不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体筛检质控品SOP
不规则抗体筛检质控品标准操作程序（SOP）一、用途本试剂盒用于长春博迅生物技术有限责任生产的抗人球蛋白检测卡（12卡/盒）、不规则抗体检测试剂（人血红细胞）（4%，5ml/瓶）进行的不规则抗体筛检实验的室内质量控制。
二、准备工作1、将质控品从冰箱取出后平衡至室温。
2、观察检测卡外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡平衡至室温（18－25℃），再用专用离心机离心5分钟。
三、操作步骤1、将抗人球蛋白检测卡做好标记；2、将不规则抗体检测试剂（人血红细胞）用低离子强度盐溶液稀释到细胞浓度为0.8%；3、将0.8%的红细胞按照Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ顺序加到抗人球蛋白检测卡1~3管和4~6管中，50μl/管。
4、分别在前3管加入样本1，后3管加入样本2，50μl/管。
5、将检测卡置37℃孵育器中15分钟。
6、即刻使用专用离心机离心5分钟（900 rpm 2分钟，1500 rpm 3分钟），取出，肉眼判定结果。
结果判定：1、本产品为非定值质控品，格局表中所提供的结果仅为定性结果，因此建议各实验室对每批号的产品自行建立相应的参考值。
2、抗体筛检：室内质控品按阳性(样本2)、阴性(样本1)设计，阳性质控品含有已知其特异性的不规则抗体，阴性质控品不含有不规则抗体。
3、质控品检测结束后，用户可将检测结果与参考值进行比较，阳性质控结果与预期结果比较出现超过1+凝集强度的差异，或阴性质控出现阳性结果时，均视为失控。
失控后要分析查找原因，必要时重复实验，确认失控原因消除后开展正常检测工作。
质控品抗A 抗B 不规则抗体样本1 + + 0样本2 0 0 +“0”代表阴性，“+” 代表阳性。
特异性及效价：O血清：与A1、B型红细胞均发生凝集，与O型红细胞不发生凝集，与O型RhD(+)红细胞间接抗人球蛋白试验呈阴性，无溶血及其他不易分辨现象；O血清与A1型红细胞反应，效价≥8，与B型红细胞反应，效价≥8。
AB血清(含IgG型抗D抗体)：与A1、B、O型红细胞均不发生凝集，与O型RhD(+)红细胞间接抗人球蛋白试验呈阳性，无溶血及其他不易分辨现象；试管抗人球法效价为2~8；微柱凝胶法效价为4~16。
BIOVUE不规则抗体筛选操作规程
BioVue不规则抗体筛查操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：不规则抗体筛查2．检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
具有已知抗原的人红细胞将与血浆中相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索(Ortho-Clinical Diagnostica,Inc)2．代号：BioVue －poly Cassettes3．包装规格：400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4．试剂成分：抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第1～6柱：抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性抗－lgG(兔)抗－C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3) 抗－C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7) FD＆C1＃蓝色染料FD＆C5＃黄色染料5．试剂的储存与效期：储存方法：2～25℃环境保存。
请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。
并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。
效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVue专用离心机；BioVue专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求，血液采集应符合相关的技术标准及管理规范。
含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。
标本采集后应尽快进行检测。
如果实验不能立即进行，应将标本置于2－8℃保存。
六、试剂准备：抗人球蛋白(IgG,C3b/C3d)检测卡为即用型产品。
每一微柱中含有仅适用于一个测试的试剂。
不规则抗体筛查流程步骤
不规则抗体筛查流程步骤下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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不规则抗体筛检卡使用
不规则抗体筛检卡标准操作方法
（一）原理：微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。
在一定离心力下，该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的
红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。
（二）操作步骤：
1、红细胞悬液的制备：将筛检红细胞或谱细胞配成0.8%浓度的悬液。
2、将准备好的不规则抗体筛检卡做好标记；
3、将配好的筛检细胞或谱细胞悬液加入标好的微管中，各一滴（或50μl）；
4、分别立即加入被检者血清1滴（或50μl）；
5、加样后的试剂卡，置37℃孵育器中孵育15分钟；
