常用缓冲液的配置

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常见缓冲液配制方法

常见缓冲液配制方法
一、介绍
缓冲液是常见的生物或化学反应的催化剂，主要用于维持反应物的酸
碱度在一定的范围内，有利于提高反应效率。

缓冲液有许多种，其配制方
法也多种多样。

下面将介绍常见缓冲液的配制方法，包括常用缓冲液的配
制方法，复合缓冲液的配制方法，以及常见的国际标准缓冲液的配制方法。

二、常用缓冲液的配制方法
1、磷酸缓冲液的配制
磷酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的磷酸
来配制。

比如，将0.2mol/L的磷酸钠和0.2mol/L的磷酸氢钠混合，可以
得到一种磷酸缓冲液，其碱度为pH7.0。

同样，如果需要制备一种低碱度
的磷酸缓冲液，可以将3mol/L的磷酸钠和3mol/L的磷酸氢钠混合，以得
到其pH值为2.12的缓冲液。

2、碳酸缓冲液配制
碳酸缓冲液是常用的酸性缓冲液，可以根据需要使用不同浓度的碳酸
氢钠来配制。

比如，将0.2mol/L碳酸氢钠和0.2mol/L碳酸钠混合，可以
得到一种碳酸缓冲液，其碱度为pH7.0。

同样，如果需要制备一种低碱度
的碳酸缓冲液，可以将3mol/L碳酸氢钠和3mol/L碳酸钠混合，以得到其pH值为2.12的缓冲液。

3、氨水缓冲液配制
氨水缓冲液是常用的碱性缓冲液。

缓冲液配制及注意事项

缓冲液配制及注意事项
缓冲液配制及注意事项
一、定义
缓冲液是一种有机水溶液，其pH值可以在一定范围内稳定。

缓冲液主要分为碱性缓冲液和酸性缓冲液，常用的缓冲液有磷酸-碳酸滴定液、氢氧化钠滴定液、氢氧化钾滴定液等。

二、缓冲液的配制
1、磷酸-碳酸滴定液
磷酸-碳酸滴定液的pH在4～6之间，该液体没有固体溶解度，只能通过溶质溶解来溶解自身，所以要配制磷酸-碳酸滴定液，首先要准备一定的浓度的碳酸氢钠溶液和磷酸二氢钠溶液，然后根据实验需要选择相应的浓度比例，将两种溶液混合，即可得到磷酸-碳酸滴定液。

2、氢氧化钠滴定液
氢氧化钠滴定液的pH为7，只要准备一定浓度的氢氧化钠溶液，就可以得到氢氧化钠滴定液，由于氢氧化钠能溶解固体，因此，可以将一定物质的固体溶解于氢氧化钠溶液，从而得到一种比较稳定的氢氧化钠滴定液。

3、氢氧化钾滴定液
氢氧化钾滴定液的pH在8～9.5之间，可以通过准备一定浓度的氢氧化钾溶液来得到氢氧化钾滴定液，也可以将一定比例的氢氧化钠溶液和氢氧化钾溶液混合，用离子选择膜将氢离子从氢氧化钠溶液中
筛除，得到浓度为4mol/L的氢氧化钾滴定液。

三、缓冲液的注意事项
1、配制缓冲液时应注意操作步骤，尤其不要添加过多的溶剂。

2、配制的缓冲液应该达到一定的酸碱度，保持比较稳定的pH值，避免极端的酸碱度对实验影响，使实验结果准确可靠。

3、配制的缓冲液必须及时使用，避免受到外来因素的影响，使其滴定性能发生变化。

4、使用缓冲液时应该注意安全，尤其是有机缓冲液，要避免皮肤接触，以免受到烫伤。

常见缓冲液配制大全

常见缓冲液配制大全缓冲液乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。

乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L 氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。

常见缓冲液的配制

常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。

常用缓冲溶液的配置方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01 g/L。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。

① 使用时可以每升中加入1g 酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41 g/L 。

227．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。

KH2PO4分子量= 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。

8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为8.25克/升10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）50毫升0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris ）溶液与X 毫升0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至100吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。

11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根）硼砂Na 2B 4O 7·H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含19.07克/升。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。

