小檗碱激活AMPK抑制3T3-L1脂肪细胞分化
小檗碱改善胰岛素抵抗机制的研究进展
小檗碱改善胰岛素抵抗机制的研究进展发表时间：2012-10-23T14:49:45.903Z 来源：《医药前沿》2012年第19期供稿作者：王红尹建梅[导读] 在胰岛素抵抗大鼠及肝细胞培养的研究均表明小檗碱可以肝细胞胰岛素抵抗王红尹建梅（天津市第三医院内分泌科 300250）【摘要】胰岛素抵杭(IR)是许多临床疾病，尤其是常见的内分泌代谢性疾病，如糖尿病、肥胖症和动脉粥样硬化等的共同危险因素，是近年世界医学多学科共同感兴趣的研究热点。
小檗碱是黄连的根状茎中提取的异喹啉类生物碱，近年研究发现小檗碱具有降糖,增强胰岛素敏感性，改善胰岛素抵抗，调节血脂紊乱的作用。
本文总结了近年来文献报道小檗碱改善胰岛素抵抗的相关机制的研究。
【关键词】小檗碱胰岛素抵抗【中图分类号】R969 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）19-0056-03胰岛素抵杭(Insulinresistanee，IR)是指机体对一定量的胰岛素的生物学效应低于预计正常水平的现象，表现为胰岛素的敏感性和反应性降低，葡萄糖摄取减少和糖原合成减少。
高血压、高脂血症、肥胖、葡萄糖耐量减低(IGT)或2型糖尿病常合并存在，其共同病因被认为可能是胰岛素抵抗。
胰岛素抵抗是一种与多种疾病的发生、发展密切相关的重要病理生理状态。
它是许多临床疾病，尤其是常见的内分泌代谢性疾病，如糖尿病、肥胖症和动脉粥样硬化等的共同危险因素，成为近年世界医学多学科共同感兴趣的研究热点。
小檗碱(Berberine，Ber)又名黄连素，是自毛蓑科黄连属植物黄连 (Coptis Chinensis Franch)的根状茎中提取的异喹啉类生物碱，是具有广泛用途的药物。
以往的研究表明，它有抗原虫和抗微生物的作用。
近年研究发现小檗碱具有降糖,增强胰岛素敏感性，改善胰岛素抵抗，调节血脂紊乱的作用[1,2]，且对肝肾功能无明显影响[3],但小檗碱改善IR的作用机制还未完全明确,尚需深入研究。
小檗碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响
ｃ ｌ ． ｎ Ｅ ｄ ｃｉ ｔ１ １ ９ １ ４ ４ ３ １ ３ ｅｌ Ｊａｉ ｎ ｏ ｒ Ｍｅａ） ９ ９，８ ： １ ８ ４ ４ ． ｓ ｎ ，
（ 稿 日 ：０ ７０ —０ 收 期 ２ ０ —７３ ）
作者 简介 ： 李珍 ， ，９０年 ３月生 ， 士在读 ， 西医科大 女 １８ 硕 山 学，３ ０ １ ０ ０ ０
但它是否参与脂肪细胞的增殖和分化过程 ， 目前 尚不清楚 。
大 的脂滴 ， 脂滴 的数 目也增 多。第 １ ２天成熟的脂 肪细 胞数 目逐渐增多 ； 而对照组 从分 化的第 ２天 已经有细 胞形态 的 变化 ， ６天就 出现了富含脂 滴的成熟 脂肪 细胞 ， １ 第 第 ２天
分化成熟脂肪细胞的数 目明显高于小檗碱组。
本研究通过小檗碱干预小 鼠前脂肪细胞观察其对该细胞增 殖和分化的影响 ， 、 为肥胖 的 ２型糖尿病 的治疗 提供可 能 的
途径 。
２３ 油红 ０染色 的 Ａ 值测定结 果 ： ， 对照组 （ ． ０６ ８±０ １ ） ．２ ， 小檗碱组 （ ．８±０ ０ ） ０３ ．５ 。在诱导分 化的第 １ ， 照组分 ２天 对
ｐ ｏ ｕ ｔ ｎ １ ｎ ｏ ｆ ｍ ， ９ ８ １ ８ ： １ —２ ｒｄ ｃｉ ，ＪＣ ｉ Ｅ ｄ ｃ ｎＭｅ ｂ １ ９ ， ３ ２ ９２ ３， ｏ ｎ ｉ １
４ ＮａｓｒＣＧ， ｎ ＸＭ ， ａＣＦ． ｇ ｌｔ ｆｔａ ｓｏ ｆ ｇ ｇ ｏ ｈ ｓｅ Ｔａｇ Ｍ Ｒｅ ｕａｉ ｏ ｒｎ ｆｍ ｉ ｒ ｗｔ ｎ ｏ ｎ
小檗碱对 ３ ３Ｌ 前脂肪细胞增殖和分化的影响 Ｔ 一１
山 西 省 汾 阳 医 院 （３ ２ ０ 王 ０２０ ） 鸿 韩红玉 刘彩 云
山西 医科 大学第一 医院
小檗碱的降糖作用独立于AMPK的信号通路
小檗碱的降糖作用独立于AMPK的信号通路肖元元;徐淼;殷峻;沈丽;魏丽【摘要】目的：研究小檗碱的降糖作用是否依赖于单磷酸腺苷激活蛋白激酶（AMPK）信号途径。
方法培养HepG2细胞和C2C12细胞，给予不同浓度小檗碱处理。
葡萄糖消耗实验和乳酸生成实验用于检测小檗碱的降糖以及刺激糖酵解的作用。
AMPK抑制剂化合物C（Compound C，CC）和显性失活突变型AMPK，即腺病毒负显性AMPK（Ad-DN-AMPK）腺病毒用于抑制AMPK的表达和活性。
Western印迹法用于检测AMPK以及乙酰辅酶A羧化酶（ACC）磷酸化水平，以评估AMPK通路的活性。
结果小檗碱显著刺激了HepG2细胞和C2C12细胞的葡萄糖消耗和乳酸生成，并表现出剂量依赖性的药物作用。
5和10µmol/L的小檗碱显著增加AMPK及其下游蛋白ACC的磷酸化水平。
CC和Ad-DN-AMPK腺病毒转染能明显抑制细胞内AMPK信号通路的活性。
然而，在AMPK活性被抑制的条件下，小檗碱依然能够显著增加细胞的葡萄糖消耗和乳酸生成。
结论小檗碱通过刺激糖酵解而上调细胞的糖代谢，该作用无需AMPK信号通路的参与。
即使在AMPK的表达或者活性被抑制的情况下，小檗碱依然能够发挥显著的降糖作用。
%Objective To investigate whether berberine exerts hypoglycemic effect in dependence of adenosine 5¢-monophosphate-activated protein kinase (AMPK) signal pathway. Methods After human liver hepatocellular cell line HepG2 and mouse myoblast cell line C2C12 were treated with berberine at different concentrations, glucose consumption and lactate production were used to evaluate the glucose-lowering and anaerobic glycolysis effects of berberine. Compound C (CC), an AMPK inhibitor, and recombinant adenovirus Ad-DN-AMPK expressing dominant negativemutant of AMPK, were used to inhibit the expression and block the activity of AMPK in the cells. AMPK phosphorylation and acetyl coA carboxylase (ACC) phosphorylation were measured with Western blotting to assess the activity of AMPK pathway. Results Berberine significantly increased glucose consumption and lactate production in HepG2 and C2C12 cells in a dose-dependent manner. AMPK and ACC phosphorylation were significantly stimulated by 5 and 10µmol/L berberine. CC and adenovirus-dominant negative-AMPK (Ad-DN-AMPK) adenovirus obviously inhibited AMPK activity, but failed to diminish the promotion of glucose utilization and lactate production induced by berberine. Conclusion Berberine significantly enhances glucose consumption by stimulating glucose metabolism, in absence of AMPK pathway activation. Therefore, even in the case of the expression or activity of AMPK is inhibited, berberine is still able to exert a significant hypoglycemic effect.