淋巴细胞趋化因子增强柯萨奇病毒DNA疫苗黏膜免疫及预防小鼠心肌炎的作用
柯萨奇病毒性心肌炎患儿T淋巴细胞亚群的变化
柯萨奇病毒性心肌炎患儿T淋巴细胞亚群的变化张秀兰;刘俊芬;贺英【期刊名称】《中国医药杂志》【年(卷),期】2004(001)003【摘要】目的:探讨病毒性心肌炎患儿细胞的免疫状态,为估计病情和判断预后提供客观依据,也为病毒性心肌炎患儿提供了新的临床治疗方法.方法:对30例病毒性心肌炎患儿急性期和恢复期T淋巴细胞亚群进行了动态观察.结果:在病毒性心肌炎急性期,外周血T淋巴细胞亚群中的CD31、CD41、CD81细胞下降,CD41/CD81比值上升,随病情的逐渐恢复,上述指标逐渐趋于正常,与正常相比差异有显著性.结论:细胞免疫在病毒性心肌炎的致病中起一定作用,其相关指标呈动态变化,可作为病情变化及预后的一个观察指标及依据,也为病毒性心肌炎采用调节免疫疗法提供了依据.【总页数】2页(P128-129)【作者】张秀兰;刘俊芬;贺英【作者单位】内蒙古科技大学第三附属医院,儿科,014030;内蒙古科技大学第三附属医院,儿科,014030;内蒙古科技大学第三附属医院,儿科,014030【正文语种】中文【中图分类】R725.4【相关文献】1.病毒性心肌炎患儿T淋巴细胞亚群与sIL-2R相关性研究 [J], 贺跃光;刘文彬;郑淑梅;刘华君;谢云霞;张宏伟2.病毒性心肌炎患儿T淋巴细胞亚群与sIL-2R相关性研究 [J], 刘文彬;郑淑梅;许红波;刘华君;袁丽3.病毒性心肌炎和扩张性心肌病患儿柯萨奇病毒Ig-M检测的临床意义 [J], 钟家蓉; 钱永如; 刘渝; 余更生; 田杰4.病毒性心肌炎和扩张性心肌病患儿柯萨奇病毒Ig—M检测的临床意义 [J], 钟家蓉; 钱永如5.病毒性心肌炎患儿T淋巴细胞亚群的变化 [J], 马洪美;王亚利;纪恩美;马传香因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
柯萨奇B3病毒诱发小鼠心肌炎的动态研究
野见 １ 个病灶为 （ ； 个 高倍视 野见 １ 病灶 为 ＋） ５ 个 （ ＋＋ ； 个高倍视野见 １ ）３ 个病灶为（ ＋＋＋） 。
１２３ Ｃ Ｂ ． ． Ｖ ３核 酸原位 杂交 阳性 杂 交 信 号 的定 量 图
维普资讯
山东 医药 ２０ ０ ７年第 ４ ７卷第 ２ ８期
柯 萨奇 Ｂ ３病 毒 诱 发 小 鼠心 肌 炎 的 动 态 研究
潘 理会 李春辉 。
（ 承德 医学院， １ 河北承德 ０ ７０ ； ６ ００ ２承德 医学院附属 医院）
［ 摘要 ］ 用柯 萨奇 Ｂ ３病毒 （ Ｖ ３ 诱发小 鼠病毒性心肌炎 （ ＭＣ 模型 ， ＣＢ） Ｖ ） 分别 在病毒感染 第 ３ ５ ７ ９天 ， 、、、 利用 光镜 Ｈ Ｅ染色 、 透射电镜技术 、 原位杂交技术观察 Ｖ ＭＣ形成过 程中形态学的动态变化 。结果 Ｖ ＭＣ小 鼠模型 于第 ３ 天开始 出现形态学改变 ， 但心肌结 构破 坏不明显 ， ９天心肌 结构 明显破 坏。表 明柯 萨奇 Ｂ 第 ３病 毒诱 发小 鼠 Ｖ ＭＣ
１． 计 软件 进 行 处 理 ， 间 配 对 用 检 验 ， ≤ １０统 组 Ｐ
００ ． ５有 统计学 意 义 。
２ 结 果
１２ １ 模型制备与分组 将小 鼠随机分成正常对 ．． 照组和模型组各 ４ Ｏ只 ， 模型组腹 腔注射 １ Ｔ Ｉ卯 ０ ＣＤ 病毒 液 ０ ３ｍ ， 常 对 照 组 注 射 等 量 生 理 盐 水 。两 ． ｌ正 组 分别设 ｄ 、５ ｄ 、９组 各 ｌ ３ ｄ 、７ ｄ Ｏ只 ， Ｃ Ｂ 于 Ｖ ３感 染 后
１ 材 料与 方法
细 胞浸 润 ： 观察 淋 巴细胞 、 核 细 胞 、 性 粒 细 胞 平 单 中
RegⅢγ修饰HuMSCs对柯萨奇B3病毒诱导的心肌炎炎性细胞浸润及心脏功能的影响
RegⅢγ修饰HuMSCs对柯萨奇B3病毒诱导的心肌炎炎性细胞浸润及心脏功能的影响蹇强,李丹,程玮,孙敏摘要目的:观察胰岛再生源蛋白Ⅲγ(RegⅢγ)修饰人脐带间充质干细胞(HuMSCs)对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的小鼠心肌炎炎性细胞浸润及心脏功能的影响㊂方法:从新鲜脐带组织中提取HuMSCs,倒置显微镜观察形态,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达;采用含过表达RegⅢγ的慢病毒感染HuMSCs,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测RegⅢγmRNA表达水平㊂将40只小鼠按照随机数字表法分为对照组㊁模型组㊁HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组,每组10只㊂模型组㊁HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组采用腹腔注射CVB3建立心肌炎模型,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组再分别尾静脉注射HuMSCs㊁RegⅢγ-HuMSCs㊂14d后,采用高分辨率小动物超声成像系统记录小鼠心脏超声指标;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清白细胞介素(IL)-2㊁IL-4㊁IL-6㊁IL-10和IL-23含量;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理损伤情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌组织细胞凋亡水平,免疫组织化学染色测定心肌组织T淋巴细胞表面抗原(CD4㊁CD8)和巨噬细胞特异性抗体(CD68)的表达㊂结果:分离的细胞呈典型纺锤形,细胞表面抗原CD44㊁CD73㊁CD90呈高表达, CD34㊁CD45㊁人类白细胞抗原-DR蛋白(HLA-DR)呈低表达,说明成功分离到HuMSCs㊂经过慢病毒感染的HuMSCs有明显绿色荧光蛋白表达,RegⅢγmRNA表达水平高于未感染的细胞(P<0.05),说明成功得到RegⅢγ修饰的HuMSCs㊂与对照组比较,模型组小鼠射血分数(EF)㊁缩短分数(FS)降低,左室舒张末期容积(LVEDV)和左室收缩末期容积(LVESV)升高,血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量增加,IL-4和IL-10含量减少,心肌组织内炎性细胞浸润明显,TUNEL阳性率增加,CD4㊁CD8及CD68蛋白表达均呈强阳性(P< 0.05);与模型组比较,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组小鼠EF和FS升高,LVEDV和LVESV降低,血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量减少,IL-4和IL-10含量增加,心肌组织炎性细胞浸润减少,TUNEL阳性率减少,CD4㊁CD8及CD68蛋白表达均下降(P<0.05);相较于HuMSCs组,RegⅢγ-HuMSCs组小鼠EF和FS升高,LVEDV和LVESV降低,血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量减少,IL-4和IL-10含量增加,心肌组织未见明显炎性细胞浸润,TUNEL阳性率减少,CD4㊁CD8及CD68蛋白表达下降(P<0.05)㊂结论:RegⅢγ修饰的HuMSCs可减轻CVB3诱导的小鼠心肌炎心肌损伤与炎性细胞浸润,改善心脏功能㊂关键词心肌炎;柯萨奇B3病毒;胰岛再生源蛋白Ⅲγ;人脐带间充质干细胞,HuMSCs;炎性细胞;小鼠;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.08.010Effects of RegⅢγ-modified HuMSCs on Inflammatory Cell Infiltration and Cardiac Function of Myocarditis Induced by Coxsackievirus B3 JIAN Qiang,LI Dan,CHENG Wei,SUN MinXi'an Children's Hospital,Xi'an710003,Shaanxi,ChinaCorresponding Author SUN Min,E-mail:*****************Abstract Objective:To investigate the effects of islet regeneratingⅢγ(RegⅢγ)modified human mesenchymal stem cells(HuMSCs) on mice myocarditis induced by Coxsackievirus B3(CVB3).Methods:HuMSCs were extracted from fresh umbilical cord tissue, morphology was observed by inverted microscopy,and the expressions of cell surface antigen was detected by flow cytometry. HuMSCs were infected with lentivirus containing overexpressed RegⅢγ,the expressions of green fluorescent protein were observed by fluorescence microscopy,and the expression of RegⅢγmRNA was detected by quantitative real-time fluorescence polymerase chain reaction(qRT-PCR).Forty mice were randomly divided into control group,model group,HuMSCs group,and RegⅢγ-HuMSCs group,with10mice in each group.The model group,HuMSCs group and RegⅢγ-HuMSCs group were intraperitoneally injected with CVB3to establish myocarditis models,and HuMSCs group and RegⅢγ-HuMSCs group were injected with HuMSCs and RegⅢγ-HuMSCs through tail vein,respectively.After14d,the cardiac ultrasound indexes of mice were recorded by high-resolution small animal ultrasound imaging system,serum interleukin(IL)-2,IL-4,IL-6,IL-10and IL-23of each group were measured by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The myocardial histopathological damage was observed by Hematoxylin-eosin(HE)staining,terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling assay(TUNEL)was used to detect apoptosis levels in myocardial tissue,and immunohistochemical staining was used to