胎牛血清制备
生产用细胞基质
生产用细胞基质
生产用细胞基质主要包括以下几种：
1. 胎牛血清：通常用于支持细胞的生长和繁殖。
它提供了一些必需和
非必需氨基酸、生长因子和维生素。
2. 胰蛋白酶：一种酶，用于分解细胞间的蛋白质，使细胞成为单个的
细胞或细胞碎片，用于制备用于培养的细胞。
3. 胶原蛋白：一种细胞外基质，在细胞生长和组织修复中起重要作用。
4. 植物凝胶：如明胶，是一种天然的多糖，可在细胞培养过程中提供
结构支持。
5. 培养皿、培养瓶、培养板等：这些是用于培养细胞的容器和模具。
6. 双抗：即青霉素钠和氯化钠，用于控制培养过程中的细菌生长。
7. MEM、DMEM、F12等基础培养基：这些是用于细胞培养的广泛使用的培养基类型，它们提供了细胞生长和繁殖所需的基本营养物质。
8. 盖玻片：一种支持材料，用于支持贴壁细胞生长。
9. 细胞计数板：一种用于计数培养物中细胞的设备。
此外，还有一些特殊的细胞基质，如用于特定细胞类型或特定用途的
特定血清替代品或小分子药物。
总的来说，生产用细胞基质是一系列用于支持细胞生长和繁殖的生物
和化学物质的混合物，它们为细胞提供了所需的环境和营养，使其能
够正常生长和发育。
具体的基质选择和使用应根据您的细胞类型、实
验目的和时间表等因素来决定。
血清在细胞培养中的作用和质量要求
天津市灏洋生物制品科技有限责任公司血清在细胞培养中的作用和质量要求现代生物技术包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程，这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切的关系，特别是在生物医药领域，细胞培养更具有特殊的作用和价值。
比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多都是通过细胞培养来实现的，基因工程乙肝疫苗大多是以CHO细胞作为载体；基因工程抗体药物的制备也离不开细胞培养。
细胞工程领域更离不开细胞培养技术，杂交瘤单克隆抗体的研究制备完全是通过细胞培养来实现的，发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。
总之，细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。
细胞培养的发展，培养基的质量是关键，而培养基的构成中动物血清对细胞的生长繁殖起着重要作用。
在动物血清中牛血清的应用又是最广泛的，所以牛血清的质量好坏直接影响生物制品的质量和安全性，保证牛血清质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。
一、牛血清的主要成分牛血清是一种成分复杂的混合物，其大部分成分已为人所知，但还有一部分仍不清楚，而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。
牛血清主要成分有以下几类：1、蛋白质类除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外还有白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白（抑制胰蛋白酶的作用）、胎牛血清中含胎球蛋白（促进细胞附着）、转铁蛋白（能结合铁离子，减少其毒性和被细胞利用）、纤维粘连素（促进细胞附着生长）等；2、多肽类主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子，最主要的生长因子是血小板生长因子，还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等，虽然在血清中含量很少，但对细胞的生长和分裂也起着重要作用；3、激素类激素对细胞的作用是多方面的。
包括：胰岛素：促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关；类胰岛素生长因子：能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用：促生长激素：促进细胞增殖的效应；氢化可的松：血清中含有微量该成分，它可能具有促细胞贴附和增殖作用。
血清制备原理
血清制备原理
血清制备是一种从动物（通常是哺乳动物）的血液中得到的透明液体，其中包含大量的抗体和其他血浆蛋白质。
血清常常被用于实验室研究、临床诊断和治疗等领域。
血清制备的过程主要包括以下步骤：
1. 选择合适的动物供体：通常选择小鼠、兔子、猪等动物作为供体。
供体选择通常基于其体积、免疫反应性和商业可获得性等因素。
2. 免疫刺激：将特定抗原或疫苗注射到动物供体体内，以刺激其免疫系统产生抗体。