不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。

下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。

配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。

2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。

配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。

3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。

配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。

-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。

4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。

配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。

- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。

- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。

配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。

下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。

一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。

二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。

三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。

以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。

在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。

以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。

而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。

最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。

对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。

以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。

常见缓冲液的配制

附溶液配制方法：L PBSKH2PO4Na2HPO4 (或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl蒸馏水加至 1000mLPBS/TNaClKH2PO4Na2H PO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) （或）KCl吐温20蒸馏水加至 1000mL碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g 蒸馏水加至 1000mLL氯化钾低渗液氯化钾，蒸馏水 100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇 3份冰醋（乙）酸 1份姬姆萨染液Giemsa原液 1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（或）10ml% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O） 2.3g蒸馏水 100ml明胶显影液明胶粉 0.2g三蒸水 10ml甲酸1% 醋酸冰醋（乙）酸 1ml蒸馏水 99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）μg 若丹明123（Rhodamine 123）μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（,3, 5hexatriene, ）四氢呋喃 10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液PBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)丙酮 1mlFDA工作液FDA贮备液PBS 100mlM-缓冲液（）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）LEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L EDTA(乙二胺四乙酸) L疏基乙醇1mmol4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚） 1mlM-缓冲液 99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（） 97ml% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250） 0.2g 甲醇冰醋（乙）酸 7ml蒸馏水生理盐水%氯化钠)氯化钠 8.5g三蒸水 1000mlL蔗糖水溶液（含L氯华钙）蔗糖 85.5g无水氯华钙 0.33g蒸馏水 1000mlL氯化铵液氯化铵 4.574g蒸馏水 500mlL硝酸钠液硝酸钠 7.224g 蒸馏水 500mlL硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O） 19.333g蒸馏水 500mlL草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O） 8.527g 蒸馏水 500mlL醋酸铵液醋酸铵 6.552g蒸馏水 500mlL葡萄糖液葡萄糖 28.83g蒸馏水 500mlL甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml)蒸馏水 500mlL乙醇液无水乙醇蒸馏水 500mlL丙醇液正丙醇（比重）蒸馏水 500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH - 范围内具有较好的缓冲能力。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。

配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。

因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。

以下是各种缓冲液的配制方法。

一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。

用蒸馏水调节至1 L。

2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。

二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。

Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。

MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。

七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。

HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。

53种常见缓冲液配制方法

53种常见缓冲液配制方法
一、磷酸缓冲液
1.0M磷酸缓冲液的配制方法
（1）将0.883克无水磷酸二铵（Na2H2PO4·2H2O）加入5升水中，
然后煮沸，以消除少量的氧气和杂质，然后用烧杯内的冻干机进行冻干；
（2）将上述冻干的水溶液加入到10升容量的烧瓶中，加热至90℃，按1.0M标准比重进行称重，比重合适时停止加热；
（3）将上述溶液加入15升的容量瓶中，加入足够的水，使它达到正
确的pH值（也就是7.00），用它精确测量pH值；
（4）最后，用0.1N硫酸钠溶液精确测量缓冲液的比重，最终得到
1.0M磷酸缓冲液。

二、氯化缓冲液
1.0M氯化缓冲液的配制方法
（1）将0.314克氯化钠加入到5升水中，然后煮沸，以消除少量的
氧气和杂质，然后用烧杯内的冻干机进行冻干；
（2）将上述冻干的水溶液加入到10升容量的烧瓶中，加热至90℃，按1.0M标准比重进行称重，比重合适时停止加热；
（3）将上述溶液加入15升的容量瓶中，加入足够的水，使它达到正
确的pH值（也就是7.00），用它精确测量pH值；
（4）最后，用0.1N硫酸钠溶液精确测量缓冲液的比重，最终得到
1.0M氯化缓冲液。

三、氨基乙酸缓冲液
1.0M氨基乙酸缓冲液的配制方法。

(最全)常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。

最全常用缓冲液配方及缓冲范围

最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够帮助控制溶液酸碱性的化学物质，它可以通过接受或释放氢离子来防止溶液的pH值发生剧烈变化。

缓冲液在许多科学实验、生物学研究、工业生产以及医药领域中都有广泛应用。

常用的缓冲液配方包括以下几种：1.乙二胺四乙酸（EDTA）缓冲液：EDTA缓冲液是一种用来稳定金属离子浓度、防止金属离子的沉淀和垢痕形成的缓冲液。

其配方如下：-0.1MEDTA（乙二胺四乙酸）溶液10mL- 0.2 M Tris-HCl缓冲液（pH 8.0） 90 mL-蒸馏水900mL2.乙醇胺缓冲液：乙醇胺缓冲液通常用于DNA或RNA的电泳和杂交实验中。

其配方如下：-1M乙醇胺9mL-0.5MEDTA1mL-蒸馏水90mL将乙醇胺缓冲液通过添加适量的盐酸来调节pH值至所需的范围。

3.乙二醇缓冲液：乙二醇缓冲液常用于蛋白质的纯化和储存过程中。

其配方如下：-0.2M乙二醇10mL- 0.1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 7.0） 90 mL按需添加其他添加剂如蛋白酶抑制剂或抗菌剂。

4.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，适用于酶反应、DNA/RNA杂交等实验。

常用的三种pH值的配方如下：-pH5.8：0.05MNa2HPO4溶液和0.05MNaH2PO4溶液的体积比为1:4-pH7.0：0.1MNa2HPO4溶液和0.1MNaH2PO4溶液的体积比为1:9-pH8.0：0.2MNa2HPO4溶液和0.2MNaH2PO4溶液的体积比为1:95.PBS缓冲液：PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，适用于细胞培养、免疫染色、蛋白质浸泡实验等。

其配方如下：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-蒸馏水1L将以上成分溶解在蒸馏水中，调节pH至7.4这些缓冲液可以满足大多数实验和应用的需求，每种缓冲液的最佳使用范围可能略有不同。

