Cry1C elisa中文说明书
转基因检测试剂盒(植物)介绍
转基因检测试剂盒(植物)介绍在今年年初,农业农村部制定了《2020年农业转基因生物监管工作方案》,该方案的主要就是为了切实做好农业转基因生物安全监管工作,保障我国农业转基因生物研究与应用的健康发展。
一直以来,转基因作物及其产品的检测技术是转基因生物安全管理的基础和技术保障,随着转基因技术研究和应用的不断扩大,国际贸易日益频繁,引种交流力度加大,每年都涌现出大量新的转化体和新的加工品,因此,只有通过准确检测和科学溯源,才能确保标识制度的实行,才能实现对转基因作物及其产品的有效监督和有力监管。
那么,对于不可见的转基因物质我们该如何快速有效地检测呢?可以使用转基因检测试剂盒。
Cry1C 转基因检测试剂盒也叫转基因植物蛋白浓度测定试剂盒,可用于转基因作物叶片蛋白浓度测定,转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗,双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。
【Cry1C转基因检测试剂盒原理】转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗,双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物,可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。
【Cry1C转基因检测试剂盒试剂准备】试剂盒中的20×浓缩洗涤液30 ml 加570 ml 灭菌ddH2O 溶解稀释至1×洗涤液,5×抽提液(30 ml)加120 ml ddH2O 稀释至1×抽提液,4℃存放备用。
【样品准备】称取约20 mg 叶片,加0.5 ml 1×抽提液(使用前30 min 放置室温)研磨至匀浆,室温放置30 min,测定前把样品上清液稀释5-20 倍。
测定茎干和胚乳中的Bt 蛋白时,样品称取约40 mg,加1 ml 1×抽提液研磨。
关于转基因检测卡Cry1AB_AC的使用——(大豆、水稻、玉米、小麦、大麦)
转基因检测卡----Cry1Ab/Ac胶体金检测试剂使用说明【产品用途】本产品用于快速检测植物叶片和种子等样品中的Cry1Ab/Ac蛋白,灵敏度为100ppb,整个检测过程只需要10分钟,适用于各类企业及检测机构。
【检验原理】转基因Bt Cry1Ab/Ac免疫金标速测卡应用双抗体夹心免疫层析的原理,样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体1结合,形成抗原-抗体复合物,继续向前方流动和NC膜检测线上特异性单克隆抗体2结合形成双抗体夹心复合物。
如果样本中抗原含量大于100ppb,检测线显红色,结果为阳性;反之,检测线不显色,结果为阴性。
【主要组成成份】1.转基因检测卡(40份/盒):每条铝箔袋单独包装。
其中试剂由金标鼠抗-Cry1Ab/Ac单克隆抗体、鼠抗-Cry1Ab/Ac单克隆抗体、羊抗鼠IgG多克隆抗体、硝酸纤维素膜、聚酯纤维素膜、塑料背衬、塑料模板组成。
2.2ml离心管80支3.一次性吸塑管40支4.一次性手套5双5.使用说明书(1份/盒)【样品处理】植物叶片组织:1. 将植物叶片组织置于一次性组织提取管的盖子与管身之间,迅速盖住盖子,得到圆形叶片组织。
用杵将叶片置于提取管的底部。
用记号笔在管壁做好标记。
2. 将杵插入管中,旋转杵碾搅碎叶片,持续按压 20~30秒。
3. 加入 500uL(约 20 滴)缓冲液。
4. 重复碾碎步骤使样品与缓冲液充分接触混合。
拿掉杵棒(注意请将杵棒一次性使用,以免不同样品间交叉污染)。
提取种子:1. 取粉碎的种子15 g,转移到做好标记的提取管中。
注意:粉碎后的颗粒成咖啡渣大小即可。
2. 加入45mL纯水或缓冲液溶解。
3. 盖好提取管的盖子,用力上下振荡提取管20~30s,确保样品与缓冲液充分混匀。
静置等待固体物质沉淀。
4. 请注意不要交叉污染,每个样品采用单独的提取管。
【检验方法】1.测试前请完整阅读使用说明书,并将检测卡恢复至常温后取出。
ELISA说明书翻译
实验步骤1.开始ELISA前一天,稀释包被抗体,取酶标板每孔加入100ul包被抗体溶液,4度过夜2.使用前将所有试剂放置室温,强烈建议所有标准品和样品做复孔或三孔,各次检测均要求做标准曲线3.洗涤液不少于300ul洗板4次,并在吸水纸上拍干板子,后续洗涤液同此4.为了阻断非特异性结合和减少背景,每孔加200ul样品稀释液5.封板并在摇床上室温孵育1h6.在上述期间,准备标准品稀释液和适当的样品稀释液(如必需)7.标准品稀释:500 pg/ml, 250 pg/ml, 125 pg/ml,62.5 pg/ml, 31.25 pg/ml, 15.6 pg/ml,7.8pg/ml 和0 pg/ml8.如步骤3洗板4次9.每孔加入100ul标准品稀释液和样品到对应孔,如有需要可对样品进行稀释10.封板并在摇床上室温孵育2h11.如步骤3洗板4次12.每孔加入100ul已稀释的二抗,封板并在摇床上室温孵育1h13.如步骤3洗板4次14.每孔加入100ul 稀释的HRP,封板并在摇床上室温孵育30min15.如步骤3洗板5次,每次洗涤洗涤液浸泡30s至1min,有利于减少背景16.每孔加入100ulTMB显色液,并在摇床孵育15-30min,阳性孔将变为淡蓝色,此步无需封板17.每孔加入100ul终止液终止反应,阳性孔将由蓝色变为黄色18.终止反应半小时内测定OD值(450nm)ELISA实验基本原理基本原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。
这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
进口试剂盒,ELISA检测试剂盒,小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒使用说明书
进口试剂盒,ELISA检测试剂盒,小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒使用说明书供应商:上海樊克生物科技有限公司产品规格:96T试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板:一块(96孔)2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,600 pg/ml,将其稀释为400 pg/ml后,再做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别稀释成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制200 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )400 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml。
4. 检测稀释液A:1×10ml。
5. 检测稀释液B:1×10ml。
6. 检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl 检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
