常用培养基配方
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物。
根据微生物的特性和应用需求，可以设计出不同成分和配方的培养基。
以下是几种常见的培养基配方：1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）的配方：-牛肉膏：5g-蛋白胨：5g-水解酵母膏：1.5g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将牛肉膏、蛋白胨和水解酵母膏溶解在蒸馏水中，添加纯化琼脂，混合并加热直至溶解，然后倒入培养皿中。
2. EMB（Eosin Methylene Blue）培养基的配方：-蛋白胨：17g-明胶胨：3g-乳糖：10g-酵母提取物：3g-果糖：1g- Eosin Y：0.4g-亚甲蓝：0.065g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将蛋白胨、明胶胨、乳糖、酵母提取物和果糖溶解在蒸馏水中，加热并搅拌至溶解，然后添加Eosin Y和亚甲蓝，最后加入纯化琼脂，混合并倒入培养皿中。
3. 铡锰培养基（Sabouraud Agar）的配方：-葡萄糖：40g-酵母膏粉：5g-水解麦粉：15g-纯化琼脂：15g-蒸馏水：1000mL将葡萄糖、酵母膏粉和水解麦粉溶解在蒸馏水中，加热并搅拌至溶解，然后添加纯化琼脂，混合并倒入培养皿中。
4.胰蛋白酶-大豆酪蛋白肉汤培养基（TRYPTICASE™SOYBROTH）的配方：-胰蛋白酶胨：15g-大豆酪蛋白胨：5g-食盐：5g-葡萄糖：20g-蒸馏水：1000mL将胰蛋白酶胨、大豆酪蛋白胨、食盐和葡萄糖溶解在蒸馏水中，混合并加热至溶解，然后冷却至室温。
5. M9盐碱培养基（M9 minimal medium）的配方：-磷酸一氢二钾：3g-硫酸镁：0.5g-氯化钠：0.5g- 氨氯化铁：7.5mg-葡萄糖：4g-去离子水：1000mL将磷酸一氢二钾、硫酸镁、氯化钠和氨氯化铁溶解在去离子水中，混合并加热至溶解，然后冷却至室温后添加葡萄糖。
这只是几种常见的培养基配方，实际上还有很多不同成分和配方的培养基。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
这些是一些常用的培养基配方，适用于细菌和真菌的培养。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境，其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一，其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下：-琼脂：15g-蔗糖：10g-牛肉膏粉：3g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化镁：0.5g-氯化钾：0.2g-高锰酸钾：0.0001g-蛋白胨：3g-酵母提取物：3g- 菜子油：0.5ml- 蒸馏水：1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基，其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下：-牛肉膏粉：3g-蛋白胨：5g-葡萄糖：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：2g-氯化镁：0.5g- 蒸馏水：1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基，其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下：-紫砂：15g-蔗糖：30g-蛋白胨：2g-磷酸二氢钾：1g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基，其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下：-麦芽粉：10g-蔗糖：30g-蛋白胨：5g-氯化钠：5g-氯化钙：0.1g- 蒸馏水：1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基，其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下：-铁蛋白：10g-蔗糖：10g-蛋白胨：2g-氯化钠：5g-磷酸二氢钾：1g-氯化钙：0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良，以提高微生物的生长和培养效果。
同时，在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作，以避免试验的污染和杂质的干扰。
各种培养基的制作方法
配方一萨氏(Sabouraud's)培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。
1、营养肉汤培养基牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7、0～7、2在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨与NaCl,加热溶化后,调节pH值至7、0～7、2。
分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌即成。
常用于培养细菌。
2、营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。
常用于培养细菌。
3、肉汁蛋白胨液体培养基牛肉 500克蛋白胨 10克NaCl 5克pH 7、1～7、2取新鲜牛肉500克,去净脂肪、筋腱后,绞碎或剁碎,加水1000毫升浸泡,15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。
用纱布将肉汁过滤,补足失水。
向肉汁中加入蛋白胨与食盐。
将肉汁加热,放入苏打(碳酸钠)至红色,调整pH值。
分装,高压蒸汽灭菌。
将上述已灭菌得培养基用棉花滤去凝集得蛋白质,制成液体培养基,如需制成固体培养基,可在每100毫升液体中加入2克琼脂,加热溶化后,分装,再次进行高压蒸汽灭菌。
常用于培养细菌。
4、高氏一号培养基(淀粉琼脂培养基)可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO4·7H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克琼脂 2克水 100毫升pH 7、2～7、4在烧杯中加水95毫升,加热至沸腾,取可溶性溶粉2克,用5毫升水调成糊状,倒入沸水中与匀。
再称取其它药品,陆续加入烧杯内(待一种药品溶解后,再加入第二种药品)。
待全部药品溶解后,停止加热,补足失水,调pH值至7、2～7、4。
分装后,高压蒸汽灭菌。
本培养基常用于培养放线菌。
5、马铃薯蔗糖培养基马铃薯 200克蔗糖 10克琼脂 20克水 1000毫升自然pH称取200克马铃薯片,加水1000毫升,煮沸半小时,用纱布过滤,补足失水。
常用25种培养基详细配方
一、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15—20g水1000mlpH 7．0—7．21．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
二、淀粉琼脂培养基(高氏1号培养基，培养放线菌用)可溶性淀粉20gKNO31gNaCl 0．5gK2HPO40．5gMgSO40．5gFeSO40．01g琼脂20g水1000mlpH 7．2—7．4配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状，在火上加热，边搅拌边加水及其他成分，溶化后，补足水分至1000ml。
1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
