果蝇培养基配制
遗传学 实验材料 果蝇
实验一:果蝇唾液腺染色体制片与观察
试剂:乙醚、生理盐水、蒸馏水、1mol盐酸、石炭酸品红
器材:恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针
实验二:果蝇饲养
试剂:乙醚、培养基
器材:放大镜、麻醉瓶、玻璃片、毛笔、石棉网、恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、牛皮纸
实验三:果蝇杂交实验
试剂:同上
器材:恒温培养箱、高压灭菌锅、显微镜、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、载片、盖片、镊子、解剖针、烧杯、量筒、牛皮纸
果蝇培养基
水1000ml
玉米粉105g
红糖75g
琼脂7.5-10g
苯甲酸0.75g
酵母粉5-10g
配制方法:配制时先将水分成两份:一份用于加热溶解琼脂和糖,另一份煮玉米粉,玉米粉要先用冷水搅拌,再加到煮沸琼脂红糖溶液中,边倒边搅拌。
继续煮15-20分钟,关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶) ,要充分搅拌后再分装培养瓶。
每瓶培养基厚度在2-3cm,置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。
待培养基冷却后,在培养基的表面滴加新鲜酵母液,插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。
果蝇饲养方案
果蝇饲养方案果蝇(Drosophila melanogaster)是一种常见的实验室模式生物,被广泛用于生命科学领域的研究。
果蝇繁殖迅速且易于饲养,是理想的实验材料之一。
下面将介绍一种简单易行的果蝇饲养方案。
材料准备:1. 玻璃培养皿/果蝇培养皿2. 石蜡纸3. 酵母粉4. 糖粉5. 酒精6. 黄油7. 成熟的果蝇(交叉一型)饲养步骤:1. 准备果蝇培养皿。
将培养皿内壁用酒精擦拭,然后贴上一层石蜡纸,这样可以防止果蝇沿着容器壁面爬行。
2. 第一层培养基的制备。
将约1克酵母粉和2克糖粉混合均匀,并撒在培养皿底部。
3. 取一只成熟的果蝇,用显微镊子将其转移到培养皿中。
注意,果蝇的数量控制在10-20只,过多会导致竞争加剧,而过少则会减缓繁殖速度。
4. 喂养果蝇。
将一小块黄油放在培养皿的边缘,为果蝇提供额外的营养。
5. 培养基的更换。
每2-3天更换一次培养基,避免过度污染。
6. 温度和湿度控制。
果蝇的适宜温度为22-25摄氏度,湿度可以通过添加少量的水分维持在50-70%之间。
定期检查保持适宜的环境条件。
观察果蝇:1. 繁殖观察。
果蝇的生命周期大约为10-14天,从卵到成虫分为卵期、幼虫期、蛹期和成虫期。
注意观察果蝇的繁殖情况、数量、发育和行为等。
2. 实验使用。
果蝇可以用于各种实验,如突变体筛选、发育研究和行为学实验等。
根据不同实验目的,可以进行交配、分离、标记和观察等操作。
饲养注意事项:1. 卫生与消毒。
饲养过程中要保持清洁,及时清理培养皿和更换培养基,避免细菌和霉菌的污染。
2. 食物比例。
酵母粉和糖粉的比例可以根据需要进行微调。
不同目的的实验可能需要不同比例的食物来控制果蝇的发育和繁殖。
3. 温湿度控制。
确保饲养环境的温湿度适宜,以保证果蝇的生长和繁殖。
4. 剔除死亡果蝇。
果蝇死亡后容易滋生细菌,应及时剔除,以免影响到整个培养群体。
总结:通过以上的果蝇饲养方案,我们可以方便地获取到大量的果蝇个体,并利用其进行各种科学研究和实验。
果蝇的培养
1.把50或100ml的三角瓶(数目根据自己试验确定)洗干净,干燥。
(能够高温灭菌也好,似乎没那必要)2.配培养基。
培养基比例:蔗糖13g,琼脂1.5g,玉米粉17g,水(单蒸水就可以)180 ml。
乙酸2 ml(可少一点),酵母粉至少1.4g培养基配制步骤:(1)称取玉米粉17g装入烧杯1(要大一些的烧杯,如500 ml),量取水90 ml。