determine the expression of T-lymphocyte surface antigens(CD4,CD8)and macrophage-specific antibodies(CD68)in myocardial tissue.Results:The isolated cells showed a typical spindle shape with high expression of cell surface antigens CD44,CD73and CD90,and low expression of CD34,CD45and human leukocyte antigen-DR protein(HLA-DR),indicating successful isolation of HuMSCs.Lentivirally infected HuMSCs Showed significant green fluorescent protein expression,RegⅢγmRNA expression was increased than that of uninfected cells(P<0.05),indicating that RegⅢγ-modified HuMSCs were successfully pared with the control group,ejection fraction(EF),shortening fraction(FS),IL-4and IL-10were decreased in the model group,left ventricular end-diastolic volume(LVEDV),left ventricular end-systolic volume(LVESV),serum IL-2,IL-6 and IL-23were increased,with significant inflammatory cell infiltration in myocardial tissue,TUNEL positivity was increased,and CD4, CD8and CD68protein expressions were strongly positive(P<0.05).Compared with the model group,EF,FS,IL-4and IL-10were increased in the HuMSCs group and RegⅢγ-HuMSCs group,LVEDV,LVESV,serum IL-2,IL-6and IL-23were decreased,significant inflammatory cell infiltration in myocardial tissue was decreased,TUNEL positivity,and CD4,CD8and CD68protein expressions were decreased(P<0.05).Compared with the HuMSCs group,EF,FS,IL-4and IL-10were increased in the HuMSCs group and RegⅢγ-HuMSCs group,LVEDV,LVESV,serum IL-2,IL-6and IL-23were decreased,there was no obvious inflammatory cell infiltration in the myocardial tissue,TUNEL positivity,and CD4,CD8and CD68protein expressions were decreased(P<0.05).Conclusion:RegⅢγ-modified HuMSCs could reduce the myocardial damage and inflammatory cell infiltration in mice with myocarditis induced by CVB3,and improve cardiac function.Keywords myocarditis;Coxsackie B3virus;islet regeneratingⅢγ;human umbilical cord mesenchymal stem cells,HuMSCs; inflammatory cell;mice;experimental study基金项目陕西省重点研发计划项目(No.2020SF-103)作者单位西安市儿童医院(西安710003)通讯作者孙敏,E-mail:****************引用信息蹇强,李丹,程玮,等.RegⅢγ修饰HuMSCs对柯萨奇B3病毒诱导的心肌炎炎性细胞浸润及心脏功能的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(8):1415-1422.心肌炎是心脏炎症性疾病,也是扩张型心肌病的前兆,通常以细胞浸润为主要特征,若心肌炎症在急性期未消退,心脏可能由于心肌细胞坏死受到直接损害,肉芽肿性炎症引起的损伤或成纤维细胞的增殖和胶原沉积引起的纤维化,可能导致扩张型心肌病或充血性心力衰竭发生[1-2]㊂心肌炎病因包括感染性和非感染性,其中病毒感染是心肌炎的常见病因,病毒可能在遗传易感个体中诱发心肌炎,儿童更易患心肌炎,目前,引起病毒性心肌炎的病毒主要包括柯萨奇病毒B㊁人类免疫缺陷病毒1㊁流感病毒及甲型和丙型肝炎病毒等[3]㊂尽管在较多研究中应用了包括皮质类固醇在内的免疫抑制药物治疗病毒性心肌炎,但效果存在争议㊂近年来,越来越多的实验和临床研究为应用细胞移植改善心肌功能的策略提供支持㊂间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有抗凋亡㊁抗纤维化和促血管生成等作用㊂人脐带间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,HuMSCs)是从脐带动脉和静脉及内皮下㊁血管周围区域中分离出来的细胞,较其他干细胞的来源丰富,生物学性状稳定,具有低免疫原性等特点[4-5]㊂已有研究表明,HuMSCs移植可能通过调节内质网应激㊁细胞外信号调节激酶(ERK)1/2信号传导途径和抑制心肌细胞凋亡减轻急性心肌炎大鼠的心肌损伤和心脏功能障碍[6]㊂胰岛再生源蛋白Ⅲγ(islet regeneratingⅢγ,RegⅢγ)是一种免疫炎症调节因子,在多种疾病或受损组织中表达,通过促进细胞增殖和抵抗细胞凋亡,发挥修复组织损伤的功能[7]㊂本研究通过慢病毒介导RegⅢγ感染HuMSCs,得到RegⅢγ修饰的HuMSCs,观察其对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的心肌炎小鼠模型心脏功能及损伤的影响,以期为临床治疗提供实验依据㊂1材料与方法1.1实验动物健康无特定病原体(SPF)级雄性BALB/C小鼠40只,4周龄,由西安交通大学实验动物中心提供,饲养于无特定病原体屏障环境,温度为22~ 24ħ,相对湿度为(50ʃ5)%,12h/12h明暗周期交替㊂本研究获得我院伦理委员会审批㊂1.2实验试剂RegⅢγ重组表达载体(PCDH-CMV-GFP-RegⅢγ)的构建㊁转染细胞及慢病毒包装过程均由上海捷瑞生物工程有限公司完成㊂胎牛血清(杭州四季青),DMEM/F12培养液和胰蛋白酶(美国HyClone公司),Trizol试剂盒(美国Thermo公司), Sensi Fast c-DNA合成试剂盒和SensiFast SYBR Green Hi-ROX试剂盒(英国Bioline公司),酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司),苏木精-伊红(HE)染色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司),免疫组织化学染色试剂盒(上海翊圣生物科技有限公司),抗体CD34㊁CD44㊁CD45㊁CD73㊁CD90㊁人类白细胞抗原-DR蛋白(HLA-DR)㊁CD4㊁CD8及CD68(英国Abcam公司),辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔或山羊抗小鼠(武汉博士德生物工程有限公司)㊂1.3实验方法1.3.1HuMSCs的提取㊁培养及鉴定收集我院妇产科无菌健康新生儿的脐带组织,磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗涤干净,剪成约1mm3的组织块,加入胶原酶Ⅱ消化,筛网过滤,滤液以4000r/min离心10min,弃上清,加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液,置于37ħ㊁体积分数5%CO2的恒温箱培养,3~5d 后换液,弃未贴壁细胞,继续培养,每隔2d换液1次㊂倒置显微镜观察细胞,融合度达80%后胰酶消化,扩大培养㊂选择第3代细胞,流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34㊁CD44㊁CD45㊁CD73㊁CD90及HLA-DR的表达㊂1.3.2慢病毒感染HuMSCs将HuMSCs消化后,按照每孔5ˑ104个细胞的密度接种于24孔板,放于37ħ㊁体积分数5%CO2的恒温箱内,待生长至融合度达到80%时,在培养孔内加入含有过表达RegⅢγ的慢病毒悬液的培养液,混匀后,置于细胞培养箱,根据细胞生长状态,12~16h更换培养液,感染24h和48h后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况㊂1.3.3实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验在感染后的HuMSCs中加入Trizol试剂液,按说明步骤提取总RNA,经分光光度计检测纯度与浓度后,根据Sensi Fast c-DNA合成试剂盒将总RNA逆转录合成cDNA㊂以获得的cDNA为模板,经过Rotor GeneQ荧光定量PCR仪进行扩增,检测RegⅢγmRNA的表达水平,具体操作按照SensiFast SYBR Green Hi-ROX试剂盒说明书进行,以β-actin作为内参基因㊂扩增条件:95ħ2min,95ħ5s,60ħ10s,共40个循环㊂RegⅢγ和GAPDH引物由上海生工生物工程有限公司合成,引物序列:RegⅢγ正向引物5'-AAGGTTGATTCTTTCAGGGAGC-3',反向引物5'-AGTGGATCTGAGTTAGGTCATGG-3';β-actin 正向引物5'-TGCGTGACATGAGAAG-3',反向引物5'-GCTCGTAGCTTCTCCA-3'㊂使用2-ΔΔCt法计算目的基因表达量㊂1.3.4动物建模与分组处理将40只小鼠按照随机数字表法分为对照组㊁模型组㊁HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组,每组10只㊂模型组㊁HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs 组均采用腹腔内注射200μL含102半数组织培养感染剂量的CVB3病毒液建立心肌炎模型[8],对照组注射等量生理盐水㊂次日,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组小鼠分别尾静脉注射100μL的HuMSCs㊁RegⅢγ-HuMSCs,注射细胞数量均为1ˑ106个,对照组和模型组小鼠均尾静脉注射100μL的生理盐水㊂1.3.5心脏超声检查14d后,采用异氟烷麻醉4组小鼠,固定在手术台上,应用高分辨率小动物超声成像系统,采集并记录小鼠超声相关指标射血分数(ejection fraction,EF)㊁缩短分数(fractional shortening,FS)㊁左室舒张末期容积(end-diastolic