显微镜的七种观察方法
七年级显微镜知识点归纳
七年级显微镜知识点归纳在理科学习中，显微镜是一个必不可少的工具。
对于初中生来说，学好显微镜知识，不仅可以帮助理解科学原理，还有助于提高观察和实验技能。
本文将对七年级显微镜知识点进行归纳梳理，以供学生学习参考。
一、显微镜的种类及组成显微镜主要分为光学显微镜、电子显微镜、扫描探针显微镜等多种类型。
其中，光学显微镜是初中生学习的重点。
光学显微镜主要由物镜、目镜、调焦机构、光源、镜身等部分组成。
二、显微镜的使用方法1.将待观察的物品片放在物镜的上方，调整高度，可以借助调焦器实现这一步骤。
2.调整目镜，在不移动物镜的前提下，可通过调整目镜对象的大小和亮度。
3.观察细胞结构等微观物体，通常要使用高倍率的物镜，同时可以考虑使用涂片和染色剂等方法，以增强被观察样本的细胞构造。
三、显微镜的工作原理光学显微镜的工作原理是利用物镜放大并收集光线，让目镜对其形成的放大像进行不断的调节，以实现所观察的物品的放大。
四、显微镜的维护1.保持显微镜清洁，尤其是物镜和目镜，以及盖玻片和待观察的物品。
2.在生物实验中，要注意避免将生物样本或其它污染物渗入显微镜中。
3.当不使用显微镜时，应将显微镜放回其安全位置，不要随意移动。
五、显微镜的应用显微镜在许多领域都有广泛的应用，比如生物学、医学、材料科学等课程。
初中生在学习中应该了解各种应用情形，从而更好地理解知识。
理解显微镜的应用也可以帮助培养学生的科学思维能力和实验实践能力。
总体来说，显微镜知识是七年级理科学习的基础。
学生们需要通过学习显微镜的种类、组成、使用方法、工作原理、维护和应用等方面的知识，更好地理解科学原理，并提高自己的实验实践能力。
显微镜的使用方法
显微镜的使用方法1．低倍镜的使用（1）检查：右手握镜臂，从镜箱内取出显微镜，左手托镜座，轻轻放在实验桌上。
先检查一下显微镜各部件有无损坏，如发现有损坏或性能不良者，立即报告教师请求处理。
（2）准备：将显微镜放于前方略偏左侧，必要时使镜筒倾斜（有的显微镜本身已经倾斜）以便观察。
转动粗调节钮，将镜筒略升高（或将载物台下降）使物镜与载物台距离略拉开。
再旋转物镜转换器，将低倍镜对准载物台中央的通光孔（可听到“咔哒”声）。
（3）对光：打开光圈，上升聚光器，双眼同时睁开，以左眼向目镜内观察，同时调节反光镜的方向，直到视野内光线明亮均匀为止。
反光镜的平面镜易把其他景物映入视野，一般用凹面镜对光。
（4）放标本片：标本片的盖片朝上，将标本片放到载物台前方，然后推到物镜下面，用压片夹压住，如有标本移动器，可用上面的弹簧夹夹住标本片，然后把要观察的部分移到通光孔的正中央。
（5）调节焦距：从显微镜侧面注视物镜镜头，同时旋转粗调节钮，使镜筒缓慢下降(或镜台上升)，大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时，再用左眼从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调节钮，使镜筒缓缓上升，直至视野中出现物像为止。
如物像不太清晰，可转动细调节钮，使物像更加清晰。
如果按上述操作步骤仍看不到物像时，可能由以下原因造成：①转动调节钮太快，超过焦点。
应按上述步骤重新调节焦距．②物镜没有对正，应对正后再观察。
③标本没有放到视野内，应移动标本片寻找观察对象。
④光线太强，尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时，易出现这种现象，应将光线调暗一些后，再观察。
2．高倍镜的使用（1）依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。
（2）将需要观察的部分移到视野的中央。
（3）眼睛从侧面注视物镜，用手移动转换器，换高倍镜。
（4）眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调节钮，直至视野内看到清晰的物像为止。
如按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成：①观察的部分不在视野内，应在低倍镜下寻找到后，移到视野中央，再换高倍镜观察。
初一显微镜的,使用方法
初一显微镜的,使用方法初一显微镜的使用方法一、引言显微镜是一种科学研究和教学中常用的仪器，它可以放大微小的物体并使其可见。
初一显微镜是一种适用于初中生的显微镜，今天我们就来了解一下初一显微镜的使用方法。
二、准备工作1. 将显微镜放在平稳的桌面上，确保其稳固不摇晃。
2. 准备一片玻璃片，用纯净水洗净并晾干，以备后用。
3. 准备好待观察的样本。
可以是昆虫的翅膀、植物的细胞、动物的血液等。
三、调节显微镜1. 调节光源：打开显微镜下方的光源开关，通过旋钮调节光源的亮度，使其适合观察。
2. 调节目镜：将目镜（位于顶部的镜筒）对准样本，通过旋钮调节目镜的位置，使其与样本保持适当的距离。
3. 调节物镜：将物镜（位于目镜下方的镜筒）转至最低放大倍数，即“4X”或“低倍镜”，通过旋钮调节物镜的位置，使其与样本接触。
4. 调节焦距：通过旋钮调节焦距，使样本清晰可见。
可以先用粗调焦距旋钮大致调节，再用细调焦距旋钮微调，直到样本清晰。
四、观察样本1. 将待观察的样本放在显微镜的玻璃片上。
2. 将玻璃片放在样本夹上，并将样本夹固定在显微镜的样本台上。
3. 通过旋钮调节样本的位置，使其处于光源的正下方，以获得最佳的观察效果。
4. 通过旋钮调节物镜的倍数，可以选择“10X”或“高倍镜”进行进一步放大观察。