6、使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500 rpm3分钟），取出肉眼
观察结果。
（三）结果判定：根据所提供的筛检红细胞或谱细胞的反应格局来判定结果例：按Ⅰ(-)、Ⅱ(4+)、Ⅲ(-)的实验结果及提供如下的筛检红细胞反应格局来分析
阴性结果用排除法,阳性结果用可能包含法。
以前五种抗原为例：
Ⅰ(-)：可排除D、C、e；
Ⅱ(4+)：判断可能含有D、C、E、c、e；
Ⅲ(-)：可排除D、C、c、e；
综上，可认为：此样品血清中可能含有-E。
不规则抗体筛查标准操作规程
不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。
(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。
2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。
3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。
(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。
不规则抗体筛查
不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查.不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体.ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇＧ抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞，必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应.临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同，其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血，则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应，可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时;2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时;5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1。
原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应,如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2。
试剂2.1 5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3.1 取试管三支,标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清(血浆）2滴，加5%筛选细胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3。
2 各加LIM0。
7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒,然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0。
1ml液体。
3。
4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集,如无凝集，则必须重作.3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体筛查试验操作规程
XXX医院不规则抗体筛查试验操作规程1.目的为规范红细胞不规则抗体筛选、鉴定的技术操作，保证检查结果准确和临床输血安全、有效，依据《输血实验室管理程序》有关条款的要求制定本规程。
2.适用范围本规程适用于本院红细胞不规则抗体的筛查。
3.职责输血科具有专业技术资格的人员负责红细胞不规则抗体的筛选和鉴定，但只对所筛选或鉴定的标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理采用盐水介质法、凝聚胺法或抗球蛋白法等试验使受检者血清（血浆）与筛选红细胞反应，检测受检者血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体，红细胞不规则抗体阳性者进一步与谱红细胞反应，根据反应格局鉴定抗体特异性。
7.仪器设备和检测环境7.1.仪器设备等：玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
7.2. 检测环境：室温应控制在18~27℃，湿度应保持在30~70%。
8.试剂①生理盐水、凝聚胺试剂、直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d），均为有合格证件的正品。
②市售O型筛选红细胞：为三支以上不同人份的3%筛选红细胞，均为有合格证件的正品。
或自制O型筛选红细胞：选择已确认ABO血型为O型的健康者，采集EDTAK抗凝血2标本离心，取少许红细胞置于试管中，用生理盐水离心洗涤3次得压积红细胞[3400转/分钟（1000g），每次离心1分钟，离心后将上清液全部倒出]，再取30µl游离红细胞加入到标记为Ⅰ号的试管中，然后加入1ml生理盐水混匀，即得Ⅰ号O型3%的筛选红细胞；依同样方法分别制备不同人份的Ⅱ号和Ⅲ号O型3%的筛选红细胞。
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程
