藏药印度獐牙菜中总三萜和齐墩果酸的含量测定
重要药用植物印度獐牙菜主要成分的定量分析
重要药用植物印度獐牙菜主要成分的定量分析1.前言印度獐牙菜是一种重要的药用植物，在印度的喜马拉雅地区尼泊尔和不丹一带生长。
印度獐牙菜被发现生长在1200-3000米高度之间的温带森林潮湿的山坡上，可以在它的野生生长地任意的采摘用于贸易和本地生产使用。
它被广泛应用在东方传统药物如印度草药学和尤纳尼医学，也是中国传统藏药以及在尼泊尔局部应用。
尼泊尔是印度药用原料植物的主要供应商之一，（1）尼泊尔是印度原料药用植物的主要供应商之一，印度獐牙菜是最重要的出口药用植物，在尼泊尔药用植物出口中排名前5，几乎占尼泊尔总药用植物的贸易的5 0%（2）印度獐牙菜有很多药用用途，其中最著名的是抗糖尿病，抗疟疾，血液净化和肝的保护性能。
也可用于中药，可治疗慢性发热，疟疾，贫血，支气管哮喘，肝脏疾病，肝炎，胃炎，消化不良，便秘，皮肤病，寄生虫，癫痫，溃疡，尿少，高血压，抑郁症和某些类型的精神紊乱，分泌胆汁，血液净化和糖尿病（3-8）。
在印度草医学的记载中，印度獐牙菜味苦，凉性药物，可促进消化，治疗咳嗽。
（9）是许多草药保健品、营养补充品的重要原料，还可用于制成抗糖尿病和抗肿瘤制剂、肝脏滋补品、护肤品、肥皂、甚至发油。
首次被介绍是在1839版的爱丁堡药典上，据报告在英国和美国药典被用作输液或酊剂。
在尼泊尔，印度獐牙菜用于本地治疗糖尿病，高血压，慢性疟疾，发烧和驱虫剂。
印度獐牙菜属龙胆科植物，含有的许多苦味素可以影响它的治疗特性如苦杏仁苷苦，环烯醚萜苷是已知最苦的化合物（10）。
印度獐牙菜也富含黄酮类化合物，萜类化合物，酮，环烯醚萜类和环烯醚萜苷（11）。
在尼泊尔当地，印度獐牙菜通过研磨并泡入水中一整夜的方法制成可输入身体的液体。
直到现在都还没有比较野生和栽培植物印度獐牙菜的报告。
在印度獐牙菜不同部位之间潜在的化学成分变化的知识缺乏。
尽管全部的印度獐牙菜都在被交易，任有一部分药用植物的相互矛盾的信息最有效。
因此本研究的目的是分析从尼泊尔不同地区收集的印度獐牙菜在不同的植物部分在水和12%乙醇中制备，，这些化学物质可能存在的差异（茎，根和花序和叶片的混合物）。
三萜含量的测定方法
三萜的检测方法
1、实验原理：
食品中三萜类物质经氯仿萃取后在香草醛-浓硫酸的作用下，生成橙色物质，其颜色深浅与三萜含量成正比。
2、试剂与材料
香草醛、氯仿、甲醇、浓硫酸均为分析纯试剂；
硫酸溶液：在100ml量筒中取水28ml，加浓硫酸至100ml，按硫酸稀释方法，小心进行。
香草醛溶液：香草醛8g加甲醇溶解定溶至100ml。
3、标准物质
齐墩果酸SIGMA 纯度≥97％
4、仪器
水浴锅、分光光度计
5、绘制标准曲线：
标准溶液：精密量取齐墩果酸标准品10mg，以氯仿定溶至100ml。
标准曲线：吸取标准溶液0.0，0.10，0.20，0.50, 1.00，1.50ml加热挥去溶剂，加入香草醛0.5ml，硫酸溶液5ml混匀后，于60度水浴中保温30分钟。
取出后冰水放置15分钟,于1cm比色皿中，以标准液0.0管为参比调节零点,于波长550±2nm处测定吸光值，求直线回归方程。
6、样品处理
固体样品：精密吸取样品0.2000-0.5000g，加氯仿约25.0ml，超声1小时，
冷却后，用氯仿定溶25.0m1，过滤：滤液备用。
液体样品直接用氯仿萃取，取氯仿层备用。
7，测定
精密移取样品制备液0.1-1.0m1于玻璃试管中，加热挥发掉溶剂加入香草醛0.5ml，硫酸溶液5.0ml混匀后，于60度水浴中保温30分钟。
于lcm色皿中，以试剂空白液为参比调节零点，于波长550±2nm处测定吸光值，按下列公式计算.
8、计算公式
cv1
W（%）= ————
mv2。
藏药材印度獐牙菜质量标准研究
牛蒡的染色体数目相同为2n =36,牛蒡的染色体核型为“2B ”与前人报道一致[11]。
毛头牛蒡的染色体核型亦为“2B ”为首次报道。
二者亲缘关系较近,同科同属,药用价值相似,均含有较高的牛蒡苷,是天然产物牛蒡苷的重要药用资源。
在中药牛蒡子使用中,毛头牛蒡的果实是其常见的伪品之一,从染色体核型来看二者均为“2B ”型,但毛头牛蒡的核型不对称系数为62.01比牛蒡的62.62略小,更接近50,毛头牛蒡的核型稍原始。
毛头牛蒡的染色体总长和长臂总长比牛蒡略大,而染色体体积比牛蒡的大5.03μm 3,毛头牛蒡18对染色体中m 型有10对,占55.56%,s m 型有8对,占44.44%,而牛蒡18对染色体中m 型有9对,占50%,s m 型有9对占50%。
这些染色体的长度、体积、核型不对称系数等指标可以作为牛蒡与毛头牛蒡细胞学染色体鉴别的重要依据,为牛蒡的正确使用,品种鉴别提供参考。
R E F E R E N C E S[1] T h e C h i n e s e A c a d e m y o f S c i e n c e s F o l r ao f C h i n aE d i t o r i a l C o m -m i t t e e .F l o r ao f C h i n a (中国植物志)[M].V o l 78,B e i j i n g :S c i -e n c e P r e s s ,1987:57-58.[2] C h i n a N a t i o n a l G r o u pC o r p .o f T r a d i t i o n a l a n dH e r b a l M e d i c i n e .C o m p e n d i u mo f C h i n e s e M e d i c i n a l M a t e r i a l R e s o u r c e s (中国中药资源志要)[M].B e i j i n g :S c i e n c e P r e s s ,1994:1247.[3] X UL ,D O UDQ ,WA N GB ,e t a l .A n a l y s i s c h r o m o s o m e o f a r c t i -u mi nC h i n a [J ].J C h i n M e dM a t e r (中药材),2009,32(3):337-339.[4] WA N GB ,L I N ,G UXJ ,e t a l .K a r y p t y p e a n a l y s i s o f D o e l l i n g e -r i a s c a b e r c h r o m o s o m e [J ].C h i nP h a r m J (中国药学杂志),2006,41(10):732-734.[5] Z H UW.P l a n t C h r o m o s o m ea n dT e c h n o l o g y (植物染色体及染色体技术)[M].B e i j i n g :S c i e n c e P r e s s ,1982:42-92.