SO4)。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H211. 覆膜:5张12. 使用说明书:1份自备物品1. 酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2. 微量加液器及吸头,EP管3. 蒸馏水或去离子水,全新滤纸心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒标本的采集及保存1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 xg离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
ELISA操作规程
ELISA操作规程标题:ELISA操作规程引言概述:ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的生物化学分析技术,广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物研发等领域。
本文将详细介绍ELISA的操作规程,包括实验前准备、试剂配制、板涂覆、标准曲线绘制、样品检测等五个部分。
一、实验前准备:1.1 清洗实验用具:使用去离子水和洗涤剂彻底清洗酶标仪、试剂瓶、试管、多孔板等实验用具,确保无任何污染物残留。
1.2 检查试剂有效期:查看试剂瓶上的标签,确保试剂的有效期未过期,避免实验结果的误差。
1.3 准备实验台:清洁实验台面,并准备好所需的实验用品,如移液器、离心机、显微镜等。
二、试剂配制:2.1 样品稀释液的配制:根据实验需要,选择适当的稀释液,如PBS(磷酸盐缓冲液)或BSA(牛血清白蛋白)溶液,并按照比例将其与样品混合。
2.2 酶标板涂层液的配制:将涂层抗体或抗原稀释至适当浓度,并将其均匀涂布在酶标板上,以便捕获待测物。
2.3 酶标记液的配制:将酶标记的抗体与酶底物反应,形成酶标记复合物,用于检测酶标板上的待测物。
三、板涂覆:3.1 预处理酶标板:将酶标板孔位用PBS或BSA溶液预处理,以避免非特异性吸附。
3.2 加入涂层液:将配制好的涂层液加入到酶标板孔位中,保持孔位内液体的均匀分布,避免气泡的产生。
3.3 孵育酶标板:将涂层的酶标板在适当的温度和时间下进行孵育,以促使待测物与涂层抗体或抗原发生特异性结合。
四、标准曲线绘制:4.1 准备标准品:选择适当的标准品,按照不同浓度进行稀释,以建立标准曲线。
4.2 加入标准品:将不同浓度的标准品加入到酶标板孔位中,每个浓度设置多个重复孔位,以获得可靠的结果。
4.3 检测与测定:使用酶标仪测定各个孔位的吸光度值,并根据标准品的吸光度值绘制标准曲线,以后续样品的检测提供参考。
五、样品检测:5.1 样品处理:将待测样品与稀释液混合,并按照操作规程将混合液加入到酶标板孔位中。
人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)elisa试剂盒使用说明书
人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)【人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)试剂盒】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)水平。
用纯化的人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP),再与HRP标记的Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Ⅰ型前胶原C 末端肽(CⅠCP)呈正相关。
氯霉素ELISA快速检测试剂盒
氯霉素ELISA快速检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E12037f检测范围:0.312 ng/ml-10 ng/ml最低检测限:0.2 ng/ml特异性:本试剂盒可用于快速检测氯霉素。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定动物组织样品(虾、鱼及肉类)、饲料、蛋、血清、血浆、尿液、蜂蜜、牛奶等样品中的氯霉素残留。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理本试剂盒采用酶联免疫间接竞争法检测氯霉素。
微孔板上包被有氯霉素偶联物。
加入氯霉素抗体和氯霉素标准品或样品,游离氯霉素与微量反应板上的氯霉素结合物竞争结合抗氯霉素抗体,没有结合的抗体被洗去,再向微孔中加辣根过氧化物酶标记二抗,与结合在反应板上的抗体作用一定时间,洗去多余的辣根过氧化物酶标记二抗。
再向反应孔中加入相应反应底物TMB,作用一定时间后,结合的酶结合物将TMB转化为蓝色,转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的氯霉素呈负相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.已包被氯霉素偶联物的酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):6×250ul/瓶。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.辣根过氧化物酶标记二抗稀释液(HRP-anti-antibody Diluent):1×20ml/瓶。
5.氯霉素单克隆抗体:1×60μl/瓶(1:100)6.辣根过氧化物酶标记二抗(HRP-anti-antibody ):1×120μl/瓶(1:100)7.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书
人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒使用说明书引言:本文是针对人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒的使用说明书,旨在帮助用户正确、便捷地操作该试剂盒,获取准确的检测结果。
请用户在使用前仔细阅读本说明书,并按照所列步骤进行操作。
1. 产品介绍1.1 人C反应蛋白(CRP)ELISA分析检测试剂盒是一种用于定量分析人体内C反应蛋白的试剂盒。
1.2 试剂盒内含有酶标板、标准品、检测样本预处理液、酶标抗体、酶标底物、洗涤缓冲液等。
2. 前期准备2.1 检测前,确保试剂盒在正确的保存条件下,并检查是否有损坏。
2.2 准备洗涤缓冲液,并按照说明稀释至所需浓度。
2.3 准备一次性使用的微量移液器和吸头。
2.4 样本处理前,确保样本已经充分解冻,并且清晰无杂质。
2.5 标准品的准备:按照说明书中的浓度进行稀释,得到一系列不同浓度的标准品。
3. 检测步骤3.1 样本预处理:取相应数量的样本和标准品,加入与试剂盒提供的检测样本预处理液等体积比例的去蛋白液,混合均匀,放置于室温下孵育一段时间。
3.2 洗涤:将试剂盒提供的洗涤缓冲液加入洗涤槽中,使用洗涤缓冲液洗涤酶标板中的洗涤孔,每孔洗涤3-4次,倾倒废液。