5. 通过旋钮调节焦距，使样本清晰可见。
6. 可以适当调节光源的亮度和角度，以改变样本的明暗程度和细节的展示。
五、注意事项1. 使用显微镜时，要保持桌面整洁，并注意避免碰撞和摔落。
2. 在调节显微镜时，要轻拧旋钮，避免过度调节或用力过猛导致损坏。
3. 在观察样本时，要轻轻转动样本夹和旋钮，避免过度压力或移动导致样本损坏。
4. 使用显微镜时，要注意眼睛与目镜的适当距离，避免眼睛与镜筒直接接触，以免划伤眼睛。
5. 使用显微镜时，要注意光源的照射时间，避免过长时间的连续观察对样本产生热损伤。
六、清洁和保养1. 使用完显微镜后，要将目镜和物镜调至最低倍数，关闭光源开关，将显微镜放回存放位置。
显微镜的七种观察方法
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按观察方法分 7-2
2.暗场:照明光通过物镜外
围射于试样，来自试样的干涉及 衍射光进入物镜并最终被观察到。
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暗场
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1 原理 丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反射或衍射，增 大了人眼可见性。 2 特点 观察到极其微小物体，分辨率可达0.02 ~ 0.004 um (明场0.4um)—”超显微“。 3 缺点 只能观察到物体存在、运动和外部形态 不方便调节 标本要求高（灰尘、盖片、载片）
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使用抗衰减剂的效果
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汞灯灯箱构造
灯室，上下、左右旋钮，聚光镜旋钮
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按观察方法分 7-4
4.偏光:有些物质在两个呈
一定夹角的偏光滤片之间可现呈 鲜明的对比，或根据双折射性能 和定向呈现颜色
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偏光
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1 原理
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
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4 应用： 微小粒子、细菌形态观察 、细菌记数，透明标本观 察等
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按观察方法分 7-3
3.荧光:利用某些物质在受
到了紫外光或短波长的光激发照 射以后能够发射出比激发光波长 长的荧光的特性的观察方法
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荧光
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什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变 为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是 非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光， 发射出的长波光。
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按观察方法分 7-7
显微镜的使用方法
显微镜的使用方法
显微镜是一种用于放大微小物体的科学仪器，它可以帮助我们观察和研究那些肉眼无法看到的微观世界。
正确的使用显微镜对于获得清晰的观察结果至关重要。
本文将介绍显微镜的使用方法，包括准备工作、调节和观察等步骤。
一、准备工作。
1. 将显微镜放置在平稳的桌面上，并确保其稳固不摇晃。
2. 插上电源线，打开显微镜的开关，待灯光亮起。
3. 准备好待观察的样本，如细胞、细菌、昆虫等，并将其放置在载玻片上。
二、调节显微镜。
1. 调节放大倍数，转动物镜镜头，选择合适的放大倍数。
一般来说，先用低倍镜（如4倍或10倍）观察整体结构，再用高倍镜（如40倍或100倍）进行细节观察。
2. 调节照明，通过调节照明亮度和对焦，确保样本能够被清晰照亮，并且焦距合适。
三、观察样本。
1. 将载玻片放置在显微镜的载物台上，并用夹片夹紧，确保样本不会晃动。
2. 通过目镜观察样本，先用低倍镜进行初步观察，然后逐渐切换到高倍镜进行细节观察。
3. 通过调节焦距，确保样本清晰可见。
可以通过轻轻转动调焦手轮来调节焦距。
四、注意事项。
1. 使用显微镜时要轻拿轻放，避免碰撞和摔落。
2. 使用完毕后，要将显微镜的放大倍数调回最低倍，并关闭照明灯，以节省电源和延长显微镜的使用寿命。
3. 清洁显微镜的镜头时，要使用专门的镜头纸和清洁液，轻柔擦拭，避免刮伤镜片。
通过正确的使用方法，显微镜可以帮助我们观察到微观世界中的奇妙景象，对于科学研究和教学都具有重要意义。
希望本文的介绍能够帮助读者更好地使用显微镜，获得清晰的观察结果。
