1M Tris-HCl 的配制方法

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Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

Tris-HCl及其他几种缓冲液配方D1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法:1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70 ml7.6 约60 ml8.0 约42ml4.将溶液定容至1 L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。

2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓HCl调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1 L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

TE即Tris-EDTA buffer(10mM Tris,1mM EDTA,pH7.4 pH7.6 pH8.0)。

常用分子生物学试剂,用于DNA的溶解等。

配制1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6,8.0)组份浓度: 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA 配制量: 1 L配制方法:1. 量取下列溶液,置于l L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100 ml500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,均匀混合。

3.将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

Tris-HCl及其他几种缓冲液配方

Tris是什么?有什么作用?Tris-HCl,Tris-EDTA如何配制?Tris:三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。

Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。

例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。

由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。

但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。

人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。

这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途:有机合成中间体。

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。

在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外,Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法:1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法

分子生物学常用母液的配置方法(1)0.5M EDTA,PH=8.0往175ml超纯水中加入46.525克Na2EDTA 2H2O,然后加入10克的NaOH,在磁力搅拌器上溶解,用酸度计测量PH值,根据PH值决定再次加入NaOH的量,直至调节PH值至8.0,然后定容至500ml,灭菌后贮存备用。

(2)1M Tris-Hcl, PH=8.0在160ml超纯水中加入24.2克的Tris碱,然后用浓盐酸调PH值至8.0(约需8.4ml的浓盐酸),最后用超纯水定容至200ml。

(用酸度计测PH值)。

灭菌后贮存备用。

(3)TE缓冲液(10mM Tris-Hcl, PH=8.0;1 mM EDTA,PH=8.0)配置100 ml溶液需加入:①1M Tris-Hcl, PH=8.0 1.0ml②0.5 M EDTA,PH=8.0 0.2 ml③超纯水98.8 ml灭菌后贮存备用。

(4) 5M Nacl称146克Nacl 溶于400 ml 超纯水中,然后用超纯水定容至500 ml。

(5) 3.0 NaAc,PH=5.2称24.6克乙酸钠,溶于70 ml超纯水中,然后用冰乙酸调PH值至5.2,最后定容至100 ml。

(6)5M KAc在50 ml 超纯水中溶49.1克的KAc,然后定溶至100 ml。

(7) 2%CTAB提缓冲液(用于DNA提取)①1M Tris-Hcl, PH=8.0 20 ml 100 mM②0.5 EDTA,PH=8.0 8 ml 20 mM③5M Nacl 56 ml 1400 mM加入CTAB 4克,水浴(65℃)或用磁力搅拌器加热溶解,冷却至室温后定容至200 ml。

灭菌后备用。

(8)氯仿/异戊醇(24:1)氯仿96 ml异戊醇4 ml(9)SDS法提取DNA缓冲液(现用现配)配40 ml (最后定容至40 ml)母液量终浓度①1M Tris-Hcl, PH=8.0 4ml 100 mM②0.5 EDTA,PH=8.0 4ml 50 mM③5M Nacl 1.2 ml 150 mM④10%SDS 8 ml 2%(V/W)⑤巯基乙醇30~800μl 0.07~2%(v/v)(10) 10%SDS 溶于80 ml 无菌超纯水中,然后定溶至100 ml。

tris-hcl及其他几种缓冲液配方

tris-hcl及其他几种缓冲液配方

Tris是什么?有什么作用?Tris-HCl,Tris-EDTA如何配制?Tris:三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。

Tris被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。

例如,在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。

由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。

但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。

人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。

这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途:有机合成中间体。

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。

在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外,Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法:1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

生物实验室常用培养基和溶液配制

生物实验室常用培养基和溶液配制

#1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)#组份浓度:1MTris-HCl 配制量:1L配制方法:1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

在800ml水中溶解121.91g Tris碱,加入浓HCl 调节pH值至所需值。

pH 7.4 HCl 70ml; pH 7.6 HCl 60ml; pH 8.0 HCl 42ml4.加水将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

#10&timeTEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量:1L 配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。

3.将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

#1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度:1.5MTris-HCl 配制量:1L配制方法:1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓盐酸调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

#3M醋酸钠(pH5.2)#组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。

#Tris-HCl平衡苯酚#配制方法:1.使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。

溶液配制

溶液配制

实验室常用缓冲液配置方案1×TE Buffer组成浓度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0配制量:500ml配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml0.5M EDTA PH=8.0 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.1)1 M Tris-HCl (pH 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

15)0.5 M EDTA(pH8.0)组份浓度:0.5 M EDTA配制量:1 L配制方法:称取186.1 g Na2EDTA·2H2O,置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值至8.0(约20 g NaOH)。