[6] L E V A NA ,F R E D G AK ,S A N D B E R G AA .N o m e n c l a c t u r e f o r c e n t r o m e r i cp o s i t i o no nc h r o m o s o m e [J ].H e r e d i t a s ,1964,52(2):201-220.[7] K U O SR ,W A N G TT ,H U A N G TC .K a r y o t y p ea n a l y s i so f s o m e f o r m o s a ng y m n o s p e r m s [J ].T a i w a n i a ,1972,17(1):66-80.[8] S T E B B I N SGL .C h r o m o s o m e E v o l u t i o ni nH i g h e r P l a n t s [M].L o n d o n :E d w a r dA r o n l d ,1971:88-105.[9] A R A N OH .C y t o l o g i c a l s t u d i e s i ns u b f a m i l yc a r d u o i d e a e(c o m -p o s i t a e )o f J a p a nI X [J ].B o t M a g ,1963,76(1):32-39.[10] D E -V E S C O V I M A ,S Z I K L AO .C a m p a r t i v e k a r y o t y p ea n a l y s i s o f D o u g l a s f i r [J ].S i l v a e G e n e t ,1975,24(2-3):48.[11] L I L ,L I UD ,Y A N GJ M ,e t a l .S t u d y o nc h r o m o s o m e o f A r c t i -u ml a p p a [J ].JS h a n g d o n gC o l l T r a d i t C h i n M e d(山东中医学院学报),1996,20(3):208-210.(收稿日期:2009-05-08)基金项目:国家药典委员会课题(Y S -200)作者简介:肖远灿,男,硕士 研究方向:药物分析与植物化学 ＊通讯作者:魏立新,男,博士 研究方向:藏药成分及药理作用研究 T e l :(0971)6143668 E -m a i l :l x w e i @n w i p b .a c .c n 藏药材印度獐牙菜质量标准研究肖远灿1,魏立新1＊,杨红霞1,2,杜玉枝1(1.中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,西宁810008;2.中国科学院研究生院,北京100049)摘要:目的 建立印度獐牙菜药材的质量标准。
藏药“甲蒂(印度獐牙菜)”中龙胆苦苷和獐牙菜苷等10种成分的含
藏药“甲蒂（印度獐牙菜）”中龙胆苦苷和獐牙菜苷等10种成分的含量测定与质量评价目的：建立印度獐牙菜中龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷等10种成分的含量测定方法，确定其含量测定指标成分及其限量标准。
方法：用Welch materials AQ-C18色谱柱；以甲醇和0.4%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱；柱温30 ℃，流速1.0 mL·min-1，检测波长254 nm。
结果：线性关系良好，精密度高，重复性好，回收率均在97%～103%；市场商品中各成分含量变异较大。
结论：该方法简便、灵敏、重复性好，适用于印度獐牙菜中各主要成分的含量测定；建议以獐牙菜苷和芒果苷作为“甲蒂（印度獐牙菜）”的含量测定指标成分，其含量限量分别为不得低于0.1%，0.3%。
标签：藏药；甲蒂；印度獐牙菜；HPLC；含量测定；含量限量“蒂达”（俗称“藏茵陈”）为藏医临床上主要用于肝胆疾病的一类常用药材，具有清肝利胆、利尿、续筋骨、止血等多种功效，临床广泛用于急性黄疸性肝炎、病毒性肝炎、胆囊炎、赤巴病、流行性感冒等多种疾病的治疗，约有10%的经典和现代藏药制剂，如二十五味珊瑚丸、二十五味獐芽菜丸、甘露灵丸、八味獐芽菜丸、五味獐芽菜散等中均使用有“蒂达”类药材。
藏医根据”蒂达”的来源、产地、功效等的差异，将“蒂达”分为“甲蒂”、“松蒂”、“桑蒂”、“机合蒂”等多个品种，其基原涉及到龙胆科、虎耳草科等的多属多种植物，其中“甲蒂”是藏医传统使用的“蒂达”类药材的代表性品种之一，来源于龙胆科植物印度獐牙菜Swertia chirayita （Roxb.ex Flemi）Karsten，以全草入药，目前药材主要从尼泊尔、印度等进口[1-3]。
关于“蒂达”类药材的质量标准，目前《中国药典》（2010年版）[4]、《部颁标准·藏药》（第一册）[5]、《藏药标准》[6]及《青海省药品标准》[7]中分别收载有唐古特虎耳草Saxifraga tangutica Engl.（迭达）[4]、印度獐牙菜S. chirayita（甲蒂）[5]、川西獐牙菜S. mussotii Franch.（桑蒂、藏茵陈）[5，7]、抱茎獐牙菜S. franchetiana S. Smith.（藏茵陈）[7]、普兰獐牙菜S. purpurascens Wall.（蒂达）[6]、椭圆叶花锚Halenia elliptica D.Don.（甲地然果）[5-7]、湿生扁蕾Gentianopsis paludosa（Mum.）Ma（加蒂那布）[5，7]、伞梗虎耳草S. pasumensis Marq. et Shaw、聚叶虎耳草S. confetifolia Engl.、虎耳草S. candelabrum Franch.（松蒂）[6]，但上述标准中均无成分对照的【鉴别】和【含量测定】项规定，标准不完善。
反相高效液相色谱法测定龙胆科藏药中齐墩果酸和熊果酸的含量
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RP-HPLC内标法测定5种中草药的齐墩果酸含量
RP-HPLC内标法测定5种中草药的齐墩果酸含量张秀真;高素莲【摘要】建立了反相高效液相色谱-内标法测定了齐墩果酸的含量.以苯甲酸为内标物,C_(18)反相柱(250mm×4.6mmi.d.,5μm)为分析柱,甲醇-水-冰醋酸(95:5:0.1)为流动相,流速1.0 mL/min;检测波长210nm,柱温35℃.齐墩果酸浓度10.0～500 mg/L范围内,对照品与苯甲酸的色谱峰面积比呈良好的线性关系.该方法准确、快速、灵敏度高、重现性好.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2010(027)002【总页数】3页(P80-82)【关键词】中草药;齐墩果酸;HPLC;内标法【作者】张秀真;高素莲【作者单位】安徽大学现代实验技术中心,国家计量认证实验室,合肥,230039;安徽大学现代实验技术中心,国家计量认证实验室,合肥,230039【正文语种】中文【中图分类】R284.2;O657.7~+2齐墩果酸(Oleanolic acid，简称OA)，又名土当归酸，是一种天然来源的药物，具有降低谷丙转氨酶，促进细胞再生，防止肝硬化，抗炎和强心作用，是治疗肝炎的有效成分[1]，近年来医学研究又证明其具有一定的抗癌活性[2-3]，且毒副作用小，安全性高。