先加少量水于烧杯中,搅拌成均匀的糊状,再加入其余的水,搅拌均匀。
然后一边在电炉上加热,一边搅拌。
直到完全煮熟。
冒泡泡以后,火小点,免得溢出来。
冒泡泡以后还是要再煮好一会。
要充分煮熟,要不培养基在培养过程中,果蝇没有吃完就发酵了,果蝇会死的。
煮好了放在一边。
(2)称取蔗糖13g,琼脂1.5g装入烧杯2,量取水90 ml。
加入大半水于烧杯中,一边加热一边搅拌。
完全煮溶。
(3)把烧杯2中煮溶的蔗糖和琼脂倒入烧杯1中,用步骤2剩余的水冲一冲烧杯,也倒入烧杯1中。
(如果烧杯1小,就装不到了。
)然后搅匀,继续搅拌加热,直到沸腾,充分混匀。
(4) 待烧杯1稍凉。
这个时候把干燥好的三角瓶摆放旁边。
将至少1.4g酵母粉加入烧杯1搅匀,将培养基倒入三角瓶中(要用卖油翁的技术,这个你没问题,就是不要把培养基沾到瓶壁或周围,浪费也不好看)。
(按照敬老师的说法要待烧杯1凉到80度左右,我觉得稍凉就好了。
因为加入酵母粉后还搅拌,就更凉了。
倒入三角瓶时,到后边就太凉了有点凝固,不好倒,还会沾到瓶壁上。
)(5)把倒好的培养基放到超净工作台上,放2天,等待瓶壁和培养基上的水分挥发。
有水残留的话,果蝇放进去翅膀打湿,飞不起来,就翘翘了。
(我自己的做法是配培养基的时候少加10ml的水,等待一天,没有完全干,但也可以用)由于果蝇是吃里面生长的酵母,所以培养基放上三天,有酵母生长了就可以接种果蝇了。
(6)我自己收集果蝇的方法:放一点水果在矿泉水瓶子中,至少要四五天才会有很多果蝇。
这几天的时间就赶快去准备其他的东西。
《果蝇培养基配制》课件
本课程将详细介绍如何制备优质的果蝇培养基。掌握这一关键技能是进行果 蝇研究的基础。
概述
果蝇培养基的制备是进行果蝇实验研究的关键步骤。本节将介绍培养基的组 成及其重要性。
材料准备
果蝇卵
从可靠的供应商处获得新鲜 的果蝇卵。
瓶子和盖子
使用干净无菌的玻璃瓶和盖 子作为培养基的容器。
麦芽粉、酵母、玉米粉 和糖
这些材料是构成果蝇培养基 的关键成分。
制备步骤
1
准备容器
使用洗净的玻璃瓶和盖
按照一定比例混合麦芽粉、酵母、玉米
粉和糖,并称量后加入容器中。
3
加入水和搅拌
加入适量的水,并搅拌均匀,确保混合
蒸煮培养基
4
物充分溶解。
使用自制的压力锅对培养基进行蒸煮,
时间约为30分钟,以确保杀灭细菌。
5
灭菌
采取适当的方法对培养基进行灭菌处理,
冷却和倒入培养皿
6
保证其无菌性。
待培养基冷却后,将其倒入准备好的培 养皿中,以准备加入果蝇卵。
结束语
基础步骤
制备果蝇培养基是进行果蝇研究的重要基础步骤。
后续实验
有了无菌的培养基,我们才能进行后续的果蝇实验和研究。
果蝇培养基制备与保存注意事项
果蝇培养基制备与保存注意事项沈妍(果蝇资源与技术平台)果蝇是经典的模式生物,具有生长迅速、繁殖力强、遗传物质简单、突变体多等优点,广泛应用于遗传,发育,生理和行为学等研究领域。
果蝇培养基是一切以果蝇为模式动物开展试验的基础,在果蝇品系保存以及各项果蝇相关试验中,适宜的培养基能达到事半功倍的效果。
本文总结果蝇培养基配制与保存的注意事项。
一培养基制备前注意事项1 原料果蝇培养基的配方主要包含水、玉米粉、大豆粉、蔗糖、麦芽糖、酵母、琼脂、丙酸和苯甲酸钠等。
玉米粉是培养基制备的主要原料。
目前,市场上玉米粉种类繁多,我们需选择糯性玉米粉。
糯性玉米粉制成的培养基蓬松粘稠,更适合幼虫生长。
而非糯性(粳性)玉米粉颗粒粗,制成的培养基较为稀薄,冷却凝结后会出现分层现象。
琼脂粉影响培养基硬度。
每一批次效价不同。
每次新订购的琼脂粉应先做预试验,根据食物硬度确定琼脂粉的用量。
2 培养基制备容器的选择根据培养基制备体积的不同,我们需选择不同的加热工具。
配制少量培养基,1L以下,选用微波炉。
配制1L到5L培养基,选用电饭锅。
配制10L以上的培养基,选用专业的带有搅拌功能的加热容器。
二培养基配制过程中的注意事项1 加热前的准备在加热前,应先将玉米粉、大豆粉、蔗糖、麦芽糖等原材料用冷水搅拌均匀,勿用热水搅拌,热水会使玉米粉、大豆粉结块,溶解不充分。
2 酵母粉发酵温度的控制干酵母粉需要和温水混匀后发酵。
