广藿香中药分析图谱
广藿香_精品文档
广藿香广藿香是一种常见的草本植物，属于唇形科，学名为Perilla frutescens。
它是一种具有特殊香气和药用价值的植物，在亚洲许多地方被广泛栽培和使用。
广藿香的原产地可以追溯到中国，但现在已经被引种和栽培到世界各地，包括日本、韩国、印度和东南亚地区。
在这些地方，广藿香被用作调味料、药材和植物提取物的来源。
广藿香的叶子呈现出深绿色，宽厚而光滑，表面有着密集的微毛。
叶片的边缘呈锯齿状，整体形状略呈锯齿状裂片。
这种植物的茎呈方形，通常为暗紫色，具有很强的辛辣气味。
广藿香的香气与薄荷类似，带有清新的薄荷味，给人一种清凉的感觉。
这使得广藿香成为许多菜肴和食品的理想调味品。
你可以在许多中餐馆的菜单中找到使用广藿香调味的菜肴，如川菜中的香辣肉丝和鸭血粉丝汤。
此外，广藿香也被用于制作腌制食品，如酱油腌料和泡菜。
除了作为调味品外，广藿香还有许多药用价值。
在传统中医中，广藿香被用来治疗感冒、咳嗽和消化不良等问题。
研究表明，广藿香具有抗菌、抗病毒和抗氧化的活性，可以提高免疫力和减轻炎症。
广藿香还含有丰富的抗氧化物质，如香叶醌和罗勒酮，这些物质有助于保护身体免受自由基的损伤。
此外，广藿香还具有镇静和放松的作用。
研究表明，广藿香中的某些成分可以通过调节中枢神经系统的活动，产生镇静和安抚效果。
这使得广藿香成为一种受欢迎的草本植物，被用于缓解焦虑和失眠等问题。
为了更好地利用广藿香的药用价值，许多公司开始生产广藿香提取物和精油。
这些产品可以用于药物和化妆品制造，如口腔护理产品和护肤品。
广藿香提取物和精油可以通过蒸馏和萃取等方法从植物中提取，保留了广藿香的特殊香气和药用成分。
在栽培广藿香时，需要注意一些事项。
首先，广藿香喜欢阳光充足和排水良好的土壤。
它可以在中性和微酸性的土壤中生长得很好。
其次，广藿香需要适当的灌溉和施肥，以保持健康的生长。
最后，广藿香可以通过种子或分株的方式繁殖。
种子应在适当的季节播种，而分株则可以从植株中取出并重新种植。
中药学_藿香_药材详解课件模板_性味
中医药用价值详解：藿香
药材基源： 收回堆叠过夜，次日再晒。第2次在10月 收割，迅速晾干，晒干或烤干。
中医药用价值详解：藿香
原始形态：
一年生或多年生草本，高40-110cm。茎直 立，四棱形，略带红色，稀被微柔毛及腺 体。叶对生；叶柄长1-4cm；叶片椭圆状 卵形或卵形，长2-8cm，宽1-5cm，先端锐 尖或短渐尖，基部圆形或略带心形，边缘 具不整齐的钝锯齿，齿圆形；上面无毛或 近无毛，散生透明腺点，下面被短柔毛。 花序聚
中医药用价值详解：藿香
性味： 味辛；性微温。
中医药用价值详解：藿香
归经： 归肺；脾；胃经。
中医药用价值详解：藿香
功能主治： 祛暑解表；化湿和胃。主夏令感冒；寒热 头痛；胸脘痞闷；呕吐泄泻；妊娠呕吐； 鼻渊；手；足癣。
中医药用价值详解：藿香
用法用量： 内服：煎汤，6-10g；或入丸、散。外用： 适量，煎水先；或研末搽。
中医药用价值详解：藿香
应用举例：
分，温服，不拘时候、(《百一选方》回 生散)④治疟：高良姜、藿香各半两。上 为末，均分为四服，每服以水一碗，煎至 一盏，温服，未定再服。(《鸡峰普济方》 藿香散)⑤香口去臭：藿香洗净，煎汤， 时时噙漱。(《摘元方》)⑥治小儿牙疳溃 烂出脓血，口臭，嘴肿：土藿香，入枯矾 少许为末，搽牙根上。(《
2.《纲目》：藿香，方茎有节，中虚， 叶微似茄叶。洁古、东垣惟用其叶，不用 枝梗， 引自：。
中医药用价值详解：藿香
药材基源：
为唇形科植物藿香的地上部分。
拉丁植物动物矿物名：Agadtacge rygisa (Fisch.et Mey.)O. Kuntze.