3.3 添加试剂:按照试剂盒中所标示的各组分体积,将样本、标准品和酶标抗体等逐步加入对应的酶标孔中。
3.4 孵育:酶标板封闭后,放置于恒温孵育箱中,按照说明书中所示的温度和时间进行孵育。
3.5 清洗:孵育结束后,将酶标板取出倒置,用洗涤缓冲液洗涤酶标孔,每孔洗涤3-4次,倾倒废液。
3.6 加底物:将试剂盒提供的酶标底物加入酶标孔中,按照说明书中所示的温度和时间进行反应,避免阳光直射。
3.7 反应终止:加入酶标终止液终止反应,避免经久暴露。
3.8 检测:使用酶标仪读取各孔的吸光度,记录相应数值。
4. 数据分析4.1 根据吸光度值,绘制标准曲线,使用标准曲线确定样本中的C 反应蛋白浓度。
Crystal Chem醇溶蛋白ELISA试剂盒说明书
Crystal Chem醇溶蛋白ELISA试剂盒说明书Crystal Chem艾美捷小麦/麸质(醇溶蛋白)ELISA试剂盒用于量化生食品和加工食品中的麸质(醇溶蛋白)水平,并使用创新的提取方法来更准确地检测过敏原水平。
仅供实验室使用。
Crystal Chem试剂盒包括:胰岛素、胰高血糖素、C肽、肠抑胃肽、瘦素、脂联素、LDL/HDL (低/高密度脂蛋白)、皮质固醇/激素、胰岛素样生长因子、谷蛋白、豆类过敏原、卵清蛋白、宿主细胞蛋白、KIM-1(肾损伤分子)、肌酐、血清白蛋白、卵清蛋白、血纤维蛋白溶酶原、以及各类抗原酶联免疫检测试剂盒和免疫层析诊断(Lateral Flow)等等。
Crystal Chem醇溶蛋白ELISA试剂盒参数:规格:96 wells灵敏度:0.26 ppm Gluten0.31 ppm Wheat分析范围标准分析:0.26-17 ppm Gluten0.31-20 ppm Wheat高量程分析:1.05-68 ppm Gluten1.24-80ppm Wheat储存温度:2-8°C方法:ELISA定量法特异性:醇溶蛋白Crystal Chem 艾美捷试剂盒特色:1.PTM认证2.改进了对生食品和加工食品中过敏原的检测3.所有试剂盒中的通用提取液4.过敏原回收率高Crystal Chem 艾美捷试剂盒提取概述:谷蛋白(醇溶蛋白)须首先从将19mL提取液添加到1克磨碎的食物。
然后在沸腾状态下加热混合物在房间里搅拌12小时或10分钟温度然后需要调整混合物的pH值到6比8。
去除上清液,然后稀释20倍在3000g下离心样品20分钟后。
Canine GRO alpha CXCL1 ELISA Kit商品信息表说明书
Canine GRO alpha/CXCL1 ELISA KitCatalog Number EC6RB (96 tests), EC6RBX10 (10 x 96 tests)Rev. 7Product descriptionThe Canine GRO alpha/CXCL1 ELISA Kit is a solid-phase sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) designed to detect and quantify the level of canine GRO alpha in cell culture supernatants, plasma, and serum.Contents and storageUpon receipt, store at 2-8°C for 6 months or -20°C for 1 year.Components Cat. No. EC6RB(96 tests)Cat. No. EC6RBX10(10 x 96 tests)Canine GRO alpha Antibody Coated wells, 96-well plate 1 plate10 plates Canine GRO alpha Biotin Conjugate 2 vials20 vials Canine GRO alpha Standard, recombinant canine GRO alpha 2 vials20 vialsWash Buffer Concentrate (20X)25 mL12 x 25 mL Assay Diluent D (5X)15 mL10 x 15 mL Assay Diluent B (5X)15 mL10 x 15 mL Streptavidin-HRP (200X)0.2 mL10 x 0.2 mL TMB Substrate12 mL10 x 12 mLStop Solution8 mL10 x 8 mL Adhesive Plate Covers220Materials required but not suppliedDistilled or deionized waterMicrotiter plater reader with software capable of measuring at 450 nmPlate washer-automated or manual (manifold dispenser)Calibrated adjustable precision pipettes and glass or plastic tubes for diluting solutionsProcedural guidelinesReview the Procedural guidelines and Plate washing directions in the ELISA Technical Guide at for details prior to starting the procedure.Reagents are lot-specific. Do not mix or interchange different reagent lots from various kit lots.Prepare 1X Wash Buffer1.Allow Wash Buffer Concentrate (20X) to reach room temperature and mix to redissolve any precipitated salts.2.Dilute 20 mL of the Wash Buffer Concentrate into 380 mL of deionized or distilled water. Label as 1X Wash Buffer.3.Store the concentrate and 1X Wash Buffer in the refrigerator. Use the diluted buffer within one month.Prepare diluentAssay Diluent D and Assay Diluent B should be diluted 5-fold with deionized or distilled water before use.Prepare biotin conjugate1.Briefly spin down the biotin conjugate before use.2.Add 100 µL of 1X Assay Diluent B into the vial to prepare a biotin conjugate concentrate.3.Pipette