volume,LVEDV)和左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume, LVESV),通过系统软件进行处理数据㊂1.3.6ELISA实验心脏超声检查完毕后,4组小鼠摘眼球取血,血液室温静置1h后,4ħ条件下,以4000r/min离心10min,取血清,根据试剂盒说明书操作,ELISA法检测各组血清白细胞介素(IL)-2㊁IL-4㊁IL-6㊁IL-10和IL-23含量㊂1.3.7HE染色处死4组小鼠,解剖取其心肌组织,清洗干净后,采用4%多聚甲醛室温固定过夜㊂次日,梯度乙醇对心肌组织进行脱水,二甲苯透明,蜡块包埋,制作厚度约为4μm的石蜡切片,采用HE染色对心肌组织石蜡切片进行染色,切片进行脱蜡水化后,加入苏木素染色5min,流水冲洗干净,再用伊红染液复染3min,脱水㊁透明后,中性树胶封片,光学显微镜下摄影并观察组织形态学结构变化情况㊂1.3.8末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色取制备的小鼠心肌组织石蜡切片,脱蜡水化后,将蛋白酶K与缓冲液混合进行稀释,使用100μL的蛋白酶K工作液(20μg/mL), 37ħ条件下孵育10min,PBS漂洗干净,封闭液处理10min,50μL TUNEL试剂液孵育1h㊂3,3'-二氨基联苯胺(DAB)显色,苏木素复染,脱水㊁透明后,中性树胶封片,光学显微镜下摄影并观察,随机选择5个视野,阳性染色为棕褐色,代表凋亡细胞,计数视野下阳性细胞与总细胞,以两者比值作为TUNEL阳性率㊂1.3.9免疫组织化学染色将制备的4组小鼠石蜡切片进行常规脱蜡水化,置于柠檬酸盐液浸泡,进行高温修复抗原㊂3%过氧化氢溶液孵育10min后,将切片用5%山羊血清室温封闭30min㊂加入一抗T淋巴细胞表面抗原(CD4㊁CD8)和巨噬细胞特异性抗体(CD68)工作液,放于4ħ下孵育过夜㊂次日,弃去一抗液,加入对应二抗工作液,室温继续孵育60min㊂利用DAB法染色,苏木精复染5min,分化数秒,自来水冲洗干净,脱水㊁透明后,中性树胶封片,光学显微镜下对免疫组织化学切片摄影,阳性染色呈棕色至棕褐色,应用Image Pro Plus6.0软件测定阳性染色区域的平均吸光度值㊂1.4统计学处理采用SPSS23.0软件处理实验数据,GraphPad Prism8.3绘制统计图㊂符合正态分布的定量资料以均数ʃ标准差(xʃs)表示,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两组间比较采用最小显著差异法(LSD-t)㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1HuMSCs的鉴定结果倒置显微镜下观察分离培养的细胞,第7天可见细胞较少,且聚集成团;第14天细胞明显增多,形状为典型的纺锤形㊂流式细胞术检测结果显示,细胞表面抗原CD44㊁CD73和CD90表达水平均较高,CD34㊁CD45及HLA-DR表达均较低㊂详见图1㊂说明成功分离到HuMSCs㊂2.2慢病毒感染HuMSCs效果测定转染24h㊁48h 后,倒置荧光显微镜观察到经过慢病毒感染的HuMSCs中均可见绿色荧光蛋白表达,48h时表达明显,感染率达到98.4%㊂qRT-PCR检测结果显示,感染含RegⅢγ的RegⅢγ-HuMSCs组细胞中RegⅢγmRNA表达水平高于未感染的对照组细胞(P< 0.05)㊂详见图2㊂此结果说明已获得RegⅢγ修饰的HuMSCs㊂2.3RegⅢγ修饰HuMSCs对心肌炎小鼠心功能的影响与对照组比较,模型组小鼠EF㊁FS降低,LVEDV㊁LVESV升高(P<0.05);与模型组比较,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组EF㊁FS均升高,LVEDV㊁LVESV 均降低(P<0.05);与HuMSCs组比较,RegⅢγ-HuMSCs组EF和FS均升高,LVEDV和LVESV均降低(P<0.05)㊂详见图3㊁表1㊂图1HuMSCs鉴定(A为倒置显微镜观察HuMSCs形态;B为流式细胞术检测HuMSCs表面抗原表达)与HuMSCs组比较,*P<0.05㊂图2HuMSCs感染(A为倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达;B为qRT-PCR检测细胞RegⅢγmRNA表达水平)图3各组小鼠心脏超声图像表1各组小鼠心功能指标EF㊁FS㊁LVEDV及LVESV比较(xʃs)组别只数EF(%)FS(%)LVEDV(μL)LVESV(μL)对照组1083.04ʃ7.6755.08ʃ5.32265.39ʃ24.4537.56ʃ3.66模型组1062.26ʃ6.16①31.87ʃ3.07①436.85ʃ40.36①171.45ʃ14.23①HuMSCs组1068.55ʃ6.72②35.34ʃ3.36②331.28ʃ31.59②123.05ʃ11.75②RegⅢγ-HuMSCs组1080.39ʃ7.87②③53.47ʃ5.22②③268.90ʃ25.34②③43.40ʃ4.16②③模型组与对照组比较,①P<0.05;与模型组比较,②P<0.05;RegⅢγ-HuMSCs组与HuMSCs组比较,③P<0.05㊂2.4RegⅢγ修饰HuMSCs对心肌炎小鼠血清炎性因子水平的影响ELISA检测结果显示,与对照组比较,模型组小鼠血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量增加,IL-4和IL-10含量减少(P<0.05);与模型组比较, HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量减少,IL-4和IL-10含量增加(P<0.05);与HuMSCs组比较,RegⅢγ-HuMSCs组血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量减少,IL-4和IL-10含量增加(P<0.05)㊂详见表2㊂表2各组小鼠血清炎性因子水平比较(xʃs)单位:pg/mL 组别只数IL-4IL-2IL-6IL-10IL-23对照组1085.66ʃ7.2183.31ʃ7.9487.51ʃ8.3279.52ʃ7.28104.63ʃ9.93模型组1050.98ʃ5.02①172.36ʃ16.78①642.62ʃ60.86①33.47ʃ2.91①476.23ʃ41.77①HuMSCs组1064.81ʃ6.19②135.05ʃ11.39②315.48ʃ30.67②50.54ʃ4.96302.64ʃ30.21②RegⅢγ-HuMSCs组1078.51ʃ6.23②③101.45ʃ10.28②③236.50ʃ21.92②③72.71ʃ7.08②③221.80ʃ20.95②③模型组与对照组比较,①P<0.05;与模型组比较,②P<0.05;RegⅢγ-HuMSCs组与HuMSCs组比较,③P<0.05㊂2.5RegⅢγ修饰HuMSCs对心肌炎小鼠心肌组织病理损伤的影响HE染色结果显示,对照组小鼠心肌组织内细胞形态规则,排列整齐,无炎性细胞浸润;模型组心肌组织内细胞排列紊乱,炎性细胞浸润明显,有坏死灶,且有部分血管渗出蛋白黏液;HuMSCs组心肌组织仍有炎性细胞浸润,但病理损伤较模型组减轻; RegⅢγ-HuMSCs组心肌组织内细胞排列较为整齐,结构清晰,未见明显炎性细胞浸润现象㊂详见图4㊂图4HE染色检测各组小鼠心肌组织病理损伤(200μm)2.6RegⅢγ修饰HuMSCs对心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的影响TUNEL染色结果显示,对照组小鼠心肌组织内棕褐色细胞染色减少;相较于对照组,模型组小鼠心肌组织内有大量棕褐色细胞,TUNEL阳性率高于对照组(P<0.05);与模型组比较,HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组心肌组织棕褐色细胞减少, TUNEL阳性率降低(P<0.05);RegⅢγ-HuMSCs组TUNEL阳性率低于HuMSCs组(P<0.05)㊂详见图5㊁图6㊂图5TUNEL染色检测各组小鼠心肌细胞凋亡(50μm )模型组与对照组比较,*P<0.05;与模型组比较,#P<0.05;RegⅢγ-HuMSCs组与HuMSCs组比较,әP<0.05㊂图6TUNEL染色检测各组小鼠心肌细胞凋亡比较2.7RegⅢγ修饰HuMSCs对心肌炎小鼠心肌组织CD4㊁CD8㊁CD68表达的影响免疫组织化学染色结果显示,模型组小鼠心肌组织内CD4㊁CD8及CD68蛋白均呈强阳性表达,可见明显的棕褐色染色,CD4㊁CD8㊁CD68蛋白表达均高于对照组(P<0.05); HuMSCs组和RegⅢγ-HuMSCs组心肌组织内棕褐色染色强度较模型组减少,CD4㊁CD8及CD68蛋白表达降低(P<0.05);RegⅢγ-HuMSCs组CD4㊁CD8及CD68蛋白表达较HuMSCs组下降(P<0.05)㊂详见图7㊁图8㊂图7免疫组织化学染色检测心肌组织CD4㊁CD8㊁CD68表达(200μm)模型组与对照组比较,*P<0.05;与模型组比较,#P<0.05;RegⅢγ-HuMSCs组与HuMSCs组比较,әP<0.05㊂图8免疫组织化学染色检测心肌组织CD4㊁CD8㊁CD68表达比较3讨论心肌炎是炎性细胞浸润到心肌组织,导致心脏功能恶化的风险增加,且临床表现具有异质性㊂心肌炎主要由病毒感染介导,也可由细菌㊁原生动物或真菌感染㊁多种有毒物质和药物及全身免疫介导的疾病所诱发㊂尽管目前进行了广泛研究,但并发左心室功能障碍㊁心力衰竭或心律失常的心肌炎,常出现危及生命的症状,包括恶性心律失常㊁心源性休克及猝死等[2,9]㊂由于心肌炎临床表现具有多样性和病因复杂性,需结合具体情况制定治疗方案,即对症支持治疗,在此基础上,包括主动脉内球囊反搏㊁体外膜肺氧合及心室辅助装置等在内的器械支持也是常用的治疗方法[10]㊂近年来,免疫抑制和抗病毒治疗在心肌炎的研究中得以运用,但这些方法的疗效均不理想㊂减轻心肌炎的炎症反应和抑制心肌细胞凋亡对提高心脏功能具有积极的意义㊂HuMSCs除了具有自我更新能力外,同时表现出较小的免疫排斥反应,可用于同种异体移植,这些特征表明HUMSCs治疗自身免疫性疾病及修复组织损伤的潜力,并已得到证实㊂HUMSCs通过芳烃受体(AhR)调节宿主免疫和肠道微生物群之间的相互作用,在类风湿性关节炎大鼠中发挥治疗作用[11]; HuMSCs调节通过转化生长因子β1/Smad家族成员3 (TGF-β1/Smad3)信号途径参与抑制卵巢组织的纤维化,修复原发性卵巢功能不全大鼠的卵巢功能[12];鼻腔移植细胞球蛋白(CYGB)修饰HuMSCs后,通过蛋白38型丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)途径介导细胞凋亡改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤[13]㊂本研究超声心动图分析结果表明,经过CVB3诱导的小鼠EF 