此外欧美国家还将其作为天然抗氧化剂应用到食品中。
因此，齐墩果酸将在病防治、医疗保健和食品工业等领域有广泛的应用前景。
OA属于五环三萜类化合物，广泛地存在于医学草本植物和其他植物中：如山楂、乌梅、女贞子、夏枯草、地肤子等，以游离或结合成苷的形式存在。
目前，其分析方法主要有高效液相色谱法(HPLC)[4-6]、薄层色谱法(TLC)[7]、气相色谱法(GC)[8-9]等方法，其中以HPLC法为最常用。
但迄今为止采用RP-HPLC内标法测定中草药中齐墩果酸的含量还未见报道。
本文采用加热超声波回流提取法提取5种中草药(安徽省亳州地区种植)的齐墩果酸，以苯甲酸为内标物，RP-HPLC法直接分离测定其含量。
总三萜含量
总三萜化合物是一类广泛存在于植物中的天然产物，具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等。
在中药材中，总三萜化合物也是重要的活性成分之一，对于药材的质量和药效有着重要的影响。
总三萜含量的高低是评价中药材质量的重要指标之一。
一般来说，总三萜含量越高，药材的质量和药效越好。
因此，对总三萜含量的测定和控制对于保证中药材的质量和安全性具有重要意义。
目前，测定总三萜含量的方法有多种，如薄层色谱法、紫外可见分光光度法、高效液相色谱法等。
这些方法各有优缺点，需要根据具体情况选择合适的方法进行测定。
在中药材中，总三萜化合物主要存在于植物的根、茎、叶、果实等部位，但不同种类的植物和不同部位的含量差异较大。
因此，在选择中药材时，需要了解其总三萜含量的高低，以便更好地评估其质量和药效。
此外，总三萜化合物在中药制剂中的应用也日益广泛。
通过测定中药制剂中总三萜的含量，可以更好地控制制剂的质量和药效，为临床用药的安全性和有效性提供保障。
总之，总三萜含量是中药材质量控制的重要指标之一，对其含量的测定和控制对于保证中药材和制剂的质量和安全性具有重要意义。
川西獐芽菜中三种山酮成分的含量测定102
川西獐芽菜中三种山酮成分的含量测定摘要】目的利用反相高效液相色谱法建立川西獐芽菜中3种山酮的含量测定，即用Kromasil-C18 (250mm×4.6mm,5μm)色谱柱，以流动相甲醇和水（含0.04%磷酸）的比例在0～20min内由65%至85%线性梯度洗脱，流速0.80ml?min-1,检测波长为254nm,柱温30℃。
结果山酮成分达到基线分离，山酮的线性范围为0.05～6.25μg（r=0.9997）。
结论测定方法快速、结果准确、可靠。
【关键词】山酮川西獐芽菜龙胆科反相高效液相色谱川西獐芽菜（S. mussotii Franch）系龙胆科(Gentianaceae)獐芽菜属(Swertia)植物，主要产于青海、西藏及四川等地，是藏族民间常用的单方草药，俗名“藏茵陈”。
具有清热解毒，利胆退黄之功能，可治疗肝炎，黄胆型肝炎，肝胆等疾病[1]。
山酮又叫苯丙色原酮，是一种特殊型的黄酮类化合物，在自然界中分布有限，主要分布于龙胆科、藤黄科及远志科等高等植物及一些低等植物中[2]。
山酮类化合物具有广泛的生理活性，是良好的中枢神经抑制剂，心血管兴奋剂，具有利胆和抑制结核杆菌，抑制鼠脑腺体单胺氧化酶等作用[3、6]。
近来对山酮物质的研究已愈来愈引起人们的重视，国内外有学者采用薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等方法对山酮及其衍生物进行过研究[4、5]。
本文利用HPLC测定川西獐芽菜中山酮类有效成分的含量，对评价药材质量及材料源的研究具有重要意义。
1.仪器Agilent1100高效液相色谱仪，配置：手动进样器、在线脱气机、高压二元梯度泵、恒温柱温箱、DAD检测器、Agilent1100色谱工作站Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱；KQ3200超声波清洗器；SZ-97自动三重纯水蒸馏器。
2. 试剂甲醇为高效液相色谱专用试剂；水为自制三重蒸馏水；磷酸为AR级。
山酮对照品分析得到（归一化法测定，纯度大于98%）。
齐墩果酸的提取及鉴别
齐墩果酸是从龙胆科植物獐牙菜属的青叶胆全草或女贞子的果实中分离提取而得一种五环三萜类化合物，以游离体和配糖体存在于多种植物中。
齐墩果酸在植物中存在很广泛，一般含量0.2%～2%。
葫芦科植物罗锅底含量较高为1.5%～2%，女贞子果实含量0.6%～0.7%。
齐墩果酸为白色针状结晶 (乙醇)，无臭、无味。
对酸、碱不稳定。
熔点308～310℃，[α]20D+73.3° (c=0.15，氯仿)，不溶于水，可溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿。
醇提制备法：将木根皮100g切成小块或丝状，加500ml 70%乙醇回流提取3次，每次约3小时，醇提取液合并；然后蒸馏回收大部分乙醇，再加入硫酸使其浓度为15%，回流2小时，放冷后过滤滤饼用水洗3次，再用3% 氢氧化钠液煮沸2次，用水煮沸1次，每次沸腾后过滤，可得灰白色钠盐粗品。
将粗品加约8倍量85%以上乙醇，0.5%活性炭回流40分钟，过滤，滤液用HCl 调至pH=3～4放置过夜，过滤，滤饼用蒸馏水洗至无氯离子，干燥即得齐墩果酸精品。
水提制备法：取木根皮块粉碎后，用水煎煮3次，每次约1小时，合并水煎液，浓缩成稀膏状。
然后加入浓硫酸不断搅拌，使其浓度达到20%，加热约1小时，放冷后加水稀释，过滤，滤饼水洗后，用3%氢氧化钠溶液煮沸2次，水煮沸1次，每次沸腾后过滤，得钠盐粗品。
将粗品加约8倍量85%以上乙醇，0.5%活性炭，回流40分钟，过滤，滤液再用HCl调至pH=3～4，放置过夜，过滤，滤饼用蒸馏水洗至无氯离子，干燥即得本品。
鉴别方法步骤(1)取该品约50mg，加氯仿2ml溶解后，加硫酸2滴，振摇，静止，氯仿液自无色（或淡黄色）渐变为淡红色。
(2）取该品少量，加乙酸酐lml，微热使溶解，滴加硫酸1滴，即显紫红色，放置后色渐变深。
(3）取该品少量，加香草醛的冰乙酸溶液（香草醛0.5g，加冰乙酸10ml溶解，即得）0.2ml，加高氯酸0.8ml，置沸水浴中加热数分钟，显紫红色，加乙酸乙酯2ml，紫红色溶入乙酸乙酯中，放置不变色。
高效液相色谱法同时测定四数獐牙菜中4种有效成分含量
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关键词 反 相 高效液 相 色谱 ； 落干 酸 ； 牙菜苦苷 ； 獐 龙胆 苦苷 ； 果苷 ； 獐 牙 菜 芒 四数 中 图分类 号 ｓ４ 文 献标 识码 Ａ ６７ 文章 编号 ０ １—６ ｌ２０ ）０ ２６ — ２ ５７ ６ １（０ ６ １— １３０