在发酵过程中应注意水温的控制,水温以25℃到30℃为宜,高温会使酵母失活。
发酵时间以十五分钟左右为佳。
3 水位的控制在配制过程中,培养基的体积最多只能加到容器体积的三分之二,必须留出三分之一沸腾的空间。
在培养基接近沸腾时要时刻关注其状态,以免培养基因沸腾过度而漫出容器外,而沸腾不充分会导致培养基分层。
一般100L的锅,我们最多只能配制60L培养基。
4 搅拌培养基不管使用哪种加热工具,在加热过程中,都需要不停搅拌培养基,防止粘锅和结块。
果蝇实验常用培养基配制
果蝇实验常用培养基配制
1、香蕉培养基将熟透的香蕉捣碎,制成香蕉浆(约50g),把1.6g琼脂加到48ml的水中煮沸,溶解后拌入香蕉浆,继续煮沸3—5分钟。
待稍降温后加入1ml丙酸以防止发霉,充分调匀后分装于培养瓶中。
使用前在培养瓶中加入适量干酵母粉或1—2滴酵母菌液。
若作为临时培养果蝇的培养基,可以直接剥去已熟透且已腐烂的橡胶的皮或苹果的皮,把剥去皮的香蕉或苹果放入培养瓶中即可。
2、玉米粉培养基将1.5g琼脂捣碎放入38ml的水中煮溶后,加入10g白糖,制成琼脂糖混合物,再将9g玉米粉和37ml的水加热搅拌成糊状倾入正在煮沸的琼脂糖混合物中,煮沸3—5分钟。
待稍降温后加入1ml丙酸,或加入溶于95%乙醇的苯甲酸少许以防腐,搅拌调匀后,将配好的培养基倒入经灭菌的培养瓶中(1—1.5cm厚),倾倒时应注意勿将培养基粘到瓶口或瓶壁上。
用灭菌的纱布棉塞塞好瓶口,冷却待用。
暂时不用的培养基应放入4℃冰箱中或清洁阴凉处保存。
使用前在培养瓶中加入适量干酵母粉或1—2滴酵母菌液。
3、米粉培养基将琼脂2g加入到75ml水中,加热煮沸溶解后再加入白糖10g,米粉7g(或麸皮),不断搅拌煮沸数分钟。
稍降温后加入丙酸1ml,调匀后分装到培养瓶中。
使用前加少许酵母液或适量干酵母粉。
以上三种果蝇培养基的配方(100ml)见下表:。
新型果蝇培养基
新型果蝇培养基①①:新型体现在红糖代替了蔗糖、全麦粉(麦麸)代替了玉米粉、鲜酵母代替了酵母粉;其优于常用的玉米粉果蝇培养基在于饲养中能充分发挥果蝇的遗传潜力,从而提高应用其进行遗传学研究和实验的准确性。
②:通过实验对比了四种胶(海藻酸钠、明胶、卡拉胶、琼脂)的凝固效果、及对果蝇培养的影响,总结出琼脂的效果最好。
③:实验表明红糖和蔗糖在培养基的效应中不存在质差,完全可用红糖代替蔗糖以降低成本。
同时看出配方中的酵母粉/红糖的配比范围也较宽,在 1/9 一l/7间均有好的效果;而适当提高此比值。
即增加鲜酵母(或在培养基中定期追加酵母液)有增效趋势,这与太多数学者提供的资料分析结果相符。
④:实验证明小麦加工料培养基饲喂果蝇的效果要极显著的优于玉米粉培养基,使用后不但可使果蝇的发育期缩短,繁殖力提高,体重增加,而且麦麸的松软度适宜果蝇幼虫钻洞取食,保湿效果较好;这是由于用前者配制的培养基比较琉松,透气性好,因而能提供充足的氧气使更有利于酵母菌的生长繁殖,从而为果蝇生长繁殖提供较丰富的食源,特别为幼虫发育提供了鞍理想的场所。
⑤:丙酸的作用是防腐、杀菌。
⑥:以往观察发现:配制的干酵母培养基(水溶解煮沸后的)也能满足果蝇的生长需要,但是特别容易发霉。
因此活酵母的培养效果较好。
参考文献:[1]陈宗礼, 延志莲. 果蝇培养基的选择研究[ J] . 生物学杂志, 1994( 3) : 31- 33.[2]LIU Min;GE Kang;WANG Liu.Investigation of new type of melanogasterculture medium[J].China agricultural University ,2011( 3) : 1-6. * :配制过程实验书上有。
果蝇培养基的制作
102.2
128.1
100.5
129.7
详细配制培养基视频地址:/v_show/id_XOTQ1Njg5Mzg0.html
配制培养基前,需要准备精确刻度量杯一个,倒入18-20毫升培养基干粉。随后倒入2.6倍开水(请注意,一定要是开水),搅拌均匀。搅拌均匀后,请将配好培养基表面弄平。晾至室温后,倒入成体果蝇50只左右。小果蝇等待15天,大果蝇等待25天做左右即可!!
