常见荧光定量PCR仪汇总
四种常见PCR仪的区别及运用-科邦实验室-2020.6.24
四种常见PCR仪的区别及运用PCR扩增仪（俗称PCR仪）PCR：PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
PCR仪实际就是一个温控设备，能在95℃，55℃，72℃之间很好地进行温度控制。
PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪，是利用PCR(Polymerase chain reaction，聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备，被广泛运用于医学、生物学实验室中，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制以及亲子鉴定等。
根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR 仪，原位PCR仪，实时荧光定量PCR仪四类。
1). 普通PCR仪（2万以下，赛默飞、伯乐、大龙，艾本德）一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪，也叫普通PCR仪。
如果要做不同的退火温度需要多次运行。
主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。
该仪器主要应用于科学研究、教学、医学临床、检验检疫等机构。
如:启步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型2). 梯度PCR仪（2万-8万，赛默飞、伯乐、大龙，艾本德）一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（温度梯度，通常有12种温度梯度）的PCR仪称作梯度PCR仪。
因为被扩增的不同DNA片段，其最适退火温度是不同的，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR 扩增，就可以筛选出表达量高的最适退火温度，进行有效的扩增。
用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。
PCR仪的种类
PCR仪的种类1. 实时定量PCR仪实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction，简称实时定量PCR）是一种用于快速、敏感且准确测定DNA、RNA拷贝数目的方法。
实时定量PCR仪是进行实时定量PCR实验的关键设备之一。
实时定量PCR仪的主要特点是能够对PCR反应过程中产生的荧光信号进行即时检测和分析，从而实现实时监测PCR反应的进程，并测定样品中目标序列的拷贝数。
实时定量PCR仪的应用非常广泛，包括基因表达检测、病原体检测、单核苷酸多态性分析等。
其高灵敏度、高特异性以及广泛的应用领域使其成为现代分子生物学和遗传学研究的重要工具。
2. 普通PCR仪普通PCR仪是进行普通聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，简称PCR）实验的基本设备。
普通PCR仪可以进行常规PCR实验，即通过PCR反应在体外扩增目标DNA片段。
普通PCR仪的特点是温控系统可以实现快速、精确的温度调节，从而使PCR反应在不同温度下的环境条件得以满足。
普通PCR仪的操作简单、成本较低，适用于常规PCR 实验的需求。
普通PCR仪的应用广泛，包括基因克隆、DNA测序、基因检测等。
它已成为分子生物学、医学和生物技术等领域中的一种基础设备。
3. 数字PCR仪数字PCR仪是一种相对较新的PCR仪器，它采用数字分析的方法对PCR产物进行定量，具有极高的准确性和可靠性。
数字PCR仪的工作原理是将PCR反应体系分成数百、甚至上千个微小反应体，从而形成多个独立的PCR反应。
每个微小反应体内含有目标序列与参考序列，通过数百或数千个微小反应的计数结果进行定量分析。
这种方法可以极大地降低PCR反应中的误差，提高PCR反应的准确性。
数字PCR仪的应用主要集中在绝对定量PCR、稀释样品的精确定量、病原体检测等领域。
其高准确性和可靠性使其在遗传学研究和临床诊断中得到广泛应用。
检验科设备清单
3 尿液有形成分分析 4 半自动血沉仪 5 自动血沉仪 6 血液细胞分析仪 7 血液细胞分析仪 8 血液细胞分析仪 9 发学发光仪 10 发学发光仪 11 血气分析 12 干化学分析 13 电解质 14 冰点渗透压 15 各种规格显微镜 完善的临床生化、免疫检验诊断系统 1 全自动生化分析仪 2 全自动酶免 3 糖化血红蛋白分析仪 4 蛋白电泳仪 5 酶标仪、洗板机 6 微量振荡器、摇床、振荡器 7 微量元素分析仪 8 离心机 9 ESCO生物安全柜 10 开盖机 11 全自动酶免疫发光仪 12 电化学发光仪 13 全自动酶免疫发光 14 特定蛋白分析仪 15 超低温冰箱
微生物室 微生物室 微生物室 微生物室 微生物室 微生物室 无菌配制室 微生物室 无菌配制室 无菌配制室 无菌配制室 微生物室 微生物室 微生物室 微生物室 微生物室
临检室 临检室