【期刊名称】《中华老年多器官疾病杂志》【年(卷),期】2014(000)011【总页数】5页(P847-851)【关键词】小檗碱;AMPK;糖酵解;乳酸【作者】肖元元;徐淼;殷峻;沈丽;魏丽【作者单位】上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病临床医学中心，上海市糖尿病重点实验室，上海市糖尿病研究所，上海市代谢病临床医学中心，上海 200233;上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病临床医学中心，上海市糖尿病重点实验室，上海市糖尿病研究所，上海市代谢病临床医学中心，上海 200233;上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病临床医学中心，上海市糖尿病重点实验室，上海市糖尿病研究所，上海市代谢病临床医学中心，上海 200233;上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病临床医学中心，上海市糖尿病重点实验室，上海市糖尿病研究所，上海市代谢病临床医学中心，上海 200233;上海交通大学附属第六人民医院内分泌代谢科，上海市糖尿病临床医学中心，上海市糖尿病重点实验室，上海市糖尿病研究所，上海市代谢病临床医学中心，上海 200233【正文语种】中文【中图分类】R917.78;R587.1;R34小檗碱又名黄连素，是中医治疗消渴疾病常用药物黄连的主要成分。
小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化影响的初探
ｇｉ ｄｉ ｌ ｏｌ ｅ Ｈｕ ｚｏｇ Ｕ ｉｅｓｙ ａ Ｍｅ ｃ ｌｇ ， ａｈ ｎ ｎｖｒｉ ａＣ ｅ ｔ
Ａ ｓ ａ ｔ Ｏ ｊｃ ｖ Ｔ ｕ ｙｔｅｅ ｅｔ ｏ ｂ ｒ ｅ ｎ ｎｈ ｍａ ｍｅ ｔ ｒａ ｉ ｘ ｔｓ ｒｌ ｅ ｔ ｎａ ｄ ｄ ｅｅ ｔ ｔ ｎ Ｍｅ ｏ ｓ ｂ ｔ ｃ ： ｂｅ ｉｅ ｏｓ ｄ ｆｃ ｆ ｅ ｆ ｅ ｕ ｎｏ ｎａ ｐｅ ｄ ｘ ｚ ｅ ｏｉ ｒ ｉ ｉ ｒｎ ｉ ｉ ． ｒ ｔ ｔ ｈ ｆ ｓ ｂｉ ｏ ｌ ｔ ｙ ｐ ｆａｏ ｎ ｆ ａｏ ｔ ｄ ｈ
胞增殖分化的影响。 结果
结论
小檗碱对人大 网膜前脂肪细胞 的增殖有促进 作用 ， 分化过 程 中的脂 肪积 聚有抑制 作用。 对
小檗碱促进前脂肪细胞 的增殖 和抑制分化作用可能 与它具有潜 在的减肥 、 降脂 作用有关 。这 为小檗碱 治疗肥 胖 ２型
糖尿病患者及增加胰 岛素敏感性 的疗效提供理论依据 。
ｔ ｅ ｅｆ ｃ ｆｂ ｒ ｅｉ ｅ ｉ ｆ ｔ ｅ ｂ ｒｎ ． ｖ ｅ ｏ Ｋｅ ｒ ｓ ｂ ｒ ｅ ｉ ｅ ｙ ｗｏ ｄ ： ｅ ｂ ｒ ； ｐ ｅ ｄ ｐ ｃ ｔ ； ｃ ｌ ｄｆｅ ｅ ｔ ｔ ｎ； ｃ ｌ ｐ ｏ ｉ ｒ ｔ ｎ ｎ ｒ ａ ｉｏ ｙ ｅ ｅｌ ｉ ｒｎ ｉ ｉ ｅｌ ｒ ｌ ｅ ａｉ ｆ ａｏ ｆ ｏ
关键词 ： 小 檗碱 ； 前脂肪细胞 ； 细胞 分化 ； 细胞增殖
中 图分 类 号 ： Ｒ ６ ９９ 文献标识码 ： Ａ
Ｅ ｆｃ ｓｏ ｅ ｂ ｒｎ ｎ ｈ ｍａ ｍｅ ｔ ｌｐ ｅ ｄ ｐ ｃ ｔ ｒ ｌ ｅ ａ ｉｎ ａ ｄ ｄ ｆ ｅｅ ｔ ｔｏ ｆ ｅ ｔ ｆ ｂ ｒ ｅ ｉ ｅｏ ｕ ｎ ｏ ｎ ａ ｒ ａ ｉ ｏ ｙ ｅｐ ｏ ｉ ｒ ｔ ｉｆｒ ｎ ｉ ｉ ｎ ｆ ｏ ｎ ａ
3T3-L1诱导分化成熟脂肪细胞方案
Sigma的试剂：IBMX（Sigma I-7018)Dexamethasone (Sigma D-4902)Insulin (Bovine; Sigma I-5500)gibco血清：小牛血清 (GibcoBRL-Cat#16170-078/Lot #1060198)胎牛血清(GibcoBRL-Cat# 10437-028/Lot # 1026566)培养基DMEM;（GibcoBRL-Cat# 11965-084）MEM Sodium Pyruvate (100mM; GibcoBRL Cat#11360-070)Pen/Strep/Glutamine (100x P/S/G; GibcoBRL Cat#10378-016)一: 本次3T3-L1细胞共一25cm3培养瓶消化后传代分为2个10cm培养皿， 3天后每个10cm皿分别传代3个10cm皿。
共6个10cm皿，将其中5个皿细胞冻存于-80°，将一个10cm皿中3t3-l1细胞分别接种于一个6孔板一个12孔板其中4孔和2个10cm皿，待2个10cm皿中细胞铺满90%后消化冻存于-80。
二：6孔板和12孔板4孔即将用于分化。
两者均在细胞铺满90%左右接触抑制2d开始加诱导剂，诱导方案严格按照之前计划的施行，诱导剂①培养2d后换为诱导剂②培养2d，后换诱导剂③培养，以后每48h换液，均采用诱导剂③，8天左右即可看到脂滴，此次整个诱导过程共用14天，出脂滴后继续48h换液，目的主要是获得更多的脂肪细胞。
三：3t3-l1诱导分化过程整体较为顺利，之前考虑到的诸如细胞可能贴壁不牢，易漂浮的情况基本未出现（漂浮很少），诱导剂配置过程中由于剂量极低，担心的浓度不准问题，后证明对分化影响不是很大。
一、诱导液配制1、4,3-异丁基-1-甲基黄嘌呤溶液（IBMX）配制。
分子量222，几乎不溶于水，现配现用，过滤除菌。
100×母液（50mmol/L）： IBMX+940ul超纯水+60ul 1mol/L KOH。
小檗碱对脂肪胰岛素抵抗细胞PPARγ及脂肪分泌因子表达的影响
小檗碱对脂肪胰岛素抵抗细胞PPARγ及脂肪分泌因子表达的影响脂肪分泌細胞因子与脂肪组织胰岛素抵抗（IR）密切相关，在糖尿病的发生发展研究中越来越受到重视。
该实验主要研究小檗碱对脂肪胰岛素抵抗（IR）细胞PPARγ和脂肪分泌因子mRNA表达的影响，探讨小檗碱增强胰岛素敏感性的分子机制及微滴数字PCR（ddPCR）方法的应用优势。
该实验采用ddPCR绝对定量分析简单直观确定合适的内参基因，ddPCR和荧光定量法（qPCR）方法比较研究不同剂量（10，20，50，100 μmol·L-1）小檗碱干预IR 3T3-L1脂肪细胞中PPARγ、脂联素、抵抗素和瘦素mRNA表达；加入GW9662研究PPARγ和脂联素mRNA表达的内在关联。
ddPCR结果发现β-actin 在脂肪细胞中表达稳定，适合作为内参基因对定量PCR数据标准化。
ddPCR和qPCR方法均显示与IR模型组相比，10，20，50，100 μmol·L-1小檗碱呈现剂量依赖降低脂联素mRNA 表达（P＜0.01）。