不规则抗体筛选和鉴定标准操作规程1.检验目的不规则抗体筛选和鉴定可在交叉配合之前进行或一起进行，这样有利于患者抗体的早期确认及鉴定，发现临床上有意义的抗体，避免一些可能的情况而造成病情的延误。
2.检验方法分盐水介质法、抗球蛋白法和微柱凝胶法。
3.检验原理让待检者的血清与已知血型的试剂红细胞即筛选红细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套）起反应，以发现在37℃中有反应活性的抗体。
这种抗体可引起新生儿溶血病、溶血性输血反应、或使输入的红细胞存活期缩短等。
当不规则抗体筛选试验阳性后，再进行不规则抗体鉴定，即利用谱红细胞（11套鉴定细胞）与待检者的血清反应，根据反应结果判断机体所产生的同种抗体类别。
4.标本要求受检者不抗凝静脉血4.0ml，分离血清，48小时内使用5.试剂5.1.筛选红细胞：由2或3人份的O型红细胞组成为一套试剂，每套试剂筛选红细胞中至少有以下常见的抗原：D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Le a、Le b、K、k、Fy a、Fy b、Jk a、Jk b等。
每次用3套试剂（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）进行抗体筛选，见表1005-1。
5.2.鉴定谱细胞：除包括常见的抗原以外还有：C w、Kp a、Kp b、Js a、Js b、Lu a、Lu b、Xr/min a等。
每次用11套试剂进行抗体鉴定，见表1005-2。
5.3.抗球蛋白试剂：多特异性抗球蛋白血清（IgG、C3d）。
5.4.致敏红细胞（质控细胞）。
5.5.0.9%生理盐水。
5.6.Coombs微柱凝胶卡。
6.器材试管、吸管、37℃水浴箱、台式离心机、滤纸、微量加样器等。
7.操作程序7.1.盐水介质法7.1.1．取受检者血清2滴于标记有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3支小试管中。
7.1.2．对应加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ套2%～5%筛选红细胞生理盐水悬液1滴，37℃孵育30分钟。
7.1.3.以3000r/min离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录反应情况于表1005-1中。
如果抗体筛选试验阳性，继续做以下试验。
不规则抗体筛选操作规程
不规则抗体筛选操作规程一．试剂和仪器1.抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）多特异检测试剂卡或抗人球蛋白（IgG）单特异检测试剂卡。
2.上海血液生物医药有限公司3%抗筛试剂红细胞悬液3.离心机和孵育器二．标本收集与处理1．血清或血浆都可以使用。
2．如果在直接抗人球蛋白实验中加入了血浆标本，因为钙离子的失活，补体依赖的抗体可能无法检测出来，所以建议使用血清标本。
三．操作步骤1．取出试剂卡，平衡至室温；使用前离心确保无气泡和断层。
2．观察卡的反应液面高度，确保试剂液面高于凝胶平面3mm左右，否则请勿使用；撕开试剂卡上的锡纸，撕开后的微柱请于1小时内进行下面操作。
3. 分别向反应柱内加入50 ul患者血清或血浆。
注意，加样时，吸头请勿触及微柱管壁。
4．再分别向反应柱内加入10ul 3%红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(抗筛红细胞)。
5．观察柱中的反应物各组分是否混匀，必要时轻弹几下微柱充分，使反应物混匀。
6．在孵育仓中37℃孵育15分钟。
7．用离心机离心5分钟，离心必须在加样后30分钟内进行。
8. 从微柱正反两面判读并记录结果。
四．结果判读阳性结果（＋）：红细胞凝集为阳性结果。
阴性结果（－）：无溶血及红细胞未凝集为阴性结果。
溶血会导致玻璃珠上方呈粉红色或红色。
如果发现溶血现象，则应先将血清或血浆置于56℃水浴30min以灭活补体，然后再重复试验，观察红细胞凝集现象。
4 + 反应：红细胞在柱中玻璃珠上面凝集，并形成一个环形带。
3 + 反应：发生凝集的大部分红细胞停留在玻璃珠的上半部分。
2 + 反应：发生凝集的红细胞分布于整个玻璃珠床，柱的底部有少量细胞。
1 + 反应：大部分凝集的红细胞停留在玻璃珠床的下半部分，柱的底部有少量红细胞。
阴性反应：所有红细胞均穿过玻璃珠床，在柱的底部形成一个平整的红细胞聚集带。
五.注意事项1. 试剂卡应保存在2～25℃，请勿冷冻保存；请勿将试剂卡放入自动除霜的冰柜中，也不要放在离热源很近或阳光直射的地方。
不规则抗体筛查
不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体。
ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇＧ抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检；3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂2.1 5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3.1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆）2滴，加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3.2 各加LIM0.7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体检测标准操作流程
不规则抗体检测标准操作流程(SOP)
目的:输血前进行检验查,可对有妊娠史,多次输血史,大量输血的病人进行不完全抗体的初选.
