血库出科题.

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血库、PCR出科题

新乡医学院第三组王裴玉贾敏

1、交叉配血主测管为受血者血浆+献血者红细胞。次测管为献血者血浆+受血者红细胞.

2、ABO血型鉴定正定型为单克隆抗体+被测者红细胞,反定型为标准红细胞+被测者血浆。

3、ABO血型鉴定红细胞:标准抗体=3~5:1.

4、不规则抗体筛查所用筛选红细胞浓度为0.5%~0.8%。

5、改良聚凝胺法交叉配血中低离子介质:聚凝胺:假聚集清除剂=3:1:1.

6、不规则抗体筛查需用抗人球蛋白法测定,因为盐水法只能检测IgM类抗体。

7、不规则抗体初筛时若Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ细胞均出现凝集最可能的抗体为抗D,抗E,抗c阳性。

8、要排除IgM类抗体干扰最常用的的是二巯基乙醇或二硫苏糖醇破坏IgM类抗体。

9、白血病患者因疾病原因,红细胞表面抗原可能减弱,易发生正反定型不符,误判断为O

型血。

10、多发性骨髓瘤患者因体内大量IgM类抗体存在,在交叉配血过程中主测管易发生假凝

集,可在37度水浴中配血,以清除冷凝集素的影响,建议输注洗涤红细胞。

11、自免溶贫患者因免疫机制的异常,为预防溶血的发生尽量输注洗涤红细胞。

12、新生儿因ABO系统发育尚不完全,体内抗体含量少,故血型鉴定时只需做正定型。

13、当正反定型不符实可采用吸收放散试验检测被测者红细胞表面抗原,取被测者唾液检

测分泌抗体种类。

14、冷沉淀是新鲜冰冻血浆部分凝血因子浓集产品,主要含Ⅷ,血管性血友病因子,纤维

蛋白原,Ⅶ和纤维结合蛋白。

15、血小板保存须37度摇箱,以防发生凝集。

16、对一个体重60kg,血容量正常的贫血患者,输注1单位红细胞可提升Hb5g/L.

17、对于ABO新生儿溶血病患者,不论新生儿的ABO系统是不是O型,均应选用O型

洗涤红细胞。

18、抗人球蛋白测试卡不规则抗体筛查时专用离心机离心5分钟,900rpm2分钟,1500rpm3

分钟。

19、嘌呤和嘧啶含有共轭双键,对250~280nm紫外线有较强吸收作用,在260nm处吸收

最强。

20、蛋白质对紫外线的吸收峰为280nm。

21、核苷酸由核苷和磷酸组成。

22、核苷包括碱基和戊糖。

23、在RNA中含有的是D-核糖,在DNA戊糖成分是D-2-脱氧核糖。

24、单核苷酸通过3’5’-磷酸二脂键相连,形成多聚核苷酸链,链的骨架有戊糖基和磷酸基

构成。

25、磷酸分子的一级结构至5’-3’端核苷酸排列顺序,即核苷酸序列。

26、核酸分子的二级结构即双螺旋模型,螺距3.4nm,直径2.0nm,每上升一圈约10个碱

基对。

27、核酸分子的三级结构即核小体,由DNA和组蛋白组成。

28、核酸链内既有酸性的磷酸基又有碱性的含氮杂环碱,是两性电解质,但磷酸酸性较强,

故表现为酸性。

29、核酸分子有较大粘性,粘度测定可作为DNA变性指标。

30、核酸变性即氢键的断裂。

31、高色效应即变性后的核酸在260nm光吸收增强。

32、底色效应即复性时紫外光吸收减弱的现象。

33、探针指一小段已知序列的单链(含数十至数百个核苷酸)核糖,经同位素或其他发光

物质标记其末端或全链。

34、测定RNA的血浆中使用EDTA抗凝,严禁使用肝素,因其对PCR扩增有抑制,且很

难在核算提取过程中完全去除。

35、肝素对MLV反转录酶和TaqDNA聚合酶均有很强的抑制作用。

36、HCV-RNA标本要求采用EDTA抗凝血因为无抗凝剂的全血若发生溶血,血红素可干扰

RNA,使其降解导致结果假阴性。

37、在DNA的提取中75%酒精用于沉淀DNA,95%的酒精用于提纯。

38、PCR反应体系包括:引物、酶、dNTP、模板、Mg离子、探针。

39、引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程

度。

40、PCR循环包括90~95度变性30s,40~60度退火30s~1min,70~75度延伸1~2min。

41、人乳头状瘤病毒(HPV)分型检测PCR+膜杂交法检测原理:采用基因扩增技术及导流

杂交原理,通过反向点杂交检测扩增产物与包被有型特异性探针膜杂交结果,采用碱性磷酸酶系统定性检测,从而对21种HPV基因型(6、11、16、18、31、33、35、39、

42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68和CP8304(81))进行分型检测。

42、HPV标本要求:3天内不使用阴道内药物或对阴道进行冲洗;24小时内不应有性行为;

检查应在非月经期进行。

43、PCR反应抑制物包括:内源性:免疫球蛋白,蛋白酶,血红素及其代谢产物,白细胞

内的乳铁蛋白,肌红蛋白,酯类,粘蛋白,尿素,离子,胆盐,多糖。外源性:肝素,纤维素,硝酸纤维,矿物油,滑石粉等

44、HBV-DNA定量检测PCR-荧光探针法原理:永一对乙型肝炎病毒特异性引物和一条乙型

肝炎病毒特异性荧光探针,配以PCR反应液、耐热DNA聚合酶(Taq酶)、核苷酸单体(dNTP)等成分,永PCR体外扩增法定量检测乙型肝炎病毒DNA》

45、改良聚凝胺法正定型原理:红细胞血型抗原及相应的抗体经低离子介质快速孵育致敏

后,加入由聚凝胺等带正电荷的大分子聚合物,以减弱红细胞静电斥力,缩短红细胞间距,加速分子运动,帮助红细胞血型抗原与相应抗体紧密搭桥,再利用机械离心力的作用,呈现肉眼可见的凝集状,这种凝集反应中存在的非特异性免疫凝集因素,可被附加的假凝集清除液快速清除,而特异的免疫凝集对假凝集清除液不敏感,能维持较长时间的凝集。由此可特异性的检出相应的血型抗原及抗体IgG,IgM.

46、ABO血型鉴定正反定型不符的常见原因有哪些?

答:1,技术和管理错误;2、血清异常;3、红细胞致敏;4、异常基因型;5、近期输血;6、疾病因素导致抗原减弱;7、嵌合体血型;8、获得性B;9、血型特异性物质过高;10、近期内进行大量的血浆置换;11、异常的血浆蛋白;12、不规则抗体的存在、13、低丙种球蛋白血症;14药物因素;15年龄因素;16防腐剂因素。

47、四种核苷酸分别是:腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G),胞嘧啶(C),胸腺嘧啶(T).

48、PCR技术类型有:原位PCR技术,反转录PCR技术,定量PCR.

49、Mg离子对PCR的影响:Mg离子浓度过高,反应特异性降低,出现非特异性扩增,浓

度过低会降低TaqDNA聚合酶的活性,使反应产物减少。

50、新生儿溶血病换血治疗:1、ABO新生儿溶血病换血,选择O型红细胞、AB型血浆

混合输注;2、RhD新生儿溶血病换血,选择ABO与新生儿同型的Rh阴性血输注;3、RhD伴ABO新生儿溶血病换血,选择O型Rh阴性红细胞加AB型血浆混合输注;4、

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