对于PPARγ，qPCR显示20，50，100 μmol·L-1小檗碱呈现剂量依赖降低其表达（P＜0.01），而ddPCR仅在50，100 μmol·L-1降低其表达（P ＜0.05）。
PPARγ特异拮抗剂GW9662干预实验表明脂联素基因表达受PPARγ直接调控（P＜0.05）。
ddPCR探针法检测到各剂量小檗碱均剂量依赖显著降低抵抗素和瘦素mRNA表达（P＜0.01）。
结果揭示小檗碱调节脂联素起到胰岛素增敏作用并非通过PPARγ依赖途径在转录调控水平上调脂联素表达，推测可能是在翻译后调控水平上调高聚体脂联素比例。
小檗碱下调抵抗素和瘦素表达减轻脂解改善IR。
ddPCR比qPCR具有更好线性范围和灵敏度，对低丰度表达基因检测具有明显的技术优势。
标签：小檗碱；胰岛素抵抗；PPARγ；脂肪细胞因子；微滴数字PCR （ddPCR）[Abstract] Adipocytokines are closely associated with insulin resistance （IR）in adipose tissues，and they are more and more seriously taken in the study of the development of diabetes. This experiment was mainly to study the effect of berberine on mRNA expression levels of PPARγ and adipocytokines in insulin resistant adipocytes，and investigate the molecular mechanism of berberine in enhancing insulin sensitization and application advantages of droplet digital PCR （ddPCR）. ddPCR absolute quantification analysis was taken in this experiment to simply and intuitively determine the appropriate reference genes. ddPCR and quantitative Real-time PCR （qPCR）were used to compare the effect of different doses of berberine （10，20，50，100 μmol·L-1）on mRNA expression levels of PPARγ，adiponectin，resistin and leptin in IR 3T3-L1adipocytes. Antagonist GW9662 was added to study the inherent correlation between PPARγ and adiponectin mRNA expression levels. ddPCR results sho wed that the expression level of β-actin in adipocytes was stable，and suitable as reference gene for normalization of quantitative PCR data. Both of ddPCR and qPCR results showed that，as compared with IR models，the mRNA expression levels of adiponectin were decreased in the treatment with berberine （10，20，50，100 μmol·L-1）in a dose-dependent manner （P＜0.01）；the expression of PPARγ was decreased by 20，50，100μmol·L-1berberine in a dose-dependent manner in qPCR assay （P＜0.01）and decreased only by 50 and 100 μmol·L-1berberine in ddPCR assay （P＜0.05）. PPARγ specific antagonist GW9662 intervention experiment showed that adiponectin gene expression was directly relevant with PPARγ （P＜0.05）. ddPCR probe assay showed that various doses of berberine could significantly reduce mRNA expression levels of resistin and leptin （P＜0.01）in a dose-dependent manner. In conclusion，berberine enhanced insulin sensitization effect not by up-regulating adiponect in expression of transcriptional level in PPARγ-dependent manner，but may by the elevated multimerization of adiponectin in the posttranslational regulation level. Berberine down-regulated the resistin and leptin expression levels，which could alleviate lipolysis and improve IR in adipocytes. ddPCR provided better sensitivity and linear range than qPCR，with obvious technical advantages for the detection of low abundance expression of target genes.[Key words] berberine；insulin resistance；PPARγ；adipocytokines；droplet digital PCR （ddPCR）doi：10.4268/cjcmm20161103近年来临床调查发现我国18岁以上糖尿病患者多达1.139亿[1]，控制血糖是防治糖尿病的关键。
小檗碱缓解胰岛素抵抗信号通路的研究进展
小檗碱缓解胰岛素抵抗信号通路的研究进展糖尿病是一种代谢紊乱型疾病，是由于胰岛素敏感性受损，阻碍机体对葡萄糖的摄取和利用，导致以葡萄糖不耐受为特征的临床病理状态。
恢复胰岛素敏感性和改善代谢稳态对治疗糖尿病及其并发症至关重要。
小檗碱是黄连等中药中提取的一种异喹啉生物碱，具有降血糖、改善能量代谢和抗炎等药理作用[1]。
大量研究表明小檗碱可恢复胰岛素敏感性和改善代谢稳态，对治疗糖尿病及其并发症至关重要。
通过下调脂肪生成相关基因的表达可改善脂肪组织和肌肉中能量消耗相关基因的表达[2]。
Ko 等[3]发现小檗碱能通过IRS1-PI3-Kinase-AktGLUT4 易位途径增加膜中 GLUT4 含量，增加胰岛素敏感性，同时还能激活 Min6 细胞中的 CREB 来增强胰岛素/IGF-1 信号级联，增强胰腺 B 细胞的功能和质量。
小檗碱可通过调控 miR-122、miR-146b和 siRNA1（SIRT1）在肝脏组织中的表达调节脂质代谢调节因子，起到抗糖尿病作用[4-5]。