在实验前应该仔细阅读相关文献，了解所使用缓冲液的特点和最适宜的pH范围。

常用缓冲溶液的配制

常用缓冲溶液的配制缓冲溶液是一种可以稳定溶液pH值的溶液，广泛应用于化学、生物学、药学等领域。

在实验研究和工业生产中，常用的缓冲溶液有磷酸盐缓冲溶液、醋酸缓冲溶液、碳酸氢盐缓冲溶液等。

本文将介绍这几种常用缓冲溶液的配制方法和相关注意事项。

一、磷酸盐缓冲溶液的配制磷酸盐缓冲溶液可通过调节磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例来控制溶液的pH值。

以下是磷酸盐缓冲溶液的配制方法：1. 磷酸盐缓冲液的配方：- 磷酸二氢盐（KH2PO4）：用量根据所需pH值确定。

- 磷酸氢二盐（Na2HPO4）：用量根据所需pH值确定。

- 蒸馏水：适量。

2. 步骤：- 根据所需pH值选择合适的磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例。

- 将磷酸二氢盐和磷酸氢二盐称量并溶解在适量的蒸馏水中。

- 将溶液pH值调整至所需值，可以使用pH计进行准确调节。

二、醋酸缓冲溶液的配制醋酸缓冲溶液是一种酸性缓冲溶液，可以维持酸性环境下的稳定pH值。

以下是醋酸缓冲溶液的配制方法：1. 醋酸缓冲液的配方：- 醋酸（CH3COOH）：用量根据所需pH值确定。

- 乙酸钠（CH3COONa）：用量根据所需pH值确定。

- 蒸馏水：适量。

2. 步骤：- 根据所需pH值选择合适的醋酸和乙酸钠的比例。

- 将醋酸和乙酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。

- 将溶液pH值调整至所需值，可以使用pH计进行准确调节。

三、碳酸氢盐缓冲溶液的配制碳酸氢盐缓冲溶液可用于调节中性或弱碱性环境下的溶液pH值。

以下是碳酸氢盐缓冲溶液的配制方法：1. 碳酸氢盐缓冲液的配方：- 碳酸氢钠（NaHCO3）：用量根据所需pH值确定。

- 碳酸钠（Na2CO3）：用量根据所需pH值确定。

- 蒸馏水：适量。

2. 步骤：- 根据所需pH值选择合适的碳酸氢钠和碳酸钠的比例。

- 将碳酸氢钠和碳酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。

- 将溶液pH值调整至所需值，可以使用pH计进行准确调节。

注意事项：1. 在配制缓冲溶液过程中，应严格按照所需pH值确定各种缓冲盐的比例。

53种常见缓冲液配制方法(总结)

53种常见缓冲液配制方法（总结）
第一类：氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液：添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中，按需可加入一定量的氢氧化钠，并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L，即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液，其综合离子强度约为 0.150 mol/L。

2、硝酸缓冲液：将一定量的硝酸钾溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

3、三甲基磺酰胺缓冲液：将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L，即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液，其综合离子约为 0.10 mol/L。

第二类：基态缓冲液
1、乙醇缓冲液：将一定量的乙醇溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

2、氢氟酸缓冲液：将一定量的氢氟酸溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L，即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液，其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。

常用缓冲液的配置

常用缓冲液的配置（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。

甘氨酸分子量＝75.07。

0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。

（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。

邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。

0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。

（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液Na 2HPO 4分子量＝141.98；0.2 mol/L 溶液为28.40 g/L 。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量＝178.05；0.2 mol/L 溶液为35.61 g/L 。

Na 2HPO 4·12H 2O 分子量＝358.22；0.2 mol/L 溶液为71.64 g/L 。

C 6H 8O 7·H 2O 分子量＝210.14；0.1 mol/L 溶液为21.01 g/L 。

（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

（五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）柠檬酸：C 6H 8O 7·H 2O 分子量＝210.14 ；0.1 mol/L 溶液为21.01 g/L 。

柠檬酸钠：Na 3C 6H 5O 7·2H 2O 分子量＝294.12 ；0.1 mol/L 溶液为29.41 g/L 。

（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L ）NaAc ·3H 2O 分子量＝136.09；0.2 mol/L 溶液为27.22 g/L 。

冰乙酸11.8 mL 稀释至1 L （需标定）。

（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）X 毫升 0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。

常用缓冲液配置

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。

5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

常见缓冲液的配方

.常用贮液与溶液1mol/L 亚精胺( Spermidine ): 溶解2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20 Co1mol/L精胺(Spermine ):溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20Co10mol/L 乙酸胺( ammonium acetate ):将77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级，无DNA 酶)于9.5ml 水中(为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白) ，盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20Co1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20 °C。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L 乙酸钾( potassium acetate )：溶解78.5g 乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml 。

1mol/L氯化钾(KCI):溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L 乙酸钠( sodium acetate )：溶解40.8g 的三水乙酸钠于约90ml 水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml o0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA 和NaOH 溶液(0.5mol/L )，混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA?2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L 1mol/L HEPES:将23.8gHEPES 溶于约90ml 的水中，用NaOH 调pH（6.8-8.2 ），然后用水定容至100ml。