显微镜的七种观察方式
显微镜的七种观察方式显微镜的七种观察方式一．明视野观察（Bright field）明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能。
二．暗视野观察（Dark field）暗视野实际是暗场照明发。
它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。
因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。
若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。
m.. 暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。
它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。
暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004三．相差镜检法（Phase contrast）在光学显微镜的发展过程中，相差镜检术的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就。
我们知道，人眼只能区分光波的波长（颜色）和振幅（亮度），对于无色通明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本.相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效地利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。
这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差。
在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处：1. 环形光阑（annular diaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
详解显微镜的八种观察方式
详解显微镜的八种观察方式方式一明视野观察(Bright field,BF)明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能。
方式二暗视野观察(Dark field)暗视野实际是暗场照明。
它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。
因此，视场为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的像。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。
若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。
暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。
它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图像。
暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02-0.004μm。
方式三相差镜检法(Phase contrast,PH)在光学显微镜的发展过程中，相差镜检法的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就。
我们知道，人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度)。
对于无色透明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本。
相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效的利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。
这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
相差图片相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ(波长)，如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减小，提高反差。
在构造上，相差显微镜又不同于普通光学显微镜，具有两个特殊之处：(1)环形光阑(annular diaphragm)位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
显微镜的七种观察方式
显微镜的七种观察方法发布时间：2013-1-7一．明视野观察（Brightfield）明视野镜检是大家比较熟悉的一种镜检方式，广泛应用于病理、检验，用于观察被染色的切片，所有显微镜均能完成此功能。
二．暗视野观察（Darkfield）暗视野实际是暗场照明发。
它的特点和明视野不同，不直接观察到照明的光线，而观察到的是被检物体反射或衍射的光线。
因此，视场成为黑暗的背景，而被检物体则呈现明亮的象。
暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。
若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。
暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。
它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象。
暗视野观察的分辨率远高于明视野观察，最高达0.02—0.004三．相差镜检法（Phasecontrast）在光学显微镜的发展过程中，相差镜检术的发明成功，是近代显微镜技术中的重要成就。
我们知道，人眼只能区分光波的波长（颜色）和振幅（亮度），对于无色通明的生物标本，当光线通过时，波长和振幅变化不大，在明场观察时很难观察到标本.相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检，也就是有效地利用光的干涉现象，将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差，即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。
这大大便利了活体细胞的观察，因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。
1相差显微镜的基本原理是，把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。
光线透过标本后发生折射，偏离了原来的光路，同时被延迟了1/4λ（波长），如果再增加或减少1/4λ，则光程差变为1/2λ，两束光合轴后干涉加强，振幅增大或减下，提高反差。
在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处：1.环形光阑（annulardiaphragm）位于光源与聚光器之间，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。
显微镜的使用方法
显微镜的使用方法
显微镜是一种重要的科学工具，用于观察微小物体。
以下是显微镜的使用方法：
1. 准备样本：选择要观察的物体或样本，并将其放置在显微镜玻璃片上。
2. 调节光源：打开显微镜下方的光源，调节光的亮度，确保样本能够被照亮。
3. 调节目镜（物镜）：通过转动显微镜上方的目镜旋钮，将物镜调节到最低放大倍数。
4. 调节聚焦：通过转动显微镜侧面的聚焦轮，将样本和物镜的间距调整到最小。
然后，通过细致地转动聚焦轮，逐渐将样本变得更加清晰。
5. 调节放大倍数：通过转动物镜旋钮，逐渐增加放大倍数，直到达到所需的观察倍率。
6. 调节工作台：通过转动显微镜底部的工作台旋钮，可以在垂直方向上移动样本，以便观察不同的区域。
7. 观察样本：通过看进目镜，您可以看到样本的放大图像。
您可以使用显微镜携带的调节旋钮，调整焦点和放大倍数，以获取清晰的图像。
8. 记录观察结果：您可以使用纸和笔记录您观察到的任何有趣的细节，或者使用相机来拍摄图像以备后用。
9. 清洁显微镜：使用柔软的镜头纸轻轻擦拭显微镜的镜头和其他表面，以确保下一次使用时的清晰观察。
注意事项：
- 在拿取和搬运显微镜时要轻柔，避免碰撞和摔落。
- 在观察之前，确保样本清洁，无尘和无污染。
- 如果需要更高放大倍数的观察，可以更换较高倍数的物镜。
希望以上使用方法对您有所帮助！。
光学显微镜的七种观察方式
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5.7、荧光观察
什么是荧光？
• 物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光， 是非温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发射出的长波光。
• 显微镜荧光利用光源激发——光化荧光
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.7、荧光观察
共轭面：吸收光线，直射光通过 物镜相板
补偿面：相位推迟，衍射光通过
聚光镜环状光阑
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.3、相差观察
• 特点：
鉴定活体细胞最实用、最经济的方法
• 缺点：
需要光强高； 切片不能太厚(5~10um)； 盖片、载片需符合标准； 需增加单色滤镜以提高相差效果； 操作较麻烦； 相差荧光物镜的荧光成像效果较明场荧光物镜差。
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.6、霍夫曼观察
• 原理：斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通 过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影，从而使透 明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。
上海超益光电科技有限公司
2019/7/17
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五、显微镜的七种观察方式