胰岛素信号通过促进糖原储存和抑制脂肪分解在维持代谢稳态中起着关键作用。
小檗碱通过刺激小鼠肝脏LKB1/AMPK/PGC1α 通路对果糖诱导的胰岛素抵抗具有保护作用，同时上调 Akt 和 GSK3b 的磷酸化水平，改善胰岛素信号[6-7]。
小檗碱可恢复糖尿病大鼠的胰腺组织损伤[8]，降低糖尿病大鼠的胰岛素敏感指数和血浆中游离脂肪酸，调节机体糖脂代谢，促进胰岛素分泌[9]。
还有研究表明小檗碱还可通过抑制 HPA 轴提高骨骼肌 GLUT4 表达[10]，上调模型大鼠特定siRNA 胰岛素受体介导信号[11]，以及诱导纤维细胞生长因子21（FGF21）合成、分泌等方面增加胰岛素敏感性，缓解胰岛素抵抗[12]。
通过上述动物和细胞实验证明小檗碱具有缓解胰岛素抵抗作用。
本文总结了小檗碱通过依赖性蛋白激酶（MAPK）信号通路、胰岛素信号通路、核因子-κB（NF-κB）信号通路以及其他信号通路改善胰岛素抵抗来说明小檗碱降血糖的作用机制。
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子分泌和炎症信号通路的影响
近 年来 ２型 糖尿病 炎 症 学说 备受 关 注 ， 多 许
研 究 表 明 ２型 糖 尿 病 患 者 血 清 中 多 种 炎 症 因 子 分 泌 和 表 达 增 加 。这 些 炎 症 因子 和 炎 症 标 志 物 可 以
公 司 ； 血清 白蛋 白 （ Ｓ ， 牛 Ｂ Ａ） Ａｍｒｓｏ公 司 ； 生 ｅｃ 新 牛血 清 、 ＤＭＥ 高糖 培养 基 ， 国 ＧＩ Ｉ Ｏ 公 司 ； Ｍ 美 ＢＣ
器 官 ， 上 述 炎 症 因 子 产 生 的 重 要 场 所 之 一 。 因 是
海西 唐生 物科 技有 限公 司 ； ａ ａａＰ ｉ Ｓ ｒ ｔ Ｔ ｋ ｒ ｒ ｍｅ ｃｉ 州 ｐ
ＲＴ ｅ ｇ ｎ ｔ Ｓ ｒ ａ ｅ ｔＫｉ、 ＹＢＲ Ｐ ｅ ｉ Ｔａ Ⅱ ， 生 ｒ ｍ ｘ Ｅｘ ｑ 宝
的磷 酸 化 水 平 明 显 增 加 ， 小 檗碱 干预 后 显 著 下 降 。ＱＲ Ｃ 检 测 结 果 显 示 １ ｇ ｍｌ 经 ＴＰ Ｒ ０ｎ ／ ＴＮ — Ｆ ｄ作 用 ２ ４ｈ使 ３ 一 １脂 Ｔ３Ｉ 肪 细 胞 Ｔ 、 ６ Ｃ 、 Ｐ １的 ｍＲＮ 表 达 增 加 ， 小 檗碱 干预 后 这 些 炎症 因子 的表 达 显 著 下 降 。 结 论 小 檗 碱 ＮＦａ Ｉ一 、 ＲＰ ＭＣ Ｉ Ａ 经
物工 程 （ 大连 ） 限 公 司 ； ｔａｔ 有 抗 ？ ｃｉ － ｎ单 克 隆抗 体 、 抗 Ｉ — 单 克 隆抗 体 、 Ｉ ＫＫ ｆ ３ 抗 ＫＫ— （ ｅ１ ０ ／ＫБайду номын сангаас Ｊ ａ ｓｒ ８ ） Ｉ — ３ （ｅ １ １ 多 克 隆 抗 体 、 抗 兔 辣 根 过 氧 化 物 酶 ｓｒ８ ） 羊 （ Ｐ 连接 的第 二抗体 均 ， 国 Ｃ ｌｓ ｎｌｇ ＨＲ ） 美 ｅｌ ｉ ａｉ ｇ ｎ
黄芪多糖和小檗碱对3T3_L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响
中国中西医结合杂志 2004 年 10 月第 24 卷第 10 期 CJITWM , O ctober 2004, V ol. 24, N o. 10
黄芪多糖和小檗碱对 3T 3 L 1 脂肪细胞 糖代谢及细胞分化的影响
王树海 王文健 汪雪峰 陈伟华
摘要 目的 比较黄芪多糖和小檗碱对脂肪细胞糖代谢和细胞分化的影响, 并分析其改善糖代谢的可 能机制。方法 检测黄芪多糖和小檗碱干预的脂肪细胞对3H 葡萄糖的摄取, 对黄芪多糖和小檗碱干预分化 的细胞进行油红 O 染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度。逆转录多聚酶联反应( RT PCR) 检测脂肪 细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体 ( PPAR ) 、CAAT / 增强子结合蛋白 ( C/ EBP ) mRNA 的表 达。结果 黄芪多糖和小檗碱组葡萄糖摄取率分别为正常组的 109 3% 和 182 7% ; 黄芪多糖明显促进分化 及其 PPAR mRNA 表达, 与对照组比较, 差异有显著性( P < 0 01) ; 小檗碱则明显抑制细胞分化及 PPAR 、 C/ EBP mRNA 表达, 与对照组比较, 差异有显著性( P < 0 01) 。结论 黄芪多糖促进脂肪细胞葡萄糖摄取 及细胞分化和 PPAR mRNA 表达, 而小檗碱促进葡 萄糖摄取但抑制脂肪细胞分化和 PPAR 及 C/ EBP mRNA 的表达。
Objective T o compare the ef fects of Astrag alus polysaccharides ( AP ) and berberine ( BB) on the adipocyte s carbohydrate metabolism and cell differentiat ion, f or assessing the possible mechanism of t hem in improving carbohy drat e metabolism. Methods Adipocyt es w ere t reat ed wit h AP or BB, t he 3 H glucose up t ake rat e in t hem w as invest igat ed, t hose of differentiat ion phase were st ained by oil red O to analyze t he degree of cell different iat ion by spectrophot ography quantit at ively . T he adipocy te diff erentiation related expression of PPAR mRNA and C/ EBP mRNA w ere determined by RT PCR. Results T he 3 H glucose up take rate in the AP group and BB group w ere 109. 3% and 182. 7% of t hat in the blank cont rol group respect ively. AP obvious ly promot ed the cell diff erentiation and up regulat ed ex pression of PPAR mRNA, w hile BB suppressed t he dif ferent iat ion and ex pression of PPAR and C/ EBP mRNA dist inct ly , all showing significant dif ference as com pared w ith t hat in t he blank cont rol ( P < 0. 01) . Conclusion AP could promote glucose up t ake, cell dif feren t iation and PPAR mRNA expression, BB also promote glucose up t ake, but suppress t he cell differentiat ion, and inhibit expressions of PPAR and C/ EBP mRNA in 3T 3 L 1 adipocy tes.
