中药第二章鉴别

甘草
牛黄清心丸
显微鉴别的目的
检查制剂中 是否有缺少或代用的药材
对药品的真实性进行鉴别。
二、程序
处方分析 供试品预处理
显微制片
显微观察 显微测量
显微化学反应
结果判断
（一）处方分析
1. 选择鉴别药味
组成较少：全检---如左金丸（黄连、吴茱萸） 组成较多：主药、贵重药、毒性药、混乱品种 ---如人参健脾丸：由11味药材组成
测量方法

需测量的目的物显微制片置显微镜载物 台上，用目镜测微尺侧量目的物的小格 数，乘以上述每一小格的微米数。
（六）显微化学鉴别
（七）结果判断
填写： 原始记录 抽验检品卡 药品检验报告书
药 品 检 验 报 告 书
结论：本品按……检验上述 项目，结果符合规定。
三、实例---牛黄解毒片的显微鉴别
一、化学反应鉴别法
（一）原理 （二）特点
1.操作简便，适用性较强。 2.其否定功能往往强于肯定功能 ,专属性较差。 3.易发生假阳性或假阴性反应
应用注意
①处方分析，首选主药、辅药、贵重药和毒性药作 为鉴别重点。 ②对样品进行预处理，除去干扰性成分，富集被检
成分。选用专属性较强的检测试剂。
分析：本法中， 盐酸的作用是将谷氨酸钾 转变为谷氨酸。 两份样品的旋光度值级差 0.02°，测定 前后空白读数均为0.00°，故测定结果有 效。 设供试品中谷氨酸钾的浓度c（g/100ml）

测定某药物的比旋度，配制的供试品溶液 浓度为50.0mg/ml，样品溶液宽2dm， 测得旋光度为+3.25°，则比旋度为 A. +6.50° B. +32.5° C. +60.0° D. +16.25° E. +325°
药典规定需检出：人参—主药 砂仁—贵重药 山药—混乱品种
（一）处方分析
2. 选择专属性鉴别特征
选取该药材在本制剂中易察见、专 属性强的显微特征1～2个 排除类似的或因加工而消失的特征
人 参 粉 末 图
导管
树脂道
淀粉粒
木栓细胞
簇晶

戊己丸：3 ------白芍—草酸钙簇晶
芍白

六味地黄丸：6 ------牡丹皮—草酸钙簇晶
二、物理常数测定
相对密度：八角茴香油相对密度在25℃时0.975~0.988。 折光率：丁香罗勒油折光率为1.530~1.540。 旋光度：八角茴香油旋光度为-2° ~ +1°。 凝点：八角茴香油凝点不低于15℃。 熔点：薄荷脑熔点为42~44℃。 馏程：松节油 在154~165℃馏出的数量不得少于90.0%
（四）显微观察
2-5个标本 对照观察
“之”字移
（五）显微测量
用目微尺，
目镜测微尺
在显微镜下 测量细胞及 细胞内含物 等的大小。
直径18～20mm的圆形玻璃片（ 50格或100格）
台微尺（标定目微尺）

通常将长1mm（或2mm）精确等分成100（或 200）小格，每1小格长为10μm
标定目微尺
第二节
一、含 义
显微鉴别法
利用显微镜对含药材粉末ห้องสมุดไป่ตู้中药
制剂中特有的组织、细胞及细胞内含
物等特征进行鉴别的方法。
板蓝根颗粒制法

取板蓝根，加水煎煮， 煎液滤过，滤液浓缩， 加乙醇静置使沉淀， 取上清液，回收乙醇 并浓缩至适量。加入 适量的蔗糖和糊精， 制成颗粒，干燥即得。
牛黄 羚 羊 角 朱砂 ……… 29味中药材
D. 水合氯醛作基准物 E. 标准石英旋光管
仪器预热
空白校正 调零
供试品 测试
（四）
应用
1. 鉴别
2. 在杂质检查中的应用
H C O H C OH OH C H H C OH H C OH CH 2 OH
如硫酸阿托品中莨菪碱的检查
3. 在含量测定中的应用 如葡萄糖注射液的含量测定
【实例分析】谷氨酸钾注射液（规格： 20ml∶6.3g）的含量测定
制片：按粉末制片法装片
观察：置显微镜下观察，应有以下特征
---草酸钙簇晶大，直径60～140µm（检大黄）
---不规则碎块金黄色或橙黄色，有光泽（检雄黄）
---牛黄解毒片的显微鉴别
大黄
雄黄
结论：本品按《中国药典》 2005版一部检验上述项目， 结果符合规定。
四、注意事项
为提高准确性，可与对照药材或已经鉴
特点
以制剂药味中的指标性成分（主要 为有效成分或特征性成分）为检测对象， 故可以更加客观深刻地评价药品的真实 性。对于液体制剂或其它不含原料药粉
的制剂，理化鉴别则显得为重要。
方法