和FS降低,LVEDV和LVESV升高,表明心肌收缩和舒张功能受损;CVB3诱导的小鼠中尾静脉注射HuMSCs后,EF㊁FS均升高,LVEDV㊁LVESV均降低㊂经过HuMSCs治疗后的小鼠心肌组织病理损伤减轻,炎性细胞浸润减少,心肌细胞凋亡受到抑制㊂由此说明,HuMSCs可抑制心肌炎小鼠炎症反应和心肌细胞凋亡,可改善心脏功能损伤㊂Reg属于C类凝集素超家族,具有多种生物调节功能,如参与细胞增殖㊁凋亡㊁炎症反应及抗菌作用等㊂RegⅢγ作为该家族的成员,可对损伤组织起到修复作用㊂有研究表明,RegⅢγ可促进培养的结肠上皮细胞生长,并在成年小鼠的小肠中高表达,在葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎中发挥组织保护作用[14]㊂严重联合免疫缺陷小鼠中,肠道共生菌可活化RegⅢγ基因表达,由此推测其参与大肠炎发生中的先天免疫[15]㊂RegⅢγ可加快急性肝衰竭中的肝再生[16]㊂本研究结果显示,经过RegⅢγ修饰的HuMSCs治疗心肌炎小鼠后,相较于HuMSCs治疗比较,该作用引起EF和FS进一步升高,LVEDV和LVESV进一步降低,心肌组织病理损伤显著改善,组织结构清晰,且心肌细胞凋亡减少㊂这一结果表明,RegⅢγ修饰可促进HuMSCs对心肌炎小鼠心功能及心肌组织损伤的改善作用㊂由于心肌炎的常见原因是病毒感染㊁细菌感染及自身免疫性疾病,且心肌炎中常观察到淋巴细胞和单核细胞浸润,并检测到促炎趋化因子㊁细胞因子等表达增加[17-18],因此,炎症反应是心肌炎主要病症之一,抑制炎性因子和炎性细胞浸润对改善心肌炎十分重要㊂本研究结果显示,在CVB3诱导的小鼠血清促炎因子IL-2㊁IL-6和IL-23含量均增加,抑炎因子IL-4和IL-10含量均减少,心肌组织内T淋巴细胞表面抗原CD4㊁CD8和巨噬细胞特异性抗体CD68表达增强,说明机体内发生炎症反应,心肌组织内炎性细胞浸润,以淋巴细胞和巨噬细胞为主㊂进一步通过尾静脉注射HuMSCs和RegⅢγ-HuMSCs治疗后,血清IL-2㊁IL-6和IL-23含量均减少,IL-4和IL-10含量均增加,心肌组织内CD4㊁CD8和CD68表达减弱㊂由此推测,RegⅢγ修饰的HuMSCs具有保护心肌炎小鼠心脏的作用,可能与抑制心肌炎性递质浸润有关㊂综上所述,经RegⅢγ修饰可促进HuMSCs对CVB3诱导的小鼠病毒性心肌炎发挥心脏功能的保护作用,抑制血清炎症反应和组织内炎性细胞浸润,减少心肌组织细胞凋亡,为心肌炎的研究提供了新方向和理论支持,然而具体机制有待进一步阐明㊂参考文献:[1]AMMIRATI E,FRIGERIO M,ADLER E D,et al.Management ofacute myocarditis and chronic inflammatory cardiomyopathy:anexpert consensus document[J].Circulation Heart Failure,2020,13(11):e007405.[2]TSCHÖPE C,AMMIRATI E,BOZKURT B,et al.Myocarditis andinflammatory cardiomyopathy:current evidence and futuredirections[J].Nature Reviews Cardiology,2021,18(3):169-193.[3]吴蓉洲.儿童病毒性心肌炎发病机制研究进展[J].中国实用儿科杂志,2021,36(5):355-359.[4]MEI Q J,MOU H B,LIU X M,et al.Therapeutic potential ofHUMSCs in female reproductive aging[J].Frontiers in Cell andDevelopmental Biology,2021,9:650003.[5]SHOJAEIAN A,MEHRI-GHAHFARROKHI A,BANIT ALEBI-DEHKORDI M.Migration gene expression of human umbilical cordmesenchymal stem cells:a comparison between monophosphoryllipid A and supernatant of lactobacillus acidophilus[J].International Journal of Molecular and Cellular Medicine,2019,8(2):154-160.[6]ZHANG C Y,ZHOU G C,CAI C X,et al.Human umbilical cordmesenchymal stem cells alleviate acute myocarditis bymodulating endoplasmic reticulum stress and extracellular signalregulated1/2-mediated apoptosis[J].Molecular MedicineReports,2017,15(6):3515-3520.[7]SUN L H,FAN G J,SHAN P P,et al.Regulation of energyhomeostasis by the ubiquitin-independent REGγproteasome[J].Nature Communications,2016,7:12497.[8]王丽娟,沈洁,王丽华.黄芪甲苷对病毒性心肌炎小鼠内质网应激及炎性反应的影响[J].解放军医药杂志,2019,31(12):6-11.[9]SOBOL I,CHEN C L,MAHMOOD S S,et al.Histopathologiccharacterization of myocarditis associated with immunecheckpoint inhibitor therapy[J].Archives of Pathology&Laboratory Medicine,2020,144(11):1392-1396.[10]王斯,魏欣,肖乾凤,等.心肌炎的分类及治疗进展[J].心血管病学进展,2021,42(4):337-341.[11]LI X Y,LU C,FAN D P,et al.Human umbilical mesenchymal stemcells display therapeutic potential in rheumatoid arthritis byregulating interactions between immunity and gut microbiota viathe aryl hydrocarbon receptor[J].Frontiers in Cell andDevelopmental Biology,2020,8:131.[12]CUI L L,BAO H C,LIU Z F,et al.HUMSCs regulate thedifferentiation of ovarian stromal cells via TGF-β1/Smad3signaling pathway to inhibit ovarian fibrosis to repair ovarianfunction in POI rats[J].Stem Cell Research&Therapy,2020,11(1):386.[13]YANG H H,TIAN S F,XIE L C,et al.Intranasal administration ofcytoglobin modifies human umbilical cord-derived mesenchymal stemcells and improves hypoxic-ischemia brain damage in neonatalrats by modulating p38MAPK signaling-mediated apoptosis[J].Molecular Medicine Reports,2020,22(4):3493-3503. [14]SHINDO R,KATAGIRI T,KOMAZAWA-SAKON S,et al.Regenerating islet-derived protein(Reg)3βplays a crucial role inattenuation of ileitis and colitis in mice[J].Biochemistry andBiophysics Reports,2020,21:100738.[15]KEILBAUGH S A.Activation of RegⅢ/and interferon expressionin the intestinal tract of SCID mice:an innate response tobacterial colonisation of the gut[J].Gut,2005,54(5):623-629. 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Calpain在柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎中的作用及其机制研究中期报告
Calpain在柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎中的
作用及其机制研究中期报告
病毒性心肌炎是一种由病毒感染引起的心肌炎症性疾病。
目前认为，Calpain参与了各种心肌病的病理过程，但其在病毒性心肌炎中的作用及
机制尚不清楚。
本研究旨在探究Calpain在柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎中的
作用及其机制。
本期报告主要介绍了实验设计和方法，实验组织和动物
模型的建立，实验进展和初步结果。
本研究通过构建柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎模型。
实验组设置了对照组、柯萨奇B3病毒组、静脉注射Calpain抑制剂MDL-28170组以及同时注射柯萨奇B3病毒和Calpain抑制剂MDL-28170组。
在建立动物模型后，将分别观察各组动物的心肌病理学改变和心肌功能变化。
同时，采用Western blot和实时荧光定量PCR技术对Calpain、细胞凋亡相关分子和炎症因子的表达进行检测。
目前，实验已经完成了动物模型的建立和各组样本的收集和处理。
初步结果表明，柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎可以导致心肌细胞凋亡增加和炎症因子的表达上调，同时Calpain的表达也得到了显著提高。
进一步的分析和检测正在进行中。
总之，本研究将深入探讨Calpain在病毒性心肌炎病理过程中的作用及其机制，为病毒性心肌炎的治疗和预防提供新的思路和理论基础。
淋巴细胞趋化因子增强柯萨奇病毒DNA疫苗黏膜免疫及预防小鼠心肌炎的作用
淋巴细胞趋化因子增强柯萨奇病毒DNA疫苗黏膜免疫及预防小鼠心肌炎的作用岳艳;胡林昆;徐薇;熊思东【摘要】本研究在已建立的柯萨奇病毒B3型(CVB3)黏膜疫苗chitosan-pVP1基础上,引入C家族趋化因子,即淋巴细胞趋化因子(LTN),以期诱导更强的黏膜免疫应答,获得更有效的免疫保护作用.将pLTN与pVP1各50 μg混合后,与chitosan形成共聚复合物,隔周滴鼻免疫小鼠,共4次;末次免疫后2周,检测血清IgG、粪便IgA 及肠系膜淋巴结细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性.同时,以3 LD50/0.1 ml CVB3腹腔感染小鼠,7 d后检测血清肌酸激酶(CK)活性及心肌病理学改变.结果显示,与对照组相比,chi-(pVP1+pLTN)可显著提高CVB3特异性血清IgG水平、粪便IgA水平以及增强肠系膜淋巴结特异性CTL应答.病毒攻击后,chi-(pVP1+pLTN)组心肌炎发病率仅为16.7%,显著低于chi-(pVP1+pcDNA3.1)组的33.3%.心肌组织病理显示,chi-(pVP1+pLTN)组心外膜下仅有轻微炎症,而chi-(pVP1+pcDNA3.1)组除心外膜下有较多淋巴细胞聚集外,心肌内尚有少量炎症浸润和坏死灶.结果提示,LTN与VP1质粒经chitosan共包装后进行滴鼻免疫,可增强CVB3特异性黏膜免疫应答,更有效地预防病毒性心肌炎的发生.【期刊名称】《微生物与感染》【年(卷),期】2010(005)002【总页数】7页(P77-83)【关键词】柯萨奇病毒B3型;黏膜疫苗;淋巴细胞趋化因子;滴鼻免疫;病毒性心肌炎【作者】岳艳;胡林昆;徐薇;熊思东【作者单位】复旦大学上海医学院免疫生物学研究所,上海,200032;复旦大学上海医学院免疫生物学研究所,上海,200032;复旦大学上海医学院免疫生物学研究所,上海,200032;复旦大学上海医学院免疫生物学研究所,上海,200032【正文语种】中文病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是一种临床常见的心血管系统疾病，近年来在全球范围内发病呈上升趋势，且已成为青少年不明原因猝死的主要原因之一[1]。