注意:pH值至8.0时,EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 适量分成小份后,高温高压灭菌。

6. 室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.4)

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.4)

北京雷根生物技术有限公司 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)简介:Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。

Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。

常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。

一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。

1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。

Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4)采用进口Tris 、去离子水配制而成,未经高压灭菌处理,被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。

组成:操作步骤(仅供参考):1、 根据实验具体要求操作。

注意事项:1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

相关:编号 名称 R00225 R00225 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.4) 100ml 500ml RT 使用说明书1份 编号 名称 NR0001 DEPC 处理水(0.1%) PE0018SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 R00227Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.0,无菌) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

常用缓冲液配置

常用缓冲液配置
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需
要,可在配方中补充
6)10 M醋酸铵
组份浓度:10M醋酸铵
配制量:
配制方法:
1.称量77.1 g醋酸铵置于100〜200ml烧杯中, 加入约30ml的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mlo
3.使用0.22 mm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
1mol/LMgCI2:溶解20.3g MgCI2・6H2O于足量 的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲
基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹
或贮存于-20Co
20mg/ml蛋白酶K(proteinaseK):将200mg
1M Tris-HCl
(PH8.0)
25ml
0.5M EDTA
(PH8.0)
20ml
20%Glucose(1.11M)
45ml
dH2O
910ml
2.高温高压灭菌后,4°C保存。
3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNase A(20mg/ml)。
13)Solution 11(质粒提取用)
20>SSC
成分及终浓度
配制1L溶液各成分 的用量
300mmol/L柠 檬酸二钠(二 水)
3mol/L氯化钠 水
88.2g 175.3g补足1L
溶解柠檬酸三钠(二水)和氯化钠于约0.9L水中,加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0,用水 补足体积至1Lo
组份浓度:3M醋酸钠
配制量:100ml
配制方法:
1.称量40.8g NaAc・3H2O置于100-200ml烧杯 中,加入月40ml的去离子水搅拌溶解

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH6.8)

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH6.8)

北京雷根生物技术有限公司
Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8)
简介:
Tris 为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14。

在25℃下,它的pKa 为
8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。

Tris 碱水溶液的pH 10.5左右,一般加入盐酸以调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。

1M Tris-HCl pH6.8和
1.5M Tris-HCl pH8.8是SDS-PAGE 电泳最常用的试剂,用来配制丙烯酰胺凝胶等。

Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8)采用进口Tris 、去离子水配制而成,常用来配制丙烯酰胺凝胶等。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、根据具体实验要求操作。

1、 Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8)对人体有刺激性,请注意适当防护。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号
名称 PE0080
PE0080 PE0080 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) 100ml 500ml
2L RT 使用说明书
1份。

tris-hcl缓冲液稀释方法

tris-hcl缓冲液稀释方法

tris-hcl缓冲液稀释方法
Tris-HCl缓冲液是一种广泛应用的中性缓冲液,可以用于生物化学、分子生物学、细胞生物学等领域。

在实验中,Tris-HCl缓冲液的pH稳定性较好,能够保持在7.2-9.0之间,且氧化还原性和离子强度也较低。

因此,为了确保实验结果的准确性和稳定性,常常需要
对Tris-HCl缓冲液进行稀释。

这里介绍一种Tris-HCl缓冲液稀释方法。

材料和试剂
Tris-HCl缓冲液(1 M,pH 8.0)
反应管
去离子水
稀释方法
1. 准备所需试剂和材料,如Tris-HCl缓冲液、反应管和去离子水。

2. 根据实验需要,计算所需Tris-HCl缓冲液的体积。

3. 另取一支新的干净反应管,向其中加入所需Tris-HCl缓冲液的体积,注意将提示
在瓶子上的pH值调整到所需pH值。

4. 将所需稀释倍数的去离子水加入到反应管中,使得最终Tris-HCl缓冲液的体积达
到所需值。

例如,若需要150 mL 0.1 M Tris-HCl缓冲液,可先加入15 mL 1 M Tris-HCl 缓冲液,然后加入135 mL 去离子水。

5. 使用pH计检查Tris-HCl缓冲液的pH值是否符合所需值。

稀释后的Tris-HCl缓冲液可以在4℃下保存约1个月,也可以根据实验需要进行重新配制。

总结
以上就是Tris-HCl缓冲液的稀释方法,通过此方法,可以根据实验需要快速准确地调配所需体积的缓冲液。

同时,在使用过程中也要注意缓冲液的质量和保存条件,以免影响
实验结果的可靠性和准确性。

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.5)

