微生物药物敏性试验的意义
药物敏感试验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过药物敏感试验，了解病原菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供科学依据，以指导临床治疗，提高治疗效果。
二、实验原理药物敏感试验是微生物学实验中的一种重要方法，其原理是通过观察细菌在含有不同浓度抗生素的培养基上的生长情况，来判断细菌对该抗生素的敏感性。
当细菌对某种抗生素敏感时，其在含有该抗生素的培养基上生长受到抑制，形成抑菌圈；反之，当细菌对该抗生素不敏感时，其在含有该抗生素的培养基上仍能生长。
三、实验材料1. 样本：临床分离的细菌菌株2. 培养基：琼脂平板、肉汤培养基3. 抗生素：青霉素、链霉素、红霉素等4. 仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、镊子等5. 试剂：生理盐水、消毒液等四、实验方法1. 样本处理：将临床分离的细菌菌株接种于肉汤培养基中，37℃培养18-24小时，观察细菌生长情况。
2. 琼脂平板制备：将肉汤培养基加热融化，待冷却至50-55℃时，加入抗生素纸片，轻轻摇匀，倒入平板，待凝固。
3. 抑菌圈测定：将培养好的细菌菌株接种于琼脂平板上，37℃培养18-24小时，观察抑菌圈的形成情况。
4. 结果记录：记录不同抗生素对细菌的抑菌圈直径，并按抑菌圈直径大小进行敏感性分级。
五、实验结果1. 青霉素：抑菌圈直径为20mm，敏感；2. 链霉素：抑菌圈直径为15mm，中敏感；3. 红霉素：抑菌圈直径为10mm，低敏感。
六、实验讨论1. 通过本实验，我们了解到青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的抗生素选择。
2. 链霉素对所检测的细菌菌株具有中敏感，可以作为一种辅助治疗药物。
3. 红霉素对所检测的细菌菌株具有低敏感，不建议作为首选治疗药物。
4. 在临床治疗过程中，应根据药物敏感试验结果，合理选用抗生素，以减少耐药菌株的产生。
七、实验结论本实验通过药物敏感试验，成功检测了细菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供了科学依据。
实验结果表明，青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的首选抗生素。
细菌药敏试验报告解读
快速药敏试验技术
在短时间内获得药敏结果，为临床提 供及时指导。
个体化给药的探索
根据耐药类型，选择最敏感的药 物。
精准医疗在药敏试验中的 应用
利用基因组学、代谢组学等技术，深入了解 病菌耐药机制，为个体化给药提供依据。
耐药机制的研究
深入研究细菌耐药机制
某些药物之间存在协同作用，可以提高治疗效果，而另一 些药物之间存在拮抗作用，可能会降低治疗效果。因此， 药敏试验中忽视药物相互作用可能导致选择不合适的治疗 方案。
06
未来展望
新药敏试验技术的发展
自动化药敏试验技术
耐药基因检测技术
提高试验效率，减少人为误差，缩短 试验周期。
直接检测细菌耐药基因，预测耐药性 ，指导临床用药。
抑菌作用强，对某些细菌具有高度选择性。
详细描述
大环内酯类抗生素主要通过抑制细菌蛋白质合成来发挥抗菌作用，对某些细菌具有较强的选择性抑制 作用，如对革兰氏阳性菌、支原体、衣原体等具有较好的抗菌效果。常见的药物有红霉素、阿奇霉素 等。
氨基糖苷类
总结词
对需氧革兰氏阴性杆菌有强大抗菌作用。
详细描述
氨基糖苷类抗生素主要通过抑制细菌蛋白质合成来发挥抗菌作用，对需氧革兰氏阴性杆 菌具有较强的抗菌活性，常用于治疗肺炎、肠道感染等。常见的药物有庆大霉素、链霉
耐药（R）
总结词
表示细菌对抗菌药物耐药，治疗效果差。
详细描述
在药敏试验中，如果细菌对某种抗菌药物耐药（R），则说明该药物不能有效地杀死或抑制细菌的生长。通常， 耐药（R）表示细菌对抗菌药物的MIC值较高，处于耐药范围，因此治疗效果较差。对于耐药细菌，需要选择其 他敏感的抗菌药物治疗或采用其他治疗策略。
指导临床用药
兽医临床中的药敏试验作用和意义
兽医临床中的药敏试验作用和意义目前由各种细菌所引起的疾病给畜禽养殖业带来严重经济损失，阻碍了养殖业的快速发展，所以使用抗菌药预防和治疗细菌性疾病成了畜禽养殖过程中的一项重要工作。
但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，细菌的耐药性问题正变得越来越突出，不少耐药菌株可耐受多种抗生素。
由此而造成的危害十分严重，它不仅使抗菌药的疗效降低，疗程延长，死亡率升高和治疗费用增加。
这不仅给养殖业带来巨大的经济损失，而且耐药菌株可能会将耐药性基因由动物转移给人类，对人类健康也造成潜在威胁。
因此，临床上应合理应用抗菌药，以避免或减少耐药性的产生，而合理应用抗菌药控制畜禽疾病的一项重要内容就是通过药敏试验指导临床用药，以充分发挥抗菌药疗效，并尽可能减少其不良影响。
一、什么是药敏试验？抗菌药物敏感性试验（antimicrobial susceptibility test，AST），简称药敏试验，是指对敏感性不能预测的分离菌株进行试验，测试抗菌药在体外对病原微生物有无抑制作用，以指导选择治疗药物和了解区域内常见病原菌耐药性变迁，有助于经验性治疗选药。