柯萨奇B_3病毒性心肌炎模型小鼠的免疫学指标检测
柯萨奇B_3病毒性心肌炎模型小鼠的免疫学指标检测杨志伟;周娅;曹秀琴【期刊名称】《宁夏医学院学报》【年(卷),期】2002(24)6【摘要】目的 :建立急性病毒性心肌炎小鼠模型并检测其免疫功能指标。
方法 :腹腔注射CVB3 建立急性病毒性心肌炎小鼠模型 ,用MTT比色法检测NK、TNF、IFN的活性 ;进行小鼠心肌组织病毒分离、病理检查 ,检测小鼠体重、心脏及脾脏重量变化。
结果 :CVB3 感染鼠的体重及心脏、脾脏的重量均明显减轻 ;血清中TNF 活性及脾细胞诱生TNF量显著增高 ;脾脏NK活性增高 ,但脾细胞诱生IL - 2量降低 ;IFN无明显变化。
结论 :急性病毒性心肌炎模型小鼠的NK活性。
【总页数】4页(P391-394)【关键词】病毒性心肌炎;小鼠;免疫学指标;检测;柯萨奇B组3型病毒;细胞因子;自然杀伤细菌【作者】杨志伟;周娅;曹秀琴【作者单位】宁夏医学院微生物与免疫学教研室;宁夏医科所生化室【正文语种】中文【中图分类】R542.21;R373【相关文献】1.柯萨奇B3病毒性心肌炎模型小鼠的免疫学指标检测 [J], 杨志伟;周娅;曹秀琴2.病心胶囊对柯萨奇B_3病毒性心肌炎小鼠心肌病理及超微结构的保护作用 [J],郑云;杜家经;孙国强3.黄芪甲甙治疗Balb/c小鼠慢性柯萨奇B_3病毒性心肌炎的疗效 [J], 李小鸣;田红;李双杰4.苦瓜素对柯萨奇B_3病毒所致病毒性心肌炎小鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响 [J], 田红;李小鸣;李双杰5.抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊对柯萨奇B_3病毒性心肌炎小鼠LDH、CK的影响[J], 闫莉婷;冯会红;牛云锋;李萌萌;魏婷婷;苏靖;靳海红;刘月红;韩淑英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠回肠黏膜固有层淋巴细胞在黏膜免疫应答中的形态学观察
小鼠回肠黏膜固有层淋巴细胞在黏膜免疫应答中的形态学观察李志春l ，谢遵江l ，崔宏波2，刘颖l ，贺业春l（l.哈尔滨医科大学解剖学教研室；2.微生物学教研室，黑龙江哈尔滨l50086）［摘要］目的探讨回肠黏膜固有层淋巴细胞在抗原诱导下的黏膜免疫应答中的形态特征。
方法采用光镜和电镜方法，观察BALB /c 小鼠灌服伤寒杆菌后回肠黏膜固有层淋巴细胞的组织学特征。
结果光镜下黏膜固有层可见形态各异的淋巴细胞。
电镜下可见大量胞浆丰富而浅淡的淋巴细胞，有些淋巴细胞的突起穿越上皮的基膜，并可见大量浆细胞或浆细胞前体细胞，内质网丰富，可见其扩张形成囊泡和RusseII 小体。
结论伤寒杆菌可诱导小鼠回肠黏膜固有层淋巴细胞的免疫应答，且黏膜固有层为黏膜免疫应答的效应部位。
［关键词］伤寒杆菌；黏膜固有层；淋巴细胞；黏膜免疫［中图分类号］R378.2；R329.l ［文献标识码］A ［文章编号］l000-l905（2003）02-0l35-02Morphological observation of lamina propria lymphocytes ofmice in mucosal immune responseLI Zhi-chun ，XIE Zun-jiang ，CUI Hong-bo ，et al（Department of Anatomy ，Harbin Medical Uniuersity ，Harbin l50086，China ）Abstract ：Objective To study the morphoIogicaI characterizations of Iamina propria Iymphocytes of iIeum ofmice in mucosaI immune response under antigen inducement.MethodsThe histoIogicaI characterizations of Iymphocytes in Iamina propria of iIeum in BALB /c mice which took salmonella typhi were observed by Iight and eIectron microscopes.Results The various morphoIogies of Iymphocytes were observed in Iamina propria under Iight microscopy.Under eIectron microscopes ，there existed a Iot of Iymphocytes which cytopIasm were pIentifuI and paIe coIoring ，some Iymphocytes were passing through basement membrane of epitheIium.There existed some pIasma ceIIs or pre-pIasma ceIIs which had pIentifuI and distended endopIasmic reticuIum.Con-clusion The salmonella typhi may induce the immune response of Iamina propria Iymphocytes in mice ，and Iamina propria is the effective site of the mucosaI immune response.Key words ：salmonella typhi ；Iamina propria ；Iymphocytes ；mucosaI immunity［收稿日期］2002-l2-23［作者简介］李志春（l966-），男，黑龙江大庆人，副主任医师，硕士研究生。
柯萨奇B组病毒3型VPI基因疫苗免疫效果的研究
柯萨奇B组病毒3型VPI基因疫苗免疫效果的研究朱莉;王灵枢;刘晶星;陆德源;袁正宏;闻玉梅【期刊名称】《上海第二医科大学学报》【年(卷),期】1999(19)3【摘要】目的为研制防治病毒性心肌炎的基因疫苗打下基础。
方法以带有CVB。
P1、P2区核酸序列的pGEM质粒为模板，用PCR方法克隆CVB3VP1基因cDNA，插入真核表达载体pcDNA3中的HindⅢ和XbaⅠ位点之间，构建成重组质粒。
经大量扩增纯化后，肌肉注射免疫BALB／c小鼠3次，用CVB3毒株攻击小鼠，取血及脾细胞检测其免疫效果。
结果小鼠经3次免疫后，虽未测出明显免疫应答指标，但诱导了T、B细胞的免疫记忆反应，免疫组鼠在CVB3毒株攻击后，迅速诱导产生了强烈的二次免疫应答。
结论CVB3VP1基因疫苗对CVB3毒株的攻击有一定程度的保护作用。
【总页数】4页(P273-276)【关键词】柯萨奇B组病毒;VP1;基因疫苗;免疫效果;心肌炎【作者】朱莉;王灵枢;刘晶星;陆德源;袁正宏;闻玉梅【作者单位】上海第二医科大学微生物学教研室;上海医科大学卫生部分子病毒重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R542.210.3;R373.23【相关文献】1.柯萨奇B组3型病毒中国分离株VP4、3D基因序列及系统发生树分析 [J], 刘明宇;孟庆文;吴东来;孟繁超2.心脏基因工程研究对一级康复的干预作用:构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白候选基因疫苗诱导体液免疫的评估 [J], 郭宏;田野;曲秀芬;李为民;孟繁超3.一株引起无菌性脑膜脑炎柯萨奇B组3型病毒的分离和VP1基因分析 [J], 李华;杨卉娟;柯华昕;陈俊英;施海晶;孙强明;马绍辉4.柯萨奇B组病毒3型VP1基因疫苗免疫效果的研究 [J], 朱莉;袁正宏5.干扰素对柯萨奇B组病毒及对7型腺病毒不同基因组型敏感性的比较 [J], 毓明涛;秦懿;孙丹枫;郑永晨;傅文永因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
柯萨奇病毒性心肌炎小鼠的自然病程观察
柯萨奇病毒性心肌炎小鼠的自然病程观察高玉峰;郑纪宁;张风英;宋鸿儒【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2006(022)008【摘要】目的以组织病理学观察CVB3感染鼠的自然病程及此过程中IL-2、IL-10的变化.方法对昆明种小鼠采用CVB3腹腔注射染毒后不同时间观察心、肝、脾、肾的病理改变及检测血清中IL-2和IL-10.结果心肌炎小鼠的各脏器出现不同程度的病理改变,IL-2、IL-10随病程的发展呈现出一定的变化:即接种CVB3后第4天IL-2水平明显低于正常均值,随着病程的发展IL-2水平呈升高趋势,第9-14天IL-2水平明显高于正常值,第10天IL-2水平达高峰,第18天IL-2水平接近正常;随着病程的发展IL-10水平逐渐下降,第9-14天IL-10水平明显低于正常均值,此时心肌病变程度加重.结论病毒性心肌炎是一类全身感染性疾病,心外器官病变不容忽视,IL-2和IL-10在此过程中起不同的作用.【总页数】3页(P767-769)【作者】高玉峰;郑纪宁;张风英;宋鸿儒【作者单位】承德医学院预防医学教研室,承德,067000;承德医学院病理学教研室,承德,067000;承德医学院预防医学教研室,承德,067000;承德医学院微生物免疫学教研室,承德,067000【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.白藜芦醇抗柯萨奇病毒感染性小鼠心肌炎的治疗研究 [J], 郝捍东;何立人;赵伟珍2.柯萨奇病毒A组16型与小鼠病毒性心肌炎的关联性及其药物干预研究 [J], 孔慧;都鹏飞;卢娟3.碱性成纤维细胞生长因子对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌氧化应激的影响[J], 潘光婷;阳冠明4.内源性硫化氢对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌内病毒复制的影响 [J], 王敏;阳冠明5.白藜芦醇抗柯萨奇病毒感染性小鼠心肌炎的实验研究 [J], 郝捍东;何立人;徐清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
柯萨奇B病毒单克隆抗体与病毒性心肌炎
柯萨奇B病毒单克隆抗体与病毒性心肌炎李华;朱德生;王鸣英【期刊名称】《陕西医学杂志》【年(卷),期】2001(030)011【摘要】病毒性心肌炎是小儿常见的心血管疾病之一 ,严重危害儿童的身体健康。
多年来各国学者对本病的病原学、发病机理及治疗等方面进行了大量研究。
尤其是1975年 Kohler和 Milstein创建了生产特异性单克隆抗体的方法以来 ,许多学者将这一技术应用于心肌炎的各项研究中。
本文综述近年来柯萨奇 B组病毒( Coxsackievirus B,CVB)单克隆抗体 ( Monoclonal antibodies,m Ab)在病毒性心肌炎基础研究及临床应用研究方面的进展。
1 柯萨奇 B组病毒单克隆抗体在病毒性心肌炎病因学研究中的应用CVB是病毒性心肌炎最常见的致病病毒[1 ] 。
CVB分 1～ 6型 ,同一型 CVB病毒因抗原决定簇的不同而有多种毒株 ,病毒株是影响其致病性的重要因素。
病毒间的抗原变异是导致抗原决定簇多样性的主要因素。
作为检测病毒抗原的多克隆抗血清可中和所有的 CVB同型株 ,但不能显示出同型中不同病毒株间的抗原异同。
而 m Ab可以准确比较出 CVB同型株间的异同。