临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室 临检室
生化室 免疫室 生化室 生化室 免疫室 免疫室 生化室 生化室 生化室 生化室 免疫室 免疫室 免疫室 免疫室 免疫室
SYSMEX 迅达 SYSMEX SYSMEX SYSMEX Beckman ROCHE罗氏 丹麦雷度 美国强生 迅达 OLYMPUS
奥林帕斯 TECAN 法国西比亚 安图 日立HITACHI Anke BECET 贝克曼库尔特 罗氏 德普 贝克曼库尔特 SANYO
位置 PCR-Ⅰ区 PCR-Ⅱ区 PCR-Ⅱ区 PCR-Ⅱ区 PCR-Ⅱ区 PCR-Ⅲ区 PCR-Ⅲ区 PCR-Ⅳ区 PCR-Ⅳ区 细胞遗传室 细胞遗传室 细胞遗传室 细胞遗传室 细胞遗传室 细胞遗传室 细胞遗传室 血液室 血液室 血液室 血液室 血液室
常见荧光定量PCR仪汇总讲解
而3320为双通道检测（FAM，HEX），支持三种荧光染料
杭州 博日FQD-48a
性能描述
FQD-48a具有单通道和4通道两种规格，通
过硬件转换可升级至4通道，支持0.2mlPCR 管，支持本公司体系：40ul 梯度温度范围：1℃~24℃ 升温速率：4.0℃/S 光路：LED激发+PMT检测
杭州 博日FQD-66A
孔数：96孔（10-100ul）检测1小时,384孔（5-20ul）检
测40min 材料：专用板，理论支持本公司PCR体系：40ul
集多个优点于一身，目前市面上最强悍的PCR仪
LightCycler Nano
优缺点：
检测通道：12个以上 加热模式：空气加热/冷却
升温：20℃/S
孔数： 32孔（4×8联管） 理论支持本公司PCR体系：40ul,价格为LC480的一半
进口定量PCR仪器厂商
市 场 占 有 率
ABI
ROChe （罗氏）
Bio-Rad （伯乐）
市 场 价 格
ROChe ABI Bio-Rad
ROChe
厂家介绍：
市 场 罗氏公司始创于1896年，总部位于瑞士巴塞尔，主要涉及药品、医疗诊 占 断、维生素和精细化工、香精香料等四个领域。LightCycler以运行速度 有 快而著称，在国内市场占有率单款最高 率
支持本公司体系：40ul
杭州 博日 linegene-3310/3320
性能描述
linegene-3310/3320具体的型号为FQD -33a 。最多检测33个样本， 支持0.2mlPCR管和8联管，支持本公司体系：40ul 升温速率：6℃/秒，通过Peltier技术控温 光路：LED激发+PMT检测 其中3310为单通道检测（FAM），支持两种荧光染料 （FAM/SYBR）
各款荧光定量PCR仪的性能比较
各款荧光定量PCR仪的性能比较本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作,用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪,如ABI5700，ABI7700,ABI7000，ABI7300，ABI7500,MJ opticon，MJ opticon2，bio—rad ICycler,LightCycler1.5，roter—gene3000，Stratagene Mx3000P，line-gene等等。
这种仪器各有各的特点，但都存在不足之处。
ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多，成系列,但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光，因而已经退出历史舞台,尤其是ABI7700，不但很贵，而且采用苹果机电脑,使用很不方便.ABI7000目前也已经淘汰,我用的这台仪器老出问题，曲线极不光滑，但同样的反应体系在国产机杭州博日line-gene上曲线非常好，在ABI7500上曲线也很光滑，所以，本人估计是ABI7000设计上有不足之处.而且卤钨灯特别容易坏，在南方，我们实验室平均5个月换一个，配件容易坏，后续使用成本就会高一些。
现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。
另外我个人感觉ABI7900（ABI公司第二代产品）有些华而不实，价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的，硬件上跟ABI7700差不了太多，但性能指标还不如ABI7500(ABI公司第三代产品）,硬件设计上也不如ABI7500合理。
所以这个型号的仪器，谁买了，用的时候会不呼上当。
ABI7500是ABI公司最成功的产品，各方面性能都不错，虽然加热模块还是有一些边缘效应，但使用中央的孔位效果可以得到保证,在96孔板使用中间的48个孔位,结果都能得到保证。
总的来说，ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的，其仪器在科研上还是可以用的，但由于硬件设计上的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，并且占用了一个检测通道。
常见荧光定量PCR仪汇总
常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪（Fluorescence Quantitative PCR Instrument）主要有以下几种：1. Applied Biosystems 7500 Fast System：该系统是ABI公司旗下产品之一，具有优秀的性能和稳定性。