操作:
1、取3—5名“O”型正常人抗凝血(新鲜血常规抗凝血)进行等量混合。
2、用无菌生理盐水洗涤3—5次。
3、配制成2%红细胞悬液(上述离心沉淀红细胞1ml加生理盐水49mL混匀)待用。
4、取病人(受血者)血清或血浆100mL和2%红细胞悬液100mL等到量混合，然后离心，侄去上清液，混匀，倒在玻片上，显微镜观察是否凝集。
5、如有凝集，说明该受血者体内存在不规则抗体，毅然交叉配血不能进行。
6、如无凝集才能配血。
实验三 不规则抗体
【标本、试剂与器材】
• 1. 标本 被检者不抗凝全血； • 2. 试剂 符合国家标准的1-10号鉴定 谱细胞、凝胶微柱卡； • 3. 器材 台式离心机、37℃水浴箱、血 液细胞洗涤离心机。
谱细胞（Panel Cell）
• 由8～12个人份的已知血型 表现型的O型RBC配套组成 • 具有各种不同的抗原成分， 分布各具特点，与抗体反应 出现不同的格局 • 能检出常见抗体和稀有抗体 • 每种抗原在谱细胞上保持一 定为1 个以上
• 4. 凝胶微柱出现凝集，而盐水介质无凝集，则提示 不规则抗体为IgG性质。
【操作步骤】
• 1. 向凝胶卡内依次加0.8-1% 1～10 号鉴定谱细胞50ul, • 2. 每孔加被检者血清25ul, • 3. 37℃温15min, • 4. 专用离心机离心10min,观察结果．
【结果判断】
【方法评价与注意事项】
• 1. 被检者自身血清加自身红细胞管应无凝集；若出 现凝集则提示存在自身免疫性抗体； • 2. ±～4+凝集为阳性结果，表示待检血清中有不规 则抗体，结合谱红细胞反应格局，确定抗体特异性； • 3. 无凝集，表示被检者血清中无不规则抗体。
【操作步骤】
待捡血清 2～5% 1号筛选谱细胞 2～5% 2号筛选谱细胞 2～5% 3号筛选谱细胞
表 一 1 1滴 1滴 2 1滴 1滴 3 1滴
1滴
1. 盐水法 按表一加样后,1000×g离心15s，轻轻摇动试管，肉眼观 察有无凝集结果，记录结果.
2. 凝聚胺 按表一加样后,依次加入低离子介质溶液、凝聚胺溶液, 1000×g离心15s，弃上清夜,摇动试管,看是否形成凝集(如没有凝集 形成需重做),加悬浮液,观察凝集是否散开,记录结果
• 3. 无凝集，表示被检者血清中不存在不规则抗体。
红细胞不规则抗体筛选标准操作规程
红细胞不规则抗体筛选标准操作规程
1、目的
为规范输血科红细胞规则抗体筛选的技术操作，确保检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.8条款的要求制定本规程。
2、适用范围
本文件适用于本院输血科红细胞规则抗体筛选的操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理：
不规则抗体是指不符合ABO血型系统Landsteiner法则的血型抗体，多数为免疫性抗体（IG性质），输血前受血者体内若发现此类抗体，应输入无对应抗原的红细胞，以避免抗原抗体反应，引起溶血性输血反应。
若产妇体内发现此类抗体，则应确定其效价并观察其效价变化，以避免其引起新生儿溶血病的发生。
目前不规则抗体筛查是采用已知抗原表型的O型试剂红细胞，在不同温度下、采用不同介质筛查被检血清中有无有临床意义的不规则抗体。
常用的方法有盐水凝集试验、聚凝胺试验、抗人球蛋白试验、酶试验等。
本科根据本科实际情况采用盐水凝集试验、聚凝胺试验、抗人球蛋白试验筛查不规则抗体。
其反应原理同配血试验。
不规则抗体筛查【范本模板】
不规则抗体检查不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。
不规则抗体是指抗Ａ、抗Ｂ以外的血型抗体。
ＡＢＯ系中的亚型,变异型抗Ａ1或某种抗Ｂ等抗体,也称为不规则抗体。
其多为ＩｇＧ抗体。
主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生,在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。