注射剂量和时间可根据具体要求进行调整。
3. 收集血清：在一定时间后，通过采集供体动物的血液来获取血清。
最常见的方法是从动物的静脉中采集血液，然后将血液置于离心机中进行离心分离，将血浆与红细胞分离。
4. 血清的保存和处理：分离后的血浆可以通过多种方法进行保存和处理，例如添加抗生素以防止细菌生长、冻干或冷冻在低温下保存。
在血清制备过程中，关键的一点是在注射抗原之后充分免疫供体动物，以激发免疫系统产生大量的抗体。
动物的免疫系统会对抗原做出反应，并产生特异性抗体。
这些抗体会被释放到血液中，从而形成抗体丰富的血清。
血清的制备非常重要，因为血清中含有大量的抗体和其他免疫相关因子，可以被用来检测特定抗原的存在、了解免疫反应机制以及进行疾病的诊断和治疗。
由于血清的制备需要动物供体，并在涉及抗原注射的过程中涉及动物实验伦理问题，因此在实际操作中需要严格遵守伦理规范和法律法规。
牛血清使用说明
牛血清使用说明本使用说明适用于下列产品系列：胎牛血清(FBS) 、新生牛血清和小牛血清产品介绍动物细胞离体培养需要营养丰富的培养基。
动物血清通常添加在合成培养基里用于促进动物细胞的正常生长。
血清是一种天然的促进细胞生长营养物质，它含有极为丰富、并且生物利用率很高的蛋白质、氨基酸、脂肪、生长引子、维生素、激素、蛋白酶抑制因子以及各种无机微量元素。
这些成分可有效地促进细胞的生长。
目前普遍使用的血清种类有胎牛血清(FBS)、新生牛血清、马血清、猪血清和人血清。
根据血清应用范围和采集后加工方法的不同，每类动物血清又可制备成不同的血清产品类型，用于各种动物和人细胞的培养。
然而，胎牛血清(FBS)被广泛认为是最适于细胞培养的动物血清，补充所必需的营养成分。
主要是因为FBS富含平衡的天然生长因子和较低γ球蛋白。
除此之外，FBS还可以防止细胞由于pH变化、重金属离子、内毒素和蛋白酶而引起对细胞的损害。
贮存方法麦迪捷生产的血清是分装在无菌的塑料瓶内，之后冰冻保存。
在运输过程中仍保持在冰冻状态。
如将血清存放在-10到-40o C度的在冰柜里，可连续保存数年，对血清的植板率没有明显的影响。
血清不应存放在无霜冰箱里。
反复冰冻融化过程会使血清中的某些物质沉淀，降低血清的使用效果。
不适当的贮存将迅速降低血清制品的有效成分和稳定性。
解冻方法血清从冰箱取出后应慢慢地解冻。
最好在4o C低温冰箱里放置一天或直到完全融化为止。
如果时间不允许低温解冻, 可参考以下解冻方法：1. 将血清从冰箱里取出后，在室温下放置15-20分钟。
2. 然后将血清放置在37o C水浴槽里。
过高温度会导致血清出现浑浊现象。
不要让水淹没装有血清的瓶子。
3. 每隔5分钟左右适当摇晃瓶子，直到完全地解冻为止。
血清解冻后要立即使用。
解冻的血清可以在2-8o C条件下存放达2个星期。
为了避免多次解冻/融化血清和长期冷藏,我们建议将没有用完的血清立即分装，然后再冰冻保存，方便以后使用。
高氏培养基配方
高氏培养基配方
高氏培养基是一种常用的细胞培养基，适用于多种细胞的培养和繁殖。
以下是高氏培养基的配方：
成分：
1. DMEM基础培养基（Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium）500ml
2. 热灭菌的胎牛血清（FBS）10%
3. L-谷氨酰胺（L-Glutamine）2mM
4. 热灭菌的青霉素-链霉素（Penicillin-Streptomycin）1%
制备：
1. 取出DMEM基础培养基，加入L-谷氨酰胺和青霉素-链霉素，混合均匀。
2. 加入10%的热灭菌的胎牛血清，混合均匀。
3. 过滤培养基，以去除可能存在的细菌和病毒。
使用：
高氏培养基可以用于各种细胞的培养和繁殖，存储温度为2℃至8℃。
注意事项：
1. 培养基应保存在无菌条件下。
2. 使用培养基前需检查是否有菌落或悬浮物。
3. 培养基应在规定时间内使用完毕，不得重复使用。
- 1 -。
PBMC的分离培养及处理步骤
刘凤君实验步骤1.采血：抽取初治(初始抗病毒治疗）之前CHB、CHC患者外周静脉血6ml，注入肝素抗凝管中，轻轻摇匀。
2.稀释：室温下加入等体积的PBS，轻轻吹打混匀。
3.加样：取50ml离心管，吸取6ml Ficoll（淋巴细胞分离液）于离心管中，（Ficoll与稀释前血液的体积比为1:1），管倾斜45°，将稀释后的血液在Ficoll液面上方约1cm处沿管壁缓慢加至Ficoll上面。
4.离心：18-20℃,2000rpm，30min，离心后从管底至液面分四层，依次为红细胞和粒细胞层、分层液层、单个核细胞层、血浆层。
5.回收：将移液管直接插入云雾层（或者先吸去上层的血浆），轻轻吸出云雾层，放入新的离心管中。