其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。
该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。
2. Bio-Rad CFX96 Touch System：这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一，具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。
它支持多种共轭染料和探针，可以同时检测多个靶序列，适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。
3. Roche LightCycler 480 System：这是一款高通量的PCR仪，可同时处理多达384个孔的样品，适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。
该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力，可提供更准确和一致的PCR结果。
4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System：该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择，可以满足不同的研究需求。
它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度，适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。
5. Qiagen Rotor-Gene Q：这是一款高通量PCR仪，可同时处理多达72个样品。
它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力，适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。
6. Stratagene Mx3000P/QPCR System：这是Agilent Technologies旗下的产品，具有高精度和稳定性的特点。
它支持多种探针和染料，可以同时检测多个靶序列，适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。
PCR实验室主要仪器设备和耗材清单
PCR实验室主要仪器设备
区域
序号
所需仪器
数量
型号 规格
试剂准备区
1
冰柜
1
－20℃
2
移液器
1
0.5-10ul
移液器
1
20－200ul
移液器
1
10-100ul或者5-50ul或者10-200ul
3
混匀器
1
200－2500转/分
4
微型离心机
1
Mini-6k
标本制备区
1
金属浴
若干，建议带滤芯，选择长款（避免污染枪）
PCR管，单管
若干，建议购买进口
1.5ml离心管
若干，建议购买进口
小镊子
至少2个
样本管架（放采样瓶用）
2个Байду номын сангаас
一次性橡胶手套和PE手套
若干，橡胶手套建议无粉
挂衣钩（挂毛巾或实验服）
建议每个分区一件实验服
垃圾桶（配生物垃圾袋）
3个
酒精喷壶
3个
计时器
2个
其他实验用品：75%酒精、次氯酸钠片或者84消毒液、生理盐水、浮板（如果是水浴会用到）、纸抽、棉签、剪刀、冰袋、记号笔、吸水纸等
1
普通(达到100℃)
2
冰箱
1
4℃，－20℃
3
高速离心机
1
300-16000转/分(能达到14000)
4
混匀器
1
200－2500转/分
5
生物安全柜或净化工作台
1
单人单面操作
6
洗涤池
1
500×500 mm
7
移液器
荧光定量PCR仪器简介-liuyi
Taqman 探针
4、荧光定量PCR仪的原理
5、荧光定量PCR仪的应用
基础科学研究 疾病检测与治疗检测、预后 优生优育及遗传筛查 基因表达分析 临床医学应用 肿瘤分型/耐药性评估 食品卫生检疫及安全评估 医院检验科、感染病科等 疾控中心 血站、血液中心 研究所等机构 食品监督管理局 海关进出口检疫
Peltier-based system 96-well(fast) Fast-mode: +/-3.5℃/s +/-0.5℃ 48-well Fast-mode: +/-2.2℃/s +/-0.25℃ 96-well Fast-mode: +/-2.2℃/s +/-0.25℃
温度精确度
光学系统
卤钨灯，单 色激发，4色 检测，CCD
1. Thermal Block Cycler包括了样本底座（96孔或384孔），Peltier元件，配合 Therma-BaseTM 热均衡器，银质散热块和电子元件。 2. Block cycler cover (热盖） 3. Multiwell plate loader, Multiwell plate detector, Multiwell plate bar-code scanner (条形码扫描装置）， Block Cycler door with fans.