药敏试验是兽医临床工作中的一项基本技能，也是使用抗菌药物治疗前必不可少的一道环节。
二、药敏试验的意义1、可以相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性，指导临床合理用药。
因为实验是在体外对已经分离的细菌进行药敏，不需要生物载体，不需要实验动物，操作相对简单，成本相对降低。
是一种既经济又有效的方法。
2、可以对流行病学调查进行监控，控制和预防耐药菌株的流行。
因为随着新型致病菌的不断出现，各种致病菌对不同的抗菌药的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药的敏感性也有差异。
进行有效的药敏试验可以及时掌握各种新型菌种和菌株的耐药性，对流行病学调查建立监控，同时采取相应的措施也就可以控制和预防耐药菌株的流行。
3、为临床用药提供参考依据。
因为一个正确的药敏试验结果，可作为临床兽医和畜禽养殖者选用有效抗菌药的参考。
药敏试验原理
药敏试验原理
药敏试验是一种用来测试细菌对抗生素的敏感性的实验方法。
它可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗感染，避免使用对细菌无效的抗生素，从而减少抗生素滥用和耐药性的发展。
药敏试验原理是基于细菌对抗生素的敏感性和耐药性，通过一系列的实验步骤来确定细菌对不同抗生素的敏感程度，从而为临床治疗提供指导。
首先，需要收集患者的痰液、血液或尿液等样本，分离出感染的细菌。
然后将这些细菌培养在含有各种抗生素的琼脂平板上，观察并记录细菌在不同抗生素下的生长情况。
通过比较不同抗生素对细菌的杀菌效果，可以确定细菌对抗生素的敏感性。
在药敏试验中，通常会使用一系列的抗生素，包括青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类抗生素等。
这些抗生素代表了不同的药物类别和作用机制，可以全面评估细菌的耐药性。
通过观察细菌在不同抗生素下的生长情况，可以确定细菌对各种抗生素的敏感性，从而为临床治疗提供参考依据。
在进行药敏试验时，需要严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性和可靠性。
同时，还需要考虑到不同细菌对抗生素的敏感性
可能存在差异，因此在选择抗生素治疗时，需要根据具体的细菌种类和药敏试验结果来进行个体化治疗。
总的来说，药敏试验是一种非常重要的临床实验方法，可以帮助医生选择最有效的抗生素治疗感染，减少抗生素滥用和耐药性的发展。
通过对细菌对抗生素的敏感性进行评估，可以为临床治疗提供科学依据，提高治疗效果，减少并发症的发生，对于维护患者的健康具有重要意义。
药敏试验平板的临床意义
MH琼脂平板ห้องสมุดไป่ตู้
产品预期用途
体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验 （AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力 的试验。随着新型致病菌的不断出现，抗菌药 的防治效果越来越差，并且各种致病菌对不同 的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌 株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以 来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌 药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物 对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供 临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效。
性能评价总结（MH）
4、药敏试验 按照临床和实验室标准协会发布的抗微生物 药物敏感性试验执行标准（第15版）要求，平 板接种质控菌应生长良好，抑菌圈应符合表1的 要求。
表1 药敏试验抑菌圈范围
• 河南美凯生物科技有限公司
产品预期用途
其大致方法是：从病人的感染部位采取含致 病菌的标本，接种在适当的培养基上，同时将 分别沾有一定量各种抗生素的纸片贴在培养基 表面（或用不锈钢圈，内放定量抗生素溶液）， 于一定条件下培养一定时间后观察结果。由于 致病菌对各种抗生素的敏感程度不同，在药物 纸片周围便出现不同大小的抑制病菌生长而形 成的“空圈”，称为抑菌圈。抑菌圈大小与致 病菌对各种抗生素的敏感程度成正比关系。于 是可以根据试验结果有针对性地选用抗生素。
产品预期用途
药敏试验旨在了解病原微生物对各种抗生素 的敏感（或耐受）程度，以指导临床合理选用 抗生素药物的微生物学试验。一种抗生素如果 以很小的剂量便可抑制、杀灭致病菌，则称该 种致病菌对该抗生素“敏感”。反之，则称为 “不敏感”或“耐药”。为了解致病菌对哪种 抗菌素敏感，以合理用药，减少盲目性，往往 应进行药敏试验。
产品预期用途