6.洗涤：加入至少于PBMC（外周血单个核细胞）体积3倍的PBS，18-20℃,2000rpm，10min，两次。
7.细胞计数：弃上清，加1ml RPMI-1640培养基(含10%胎牛血清），吹打混匀，制备成PBMC细胞悬液。
①专用仪器测定：吸取一定量的PBMC细胞悬液于EP管中，取等量2%台盼蓝，吹打混匀后吸取1滴进行细胞浓度测定。
②血细胞计数板：取一滴PBMC悬液与一滴2%台盼蓝染液混匀后加于血细胞计数板中，在显微镜下计数4大格内细胞总数。
细胞数/ml=4个大方格细胞总数/4×104×2（稀释倍数）8.细胞培养：细胞计数后调整细胞浓度为2×105/ml培养基，加于6孔板或24孔板中进行培养。
（我们通常是培养过夜后再进行下一步处理）。
9.干扰素处理：加入500IU/ml（培养基的终浓度）的α-IFN（干扰素），同时设对照组，时间为8小时。
（家族性乙肝、丙肝患者中不准备抗病毒治疗者省去干扰素处理的步骤。
10.细胞收集：将6孔板或24孔板中的培养基吸出弃掉，每孔加200ulTrizol，用移液枪将孔壁吹打数次后，将Trizol转入EP管中。
11.细胞冻存：将收集的细胞放入-80℃冰箱中保存。
牛血清白蛋白的制备方法[发明专利]
![牛血清白蛋白的制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/955192b6ed3a87c24028915f804d2b160b4e86c1.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011570120.7(22)申请日 2020.12.26(71)申请人 郑州伊美诺生物技术有限公司地址 450000 河南省郑州市经济技术开发区第六大街133号1号厂房(72)发明人 王萍 赵巧辉 吕庆生 包金芝 李桂林 付光宇 吴学炜 (74)专利代理机构 北京集佳知识产权代理有限公司 11227代理人 温可睿(51)Int.Cl.C07K 14/765(2006.01)C07K 1/14(2006.01)C07K 1/34(2006.01)(54)发明名称牛血清白蛋白的制备方法(57)摘要本发明涉及生物技术领域，尤其涉及牛血清白蛋白的制备方法。
本发明提供的BSA的制备方法中，包括：血清稀释、第一步提取、第二步提取、洗滤浓缩几个步骤。
实验表明，采用本发明提供的方法在适宜的参数下，能够获得良好的提取效果，不仅收率较高，并且批间差异小，降低了化学残留，提高了抗干扰能力，所得产品作为检测试剂的关键辅料蛋白，能够显著降低检测试剂的非特异性吸附。
权利要求书2页 说明书9页 附图4页CN 112521488 A 2021.03.19C N 112521488A1.牛血清白蛋白的制备方法，其特征在于：包括：血清稀释：将牛血清或牛血浆稀释至蛋白浓度为40～45mg/ml；第一步提取：在稀释后的血清中加入辛酸钠至质量分数为3.5‰～4‰，边加入边搅拌，然后调节pH值至5.8～6.8，加热至65～70℃保温4h，冷却至室温放置12～16h，然后分离上清液A；第二步提取：在上清液A中加入辛酸钠至质量分数为2‰～2.5‰，边加入边搅拌；然后调节pH值至5.0～5.5，加热65～70℃保温2h，冷却至室温放置12～16h，然后分离上清液B；洗滤浓缩：调节上清液B的pH值至7.0～7.5，过滤、浓缩至蛋白浓度为150～180mg/ml 后，经冷冻干燥获得牛血清白蛋白。
胎牛血清制备
胎牛血清制备Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】胎牛血清制备一、目的:为了保障胎牛血清产品质量的均一性和稳定性，制定以下操作方法，以规范胎牛血清生产制备。
二、操作方法：（一）采血1、挑选出大约8月龄以上的健康妊娠母牛，经剖腹获取小牛。
2、将小牛清洗干净后，侧放在万级洁净房间内的采血台上，固定四肢及头部。
3、用来苏水清洗心脏外部，刮去心脏外部牛毛，露出心脏外部一侧皮肤，用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心脏部位切开一道10厘米左右的切口，取出近心血管，先用2%碘酒消毒，再用75%的酒精消毒，用止血钳夹住血管，切开1厘米左右的切口进行插管，插好管后打开血管的止血钳，让牛血顺采血管流入另一个洁净房间内的采血瓶中。
5、采血瓶采血前经干烤灭菌（180℃ 2小时）后，按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口，于采血前半小时放入37℃恒温箱备用。
采血前先晃动瓶内生理盐水，使其充分湿润瓶壁后倒出，再进行采血并加塞封口。
将采血后的采血瓶放37℃恒温室2小时，再放入4℃冷库 4小时以备离心。