Webb等 [2 ]利用特异性 m Ab对 CVB4抗原决定簇的多态性进行研究 ,提示 Jvb 和 Edw株间的抗原片段表达的质量和数量均存在...【总页数】3页(P666-668)【作者】李华;朱德生;王鸣英【作者单位】西安市儿童医院,西安,710002;西安市儿童医院,西安,710002;西安市儿童医院,西安,710002【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.抗柯萨奇 B病毒性心肌炎胶囊复方新制剂对柯萨奇 B3病毒感染的人喉癌上皮细胞的影响 [J], 徐静;姚荣妹;马会霞;李洁;韩淑英;包巨太2.柯萨奇B病毒性心肌炎病原学检测及单克隆抗体的应用 [J], 李华;朱德生;王鸣英;向润娥3.抗柯注射液治疗柯萨奇B病毒性心肌炎研究 [J], 陈曙霞;梅尚文;章隆泉;钱富荣;谢龙山;陈美芳;王平全;陆国红;沈金芳;刘晶星;陈福祥;陆德源;姚季生4.抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊对柯萨奇B_3病毒性心肌炎小鼠LDH、CK的影响[J], 闫莉婷;冯会红;牛云锋;李萌萌;魏婷婷;苏靖;靳海红;刘月红;韩淑英5.抗柯注射液治疗柯萨奇B病毒性心肌炎及其机理研究 [J], 陈曙霞;梅尚文;王平全;陈美芳;钱富荣;谢龙山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
用ELISA法快速诊断柯萨奇B组病毒感染的儿童心肌炎
用ELISA法快速诊断柯萨奇B组病毒感染的儿童心肌炎江永珍;张礼璧;谢景石;朱晖;李继芬;王棣华【期刊名称】《病毒学报》【年(卷),期】1991(7)2【摘要】以柯萨奇B组(Cox B)1～5型病毒感染的Vero细胞上清液作为抗原,建立了间接ELISA法和IgM抗体捕捉ELISA法(MacELISA),并分别用于检测心肌炎和非心肌炎患儿血清中Cox B1～5型病毒IgG和IgM抗体。
结果IgG类抗体滴度≥6 400者,在80例心肌炎(包括30例急性心肌炎)患儿中有49例,占61.25％,50例非心肌炎患儿中有11例,占22％。
两者有显著性差别,u=5.6,P<0.01。
而IgM抗体的阳性率,急性心肌炎患儿为73％,心肌炎患儿为32％,总阳性率为47.5％;而非心肌炎患儿仅为8％。
30例心肌炎和急性心肌炎IgM抗体阳性者中,以抗Cox B3型的百分率最高,占40％(12例);其次为2型,占33％(10例);4型占17％(5例),1型占6.6％(2例):5型占3.3％(l例)。
10例急性心肌炎患儿的双份血清,间接ELISA法检测恢复期IgG抗体呈4倍以上升高或降低者有6例(60％),MacELISA法检测IgM抗体8例(80％)阳性。
【总页数】6页(P158-163)【关键词】柯萨奇B病毒;ELISA;儿童;心肌炎【作者】江永珍;张礼璧;谢景石;朱晖;李继芬;王棣华【作者单位】中国预防医学科学院病毒学研究所;河南医科大学附属第三医院;首都儿童医院临床实验室【正文语种】中文【中图分类】R373.9【相关文献】1.抗柯萨奇 B病毒性心肌炎胶囊复方新制剂对柯萨奇 B3病毒感染的人喉癌上皮细胞的影响 [J], 徐静;姚荣妹;马会霞;李洁;韩淑英;包巨太2.用Mac ELISA法检测病毒性心肌炎患者血清中柯萨奇B组病毒IgM抗体 [J], 朱晖;张礼壁3.早期快速诊断小儿柯萨奇B组病毒感染的研究 [J], 周德贵;徐宏霞;郑丽芬4.间接ELISA法检测柯萨奇B组病毒感染的特异性IgM抗体诊断试剂盒… [J], 李晓眠;刘民5.抗体捕捉ELISA法在诊断柯萨奇A16病毒感染中的应用 [J], 朱托夫;张礼璧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及黄芪甲甙干预研究
小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及黄芪甲甙干预研究罗永姣;刘红英;李双杰【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2009(17)2【摘要】目的探讨黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10mRNA表达和蛋白质产生的影响。
方法Balb/c小鼠50只随机分为5组,空白对照组,腹腔无菌注射不含病毒的Eagle’s培养基0.1mL,在腹腔注射病毒培养基30min后,以生理盐水0.1mL灌胃,共7d;病毒性心肌炎对照组,小鼠每只腹腔注射0.1mL内含1×105TCID50柯萨奇B3病毒的Eagle’s培养基,在腹腔注射含病毒的Eagle’s 培养基30min后,以生理盐水0.1mL灌胃,共7d;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组,在腹腔注射病毒30min后,用黄芪甲甙剂量分别为0.07、0.2和0.6mg/(kg·d)0.1mL灌胃,共7d。
14d后处死全部小鼠并取其心脏。
心脏组织一半用于逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达,另一半用Westernblot测定细胞因子蛋白质生成量。
结果空白对照组上述细胞因子均无明显表达,心肌炎对照组肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6和白细胞介素10mRNA和蛋白产生均显著高于空白对照组;同心肌炎对照组比较,高剂量黄芪甲甙组的肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6mRNA和蛋白生成均显著下降,而白细胞介素10mRNA和蛋白明显升高。
结论黄芪甲甙明显降低小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏的致炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6,而升高炎症保护因子白细胞介素10。
【总页数】3页(P122-124)【关键词】Balb/c小鼠;黄芪甲甙;柯萨奇B3病毒;心肌炎;细胞因子;基因表达【作者】罗永姣;刘红英;李双杰【作者单位】南华大学附属第一医院儿科;湖南省儿童医院感染科【正文语种】中文【中图分类】R72【相关文献】1.黄芪甲甙治疗Balb/c小鼠慢性柯萨奇B3病毒性心肌炎的疗效 [J], 李小鸣;田红;李双杰2.黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒所致病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织连接蛋白43mRNA表达的影响 [J], 于影;马奎影;侯春霞;柳文清;赵明3.黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织连接蛋白43表达的影响 [J], 王洪军;窦忠霞;陈少青;柳文清;赵明4.黄芪甲甙治疗Balb/c小鼠慢性柯萨奇B_3病毒性心肌炎的疗效 [J], 李小鸣;田红;李双杰5.黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的抗氧化作用 [J], 罗永姣;李双杰;刘红英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
碱性成纤维细胞生长因子对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌氧化应激的影响
碱性成纤维细胞生长因子对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌氧化应激的影响潘光婷;阳冠明【期刊名称】《中国临床新医学》【年(卷),期】2012(005)004【摘要】目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对柯萨奇病毒B3(CVB3)所致病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌氧化应激的影响.方法雄性Balb/c小鼠通过腹腔接种CVB3复制VMC模型.75只雄性Balb/c小鼠随机分为5组(每组15只):正常对照组、VMC组及bFGF低、中、高剂量干预组(bFGF给药采用肌肉注射,bFGF低、中、高剂量干预组的bFGF剂量分别为1 000.0、2 000.0、4 000.0 IU·kg-1,1次/d,共6次;bFGF的首次给药为腹腔接种CVB3的同时肌肉注射bFGF).于腹腔接种CVB3后第7天处死小鼠.用光镜观察心肌组织的病理变化;用分光光度法测定心肌组织的超氧阴离子(O2.-)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(·OH)、丙二醛(MDA)含量;用酶联免疫吸附法测定心肌组织的金属硫蛋白(MT)含量及血清的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量;用逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应方法检测心肌组织的MT-Ⅰ mRNA、MT-Ⅱ mRNA表达.结果 VMC组心肌组织的O2.-、H2O2、·OH、MDA含量及病理积分、血清cTnI含量明显高于正常对照组(P<0.01),心肌组织MT-Ⅰ mRNA、MT-Ⅱ mRNA表达水平及MT含量明显低于正常对照组(P<0.01);bFGF低、中、高剂量3个干预组心肌组织的O2.-、H2O2、·OH、MDA含量及病理积分、血清cTnI含量明显低于VMC组(P<0.01),心肌组织MT-Ⅰ mRNA、MT-Ⅱ mRNA表达水平及MT含量明显高于VMC组(P<0.01),且与bFGF的剂量呈量效关系.结论 bFGF抑制CVB3导致心肌氧化应激而减轻CVB3对心肌的损伤,与其拮抗CVB3抑制心肌合成MT而增加心肌清除O2.-、H2O2、·OH的能力有关.【总页数】6页(P292-297)【作者】潘光婷;阳冠明【作者单位】530021,南宁,广西医科大学第一附属医院儿科;530021,南宁,广西医科大学第一附属医院儿科【正文语种】中文【中图分类】R542.21【相关文献】1.内源性硫化氢对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌内病毒复制的影响 [J], 王敏;阳冠明2.卡维地洛对柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎小鼠的疗效及其抗氧化应激作用 [J], 李岳春;任江华;曹茂银3.大蒜素对柯萨奇病毒B3感染的小鼠心肌炎免疫和心肌损伤的影响 [J], 蓝景生;潘兴寿;黄照河;陆克兴4.反义硫代寡核苷酸对小鼠柯萨奇病毒B3性心肌炎影响的研究 [J], 齐秀英;李晓眠;李梅;刘民;张国际5.NF-κB蛋白在柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎小鼠心肌细胞焦亡过程中的调控作用 [J], 石哲玮;秦铖璠;钱彩珍;蔡露铷;刘胜新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
柯萨奇病毒B3m重复感染致病毒性心肌炎的心脏形态学改变