我公司生产的MH琼脂平板和苛养菌药敏琼脂 平板是药敏培养基，添加丰富营养物质，MH琼 脂平板主要用于非苛养菌的药敏试验，从而达 到筛选细菌的敏感抗菌药物、指导临床用药、 防止细菌产生耐药性的目的；苛养菌药敏琼脂 平板主要用于苛养菌的药敏试验，从而达到筛 选苛养菌的敏感抗菌药物、指导临床用药、防 止苛养菌产生耐药性的目的。
微生物药敏结果临床解读与应用
微生物药敏结果临床解读与应用微生物药敏试验（Antimicrobial Susceptibility Testing, AST）是一种用来检测微生物（如细菌）对特定抗生素的敏感性的实验。
这种测试的结果对于指导临床治疗尤为重要，特别是在处理细菌感染时。
以下是微生物药敏结果的临床解读和应用：一、临床解读：1.敏感（Sensitive, S）：●如果细菌对某种抗生素敏感，这意味着这种抗生素在临床上可以有效抑制或杀死这种细菌。
●在选择治疗方案时，敏感的抗生素通常是首选。
2.中间敏感（Intermediate, I）：●中间敏感意味着抗生素对细菌有一定的抑制作用，但效果不如敏感类别中的抗生素。
●在某些情况下，如果药物浓度增加或药物累积，中间敏感的抗生素也可能有效。
3.耐药（Resistant, R）：●耐药表示细菌对某种抗生素具有抵抗力，常规剂量的抗生素无法有效控制或杀死这种细菌。
●应避免使用对该细菌耐药的抗生素。
二、应用：1.制定治疗计划：●药敏测试结果是制定抗生素治疗方案的重要依据，有助于选择最有效的抗生素。
●这有助于提高治疗效果，同时减少抗药性的发展。
2.调整治疗方案：●如果患者对初步治疗没有反应，药敏结果可以用来调整治疗方案。
●在长期或复杂的感染治疗中，根据药敏结果定期调整抗生素选择是常见的做法。
3.监测抗药性发展：●药敏测试可以帮助监测特定地区或医院内细菌抗药性的趋势。
●这对于公共卫生管理和抗生素使用指南的制定具有重要意义。
4.避免抗生素滥用：●通过准确的药敏测试，可以避免不必要或无效的抗生素使用，从而降低抗药性风险。
5.个体化治疗：●药敏测试结果有助于实现针对特定患者和感染的个体化治疗。
三、注意事项：1.临床医生需要结合患者的具体情况（如感染部位、患者的免疫状态、过敏历史等）来解读药敏测试结果。
2.在某些情况下，可能需要结合其他微生物学和临床数据来做出最终的治疗决策。
3.定期更新和审视药敏测试技术和标准，以确保结果的准确性和可靠性。
药敏试验结果的正确解读
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目的：为临床治疗提供依据，指导 合理用药。
结果解读：根据MIC值判断药物的 抗菌活性，MIC值越低，抗菌活性 越强。
药敏试验的原理
药敏试验是一种检测细菌对药物敏 感性的试验方法
试验方法：纸片法、稀释法、Etest法等
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原理：通过测量细菌在药物作用下 的生长情况，判断细菌对药物的敏 感性
病菌因素
病菌种类：不同种 类的病菌对药物的 敏感性不同
病菌浓度：病菌浓 度过高或过低都可 能影响药敏试验结 果
病菌生长阶段：病 菌在不同生长阶段 对药物的敏感性也 不同
病菌耐药性：病菌 可能对某些药物产 生耐药性，导致药 敏试验结果不准确
宿主因素
宿主的生理状态：如年龄、性别、体重等 宿主的免疫状态：如免疫功能、免疫应答等 宿主的疾病状态：如感染部位、感染程度等 宿主的用药史：如既往用药、药物敏感性等
耐药性定义：细菌对药物的耐受性，导致药物治疗效果降低 耐药性产生原因：细菌基因突变、药物使用不当、抗菌药物滥用等 耐药性检测方法：药敏试验、基因测序等 耐药性应对策略：合理使用抗菌药物、研发新型抗菌药物、加强感染控制等
影响药敏试验结果的因素
药物因素
药物浓度：药物浓度过高或过低都可能影响药敏试验结果 药物相互作用：两种或多种药物同时使用可能会影响药敏试验结果 药物稳定性：药物在试验过程中的稳定性可能会影响药敏试验结果 药物吸收：药物在体内的吸收速度可能会影响药敏试验结果
报告的呈现方式：可以选择文字、表格、图形等方式，以便于理解和交流
报告的审核和修改：在提交之前，需要对报告进行审核和修改，确保内容 的准确性和完整性
常见细菌药物敏感性试验报告规范
常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识微生物学检验为感染性疾病的诊断、治疗和控制提供了必不可少的证据。
因此微生物学检验报告是临床和实验室等多方共同关注的焦点。
国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。
同时，临床与实验室的沟通存在一定不足，密切协作非常必要。
基于实际存在的问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告的规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实的科学依据。
本共识限于常见细菌的药物敏感性报告。
一、药物敏感性试验的意义和基本原则(一)意义药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物的敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。
对于经验治疗，依据一方面来自医生自身的经验，一方面是实验室长期不断提供的数据积累。