（二）离心将准备好的采血瓶放入离心套筒调好平衡后，对称放入离心机，按1800转/分钟离心50分钟后，放入4℃冷库备用。
（三）抽血清取出4℃冷库离心好的采血瓶，注意轻抬轻放，以免将下层血块和血清混层。
将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的5000ml大瓶的抽气孔一端的管子接好空气滤器，再接到压缩机抽气口上。
打开压缩机，用抽血清孔的管子轻轻抽取采血瓶内的上清液，注意控制好抽管，避免抽到下层血块。
将抽好的血清分装，即为粗制胎牛血清，放入-20℃冷库冷藏备用。
（四）血清过滤1、将-20℃冷库内的粗制血清取出化冻。
2、将化冻后的粗制血清用经过高压灭菌的12层医用脱脂棉纱布进行初滤。
3、把初滤后的血清倒入大罐进行混合。
4、将装好滤芯的滤器做密封性试验和发泡试验合格后，经过高压灭菌，在洁净室内用无菌操作法将滤器按滤柱孔径由大到小的顺序进行组装，并装上压力表。
一种用于体外细胞培养的中药含药血清制备及鉴定方法
一种用于体外细胞培养的中药含药血清制备及鉴定方法在当今的医学研究中，体外细胞培养是一个非常重要的研究领域，它为疾病的治疗和理解提供了基础。
而在体外细胞培养中，血清是不可或缺的一部分。
传统上，常用的是胎牛血清或新生牛血清。
但是，由于这些血清来源的限制和质量的不稳定性，人们开始寻找其他替代品。
中药含药血清便是其中之一。
中药含药血清制备及鉴定方法对于保证体外细胞培养的质量和稳定性至关重要。
本文将从深度和广度两个方面来探讨这一主题。
1. 中药含药血清制备方法中药含药血清的制备方法多种多样，但其中最常见的是将中药提取物与动物血清混合，然后通过一系列的处理方法将其制备成符合体外细胞培养要求的含药血清。
其中的关键步骤包括中药提取物的获取、血清的制备、混合和稳定剂的添加等。
这一过程需要严格控制，以确保最终的中药含药血清符合质量要求。
2. 中药含药血清的鉴定方法为了确保中药含药血清的质量和稳定性，需要对其进行全面的鉴定。
这包括对其中药提取物的成分分析、血清的纯度和稳定性测试、混合和稳定剂的含量测定等。
这些鉴定方法需要依托先进的分析仪器和技术，以确保测试结果的准确性和可靠性。
从个人的角度来看，中药含药血清的制备及鉴定方法的研究对于中医药的现代化和国际化具有重要意义。
通过科学的方法和严格的标准，我们可以更好地利用中药资源，为体外细胞培养提供更可靠的血清来源，并且可以把中医药的疗效更好地展现给世界范围内的患者。
中药含药血清制备及鉴定方法是一个重要且复杂的研究领域，其深度和广度需要我们不断地去探索和完善。
只有通过科学严谨的研究和实践，我们才能更好地利用中药资源，推动中医药的现代化进程，为人类健康事业做出更大的贡献。
中药含药血清制备及鉴定方法是一个日益受到重视的研究领域。
在现代医学和生物技术领域，体外细胞培养技术已成为不可或缺的工具，用于疾病模型研究、药物筛选以及组织工程等领域。
而血清作为细胞培养基质中的重要成分，在维持细胞生长和功能方面发挥着关键作用。
动物血清制备实验报告
动物血清制备实验报告本实验旨在研究动物血清的制备方法，探究其应用领域及生物学意义。
实验原理：动物血清是一种含有丰富抗体及其他生物活性因子的生物制品，广泛应用于生物医学和生物技术领域。
其制备方法一般包括以下几个步骤：1. 动物免疫：选取合适的动物作为免疫体，通常选择小鼠、大鼠、兔子等。
根据需要，可选择单一抗原进行免疫，也可以采用多次免疫或多个抗原的混合免疫。
2. 收集血清：免疫后经过一定的时间，将动物取杀，取出血液，离心分离血浆，即可获得动物血清。
3. 补充试剂：血清属于液态制品，需要添加一定比例的防腐剂，如青霉素、链霉素、青霉素等，以防止细菌生长。
实验步骤：1. 准备免疫动物：选择健康、无特殊疾病的动物作为免疫体，并进行预免疫处理，增强动物免疫力。
2. 免疫处理：按照免疫计划，将免疫原与佐剂混合，并按照一定的途径注射到免疫动物体内，可以选择皮下注射、肌肉注射、腹腔注射等。
3. 动物管理：在免疫过程中，需要对动物进行日常管理，包括喂养、环境控制、体温测量等。
4. 血液采集：根据免疫计划，逐步采集免疫动物的血液样本，可以选择尾静脉采血、眼眶静脉采血等方法。
5. 血清分离：采集完血液样本后，将其低速离心，得到纯净的血浆，血浆中包含了动物体内产生的丰富抗体及其他生物活性因子。
6. 血清处理：将血浆分装到无菌试管中，根据需要添加适量的防腐剂，进行混匀搅拌，然后密封保存于-20以下，以保证其稳定性质。
实验结果：通过动物血清制备的实验，可得到丰富的血清样品，其中富含抗体及其他活性分子。
这些血清样品可以应用于多个领域，包括：1. 免疫学研究：动物血清中含有反应特定抗原的抗体，可用于免疫组织化学、免疫电镜等实验，研究免疫反应机制。