2、加入白糖;
3、取另一半水将玉米粉调成糊状,加入到琼脂水中搅拌煮成糊状;
4、加入0.5ml丙酸搅拌;
5、分装入培养瓶,大约2cm高,塞上棉塞;
6、高压灭菌,15磅/cm2,20分种,冷却后加入酵母及灭菌的栖息纸。
㈡米粉饲料
配制同玉米饲料。
㈢香蕉饲料
1、将熟透的香蕉去皮捣碎,制成香蕉浆:
2、将琼脂加到水中煮化;
3、将琼脂溶液拌入香蕉浆,煮沸;
4、加入丙酸;
5、分装;
6、加入酵母、栖息纸。
玉米饲料
百分比
米粉饲料
百分比
香蕉饲料
百分比
水
76g
74.36%
100g
78.06%
77.10%
47.8g
47.56%
琼脂
1.5g
13.21%
0.9-2.5g
0.70%
1.93%
1.5g
1.49%
糖
13.5g
13.21%
10g
7.81%
7.71%
-
/
香蕉浆
-
/
-
/
/
50g
49.75%
玉米粉
10g
9.78%
-
如何饲养果蝇
如何饲养果蝇正果蝇属昆虫纲,双翅目,果蝇科,是遗传实验的好材料。
下面是店铺精心为你整理的饲养果蝇的方法,一起来看看。
饲养果蝇的方法一、饲养容器制作材料:一个塑料罐子(高的斗鱼杯亦可。
必须有盖,盖子不能太硬。
),一块纱布,一个离心管(直径1cm)。
二、培养基制作果蝇培养基有很多种做法,最简单就是直接用香蕉,香蕉用两天就很容器出水,容器粘住成虫,倾倒果蝇时还相对不方便。
如果是能够附着于容器上且不易出水的培养基那就要方便很多。
以下是个人使用的一个配方,仅作参考当然你觉得有自己喜欢用的方法也可以。
玉米粉20g糖25g麦麸10g酵母粉3g琼脂3g水250ml这个培养基里有琼脂,琼脂是需要加热的,凝固后就是果冻状物体。
保水性能很好,价格也不高。
可以较长时间饲养。
等待培养基冷却凝固后,就可以使用了。
根据自己的需要来定做培养基的量,按照比例来确定5L里培养基中各成分的量。
果蝇的外观特征体型较小,身长3~4mm。
近似种鉴定困难,主要特征是具有硕大的雄性腹部有黑斑前肢有性梳,雌性没有雄性腹部有黑斑前肢有性梳,雌性没有红色复眼。
雌性体长2.5毫米,雄性较之还要小。
雄性有深色后肢,可以此来与雌性作区别。
雌雄鉴别方法:雌果蝇体型大,末端尖。
背面:环纹5节,无黑斑。
腹面:腹片7节。
第一对足跗节基部无性梳。
雄果蝇体型小,末端钝。
背面:环纹7节,延续到末端呈黑斑。
腹面:腹片5节。
第一对足跗节基部有黑色鬃毛状性梳。
果蝇的优点与用途作为实验动物,果蝇有很多优点。
首先是饲养容易,用一只牛奶瓶,放一些捣烂的柿子,就可以饲养数百甚至上千只果蝇。
第二是繁殖快,在25℃左右温度下十天左右就繁殖一代,一只雌果蝇一代能繁殖数百只。
孟德尔以豌豆为实验材料,一年才种植一代。
摩尔根最初以小鼠和鸽子为实验动物研究遗传学,效果也不理想。
后来经人介绍,摩尔根于1908年开始饲养果蝇。
果蝇只有四对染色体,数量少而且形状有明显差别;果蝇性状变异很多,比如眼睛的颜色、翅膀的形状等性状都有多种变异,这些特点对遗传学研究也有很大好处。
果蝇培养基配制方法 遗传学
果蝇培养基配制方法及果蝇的转接饲养一、果蝇培养基配制方法配方:760ml水+6.2g琼脂+82.5g玉米粉+62g白糖+7g克酵母+5g丙酸(一)、准备工作:1、清洗试管:规格20*30。
2、烘干试管:电热鼓风干燥箱烘干(60-70度)或自然风干。
塞上棉塞。
另外做一试管滤纸。
3、包扎试管:2层报纸包扎。
包扎镊子;包扎一块大小适中的4层纱布4、高压灭菌:将上述包扎好的试管、镊子、纱布高压灭菌(高压锅切勿忘记加水,121度0.1Mpa,维持20-30分钟)5、高压后取出烘干(60-70度)。
(二)、准备工作1、用酒精棉球将操净工作台台面、侧壁消毒。