5.6、霍夫曼观察
• 优点：
体荧光等
发荧光量的测定对物质定性、定量分析
2019/7/17
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2019/7/17
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• 缺点：
只能观察到物体存在、外部轮廓、运动状态等； 物镜使用的局限，不方便调节； 对标本要求较高（灰尘、盖片、载片等）。
• 应用：
微小粒子、细菌形态观察、细菌记数，透明标 本观察等。
各种细菌的显微镜检查方法
各种细菌的显微镜检查方法
常用的细菌的显微镜检查方法有以下几种：
1. 直接涂片法（直接镜检法）：将待检样品直接涂于玻片上，用染色剂染色后在显微镜下观察。
2. 阳性抽滤法：将待检样品与细菌特异性抗体结合，再通过滤膜抽出细菌，并用抗体标记荧光染料显色，然后在荧光显微镜下观察。
3. 厚滴片法：将待检样品与染色剂混合滴于玻片上，使细菌沉积在玻片上，然后用染色剂染色并在显微镜下观察。
4. 葡萄糖酸盐液滴片法：将待检样品滴入含有葡萄糖酸盐液的滴片中，使细菌生长并产生气泡，然后在显微镜下观察气泡内的细菌。
5. 培养法：将待检样品接种于适宜培养基上，通过细菌的生长和形态特点来进行检查和鉴定，如革兰氏染色、肌红蛋白酶试验、糖发酵试验等。
这些方法都可以通过显微镜观察细菌的形态、大小、结构以及染色反应等特征来进行细菌的检查和鉴定。
初一显微镜的使用方法步骤
初一显微镜的使用方法步骤一、准备工作1. 将显微镜放在平稳的桌面上，确保其稳定性。
2. 检查显微镜是否完好无损，如有损坏应及时更换或修理。
二、安装样本1. 准备好待观察的样本，可以是薄片、液体或固体样本。
2. 将样本放置在玻璃载物片上，用夹子固定好。
三、调节光源1. 打开显微镜下部的光源开关。
2. 通过旋钮调节光源的亮度，使其适合观察样本。
四、调节物镜1. 将低倍物镜（通常为4倍或10倍）转到工作位置。
2. 用转盘旋转物镜，将其对准样本。
3. 用粗调焦轮，将样本与物镜保持适当的距离。
五、观察样本1. 通过目镜观察样本，调节目镜焦距以获得清晰的图像。
2. 使用精细调焦轮，微调物镜与样本的距离，使图像更加清晰。
3. 如果需要放大观察，可以使用高倍物镜（通常为40倍或100倍）。
六、调节显微镜参数1. 通过旋钮调节调节光圈大小，控制光线的强弱。
2. 通过调节望远镜的直径，调整视场的大小。
3. 通过调节瞳孔距离，使双眼看到的图像重合。
七、移动样本1. 使用显微镜的移动控制器，将样本移动到感兴趣的位置。
2. 通过旋钮调节移动控制器的速度，使样本移动得更加精确。
八、观察记录1. 使用纸和笔记录观察到的现象和结论。
2. 观察时要仔细观察样本的细节，如形状、颜色、结构等。
九、保养显微镜1. 使用显微镜后，要及时关闭光源开关。
2. 使用干净的布或纸巾擦拭显微镜的镜头和外壳。
3. 将显微镜放回原来的存放位置，避免碰撞和摔落。
总结初一显微镜的使用方法步骤主要包括准备工作、安装样本、调节光源、调节物镜、观察样本、调节显微镜参数、移动样本、观察记录和保养显微镜。
通过遵循这些步骤，我们可以有效地使用显微镜观察样本，并获取清晰的图像和有意义的观察结果。
初一显微镜的使用不仅可以帮助我们更好地理解微观世界，还可以培养我们的观察力和科学精神。
因此，掌握显微镜的使用方法对于初中生来说是非常重要的。
显微镜的七种观察方法 ppt课件
显微镜的七种观察方法
应用： 矿物质、化学物品鉴别 鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体 植物病理检验 鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿 瘤细胞、横纹肌和毛发等
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落射荧光显微镜各部件特性和 作用
• 分色镜:
T%
反射激发光,荧光透过 ＜A 反射
＞A 透过
A
nm
• 吸收滤色镜:
T%
荧光透过,阻挡杂光
＜B 阻挡
＞B 透过
显微镜的七种观察方A法
B
nm
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
分色镜: 反射激发光,荧光透过
T% ＜A 反射
＞A 透过
吸收滤色镜:
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
偏振器1
自然光（多 振动面）
偏振器2
偏振光（单 一振动面）
各向同性：单折射体，光性质不因照射方向而改变，普 通气体、液体、非结晶固体等
各向异性：双折射体，光速度、折射率、吸收和振动面、
振幅随照射方向不同，晶体、纤维等
）
显微镜的七种观察方法
显微镜的七种观察方法
显微镜的七种观察方法
按观察方法分七种
明场
DIC 暗场
荧光
偏光
霍夫曼 相差
显微镜的七种观察方法
显微观察方式
显微镜的七种观察方法
按观察方法分 7-1
1.明场:照明光直接通过聚
光镜入射于试样，并透过试样后 进入物镜并最终被观察到。
显微镜的七种观察方法
明场
显微镜的七种观察方法
明场观察方式
常规观察方式 应用领域：
常规镜检、病理、染色标本 优点：
使用显微镜的7个步骤
使用显微镜的7个步骤1安放：显微镜应放在体前偏左，镜筒在前镜臂在后的方向安放好。
2对光：用低倍镜、较大光圈(遮光器上调);眼看目镜，同时调节反光镜;使视野变得明亮。