2. 生物医学研究：动物血清中的特定抗体可以用于诊断疾病，如乙肝、艾滋病等，通过检测患者血清中的特定抗体水平，判断患者是否感染病原体。
3. 药物研发：动物血清中的抗体可以用作药物的检测和评价，通过检测药物与特定抗体的结合能力，评估药物的疗效和安全性。
fbs培养基生产工艺
fbs培养基生产工艺1.引言1.1 概述FBS（Fetal Bovine Serum）培养基是细胞培养中广泛使用的一种重要培养基之一。
它来源于牛胎血清，通过一系列的生产工艺制备而成。
FBS 培养基在细胞培养中起着至关重要的作用，提供了细胞生长所需的营养物质、因子及血清蛋白，为细胞提供了适宜的生长环境。
本文主要围绕FBS培养基的生产工艺展开讨论。
生产FBS培养基首先需要从产地获得牛胎血液，并进行初步处理，去除其中的杂质和不必要的成分。
接着，需要进行一系列的加工步骤，包括离心、过滤、冻干等，以获取高纯度的FBS培养基。
随着科学技术的不断进步，FBS培养基的生产工艺也在不断改进和优化。
生产工艺的改进旨在提高培养基的质量和稳定性，使其更适用于各种细胞培养的需求。
同时，生产工艺的优化也可以提高生产效率，降低成本，为广大科研人员和生物制药行业提供更加经济和可靠的FBS培养基。
本文将对FBS培养基的生产工艺进行详细的介绍和讨论，包括生产流程、关键步骤以及常见的质量控制措施。
同时还将探讨FBS培养基生产工艺的重要性和未来的发展趋势。
通过对FBS培养基生产工艺的深入了解，我们可以更好地理解其在细胞培养中的应用，并为相关领域的科学研究和生产实践提供指导和借鉴。
文章结构部分的内容应该着重介绍整篇文章的结构和组织方式，以便读者可以清楚地了解文章的脉络和内容安排。
以下是文章结构部分的一个示例：1.2 文章结构本文将从以下几个方面对FBS培养基生产工艺进行详细介绍和探讨：1. 概述：首先，我们将给出FBS培养基的基本概念和特点，介绍它在细胞培养中的重要作用。
我们将解释为什么FBS培养基在生物技术、医药研究等各个领域都具有广泛的应用价值。
2. FBS培养基的定义和作用：在这一部分，我们将详细介绍FBS培养基的成分和配方，解释它在细胞培养中的作用原理。
我们将深入探讨FBS 培养基对细胞生长、增殖和分化的影响，并结合实验数据和研究成果进行阐述。
血清使用问题的总结
拜力生物编辑整理：
一、血清灭活问题。
1、问：加到培养基中的血清必须灭活吗？
答：不是必须的，看做什么实验了。
2、问：四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗？
答：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞，如内皮细胞，血清是需要灭活，一般是
3、问：4℃冰箱内保存3个月的胎牛血清，能否继续使用？相关细胞和其它试剂的代价比较高，不敢轻易尝试。
答：需要长期保存的胎牛血清必须要保存在-20至-70℃的低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间不要超过1个月。
五、FBS可否代替人AB型血清？
问：我现在在做人的外周血b淋巴细胞的培养，文献上要求用人的AB型血清，但是我觉得很多代理商都没有。我想FBS代替，但不知道可否，我先是担心免疫排斥之类，但是我查了些资料后，应该不会(我觉得)。但是我又不能够TRY。因为细胞因子确实太贵了，所以咨询一下。谢谢！
答：常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间，而时间则从15分钟到60分钟不等，其中最常用的手法是56℃热处理30分钟。看看你养的细胞是什么，一般的话估计问题不大，要是很珍贵的细胞还是慎重一点啊。热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质， 在对补体灭活以外，热处理同时也对血清中可能存在的支原体具有灭活作用。现在好像不主张热灭活，热灭活经常给血清产品带来负面影响，对血清的加热经常导致血清中沉淀的产生，此外，有研究结果证实热灭活步骤减弱了胎牛血清和小牛血清对细胞的促粘附作用。
答：血清一定要灭活，可以先用无血清培养基加病毒孵育几小时以后再加血清。避免杂蛋白对病毒和宿主结合过程的干扰，一般是2-6小时，根据细胞的状态决定。血清不一定需要灭活，灭活的目的是将血清中的补体灭活！这要根据实际情况而定，如果没有把握那就灭活吧，也不麻烦56度半个小时。
胎牛血清生产工艺
胎牛血清生产工艺胎牛血清是一种重要的生物制品，广泛应用于细胞培养、疫苗制备、抗体生产等领域。
其生产工艺主要包括胎牛采集、血清分离和处理、灭菌和包装等环节。
下面我将具体介绍一下胎牛血清的生产工艺。
胎牛采集是生产胎牛血清的第一步。
一般选择3到8个月大的胎牛作为血清的来源，因为这个阶段的胎牛血液中含有丰富的血清成分。