临床需要考虑不同感染的病原谱和常见病原对不同药物的敏感性；对于靶向治疗，特定分离株的具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。
(二)基本原则1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药：天然耐药是细菌菌种固有的特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物的天然耐药[2]。
天然耐药信息一般由基础医学和临床文献提供。
部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。
常见菌种对各类药物的天然耐药见文献[3,4]。
实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习和参考。
2．药敏试验测试的前提条件[5]：实验室应具备相应检测的人员能力、客观条件、结果解释依据。
标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果的解释能力，能够提供临床会诊服务。
临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。
微生物药物敏性试验的意义
纸片扩散法具有操作简便、成本低廉的优点，适用于大量样本的初步筛选。但是，该方法的结果受人为因素影响 较大，且无法准确测定细菌的MIC值。
E试验
总结词
E试验是一种半定量药物敏性试验方 法，通过在细菌培养液中加入药物浓 度的梯度，观察细菌的生长情况，从 而判断细菌对药物的敏感性。
详细描述
E试验具有操作简便、结果准确、可重 复性好的优点，适用于临床实验室和 科研实验室。但是，该方法需要特殊 的仪器和试剂，成本较高。
微生物药物敏性试验 的意义
目 录
• 微生物药物敏性试验的定义和目的 • 微生物药物敏性试验的方法和流程 • 微生物药物敏性试验的应用领域 • 微生物药物敏性试验的挑战和前景 • 微生物药物敏性试验的案例分析
01
微生物药物敏性试验的 定义和目的
定义
微生物药物敏性试验是指通过实验手 段检测微生物对各种药物的敏感性和 耐药性，从而为临床治疗提供依据的 过程。
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个体化治疗
根据患者的药敏试验结果，医生可以为患者制定个体化的治疗方案，确保治疗的有效性和安全性。
药物研发
新药筛选
药敏试验可用于筛选具有抗菌活 性的新药，为药物研发提供依据 。
药物评价
通过比较不同药物对微生物的药 敏性，可以评估新药的抗菌效果 和潜在的治疗优势。
流行病学研究
疾病监测
通过药敏试验监测致病菌的耐药性变化 ，有助于了解疾病的流行趋势和传播情 况。
它是一种重要的临床实验室检测方法， 用于指导医生选择合适的药物和剂量， 提高治疗效果并减少不必要的药物浪 费和副作用。
目的
确定微生物对药物的敏感 性和耐药性
抗微生物药物和敏感性试验
临床常用抗生素
青霉素类 头孢菌素类 其他β-内酰胺类抗生素 其他 内酰胺类抗生素 氨基糖苷类 喹诺酮类 大环内酯类 四环素、 四环素、氯霉素和林可霉素类 糖肽类 磺胺类 其他合成抗菌药物
临床常用抗生素
注： 抗微生物新药不断涌现,给感染性疾病的治疗带来福 音。 抗菌药物的使用不当可促进耐药菌在病人体内和医 院环境中定殖繁衍导致交叉感染和内源性感染。 合理使用抗菌药物的前提是重视感染病原学的实验 室检查和监控抗感染治疗的药物选择.
（二）分类：1.液体稀释法 分类： 液体稀释法
2.琼脂稀释法 琼脂稀释法
抗菌药物敏感性试验
其他
1.结核杆菌的药敏试验 结核杆菌的药敏试验 2.厌氧菌的药物敏感试验 厌氧菌的药物敏感试验 3.真菌的药物敏感试验 真菌的药物敏感试验
抗菌药物敏感性试验
特殊耐药菌检测 （一）耐甲氧西林葡萄球菌检测
金葡菌： 苯唑西林抑菌圈 苯唑西林抑菌圈≦ 金葡菌：1ug苯唑西林抑菌圈≦10mm或MIC≧0.4ug/ml 或 ≧ 凝固酶阴性葡萄球菌： 苯唑西林抑菌圈≦ 凝固酶阴性葡萄球菌： 1ug苯唑西林抑菌圈≦17mm 苯唑西林抑菌圈
抗菌药物敏感性试验
(七) 质量控制 七
采用标准菌株金葡菌ATCC25923,大肠埃希菌 大肠埃希菌ATCC25922 采用标准菌株金葡菌 大肠埃希菌 和铜绿假单胞菌ATCC27853等与测试菌在同一条件下做药 和铜绿假单胞菌 等与测试菌在同一条件下做药 敏试验 标准菌株的抑菌圈应落在预期范围内.如果超出范围 如果超出范围,则不应 标准菌株的抑菌圈应落在预期范围内 如果超出范围 则不应 发出报告,及时检查原因 予以纠正 发出报告 及时检查原因,予以纠正 及时检查原因 每日标准菌株的测定结果应以抑菌圈直径为纵坐标,天数为 每日标准菌株的测定结果应以抑菌圈直径为纵坐标 天数为 横坐标绘制室内质控图,要求每天抑菌圈变化数不得超过 横坐标绘制室内质控图 要求每天抑菌圈变化数不得超过 2mm 标准菌株应每周在MH琼脂上传代一次 ℃保存 琼脂上传代一次,4℃ 标准菌株应每周在 琼脂上传代一次
药敏试验原理
药敏试验原理
药敏试验是一种用于测试微生物对抗生素或药物的敏感性的实验方法。
它可以帮助医生确定最有效的治疗方法，避免使用对微生物无效的药物，从而减少药物滥用和耐药性的产生。