如果交叉配血不仔细，或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体，而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生.红细胞血型抗体检查适用于下列情况：1、ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时；2、供血者血清抗体筛检;3、输血前受者血清抗体检查；4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时；5、孕妇血清的抗体检查；6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查；7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
1. 原理利用筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚胺介质中反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体。
2. 试剂2。
1 5％筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)2.2 凝聚胺试剂2.3 直接抗人球试剂外周血或静脉血3. 操作步骤3。
1 取试管三支，标明Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ并往各管加病人血清（血浆)2滴,加5%筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）各1滴。
3.2 各加LIM0。
7ml，混合均匀后，再各加Polybrene 溶液2滴，并混合均匀。
3.3 用BASO专用离心机1000G离心力，离心10秒,然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0。
1ml液体。
3.4 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重作。
3.5 最后加入Resuspending 2滴，轻轻转动试管混合并同时观察结果。
如果凝集散开，表示是由Polybrene引起的非特异性聚集，抗体筛检结果为阴性；如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作抗体鉴定。
不规则抗体筛查操作方法
不规则抗体筛查操作方法抗体筛查是一种常用的实验技术，用于检测人体中是否存在某种特定的抗体。
不规则抗体指的是那些不符合正常免疫反应模式的抗体，其产生可能与某些疾病或异常情况相关。
本文将介绍一种不规则抗体筛查的操作方法，包括前处理、抗原标记、试剂制备、试管操作等环节。
1. 前处理：首先，需要准备样本，通常是血液或血浆样本。
将样本离心分离血细胞和血浆，取出血浆备用。
如果需要检测特定器官或组织的抗原，还需进行相应的前处理，如组织细胞抗原的制备。
2. 抗原标记：将待检测的抗原标记。
标记可采用放射性同位素、酶标记、荧光标记、金标记等方法。
标记时需要注意选择合适的标记物，以确保标记效果稳定和信号强度足够。
3. 试剂制备：制备抗体和其他试剂。
抗体可通过动物免疫、杂交瘤细胞技术等方法获得，然后纯化和浓缩。
其他试剂包括缓冲液、辅助试剂等。
制备试剂时需要严格控制操作条件，避免交叉污染和分装误差。
4. 试管操作：a. 将样本和标记的抗原加入试管中，混匀，使抗原与抗体充分结合。
b. 对于各类试管进行不同的操作，如剥夺试验、沉淀试验、凝集试验、间接荧光试验等。
具体操作时需要根据试管类型选择合适的剂量和条件。
c. 通过观察试管内的反应情况，判断是否存在不规则抗体。
不规则抗体的存在可通过沉淀、荧光、凝集等形式观察到，如试管内有沉淀物形成、荧光强度异常高或低、凝集抗体间距不均匀等。
5. 结果分析：根据试管内的反应结果，可判断是否存在不规则抗体。
如果需要进一步确认，还可进行其他检测方法，如免疫组织化学、免疫电镜等。
同时，还需要将结果与临床资料结合，分析不规则抗体是否与某种疾病或异常情况相关。
总结：不规则抗体筛查操作方法主要包括前处理、抗原标记、试剂制备和试管操作等环节。
通过对样本和标记抗原进行混合、加热、冷却等处理，观察试管内的反应情况，可以判断是否存在不规则抗体。
这项技术在疾病诊断和研究中具有重要意义，能够帮助医生确定病情和制定合适的治疗方案。
不规则抗体筛检操作作业指导书
不规则抗体筛查实际操作作业指导1.目的用于检测血浆中是否存在抗体（IAT）2.原理血液中一些IgG类抗体或补体C3（主要是免疫性抗体）与红细胞表面相应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见凝集反应，但在加入抗IgG或抗C3抗体后，以其搭桥则出现凝集反应，该实验称为抗人球蛋白试验（Coomb’s Test）。