三、查氏培养基(培养霉菌用，实验16)NaNO32gK2HPO41gKCl 0．5gMgSO40．5gFeSO40．01g蔗糖30g琼脂15—20g水1000mlpH 自然1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
四、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5gKH2PO41gMgSO4·7H2O 0．5g1/3000孟加拉红(rose bengal，玫瑰红水溶液)100ml琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800ml0．56kg/cm2(8磅/英寸2)，112．6℃灭菌30分钟。
临用前加入0．03%链霉素稀释液100ml，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
五、马铃薯培养基(实验16)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂15—20g水1000mlpH 自然马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000ml。
1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟。
六、麦芽汁琼脂培养基(实验15)1．取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，置15℃阴暗处发芽，上盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
2．将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴锅中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：1. LB培养基（Luria-Bertani）LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺（L-Glutamine）: 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水：使混合液体稀释至所需体积配制方法：将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中，调整pH值至7.4，混合均匀即可。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分：牛肉膏或牛肉汤500克，葡萄糖10克，胰蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分：NaCl300克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分：果胶5克，葡萄糖5克，NaNO32克，K2HPO40.2克，MgSO4·7H2O0.1克，CaCO30.02克，FeSO4·7H2O0.01克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分：土豆提取物4克，蛋白胨2克，乳糖10克，NaCl10克，胆盐0.75克，碱性蓝2克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分：石蜡300克，肉浸膏100克，大豆酪蛋白胨20克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分：肉膏1克，酵母提取物2克，葡萄糖2克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani（LB）培养基成分：酵母提取物5克，酪蛋白胨10克，NaCl10克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖40克，醇20克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分：鱼精膏20克，胆盐胆红素15克，玛琪琼脂25克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分：马加提琼脂50克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖20克，醇30克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
常用培养基配方（微生物学与微生物检验学部分）渤海大学生物与食品科学学院2006年3月目录01糖发酵管02 ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08Hugh－Leifson培养基(O/F试验用)09 马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12 氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水(靛基质试验用)14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)15 尿素琼脂16 氰化钾(KCN)培养基17 氧化酶试验18 硝酸盐培养基19 细胞色素氧化酶试验20 过氧化氢酶试验21 过氧化物酶试验22 磷酸盐缓冲液23明胶磷酸盐缓冲液24 乳酸－苯酚溶液25 肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉(或牛心)消化汤28血消化汤29豆粉琼脂30血琼脂31营养琼脂32营养肉汤33 乳糖胆盐发酵管34乳糖发酵管35 EC肉汤36 缓冲蛋白胨水(BP)37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)41 GN增菌液42 肠道菌增菌肉汤43 亚硫酸铋琼脂(BS)44 DHL琼脂45 HE琼脂46 SS琼脂47 WS琼脂48 麦康凯琼脂49 伊红美蓝琼脂(EMB)50三糖铁琼脂(TSI)51 三糖铁琼脂(换用方法)52 克氏双糖铁琼脂(KI)53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)54 葡萄糖半固体发酵管55 5%乳糖发酵管56 CAYE培养基57 Honda氏产毒肉汤58 Elek氏培养基(毒素测定用)59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60 胰蛋白胨水61 Rustigian氏尿素培养液62 氯化钠结晶紫增菌液63 氯化钠蔗糖琼脂64 嗜盐菌选择性琼脂65 3.5%氯化钠三糖铁琼脂66 氯化钠血琼脂67 3.5%氯化钠生化试验培养基68 改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)69 CIN－1培养基70 嗜盐性试验培养基71 改良Y培养基72 改良克氏双糖73 快速硫化氢(H2S)试验琼脂74 DNA酶甲基绿琼脂(DTA)75 Cary－Blair氏运送培养基76 Skirrow氏培养基77 TTC琼脂78 甘氨酸培养基79 改良磷酸盐缓冲液80 氯化镁孔雀绿肉汤81 胰酪胨大豆肉汤82 Baird－Parker氏培养基83 7.5%氯化钠肉汤84 匹克氏肉汤85 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂86 3.8%柠檬酸钠溶液87 酪蛋白琼脂88 木糖－明胶培养基89 庖肉培养基90 卵黄琼脂培养基91亚硫酸盐－多粘菌素－磺胺嘧啶琼脂(SPS) 92液体硫乙醇酸盐培养基(FT)93含铁牛奶培养基94 动力-硝酸盐培养基（A法）95 动力－硝酸盐培养基(B法)96 血清肉汤97 马丁氏肉汤98 明胶培养基99 察氏培养基100 高盐察氏培养基101 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)102 马铃薯琼脂103 孟加拉红培养基104 玉米粉琼脂105 大米粉培养基106 亚硒酸盐煌绿增菌液107 煌绿肉汤增菌液108 肠毒素产毒培养基109 0.1%蛋白胨水稀释剂110半固体琼脂01 糖发酵管成分：牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法：1葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100mL，121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。