Wavelength (nm)
石英卤钨灯激发范围 (350-750nm) 激光的激发范围 (488-514nm)
3、检测装置比较
光电倍增管(PMT) 电荷耦合装置（CCD） 光电二极管(PDT)
优点
信噪比高； 背景噪音信号低； 对较低的光信号敏感度 高； 检测范围宽。 成本较高；
7500型荧光定量PCR仪
●
●
2
3
AB具有的Real-Time PCR相关的知识产权
● ● ● ●
PCR仪器专利 定量PCR仪器专利 VIC dye TaqMan MGB探针
4
ABI提供基因分析全套解决方案
基因序列分析，SNP和突变分析，STR基因分型，基因表达分析 ● ● ● ● • ●
5
常规PCR仪
– 2720、9700、9800、Veriti；
● ● ● ● ●
Bacillus anthrasis – 炭疽芽胞杆菌 Yersinia pestis – 鼠疫杆菌 Francisella tularensis – 土拉弗朗西斯菌 Pseudomonas aeruginosa – 绿脓杆菌 Staphylococcus – 葡萄球菌
– 阪崎肠杆菌
其他检测试剂盒
● ● ● ● ●
药物代谢基因分型分析试剂盒 病原体检测试剂盒 转基因检测试剂盒 禽流感检测试剂盒 ……
32
全面解决方案
● ● ● ●
安装培训 用户培训 售后服务
全面的试剂、耗材支持 ● …………
ABI不仅仅提供仪器
33
Q & A
34
Thanks!
4006209660 cnmcbsupport@
独特的茎环设计，有效区分前体 和成熟的microRNA； 检测灵敏度高，仅需1-10ng总 RNA或类似样品； 检测速度快，两步反应3小时内 得到高质量的结果； 涵盖人、线虫、果蝇、拟南芥、 小鼠和大鼠等众多物种，1000多 个检测试剂盒可供选择。
27
miRNA研究举例——生殖细胞瘤表达谱
DG YST
7
7500定量PCR仪热循环系统
荧光定量PCR仪参数比照表
这个表格反映的是碱基的不同，带来的Tm值的变化，可以看出A/T之间的突变，需要温度分辨率小于﹤0.2℃才能区分开，而象AB等其它公司的分辨率是± 0.25℃，所有它是区别不开第四类的SNP变化的，HRM技术的发明者，曾发表过一篇文章，用市场上所有能做HRM机器的定量，做了一次比较，结果显示QIAGEN Rotor-Gene Q 是能做的最好的一个公司；文章全文可见以下链接：Herrmann et al 2007 Clinical Chemistry 53,/cgi/content/abstract/clinchem.2007.088120v1 Expanded Instrument Comparison of Amplicon DNA Melting Analysis for Mutation Scanning and GenotypingFig 1 (detail) Normalized melting curves of a 110 bp β-globin amplicon (triplicate HRM data)以下是一些关于定量PCR HRM（High Resolution Melt中文：高分辨率熔解曲线）一些介绍！（QIAGEN）有2个最显著特点：1）是温控精度非常高（温度均一性：±0.01℃，温度分辨率：±0.02℃）及升降温速度非常快（升温可达15 ℃/秒，降温可达20℃/秒）2）是区别与其它的公司定量PCR的是它的HRM功能，这个是其它厂家都无法能做到的（比如ABI 7500Fast及其它公司这种板式加热系统，因为它的温度分辨率达不到）QIAGEN 是一个集遗传分析和定量完美结合的一款机器;现阶段,大家检测SNP时都用一贯的检测方法,包括测序,探针还有DHPLC等等,而甲基化大多用MSP.至于HRM技术并不为大家所熟知,有两个原因:1)适合做HRM技术的仪器在国内的普及程度不高,具我了解能真正能够做HRM的只有QIAGEN Roter-Gene Q+HRM系列和Idaho LightScanncer.Roche；其中QIAGEN 在其温度控制及软件分析上是做的最好的. （其它的比如ABI 7500 Fast及伯乐也对外宣传它的HRM功能，但由于它的温控精度，决定了它做HRM功能是做不好的，可见也是一个赶时髦的功能，也只能通过软件的模拟来处理）2)HRM的实验灵敏度太高,影响实验因素过多,很多人都做了,但是就是做不出来.