3放片：观测对象必须正对物镜的孔，将玻片缠不好之后再调焦。
4调焦：先用低倍镜寻找物象，先降镜筒后升高镜筒，降低镜筒时要在侧面观察是否压片，升高镜筒时正对着目镜寻找物象。
把物像移到视野中心，换用高倍镜观察只调节细准焦螺旋，使物象变得清晰。
5观测：两眼睁开，用左眼观测，用右眼画图。
注意事项：1.必须熟练掌握并严格执行采用规程。
2.取送显微镜时一定要一手握住镜臂，另一手托住底座。
显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。
取送显微镜时要轻拿轻放。
1.实验时必须把显微镜放到桌面上，镜座应当距桌沿6～7cm左右，关上底光源控制器。
2.转动转换器，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。
然后用双眼注视目镜内，调整光源强度，把聚光镜上升，把虹彩光圈调至最大，使光线反射到镜简内，这时视野内呈明亮的状态。
3.将所要观测的装片放到载物台上，并使被观测的部分坐落于通光孔的也已中央。
4.先用低倍镜观察(物镜10×、目镜10×)。
观察之前，先转动粗准焦螺旋，使载物台上升，使物镜逐渐接近切片。
需要注意，不能使物镜触及玻片，以防镜头将玻片压碎。
并转动粗准焦螺旋，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。
5.如果在视野内看见的物像不合乎实验建议(物像偏移视野)，可以慢慢移动左右移动尺。
移动时应特别注意玻片移动的方向与视野中看见的物像移动的方向刚好恰好相反。
如果物像不甚准确，可以调节细准焦螺旋，直到物像准确年才。
6.如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视野中的物像范围缩小了很多)。
一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高信物镜应该可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动细准焦螺旋进行调节。
显微镜观察脑细胞的方法
显微镜观察脑细胞的方法
显微镜观察脑细胞的方法有以下几种：
1. 光学显微镜：这是最常用的显微镜类型，可以观察到活体的脑细胞和组织。
通过光学显微镜可以观察到神经元的形态、大小、分支和突触等细节。
2. 电子显微镜：电子显微镜可以提供更高的分辨率，可以观察到更小的细胞器和分子。
通过电子显微镜可以观察到神经元的超微结构，如突触前后膜、突触囊泡和神经递质等。
3. 光学投影显微镜：光学投影显微镜是一种特殊的显微镜，可以将样品的图像投影到屏幕上。
这种显微镜可以用于观察大型组织、整个脑区域和神经回路等结构。
4. 光片段显微镜：光片段显微镜是一种新型的显微镜技术，利用荧光标记的神经元和突触来观察神经回路和神经活动。
这种显微镜可以在活体大脑中实时观察到神经元的活动和突触的变化。
以上是常见的显微镜观察脑细胞的方法，不同的方法有不同的优缺点和适用范围，需要根据具体的实验需求选择合适的方法。
显微镜使用方法
显微镜使用方法
显微镜是一种用来观察微小物体的仪器，它可以帮助我们看到肉眼无法观察到的微观世界。
正确的使用显微镜可以让我们更清晰地观察样本，提高观察效果。
下面将介绍显微镜的使用方法，希望能对大家有所帮助。
首先，使用显微镜前需要将显微镜放置在平稳的桌面上，确保显微镜处于稳定状态。
然后，调节显微镜镜筒，使其与样本保持适当的距离。
接着，打开光源，调节光源亮度，以确保样本能够被适当照亮。
调节对焦手轮，将样本调至清晰状态，可以适当调整放大倍数，以获得更清晰的观察效果。
在观察过程中，需要注意保持显微镜镜片的清洁，避免灰尘或污渍影响观察效果。
同时，要轻柔地移动样本，避免碰撞到显微镜镜片，造成损坏。
观察结束后，要及时关闭光源，将样本取下，关闭显微镜，并将其放回原位。
除了正确使用显微镜外，还需要注意一些细节问题。
比如，在观察透射光样本时，要使用薄而透明的样本，以确保光线能够透过样本，使其清晰可见。
而在观察反射光样本时，则需要使用表面光
滑的样本，以避免光线被反射，影响观察效果。
此外，对于不同类型的显微镜，其使用方法可能会有所不同。
例如，在使用偏光显微镜时，需要注意调节偏光片的角度，以观察材料的双折射现象。
而在使用荧光显微镜时，则需要注意选择适当的荧光染料，以获得清晰的荧光图像。
总的来说，正确的使用方法可以帮助我们更好地观察样本，提高观察效果。
希望大家在使用显微镜时，能够按照上述方法进行操作，以获得更好的观察体验。
祝大家观察愉快！。
显微镜的七种观察方法
荧光显微镜的种类
透射式
荧光显微镜的种类
落射式
荧光显微镜的主要部件
透射式
落射式
汞灯光源 激发滤色镜 吸收滤色镜 暗场聚光镜
汞灯光源 激发滤色镜 分色镜 吸收滤色镜
落射荧光显微镜的构造
吸收滤色镜 激发滤色镜
落射荧光显微镜的构造
荧光显微镜光源
• 汞灯光源:
提供激发光(U、V、B、G)
按观察方法分 7-6
6.DIC:照明光由微分干涉对比
棱镜变为两束衍射光，并使样品高 度差异造成在光路上的微小差异， 而光路差异变为利用微分干涉对比 棱镜和检偏振器的明暗对比。有时 也利用敏感色板（波长补偿片）， 加强了高度差异的颜色变化。
DIC微分干涉相衬
DIC
相衬
1 原理 通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直，强度相等的光束，光束载极近的两点 （小于显微镜的分辨率）上通过被检物体，从而在相位上略有差别，使图象呈现 出立体三维感觉。