藏药印度獐芽菜石油醚部位化学成分及体外活性研究
藏药印度獐芽菜石油醚部位化学成分及体外活性研究采用各种柱色谱以及重结晶等方法对印度獐芽菜石油醚萃取部位进行化学成分研究。
通过理化性质和波谱数据分析鉴定了15个化合物，包括8个酮，2个三萜，1个裂环烯醚萜，1个香豆素和3个其他类化合物，分别为1，8-二羟基-3，5-二甲氧基酮（1）、1-羥基-3，7，8-三甲氧基酮（2）、1，8-二羟基-3，5，7-三甲氧基酮（3）、1-羟基-3，5，7，8-四甲氧基酮（4）、1，5，8-三羟基-3-甲氧基酮（5）、1-羟基-3，7-二甲氧基酮（6）、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基酮（7）、1-羟基-3，5-二甲氧基酮（8）、古柯二醇（9）、齐墩果酸（10）、（±）-龙胆内酯（11）、东莨菪内酯（12）、芥子醛（13）、丁香醛（14）、β-谷甾醇（15）。
其中化合物3，4，9，11～14为首次从该植物中分离得到，化合物9和12为首次从獐芽菜属中发现。
对5个量大酮1，2，5，7，8进行体外活性测试，结果显示其在最高浓度50 μmol·L-1对胰腺癌细胞SW1990和BxPC-3的增殖和过氧化氢（H2O2）诱导的人脐静脉融合细胞EA.hy926氧化应激损伤均无明显作用。
标签：印度獐芽菜；酮；石油醚部位；化学成分；胰腺癌细胞；氧化应激损伤[Abstract] The present work is to study the chemical constituents from petroleum ether fraction of Tibetan medicine Swertia chirayita by column chromatography and recrystallization. The structures were identified by physical and chemical properties and spectral data as swerchirin （1），decussatin （2），1，8-dihydroxy-3，5，7-trimethoxyxanthone （3），1-hydroxy-3，5，7，8-tetramethoxyxanthone （4），bellidifolin （5），1-hydroxy-3，7-dimethoxyxanthone （6），methylswertianin （7），1-hydroxy-3，5-dimethoxyxanthone （8），erythrodiol （9），oleanolic acid （10），gnetiolactone （11），scopoletin （12），sinapaldehyde （13），syringaldehyde （14），and β-sitosterol （15）. Compounds 3，4，9，11-14 were isolated from S. chirayita for the first time. Compounds 9 and 12 were firstly isolated from the genus Swertia. The cytotoxic activities of compounds 1，2，5，7 and 8 against human pancreatic cancer cell lines SW1990 and BxPC-3，and the protective effects of these compounds against hydrogen peroxide （H2O2）-induced oxidative stress in human endothelium-derived EA.hy926 were investigated in vitro. The results showed no obvious effect at the high concentration of 50 μmol·L-1[Key words] Swertia chirayita；xanthone；petroleum ether fraction；chemical constituents；pancreatic cancer cells；oxidative stress damage印度獐牙菜Swertia chirayita （Roxb. ex Fleming）H. Karst.，藏语名“甲蒂”，为龙胆科植物印度獐牙菜的干燥全草，主要分布在克什米尔至不丹的喜马拉雅温带地区，主产于印度、尼泊尔和不丹，是藏医药治疗肝胆疾病的首选药物，在印度传统医药中也广泛应用[1]。
HPLC法测定不同品种獐牙菜中齐墩果酸的含量
（５ ｍ ４６ ｍ ｏ ｍ ａ ｓｄ Ｔ ｅｍ ｂｌ ｐ ａｅｃｎ ｉｅ ｆ ｔａｏ— ｔｒ （０ １ ） ｉ ｅ ｃ ｏ ａｅｅｇｈｏ ２ ７ ｍ １０ ｍ＊．ｍ ）ｃｌ ｎｗ ｓｕｅ ． ｈ ｏ ｉ ｈｓ ｏｓ ｔｄｏ ｈ ｎｌＷａｅ ９ ：０ ｗｔ ｄｔ ｔ ｎｗ ｖｌｎｔ ｆ ０ ｎ ， ｕ ｅ ｓ Ｍｅ ｈ ｅｉ
牙 菜 中的 齐墩 果 酸含 量 ， 色谱 条件 ：Ｏ Ｂ Ｘ Ｓ — １ （ ． Ｚ Ｒ Ａ Ｂ Ｃ ８ ４６ ｍｍｘ ５ ｍｍ，ｔ ｌ０ ５ ｍ色谱 柱 ） 流动 相 为 甲醇一 （０ ｘ ， 水 ９：
ｌ） Ｏ ，检 测 波 长２ ７ｍ，流速 １ ｍｌｍｎ ０ｎ ． ・ ｉ～，柱 温为 室温 。结果 ：测 定观 赏獐 牙 菜 中齐墩 果酸 的平 均 回收 率为 ０ １２ ％， ０． 重现 性 实验ｓ １ ８ 符 合 定量 分析 要 求 。分 别 测 定 了６ 獐 牙 菜 中 齐墩 果酸 的 含 量 ： 赏獐 牙菜 ４ 为 ． ％， ５ 种 观 （ ｅｏａ ． ｍ ／， 川獐 牙 菜（ ｉ ｈｏ ｓ ）２ ３ ／， 江 獐 牙 菜 （ ｄｌｖｙ）１ ７ ｇｇ 紫红 獐 牙 Ｓ ｄｃｒ）２ ４ ｇｇ 宾 ３ Ｓ ｂｎ ｕｚ ｉ ． ｍｇ 丽 ｃ ￣ｎ ｓ ４ ｇ ｅａａｉ ． ｍ ／， ９
Ｏ０ ＡＵＦ ． ｈ ｏ ｒ ｔ ｓｗａ ． ｍｉ ～ Ｒｅ ｕ ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｎ ｒ ｃ ｖ ｒ ｆＯｌａ ｏｉ ｃｄ ｉ ｗ ｒｉ ｅ ｏ ａ ｗａ ０ ． ％ ． ｈ Ｄ ．５ Ｓ Ｔ ｅ ｆ ｗ ａｅ ｓ １０ ｍｌ ｌ ｎ ． ｓ ｌ：Ｔ ａ ｅ ｏ ｅ ｙ ｏ ｅ ｎ ｌ ａ ｉ ｎ Ｓ ｅ ｔ ｄ ｃ ｒ ｓ １ ２４ ｃ ａ Ｔ ｅ ＲＳ ｗ ｓ １５ ％ ｗ ｉｈ ｍｅ ｈ ｅ ｕｒ ｍｅ ｔｏ ｕ ｎ ｉ ｔ ｅ ａ ａ ｙ ｉ． ｅ ｃ ｎｅ ｔ ｏ ｅ ｎ ｌ ｃｄ ｉ ｉ ｐ ｃｅ ｆ Ｓ ｅ ｔ ｅ ｂ ｅ ｅ ａ ．８ ｈｃ ｔｔｅｒｑ ｉ ｅ ｎ ｆｑ ａ ｔ ａ ｉ ｎ ｌｓｓ Ｔｈ ｏ ｔｎ ｓ ｆＯｌ ａ ｏ ｉ ａ ｉ ｎ ｓｘ ｓ ｅ ｉ ｓ ｏ ｗ ｒ ａ ｈ ｒ ｓ ｗ ｒ ｔ ｖ ｃ ｉ