2、将上述灭菌好的试管、纱布,一个250或300毫升的三角烧瓶,酒精灯、火柴,小红桶放入操净工作台内,紫外灭菌20分钟,同时开启风机。
(注意;紫外灭菌后,要风机开启10分钟后方可用)也可在超净工作台外倒培养基(三)、培养基配制步骤:1、量筒量取760毫升自来水(或者蒸馏水),置入搪瓷缸内,电炉加热(注意:电炉下垫电板,以免烧坏新实验台面)2、称取琼脂条6.2克,剪成小段,放入上述水中加热溶解。
3、材料:玉米粉82.5克、白糖62克、酵母粉7克、5毫升丙酸。
4、加入顺序:等琼脂完全溶解后,将玉米粉少量慢慢加入,一边搅拌一边加入,待完全成糊状,煮出香味、煮熟为止。
再加入白糖,搅拌均匀溶解。
离开电炉,放凉至60度左右,加入酵母粉搅匀,最后再放入丙酸搅匀。
5、倒培养基:酒精棉球消毒手,点燃酒精灯,将试管插入三角瓶,将培养基直接倒入试管内,作成斜面6、培养基倒好后,直接用灭菌纱布封住试管口。
拉下操净工作台的门,风机开着(目的是让试管内的水蒸气蒸发得更快)。
7、 3-4天后,水汽蒸发完全后,即可塞上棉塞,拿出操净工作台。
二、果蝇的转接饲养1、在果蝇培养基试管内加入一片灭菌滤纸(助于吸收水分和果蝇产卵),2、转接果蝇:新管在上,果蝇管在下,试管口对口,这样果蝇就会自动向上爬行,待有5对左右时即可。
果蝇培养基配制
4. 培养基的分装
将熬制好的培养基分装到广口瓶中。
• 5. 培养基的灭菌
• (1)灭菌前的准备:将高压蒸汽锅的内桶取出,向外锅内加入适量 的水,将内桶放入。
• (2)装放待灭菌物品:将已包扎好的培养基放入内桶。盖上锅盖。 • (3)加热排气:接通电源,同时打开排气阀,待见有大量水汽排除
时,维持3~5min,锅内空气排尽,关上排气阀。 • (4)升温保压:压力为1.05kg/cm2,121.3℃,20~30min • (5)出锅,隔断热源,自然降温,待压力表指针回到零,打开排气
3. 配制好的培养基立即分装灭菌,每瓶培养基厚2~3cm, 灭菌前在每一瓶内加入一牛角勺酵母粉,改善瓶塞,报 纸封口,进行灭菌。
培养果蝇的饲养瓶,常用的有牛奶瓶,大中型试管, 并用纱布包裹的棉花球作瓶塞。
试管棉塞不但能保护试管内物质不受外界微生物污 染,并且能保证管内有供果蝇呼吸的气体。
3. 棉塞的制作
一、实验目的
1. 了解果蝇实验几种常用培养基配制方法; 2. 掌握玉米粉培养基配制方法。
二、实验原理
• 果蝇在水果摊或果园里常见,它不以水果 为生,而是食生长在水果上的酵母菌,因 此实验室内凡能发酵的基质,均可作为果 蝇饲料。
三种常见的果蝇培养基
成分 水/ml 琼脂/g 白糖/g 香蕉浆/g 玉米粉/g 米粉/g 麸皮/g 酵母粉/g 苯甲酸/ml
玉米培养基 米粉培养基 香蕉培养基
500
75
48
7.5
2.0
1.6
50
10
—
—
—
50
57.5
—
—
—
7
—
—
7
培养基的配制灭菌
4. 灭菌:置121℃高压蒸汽灭菌15分钟。 5. 培养酵母菌:待培养基冷却后,在培养基的 表面滴加1-2滴新鲜酵母液,放置1d待培养基表面干 燥后再接种果蝇。 6. 接种果蝇:拔出接种瓶、亲本瓶的棉塞,夹 在指缝中间,迅速将亲本瓶口倒扣在接种瓶上方,轻 拍亲本瓶让果蝇落入接种瓶中,此法仅适用于原种继 代培养。如要挑取处女蝇、不同品种杂交、子代性状 检查,需要先做麻醉处理,有选择性转入接种瓶。
在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气的排除是 当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。
1) 首先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。 1MPa(相当于15Ib/in2或1.