激发 分色 吸收
滤色镜的特性
带宽对图象的影响
SWB: BP420-480
FITC+PI
WB: BP450-480
WIB: BP460-490
NB: BP470-490
多重染色标本的多色观察
FITC+Texas Red+DAPI
三色滤色镜的特性曲线
激发 分色 吸收
双重染色标本的单色和双色观 察
2 特点 可以使被检物体产生三维立体感觉
观合更好 可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的 效果。
3 缺点 需要光强高，双折射物质不能达到DIC镜检效果，不能应用于塑料容器培养 物的观察，镜检灵敏度有方向性，调节较复杂
显微镜下物像的寻找方法
显微镜下物像的寻找方法显微镜是一种能够放大微小物体的光学工具，它通过透射或反射对光进行聚焦，使得观察者能够看到细微结构和细胞组织等。
寻找物像是显微镜使用的基本操作之一，本文将介绍几种常用的显微镜下物像的寻找方法。
1.望远镜法：将物镜对准样品表面，调节目镜直至能够清晰地看到物体的整体形状。
然后，用目镜调节焦距，直到物体表面的细节清晰可见。
这种方法适用于体积较大的样品，如昆虫、植物切片等。
2.反射法：在显微镜下，首先调节物镜的焦距，使其对准样品表面。
然后，将光源调至合适强度，通过反射观察物体的细节。
这种方法适用于样品表面较亮的情况，如金属表面等。
3.透射法：与反射法类似，将物镜对准样品表面，调节焦距。
然后，将光源调至适当强度，通过透射观察物体的细节。
这种方法适用于透明或半透明的样品，如细胞组织切片等。
4.油浸法：在使用高倍物镜观察细小结构时，常常需要使用油浸法。
将一滴高折射率的油滴放在物镜和样品之间，这样可以提高光的聚焦能力，使得观察到的图像更加清晰。
这种方法适用于观察接近无法分辨的细小结构，如细胞核等。
在进行显微镜观察时，还需要注意以下几点：1.调节光源的强度，避免过亮或过暗的情况。
过亮会导致样品烧焦或产生反射，过暗则无法清晰观察。
2.调节物镜和目镜的焦距，使其对准样品表面。
如果焦距不正确，观察到的图像会模糊不清。
3.避免震动和颤动，使用显微镜时要稳定手腕和呼吸，可以使用显微镜底部的支架来固定显微镜，减少晃动。
总之，显微镜下物像的寻找是显微技术中的基本操作之一，掌握了适当的方法和技巧，能够更好地观察样品中的细节结构。
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4 应用： 微小粒子、细菌形态观察 、细菌记数，透明标本观 察等
.
按观察方法分 7-3
3.荧光:利用某些物质在受
到了紫外光或短波长的光激发照 射以后能够发射出比激发光波长 长的荧光的特性的观察方法
.
荧光
.
什么是荧光 ?
物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为 高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是非 温度辐射光——冷光。即：物质吸收短波光，发 射出的长波光。
偏振器1
自然光（多 振动面）
偏振器2
偏振光（单 一振动面）
各向同性：单折射体，光性质不因照射方向而改变，普 通气体、液体、非结晶固体等
各向异性：双折射体，光速度、折射率、吸收和振动面、
振幅随照射方向不同，晶体、纤维等
.
应用： 矿物质、化学物品鉴别 鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体 植物病理检验 鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿 瘤细胞、横纹肌和毛发等
过分别处于聚光镜与物镜的一对互
补的光环后产生干涉（强度叠加或
减弱），即相位差转变成了光强差，
从而可清楚观察到使原来不易看清
的透明类样品（即相位物体，如活
细胞）。
.
相 差（衬）
.
相 差（衬）
.
1 原理
利用被检物体的光程（折射率 x 厚度）差进行镜检，即利用干涉现象，将相位差 变为人眼可以分辨的振幅差
带宽对图象的影响
SWB: BP420-480
WB: BP450-480
WIB: BP460-490
NB: BP470-490
.
多重染色标本的多色观察
FITC+Texas Red+DAPI
.
三色滤色镜的特性曲线
激发
分色
吸收
.
双重染色标本的单色和双色观 察
WU
WIB
DUAL BAND
DAPI+FITC
）
.
显微镜的七种观察方 法
.
按观察方法分七种
明场
DIC 暗场
荧光
偏光
霍夫曼 相差
.
显微观察方式
.
按观察方法分 7-1
1.明场:照明光直接通过聚
光镜入射于试样，并透过试样后 进入物镜并最终被观察到。
.
明场
.
明场观察方式
常规观察方式 应用领域：
常规镜检、病理、染色标本 优点：
视野亮度高、均匀， 应用范围广， 操作简单，价格低， 物镜适用于荧光观察 缺点： 透明标本对比度低， 标本没有立体感
.
使用抗衰减剂的效果
.
汞灯灯箱构造
灯室，上下、左右旋钮，聚光镜旋钮
.
按观察方法分 7-4
4.偏光:有些物质在两个呈
一定夹角的偏光滤片之间可现呈 鲜明的对比，或根据双折射性能 和定向呈现颜色
.Hale Waihona Puke 偏光.1 原理
依据波动光学原理观察和精密测定标本细节,或透明物体改变光束的物理参数,以 此判别物质结构的一种显微镜
.