柯萨奇病毒B3m重复感染致病毒性心肌炎的心脏形态学改变郭玲;孙辉;钟翔宇;王莹威;周令望;钟学宽【期刊名称】《中华地方病学杂志》【年(卷),期】2005(024)003【摘要】目的探讨柯萨奇病毒B3m(CVB3m)重复感染致病毒性心肌炎的心脏形态学改变.方法用梯度倍增法连续4次经腹腔注射CVB3m病毒液感染昆明小鼠,分别于末次感染后10、30、60 d处死动物,HE和VG染色观察心肌病变和纤维增生情况;免疫组化法检测心肌中Ⅰ、Ⅲ型胶原.结果(1)HE染色显示末次感染后10 d心肌损伤严重,30 d时仍可见小灶坏死,60 d时未检出心肌的炎性损伤.(2)VG染色表明末次感染后10 d心肌即出现较弱的胶原染色,30 d时胶原明显可见,60 d时心肌组织的胶原显著增加,心肌组织血管周围胶原面积(PCVA)和心肌胶原容积分数(CVF)均显著增加.(3)心肌胶原的免疫组化进一步显示心肌胶原的增加以Ⅰ型为主,Ⅲ型胶原在末次感染后10、30 d未见表达,60 d时表达量亦较少,而Ⅰ型胶原的表达与胶原染色结果基本一致.结论CVB3m重复感染可导致心肌纤维化和心室重构,使室壁僵硬而影响心脏的收缩和舒张功能,是心力衰竭发生的重要原因之一.【总页数】3页(P278-280)【作者】郭玲;孙辉;钟翔宇;王莹威;周令望;钟学宽【作者单位】150086,哈尔滨医科大学克山病研究所;150086,哈尔滨医科大学克山病研究所;哈尔滨医科大学第二临床医学院;黑龙江省中医药大学;150086,哈尔滨医科大学克山病研究所;150086,哈尔滨医科大学克山病研究所【正文语种】中文【中图分类】Q939.47【相关文献】1.柯萨奇病毒B3致病毒性心肌炎动物模型的建立 [J], 李岳春;杨占秋2.丹红注射液对柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎血清单核细胞趋化蛋白-1及心肌型脂肪酸结合蛋白的影响及临床意义 [J], 张永强;陈志;刘海仁;薛艳3.柯萨奇病毒致病毒性心肌炎的细胞凋亡研究 [J], 宋晓东;王仑;刘玉清;辛颖;惠汝太4.中药黄芪颗粒对儿童急性柯萨奇病毒感染导致病毒性心肌炎免疫调节的研究 [J], 刘迎宣;李子楠5.益气降浊汤对CVB3m重复感染致病毒性心肌炎小鼠TGF-β_1 mRNA表达的影响 [J], 王莹威;郭玲;李奇虹;李延因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡与外周血淋巴细胞凋亡的研究
病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡与外周血淋巴细胞凋亡的研究王述昀;马沛然;王玉林【期刊名称】《山东大学学报：医学版》【年(卷),期】2003(41)1【摘要】目的:研究心肌炎小鼠柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎模型外周血淋巴细胞凋亡与心肌细胞凋亡的关系。
方法:采用AnnexinV/PI双参数法在流式细胞仪上定量检测CVB3心肌炎小鼠外周血淋巴细胞凋亡及心肌细胞凋亡百分率。
结果:CVB3感染所致心肌炎小鼠外周血淋巴细胞凋亡以及心肌细胞凋亡均显著高于正常对照小鼠(P<0.001),且两者呈显著正相关(r=0.80,P<0.01);外周血淋巴细胞及心肌细胞凋亡百分率与心肌病理积分亦呈明显正相关(r=0.72,P<0.01;r=0.85,P<0.01)。
结论:病毒性心肌炎外周血淋巴细胞凋亡可以反映心肌细胞凋亡情况,而且两者均与心肌炎病理损害程度密切相关。
【总页数】3页(P28-30)【关键词】心肌炎;细胞凋亡;淋巴细胞;柯萨奇病毒B组;小鼠;近交Balb/c【作者】王述昀;马沛然;王玉林【作者单位】山东大学医学院病理生理学教研室;山东省立医院儿科【正文语种】中文【中图分类】R542.21;Q95－33【相关文献】1.急性病毒性心肌炎患儿血清心肌酶与外周血淋巴细胞凋亡的关系 [J], 叶明阳;温晓敏;王锋2.小儿病毒性心肌炎与Fas/Fasl介导的外周血淋巴细胞凋亡的关系 [J], 梅花;任少敏;傅亮3.小儿急性病毒性心肌炎心肌酶与外周血淋巴细胞凋亡的关系 [J], 梅花;傅亮;马金柱;张嘉玲4.小儿病毒性心肌炎外周血淋巴细胞凋亡的研究及意义 [J], 梅花;杨晓庆;傅亮;杨轶男5.病毒性心肌炎外周血淋巴细胞凋亡与坏死的临床与实验研究 [J], 王述昀;马沛然因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
抗柯萨奇病毒B病毒性心肌炎胶囊复方提取物对病毒性心肌炎小鼠心肌的保护作用
抗柯萨奇病毒B病毒性心肌炎胶囊复方提取物对病毒性心肌炎小鼠心肌的保护作用林清;马会霞;高秀娟;谢飞;徐静;王巍;包巨太【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2015(0)6【摘要】Objective To discuss the myocardial protection about viral myocarditis mice induced by adriamycin ( ADM) about com-pound extracting from againsting coxsackie virus B viral myocarditis capsule ( K-CoxB-JN).Methods To observe the influence from myocar-dial tissue pathology ,index of the mice hearts and spleens ,CK,CK-MB,cTnI through different groups from compound extracting .Results The group of compound flavonoids and the group of ( flavonoids+saponins ) improved the inflammatory pathological changes ,and controlled the activity about CK ,CK-MB and cTnI.Conclusions K-CoxB-JN compound extracting could protect myocardial cells on viral myocarditis in mice.%目的：探讨抗柯萨奇病毒B病毒性心肌炎胶囊（ K－CoxB－JN）复方提取物对于阿霉素（ ADM）诱导小鼠心肌损伤模型的保护作用。
柯萨奇病毒B组3型基因疫苗预防实验性心肌炎的研究
柯萨奇病毒B组3型基因疫苗预防实验性心肌炎的研究田野;钟照华;杨巍;赵铁强;刘明;黄建林;孟繁超;黄永鳞;鲁凤民;叶鸿瑁【期刊名称】《中华地方病学杂志》【年(卷),期】2001(020)004【摘要】目的以构建的柯萨奇病毒B组3型(CVB3)VP1基因的真核表达系统pCEP4-CVB3VP1作为基因疫苗,评价其对CVB3实验性心肌炎的预防作用.方法大量制备pCEP4-CVB3VP1,提纯后将其接种BALB/C小鼠,取血清进行ELISA、病毒中和试验和病毒攻击保护实验.结果 ELISA证明pCEP4-CVB3VP1表达产物可刺激机体产生抗CVB3的特异性IgM;病毒中和试验证明其可诱导机体产生中和抗体,中和CVB3毒力;病毒攻击保护实验证明其可保护接种小鼠抵抗CVB3攻击.结论pCEP4-CVB3VP1能诱导机体产生免疫应答,可作为基因疫苗预防CVB3心肌炎.【总页数】3页(P259-261)【作者】田野;钟照华;杨巍;赵铁强;刘明;黄建林;孟繁超;黄永鳞;鲁凤民;叶鸿瑁【作者单位】哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科;哈尔滨医科大学基础医学院;哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科;哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科;哈尔滨医科大学基础医学院;哈尔滨医科大学基础医学院;哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科;哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科;北京大学第三医院;北京大学第三医院【正文语种】中文【中图分类】R373.2+3;R542.2【相关文献】1.VP1与C3d3融合基因疫苗诱生CVB3特异性免疫应答及其预防病毒性心肌炎的研究 [J], 赵娜2.柯萨奇病毒B组3型VP1蛋白的原核表达及免疫效果研究 [J], 李伟;蓝佳明;李剑;金玉怀;高志云;揣侠;刘贵霞;张永红;王永祥3.牙龈卟啉单胞菌精氨酸特异性牙龈素基因疫苗预防比格犬种植体周围炎的实验研究 [J], 李传花;王志峰;朱丽娜;范欣;蓝菁4.柯萨奇病毒B组3型VP1和IL-15双表达基因疫苗对小鼠的免疫效果 [J], 房文亮;金玉怀;金士香;揣侠5.诱导型一氧化氮合酶在实验性病毒性心肌炎心肌内的表达及其与心肌损害的关系[J], 范晓晨;刘雪芹;马郁文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
益心康对柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎小鼠作用的实验研究
益心康对柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎小鼠作用的实验研究王鹏;陈苏宁;张玉芳;杨积武【期刊名称】《辽宁中医杂志》【年(卷),期】2002(29)11【摘要】目的 :实验观察中药复方益心康 ,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护作用和对心肌细胞内病毒复制的抑制作用。
方法 :诱导Balb/c小鼠形成病毒性心肌炎模型 ,分别予益心康、病毒唑稀释液、生理盐水灌胃。
测每个小鼠血清磷酸肌酸激酶 (CK)及其同功酶MB(CK -MB) ,测心肌细胞感染CVB3mRNA量。
结果 :中药治疗组小鼠的血清CK和CK -MB明显低于其它两个治疗组。
中药治疗组小鼠的心肌细胞含有的病毒RNA量明显少于其它两个治疗组。
结论 :益心康对柯萨奇B3m病毒性心肌炎小鼠有保护作用,并抑制柯萨奇病毒B3m在心肌细胞中的复制。
【总页数】2页(P695-696)【关键词】益心康;柯萨奇B3m病毒;心肌炎;小鼠;实验研究【作者】王鹏;陈苏宁;张玉芳;杨积武【作者单位】辽宁中医学院99级硕士研究生,辽宁,沈阳,110032;辽宁中医学院附属医院,辽宁,沈阳,110032;营口市中医院,辽宁,营口,115000【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R259.【相关文献】1.心肌康注射液对急性柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠免疫功能影响的实验研究 [J], 李永吉;师青春2.心康口服液对实验性小鼠柯萨奇B_3病毒性心肌炎的实验研究 [J], 赵红;万素君;徐新林;楮雁;黄霞珍;阮英茆3.益心饮对柯萨奇B_3病毒性心肌炎小鼠心肌组织病理及超微结构的保护作用 [J], 秦志丰;魏晓;魏品康4.柯萨奇B_(3m)病毒致低硒BALB/C成年鼠心肌损伤特点实验研究 [J], 钟学宽;张邻杰;于新;周令望;迟月明;刘红;万汇涓;刘阳;高彦辉;刘艺;许永莉;曾宪惠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
CKLF-1对小鼠淋巴细胞、骨髓细胞及巨噬细胞趋化作用的研究
CKLF-1对小鼠淋巴细胞、骨髓细胞及巨噬细胞趋化作用的研
究
覃红斌
【期刊名称】《湖北民族学院学报（医学版）》
【年(卷),期】2004(021)003
【摘要】目的研究趋化因子CKLF-1对正常小鼠淋巴细胞、巨噬细胞、骨髓细胞
的趋化活性、生物学效应.方法通过质粒的构建,BALB/C小鼠骨髓细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的分离,将CKLF-1和pcDI转染上清倍比稀释分别作用于小鼠上述细胞,
测出趋化指数并用MTT法观察骨髓细胞增殖情况.结果发现CKLF-1转染上清呈剂量依赖性对小鼠淋巴细胞、巨噬细胞、骨髓细胞有趋化作用,对小鼠骨髓细胞也有
明显的促增殖作用.结论 CKLF-1对正常小鼠淋巴细胞、巨噬细胞、骨髓细胞有明
显的趋化作用,提示了CKLF-1对造血障碍性疾病、免疫功能缺陷的治疗有一定的
应用前景.