up and down to mix gently (the concentrate can be stored at 4°C for 5 days).4.The biotin conjugate concentrate should be diluted 80-fold with 1X Assay Diluent B and used in step 2 of ELISA procedure.Sample preparation guidelinesCollect samples in pyrogen/endotoxin-free tubes.Freeze samples after collection if samples will not be tested immediately. Avoid multiple freeze-thaw cycles of frozen samples.Thaw completely and mix well (do not vortex) prior to analysis.Avoid the use of hemolyzed or lipemic sera. If large amounts of particulate matter are present in the sample, centrifuge or filter sample prior to analysis.Pre-dilute samples1X Assay Diluent D should be used for dilution of serum, plasma, and cell culture supernatant samples.Dilute serum and plasma 3-fold.Because conditions may vary, it is recommended that each investigator determine the optimal dilution to be used for eachapplication.Dilute standardsNote: Use glass or plastic tubes for diluting standards.1.Briefly spin down a vial of lyophilized standard.2.Add 800 µL 1X Assay Diluent D (Assay Diluent D should be diluted 5-fold with deionized or distilled water before use) into vial toprepare a 75 ng/mL standard solution. Dissolve the powder thoroughly by a gentle mix. Add 3.5 µL of CXCL1 standard solution from the vial, into a tube with 746.5 µL 1X Assay Diluent D to prepare a 350 pg/mL standard solution. Pipette 300 µL 1X Assay Diluent D into each tube. Use the 350 pg/mL standard solution to produce a dilution series (shown below). Mix each tubethoroughly before the next transfer. 1X Assay Diluent D serves as the zero standard (0 pg/mL).3.5300300300300300300DiluentVolume746.5 µL300 µL300 µL300 µL300 µL300 µL300 µL300 µL75 ng/mLStd1350 pg/mLStd2175 pg/mLStd387.50 pg/mLStd443.75 pg/mLStd521.88 pg/mLStd610.94 pg/mLStd75.47 pg/mLBlank0 pg/mLPrepare 1X Streptavidin-HRP solutionNote: Prepapre the Streptavidin-HRP within 15 minutes of usage.1.Briefly spin the Streptavidin-HRP and pipette up and down to mix gently before use, as precipitates may form during storage.2.Dilute Streptavidin-HRP 200-fold with 1X Assay Diluent B.3.Do not store diluted solution for future use.Perform ELISA (Total assay time: 4 hours and 45 minutes)Allow all reagents to reach room temperature before use. Mix all liquid reagents prior to use.IMPORTANT! Perform a standard curve with each assay.Determine the number of 8-well strips required for the assay. Insert the strips in the frames for use. Re-bag any unused strips and frames, and store at 2 to 8°C for future use.1Bind antigen a.For the standard curve, add 100 µL of standards to the appropriate wells (see Dilute standards). Forsamples, add 100 µL of diluted samples (see Dilute samples) to the wells.b.Cover wells and incubate for 2.5 hours at room temperature or over night at 4°C with gentle shaking.c.Discard the solution and wash 4 times with 1X Wash Buffer. Wash by filling each well with WashBuffer (300 µL) using a multi-channel Pipette or autowasher. Complete removal of liquid at each stepis essential for good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Buffer byaspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.2Add biotin