包括直接抗人球蛋白试验（DAT）和间接抗人球蛋白试验（IAT）。
直接抗人球蛋白试验用于检测红细胞是否被抗体致敏，间接抗人球蛋白试验用于检测血浆中是否存在抗体。
3.样品3.1样品类型：血浆或血清3.2患者准备：应避免高脂食物或未知药物影响，可能的情况下，在大量用药前采集标本3.3容器和添加剂类型：EDTA-K2抗凝血3ml～5ml，在低速离心机1000g条件下离心5min，离心后应无溶血、无凝块、无明显乳糜。
紧急情况下可以使用抗凝动脉血，5ml～10ml全血分离得到的血清也可以4.环境和安全控制4.1实验环境（1）环境温度：18℃～30℃（2）环境相对湿度：15%～80%RH（无冷凝）（3）实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀、防磁与屏蔽等方面的环境条件应符合检验项目和检测仪器设备对环境条件的要求，室内采光良好。
4.2人员安全（1）操作人员二级防护（2）所有血液样本及与血液接触的材料均视为传染性物质（3）对设备进行清洁或清除污染、处理样本、处置废弃试剂卡、处理稀释样本管等遵照实验室生物危害注意事项。
5.方法学微柱凝胶法6.程序性步骤试剂卡做好标记（病人姓名、日期）→分离被检者血清（或血浆）→用低离子强度溶液将筛检红细胞或谱红细胞配成1%浓度（I/II/III）→分别加入50ul在标记好的三个微管中（仅暴露所需反应孔）→立即加入被检者血清（或血浆）50ul在三个微管内→ 37℃孵育15min →专用离心机900r2min 转1500r3min →取出判读结果7.结果判读红细胞层下沉阴性，红细胞层未下沉为阳性8、措施计划1.鉴定卡和病人编号一致2.样本溶血、脂血慎用3.抗筛细胞浓度为4%，所需1%抗筛细胞仅需75ul抗筛细胞加入25ul生理盐水混匀后即可使用。
不规则抗体筛查标准操作规程
不规则抗体筛查标准操作规程(一)检验目的检测受血者、孕妇等血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、ABO血型正确定型(不规则抗体干扰反定型)以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。
(二)检验原理1.盐水介质法IgM类不规则抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法就可以判断受检者血液中是否存在IgM类不规则抗体。
2.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而被不规则抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断受检者血液中是否存在不规则抗体。
3.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
4.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，而未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、手工微柱凝胶法、手工玻璃珠微柱法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法不规则抗体筛查及鉴定试验。
(四)设备性能参数各种用于不规则抗体筛查试验的检测系统性能指标参见相应说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型配血系统、阅片灯箱、卡式专用离心机、孵育器、塑料软试管、塑料硬质试管(75m m×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液器、一次性移液枪头。
输血科不规则抗体(红细胞血型抗体筛查)标准操作程序
输血科不规则抗体（红细胞血型抗体筛查）标准操作程序红细胞血型抗体检查适用于下列情况：①ABo血型鉴定发现受检者血清中有ABO血型以外的抗体时；②供血者血清抗体筛检；③输血前受血者血清抗体检查；④输血后溶血性输血反应疑为由同种抗体引起时；⑤孕妇血清的抗体检查；⑥新生儿溶血病婴儿血液中抗体检查；⑦直接抗人球蛋的试验阳性红细胞上抗体的检查。
