝体生长的最佳母种配方具有一定的理论与实际意义。
本试验以不同的研究人员试验获得的6种母种培养基为基础，以菌种初萌发时间、菌丝长速、菌丝长势、满管时间为指标，筛选出母种培养基的最佳配方，以期应用于蛹虫草的生产和科学研究。
1 材料和方法1.1 菌种蛹虫草试管母种由华中农业大学微生物教研室提供。
1.2 主要仪器不锈钢立式压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械厂生产，型号：LDZX-30FB；超净工作台，苏净集团安泰公司制造，型号：SW-CJIFD；恒温培养振荡器，天津市欧诺仪器仪表有限公司生产，型号：HNY-2102。
1.3 培养基设计根据蛹虫草生长所需营养条件及不同研究人员提供的最佳配方确定。
1.3.1 配方1 葡萄糖10 g、蛋白胨10 g、琼脂20 g、MgSO4 0.3 g、KH2PO4 0.5g 、VB1（50 mg·L-1）、蒸馏水1 L、pH值5～6。
1.3.2 配方2 葡萄糖10 g、牛肉膏10 g、琼脂25 g、MgSO4 0.6 g、KH2PO4 2 g、乙酸钠5g、柠檬酸二胺2 g、MnSO4 0.25 g、吐温80 mL、酵母粉5 g或酵母膏10 g、蒸馏水1 L、pH 值6.2～6.4。
1.3.3 配方3 蛋白胨10 g、牛肉膏3 g、琼脂17 g、NaCl 5 g、蒸馏水1 L、pH值7.2左右。
1.3.4 配方4 葡萄糖10 g、琼脂20 g、MgSO4 1 g、KH2PO4 1.5 g、VB1（50 mg·L-1）、CaCO3 1 g、蒸馏水1 L、pH值5～6。
1.3.5 配方5 葡萄糖15 g、柠檬酸铵2.5 g、琼脂20 g、乙酸钠5.5 g、MgSO4 0.65 g、MnSO4 0.3 g、KH2PO4 1.5 g、蒸馏水1 L、pH值自然。
1.3.6 配方6 20%马铃薯提取液中加入1%葡萄糖、1%蛋白胨、2%琼脂、0.5%KH2PO4、0.3%MgSO4、VB1（10 mg·L-1）、蒸馏水1 L、pH值5.8。
1.4 方法步骤1.4.1 培养基制备、分装与灭菌按培养基制备的常规技术，分别制作以上6种配方培养基。
配方中有马铃薯者，将马铃薯削皮、去掉芽眼切块（0.5 cm×1 cm），称质量。
置沸水中煮30 min，用4层纱布过滤挤压取其汁液至于烧杯中，同时加入琼脂及其它药品搅拌使其充分溶解，加水定容至1 L，测定并调整酸碱度。
将制备的培养基分别装入试管中，装量为管高的1/4。
每种配方装6支试管，塞上棉塞封口，捆扎。
在压强1.14×105 MPa、温度120 ℃下高压灭菌30 min后，待高压锅的气压降至0，将试管取出冷却并搁置斜面，然后将其放入28～30 ℃室温中培养48 h进行无菌检验。
检查完毕将其置于超净工作台中备用。
1.4.2 接种与培养接种前将母种菌株搁置在恒温箱中活化1 d，然后菌种移入接种室，在超净工作台中按无菌操作要求，向试管斜面中央接种，接种块大小为5 mm×25 mm。
注意接种块不要碰到其它部位，以免影响菌种萌发后菌丝体的观察。
每种培养基配方接6支试管。
接种后移入恒温箱中培养，培养条件为18.5～19 ℃，无光照。
接种后每2 d记录菌落形成及菌丝生长情况。
1.4.3 测定菌丝长速菌丝长速是菌丝生长的指标。
将菌丝接种到斜面培养基中，每天测量1次菌落直径，直至菌落满管为止。
观察并记录每种配方6支试管中菌丝的生长情况，重复3次取其平均值。
1.4.4 统计满管天数满管天数是菌种接种到斜面培养基上，到菌丝布满斜面所需要的时间。
观察并记录每种配方6支试管的满管时间，重复3次取其平均值。
1.4.5 观察菌种初萌发天数从菌种接种到培养基上开始观察，到接种块周围长出白色绒毛状菌丝体，这段时间为菌种初萌发时间。
从接种开始，每24 h观察并记录每种配方6支试管中菌种的萌发情况，重复3次取其平均值。
1.4.6 观察菌丝长势菌丝长势是评价菌丝生长情况的重要指标。
以菌丝的洁白程度、生长健壮程度、菌丝浓密程度、菌台厚度为指标，观察并记录每种配方6支试管中菌丝的长势。
观察结果用很强、强、较强、弱4个等级表示。
2 结果与分析2.1 菌丝长速不同配方培养基上菌丝的生长速度如图1。
在不同培养基上菌丝长速在4.7～6.3 mm·d-1之间。
其中配方6长速最快，配方1次之，配方2最差。
2.2 菌种初萌发天数不同培养基菌种初萌发天数如图2所示。
不同培养基上菌种初萌发天数约在2 d左右，其中配方2萌发时间最长，为2.7 d；配方5为2.3 d；其他配方均为2 d。
2.3 菌丝体满管时间不同培养基菌丝的满管天数如图3。
菌丝满管时间在10～14 d之间。
其中配方2满管所需时间最长，为13.4 d；其后依次为配方5、配方3、配方4、配方1，配方6所需时间最短，为10 d。
2.4 菌丝在不同配方培养基上生长情况菌丝体在不同配方培养基上的长势如表1。
配方6和配方1菌丝长势最强，菌丝洁白、浓密，菌台厚；配方3、配方4次之；配方2长势最差，菌丝稀疏，易污染，菌台薄；配方5长势稍强于配方2，但与其它配方相比长势较差。
3 结论与讨论配方6和配方1的菌丝生长情况最好，菌种初萌发时间短，菌丝长速快，菌丝长势很强，满管时间短。
其次为配方3、配方4，配方5和配方2菌丝生长情况最差。
配方6菌丝生长情况稍优于配方1，由于配方6中含有马铃薯提取液，作为碳源马铃薯提取液优于蔗糖和葡糖。
配方3优于配方4，配方3菌丝长速和满管时间虽然不是最快，但由于母种培养基中对菌丝的生长氮源比碳源影响大[8]，牛肉膏是最佳氮源[9]。
而配方4中无氮源。
配方5、配方2生长情况最差，由于配方5中只有少量柠檬酸铵作为氮源，氮源浓度不足。
配方2中含有牛肉膏、柠檬酸二胺，酵母粉或酵母膏氮源丰富浓度过大，菌丝长势差。
研究表明同一氮源浓度以10 g·L-1为佳[9]。
配方6含有最佳碳源及生长因子，所以菌种初萌发时间短、长速快、长势强，菌种满管时间短。
牛肉膏做氮源综合指标虽然最好，但菌丝长速和满管时间并不是最快。
蛹虫草生长过程中所需氮源以牛肉膏最佳，氮源浓度要适宜。
本试验是从不同研究人员所获得的6种配方中筛选的最佳母种培养基配方，至于是否还存在其它配方更有利于蛹虫草菌丝体的生长，还有待于在以后的试验中进行深入的研究和探讨。
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