conjugate a.Add 100 µL of prepared biotin conjugate (see Prepare biotin conjugate) to each well.b.Incubate for 1 hour at room temperature with gentle shaking.c.Discard the solution. Repeat the wash as in step 3.3Add Streptavidin-HRP a.Add 100 µL of prepared Streptavidin-HRP solution (see Prepare Streptavidin-HRP solution) to eachwell.b.Incubate for 45 minutes at room temperature with gentle shaking.c.Discard the solution. Repeat the wash as in step 3.4Add TMB substrate a.Add 100 µL of TMB Substrate to each well. The substrate will begin to turn blue.b.Incubate for 30 minutes at room temperature in the dark with gentle shaking.5Add stop solution Add 50 µL of Stop Solution to each well. Tap the side of the plate gently to mix. The solution in thewell changes from blue to yellow.Read the plate and generate the standard curve1.Read the absorbance at 450 nm. Read the plate within 30minutes after adding the Stop Solution.e curve-fitting software to generate the standard curve. Afour parameter algorithm provides the best standard curve fit.Optimally, the background absorbance may be subtracted from all data points, including standards, unknowns and controls,prior to plotting.3.Read the concentrations for unknown samples and controlfrom the standard curve. Multiple value(s) obtained forsample(s) by the appropriate factor to correct for the sampledilution.Note: Dilute samples producing signals greater than that of thehigest standard in Standard Diluent Buffer and reanalyze.Multiply the concentration by the appropriate dilution factor.Performance characteristicsStandard curve (example)These standard curves are for demonstration only. A standardcurve must be run with each assay.Intra-assay precisionTo determine intra-assay precision, two standard curves and 3 samples for each standard curve are run. The standard curve concentration points as well as the samples are tested in duplicates on a single plate. Two different concentration values are obtained for each sample, using the two separate standard curves. The two concentration values for each sample is compared to each otherusing the CV% calculation. Intra-Assay CV%: <10%Inter-assay precision To evaluate inter-assay precision, the second standard curve is tested on a separate plate along with the second set of samples. Inter-Assay CV%: <12%RecoverySample TypeAverage % Recovery Range (%)Cell Culture Supernatants 135121-145Plasma 128109-141Serum129108-149SpecificityThis ELISA antibody pair detects Canine CXCL1 and Mouse CXCL1. Other species not determined. This ELISA kit shows no cross-reactivity with the following cytokines tested: canineErbB3, Galectin-3, GASP-1, IGFBP-2, MMP-8, NCAM-1, Nope, PDGF-BB, TGF-alpha.Linearity of dilutionThe cell culture supernatants, plasma, and serum samples were spiked with recombinant canine GRO alpha, serially diluted in sample diluent and evaluated. Observed values were compared to expected values to calculate percent recovery and demonstrate the dilution linearity of the assay.Sample TypeAverage % Expected Range (%)1:2 Dilution1:4 Dilution1:2 Dilution1:4 DilutionCell CultureSupernatants10488101-10884-92 Plasma988593-10580-93Serum7433719973-7672-76SensitivityThe