因此就放弃,就换用其他比较成熟的方法.殊不知,HRM技术的检测方法有其他技术难以比拟的优势，不仅能实现高通量和高精度的同时,PCR和荧光定量在同一管内进行,能够有效避免假阳性.（QIAGEN 在上海有个用的非常好的用户，是交通大学华山医院的关明主任，用这个机器发表了一篇非常好的文章，如果老师有兴趣，可过去看看）作为新一代的遗传扫描工具,HRM具有"简,效,快,廉"等其他技术难以比拟的优势:简:无需序列特异性探针,不受碱基位点局限,同时检出已知或未知突变、SNP和甲基化位点：闭管操作，避免交叉污染。
常见荧光定量PCR仪汇总
技术发明史
概述
1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出 1996年由美国Applied Biosystems公司推出
技术发展趋势
从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法
从最初的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长光源
进口定量PCR仪器厂商
ABI
市
场
占
ROChe （罗氏）
缺点：价格昂贵，体积大
综上所述，以上几款为ABI常见的荧光定量PCR仪器，像ABI7700,7000已 被市面所淘汰。ABI系列是市场占有率最大的荧光PCR仪器厂商，但由于 硬件设计上的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，且ABI维修费用相当 高。
进口定量PCR仪器厂商
ABI
市
场
占
ROChe （罗氏）
优缺点：
ABI ViiA7
ABI第7代产品，优点比7900有所提升，理论支持本公司PCR体系：40ul 1.检测孔数：96孔板，384孔板，Taqman 低密度表达谱芯片 2.激发光源：齿钨灯 3.加热模块：半导体加热模块，升温3℃/S，温控准确性好。 4.运行时间：35min完成40个循环。 5.检测通道：6通道，除去ROX后5通道
测40min 材料：专用板，理论支持本公司PCR体系：40ul 集多个优点于一身，目前市面上最强悍的PCR仪
优缺点：
LightCycler Nano
检测通道：12个以上 加热模式：空气加热/冷却 升温：20℃/S 孔数： 32孔（4×8联管） 理论支持本公司PCR体系：40ul,价格为LC480的一半
综上所述：LightCycler系列检测速度快，稳定性非常好，灵敏度明 显比其它仪器高。但操作过程是以毛细管进行，操作时应特别小心。 Roche使用的耗材的通用性差，成本高(毛细管)，且每次的检测数量低。
荧光定量PCR实验室设备清单(卫生部推荐)
PCR扩增区和产物分析区
17
专用工作服和衣柜
PCR扩增区和产物分析区
18
荧光定量PCR检测仪
PCR扩增区和产物分析区
样品准备区
9
生物安全柜B2级
样品准备区
10
冷冻高速离心机（丙肝专用）
样品准备区
11
恒温金属浴
样品准备区
12
混匀器
样品准备区
13
可调式移液器(5-40ul)，(20-200ul)，(200-1000ul)一套
样品准备区
14
专用工作服和衣柜
样品准备区
15
紫外线消毒灯
PCR扩增区和产物分析区
16
可调式移液器（1-10µl），(5-40ul)，(20-200ul)一套
荧光定量PCR实验室设备清单（卫生部推荐）
序号
仪器设备、辅助材料名称
放置地点
1
冰箱
博日荧光定量pcr仪参数
博日荧光定量pcr仪参数
博日荧光定量PCR仪（FQD-96A）的主要参数包括：
1. 样本容量：96微孔板（全裙）、12×8联管、96×单管（底部透明）。
2. 动力学范围：10-10^10 Copies/ml。
3. 激发光波长：≥nm。