【总页数】4页(P4-7)
【作者】覃红斌
【作者单位】湖北民族学院医学院,湖北,恩施,445000
【正文语种】中文
【中图分类】R392.1
【相关文献】
1.黄芪对人淋巴细胞,小鼠巨噬细胞和中性粒细胞直接活化作用的研究 [J], 陈哲生;孙明杰
2.北豆根提取物对小鼠和人淋巴细胞及巨噬细胞作用的体外实验研究 [J], 梁文杰;刘东青;单保恩;张静;李巧霞
3.骨髓细胞动员对巨噬细胞聚集静脉血栓趋化作用的影响 [J], 孙浩;陈以宽
4.小鼠腹腔巨噬细胞趋化和吞噬功能中SRC-3的作用研究 [J], 李军;白树荣;林露;安虹;孙阳阳;易晓波;刘英海;王军平;粟永萍
5.二至丸对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞作用的活性组分构件研究 [J], 姚干;何宗玉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
柯萨奇病毒致病毒性心肌炎分子生物学机理
柯萨奇病毒致病毒性心肌炎分子生物学机理宋晓东;张禅那;李佳;刘玉清【期刊名称】《中国分子心脏病学杂志》【年(卷),期】2002(2)3【摘要】柯萨奇B组病毒是引起病毒性心肌炎的主要病原之一,有25％VMC患者的确切病因是由CVB感染所致。
根据其对新生乳鼠的致病特点,CVB可分为六个血清型,其中CVB3有很强的噬心肌性,在病变心肌组织中发现的CVB3病毒RNA序列已经证实这一点。
通过研究CVB3病毒结构蛋白与疾病发病机理之间的关系,以及重组CVB3嵌合病毒与心血管疾病的相关位点,证实CVB3的5’端非编码区对病毒毒力的重要作用;同时证实除诱导心肌炎的病毒可以直接破坏感染细胞外,宿主的自发性免疫反应则使心肌组织进一步损伤,由于心肌纤维化、心肌细胞肥大以及心肌结构重塑,最终导致约15％的VMC患者可逐渐发展成为扩张型心肌病。
【总页数】7页(P46-52)【关键词】柯萨奇B组病毒;病毒性心肌炎;扩张型心肌病【作者】宋晓东;张禅那;李佳;刘玉清【作者单位】北京,100037,中国医学科学院,中国协和医科大学,心血管病研究所,阜外心血管病医院,中-德分子医学研究室【正文语种】中文【中图分类】R259.422.1【相关文献】1.柯萨奇病毒B3m重复感染致病毒性心肌炎的心脏形态学改变 [J], 郭玲;孙辉;钟翔宇;王莹威;周令望;钟学宽2.柯萨奇病毒B3致病毒性心肌炎动物模型的建立 [J], 李岳春;杨占秋3.丹红注射液对柯萨奇病毒B3所致病毒性心肌炎血清单核细胞趋化蛋白-1及心肌型脂肪酸结合蛋白的影响及临床意义 [J], 张永强;陈志;刘海仁;薛艳4.柯萨奇病毒致病毒性心肌炎的细胞凋亡研究 [J], 宋晓东;王仑;刘玉清;辛颖;惠汝太5.中药黄芪颗粒对儿童急性柯萨奇病毒感染导致病毒性心肌炎免疫调节的研究 [J], 刘迎宣;李子楠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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ｃｉ ｐ １ ｐ Ｔ ｈ一 ＶＰ Ｌ Ｎ）ｗ ｓｐｅ ａｅ ｙｃ ｎｕ ａｉｇｃ ｉ ｓｎｗｉ ｘｕｅｏ ＶＰ ｎ Ｌ Ｎ （０ ｇｅｃ ） （ ａ ｒｐ ｒｄｂ ｏ ｊｇ ｔ ｈｔ ａ ｔ ａｍｉｔｒ ｆ ｎ ｏ ｈ ｐ １ａ ｄｐ Ｔ ５ ａｈ ．
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Ａｂ ｔａ ｔ Ｔｈｅ ｓｒｃ ： ｇｏａ ｏｆ ｈｉ ｓｕｄ ｗ ａ ｔ ｍ ｐｒ ｅ ｈｅ ｌ ｔ ｓ ｔ ｙ ｓ ｏ ｉ ｏｖ ｔ ｍ ｕ ｏ ａ ｉ ｍ ｕｎ ｒ ｓ ｏｎ ｅ ａ ｐｒ ｅ ｔｏｎ ｇ ｎｓ ｃｓｌ ｍ ｅ ｅ ｐ ｓ ｓ ｎｄ ｏｔ ｃ ｉ ａ ａｉ ｔ
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微 生物 与感 染
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｃｏ ｅ ｄＩ ｆ ｔ ｎ ， ｕ ｅ２ ， ０ ０ ５ ２ ： ７８ ｈ ｔ ： ｍｉ ｕ ａ ．ｄ ．ｎ ｏ ｒ ａ ｏ Ｍｉ ｂ ｓ ｎ ｎｅ ｉ ｓ Ｊ ｎ ５ ２ １ ， （ ） ７ —３ ｔ ∥ｉ ． ｄ ｎ ｅ ｕ ｃ ｒ ａ ｃｏ ｐ ｆ
摘
要： 本研 究 在 已建 立 的柯 萨奇 病 毒 粥 型 （ ＶＢ ） 膜 疫 苗 ｃ ｉ ｓｎｐ １ 础 上 ， 入 Ｃ家 族 趋 化 因 子 ， Ｃ ３黏 ｈｔ ａ —ＶＰ 基 ｏ 引
即淋 巴细 胞 趋 化 因 子 （ Ｔ ， 期 诱 导 更 强 的 黏 膜 免 疫 应 答 ， 得 更 有 效 的 免 疫 保 护 作 用 。将 ｐ Ｔ 与 Ｌ Ｎ） 以 获 ＬＮ ｐ １ ５ ｇ 合 后 ， ｃ ｉ ｓｎ形 成 共 聚 复 合 物 ， 周 滴 鼻 免 疫 小 鼠 ， ４次 ； 次 免 疫 后 ２周 ， 测 血 清 ＶＰ 各 ０ 混 与 ｈｔ ａ ｏ 隔 共 末 检
关键词 ： 柯萨奇病毒 Ｂ ３型； 黏膜 疫苗 ； 巴细胞趋化 因子 ； 鼻免疫 ； 淋 滴 病毒性心肌炎
Ｅｎ ｎｃ ｍ ｅ ｏ ｔ ｍ ｕ ｏ ａ ｉ ｍ ｕ ｒ ｓ ｏ ｓ ｓ ｎ ｄ ｐｒ ｐｈｙ ａ ｔｃ ｈａ ｅ ｎｔ ｆ ｈｅ ｃｓｌ ｍ ｎｅ ｅ内 尚有少量 炎症浸润 和坏死 灶。结果提示 ， Ｔ Ｌ Ｎ与 ＶＰ １质粒经 ｃ ｉ ｓｎ共 包装后 ｈｔ ａ ｏ
进 行滴 鼻免 疫 ， 增 强 Ｃ ３ 异 性 黏膜 免 疫 应 答 ， 有 效 地 预 防 病 毒 性 心 肌 炎 的 发 生 。 可 ＶＢ 特 更
ＩＧ、 ｇ 粪便 ＩＡ及肠系膜淋 巴结细胞毒性 Ｔ淋 巴细胞 （ Ｔ 活性 。同时 ， ３Ｌ ／ ． ｇ Ｃ Ｌ） 以 Ｄ 。０ １ ＣＶＢ ｍｌ ３腹腔感染小
鼠 ， 检 测 血 清肌 酸 激 酶 （ ７ｄ后 ＣＫ） 性 及 心 肌 病 理 学 改 变 。结 果 显 示 ， 活 与对 照 组 相 比 ，ｈ一ｐ １ ｐ Ｔ 可 ｃ ｉ ＶＰ Ｌ Ｎ） （ 显 著 提 高 Ｃ ３特异 性 血 清 ＩＧ 水 平 、 便 ＩＡ 水 平 以 及 增 强 肠 系 膜 淋 巴结 特 异 性 Ｃ Ｌ应 答 。 病 毒 攻 击 ＶＢ ｇ 粪 ｇ Ｔ 后 ，ｈ一ｐ １ Ｌ Ｎ） 心 肌 炎 发 病 率 仅 为 １ ． ％ ， 著 低 于 ｃ ｉ ｐ １ ｐＤＮ ． ） 的 ３ ． ％ 。 心 肌 ｃ ｉ ＶＰ ＋ｐ Ｔ 组 （ ６７ 显 ｈ一 ＶＰ ｃ Ａ３ １组 （ ３３ 组 织病 理显 示 ，ｈ一ｐ １ ｐ Ｔ 组 心 外膜 下仅 有轻 微炎 症 ， ｃ ｉ ｐ １ ｐ ＤＮ ． ） 除 心外 膜 下有 较 ｃ ｉ ＶＰ Ｌ Ｎ） （ 而 ｈ一 ＶＰ ｃ Ａ３ １ 组 （
Ｙ ＵＥ Ｙａｎ，Ｈ Ｕ ｎ— Ｌｉ Ｋｕｎ，Ｘ Ｕ ｅ ，ＸＩ Ｗ ｉ ＯＮＧ － ＳｉＤｏｎｇ
Ｉｓｉ ｔｆ ｒ ｍｍｕ ｏ ｉｌｇ ， ｈ ｎ ｈ ｉ ｄｃｌ ｏｌ ｅ ｕ ａ ｎｖｒ ｔ Ｓ ｎｈ ｉ ０ ０ ２，Ｃ ｉａ ｎｔｕｅ ｏ ｔ Ｉ ｎ ｂｏｏ ｙ Ｓ ａ ｇ ａ ｉ ｌｇ ，Ｆ ｄ ｎＵ ｉｅｓｙ， ｈ ｇ ０ ， Ｍｅ ａ Ｃ ｅ ｉ ａ ａ ２ ３ ｈｎ
ｐ ａ ｍｉ ｎ ｏ ｉ ｇ ｌ ｍｐ ｏ ａ ｔｎ （ ＬＴＮ ） ｌｓ ｄ ｅ ｃ ｄ ｎ ｙ ｈ ｔ ｃ ｉ ｐ ，ｗｈ ｃ Ｓ ａ Ｃ ａ ｌ ｈ ｍｏ ｉ ｅ Ｔｈ ｉ ａ ａ ｃｎ ｏ ｍｕ ａ ｉ ｎ ｉｈ ｉ ｆ ｍｉ ｃ ｅ ｋ ｎ ． ｙ ｅ ｆｎ ｌ ｖ ｃ ｉ ｅ ｆ ｒ ｌ ｔ ｏ
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７ ・ ７
论 著
淋 巴细 胞 趋 化 因 子 增 强 柯 萨 奇 病 毒 ＤＮ 疫 苗 黏 膜 Ａ 免 疫 及 预 防 小 鼠 心 肌 炎 的 作 用
岳艳 ， 林 昆， 薇 ， 思 东 胡 徐 熊
复旦 大 学 上 海 医学 院 免 疫 生 物 学 研 究 所 ， 海 ２ ０ ３ 上 ００２