minimum detecable dose of canine GRO alpha is 5.4 pg/mL.This was determined by assaying replicates of zero and thestandard curve. The mean signal of zero + 2 standard deviationsread in dose from the standard curve is the LLD. This value is thesmallest dose that is not zero with 95% confidence.Limited product warrantyLife Technologies Corporation and/or its affiliate(s) warrant theirproducts as set forth in the Life Technologies' General Terms andConditions of Sale found on Life Technologies' website at/us/en/home/global/terms-andconditions.html. If you have any questions, please contactLife Technologies at /support.Product label explanation of symbols and warningsCatalogNumberBatchCodeTemperaturelimitationUsebyManufacturerConsultinstructions for useCaution, consultaccompanying documentsDISCLAIMERTO THE EXTENT ALLOWED BY LAW, LIFE TECHNOLOGIES AND/OR ITS AFFILIATE(S) WILL NOT BE LIABLE FOR SPECIAL, INCIDENTAL, INDIRECT, PUNITIVE, MULTIPLE, OR CONSEQUENTIAL DAMAGES IN CONNECTION WITH OR ARISING FROM THIS DOCUMENT, INCLUDING YOUR USE OF IT. Important Licensing Information: These products may be covered by one or more Limited Use Label Licenses. By use of these products, you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.Corporate entity: Life Technologies Corporation | Carlsbad, CA 92008 USA | Toll Free in USA 1 800 955 6288©2021 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.For support visit /support or contact ************************.22-Nov-21。
人维生素 C(VC)定量检测试剂盒(ELISA) 说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人维生素C(VC)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人维生素C(VC)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中维生素C(VC)的含量。
【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被人维生素C(VC)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人维生素C(VC)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人维生素C(VC)含量。
【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:2400、1200、600、300、150、75ng/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
单样冰点测定仪CryoSmart 1-使用手册-2013版
菜单................................................................................................................................................................. 5
C反应蛋白ELISA试剂盒说明书
C反应蛋白ELISA试剂盒说明书C反应蛋白ELISA试剂盒说明书产品规格:96T/48T。
本产品只用于科研实验。
C反应蛋白ELISA试剂盒说明书Elisa试剂盒标本要求:1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
Elisa kit:3.1 samples were collected as soon as possible after the extraction, extraction by the relevant literature, as soon as possible after the extraction experiment. If you can not4.Test immediately, can put the sample at -20 deg.c for preservation, but should avoid repeated freezing and thawing5.2 could not detect the NaN3 containing samples, because NaN3 inhibited the activity of horseradish peroxidase (HRP).C反应蛋白ELISA试剂盒说明书Calculation:To the standard concentration as the abscissa, OD value as the ordinate, draw the standard curve on coordinate paper, according to the OD value of samples from the standard curve found corresponding concentration; multiplied by the dilution multiple; or with the standard concentration and the OD value calculated straight line