4. 检测波长：nm。
5. 检测通道：标准配置4通道，可升级6通道。
6. 适用染料：F1: FAM SYBR GreenⅠ；F2: VIC HEX JOE
Cy3,NED,TAMARA；TET；F3:tTEXAS RED ROX；F4: CY5；F5: ；F6预留通道（可选双杂交探针检测用通道）。
7. 检测器：长寿命LED光源，PMT检测器。
8. 模块工作温度范围：4-105℃（最小设置刻度：℃），具有SOAK低温保存功能。
这些参数主要关注样本容量、荧光检测波长、激发光波长等关键技术指标，能够为研究人员在实验设计、仪器选择和参数设定方面提供重要参考。
北京荧光定量pcr
北京荧光定量pcr
在北京，有多种品牌和型号的荧光定量PCR仪可供选择。
其中，北京乐普医疗科技有限责任公司提供的全自动医用PCR仪96通道，价格为30.00万至38.00万，具有96孔的样本通量，线性范围为1～1010copies，控温精确度≤±0.1℃，温度波动范围≤±0.1℃，温度均匀性≤±0.3℃，梯度温度为12列梯度温度，热盖温度范围为30℃～110℃，全封闭3D电动热盖，可以实现试管压力恒定，自动升降。
此外，山东济南的大龙实时荧光定量PCR系统Accurate96-x6，覆盖多数荧光，操作便捷，价格为30.40万至50.00万。
北京顺义的大龙实时荧光定量PCR仪，控温技术为半导体制冷片加热制冷技术，控温模式根据加液量自动选择BLOCK和模拟TUBE两种控温模式，价格为38.00万。
荧光定量PCR实验室配置清单全套
荧光定量PCR实验室配置清单
PCR实验室是新冠病毒催生的一个快速检测核酸实验室，各大医院及大型检测机构均配置，国内各个地区核酸检测提供快速的应急相应，为疫情防控做出来巨大的贡献。
PCR实验室分为四个区域：一、准备区，二、制备区，三、扩增区，四、分析区。
一，准备区主要需要的设备包括
1、分析天平：称量用具
2、2-8℃冷藏箱：保存样品
3、-15℃冰箱：冷冻样品
4、高压灭菌锅：高压蒸汽灭菌
5、移动紫外灯（各个区可移动使用）
二、标本区设备包括
1、高速冷冻离心机：低温分离
2、水浴锅：加热恒温
3、2-8℃冷藏箱：保存样品
4、-20℃低温冰箱：低温冷冻，保存样品
5、多管旋涡混匀器：样品混匀
6、超声波破碎仪：处理大分子
7、移液器：单通道（1u~10u、10u~20u、5u~50u、200u~1000u）
8、多通道移液器：8联管
三、扩增区
1、荧光定量PCR：DNA扩增
2、离心机：分离样品
四，分析区
1、自动DNA核酸提取仪：提取DNA
2、电泳仪和电泳槽
3、超净工作台
4、生物安全柜（A2双人）
5、病毒灭火箱
对应的耗材：离心管、移液器枪头，试机
现在应急相应速度不断提高，即使没有配套的PCR实验室，移动方舱也很方便快捷，这就是中国速度！。
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决定其通道数
荧光定量PCR技术的优点
ABI荧光定量PCR仪
厂家介绍：
市 场 美国应用生物系统公司，经营生产生命科学设备 占 有 仪器和试剂，其荧光PCR仪成系列，市场占有率高。 率
荧光PCR仪型号：
ABI 7500
﹥
ABI 7300
﹥ ABI 7900 ﹥ ABI stepone ﹥ABI ViiA7
荧光PCR仪型号：
LightCycler 2.0
﹥ LightCycler﹥LightCycler 480﹥ LightCycler Nano
代理公司：
上海浩然，达安基因，上海博尼，山东艾克韦，济南朋远，北京博凌，上海
众华，北京普生瑞等
LightCycler
优缺点：
检测通道：3通道 加热模式：离心式空气加热/冷却 升温：20℃/S 孔数：32孔 材料：玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格 实验成本：体系小，成本低 理论支持本公司PCR体系：20ul
性能描述
FQD-66A具有4通道规格，为博日公司最新
产品，支持0.2mlPCR管 检测通道：4通道，同时具有4波长激发光