否完全极为重要,因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压, 待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌器内的压力,
6) 将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时,经检
1) 每次使用前一定要检查水位,添加适量水。
查若无杂菌生长,即可待用。 1MPa(相当于15Ib/in2或1.
时间的长短可根据灭菌物品种类和数量的不同而有所变化,以达到彻底灭菌为准。
1MPa,121℃保持15~30分钟进行灭菌。
注意事项: 这种灭菌适用于培养基、工作服、橡皮物品等的灭菌,也可以用于玻璃器皿的灭菌。
待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌器内的压力, 从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
果蝇的培养——精选推荐
果蝇的培养1.把50或100ml的三⾓瓶(数⽬根据⾃⼰试验确定)洗⼲净,⼲燥。
(能够⾼温灭菌也好,似乎没那必要)2.配培养基。
培养基⽐例:蔗糖13g,琼脂1.5g,⽟⽶粉17g,⽔(单蒸⽔就可以)180 ml。
⼄酸2 ml(可少⼀点),酵母粉⾄少1.4g培养基配制步骤:(1)称取⽟⽶粉17g装⼊烧杯1(要⼤⼀些的烧杯,如500 ml),量取⽔90 ml。
先加少量⽔于烧杯中,搅拌成均匀的糊状,再加⼊其余的⽔,搅拌均匀。
然后⼀边在电炉上加热,⼀边搅拌。
直到完全煮熟。
冒泡泡以后,⽕⼩点,免得溢出来。
冒泡泡以后还是要再煮好⼀会。
要充分煮熟,要不培养基在培养过程中,果蝇没有吃完就发酵了,果蝇会死的。
煮好了放在⼀边。
(2)称取蔗糖13g,琼脂1.5g装⼊烧杯2,量取⽔90 ml。
加⼊⼤半⽔于烧杯中,⼀边加热⼀边搅拌。
完全煮溶。
(3)把烧杯2中煮溶的蔗糖和琼脂倒⼊烧杯1中,⽤步骤2剩余的⽔冲⼀冲烧杯,也倒⼊烧杯1中。
(如果烧杯1⼩,就装不到了。
)然后搅匀,继续搅拌加热,直到沸腾,充分混匀。
(4) 待烧杯1稍凉。
这个时候把⼲燥好的三⾓瓶摆放旁边。
将⾄少1.4g酵母粉加⼊烧杯1搅匀,将培养基倒⼊三⾓瓶中(要⽤卖油翁的技术,这个你没问题,就是不要把培养基沾到瓶壁或周围,浪费也不好看)。
(按照敬⽼师的说法要待烧杯1凉到80度左右,我觉得稍凉就好了。
因为加⼊酵母粉后还搅拌,就更凉了。
倒⼊三⾓瓶时,到后边就太凉了有点凝固,不好倒,还会沾到瓶壁上。
)(5)把倒好的培养基放到超净⼯作台上,放2天,等待瓶壁和培养基上的⽔分挥发。
有⽔残留的话,果蝇放进去翅膀打湿,飞不起来,就翘翘了。
(我⾃⼰的做法是配培养基的时候少加10ml的⽔,等待⼀天,没有完全⼲,但也可以⽤)由于果蝇是吃⾥⾯⽣长的酵母,所以培养基放上三天,有酵母⽣长了就可以接种果蝇了。
(6)我⾃⼰收集果蝇的⽅法:放⼀点⽔果在矿泉⽔瓶⼦中,⾄少要四五天才会有很多果蝇。
这⼏天的时间就赶快去准备其他的东西。
《果蝇培养基配制》课件
学会了如何选择和配 制适合实验需求的培 养基
了解了不同种类培养 基的特点和应用场景
课程总结
掌握了培养基质量检测与保存的方法 课程不足
部分同学对于某些专业术语的理解存在困难
课程总结
01
实验操作环节时间紧张,部分同 学未能充分实践
02
部分培养基的配制方法需要进一 步优化和改进
课程展望
未来研究方向 探索更多新型的培养基成分和配方
矿物质和维生素 其他成分
为果蝇提供能量来源,常用葡萄 糖、蔗糖等。
维持果蝇正常生理功能,如磷酸 盐、硫酸盐、维生素B等。
03
果蝇培养基的配制过程
Chapter
准备器具与材料
玻璃棒
用于搅拌培养基。
恒温烘箱
用于烘干和消毒。
烧杯
用于配制培养基的 容器。
电子天平
用于称量各种成分 。
试剂和原料
蔗糖、酵母粉、琼 脂粉、磷酸二氢钾 等。
适用于大规模培养或自动 化培养设备,能够提高培 养效率和实验可重复性。
特殊培养基