化学反应法


微量升华法
荧光鉴别法 薄层色谱法(今后中药制剂鉴别的发展方向)
分光光度法
气相色谱法和高效液相色谱法
配制一系列的标准溶液，浓度 在供试品近似浓度附近，测定一系 列n， 做出标准曲线（n-C曲线）
物质的折光率与下列因素有关
A、光线的波长 B、被测物质的温度
C、光路的长短
D、被测物质浓度 E、杂质含量
20℃时水的折光率为
A、1.3305 B、1.3325
C、1.3330
D、1.517 E、1.7左右
通过旋光仪测定，不是物理常数
K C L
旋光度 旋光系数 溶液浓度
液层厚度
4、比旋度


20 D

cl
当旋光性物质的浓度为1g／ml，液层厚度为 ldm时所测得的旋光度。
t D
l－液层厚度或旋光管长度，dm 钠光谱D线 （589.3nm） c－溶液浓度，g／ml
固体供试品
测定盐酸土霉素的比旋度时，若称取供试品 0.5050g ， 置 50ml 量 瓶 中 ， 加 盐 酸 液
（9→1000）稀释至刻度，用2dm长的样品管
测定，要求比旋度为–188 ～ –200。则测得
的旋光度的范围应为
A、–3.80～–4.04 C、–1.90～–2.02 E、–1.88～–2.00 B、–380～–404 D、–190～–202
c l
t D
折光率
（一）
（二） （三） （四）
基本原理
影响因素 阿贝折光计使用 应用
（一）
基本原理
折射现象：光线 通过两种密度 不同的透明介质 时，其速度和方向 发生改变的现象。
i
r
空气、供试液
折光率是入射角的正弦与折射角的正弦的比值
入射角 20℃
sin i t nD
（四）
应用
1、鉴别和纯度检查 2、含量测定
（1）折光率因素(F)法
方法：a.配制浓度已知标准溶液， b.求F(斜率)
n n0 F C
标准溶液 折光率
同温度时水 的折光率
样品%
样品溶液每间隔1%浓度时折光率增加值
c.求C测
未知溶液 折光率
同温度时水 的折光率
（n n） c F
（2）标准曲线法
第二章 中药制剂的鉴别
中药制剂的鉴别
利用制剂的处方组成、性状特征、显微
特征、所含成分的理化性质、色谱和光谱特
性以及相应的物理常数，确定制剂真实性的
方法， 包括性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别三大类。
特点
1、药物鉴别是药物分析的首项任务
2、药物鉴别为已知药物的确证试验
3、鉴别试验是个别分析
4、化学鉴别试验要有明显的现象
定的药材对照观察。
药渣投料或投料量不足等，需配合理化 鉴别、含量测定等方法进行检验。
思考
某企业生产左金丸（黄连、吴茱萸） 时，黄连用盐酸小檗碱或用提取过盐 酸小檗碱的药渣投料，请设计检验方 案，揭露这两种违规行为。
第三节
理化鉴别
利用制剂所含化学成分的理化性质， 通过化学反应法、光谱法和色谱法等分 析方法和技术检测有关成分是否存在， 从而判断制剂的真伪。
精密量取本品15ml 2份，分别置50ml量瓶 中，各加盐酸10ml，用水稀释到刻度，摇匀， 依法测定旋光度，旋光管的长度为2dm，测得 第一份样品的3次旋光度平均值为＋4.84°、 第二份样品的3次旋光度平均值为＋4.85°， 两份样品各次的旋光度的级差为0.02°。测定 前，以溶剂为空白，校正读数为0.00°；测定 后，再次测定溶剂的旋光度， 仍为0.00°。 求出谷氨酸钾注射液标示量的百分含量。已知 谷氨酸的比旋度为＋31.5°～＋32.5°。

归芍地黄丸：8
------白芍—糊化淀粉粒团块
牡 丹 皮 ------牡丹皮—木栓细胞
（一）处方分析
若制剂的显微鉴别特征在国家药品标准
中有记载，则可省去该分析过程，直接依
法鉴别。
《中国药典》2005年版：290/564
（二）供试品预处理
散剂、胶囊剂：直接取粉末制片。 片剂：取2～3片研细，混匀，粉末制片。 水丸、糊丸、水蜜丸： 取数丸，置乳钵中 研细，混匀，再取适量 粉末装片。
sin r
折射角
钠光谱D线 （589.3nm）
（二）
影响n因素
物质性质
溶液浓度
温度
光的波长
压力
（三）
阿贝折光计使用
观测系统和读数系统 入射角i为90º 时，sin i=1, 这时折射角达到最大值， 称为临界角β0（一定条件 下为常数）， n=1/sinβ0
目镜中颜色的调节
表示光线从棱镜入射角达到了临界角
解离组织制片法