梯度温度范围：1℃~24℃
升温速率：4.0℃/S 光路：LED激发+PMT检测 支持本公司体系：40ul
厦门安普利 9800GeneLight 2400
激发光源：固态激光
检测光源：光电倍增管，灵敏度是CCD、光电二极管的10000倍以上 加热系统：采用电阻薄膜加热 ，速率为1.5℃/S，弥补了空气加热造 成的受热不均，温差较大的缺陷，又克服了半导体加热所致的热效应 较低，元器件易损
ABI
ROChe （罗氏）
Bio-Rad （伯乐）
市 场 价 格
ROChe
ABI Bio-Rad
如何选择荧光定量 PCR 仪器？
1 、仪器使用的广泛程度
2 、仪器的检测通量（反应孔数）
3、仪器的通道数量
4、耗材的开放性
5、硬件设计特点
6、运行速度
7、灵活性
热模块系统
荧光定量PCR的光学系统
3.进样时可以采用ABI自动机械臂，方便快捷
4.加热模块：半导体加热模块，升温3℃/S 缺点：
体积大，价格贵，性能比上不如7500。
各孔板基座
96孔板
384孔
Байду номын сангаас8联管
芯片板
ABI 7500
优缺点：
7500是ABI第三代PCR产品，目前ABI市场占有率最高，最成功PCR仪。 价格40万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul 检测孔数：兼容96孔和8联管。 检测通道：5通道，除去ROX后4通道。 加热模块：半导体加热模块，升温3℃/S 激发光源：齿钨灯。
CFX96
优缺点：
1.检测孔数：96孔板 2.激发光源：6色LED 3.加热模块：其基座为半导体加热模块，反应模块为 专利蜂巢设计，升温5℃/S，温控准确性好。 4.运行时间：55min完成40个循环。 5.检测通道：5通道，PMT扫描机制，无需ROX校正 6.可以脱离电脑控制，独立运行
7.具有温度梯度功能
综上所述：LightCycler系列检测速度快，稳定性 非常好，灵敏度明显比其它仪器高。但操作过程是以 毛细管进行，操作时应特别小心。Roche使用的耗材 的通用性差，成本高(毛细管)，且每次的检测数量低。
进口定量PCR仪器厂商
市 场 占 有 率
ABI
ROChe （罗氏）
Bio-Rad （伯乐）
市 场 价 格
ROChe
ABI Bio-Rad
Bio-Rad 厂家介绍：
伯乐自1952年在美国成立，在50多年中为临床诊断和生命 科学研究市场提供了广泛的新型产品和服务，始终居于科
学发现的中心地位。
荧光PCR仪型号：
Chromo 4 Opticon 2 CFX96
IQ 5
代理公司：
上海劢瑞，上海甄明，创博环球，北京赛伯乐，黑龙江万联顺等
进口定量PCR仪器厂商
市 场 占 有 率
ABI
ROChe （罗氏）
Bio-Rad （伯乐）
市 场 价 格
ROChe
ABI Bio-Rad
ROChe
厂家介绍：
市 场 罗氏公司始创于1896年，总部位于瑞士巴塞尔，主要涉及药品、医疗诊 占 断、维生素和精细化工、香精香料等四个领域。LightCycler以运行速度 有 快而著称，在国内市场占有率单款最高 率
孔数：96孔（10-100ul）检测1小时,384孔（5-20ul）检
测40min 材料：专用板，理论支持本公司PCR体系：40ul
集多个优点于一身，目前市面上最强悍的PCR仪
LightCycler Nano
优缺点：
检测通道：12个以上 加热模式：空气加热/冷却
升温：20℃/S
孔数： 32孔（4×8联管） 理论支持本公司PCR体系：40ul,价格为LC480的一半
支持96孔板，机身小巧，可进行温度梯度反应
支持本公司体系：40ul
上海枫岭FTC-2000
枫岭生物ftc-2000一共具有a/b/c三种型号，共具有96、 64、32检测孔，支持：0.2ml单管，8x0.2ml排管，96孔 反应板（国产管适用），检测通道分别达到了4、3、1 检测光源模式：卤钨灯激发+CCD检测 具有温度梯度功能
ABI 7500 fast
7500 fast是7500快速反应模式仪器，理论支持本公司PCR体系：20ul 检测孔数：兼容96孔和8联管。