根据研究需要,可添加特 定成分或药物的特殊培养 基,用于特定条件下的果 蝇培养。
培养基的成分
提供果蝇所需的氨基酸、蛋白质 等营养成分,常用酵母粉、蛋白 胨等。
根据需要添加抗生素、抗真菌剂 等,以抑制杂菌生长。
碳源 氮源
配制步骤
按照配方比例称取各种原 料,并记录下每种成分的 质量。
在烧杯中加入适量的水, 然后加入蔗糖、酵母粉和 磷酸二氢钾,搅拌均匀。
将琼脂粉加入上述溶液中 ,继续搅拌至溶解。
将培养基倒入灭菌的培养 皿中,待其冷却凝固后即 可使用。
将溶液加热至沸腾,并保 持沸腾状态约10分钟,以 便琼脂充分溶解和培养基 充分消毒。
2011-果蝇培养及操作
第一部分果蝇培养基的配制培养基的配制:培养果蝇前需要配制培养基,培养基成分如下表(表1)所示:果蝇培养基2000ml表1 果蝇培养基配方表成分含量成分含量果蝇培养基①玉米粉180g ②大豆粉20g③琼脂15g ④啤酒酵母37g⑤糖稀80g ⑥麦芽糊精80g⑦对羟基苯甲酸甲酯溶液(防腐剂)16ml(2.5g对羟基甲酸甲酯固体粉末溶于16ml95%的乙醇中)操作:1)先1.5L水烧开,然后①玉米粉溶于额外500ml水中,慢加并混匀,再慢慢加入已煮沸的1.5L水中,混匀,煮沸后,调节温度至50度,保温3-4小时(约50度左右)2)大约保温3小时左右,回到实验室,进行接下来的预备工作。
将②、③、④、⑥混合搅匀,一块加入保温的玉米糊中,边加边搅拌至混合均匀。
3)紧接着,加入⑤,慢加快搅,此步很重要,务必防止糖稀粘锅煮糊。
4)然后,将温度调大一块煮沸,再将温度降下来,冷却至60度左右(可用冷水浴约3min 的方法较快速降温),待温度冷却下来,即加入⑦防腐剂,用玻璃棒搅拌均匀后分装到培养瓶内,注意在分装时不要把培养基倒在瓶壁上。
用瓶塞塞好,使多余的水分蒸发出去,待培养基冷却后塞好瓶塞,放入冰箱。
分装至每瓶高1cm左右。
注:2L 培养基可倒瓶约100-120个左右。
若配置1L 培养基,以上成分均减半。
注意在分装时不要把培养基倒在瓶壁上。
刚配制完的培养基放凉后在瓶壁上会有许多水滴,这时如果把果蝇放进去,水滴可能将果蝇的翅膀粘住,为避免发生此事,可将配好的培养基放在温箱内2~3d,待水分蒸发后再使用,或用酒精棉将瓶壁上的水分擦掉。
分装培养基时,注意不要将培养基倒在侧壁上,这样果蝇会将大量的卵产在壁上,产在壁上的卵是无法孵化的。
在配制培养基的过程中,既要尽量避免培养基被煮糊,又要注意在装瓶的过程中尽量不出现培养基贴壁现象,只有整个过程中的细致和耐心才能使这个大实验得以顺利进行,如果培养基一旦出现问题,会对所有同学的实验进度和结果产生很大影响。
果蝇培养基
1、果蝇培育基的制备
(1) 培养瓶的洗涤:
在超声清洗器中参加少许洗涤剂,将培养瓶放入其中超声清洗约30min,取出培养瓶用净水将洗涤剂冲刷清洁,然后倒放晾干或于培养箱中烘干。
(2) 培养瓶的灭菌:
果蝇的培养基要装在经过灭菌处置的培养瓶中。
灭菌可防止真菌污染,也可杀逝世培养瓶中可能残留的幼虫或蛹,防止混淆。
灭菌的方式是:将带塞的培养瓶在高压蒸气灭菌锅中,121˚C条件下灭菌15~20min。
(3) 培养基的配制:
表1.4 果蝇培养基配方
水1L
玉米粉105g
红糖75g
琼脂7.5g
丙酸 6.25ml
酵母粉20g
量取1L水,将大约一半倒入一清洁的锅中,加入琼脂加热溶解;水开后,加入蔗糖,搅拌均匀,将玉米粉参加剩余的水中,搅拌均匀,再沿着锅边慢慢倒入,边倒边搅拌(这样玉米粉不易结块)。
持续煮5~10min,锅中的培养基成为一种糊状物时即可离火。
参加丙酸(用以防腐)及酵母粉,搅拌均匀即可分装。
分装时,将造就基悬空倒进培养瓶中,尽量不要有培养基粘在瓶壁上,减少污染的可能性,每瓶培育基厚约2cm。
(4) 培养基的紫外灭菌:
等培养基凝固后,将培养基置于超净工作台中,在紫外灯下灭菌30min。
(5) 培养基的干燥:
刚配制的培养基含有较多的水份,为防止由于水份太多以致培养基太软会粘住果蝇致逝世,紫外灭菌
后的培养基需在室温下干燥1~2天。
配好的培养基如暂时不用,可放在4˚C下贮存。