纤维素细胞壁的细胞间质主要有果胶纤 维构成，可因与氢氧化钾或氢氧化钠等 碱液共热而分解破坏；木化细胞的细胞 间质常因含有木质素而不被碱液破坏， 可用氧化剂破坏木质素，是细胞分离。 氢氧化钾法-薄壁组织发达，木化组织 较少或分散存在的供试品。 硝铬酸法，氯酸钾法-木化组织较多或 集成较大群束的供试品。

t D

cl
c g / ml


t D l
c%
100

t l D
（二）
影响α因素
结构
溶液浓度
液层厚度
溶剂
光的波长
温度
旋光管
（三）
标准石英旋光管
旋光仪使用
旋光计的检定，中国药典（2010年版） 规定用
A. 葡萄糖作基准物
B. 水杨醛作基准物 C. 半乳糖作基准物
（ml/ml）。
旋光度
（一）
（二） （三） （四）
几个概念
影响因素 旋光仪使用 应用
（一）
几个概念
1、偏振光：仅在一个平面上振动的光。
2、旋光性：光学活性物质使偏振光偏振面 发生旋转的性质。 右旋体：偏振面右旋(+) 左旋体：偏振面左旋(-)
3、旋光度(α) ：偏振光振动平面旋转的角度
旋光性 物质 α


注意事项： 制剂的性状指成品的颜色、形态、气味等； 有包衣的丸剂、片剂应描述除去包衣后的片 心、丸心的颜色及气味； 硬胶囊应写明除去胶囊后内容物的性状； 制剂色泽有两种色调组合，描写时以后者为 主，如棕红色。
对不同剂型的中药制剂常采用不同的性状 描述方法

附子理中丸（蜜丸）：本品为棕褐色 至棕黑色的水蜜丸，或为棕褐色至棕 黑色的大蜜丸；除去包衣后显棕褐色； 气微，味微甜而辛辣
（三）显微制片
粉末制片法：
--- 冷装片
---水合氯醛加热
透化装片 解离组织制片法：
观察单个细胞


粉末冷装片：解剖针挑取粉末少许，置载 玻片中央偏右处，滴加适量透明剂1-2滴， 搅匀，放置盖玻片 水合氯醛试液透化装片：挑取粉末少许， 置载玻片中央偏右处，滴加水合氯醛1-2滴， 搅匀，用试管夹夹持载玻片一端，保持水 平置酒精灯火焰上方约1-2cm加热，微沸后， 离开火焰，再滴加水合氯醛试液，小火继 续加热，如此反复操作至透化清晰。避免 水合氯醛结晶析出，放冷后滴加稀甘油1-2 滴，封片镜检。
③必要时做阳性或阴性对照试验加以验证，保证其
专属性和灵敏度。
大山楂丸 P67
【 成 份 】 山楂、六神曲(麸炒)、麦芽(炒)。 【 制 法 】以上三味，粉碎成细粉，过筛，混匀； 另取蔗糖600g，加水270ml与炼蜜600g，混合， 炼至相对密度约为1.38（70°C）时，滤过，与 上述粉末混匀，制成大蜜丸，记得 。
5、药物鉴别的方法要求专属性强、灵敏度高、 再现性好、以及操作简便、快速等特点。
6、制剂鉴别要考虑干扰成分的影响
第一节 性状鉴别
性状：通常是药品的形状、状态、 剂型、外观色泽、气味、口味、溶解性、 熔点等的总称。
制备工艺

1．形状或形态 当制剂的形状或形态发生改 变时，可能与变质、掺杂等有关。 2．色 泽 系指制剂在日光下呈现的颜色及 光泽度。常与制剂的品种、原料、所含成分、 生产工艺、贮藏时间等有关，一般较为固定， 为中药制剂质量的重要标志。 3．气、味 口尝制剂时，要取少量有代表性 的样品，咀嚼至少1分钟，使舌的各部位都充分 与药液接触，以便能准确地尝到药味。
---牛黄解毒片的显微鉴别

处方：
雄黄 大黄 牛黄 冰片; 黄芩 石膏 桔梗 甘草

制法： ---雄黄、大黄、牛黄、冰片成粉； ---黄芩等四味加水煎煮，滤液浓缩成膏； ---混匀，压制成片或包衣，即得。 分析结果：检--大黄 雄黄（中国药典）
---牛黄解毒片的显微鉴别 取样：取2～3片，去包衣，乳钵中研细， 或用刀片从药片断面刮取少量粉末。