采集时，必须确保操作者具备相应的专业知识和技能，以避免对胎牛产生伤害。
常用的采集方法包括扎颈静脉或腹腔进行穿刺，采取无菌措施，将采集的血液放入无菌容器中。
血清分离和处理是生产胎牛血清的第二步。
将采集得到的血液置于稳定的条件下，让血液自然凝固。
血液凝固后，采用离心技术将血凝块与血清分离开。
然后对血清进行过滤或超速离心，以去除其中的固体颗粒。
接着，对血清进行提纯和处理。
常用的处理方法包括冷冻干燥、冷冻、无菌过滤等。
灭菌是生产胎牛血清的必要环节。
不同厂家和用户对灭菌要求不同，灭菌方法也有所差异。
传统的灭菌方法有热处理和化学处理两种。
热处理一般采用高温短时的方法，如121℃高压蒸汽灭菌，或者采用干热灭菌。
化学处理一般包括酒精灭菌、过氧化氢灭菌等方法。
近年来，随着技术的发展，还出现了新型的灭菌方法，如紫外线灭菌、滤膜灭菌等。
最后，将处理好的胎牛血清进行包装。
常用的包装方式有玻璃瓶包装和塑料袋包装两种。
玻璃瓶包装适用于较小规模的生产，能够有效防止胎牛血清受到外界污染。
塑料袋包装适用于大规模的生产，能够减少人工操作，提高包装效率。
综上所述，胎牛血清生产工艺主要包括胎牛采集、血清分离和处理、灭菌和包装等环节。
通过合理的操作，可以得到高质量的胎牛血清，满足细胞培养、疫苗制备、抗体生产等领域的需求。
同时，在生产过程中要注重无菌操作，确保胎牛血清的质量安全。
关于血清的一些问题解读
关于血清的一些问题解读实验室里常会遇到的关于血清的问题1.血清的运用领域血清：离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，即血清。
血清可以抗病毒,增强抵抗力血清属于生物制剂.小牛血清含在离开母体后自身产生的一些代谢物质，当然也包括一些生长激素，而胎牛血清绝大部分的物质来自于母体。
血液凝固析出的淡黄色透明液体。
如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。
凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。
在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。
而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。
这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。
这些也都是与血浆区别之处。
但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。
为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。
血清(serum)细胞培养的发展，培养基的质量又是关键，而培养基的主要成份中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要甚至是难以替代的作用。
在动物血清的应用中牛血清又是最为广泛的，所以血清是医药生物技术产品中重要的原材料之一。
保证血清质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。
1.血清种类:目前用于组织培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。
选择用牛血清培养细胞的原因：来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。
牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有极为重要的功能。
牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。
浅析影响胎牛血清质量的几大因素
浅析影响胎牛血清质量的几大因素胎牛血清作为一种常用的培养基添加剂，被广泛用于细胞培养、疫苗制备、抗体生产等领域。
其质量的好坏直接关系到最终产品的质量和效果。
下面将重点分析影响胎牛血清质量的几大因素。
1.采集方式：采集胎牛血清的方式有两种，一种是直接采集胎牛静脉血，另一种是采集到胎儿自然脱落的胎盘血。
直接采集胎牛静脉血可以获得更多的血清，但胎牛的死亡率较高，容易造成血清污染和质量下降。
而采集胎盘血则减少了对胎牛的伤害，但血量较少，收集效率低。
因此，选择适当的采集方式可以更好地保证胎牛血清的质量。
2.饲养管理：胎牛的饲养管理直接关系到血清的质量。
饲养环境应该干净卫生，并严禁使用生长激素、抗生素和激素类药物等对胎牛进行干预。