药敏试验的原理是通过将不同的抗生素或药物加入培养基中，观察微生物在不同药物浓度下的生长情况，从而判断微生物对药物的敏感性。
在进行药敏试验时，首先需要培养待测微生物，使其达到一定的数量和生长状态。
然后将不同浓度的药物加入含有微生物的培养基中，通常会采用双倍稀释法或梯度法来确定不同浓度的药物。
接着将含有药物的培养基与微生物接种于琼脂平板上，培养一定时间后观察微生物的生长情况。
通过比较不同药物浓度下微生物的生长情况，可以确定微生物对药物的敏感性。
药敏试验的结果通常会以最小抑菌浓度（MIC）来表示，MIC是指能完全抑制微生物生长的最低药物浓度。
根据MIC的结果，可以将药物分为对微生物具有杀菌作用和仅具有抑菌作用两种类型。
对于临床治疗来说，通常会选择对微生物具有杀菌作用的药物，以达到最好的治疗效果。
除了MIC外，药敏试验还可以通过观察药物对微生物的杀菌曲线来评估药物的抗菌活性。
杀菌曲线可以反映出药物对微生物的杀菌速度和效果，对于选择治疗方案和判断药物的疗效都具有重要意义。
总的来说，药敏试验是一种非常重要的实验方法，可以帮助医生选择最有效的治疗药物，减少药物滥用和耐药性的产生。
通过了解药敏试验的原理和结果解读，可以更好地理解临床上药物选择的依据，为临床治疗提供更科学的依据。
同时，药敏试验也为药物研发和抗菌药物的选择提供了重要的参考依据，对于推动医学和药学领域的发展具有重要意义。
微生物药敏实验报告
微生物药敏实验报告微生物药敏实验报告概述微生物药敏实验是鉴别细菌对抗生素敏感性的重要实验方法。
通过药敏实验，临床医生能够选择合适的抗生素治疗感染，从而提高治疗效果，减少不必要的药物使用，降低细菌耐药性的风险。
本报告将详细介绍药敏实验的过程和结果，并分析实验数据。
实验过程1、菌株选择与培养实验开始前，我们从临床样本中选择了具有代表性的菌株，包括革兰阳性菌（如金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）和革兰阴性菌（如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等）。
这些菌株通过分离培养、纯化及鉴定，确保其种类和特性的准确性。
2、抗生素选择与制备根据临床常见感染和抗生素使用情况，我们选择了多种常用的抗生素，包括青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类等。
在实验前，我们将每种抗生素制备成适合药敏实验的浓度。
3、药敏实验我们将上述菌株和抗生素按照规定的比例和方法进行接种和培养。
在设定的时间点观察细菌的生长情况，并记录每个菌株对不同抗生素的敏感性。
4、数据处理与分析根据实验结果，我们将各种抗生素对不同菌株的抑菌圈直径进行测量和记录，并计算出各个菌株对不同抗生素的敏感性和耐药性。
实验结果以下是实验中部分抗生素对部分菌株的药敏结果：从上表可以看出，不同的菌株对同一种抗生素的敏感性不同，同一种菌株对不同抗生素的敏感性也可能存在差异。
例如，金黄色葡萄球菌对青霉素G、头孢唑林、庆大霉素等敏感，但对氨苄西林/舒巴坦耐药；大肠埃希菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、阿米卡星等耐药，但对左氧氟沙星、环丙沙星敏感。
这些结果对于临床医生选择合适的抗生素治疗感染具有指导意义。
结论通过本次微生物药敏实验，我们获得了大量有关不同菌株对常用抗生素敏感性的数据。
这些数据不仅有助于临床医生精确选择抗生素，提高治疗效果，还能减少不必要的药物使用，降低细菌耐药性的风险。
本实验也提醒我们，对于感染的治疗，除了选择合适的抗生素外，还需要结合患者的具体情况，采取综合治疗措施，以提高治疗效果，缩短病程。
抗微生物药物敏感性试验执行标准
抗微生物药物敏感性试验执行标准抗微生物药物敏感性试验是评价抗菌药物对微生物的作用和微生物对抗菌药物的敏感性的重要手段。
正确执行抗微生物药物敏感性试验，对于指导临床用药、控制细菌耐药性具有重要意义。
本文将详细介绍抗微生物药物敏感性试验的执行标准。
1. 试验菌株的选取。
试验菌株的选取是抗微生物药物敏感性试验的第一步。
应根据临床感染的部位和病原菌的种类，选择相应的菌株进行试验。
同时，应注意菌株的来源、保存和传代方式，以保证试验结果的准确性和可重复性。
2. 试验方法的选择。
根据不同的抗菌药物和微生物，选择合适的试验方法进行抗微生物药物敏感性试验。
常用的试验方法包括纸片扩散法、微量稀释法等。
在选择试验方法时，应考虑到试验的灵敏度、特异性和操作的简便性，并严格按照相关标准进行操作。
3. 试验条件的控制。
试验过程中，应严格控制试验条件，包括温度、湿度、培养基的配制和质量等。
试验操作人员应具备良好的实验操作技能，严格按照操作规程进行操作，避免外界因素对试验结果的影响。
4. 试验结果的解读。
试验结束后，根据试验结果进行解读。
应根据相关标准和临床实际，判断微生物对抗菌药物的敏感性，确定抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）等参数。
同时，应注意对试验结果的统计学分析，确保结果的科学性和可靠性。
5. 结果报告和数据保存。
试验结果应及时进行报告，包括试验方法、试验菌株、试验条件、试验结果等内容。