藏药川西獐牙菜的质量标准研究_田成旺
·75·
第 19 卷第 4 期 2013 年 2 月
中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 4 Feb． ，2013
川西獐牙菜药材来源于龙胆科植物川西獐牙菜 的干燥全草，为我国传统藏药藏茵陈的主要源药材 之一，具有清肝利胆、退诸热的功效，用于治疗黄疸 型肝炎，疗 效 显 著［1］。川 西 獐 芽 菜 收 载 于 卫 生 部 《药品标准·藏药》（ WS3-BC-0006-95） ，其中包括性 状鉴别和性味、功能等项，但没有薄层鉴别和含量测 定项，难以有效控制川西獐牙菜的质量。现代研究 表明，川西獐牙菜中含有环烯醚萜、呫吨酮、三萜等 多种类别 的 化 学 成 分［2-4］，其 中 环 烯 醚 萜 类 成 分 包 括獐牙菜苦苷、獐芽菜苷、龙胆苦苷等，并具有抗炎、 促进肝损伤细胞修复等药理活性［5-6］； 呫吨酮类成 分包括芒果苷、当药醇苷、1-三羟基-2，5，8-三甲氧基 呫吨酮等，并具有抑制转氨酶升高、抗乙肝病毒等药 理活性［7-8］； 三萜类成分包括齐墩果酸、熊果酸等， 并具有抗 炎、保 肝 等 药 理 作 用［9-10］。 本 文 在 参 阅 相 关文献的基础上［11-14］，建立了川西獐牙菜药材的薄 层鉴别和主要活性代表成分獐牙菜苦苷、芒果苷、当 药醇苷和齐墩果酸的含量测定方法，以达到科学控 制藏茵陈药材质量的目的。 1 材料
第 19 卷第 4 期 2013 年 2 月
中国实验方剂学杂志 Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 4 Feb． ，2013
藏药材印度獐牙菜5种成分含量测定及药效学初步研究
引言
印度獐牙菜为龙胆科獐牙菜属植物印度獐牙菜 （藏语称甲蒂）[Swertiachirayita（Roxb. exFlemi.）Karsten] 的干燥全草，藏药蒂达的主要来源药材之一 ， [1-3] 为 一年生或多年生草本，是藏医治疗肝胆疾病的首选 药物[4]。
一测多评法（quantitativeanalysisofmulti-components by single-marker，QAMS） 是由中国中医科学院王智 民等[5]于 2006 年率先提出的多指标质量控制方法， QAMS 具有检测成本低、分析效率高等优点，是利用
其它试剂均为分析纯级试剂；水为 Millipore 超纯水
Agilent1200 液相色谱仪， 配 G1322A 在线脱气 机，G1311A 四元泵，G1329A 自动进样器，G1316A
盒 ， 购 自 上 海 科 华 公 司 ； 联 苯 双 酯 （国 药 准 字 H33021305，批号 080207）；其它试剂均为国产。
柱温箱，G1315D 二极管阵列检测器。 KQ5200DE 型 数控超声波清洗器 （昆山市超声仪器有限公司），
龙胆苦苷对照品（Gentiopicrin，中国药品生物制 品检定所，供含量测定用，批号 110770-2L203，PL602-L，XS204 天 平 。 果苷（Mangiferin，中国药品生物制品检定所，供含量
TAUTO，RU-T-20 型超纯水仪 （上海同田生物技术 测 定 用 ， 批 号 111607-200301）， 獐 牙 菜 苦 苷
销售收入 11.2 亿元，新增利税 2.6 亿元。 研究成果技术创新突出，应用程度高，具有较强
的示范、带动、辐射和扩散能力，提高了藏医药行业 的整体技术水平、竞争能力和系统创新能力，促进了 藏药产业结构优化调整、质量标准升级及产品更新 换代，对藏药行业的发展起到了极大推动作用，先后
印度獐牙菜的化学成分研究
及其苷类，如芒果苷、当药醇苷［６］；环烯醚萜及其 苷类，如 龙 胆 苦 苷、獐 牙 菜 苦 苷［７］；三 萜 及 其 苷 类，如齐墩果酸、熊果酸［８］；以及生物碱等类型的 化合物［７］。相对而言，对木脂素类化合物的报告 较少。为了进一步研究这一药用植物资源，弄清 印度獐牙菜的药效物质基础，本文对产自云南省 香格里拉地区的印度獐牙菜的正丁醇相进行分离 纯化，得到了 ５个木脂素类化合物，结构如下：
印度獐牙菜的化学成分研究
左马怡，盛 誉，阚雪清，牟林云，刘佳鑫，李干鹏
（云南民族大学民族医药学院，昆明 ６５０５００）
摘 要： 研究印度獐牙菜的化学成分。采用各种柱色谱进行对印度獐牙菜的正丁醇相分离纯 化，并通过 ＵＶ、ＩＲ、ＭＳ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ等波谱技术进行结构鉴定。分离鉴定了 ５个木脂素类化 合物，分别为（＋）－丁香脂素（（＋）－Ｓｙｒｉｎｇａｒｅｓｉｎｏｌ，Ｉ）、秃毛冬青甲素（Ｇｌａｂｅｒｉｄｅ，ＩＩ）、Ｓａｌｉｃｉｆｏｌｉｏｌ （Ⅲ）、蛇菰宁（Ｂａｌａｎｏｐｈｏｎｉｎ，Ⅳ）、（－）－Ｂｅｒｃｈｅｍｏｌ（Ⅴ）。
Байду номын сангаас４４·
云南化工 ２０１６年第 １期
１ 实验部分
１１ 实验材料、仪器与试剂 柱层析硅胶［０１５０～００７５０ｍｍ（２００～１００
目），００４５０～００７５０ｍｍ（３００～２００目 ）及 ００３７４～００７５０ｍｍ （４００ ～３００目）］；薄层层 析硅胶 ＧＦ２５４（青岛海洋化工厂）；反相填充材料 ＲＰ－１８［００７０ｍｍ（２５０目），Ｍｅｒｃｋ公司］；ＭＣＩ 填充材料 ＭＣＩ－ｇｅｌＣＨＰ－２０Ｐ（７５～１５０μｍ）； ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ－２０（Ｍｅｒｃｋ公司）。
藏药翼首草不同产地根和叶中齐墩果酸与熊果酸的含量测定
藏药翼首草不同产地根和叶中齐墩果酸与熊果酸的含量测定陈德道;陈根平;刘渊宏;张国霞;张樱山;李富银【摘要】Objective:To detect the contents of malol and oleanolic acid contained in different parts of YiShouCao (hooker winghead root) from different producing areas.Methods:The contents determination was performed by using HPLC.Results:By determining the contents of malol and oleanolic acid contained in different parts of YiShouCao from different producing areas,the great difference existed in the contents of two kinds of the ingredients contained in different parts of YiShouCao from different producing areas,the contents in the root of the samples were unqualified,the contents in the leaves were the highest,50 times of the contents in the root.Conclusion:Conforming articles YiShouCao should be the entire plants,currently,commercial medicinal materials on the markets mostly are the roots,and it doesn't conform to medicinal standard.