合理的饲料和草料供应可以保证胎牛的健康成长，进而提高血清的质量。
3.血样处理：从采集到的胎牛血样中提取血清时，需要经过一系列处理步骤，如离心、分离、过滤等。
这些步骤的操作技术和条件都可能影响血清的质量。
离心速度和时间的不当可能导致沉淀和杂质的残留。
分离过程中，应避免血样与外界的接触，以避免污染。
过滤时应选择合适的滤膜和过滤器，以确保血清的纯净度。
4.保存条件：胎牛血清的保存条件对血清的质量起着重要作用。
一般来说，胎牛血清应存放在低温环境下，常见的保存温度为-20℃或-80℃，并避免频繁的冻融循环。
此外，胎牛血清应避免阳光直射和暴露在高温环境下，以防止脂质氧化和蛋白质降解。
适当的保存条件可以保持血清的活性和稳定性。
5.检测方法：血清的质量可通过多种方法来进行评估，如蛋白质浓度检测、免疫球蛋白含量检测、内毒素浓度检测等。
选择合适的检测方法，可以及时发现质量问题，并进行调整和改进。
定期对血清质量进行检测，是保证血清质量的重要手段。
总之，影响胎牛血清质量的因素很多，包括采集方式、饲养管理、血样处理、保存条件和检测方法等。
只有综合考虑这些因素，并采取相应的措施，才能有效提高胎牛血清的质量，满足各种应用的需求。
胎牛血清制备
胎牛血清制备一、目的:为了保障胎牛血清产品质量的均一性和稳定性，制定以下操作方法，以规范胎牛血清生产制备。
二、操作方法：（一）采血1、挑选出大约8月龄以上的健康妊娠母牛，经剖腹获取小牛。
2、将小牛清洗干净后，侧放在万级洁净房间内的采血台上，固定四肢及头部。
3、用来苏水清洗心脏外部，刮去心脏外部牛毛，露出心脏外部一侧皮肤，用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心脏部位切开一道10厘米左右的切口，取出近心血管，先用2%碘酒消毒，再用75%的酒精消毒，用止血钳夹住血管，切开1厘米左右的切口进行插管，插好管后打开血管的止血钳，让牛血顺采血管流入另一个洁净房间内的采血瓶中。
5、采血瓶采血前经干烤灭菌（180℃ 2小时）后，按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口，于采血前半小时放入37℃恒温箱备用。
采血前先晃动瓶内生理盐水，使其充分湿润瓶壁后倒出，再进行采血并加塞封口。
将采血后的采血瓶放37℃恒温室2小时，再放入4℃冷库 4小时以备离心。
（二）离心将准备好的采血瓶放入离心套筒调好平衡后，对称放入离心机，按1800转/分钟离心50分钟后，放入4℃冷库备用。
（三）抽血清取出4℃冷库离心好的采血瓶，注意轻抬轻放，以免将下层血块和血清混层。
将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的5000ml大瓶的抽气孔一端的管子接好空气滤器，再接到压缩机抽气口上。
打开压缩机，用抽血清孔的管子轻轻抽取采血瓶内的上清液，注意控制好抽管，避免抽到下层血块。
将抽好的血清分装，即为粗制胎牛血清，放入-20℃冷库冷藏备用。
（四）血清过滤1、将-20℃冷库内的粗制血清取出化冻。
2、将化冻后的粗制血清用经过高压灭菌的12层医用脱脂棉纱布进行初滤。
3、把初滤后的血清倒入大罐进行混合。
4、将装好滤芯的滤器做密封性试验和发泡试验合格后，经过高压灭菌，在洁净室内用无菌操作法将滤器按滤柱孔径由大到小的顺序进行组装，并装上压力表。
把滤器大孔径一端和蠕动泵出口进行连接。
抗体的制备方法与原理
抗体的制备方法与原理一、抗血清的制备有了质量好的抗原，还必须选择适当的免疫途径，才能产生质量好（特异性强和效价高）的抗体。
（一）用于免疫的动物作免疫用的动物有哺乳类和禽类，主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等，实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。
动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足够数量的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，最好为///雄性，此外还需十分注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。
若用兔，最好用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。
（二）免疫途径免疫途径有多种多样，如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等，一般常用皮下或背部多点皮内注射，每点注射0.1ml左右。