regression equation of the standard curve, the sample OD value in the equation, calculate the sample concentration, multiplied by the dilution factor is the actual concentration of the sample.Experimental principle:This kit is used to measure the level of the chorionic gonadotropin in the sample of small and medium rats by double antibody sandwich method. With purified mouse chorionic gonadotropin? Antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the micropore of monoclonal antibody in turn added to collagenase, and then with HRP labeled collagenase? Antibody binding, forming antibody, antigen and enzyme labeled antibody complexes, after thorough washing, TMB substrate added color. TMB under the catalysis of the HRP enzyme into blue, and under the action of acid into the final yellow. The depth of color and the collagenase in the sample were positively correlated. Enzyme standard instrument in 450 nm wavelength was used to measure the absorbance (OD) and the standard curve calculation of a small sample in chorionic gonadotropin concentrations.C反应蛋白ELISA试剂盒说明书上海乔羽生物有限公司专业的提供elisa试剂盒,人elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,羊elisa试剂盒,植物elisa试剂盒等等,更多优惠,来电咨询!谢谢!C反应蛋白ELISA试剂盒说明书Matters needing attention:1 kit from the cold storage environment should be removed at room temperature for 15-30 minutes after the use of the enzyme labeled package is not used up after the plate, the plate should be stored in a sealed bag.2 washing buffer will crystallization, heated the water solubilization dilution, washing does not affect the results.3 each step sample should be used, and often to check its accuracy, in order to avoid the test error. A sample within 5 mins, ifthenumberofsampleismuch, recommend to use volley like.4 please make the standard curve at the same time, it is better to do the hole. Such as samples to be measured matter content is too high (the sample od high standard product the first hole hole OD), please first sample dilution multiples (n times) were measured and calculated please then multiplied by the total dilution ratio (n * * 5).5 closure plate membrane only a one-time use, to avoid cross contamination.6 substrate please avoid light preservation.7 in strict accordance with the instructions of the operation, the results of the test must be determined in accordance with the enzyme standard instrument readings.8 all samples, washing liquid and all kinds of waste should be treated as infectious agents.9 different batches of this reagent can not be mixed.10 if there is a difference between the specification and the English specification. C反应蛋白ELISA试剂盒说明书友情提醒:公司经营的产品均为科研实验用,不可用于临床应用。
elisa 检测 技术手册
ELISA检测可从9个方面加以说明。
(一)固相载体:可溶性抗原或抗体吸附于固相载体而成为不溶形式,这是进行酶标记测定的基本条件。
许多物质可作为固相载体,如纤维素、交联右旋糖苷、琼脂糖珠、聚丙烯、聚苯乙烯、聚乙烯及聚氯乙烯等等。
但在ELISA中最常用的是聚苯乙烯或聚氯乙烯微量反应板及塑料管。
由于微量反应板所用试剂量少,操作方便,适合于大规模应用。
国产聚苯乙烯微量反应板(上海塑料三厂出品)目前已大量应用于ELISA测定,并且获得了满意的结果。
但每批微量反应板对抗原或抗体蛋白质的吸附性能是有显著差别的。
实验证明,吸附效果似乎与塑料的类型及其表面性质有关。
特别是塑料制品在加工过程中因工艺不同或受其他因素的影响而造成吸附性能的极大差异,甚至完全丧失吸附能力。
因此,对每批制品在使用前,必须经过实验室鉴定,鉴定的方法和标准是对每批购置的微量反应板或塑料管抽样,用0.2ug/ml纯化的正常人IgG进行包被,经洗涤后加酶标记抗人球蛋白进行反应,再经孵育洗涤,加底物显色终止反应后,逐孔在酶标比色计中测定其消光值、光密度(O.D值)。
一般认为全板中每两孔间O.D值的误差不超过10%为合格。