检测通道：5通道，除去ROX后4通道。
反应时间：30~40min 激发光源：齿钨灯。
ABI 7300
优缺点：
ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改 变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。价格2030万RMB，理论支持本公司PCR体系：40ul 检测孔数：兼容96孔和8联管。 检测通道：4通道，除去ROX后3通道。 激发光源：齿钨灯。 加热模块：半导体加热模块，升温3℃/S
常见荧光定量PCR仪介绍
概述 技术发明史
1992年由日本科学家Higuchi在报告中提出 1996年由美国Applied Biosystems公司推出
技术发展趋势
从单一的染料染色法发展到特异性更高的探针法
从最初的只能检测单一波长光源发展到可以检测多种波长 光源
进口定量PCR仪器厂商
市 场 占 有 率
而3320为双通道检测（FAM，HEX），支持三种荧光染料
杭州 博日FQD-48a
性能描述
FQD-48a具有单通道和4通道两种规格，通
过硬件转换可升级至4通道，支持0.2mlPCR 管，支持本公司体系：40ul 梯度温度范围：1℃~24℃ 升温速率：4.0℃/S 光路：LED激发+PMT检测
杭州 博日FQD-66A
支持本公司体系：40ul
2004年全线产品技术升级，6点温控、免维护激发光源、 梯度温度功能等技术的应用，使FTC-2000系列充分满足 于医疗、科研等分子生物学领域。
上海科华 FluoCycle
性能描述
离心式空气加热原理
采用LED激发+PMT旋转检测的光源系统 采用玻璃毛细管作为扩增容器，耗材适用性差 DNA类标本40分钟即可完成测试 支持本公司体系只需20ul。
LightCycler 2.0
优缺点：
检测通道：6通道 加热模式：空气加热/冷却 升温：20℃/S 孔数：32孔 材料：玻璃毛细管 20ul和100ul 两种规格 实验成本：体系小，成本低，一般是ABI的一半 理论支持本公司PCR体系：20ul
LightCycler 480
优缺点：
检测通道：6通道 加热模式：半导体加热制冷模块 升温：5℃/S
支持本公司体系：40ul
杭州 博日 linegene-3310/3320
性能描述
linegene-3310/3320具体的型号为FQD -33a 。最多检测33个样本， 支持0.2mlPCR管和8联管，支持本公司体系：40ul 升温速率：6℃/秒，通过Peltier技术控温 光路：LED激发+PMT检测 其中3310为单通道检测（FAM），支持两种荧光染料 （FAM/SYBR）
国产各厂家仪器展示
达安基因 DA
杭州 博日FQD
厦门安普利 GeneLight 上海宏石 SLAN
达安基因 DA 7600
性能描述
样本容量 ：支持48孔，48×0.2ml离心管或6×8连管
检测通道：两个检测通道，F1.F2 升温速率： 4.0℃/s 加热基座：半导体加热模块 光路系统：LED激发+PMT检测
优缺点：由DNA Engine和光学模块组成
1.检测孔数：96孔板 或 8联管
2.激发光源：LED单激发光源，双通道检测
3.加热模块：DNA Engine 升温3℃/S 4.运行时间：2h完成40个循环。
5.检测通道：2通道，无需ROX校正
6.可以脱离电脑控制，独立运行 7.具有温度梯度功能，最高可达24℃
西安天隆TL988
光源系统：LED激发+PMT检测 检测通道：可达5通道。 检测通量：36/96加热模块可切换 缺点：使用单激发虑光片，激发光特异性不好，
导致检测灵敏度较低。
性能描述
检测通量：可达96，适用于高通量分析
上海宏石 SLAN
性能描述
采用LED+PMT检测模式，升温3℃/S
半导体加热模块 具有单通道，双通道，三通道三种检测模式 支持48孔模式，耗材为0.2mlPCR管 在病原体的临床检测，食品卫生检测方面应
用比较不错。
北京博奥 RT-CyclerTM 136
4.运行时间：35min完成40个循环。