途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物学活性抗原，一般不宜采用静脉注射。
（三）佐剂由于不同个体对同一抗原的反应性不同，而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱，因此常常在注射抗原的同时，加入能增强抗原的抗原性物质，以刺激机体产生较强的免疫反应，这种物质称为免疫佐剂。
佐剂除了延长抗原在体内的存留时间，增加抗原刺激作用外，更主要的是，它能刺激网状内皮系统，使参与免疫反应的免疫活性细胞增多，促进T细胞与B细胞的相互作用，从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。
常用的佐剂是福氏佐剂（Freund adjuvant）,其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份，羊毛脂与石腊油的比例，视需要可调整为1：2～9（V/V），这是不完全福氏佐剂，在每毫升不完全佐剂加入1～20mg 卡介苗就成为完全佐剂。
配制方法：按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内，用超声波使之混匀，高压灭菌，置4℃下保存备用。
免疫前取等容积完全或不完全佐剂与免疫原溶液混合，用振荡器混匀成乳状，也可以在免疫前取需要量佐剂置乳钵中研磨，均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液（其中加卡介苗3～4mg/ml或不加），加完后再继续研磨成乳剂，滴于冰水上5～10min内完全不扩散为止。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
胎牛血清制备
Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
胎牛血清制备
一、目的:
为了保障胎牛血清产品质量的均一性和稳定性，制定以下操作方法，以规范胎牛血清生产制备。
二、操作方法：
（一）采血
1、挑选出大约8月龄以上的健康妊娠母牛，经剖腹获取小牛。
2、将小牛清洗干净后，侧放在万级洁净房间内的采血台上，固定四肢及头部。
3、用来苏水清洗心脏外部，刮去心脏外部牛毛，露出心脏外部一侧皮肤，用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心脏部位切开一道10厘米左右的切口，取出近心血管，先用2%碘酒消毒，再用75%的酒精消毒，用止血钳夹住血管，切开1厘米左右的切口进行插管，插好管后打开血管的止血钳，让牛血顺采血管流入另一个洁净房间内的采血瓶中。
5、采血瓶采血前经干烤灭菌（180℃ 2小时）后，按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口，于采血前半小时放入37℃恒温箱备用。
采血前先晃动瓶内生理盐水，使其充分湿润瓶壁后倒出，再进行采血并加塞封口。
将采血后的采血瓶放37℃恒温室2小时，再放入4℃冷库 4小时以备离心。
（二）离心
将准备好的采血瓶放入离心套筒调好平衡后，对称放入离心机，按1800转/分钟离心50分钟后，放入4℃冷库备用。
（三）抽血清
取出4℃冷库离心好的采血瓶，注意轻抬轻放，以免将下层血块和血清混层。
将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的5000ml大瓶的抽气孔一端的管子接好空气滤器，再接到压缩机抽气口上。
打开压缩机，用抽血清孔的管子轻轻抽取采血瓶内的上清液，注意控制好抽管，避免抽到下层血块。
将抽好的血清分装，即为粗制胎牛血清，放入-20℃冷库冷藏备用。
（四）血清过滤
1、将-20℃冷库内的粗制血清取出化冻。
2、将化冻后的粗制血清用经过高压灭菌的12层医用脱脂棉纱布进行初滤。
3、把初滤后的血清倒入大罐进行混合。
4、将装好滤芯的滤器做密封性试验和发泡试验合格后，经过高压灭菌，在洁净室内用无菌操作法将滤器按滤柱孔径由大到小的顺序进行组装，并装上压力表。
把滤器大孔径一端和蠕动泵出口进行连接。
5、用蠕动泵将大罐内的血清送入滤器进行过滤。
6、将滤出的血清在百级净化操作台上进行分装后，即为精制胎牛血清，送-20℃冷库储存。
三、注意事项：
1、在操作过程中，要经常用75%的酒精对手部进行消毒，同时避免接触牛血或血
清，特别是有伤口的部位，以免感染。
2、在采血插管过程中，插管避免接触到未消毒的部位，尽量深入血管，使牛血能
快速流完为好，并固定好插管，避免脱离动脉血管。
3、在抽血清的过程中，控制好压缩机的压力大小，避免压力过大，抽到下层的沉
淀物。
4、在过滤过程中，控制好压力的大小，避免超过滤柱工作压力。