果蝇玉米培养基配置流程
果蝇玉米培养基配置流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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果蝇性状观察与雌雄鉴别
A
灭菌温度121℃
灭菌时间20分钟
B
”
七、果蝇♀♂识别
♀
♂
个体
大
小
尾部
尖
圆
背腹纹
5
3
腹片
6
4
性梳
无
有
雌雄果蝇
雌性果蝇
果蝇性梳
果蝇性梳
性状观察
果蝇性状观察
01
眼睛的颜色
02
翅的大小
03
身体的颜色
04
刚毛
实验材料
眼色
翅形
体色
18
√
√√12e Nhomakorabea22
红 白 长 残 灰 黑檀 性状 品种
残翅 野生型 棒眼 黑檀体 白眼
果蝇的麻醉 麻醉剂:乙醚
3、死亡果蝇的标志
果蝇性状观察与雌雄鉴别
汇报人姓名
汇报时间:12月20日
Annual Work Summary Report
果蝇英文俗名fruit fly,属于节肢动物门,昆虫纲,双翅目,果蝇科果蝇属,完全变态昆虫。 果蝇是模式生 物之一,得到了广泛 的研究。
1天
25℃下果蝇的生活史: 成虫 4天 减数 12小时 分裂 蛹 精、卵 2.5~3天 2天 三龄幼虫 受精卵 1天 1天 二龄幼虫 一龄幼虫
喜温 喜湿 向上性 食酵母菌 喜食糖份含量高的物质
果蝇生活习性
五、果蝇的饲养 (一)果蝇培养基成份(100ml)
水
80ml
玉米粉
8.25g
糖
6.2g
琼脂
0.6g
丙酸(苯甲酸)
0.5ml (0.25g)
酵母
少许
(二)配制方法
果蝇的培养及果蝇性状形态的观察
实验一:果蝇的培养及果蝇性状形态的观察一、实验目的①、掌握果蝇的饲养方法②、了解果蝇的生活习性③、学习辨认果蝇的雌雄个体④、学会观察果蝇的某些特殊性状二、实验原理果蝇(fruit fly,vinegar fly )广泛存在于全球温带及热带气候区,在果园、菜市场等地皆可见其踪迹,目前已发现1000多种。
果蝇以酵母菌为主要食料,能发酵的水果或植物基质,都可用作果蝇的饲料。
黑腹果蝇(Drosophila ):双翅目,果蝇属。
特点:生活史短,每12天左右即可完成一个世代;饲养容易,以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖;繁殖能力强,每只受精的雌蝇可以产卵500个左右;突变型多,突变性状多,多数是形态变异,容易观察;染色体少、个体小,是一种很好的遗传学实验材料,是一种模式生物。
在25摄氏度的环境下,果蝇从出生到成熟共需要十天。
果蝇是完全变态昆虫,生活周期可分为4个时期:卵、幼虫、蛹和成虫。
最适培养温度20~25℃,温度越高,生长越快,但高于30℃不育甚至死亡。
卵:白色,椭圆形,长约 0.5mm,前端背面伸出一触丝,附着在食物上。
幼虫:一龄——二龄——三龄,三龄体长4-5 mm,幼虫头尖尾钝,头上有一黑色钩状口器。
蛹:化蛹前三龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的瓶壁上,形成菱形的蛹,形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。
成虫:刚羽化的果蝇虫体较肥大,体表呈半透明,颜色逐渐加深,硬化。
三、实验材料及器材培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、搪瓷杯、玻璃棒、培养瓶、海绵塞、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板,电子天平、镊子、解剖镜、显微镜。
乙醚、酒精、4ml丙酸、5.6克酵母粉、6克琼脂、68克玉米粉、52克白糖、600ml水(5人一组)。
三种不同性状的果蝇:三隐型,野生型,黑体型(各数只)。
四、实验方法及步骤培养瓶的清洗及灭菌①、每个人取12个培养瓶,并配上12个松紧度合适的塞子。
将培养瓶清洗干净,沥干水。
(若找不到合适的塞子,则自己用纱布和棉花制作)。