%目的:测定不同产地和不同药用部位药材中齐墩果酸和熊果酸的含量.方法:采用高效液相色谱法进行含量测定.结果:通过对不同产地和不同药用部位药材中齐墩果酸和熊果酸的含量测定,得知不同产地和不同药用部位中两种成分的含量有很大的差异,检测样品中根部含量均不合格,叶部含量最高为根部的50倍.结论:合格商品翼首草应为全草,目前市场上的商品药材多为根部,不符合药用标准.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2017(030)012【总页数】4页(P16-19)【关键词】翼首草;不同药用部位;齐墩果酸;熊果酸;高效液相色谱法;含量测定【作者】陈德道;陈根平;刘渊宏;张国霞;张樱山;李富银【作者单位】甘肃省中药现代制药工程研究院有限公司,甘肃兰州730000;甘肃省中药现代制药工程研究院有限公司,甘肃兰州730000;甘肃省中药现代制药工程研究院有限公司,甘肃兰州730000;甘肃省中药现代制药工程研究院有限公司,甘肃兰州730000;甘肃省中药现代制药工程研究院有限公司,甘肃兰州730000;甘肃奇正藏药有限公司【正文语种】中文【中图分类】R284藏药翼首草系藏族习用药材，为川续断科植物匙叶翼首草Pterocephalus hookeri(C.B.Clarke)Hoeck的干燥全草［1］。
藏药二十五味獐牙菜丸质量标准提高
藏药二十五味獐牙菜丸质量标准提高古桑德吉;尼玛潘多【摘要】目的:建立二十五味獐牙菜丸的质量控制方法.方法:采用显微鉴别法对处方中显微特征强、重复性高的红花和甘草进行显微特征的定性鉴别;对处方中小檗皮、丁香、木香进行薄层色谱法定性鉴别.结果:显微鉴别方法的专属性强,重现性好;薄层色谱方法简便、专属性强.结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于藏药二十五味獐牙菜丸的质量控制.%Objective To establish a quality Standard for Ershiwuweizhangyacai Pills.Methods CarthamiFlos and Glycyrrhize Radix et Rhizoma are main components of Ershiwuweizhangyacai Pills,it were distinguished by microscopic distinction.Berberidis Cortex,Caryophylli Flos and Aucklandiae Radix were identified by TLC(Thin Layer Chromatography).Results Microscopic identification is specific and repeatable;TLC is easy going and has a good specificity.Conclusion TLC is simple,precise and repeatable.This method is worked for quality control of Ershiwuweizhangyacai pills.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2017(026)007【总页数】3页(P15-17)【关键词】二十五味獐牙菜丸;质量标准;显微特征;薄层鉴别【作者】古桑德吉;尼玛潘多【作者单位】西藏自治区食品药品检验所,西藏拉萨 850000;西藏自治区食品药品检验所,西藏拉萨 850000【正文语种】中文【中图分类】R284.1藏药二十五味獐牙菜丸系藏族验方，最早记载于藏医著名古籍《四部医典》。
藏药匙叶翼首草中齐墩果酸及熊果酸的含量测定
藏药匙叶翼首草中齐墩果酸及熊果酸的含量测定权红;甄梓娟;李连强;陈敏;兰小中【摘要】目的:采用HPLC-PDA法测定藏药匙叶翼首草不同生长年限、不同药用部位中的齐墩果酸及熊果酸含量动态变化.方法:采用YMC-ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1％乙酸铵为流动相(85:15)等度洗脱,流速为1 mnL· min-,检测波长为210 nm,柱温为35℃.结果:齐墩果酸在5～150 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 5),平均加样回收率为101.17％;熊果酸在20～600 mg·L-1线性关系良好(r =0.999 5),平均加样回收率为100.69％.匙叶翼首草中齐墩果酸和熊果酸的质量分数分别为0.199 ～0.946、0.737 ～6.750 mg·g-1.结论:匙叶翼首草中齐墩果酸及熊果酸的含量在时间与空间格局上均具有统计学差异.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)006【总页数】4页(P762-765)【关键词】匙叶翼首草;齐墩果酸;熊果酸;含量测定【作者】权红;甄梓娟;李连强;陈敏;兰小中【作者单位】西藏大学农牧学院药用植物研究中心,西藏林芝860000;西藏大学农牧学院药用植物研究中心,西藏林芝860000;西藏大学农牧学院药用植物研究中心,西藏林芝860000;西南大学药学院,重庆400715;西藏大学农牧学院药用植物研究中心,西藏林芝860000【正文语种】中文·基础研究·翼首草为川续断科(Dipsacaceae)翼首草属(Pterocephalus)匙叶翼首草Pterocephalus hookeri (C.B.Clarke) Höeck植物的干燥全草，收载于《中华人民共和国药典》(《中国药典》)2015版一部[1]，是我国传统藏药材。
藏药印度獐牙菜中总三萜和齐墩果酸的含量测定
藏药印度獐牙菜中总三萜和齐墩果酸的含量测定
孙忠文;刘汉清;黄一平;鞠建明
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2010(019)001
【摘要】目的:测定印度獐牙菜中总三萜和齐墩果酸的含量.方法:以齐墩果酸为对照品,分别采用可见分光光度法和高效液相色谱法,测定总三萜和齐墩果酸含量.结果:总三萜含量为7.81mg/g,齐墩果酸的含量为3.11mg/g.结论:本方法操作简便准确,重复性好.