同时，应将试验过程中的原始数据进行保存，以备查验。
在报告中应注明试验人员、试验时间、试验地点等信息，确保结果的可追溯性和可信度。
6. 质量控制和质量保证。
在抗微生物药物敏感性试验过程中，应严格执行相关质量控制和质量保证程序。
包括对试验菌株的鉴定、对试验方法的验证、对试验条件的控制等方面进行严格管理，确保试验结果的准确性和可靠性。
7. 相关标准和法规的遵守。
在执行抗微生物药物敏感性试验时，应严格遵守相关的标准和法规，包括药典规定、临床实验室质量管理规范等。
药敏试验的原理以及方法
药敏试验的原理以及方法一、药敏试验的概述药敏试验（Antimicrobial susceptibility testing），简称AST，是指通过对微生物感染株与抗生素药物进行体外相互作用研究，以评价抗生素对细菌的活性和有效浓度。
药敏试验广泛应用于临床和研究工作中，对指导临床治疗和控制抗感染药物的使用具有重要意义。
二、药敏试验的原理药敏试验的原理是通过确定抗生素与细菌之间的相互作用，评估细菌对抗生素的敏感性或耐药性。
常用的药敏试验方法包括： 1. 纸片法（Disk diffusion method）：将已知浓度的抗生素制剂由特定的纸片载体上释放，与培养基中的细菌相互作用。
2. 麦克法（Microbroth dilution method）：通过在微量培养基中加入不同浓度的抗生素，观察细菌生长的情况来确定最低抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC）。
3. E测试法（E-test method）：通过将具有抗生素梯度的试纸放置在含有细菌的琼脂平板上，观察细菌生长与抑制的交界处，确定MIC。
三、药敏试验的方法1. 药敏试验前的准备•培养细菌：选取目标细菌进行预培养，并利用常规方法进行纯化。
•制备试验培养基：根据需要的培养基配制，包括含有不同浓度抗生素的培养基。
•准备抗生素：选择待测抗生素，制备不同浓度的抗生素试液。
2. 纸片法1.在琼脂平板上均匀涂布待测菌株，使其在琼脂表面生长。
2.在琼脂平板表面放置含有不同抗生素的纸片，使其药物逐渐扩散到琼脂中，与菌株相互作用。
3.培养平板在恰当条件下孵育。
4.观察细菌的生长情况，测量药物扩散的直径。
3. 麦克法1.在96孔板中，加入逐个减少浓度的抗生素试液，每个孔位加入一定浓度细菌悬液。
2.培养孔板在适宜条件下孵育。
3.观察不同浓度抗生素对菌落生长的影响，确定细菌耐药性。
4. E测试法1.将E-test试纸放置在含有细菌的琼脂平板表面。
微生物药物敏性试验的意义
血清半衰期多较短，大多为0.5～1.5小时； 不易透过血脑屏障
2021/某3/14些注射用品种对肾脏有一定毒性。
17
第一代头孢菌素
G＋ G－ 耐酶 血浓度 蛋白 肾毒性 其他
结合率
头孢Ⅰ、噻吩++ ++ 中 中
中 单低 体内代谢
头孢Ⅱ、噻啶 +++ +++ 不耐 高
低
明显
入CSF
头孢Ⅳ、氨苄 +~++ +
2011
二.培养+药敏的目的
1、 确定导致感染的病原菌的种类，对于不同 的病原菌（G-杆菌或G+球菌，条件致病菌或 急性传染病病原菌）需要采取不同的治疗措 施。
2 、 确定病原菌对各种抗生素的敏感性，指导 临床根据病人情况合理用药。由于细菌耐药 性的快速增长，单纯依赖经验选用药物经常 无效，在更多的时候需要参考药敏实验的结 果。
2021/3/14
16
第一代头孢菌素
主要作用于MRSA和除肠球菌外的需氧革兰 阳性球菌(包括甲氧西林敏感葡萄球菌以及 各组链球菌)。对部分大肠埃希菌、肺炎克 雷伯菌、痢疾杆菌和奇异变形杆菌等亦有较 强抗菌作用；对口腔厌氧菌具抗菌活性。
对青霉素酶稳定，但仍可为许多革兰阴性菌 产生的β内酰胺酶所水解；
美罗培南 帕尼培南亚胺培南
抗铜绿假单胞菌活性
美罗培南 亚胺培南=帕尼培南
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32
氨基糖甙类
水溶性好、在碱性环境中抗菌活性增强 口服不吸收，血清半衰期2-3小时 不良反应：耳/肾毒性、神经肌肉阻滞 属浓度依赖性抗生素，对革兰氏阴性菌、结
核和分枝杆菌有效 对杆菌阿米卡星最佳，对球菌奈替米星最强 体外活性要客观评价
实验三药物敏感试验和消毒灭菌
• 结果判读：
– 用刻度尺量取抑菌圈直径，根据CLSI （Clinical and Laboratory Standards Institute）标准判读结果； – 报告：细菌对该抗生素是 敏感（susceptible，S）； 耐药（resistant，R）； 还是中介（intermediate，I）。
实验三 消毒灭菌和药敏试验
实验内容和要求
• 1.掌握药敏试验的原理、步骤、结果及 意义 • 2.掌握常用的消毒与灭菌技术 • 3.熟悉紫外线杀菌试验的原理 • 4.了解细菌L型的诱导和菌落类型
一、药敏试验在感染性疾病防治 中的意义
近年来，由于各种抗菌药物的广泛应 用，导致耐药菌株的迅速增多。尤其是广 谱及超广谱抗生素的普遍使用，造成耐药 菌株大量出现，给临床治疗带来极大的困 难。同时，由于不合理的使用抗生素，治 疗的失败率及不良反应均有增加。因此， 药敏试验在感染性疾病的防治方面具有日 益重要的实际意义。
五、纸片扩散法（K-B法）
• 原理：
