液相色谱仪维护培训班(岛津分析中心)PPT课件

控制器
真空泵
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6. 保护柱
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保护柱的位置
阻尼管 泵
进样器 保护柱
分析柱
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保护柱的作用 • 代替分析柱过滤样品中的杂
质和捕集样品中的强保留组 分;容易更换，降低成本。
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7.ODS柱
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如何使用和延长色谱柱的使用寿命
1. 样品预处理
2. 流动相(流量、柱压、缓冲盐)
3. 保护柱 4. pH范围 5. 温度 6. 色谱柱的储存 7. 条件允许色谱柱不要混用
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脱气的方法
1. 减压吸气脱气法 *可以抑制配制流动相时产生的气泡 *只是暂时的脱气法 *不能解决因溶解气体造成的问题
2. He清除法 3. 使用氟树脂膜的减压脱气法 4. 超声波脱气法
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He清除法
调压阀 排气阀
往送液泵
流动相 过滤器
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使用氟树脂膜的减压脱气法
氟树脂膜 真空室 往送液泵
流动相
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8.关于ODS柱补修
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峰的变形
根部变宽
有肩或分叉
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峰产生有肩或分叉的原因
1.色谱柱入口处塌陷 2.柱床结构变化 3.填料表面变化 4.色谱柱污染 5.反冲处理过 6.样品劣化不稳定（生成氧化物、分解物等）
不要用手直接接触氘灯表面
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2.手动进样器
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手动进样器的原理图
装填状态
进样状态
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交叉污染的原因
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手动进样法
• 普通方法
1. 在进样(Inject)状态下清洗针口 2. 将扳手切到装填(Load)状态下插入微量注射器 3. 注入样品 4. 将扳手切到进样(Inject)状态 5. 抽针、清洗针口
EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。 措施：1.轻微污染时,用针筒注入异丙醇，清洗样品池;
2.如污染严重， 拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中 超声波清洗。
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日常维护
更换氘灯（紫外检测器）
• 判断氘灯能量： 设定220nm波长，检查参比池能量，如
能量低于800，需更换氘灯。 • 操作注意点：
管路过滤器 压力传感器
洗 判断依据：关闭排液阀，断开
出口管路，设定流速
排液阀
1mL/min，如压力>0.3MPa， 则可能堵塞。先确认排液阀
打开状态压力为零。
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日常维护
紫外检测器
样品池
光线
参比池
光电倍增管
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日常维护
紫外检测器
性能判断
A: 池子、透镜污染
B: 灯老化
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日常维护
紫外检测器
故障：样品池污染 现象：样品池和参比池能量相差较大 检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPL
出口单向阀
泵头
进口单向阀
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日常维护
单向阀
故障1：宝石球粘附于垫片 现象：泵无法吸液或排液，流路不通 措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，
使宝石球与垫片分开 2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，
用超声波清洗
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日常维护
单向阀 故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好 现象：系统压力波动大 措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超
醋酸 柠檬酸 磷酸
pK1 pK2 pK3 4.87 3.13 4.76 6.40 2.16 7.2 1 12.32
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注意点
(1).现配现用. (配制时注意前后的pH值一样)
(2).工作完毕后及时冲洗LC系统 (常用的ODS柱怎么冲洗?)
(3).梯度洗脱时,确认了缓冲液与有机溶剂的 混合没问题了吗?
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百度文库
注意点
选择缓冲液注意
1 .确定最佳分离状态时的流动相pH值 (pH酸度计校验了吗?)
2 .选择具有与流动相的pH相近的pKa 的缓冲液 （即使浓度稀也具有较强的缓冲能力）
3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收 （在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬
酸的缓冲液）
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代表性弱酸的pKa
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3.2 梯度洗脱法分析 需要“HPLC”级有机溶剂
理由：即使没有注入被测样品，因流动 相的不纯物质，造成出峰. 给分析结果 带来影响.
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3.3 梯度洗脱法的注意点
• 1.流动相使用HPLC级有机溶剂。 • 2.查看空白实验的数据。 • 3.遵守分析周期。
（最初的分析数据不采用）
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4.谈谈缓冲液
2.堵塞严重时,分别按下面的顺序超声波清洗: 水→异丙醇→水 → 5％～20％的稀硝酸溶液→水
注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断
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日常维护
单向阀
LC-10ATvp泵： 串联式往复泵
LC-10ADvp泵： 并联式往复泵
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日常维护
单向阀结构
宝石球 抛光面
透明塑料垫片 流动相
单向阀原理
吸液冲程
排液冲程
高效液相色谱仪 --维护培训班
岛津广州分析中心 詹松 Tel: Fax:
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1.日常维护的要点
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液相系统维护流程图
线路过滤器
单向阀
检测器 柱塞密封圈 手动进样器
吸滤头
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日常维护
吸滤头
材料：不锈钢烧结，孔径10um 故障：堵塞 现象：管路中不断有气泡生成 措施：1.用5％～20％的稀硝酸溶液，超声波清洗，再用蒸馏水清洗
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手动进样法
• 便捷方法
1. 在进样(Inject)状态下插入微量注射器 2. 将扳手切到装填(Load)状态 3. 注入样品 4. 将扳手切回到进样(Inject)状态 5. 抽针、清洗针口
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日常维护
手动进样器
塑料箍
操作注意点： 1）插针应插到底 2）进样应使用液相色谱专用平头
进样针 3）清洗应使用专用针口清洗器
声波清洗
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日常维护
柱塞密封圈
密封圈
柱塞杆 泵头清洗管路 流动相
故障：密封圈磨损而导致 密封不良
现象：系统压力波动大或 漏夜
措施：更换密封圈 注意点：
更换密封圈 拆卸泵头前，柱塞杆 复位 （P－SET）
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日常维护
故障：堵塞 现象：系统压力波动大或压
管路过滤器
力偏高 措施：5％稀硝酸，超声波清
流动相
弹簧 不锈钢套 转子 定子
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3.有机溶剂的优与劣
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什么时候需要 “HPLC”级有机溶剂
1. 等浓度洗脱法的微量分析
用光谱进行判断
2. 梯度洗脱法分析
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3.1 等浓度洗脱法的微量分析
HPLC
优 级
级 乙腈
优级
目的成分 噪声
HPLC级 目的成分
噪声
测试波长上的噪声水平与流 动相的吸光度成正比
* 用不完,舍不得倒掉;放冰箱,能放几天?
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5.关于脱气
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脱气的目的
1. 防止由气泡的产生引起的故障 2. 防止由溶解（在液体中的）气体量
的变动引起的检测不稳定程度 1）示差折射率检测器 *使折射率变化 2）UV检测器（200nm以下） *溶解氧气有吸收 3）荧光检测器 *溶解氧气有消光作用