小檗碱通过抑制脂肪酸摄取降低小鼠原代肝细胞脂质沉积
摘 要 ：目的 观 察小檗碱对小鼠原代肝细胞脂质沉积的影响 及其是否依赖于磷酸腺苷活化蛋白激酶（a deno/ne 5 ^ m o n o phosphate-activated protein kinase，A M P K ) 通 路 ，探 讨 小 楽 喊 治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方 法 用 不 同 浓 度 白 蛋 白偶联的油酸（0 A ) 孵 育 小 鼠 原 代 肝 细 胞 ，确 定 0 A 诱导脂 肪 变 的 具 体 浓 度 ，同 时 以 二 甲 双 胍 为 阳 性 对 照 ，给 予 小 檗 碱 处 理 24 ( ，乳酸脱氢酶( L D H )试剂盒检测确定小檗碱的安全 剂 量 ;油红染色定性判断细胞内脂质水平;酶法定量检测细 胞 内 甘 油三酯含量；W e / r n blot法 检 测 A M P K 以及乙酰辅 酶 A 羧 化 酶 （A C C ) 磷 酸 化 水 平 。A M P K 的 特 异 性 阻 断 剂 C o m p o u n d C ( C C ) 孵 育 原 代 肝 细 胞 1 h 后 ，再 用 小 檗 碱 处 理 细 胞 24 ( ，油红染色及甘油三酯检测判断A M P K 被抑制时小 檗 碱 对 脂 质 沉 积 的 作 用 。生 化 分 析 仪 检 测 0 A 组 、小檗碱 组 、鱼藤酮（线 粒 体 复 合 物 I 抑制剂）组细胞上清液中脂肪酸 的含量，观察细胞对脂肪酸的摄取情况与复合物I 抑制之间 的关系。结 果 小 檗 碱 在 无 细 胞 毒 性 的 剂 量 下 可 明 显 降 低 小 鼠 原 代 肝 细 胞 中 油 酸 所 致 脂 质 沉 积 。同 时 ，小 檗碱可使 A M P K 及 A C C 的 磷 酸 化 水 平 增 加 。此 外 ，在 加 人 C C 即 A M P K 活性被抑制的情况下，小檗碱降低肝细胞脂质沉积的 作 用 不 受 影 响 。小 檗 碱 和 鱼 藤 酮 分 别 使 肝 细 胞 的 油 酸 摄 取 减 少 约 31. 2 % 和 23. 6 % 。结 论 小 檗 碱 通 过 抑 制 电 子 传 递 链 线 粒 体 复 合 物 I 抑制脂肪酸摄取，进而降低小鼠原代肝细 胞 脂质沉积，这一作用并不依赖于A M P K 通 路 。
小檗碱在制药中的应用[发明专利]
![小檗碱在制药中的应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/e5ae67a6767f5acfa0c7cda4.png)
专利名称：小檗碱在制药中的应用专利类型：发明专利
发明人：宁光,王宁,周丽斌,王晓申请号：CN201210594643.4申请日：20121231
公开号：CN103040821A
公开日：
20130417
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于医药制备领域，特别涉及小檗碱在制备治疗肥胖症及治疗2型糖尿病药物中的应用，制备抑制脂肪细胞分化的药物及促进磷酸二酯酶活性的药物中的应用。
本发明采用3T3-L1脂肪细胞为研究对象，实验结果显示：小檗碱能抑制3T3-L1脂肪细胞分化，尤其是当小檗碱浓度为
10μmol/L几乎完全抑制脂肪细胞分化；小檗碱能通过激活AMPK而降低C/EBPα、PPARγ等脂肪细胞分化转录因子的表达，抑制脂肪细胞的分化；小檗碱可通过减少对PED活性的抑制，增加细胞内cAMP的降解，降低HSL的磷酸化水平而起抗脂解作用。
本发明为临床上更合理的将小檗碱用于2型糖尿病及肥胖患者的治疗提供了实验数据和理论依据。
申请人：上海市内分泌代谢病研究所
地址：200025 上海市黄浦区瑞金二路197号
国籍：CN
代理机构：上海伯瑞杰知识产权代理有限公司
代理人：吴瑾瑜
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梓醇和小檗碱及其配伍对脂肪细胞糖代谢和分化的影响
梓醇和小檗碱及其配伍对脂肪细胞糖代谢和分化的影响刘芳芳;杨明玮【期刊名称】《山西中医》【年(卷),期】2014(030)003【摘要】目的:观察中药提取物梓醇和小檗碱及其配伍对3T3-L1脂肪细胞增殖,葡萄糖代谢及细胞分化的影响,初步探讨药物改善胰岛素抵抗(IR)的可能机制.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测3T3-L1前脂肪细胞的增殖；以葡萄糖氧化酶法检测药物干预后培养液中葡萄糖消耗量,并以油红O染色检测细胞分化过程中胞浆脂质的堆积.结果:与对照组比较,小檗碱组使前脂肪细胞MTT值增加29％,而小檗碱加梓醇组、梓醇组均无差异；梓醇、小檗碱及其配伍组分别使成熟脂肪细胞的葡萄糖消耗增加64％、76.5％和98％；小檗碱处理脂肪细胞胞浆脂质堆积明显低于对照组,梓醇组与对照组无差异.结论:小檗碱能促进前脂肪细胞增殖,增加葡萄糖消耗,抑制脂肪细胞分化；梓醇能促进葡萄糖吸收；其作用均不依赖胰岛素的存在.直接增加葡萄糖的吸收可能是这两种药物降低血糖,改善胰岛素抵抗的机制之一.【总页数】3页(P50-52)【作者】刘芳芳;杨明玮【作者单位】广东省惠州市中医医院惠州516003;广东省惠州市中医医院惠州516003【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响 [J], 周丽斌;杨颖;唐金凤;李凤英;李荣英;陈名道2.小檗碱对3T3-L1前体脂肪细胞增殖与分化的影响 [J], 李东伟;曹美霞;宋阳阳;于立恒;李永民;李焰焰;屈长青3.梓醇与小檗碱及其配伍对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的影响 [J], 刘芳芳;杨明炜;王晓强;王开富;陆付耳4.小檗碱与梓醇及其配伍对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运子4蛋白及C-Cb1相关蛋白表达的影响 [J], 陈立;杨明炜;汪忠煜;刘艳娟;陆付耳;黄光英5.黄芪多糖和小檗碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响 [J], 王树海;王文健;汪雪峰;陈伟华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小檗碱在糖尿病治疗中的应用
小檗碱在糖尿病治疗中的应用小檗碱又称黄连素，是一种常见的异喹啉生物碱，分子式C20H18NO4。
它存在于小檗科等四个科十个属的许多植物中。
1826年M.-E.夏瓦利埃和G.佩尔坦从Xanthoxylonclava树皮中首次获得。
作为传统中医药物，国内已将小檗碱用于糖尿病的临床治疗，国际上韩国科研人员经研究确认了小檗碱对肥胖和糖尿病有正面作用。
现将有关文献概述如下，供读者参考。
1997年文献[1]报道，安徽省凤台县卫生进修学校童金花对应用黄连素片治疗的Ⅱ型糖尿病49例进行临床观察，总有效率为63.3％，鉴于黄连素片有较好的降血糖作用，且服用方便，不良反应小，作者认为可作为Ⅱ型糖尿病的辅助治疗。
2000年文献[2]报道，太原市商业职工医院石利天等人评价了黄连素对2型糖尿病患者临床疗效及毒副作用。
方法：对68例2型糖尿病患者及20例血糖正常者口服黄连素片，同时监测服药前后的空腹血糖、餐后血糖、血浆胰岛素、血尿常规、肝肾功能等。
结果：患者血糖明显下降，总有效率为86.8％，无明显毒副作用。
结论：黄连素治疗２型糖尿病患者疗效良好，且无明显毒副作用。
2003年文献[3]报道，杭州市拱墅区人民医院王晓新等人观察黄连素治疗2型糖尿病l16例疗效。
目的：了解黄连素治疗2型糖尿病的降血糖疗效及安全性。
方法：分A、B两组共U6例，男65例，女51例，年龄46—81岁。