如果中间孔与四周孔O.D值相差太大,或者反应板的这一边与另一边凹孔的O.D值相差大,均不合格。
此外,还要检查阳性和阴性参考血清O.D值是否有明显差别。
一般要求有10倍左右的差异为合格,微量反应板或塑料管在使用前并不一定通过特殊处理。
用蒸馏水冲洗即可应用。
(二)抗原:在ELISA中,包被于固相载体表面的抗原或抗体的来源和制备方法对试验结果都有影响。
包被所用的抗原必须是可溶性的,而且要求是优质和稳定的制剂,纯度和免疫原性要高。
如果不纯,由于抗原中所含杂质就会竞争固相载体上的有限位置,降低敏感性和特异性。
此外还应考虑到制备包被抗原不应破坏其免疫学活性。
经试验证明,适用于其他血清学试验的抗原并非均适合用于ELISA法。
因此,对某一疾病的诊断,必须通过实践,才能选出适用的优质抗原。
CaryEclipse荧光仪的原理、操作及注意事项(精)
CaryEclipse 荧光仪的原理、操作及注意事项一、荧光剖析法的基来源理处于基态的被测物质的分子在汲取适合能量,如光、化学、物理能后,其共价电子从成键分子轨道或非键分子轨道跃迁到反键分子轨道上去,形成分子激发态。
分子激发态不稳固,将很快衰变到基态。
在分子激发态返回到基态的同经常陪伴着光子的辐射。
这类现象就是发光现象。
荧光则属于分子的光致发光现象。
二、开机及基本操作步骤1.开电脑进入 Windows 系统。
2.开 Cary Eclipse 主机(注:保证样品室内是空的)。
3.双击 Cary Eclipse 图标。
4. 在 Cary Eclipse 主显示窗下,双击所选图标(Concentration为例)。
进入浓度主菜单5.能够任选 A 或 B 步骤进行操作A..新编一个方法步骤。
1).单击 Setup 功能键,进入参数设置页面。
2).按 Cary Control→ Options→Accessories→ Standards→Samples→Reports→Auto store 次序 ,设置好每页的参数。
而后按 OK 回到浓度主菜单。
3).单击 View 莱单,选择好需要显示的内容。
基本选顷 Toolber;buttons ;Graphics;Report。
4 ).单击 Zero 放空白到样品室内→按OK 。
提示: Load blank press ok to read (放空白按 ok 读)。
5).单击 Start.出现标准/样品选择页。
Solutions Available (溶液有效)。
此左框中的标准或样品为不需要从头丈量的内容。
Selected for Analysis (选择剖析的标准和样品)。
此右框的内容为准备剖析的标准和样品。
6).按 ok 进入剖析测试。
Present std1 ( 1.0 g/l)提示:放标准 1 而后按OK键进行读数。
Press OK to read.放标准 2 按 OK 进行读数。
转基因检测试剂盒Bt Cry1Ab-1Ac转基因试剂盒
转基因检测试剂盒Bt Cry1Ab/1Ac转基因试剂盒Bt Cry1Ab/1Ac转基因试剂盒也称转基因检测试剂盒,由托普云农公司供应,是用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基因,灵敏度为1%,整个检测过程只需要10-15分钟,适用于各类企业及检测机构。
下面我们就来具体的聊一聊转基因检测试剂盒的具体信息,以及它是如何使用的。
转基因检测试剂盒【产品编号】规格:100份/盒检测样本:种子/叶片灵敏度:1%检测时间:10分钟有效期:12个月储存条件:4℃~30℃避光保存,切勿冷冻。
转基因检测试剂盒试纸检测原理:转基因 Bt Cry1Ab/1Ac 快速检测试纸应用双抗体夹心免疫层析的原理,样本中的抗原在侧向移动的过程中与胶体金标记的特异性单克三隆抗体 1 结合,形成抗原-抗体复合物,继续向前方流动和 NC 膜检测线上特异性单克隆抗体 2 的结合形成双抗体夹心复合物。
如果样本中转基因蛋白占可溶性蛋白的含量大于 1%,检测线(T 线)显红色,结果为阳性;反之,检测线(T 线)不显色,结果为阴性。
【样品处理】植物种子:1、称取 0.25 g 粉碎的种子样本(玉米、水稻等),到干净提取管中。
充分粉碎样本能够提高测试准确度。
)2、加 0.75 mL 缓冲液溶解。
3、盖好提取管的盖子,用力上下振荡提取管 20~30s,确保样品与缓冲液充分混匀。
静置等待固体物质沉淀在管底。
吸取 500 μL 上清用于检测。
4、请注意不要交叉污染,每个样品采用单独的提取管。
叶片组织:1、将植物叶片组织置于一次性组织提取管的盖子与管身之间,迅速盖住盖子,重复 2 次,得到 2 片圆形叶片组织。
用杵将叶片置于提取管的底部。
用记号笔在管壁做好标记。
2、将叶片充分捣碎。
3、加入 0.2 mL 样品缓冲液。
4、重复碾碎步骤使样品与缓冲液充分接触混合。
拿掉杵棒(注意请将杵棒一次性使用,以免不同样品间交叉污染)。
【转基因 Bt Cry1Ab/1Ac 快速检测试纸使用步骤】1、测试前请完整阅读使用说明书,并将试纸和待检样本溶液恢复至常温。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
植物Cry1C ELISA试剂盒
植物Cry1C酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中Cry1C含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物Cry1C水平。
用纯化的植物Cry1C 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Cry1C,再与HRP标记的Cry1C抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Cry1C呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物Cry1C浓度。
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中
分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;
然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为360 ng/L,240 ng/L,120 ng/L,60 ng/L,30 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、
待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀
释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃
去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃
避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定
应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
20ng/L -450 ng/L
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。