［试剂］1、试剂红细胞由血型参比实验室或血液中心提供，或由各血库从供血者或工作人员中进行普查得到，筛查红细胞以2个或3个人抗原互补的不同的红细胞为1套，单独分开分装，因为单一的筛查红细胞较混合红细胞提供较高的敏感性。
2、血清标本，虽然血清和血浆中都存在相同的红细胞抗体，但一般都采用血清进行抗体检查，因为：①如果血浆中的凝血系统发生部分激活，就可以产生纤维蛋白，干扰对凝集的解释；②只有通过激活补体的作用才能证实的抗体，不能在血浆中检出；③常用的抗凝剂是结合来防止凝固，而Ca"对于补体的激活是必不可少的。
血清标本的采取时间应注意，例如：受血者血样一定要在48小时内采集。
为了检出由于最近红细胞刺激而产生的抗体，血样必须是新近的。
如果抗体筛查结果阴性，有时需要隔数天后重新采样复查，因为此时抗体的浓度可逐渐增强。
［操作］适用于红细胞抗体筛查及其特异性鉴定的方法很多，应根据不同情况采用。
1、凝聚胺法(I)取受检者血清2滴于标好的试管中；(2)取筛查红细胞悬液1滴于每个试管中；(3)各加低离子介质溶液O.6ml,混合均匀后，静置1分钟，再各加凝聚胺渗液2滴，混合均匀，静置15秒。
(4)3400转离心15秒，然后把上清液倒掉。
(5)轻摇试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集则必须重作。
(6)最后加入重悬液2滴，轻轻转动试管混匀并同时观察结果，结果判定：如果凝集在60秒内凝集散开，代表是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集，结果为阴性，如凝聚不散开结果为阳性，应进一步做抗体鉴定。
不规则抗体筛选试验标准操作规程(sop)
不规则抗体筛选试验标准操作规程一、目的为规范微柱凝胶抗球蛋白检测卡在红细胞不规则抗体筛选试验中的应用，保证实验结果的准确性和有效性。
二、适用范围输血科进行的微柱凝胶卡式不规则抗体试验。
三、原理红细胞血型抗原—抗体反应体系在微柱凝胶卡微孔上端反应室反应后，如红细胞血型抗原与相应特异性抗体发生凝集反应后，离心后被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或者颗粒间隙之中，不能通过凝胶筛网，而未发生抗原—特异性抗体凝集的红细胞则可以通过凝胶筛网沉降至微柱凝胶底部。
四、步骤和方法1、取微柱凝胶抗球蛋白检测卡放入专用离心机，3000r/min离心1min后撕开锡纸膜，正立放置待用。
2、在标记为I、II、III的各反应腔中分别加入对应的I、II、III号筛选红细胞稀释液（1滴细胞+3滴lis液）50微升，再在标记为I，II，III的各反应腔中分别加入对应的受检者血清（血浆）20微升，加入后轻轻震荡3次使其充分混合。
3、将检测卡在微柱凝胶专用孵育器中37℃孵育15min后，用专用离心机以1800r/min·2min，2500r/min·1min离心后取出判断结果。
5、结果判读：I、II、III型红细胞任何一种出现阳性反应，表明该血清（血浆）不规则抗体筛选阳性。
五、质量控制微柱凝胶试剂卡，试剂筛选红细胞在有效期内使用。
六、注意事项1、检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室5—10min平衡至室温。
2、撕开微柱凝胶卡锡纸膜时，注意避免各微柱间特异性抗体试剂的交叉污染。
3、细菌污染，纤维蛋白析出及抗凝不佳的血，可产生假阳性结果，建议使用血清。
4、严格遵循离心力，离心时间要求，离心速度过快，离心时间过长均易产生假阴性结果。
5、由于试剂生产厂家，批号不同等因素，红细胞浓度，吸取样品的量及离心条件等环节要求有所差异，以试剂说明书为准。
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不规则抗体检测标准操作流程(SOP)
目的：输血前进行检验查,可对有妊娠史,多次输血史,大量输血的病人进行不完全抗体的初选.
操作：
1、取3—5名“O”型正常人抗凝血(新鲜血常规抗凝血)进行等量混合。
2、用无菌生理盐水洗涤3—5次。
3、配制成2%红细胞悬液（上述离心沉淀红细胞1ml 加生理盐水49mL混匀）待用。
4、取病人（受血者）血清或血浆100mL和2%红细胞悬液100mL等到量混合，然后离心，侄去上清液，混匀，倒在玻片上，显微镜观察是否凝集。
5、如有凝集，说明该受血者体内存在不规则抗体，毅然交叉配血不能进行。
6、如无凝集才能配血。