A组70例，单一使用黄连素；B46例，为原降糖药+黄连素。
两组用量均为0．3g／次，1日3次。
分别测定用药前、用药后10d、1月、1年空腹血糖及66例用药前、后的餐后2h血糖，观察其降血糖效果及副作用。
结果：病人血糖在用药第10d 就明显下降，且呈稳定下降态势，统计学处理有显著差异P＜0．01。
1年后空腹血糖正常率为91％。
结论：黄连素治疗2型糖尿病降糖疗效肯定且安全、方便，无低血糖反应，与其它降糖药合用有协同作用。
该药同时具有降血压、降血脂、抗血小板聚集，恰恰对糖尿病及其并发症有治疗作用。
硫化氢抑制小鼠胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞系抵抗素的分泌
硫化氢抑制小鼠胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞系抵抗素的分泌郝丹丹;张垒;刘俊;张凤宁;瑞云【摘要】目的观察硫化氢(H2S)是否通过AMPK信号通路影响小鼠胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞系抵抗素的分泌.方法将细胞分为对照组、胰岛素抵抗3T3-L1组和50μmol/L NaHS组,利用ELISA法检测抵抗素(resistin)的分泌,Western blot 检测AMP激活的蛋白激酶(AMPK)及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)磷酸化蛋白的表达,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测resistin及AMPK mRNA表达.结果与对照组比较,给予NaHS后抵抗素分泌明显降低(P＜0.05).正常和胰岛素抵抗细胞中AMPK 和ACC磷酸化蛋白表达显著增加(P＜0.05).AMPK通路特异性阻断剂compound C可减弱NaHS对AMPK及ACC蛋白磷酸化的作用,且降低正常和胰岛素抵抗细胞抵抗素的分泌.结论 H2S可能通过激活AMPK通路来抑制小鼠正常和胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的抵抗素分泌.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2016(036)002【总页数】5页(P232-236)【关键词】硫化氢;AMP蛋白激酶;3T3-L1脂肪细胞;抵抗素;小鼠【作者】郝丹丹;张垒;刘俊;张凤宁;瑞云【作者单位】赤峰学院医学院生理学教研室,内蒙古赤峰024000;赤峰学院医学院附属医院神经外科,内蒙古赤峰024000;复旦大学上海医学院生理学与病理生理学系,上海200032;赤峰学院医学院生理学教研室,内蒙古赤峰024000;赤峰学院医学院生理学教研室,内蒙古赤峰024000【正文语种】中文【中图分类】R34脂肪组织在能量代谢中的作用日益受到重视，它可以分泌某些生物活性因子，如抵抗素(resistin)及瘦素(leptin)等，这些活性因子被称为脂肪因子[1]。
而后者与肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病等疾病的发生发展有着密切的联系[2-3]。
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响李萍;岳晶晶;张达;牛文彦;何庆【摘要】Objective To observe the effects of berberine on inflammatory factors, adipokines and fatty acid metabo-lism in 3T3-L1 adipocytes, and to investigate the molecular mechanism underlying berberine’s role of improving insulin re-sistance. Methods mRNA level of inflammatory molecules, adipokines, key enzymes and protein in fatty acid metabolism in 3T3-L1 cells were determined by quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) after cells were treated with different concentrations of berberine (0, 5, 10, 20, 40μmol/L) for 24 hours and with 10μmol/L berberine at different du-rations (0,4,8,24,48 h). These factors mainly included interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-α(TNF-α), leptin, adipo-nectin, visfatin, fatty acid synthase (FAS), acetyl-CoA carboxylase (ACC), adipose triglyceride lipase (ATGL) and adipocyte fatty acid binding protein (AFABP). Results In 3T3-L1 adipocytes, transcription level of IL-6, TNF-α, leptin, FAS, AT-GL, AFABP reduced with addition of berberine dosage at 10~40μmol/L(P<0.05)while visfatin mRNA levelincreased(P<0.05)compared with the control group. No significant difference was found in expression of adiponectin(P>0.05). Tran-scription level of IL-6, TNF-α, leptin, AFABP, ATGL, FAS decreased with time after10μmol/L berberine intervention (8-48 h) compared with the control group(P<0.05). On the other hand, visfatin mRNA levelincreased(P<0.05)compared with the control group. Adiponectin mRNA decreased only after cells were treated with berberine for 48 h(P<0.05). No sig-nificant difference was found transcription of ACC between each groups treated with berberine(P > 0.05). Conclusion mRNA level of inflammatory factors, adipokines, key enzymes and protein in fatty acid metabolism in 3T3-L1 adipocytes can be affected by berberine and this effect depend on its dose and time . This might be the mechanisms underlying berber- ine to improve insulin resistance.%目的：观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响，探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制。