迟缓反应需观察14～30d。
02 ONPG培养基成分：邻硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)10mL1%蛋白胨水(PH7.5)30mL制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm×75mm试管，每管0.5mL，用橡皮塞塞紧。
试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1～3h和24h观察结果。
如果β－半乳糖苷酶产生，则于1～3h变黄色，如无此酶则24h不变色。
03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法：先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化。
然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min。
放成斜面。
试验方法：挑取少量琼脂培养物接种，于36±1℃培养4d，每天观察结果。
阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。
04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分：磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL，121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。
鲜红色为阳性，黄色为阴性。
甲基红试剂配法：10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中，然后加入20mL蒸馏水。
V－P试验：用琼脂培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～4d。
哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。
加入6%α－萘酚－乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL，充分振摇试管，观察结果。
阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃下培养4h再进行观察。
05克氏柠檬酸盐培养基成分：柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000mL制法：加热溶解，分装试管，121℃高压灭菌15min。
放成斜面。
试验方法：用琼脂培养物接种整个斜面，在36±1℃培养7d，每天观察结果。
阳性者培养基变为红色。
06 丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH6.8制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121℃高压灭菌15min。
试验方法：用新鲜的琼脂培养物接种，于36±1℃培养48h，观察结果。
阳性者由绿色变为蓝色。
07 葡葡糖铵培养基成分：氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121℃高压灭菌15min，放成斜面。
试验方法：用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜。
将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。
于36±1℃培养24h。
阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。
如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。
注：容器使用前应用清洁液浸泡。
再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用。
如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。
08 Hugh－Leifson培养基(O/F试验用)成分：蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.2制法：将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正pH至7.2。
加入葡萄糖、琼脂煮沸，溶化琼脂，然后加入指示剂。
混匀后，分装试管，121℃高压灭菌15min，直立凝固备用。
试验方法：从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种，同时接种两支培养基，其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面，高度约1cm，于36±1℃培养。
09 马尿酸钠培养基成分：马尿酸钠1g肉浸液100mL制法：将马尿酸钠溶解于肉浸液内，分装于小试管内，并于管壁画一横线。
以标志管内液面高度，高压灭菌121℃20min。
试剂：三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g，溶于2%盐酸溶液100mL中即成。
试验方法：用纯培养物接种，于42℃培养48h，观察培养液是否到达试管壁上记号处，如不足时，用蒸馏水补足至原量。
经离心沉淀，吸取上清液0.8mL，加入三氯化铁试剂0.2mL，立即混合均匀，经10～15min，观察结果。
结果：出现恒久之沉淀物为阳性。
10营养明胶成分：蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.8～7.0制法：加热溶解、校正至pH7.4～7.6，分装小管，121℃高压灭菌10min，取出后迅速冷却，使其凝固。
复查最终pH应为6.8～7.0。
试验方法：用琼脂培养物穿刺接种，放在22～25℃培养，每天观察结果，记录液化时间。
或放在36士1℃培养，每天取出，放冰箱内30min后再观察结果。
11苯丙氨酸培养基成分：酵母浸膏3gDI－苯丙氨酸(或L－苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法：加热溶解后分装试管，121℃高压灭菌15min，使成斜面。
试验方法：自琼脂斜面上挑取大量培养物，移种于苯丙氨酸琼脂，在36±1℃培养4h或18～24h。
滴加10%三氯化铁溶液2～3滴，自斜面培养物上流下，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。
12 氨基酸脱羧酶试验培养基成分：蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫－乙醇溶液1mLL－氨基酸或DL－氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法：除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL，分别加入各种氨基酸：赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。
L－氨基酸按0.5%加入，DL－氨基酸按1%加入。
再行校正pH至6.8。
对照培养基不加氨基酸。
分装于灭菌的小试管内，每管0.5mL，上面滴加一层液体石蜡，115℃高压灭菌10min。
试验方法：从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36±1℃培养18～24h，观察结果。