【总页数】1页(P21)
【作者】孙忠文;刘汉清;黄一平;鞠建明
【作者单位】南京中医药大学,江苏,南京,210046;南京中医药大学,江苏,南
京,210046;江苏省中医药研究院,江苏,南京,210046;江苏省中医药研究院,江苏,南京,210046
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.弥勒獐牙菜药材不同部位獐牙菜苦苷与齐墩果酸的含量测定
2.藏药印度獐牙菜化学成分的UPLC-ESI-Q-TOFMS分析
3.藏药印度獐牙菜提取物红外光谱分析及保肝活性比较研究
4.薄层比色法测定獐牙獐牙菜中齐墩果酸的含量
5.藏药材印度獐牙菜5种成分含量测定及药效学初步研究
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齐墩果酸（Oleanolic acid），又称石竹素、土当归酸，是一种五环三萜类化合物，以游离体和配糖体存在于多种植物中，如青叶胆全草，齐墩果叶，大星芹的根、叶。
齐墩果酸是一种广谱抗菌药，临床上用于护肝降酶，治疗支气管炎、菌痢、急性肠胃炎、泌尿系统感染。
另外，临床上还用于治疗急性肝炎。
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２ ３ ６ 回收率试验 取 已知含量 （ ． １ ／ ） 同一样 品 ５ ．． ７ ８ ｍｇｇ 份 ，精密称取 １０ ｇ细粉 ，加 入 齐墩 果酸 对 照 品 １０ ｒ ， ０ｍ ． ０ ｇ ａ 按照供试 品溶液制 备方 法制备 ，并按 照 总鞣质 含量测 定 方 法测定 含量 ，结果 ５次测定 的平均 回收率 为 ９ ．６ ，Ｒ Ｄ ９６％ Ｓ １０ ％ ，说 明该测定方法 测得的结果准确 。 ．２ ２ ３７ 总三 萜的含量测定 精密 吸取供试 品溶 液和对 照 品 ．． 溶液各 ０ ４ ｌ ． ｍ ，置 １ｍｌ 塞试 管 中，水 浴挥 干溶剂 ，加 入 ０ 具 新鲜配制 的 ５ 香 草醛 冰醋 酸 溶液 ０２ ｌ ％ ． ｍ ，高 氯 酸 ０ ８ ｌ ．ｍ ， ７ｏ ０ Ｃ水 浴加热 １ ｒｎ ５ ｉ，取出加入冰醋 酸 ５ ｌ ａ ｍ ，于 ５ ８ ｍ处测 ４ｎ 定吸光度 ，随行试剂作 空 白对照 。 ２ ４ 齐 墩 果 酸含 量 测 定 ． ２ ４ １ 色 谱 条 件 ：色 谱 柱 ：Ｚ ｒａ Ｂ —Ｃ ８ （ ． × ． ． ｏｂｘ Ｓ １ ４６ １０ ｍ，５． ，流动 相 ：乙腈 一０ １ 磷 酸水 溶 液 ＝７ ： ５ｍ １ Ｌ ｍ） ．％ ０ ３ ０，流速 １ ／ ｉ，柱温 ３ ｏ ｍｌｍｎ ０ Ｃ，检测波长 ２５ ｍ。 １ｎ ２ ４ ２ 标准 曲线 的制备 取浓度 为 ０ １２ ｍｇｍ 齐墩果 酸 ．． ．９ ４ ／ ｌ 对 照品溶液 ，按 照 ２ ４ １中色谱 条件 ，分别 进样 ２ 、８ ．． 、５ 、 １ 、１ 、２ ｕ，测 定 峰 面 积 ， 以峰 面 积 为 纵 坐标 ，以 进 样 量 ０ ５ ０ｌ 为横坐标 绘 图 ，得 回归 方 程 Ｙ＝３５ １ｘ＋６４ ９ ，Ｒ ５．２ ． ０８ ２＝ ０９ ９ ，表 明在 ０ ３ ５ ｇ一 ．５ ｇ范围 内，线性关系 良好 。 ．９１ ．８ｕ ３８ｕ ２４ ３ 精密度 试验 精密吸取 同一 供试 品溶液 １ｕ ，连续 ．． ０ｌ 进样 ５次 ，峰 面积的 Ｒ Ｄ＝１ ８ ％。结果说明精密度 良好 。 Ｓ ．２ ２ ４ ４ 重现性试验 取 印度獐 牙菜粉 末 ５份 ，按 供试 品溶 ．． 液制备方法制备 印度獐 牙菜 药材 粉末 供试 品 的溶 液 ，按 照 ２ ４ １ 谱 条 件 重 复进 样 ５次进 行 测 定 ，外 标 法 定 量 ，测 得 ．． 色 齐墩果酸含量为 ３ １ｍ ／ ，Ｒ Ｄ＝ ．６ （ ５ 。 ． １ ｇ ｇ Ｓ ２ ０ ％ ｎ＝ ） ２ ４ ５ 稳 定性试验 取供 试 品溶液 在选 定 的色谱 条件 下 ， ．． 分 别于放置 ０，２ ，６和 ８ 后进 样 １ １ ，４ ｈ ０ｘ Ｌ进行 测定 。结果 齐 墩果 酸峰 面积 的 Ｒ Ｄ为 ２ ５ ％ ，表 明该 样 品溶 液 在 ８ Ｓ 。１ ｈ
民 族 医 药
Ｅｈ ｏ ｄｅｎ ｎ Ｅｔｎ ｐ ａｍａ ｙ ｔｎ ｍｅ ｉｉｅ ａ ｄ ｈ ｏ ｈ ｒ ｅ
中 国 民 族 民 间 医 药
Ｃ ｉｅｅｊｕ ］ｏ ｔｎ ｍ ｄｅ ｅ ａｄ ｅｈ ｏｈｒ ａｙ ｈｎｓ ｏｍａ ｆｅ ｏ ｅ ｉｎ ｎ ｔｎｐ ａｍ ｃ ｈ ｉ ・２ １・
２ 方 法 与 结 果 ２ １ 对 照 品 溶 液 制 备 ．
精密称取 齐墩果酸对 照 品 ４ ８ ｍｇ ． １ ，置 ２ ｍ 容 量瓶 中 ， ５ｌ 加 甲醇溶解 ，定 容 至刻 度 ，得 ０ １２ ｍｇｍｌ ．９ ４ ／ 齐墩 果 酸对 照 品溶液 。 ２ ２ 供 试 品溶 液 制备 ． 精密称取 印度獐牙菜细粉 １ ，置 ５ ｍ 三角 瓶 中，精 密 ｇ ０ｌ 加入 甲醇溶液 ２ ｍ ，超 声提取 ２次 ，每次 ４ ｍ ｎ ５ｉ ０ ｉ ，放冷 ，摇 匀 ，过滤 ，合并滤 液 ，置 ５ ｍｌ 瓶 ，加 甲醇定 容 至 ５ ｍ ， ０ 量 ０ｌ