按观察方法分 7-2
2.暗场:照明光通过物镜外
围射于试样，来自试样的干涉及 衍射光进入物镜并最终被观察到。
.
暗场
.
1 原理 丁道尔(Tyndall)现象，微粒对斜射光反射或衍射，增 大了人眼可见性。 2 特点 观察到极其微小物体，分辨率可达0.02 ~ 0.004 um (明场0.4um)—”超显微“。 3 缺点 只能观察到物体存在、运动和外部形态 不方便调节 标本要求高（灰尘、盖片、载片）
显微镜荧光利用光源激发——光化荧光
.
荧光的种类
自发（固有）荧光
二次荧光
.
荧光的性质
❖ 吸收光，必需有激发光源 ❖ 荧光波长＞激发波长（损失热能） ❖ 荧光强度极小于激发光的强度 ❖ 有不同程度的衰减 ❖ 荧光强度取决于激发光强度、被检物浓度、
荧光效率
.
荧光显微镜的优点和用途
优点：
❖ 检出能力高（放大作用） ❖ 对细胞的刺激小（可以活体染色） ❖ 能进行多重染色 用途： ❖ 物体构造的观察——荧光素 ❖ 荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体
＞A 透过
A
nm
• 吸收滤色镜:
T%
荧光透过,阻挡杂光
＜B 阻挡
＞B 透过
.
B A
nm
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
分色镜: 反射激发光,荧光透过
T% ＜A 反射
＞A 透过
吸收滤色镜: 荧光透过,阻挡杂光
A
nm
T%
＞B ，＜C 透过
.
AB
C
nm
滤色镜的选择
荧光素的特性
荧光素
激发波长 发射波长
DAPI
荧光等 ❖ 发荧光量的测定对物质定性、定量分析
.
荧光显微镜的种类
透射式
.
荧光显微镜的种类
落射式
.
荧光显微镜的主要部件
透射式
❖ 汞灯光源 ❖ 激发滤色镜 ❖ 吸收滤色镜 ❖ 暗场聚光镜
.
落射式
❖ 汞灯光源 ❖ 激发滤色镜 ❖ 分色镜 ❖ 吸收滤色镜
落射荧光显微镜的构造
吸收滤色镜 激发滤色镜
.
落射荧光显微镜的构造
372
456
AMCA
350
450
Hoechst 33258
365
465
FITC
490
520
Acridine Orange
490
590
Acridine Yellow
470
550
CY3
552
565
TRITC
541
572 .
Propidium Iodide 530
615
滤色镜的特性
激发
分色
吸收
FITC+PI
.
❖ 偏光显微镜主要用于检测矿石,地质大学会用 到,特别是可以用来鉴定珠宝,另外可以检测生 物内骨骼,这个我还没有遇见实例,还可以检测 生物化学结晶,化学院用来观察结晶液像,其他 在纺织物品化学成分上检测上,物理芯片上等, 凡是观察双折射晶体会使用偏光显微镜 。
.
按观察方法分 7-5
5.相衬（差）:利用光线通
共轭面：吸收光线，直射光通过 补偿面：相位推迟，衍射光通过
物镜相 板
聚光镜环状光阑
.
2 特点 鉴定活体细胞最实用、最经济的方法 3 缺点 需要光强高 切片不能太厚(5~10um) 盖片、载片需符合标准 最好配用单色滤光镜 操作较麻烦 荧光效果不如明场物镜
.
荧光显微镜光源
• 汞灯光源:
提供激发光(U、V、B、G)
• 氙灯光源：
高峰值更宽，更稳定
.
荧光显微镜激发透镜组
• 激发透镜组
吸收 滤色镜
（激发块）:
激发 滤色镜
发射光
入射光
• 激发滤色镜:
激发波长选择
分光 滤色镜
T%
nm .
BAND PASS
落射荧光显微镜各部件特性和 作用
• 分色镜:
T%
反射激发光,荧光透过 ＜A 反射
WIBA
WIG
.
WIB
FITC+PI
单色滤色镜的特性曲线
.
双色滤色镜的特性曲线
.
现行显微镜特点和各种滤色镜
.
分色镜
自由组合 激 发块
吸收滤色镜
.
激发滤色镜
油 镜 应 使 用 荧 光 油
.
的运用
光栏全开启
物镜光栏
减少杂散光干扰
光栏适当关小
.
荧光的衰减
有衰减的标本
防衰减的方法
❖ 使用抗衰减剂 ❖ 选择衰减小的荧光素 ❖ 降低激发光强度 ❖ 降低标本中氧的浓度