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响谷卫;曾文衡;胡海英【期刊名称】《中国中药杂志》【年(卷),期】2005(30)4【摘要】目的:探讨小檗碱和胰岛素对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响。
方法:检测分别经小檗碱及胰岛素处理后3T3 L1脂肪细胞脂联素表达水平改变,以β actin为内对照,半定量法RT PCR测定脂联素mRNA表达。
结果:经小檗碱(10μmol·L-1)干预后3T3 L1脂肪细胞脂联素表达显著增加(P<0.05),加入胰岛素后脂联素的表达受到抑制,高浓度胰岛素有显著抑制作用(P<0.05)。
结论:体外实验中,小檗碱使3T3-L1脂肪细胞脂联素的表达增加,而胰岛素可抑制小檗碱增加脂联素表达的作用。
【总页数】3页(P286-288)【关键词】脂联素;小檗碱;3T3-L1脂肪细胞;表达;胰岛素;体外实验;影响;增加;目的;作用【作者】谷卫;曾文衡;胡海英【作者单位】浙江大学医学院附属第二医院【正文语种】中文【中图分类】R587.1;R589【相关文献】1.罗格列酮对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂联素、瘦素及抵抗素的分泌及mRNA 表达的影响 [J], 孙殿静;刘晴晴;耿建林2.五甲基槲皮素对3T3-L1前脂肪细胞分化及对脂肪细胞PPAR-γ和脂联素mRNA表达的影响 [J], 陈雷;丁一;胡燕;金满文3.C反应蛋白对3T3-L1脂肪细胞内高分子量多聚体脂联素表达和脂联素多聚化水平的影响 [J], 刘媛馨;石厚霞;刘翠萍;王苏;杨奇超;蒋丹;杨玲;袁国跃4.甘精、地特、人胰岛素对3T3-L1脂肪细胞脂联素mRNA表达的影响 [J], 梁玉;杨静;阴津华5.祛胰抵方对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞脂联素、瘦素及抵抗素表达的影响 [J], 牛晓瑞;马建;赵娜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小檗碱抑制IKKβ Ser 181磷酸化改善高糖诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的分子机制
小檗碱抑制IKKβ Ser 181磷酸化改善高糖诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的分子机制易屏;陆付耳;陈广;徐丽君;王开富【期刊名称】《中草药》【年(卷),期】2008(39)5【摘要】目的研究小檗碱对高糖诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用,探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制。
方法以25 mmol/L葡萄糖加0.6 nmol/L胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,予以小檗碱进行干预,同时以阿司匹林作为阳性对照,以2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄入法观察葡萄糖的转运率,用Western blotting检测IKKβ蛋白,IKKβ Ser 181磷酸化,IRS-1蛋白,IRS-1 Ser 307磷酸化,PI-3K p85蛋白,GLUT4蛋白的表达。
结果25 mmol/L葡萄糖加0.6 nmol/L 胰岛素作用18 h使3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运抑制60%,IKKβSer 181磷酸化、IRS-1 Ser 307磷酸化的表达增加,IRS-1和PI-3K p85蛋白的表达减少;同时加入小檗碱或阿司匹林则可逆转上述效应。
但高糖、小檗碱、阿司匹林对3T3-L1脂肪细胞IKKβ蛋白、GLUT4蛋白的表达无明显影响。
结论小檗碱可以明显改善高糖诱导的胰岛素抵抗,其分子机制可能是小檗碱通过抑制IKKβSer181磷酸化,使IRS-1丝氨酸残基磷酸化减少而酪氨酸残基磷酸化增加,调节胰岛素信号蛋白的表达来实现的。
【总页数】6页(P724-729)【关键词】小檗碱;胰岛素抵抗;IKKβ;高糖【作者】易屏;陆付耳;陈广;徐丽君;王开富【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院中医科;华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所【正文语种】中文【中图分类】R286.72【相关文献】1.高糖磷酸化IKKβ Ser181诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的分子机制 [J], 易屏;陆付耳;陈广;徐丽君;董慧;王开富2.小檗碱改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的分子机制 [J], 易屏;陆付耳;陈广;徐丽君;王开富3.3T3-L1脂肪细胞中高糖诱导胰岛素抵抗的分子机制 [J], 刘慧霞4.小檗碱抑制核因子NF-κB p65表达及转位改善游离脂肪酸诱导的3T3-L1细胞胰岛素抵抗的分子机制 [J], 易屏;陆付耳;陈广;徐丽君;王开富因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响
小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响周丽斌;杨颖;唐金凤;李凤英;李荣英;陈名道【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2002(022)005【摘要】目的探讨小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响.方法检测药物处理24h或48h 后3T3-L1脂肪细胞对培养液中的葡萄糖消耗量,以2-脱氧-3H-D-葡萄糖摄入法观察葡萄糖的转运率. 结果在低糖(5.5mmol/L)和高糖(25mmol/L)培养液中,小檗碱皆有显著的降糖作用,0.1～200μmol/L小檗碱能使葡萄糖的消耗量增加26%～201%,其作用呈剂量效应,10μmol/L小檗碱能明显增强1、100nmol/L胰岛素的降糖作用(P＜0.01).0.1、1、10μmol/L小檗碱使3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖转运率明显增加,50、100μmol/L小檗碱使其葡萄糖转运率明显降低.结论小檗碱能显著增加脂肪细胞的葡萄糖转运和消耗.【总页数】3页(P412-414)【作者】周丽斌;杨颖;唐金凤;李凤英;李荣英;陈名道【作者单位】上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院上海市内分泌研究所,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R77.1+5【相关文献】1.小檗碱和人参皂苷Rb1合用对脂肪细胞炎症因子表达和炎症信号通路的影响 [J], 张红霞;赵娟;于希忠;郭超;潘扬;尚文斌2.梓醇和小檗碱及其配伍对脂肪细胞糖代谢和分化的影响 [J], 刘芳芳;杨明玮3.小檗碱对3T3-L1前体脂肪细胞增殖与分化的影响 [J], 李东伟;曹美霞;宋阳阳;于立恒;李永民;李焰焰;屈长青4.盐酸小檗碱对糖耐量减低患者脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白的影响临床观察 [J],杨金颖;周卫东;张依伦5.黄芪多糖和小檗碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响 [J], 王树海;王文健;汪雪峰;陈伟华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子分泌和炎症信号通路的影响