– 含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上， 纸片所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断向纸片周 围区域扩散，形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度 范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。 – 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该 药对测试菌的最低抑制浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）呈负相关，即抑菌圈愈大，M ̶
非电离辐射：紫外线
• 最佳杀菌波长为250～270nm
• 杀菌机理：干扰DNA的复制与转录
• 特点：紫外线穿透力较弱
• 适应范围：紫外线消毒适用于
• 空气消毒与物品表面的消毒。
消毒与灭菌技术
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头孢菌素类
第一～四代头孢菌素 口服头孢菌素
2014-2-17 11
β内酰胺类+酶抑制剂
非典型类
单环类 碳青霉烯类
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12
青霉素类
天然青霉素：包括青霉素G、青霉素V；主 要作用于革兰氏阳性菌、革兰氏阴性球菌、 和某些革兰氏阴性杆菌如嗜血杆菌属。 氨基青霉素类：包括氨苄西林、阿莫西林、 巴氨西林、匹氨西林等；主要用于对青霉素 敏感的革兰氏阳性菌以及部分革兰氏阴性杆 菌如大肠杆菌、奇异变形杆菌、沙门菌属、 志贺菌属和流感杆菌等。 抗葡萄球菌青霉素类：包括双氯西林、苯唑 西林、甲氧西林等；对产β内酰胺酶葡萄球
曲松 他定
++ ~ +++ +++
++ ++++
耐 耐
肝胆 肾
半衰期长，
入CSF多
免疫缺陷
者感染
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20
第四代头孢菌素
广谱，四代，对绿脓有效 对广谱β -内酰胺酶稳定，亲和力↓，膜穿 透↑ 对金葡，肠杆菌与枸橼酸杆菌( I 型酶)作用 ↑ T1/2b 2h，蛋白结合率<5% 每日2~4g，分2次 主要用于耐三代头孢的菌株(G-为主)所致感 染
抗葡萄球菌、肠球菌等活性： 帕尼培南亚胺培南 美罗培南 抗肠科杆菌活性 美罗培南 帕尼培南亚胺培南 抗铜绿假单胞菌活性 美罗培南 亚胺培南=帕尼培南
三、什么情况下需要做培养+药敏？
感染原因无法确定。 病原菌的耐药性无法确定，经验用药可能失败（尤 其是免疫力低下患者、长期使用抗生素者、ICU病 房、院内感染患者、接受导管插入或其他创伤性治 疗患者。） 病人对可用药物过敏，需要检测其他药物的耐药性。 病人个体情况要求对某些药物精确用药，需要测定 其最低抑菌浓度（MIC）。
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26
氨苄西林 阿莫西林 舒巴坦 克拉维酸
替卡西林 克拉维酸
头孢哌酮 舒巴坦
哌拉西林 三唑巴坦
优力新 力百汀 特美汀 舒普深 特治星 肠杆菌科 ++ ++ ++～+++ +++ ++～+++ 绿脓、沙雷 ++～ +++ +++ ++～+++ 不动杆菌 （不动杆菌对舒巴坦敏感） 肠球菌 ++ ++ ++～ +++ +++ 嗜麦芽窄食 +++ 中枢感染 + + 目前对于泛耐/全耐鲍曼不动杆菌主张喹酮类+舒巴坦+碳青霉稀类药 物联合
对革兰阴性杆菌具有强大抗菌作 用，包括对铜绿假单胞菌具良好 抗菌作用；对第三代头孢菌素呈 现耐药的肠杆菌属细菌可呈现敏 感。对革兰阳性球菌作用强于第 三代头孢菌素 对Bush I组染色体介导的β内酰 胺酶稳定性高于第三代头孢菌素， 对细菌外膜通透性增加 血半衰期2h，主要自肾排出
22
革兰阳性球菌
肾毒性
单低 低 低
其他
体内代谢 明显 低
高 单低 低 无钠、口服 + 注射
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17
第二代头孢菌素
头孢呋辛 Cefuroxime 头孢克洛Cefaclor 头孢孟多 Cefamandole 头孢美唑 头孢西丁 头孢替安Cefotian 头孢尼西
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六、当前细菌感染的特点及对策
1 、条件致病菌引起的感染增多，感染的病 原菌难以事先预料。 2 、由于耐药性的普遍增加，细菌对抗生素 的敏感性往往无法预知，经验用药经常无效。 3 、多重耐药菌株增多。特别是院内感染病 人， ICU 病房、免疫力低下的病人所发生的 感染。具有特殊耐药机制的菌株不断增多， 给临床治疗带来难题，对于部分细菌甚至出 现没有合适的抗生素可以使用。
抗菌药物分类
青霉素类 头孢菌素类 β-内酰胺类 其他β内酰胺类 氨基糖甙类 大环内酯类 喹诺酮类 林可霉素类和克林霉素 糖肽类 四环素 氯霉素 利福霉素类 其他抗菌药物（硝基呋喃类、磺胺药及甲氧苄啶）
10
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β内酰胺类抗生素