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH7.5)

北京雷根生物技术有限公司 Tris-HCl 缓冲液(1 mol/L,pH7.5)简介:Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。

Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。

常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。

一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。

1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。

Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.5)采用进口Tris 、去离子水配制而成,未经高压灭菌处理,被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。

组成:操作步骤(仅供参考):1、 根据实验具体要求操作。

注意事项:1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

相关:编号 名称 R00215 R00215 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH7.5) 100ml 500ml RT 使用说明书1份 编号 名称 DC0032 Masson 三色染色液 NR0001DEPC 处理水(0.1%) PE0018SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 R00227Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.0,无菌) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

溶液配制

溶液配制

实验室常用缓冲液配置方案1×TE Buffer组成浓度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=配制量:500ml配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中1M Tris-HCl Buffer PH= 5mlEDTA PH= 1ml向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.1)1 M Tris-HCl (pH组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

15) M EDTA组份浓度: M EDTA配制量:1 L配制方法:称取g Na2EDTA·2H2O,置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值至(约20 g NaOH)。

注意:pH值至时,EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 适量分成小份后,高温高压灭菌。

6. 室温保存。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl , ,组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低个单位。

2)10×TE Buffer , ,组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量:1 L配制方法:1. 量取下列溶液,置于1 L烧杯中。

3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH8.8)

Tris-HCl缓冲液(1molL,pH8.8)

北京雷根生物技术有限公司 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.8)简介:Tris(三羟甲基氨基甲烷)为弱碱,分子式为C 4H 11NO 3,相对分子量为121.14, 在25℃下pKa 为8.1,Tris 缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间。

Tris 碱的水溶液pH 在10.5左右,一般加入盐酸调节pH 值至所需值,即可获得该pH 值的缓冲液。

常用作生物缓冲液,常用pH 值为6.8、7.4、8.0、8.8,其pH 值随温度变化很大。

一般来说,温度每升高1℃,pH 值下降0.03。

1M Tris-HCl pH8.0是分子生物学中最常用的试剂之一,用来作为各种缓冲液的基础成分,调节酸碱度,例如配制Tris-EDTA 溶液,TBE 电泳缓冲液等。

Leagene Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.8)采用进口Tris 、去离子水配制而成,未经高压灭菌处理,被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂。

组成:操作步骤(仅供参考):1、根据实验具体要求操作。

注意事项:1、 对人体有刺激性,请注意适当防护。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

相关:编号 名称 R00224 R00224 Storage Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH8.8) 100ml 500ml RT 使用说明书1份 编号 名称 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 NR0001DEPC 处理水(0.1%) OR0002pH 标准缓冲溶液(pH=6.86) PE0018SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 PW0111Super ECL Plus 超敏发光液 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。

te缓冲液的配制

te缓冲液的配制

te缓冲液的配制一、引言TE缓冲液是分子生物学实验中常用的一种缓冲液,其主要作用是维持实验体系的pH值,同时还可以稳定DNA和RNA的结构。

因此,正确的TE缓冲液的配制对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。

二、TE缓冲液的组成TE缓冲液由两部分组成:Tris-HCl缓冲液和EDTA。

其中,Tris-HCl 缓冲液是一种弱碱性缓冲液,可以稳定实验体系的pH值;而EDTA则可以与金属离子结合,从而稳定DNA和RNA的结构。

三、TE缓冲液的配制1. Tris-HCl缓冲液的配制Tris-HCl缓冲液的配制需要以下试剂:- Tris base- HCl- 纯水具体步骤如下:1)称取所需量的Tris base,加入一定量的纯水中,搅拌至Tris base完全溶解。