小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子分泌和炎症信号通路的影响于希忠;刘佳;程罗根;尚文斌【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2010(026)003【摘要】目的观察小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子分泌和表达的作用及其分子机制.方法将3T3-L1脂肪细胞用10μmol/L的小檗碱干预后取上清检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、脂联素的含量.另外,以10 ng/mLTNF-α诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗模型,予以10μmol/L小檗碱进行干预,western blotting法检测脂肪细胞IKK-β的表达及IKK-β(ser181)的磷酸化水平;实时定量PCR(QRTPCR)法检测TNF-α、IL-6、CRP、MCP-1及脂联素mRNA的表达.结果10μmol/L的小檗碱能够降低基础状态下3T3-L1脂肪细胞TNF-α和IL-6的分泌,但是没有增加脂联素分泌的作用.10 ng/mL TNF-α作用24 h使3T3-L1脂肪细胞IKK-β的表达没有明显改变,但是IKK-β(ser181)的磷酸化水平明显增加,经小檗碱干预后显著下降.QRTPCR检测结果显示10 ng/mL TNF-α作用24 h使3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-6、CRP、MCP-1的mRNA表达增加,经小檗碱干预后这些炎症因子的表达显著下降.结论小檗碱可能通过作用于IKK-β降低脂肪细胞炎症因子的分泌,改善胰岛素抵抗.【总页数】5页(P217-219,247-248)【作者】于希忠;刘佳;程罗根;尚文斌【作者单位】南京师范大学生命科学院,江苏,南京,210046;南京中医药大学第一临床医学院,江苏,南京,210046;南京师范大学生命科学院,江苏,南京,210046;南京中医药大学第一临床医学院,江苏,南京,210046【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.小檗碱和人参皂苷Rb1合用对脂肪细胞炎症因子表达和炎症信号通路的影响 [J], 张红霞;赵娟;于希忠;郭超;潘扬;尚文斌2.小檗碱对3T3-L1脂肪细胞炎症因子、脂肪因子及脂肪酸代谢的影响 [J], 李萍;岳晶晶;张达;牛文彦;何庆3.不同频率间歇低氧对3T3-L1脂肪细胞炎症因子和脂肪因子的影响 [J], 岳晶晶;周芹;何庆;朱慧;曹竞文;冯靖;牛文彦;陈宝元4.小檗碱对奥氮平诱导胰岛素抵抗大鼠炎症因子及TLR4/NF-κB炎症信号通路的影响 [J], 兰建萍;刘守青;谢欣娥;王俊5.不同时间持续缺氧对3T3-L1脂肪细胞炎症因子mRNA的影响 [J], 杨传慧;何庆;牛文彦;徐宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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制 ３ 一１ ３ １ Ｌ 脂肪 细胞分化 ，０ ｗ ｏ Ｌ小檗 碱几 乎完 全抑制胞 浆中脂肪 的堆积 。５ｐｎｌＬ小檗碱 在脂肪细胞诱 １ ｍ ｌ ／ ｚｏ ／ 导分化 １３ ５ ７ 后 均显 著 降低 Ｃ Ｂ ａ ｍＲ Ａ表 达 （ 、 、 、ｄ Ｅ Ｐ Ｎ Ｐ＜０ ０ ． ５或 Ｐ＜０ ０ ） 诱 导分 化 ３ ５ ７ ．１ ， 、 、 ｄ时显 著 降低 ＰＡ ￣ Ｐ Ｒ ２的 ｍ Ｎ Ｒ Ａ表达 （ ０ ０ Ｐ＜ ．５或 Ｐ＜ ． １ 。Ａ Ｋ的 ｍ Ｎ ０ ０ ） ＭＰ Ｒ Ａ水平在分化过程 中未受小檗碱 的明显影响 ， 而 小檗碱 明显增加其蛋 白磷酸化水平 ， 其下游靶基 因 Ａ Ｃ磷酸化水平也 明显增加 。结论 ： Ｃ 小檗碱抑 制 ３ －Ｉ脂 ３ １ Ｌ 肪细胞 的分化可能与其激活 Ａ Ｋ有关 。 ＭＰ 关键词 小檗碱 腺 苷酸活化蛋 白激酶 脂肪细胞分化 过氧化 物酶体增殖 物激活受体 强子结合蛋 白 ０ 【 Ｃ Ａ Ｔ增 ＣＡ
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・
论
著 ・
小 檗 碱 激活 Ａ Ｋ 抑 制 ３ ３Ｌ ＭＰ Ｔ ． １脂肪 细 胞 分 化 △
上海市内分泌代谢病研究所 ， 上海内分泌代谢病临床医学中心 ， 上海 交通 大学 医学 院 附属 瑞金 医 院 （００ ５ ２ ０２ ） 王 宁 张 娟 建 方方 邓儒 元 唐红 菊 刘 赘 李凤 英 王 晓 周 丽斌
１ ３１ １ ３ ６ ． ６ ７．
的表达及 临床价值 ［ ］ 标记 免疫分析与临床 ， １ ， （ ） ８ － ． Ｊ． ２ ０ １ ２ ：６ ８ ０ ７ ８
『 Ｍｉｔ ｅ Ｋ ｖｔ ｈＡ ．Ｈ ＭＥ １ｍ ｎ ｅ ｎｌ ｎ ｂｄ ｓｆｌｎ ２ １ ｅ ｉ ｎＭ， ｏａｉ Ｊ Ｂ ． ｏｏｌ ａ ｔ ｏｙｕｅ ｔｎ ｅ ｏ ａｉ ｕｉ
摘要 目的 ： 探讨小檗 碱对 ３ ＂ Ｌ Ｉ 一１脂肪分 化 的作 用是 否与激 活腺苷 酸活 化蛋 白激酶 （ ＭＰ 有关 。方 ３ Ａ Ｋ） 法： ３ 一 在 １ Ｌ脂肪细胞分化全程加入小檗碱 ， ３ 以油 红 ０染色检测 ３３ Ｌ １ －１脂肪细胞 胞浆 中脂 肪的堆积 ， 实时定量 Ｐ Ｒ检测过氧化物酶体增殖物激活受体 啦 （ Ｐ Ｒ／） Ｃ Ａ Ｔ增强子结合 蛋 白 ｏ（ Ｅ Ｐｔ 和 Ａ Ｋ的 ｍ Ｎ Ｃ ＰＡ ￣ 、Ｃ Ａ ２ ｔＣ Ｂ ｃ） ＭＰ ＲＡ 表达 ， Ｗｅｔｒ 以 ｓ ｎ印迹法检测 Ａ Ｐ ｅ Ｍ Ｋ和乙酰辅酶 Ａ羧化酶（ Ｃ 的磷酸化水平 。结果 ： Ａ Ｃ） 小檗碱剂量依赖性地抑
Ｄ ｄｐ７ ｋｐ ）ｉ ｅｄ ｅｅｔ ｉｇｏｉ ｏ ｔｙｏ ｏｕｅ ［ ］ １ａ ２ （ ｉ１ ｎｔ ｉ ｒｎｉ ｄａｎ ｓ ｆｈｒｉ ｎ ｄｌｓ Ｊ ．Ｊ ｎ ｈ ｆ ｌ ａ ｓ ｄ
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［ ］ 王丽华 ， ５ 赵永 桔， 王晓颖 ， ． ａ ｅｎ３和 ＣＭ ６在 甲状腺 细 等 Ｇｌ ｔ－ ｅｉ Ｉ ｖ 针穿刺标本上 的表达及意义 ［］ 上海 医学 ，０ ６，９ １ ） ７ ５７ ８ Ｊ． ２０ ２ （ １ ：８ －８ ．
３，ＨＢＭＥ－ １，ｃ ｔｋ ｒｔｎ １ ｙｏ ｅａｉ ９， ｈｇ ｌｃ ｌｒｗｅｇ ｔｅｔｋ ｒｔｎ，ｅ ｅ ｎ ｉｈ ｍｏｅ ｕａ ｉｈ ｙｏ ｅａ ｉ ｙｌ ｉ
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ｎ ｏ ｅｔ ｏｓ Ｊ ．Ｉ ｍｕ ｏｉｏｈｍ，１９ ３：１—２ ． ａｄｂ ｎ ｍ ｒ『 ］ ｍ ｎｈｓ ｃｅ ｕ ｔ ９５， １５１２
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