青霉素类
天然青霉素 抗葡萄球菌青霉素 氨基青霉素 抗铜绿假单胞菌青霉素
五、如何理解MIC值及药敏结果？
每种药物均提供定性和定量两种结果。 定性：敏感（S ）表示该药物对该细菌有抑制或杀灭作用。使 用常规剂 量可以达到有效的治疗效果。 中介（中度敏感，I）表示细菌对该药物治疗的敏感性低 于敏感 菌株，必须加大剂量以达到更高的血药浓度才能在特定 的生理部 位获得有效的临床效力；对于使用剂量有严格限制的药 物则必须 重复测试以确定敏感还是耐药。 耐药（R）表示药物常规剂量所达到的药物浓度不能抑制 或杀死 细菌，即使加大剂量也不能达到治疗效果或者超过了人 体的正常
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第四代
头孢吡肟 头孢匹罗
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β －内酰胺酶抑制剂
抑酶谱 他唑巴坦
克拉维酸 舒巴坦
பைடு நூலகம்
抑酶强度 ++++
+++ ++
入CSF
√
稳定性 ++++
++ +++
诱导酶的产生 +
++++ ++
+++
++ +++
× √
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其他β-内酰胺类
头霉素：二代头孢+厌氧菌，对产ESBLs 菌有效 氧头孢烯类：三代头孢+厌氧菌 单环β-内酰胺类：氨曲南，窄谱，对G-菌 强大的活性 β-内酰胺类+酶抑制剂 氨苄西林-舒巴坦：优立新、舒氨新 阿莫西林-克拉维酸：安美汀 替卡西林-克拉维酸：特美汀
碳青霉烯类
美罗培南(Meropenem，美平)
对人的去氢肽酶稳定，不必合用酶抑制剂 无明显的中枢毒性反应
帕尼培南(Panopenem/Betamipron， 克倍宁)
倍他米隆减少帕尼培南的肾毒性 无明显中枢毒性
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碳青霉烯类药物对不同细菌 的抗菌活性比较
4、 细菌对抗生素的抵抗力在增加，并且速度也在加 快。很多细菌对各种药物的MIC值在不断提高，表现 出细菌对抗生素的敏感性在不断降低。对于G+球菌， 青霉素的剂量已经从最初的2万单位上升到几百万单 位，仍然有耐药菌株出现。临床出现的葡萄球菌几 乎全部对青霉素耐药。很多菌株（特别是G-杆菌）， 在使用抗生素治疗4天后，就可以通过各种途径获得 对某敏感药物的耐药性。万古霉素是用于阳性球菌 所致严重感染时的首选用药，在应用的3年后就已经 发现耐万古霉素的肠球菌菌株。虽然目前还没有发 现耐万古霉素的葡萄球菌，但如果无目的使用，对 其耐药的葡萄球菌菌株将会很快出现。
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第四代头孢菌素
头孢吡肟cefepime 头孢匹罗 Cefpirome 头孢克定Cefclidin Cefozopran Cefquinome Cefluprenam BO-1236 Cefoselis FK-518 YM-40220
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第一代头孢菌素
G＋ G－ 耐酶 血浓度 蛋白 结合率 头孢Ⅰ、噻吩++ ++ 中 中 中 头孢Ⅱ、噻啶 +++ +++ 不耐 高 入CSF 头孢Ⅳ、氨苄 +~++ + 耐 低
头孢Ⅴ、唑啉 +++ +++ 头孢Ⅵ、拉定+~+++ 耐 耐 高 高 低
已在国内上市者 亚胺培南/西司他丁 Imipenem/cilastatin, 商品名：泰能 Tienam 帕尼培南/倍他米隆 Panipenem/betamipron, 商品名：克倍宁 Carbenin 美罗培南 Meropenem, 商品名：美平 Mepem
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碳青霉烯类
特广谱 G＋、G－、需氧与厌氧菌 多重耐药菌与产酶菌所致严重的G－菌感染、 混合感染、院内感染、免疫缺陷者感染 中枢毒性反应 剂量不超过4g/d，200ml，1-2h慢滴 老年人、肾功能不全者、中枢疾患者、癫 痫史者
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碳青霉烯类
四、自动化仪器与手工法的比较
1. 结果分析智能化：仪器能够将具有特殊耐药机制的细 菌报告，而这类细菌用药方案与常规不同。如ESBL、 MRSA等等。此外，体外药敏结果可能与体内效果不一 致时，对该结果提出预警。 2. 药敏组合更为合理、全面：仪器做药敏时，按照不同 类别细菌将抗生素合理组合，避免将不适用的抗生素 报告给临床。如：红霉素用于报告对阳性球菌的药敏， 但不能报告对阴性杆菌的药敏。同样，头孢哌酮用于 报告对阴性杆菌特别是铜绿假单胞菌的药敏，但一般 不报告对阳性球菌的药敏。 3. 药敏结果实现定量：同时报告MIC值以及由此得出的 定性结论（敏感。中介、耐药）。
对革兰阳性菌的作用与第 一代头孢菌素相仿或略差; 对革兰阴性菌的作用则强 于第一代者，但较第三代 差，对某些肠杆菌科细菌 和铜绿假单胞菌等革兰阴 性杆菌的抗菌活性仍弱。 除头孢孟多外第二代头孢 菌素对多数β内酰胺酶稳 定; 肾毒性较小