印度獐牙菜 （ ｗ ｒａｂｍａｕａ Ｓ ｂ ｔ ｕ ｃ ）Ｈｏｋ Ｓ ｅ ｉ ｉ ｃｌｔ ｉ ．ｅ Ｚ ｃ． ｔ ａ（ ｅ ｏ． ｆ ｔ ｈｍ ．Ｏ ．Ｂ ｌｒｅ 藏语 名 甲蒂 （ ．ｅ Ｔ ｏ ｓ ＸＣ ．Ｃａｋ ） 藏文 ：ｒｙｔ ｇａ — ｉｇ ，为龙胆 目龙胆 科獐 牙 菜属植 物 印度 獐牙 菜 的干燥 全 ｎ） 草 ，功能清肝 利胆 ，退 诸热 ，临床 上主要 用 于治疗 急性 和 慢性肝炎 、脂 肪肝 、肝硬化 、急性 和慢性胆囊 炎 、胆结 石 、 贫血 等 ，且具有滋 补作 用 ，其中三萜类 成分是其 发挥保肝 、 降酶作 用 的 有效 成 分 ，齐墩 果 酸 是 三萜 类 的代 表 性 化 合 物¨ ｊ 。本文采用可见 分光 光度 法及 高效 液相 色谱 法分 别 测定 印度獐牙菜 中总 三萜 和齐墩 果 酸含量 ，为 该药 材 的质 量控制提供 了科学方法 和依 据。 １ 仪 器 与 试 药 Ｕ ２０ Ｖ一 ８２紫外 可见 分 光 光度 计 （ 尼 柯 上海 有 限 公 优 司） ｇ ｅｔ １０高效液相色谱仪 （ 国 Ａ ｉ ｎ 公 司） Ｌ ；Ａ ｉ ｎ １０ ｌ 美 ｇｅｔ ｌ ；Ａ ２４万分之一天平 （ ０ 瑞士 Ｍ Ｔ Ｔ Ｒ公司 ） ｎ ｅＴ Ｌ一１ Ｇ Ｅ ＩＥ ；Ａ ｋ Ｇ ６ 离心机 （ 上海安亭科学仪器厂 ） 。超 声波清洗 机 （ 山超 声 昆 仪器有 限公 司） ；齐墩 果 酸对 照 品 （ 批号 １０４ １７ ２—２ ０ １ ， ０ ５６ 中国药 品生物制品检定所 ） ；乙腈、磷酸 （ 色谱纯 ） ，其余分 析纯 ，印度獐牙菜由拉萨市高原生物研究所提供 。
２４ ６ 回收率试 验 取 已知 含 量 的样 品 ５份 ，精 密称 取 ．． １０ ｇ ．０ ，准确加入一定量 的齐墩果酸标 准 品 ，按 照供试 品溶 液制备方法制备 ，按 ２ ４ １ ． ． 色谱条 件测 定 ，并计算 回收率 ， 结 果 平 均 回 收率 为 １０ １％ ，Ｒ Ｄ＝ ．５ （ ５ 。 ０ ．９ Ｓ ０ ６ ％ ｎ＝ ） ２ ４ ７ 含 量测定 分 别精 密量取 对照 品、样 品溶 液 １ ， ．． Ｏ 进样 ，记录色谱 图 ，以外 标法 计算 齐墩 果酸 含量 ，其 结果 为 ：齐墩 果 酸 含 量 为 ３０ ％ ，平 均 含 量 为 ３ １ ％ ，Ｒ Ｄ ．９ ．１ Ｓ
为 １４ ％ 。 ．０ ３ 讨 论
３ １ 本文考察 了索式提取 、回流提取和超声 提取 三种提取 ． 方式对 印度獐 牙菜 中总 三萜 和齐墩 果酸 含量 的影 响 ，发现 回流提取 总三萜和齐墩果 酸的得率 稍低 于索 式提 取和超 声 提取 ，而超声提取操 作简单 ，因此 ，采用超声提取方式 。 ３２ 三萜类成分是 印度獐牙菜发挥 保肝利胆 作用 的重 要的 ．
有 效 成 分 ，是 印 度 獐 牙 菜 质 量 控 制 的 重 要 指 标 ，本 文 通 过
对其中总三萜和 齐墩果 酸 的含量 测定 ，对 其质 量控 制有 重
要意义 。
参考文献
［ ］蒲友明 ，张艺 ，古锐 ，等．藏药 “ １ 蒂达 ” 研究 概况 ［ ］ Ｊ ．湖南 中医药 大学学报 ， ０ ７ ７ ２ ０ ，２ ． ［ ］郭爱华．龙胆科獐 牙菜 属 药用 植 物化 学 成 分和 药 理作 用 的研 究 进展 ２ ［］ Ｊ ．山西中医学院学报 ， ０５ ． ２０ ，６ （ 收稿 日期 ：２０ ． １２ ） ０ ９ １ ．０
Hale Waihona Puke 法 ，测定总三萜和齐墩果酸含量。结果：总三萜含量为 ７ ８ ｍ ／ ，齐墩果 酸的含量为 ３ １ｍ ／ 。结论 ：本方法操作简便准确 ，重复性好。 ．１ ｇｇ ． ｌ ｇｇ
【 关键词】 ：印度獐牙菜 ；总三萜 ；齐墩果酸 ；含量测定 【 中图分类号】Ｒ ２． ９７２ 【 文献标识 码】Ａ 【 文章编号 】１０ — ５７ （００ １ ０２ － １ ０７ ８１ ２ １）Ｏ － ０ １ ０
藏 药 印 度 獐 牙菜 中总 三 萜 和 齐墩 果 酸 的 含 量 测 定
孙忠文 刘汉清 黄一平 鞠建明
１ ．南京中医药大学，江苏 南京 ２ ０ ４ ；２ １０ ６ ．江苏省中医药研究院 ，江苏 南京 ２０４ １０ ６
【 摘
要 】 目的：测定 印度獐牙菜 中总三萜和齐墩果酸的含量。方法 ：以齐 墩果 酸为对 照品，分别采用可见分光光度法和高效液相色谱 ：
＝
内测 定 稳 定 。
２ ３ １ 最大 吸收波长的选 择 取齐 墩果酸对 照 品溶 液 ，水 ．． 浴挥干溶 剂后 ，加 ５ 香 草 醛冰 醋 酸 溶 液 ０ ２ ｌ ％ ． ｍ ，高氯 酸 ０ ８ ，７ ｏ ． ｍｌ ０Ｃ水浴加热 １ｍｉ，取 出加入 冰醋 酸 ５ ｌ ５ ｎ ｍ ，显 色 ， 进 行 可 见 一紫 外 全 波 长 扫 描 。 结 果 表 明 ，对 照 品 溶 液 在 ５ ８ ｍ 处有 最 大 吸 收 峰 ，多 次 重 复 ， 峰 形 一 致 且 空 白对 照 ４ｎ 无干扰 ，故选择 ５ ８ ｍ作为样品测定 的波长 。 ４ｎ ２３ ２ 标准 曲线 的制备 精 密 吸取 齐墩 果 酸对 照 品 溶 液 ．． ０ ２ ． 、０ ４ ． 、０６ ｌ ． 、０３ ． 、０ ５ ． ｍ ，置 １ｍｌ 塞试 管 中 ，水 浴 挥 ０ 具 干 溶 剂 ，加 入 新 鲜 配 制 的 ５ 香 草 醛 冰 醋 酸 溶 液 ０ ２ ｌ 高 ％ ．ｍ ， 氯酸 ０ ８ ｌ ． ｍ ，于 ５ ８ ｍ处 测定 吸 光度 ，随行 试剂 作 空 白对 ４ｎ 照 。以峰面积为纵坐标 ，浓度为横坐标 ，得标准 曲线方 程 Ｙ ＝４ ． ６ ｘ 一 ００ ７ ， Ｒ ＝ ０ ９ ８ ， 表 明 在 ０ ０６ — １ １４ ． １３ ２ ．９ ９ ． ０４ ０ Ｏ９ ｍ ／ ｌ ． １２ ｇｍ 浓度范围内线性关系 良好 。 ２ ３３ 精密度试验 精 密吸取 同一供试 品溶 液 ６份 ，按 照 ．． 总 三 萜 的含 量 测 定 方 法 ，于 ５ ８ ｍ 处 测 定 吸 光 度 ，结 果 吸 ４ｎ 光度 的 Ｒ Ｄ＝１２ ％ （ ６ ，说 明精 密度 良好。 Ｓ ．６ ｎ＝ ） ２ ３４ 重复性试验 取印度獐牙菜粉末 ５份 ，按供试品溶液 ．． 制备方法制备印度獐牙菜药材粉末供试品的溶液 ，进行三萜含 量测定。结果平均含量为 ７ ８ｍ ／ ，Ｒ Ｄ为 ｎ９ ％ （ ５ 。 ．１ ｇｇ Ｓ ２ ｎ＝ ） ２ ３ ５ 稳定性试验 精密 吸取 供试 品溶液 ０４ ｌ ．． ． ｍ ，按 标 准 曲线制备项下方 法操作 ，显色 ３ ｍ ｎ后 ，每 隔 ５ ｉ ０ｉ ｍｎ测定 １ 次吸光度 ，共 ６次 ，计算 Ｒ Ｄ为 １２ ％ （ Ｓ ．４ ｎ＝６ ，表 明三 ） 萜类在显色终止反应后 ３ ｍ ｎ内测 定稳定。 ０ｉ