2)调节pH值至所需的值(一般为8.0),可以使用HCl或NaOH进行调节。

3)最后加入足量的纯水,使得总体积达到所需的体积。

2. TE缓冲液的配制TE缓冲液的配制需要以下试剂:- Tris-HCl缓冲液- EDTA- 纯水具体步骤如下:1)称取所需量的Tris-HCl缓冲液和EDTA,加入一定量的纯水中,搅拌至完全溶解。

2)最后加入足量的纯水,使得总体积达到所需的体积。

四、注意事项1. Tris base的溶解需要一定时间,可以使用热水浴或者磁力搅拌器来加速溶解过程。

2. 在调节pH值时,需要使用pH计进行准确测量,以确保pH值的准确性。

3. 在配制过程中,需要使用无菌技术,以避免污染实验体系。

五、总结TE缓冲液的配制是分子生物学实验中非常重要的一步,正确的配制可以保证实验结果的准确性和可靠性。

在配制过程中,需要注意Tris base的溶解、pH值的准确调节以及无菌技术的使用。

提取质粒--碱裂解法打印版

提取质粒--碱裂解法打印版

碱裂解法碱裂解液1组分浓度:25mM Tris-HCl(pH8.0),10mM EDTA,50mM glucose配制量:1L配制方法:1、量取下列溶液,置于1L烧杯中1M Tris-HCl(pH8.0) 25ml0.5M EDTA(pH8.0) 20ml20% glucose(1.11M) 45mlaH2O 910ml2、高温高压灭菌后,4℃保存3、使用前每50ml的碱裂解液1中加入2mlRNase A(20 ug/ml)1M Tris-HCl(pH8.0)配制量:1L配制方法:1、称量121.1g Tris 置于1L烧杯中2、加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解3、加入浓盐酸调节所需pH值pH 8.0 约 42ml4、定容至1L5、灭菌,室温保存注意:应使溶液冷却了再调pH值0.5M EDTA(pH8.0)配制量:1L配制方法:1、称取186.1gNa2EDTA.2H2O于1L烧杯中2、加入约800ml的去离子水,充分搅拌3、用NaOH调节pH至8.0(约20gNaOH)注意:pH至碱裂解液2组分浓度:200 mMNaOH,1%(w/v)SDS配制量:500 ml配制方法:1、量取下列溶液,置于500ml烧杯中50ml10% SDS 50ml2N NaOH 50ml2、加灭菌水定容至500ml,充分混匀3、室温保存,此溶液保存时间最好不要超过1个月注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌碱裂解液3组分浓度:3M KOAc,5M CH3COOH配制量:500ml配制方法:1、称量下列试剂,置于500ml烧杯中KOAc 147gCH3COOH 57.5 ml2、加入300ml去离子水后搅拌溶解3、加去离子水将溶液定容至500ml4、高温高压灭菌后,4℃保存Ⅰ1M Tris-HCl(pH 8.0)配制量:1L配制方法:1、称量121.1gTris置于1L烧杯中2、加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解3、加入浓盐酸调节所需的pH值Ph 8.0 约42ml4、定容至1L5、灭菌,室温保存应使溶液冷却了再调PH值0.5M EDTA(PH 8.0)配制量:1L配制方法:1、称取186.1gNa2EDTA.2H2O于1L烧杯中2、加入约800ml的去离子水,充分搅拌3、用NaOH调节pH至8.0(约20g NaOH)PH至8.0时,EDTA才能完全溶解4、加入去离子水,定容至1L5、适量分成小份,高温灭菌6、室温保存20%(w/v)glucose配制量:100ml方法:1、称取20g glucose置于100—200ml烧杯中,加入约80ml去离子水,搅拌溶解2、加去离子水定容至100ml3、灭菌,4℃保存Ⅱ2N NaOH配量:100ml方法:1、量取80ml去离子水于100-200ml塑料烧杯中2、称取8gNaOH小心加入烧杯中,边加边搅拌3、待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液定至100ml4、室温保存10% SDS(PH7.2)配制100ml方法:1、称取10gSDS于100-200ml烧杯中,加入约80ml去离子水,68℃加热溶解2、滴加浓HCl调至7.23、定容100ml,室温保存提取质粒注意事项:1、将菌种接种到LB培养基上(3ml),含适当培养基2、在离心管中加入1.5ml培养液,离心2min(12000改为15000rpm)3、倒去上清,重复2次,用枪吸去上清4、将菌沉淀重悬于100ul冰预冷的溶液Ⅰ,再涡旋搅拌剧烈振荡,室温放置5min5、加入200ul溶液Ⅱ,盖紧管口快速颠倒(勿振荡)ep管5次,充分混合后,充分混合内容物后,放在冰上4min6、加入150ul冰预冷溶液Ⅲ,盖紧管口,倒置振荡10s,将溶液Ⅲ分散均匀后,置于冰上3-5min,离心5min,12000rpm,取上清7、加入等量酚:氯仿:异戊醇25:24:1,12000rpm离心2min,取上清8、加入2倍体积冰无水乙醇,1/10NaOAc,冰箱放置30min(-20℃ 2小时以上,-80℃20-30min)以沉淀DNA9、4℃,12000rpm,5min离心(改为15000,8min)10、小心吸取上清,将离心管倒放在纸巾上,以使所有液体流出,并将附于管壁上的液滴除尽11、用1ml70%乙醇在4℃离心5min(12000rpm),去上清12、干燥30min(空气中),加入20ug(2ul)10mg/mlRNA酶和50ulTE,37℃反应1-3h,-20℃保存。

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