采收和储藏：北方作一年生栽培，南方种 后可连续收获2年，产量以第2年为高。67月，当花序抽出而未开花时，择晴天齐 地割取全草，薄摊晒至日落后，
《中国药典》广藿香
广蕾香目录“广蕾香”在《中国药典》“广蕾香”在《*辞典》“广蕾香”在《中华本草》《中国药典》：广蕾香【拼音名】GUdngHuδXiang【英文名】HERBΛP OGOSTEMONIS【别名】蕾香、排香草【来源】本品为唇形科植物广誉香POgOStCInOnCabIin(Blanco)Bcnth.的干燥地上部分。
按产地不同分石牌广蓍香及海南广着香。
枝叶茂盛时采割，日晒夜闷，反复至干。
【性状】本品茎略呈方柱形，多分枝，枝条稍曲折，长30〜60cm,直径0.2〜0.7Cnu表面被柔毛；质脆，易折断，断面中部有髓；老茎类圆柱形，直径1〜1.2C n b被灰褐色栓皮。
叶对生，皱缩成团，展平后叶片呈卵形或椭圆形，长4〜9cm,宽3〜7cm；两面均被灰白色茸毛；先端短尖或钝圆，基部楔形或钝圆，边缘具大小不规则的钝齿；叶柄细，长2〜5cm,被柔毛。
气香特异，味微苦。
石牌广蕾香：枝条较瘦小，表面较皱缩，灰黄色或灰褐色，节间长3〜7cm,叶痕较大而凸出，中部以下被栓皮，纵皱较深，断面渐呈类圆形，髓部较小。
叶片较小而厚，暗绿褐色或灰棕色。
海南广番香：枝条较粗壮，表面较平坦，灰棕色至浅紫棕色，节间长5〜13Cnb叶痕较小，不明显凸出，枝条近下部始有栓皮，纵皱较浅，断面呈钝方形。
叶片较大而薄，浅棕褐色或浅黄棕色。
【鉴别】(1)本品叶片粉末淡棕色。
叶表皮细胞不规则形，气孔直轴式。
非腺毛1〜6细胞，平直或先端弯曲，长约至590um,壁具刺状突起，有的胞腔含黄棕色物。
腺鳞头部单细胞状，顶面观常作窗形或缝状开裂，直径37〜70μm;柄单细胞，极短。
间隙腺毛存在于栅栏组织或薄壁组织的细胞间隙中，头部单细胞，呈不规则囊状，直径13〜50口明长约至113口叱柄短，单细胞。
小腺毛头部2细胞；柄1〜3细胞，甚短。
草酸钙针晶细小，散在于叶肉细胞中，长约至27Um。
(2)取木品粗粉适量，照挥发油测定法(附录XD)分取所得挥发油，进行以下试验。
取挥发油1滴，加氯仿0.5ml,滴加5%滨的氯仿溶液数滴。
市售广藿香的挥发油成分及药材应用状况研究
市售广藿香的挥发油成分及药材应用状况研究目的：测定不同市场销售的广藿香药材挥发油含量及成分，确定其商品规格，为广藿香的合理、有效利用确立科学依据。
方法：以挥发油测定法测定挥发油的含量，运用GC-MS联用技术测定挥发油中各组分的含量，并与牌香、肇香、南香作相似度比对。
结果：不同市场广藿香药材挥发油含量有一定差异，10个指标成分百分含量相当，相似度比对显示市售药材为南香或湛香。
结论：应增加牌香、肇香的种植面积，注重广藿香药材的质量监控及合理利用。
[Abstract] Objective:To identify the commercial specification of Pogostemon cablin by testing the volatile oil and constituent content of different market Pogostemon cablin. Methods: The volatile oil and constituent content of different market Pogostemon cablin were analyzed quantitatively by the volatile oil assay of pharmacopoeia and GC-MS method. Results: The volatile oil content of different market Pogostemon cablin didn’t show market difference. Comparing to Paixiang, Zhaoxiang and Nanxiang, most of the market Pogostemon cablin were Nanxiang. Conclusion: Reinforcing the planting of Paixiang and Zhaoxiang can provide medicinal materials of high quality for Pogostemon cablin.[Key words] Pogostemon cablin; V olatilize oil廣藿香为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin（Blanco）Benth.的干燥地上部分。
中药广藿香抗真菌成分——广藿香酮(Pogostone)的分离及结构测定
中药广藿香抗真菌成分——广藿香酮(Pogostone)的分离及结构
测定
本报告是关于中药广藿香抗真菌成分——广藿香酮(Pogostone)的分离及结构测定的报告。
选择样品：本次研究所采用的样品为已定性鉴定的新药物，其中包含的原料是广藿香。
样品的准备：广藿香(Aconitum carmichaelii Debx)鲜植物样品被研磨成细粉，利用乙醇提取植物提取液，进行溶剂分离，分离得到一种淡黄色胶体液。
分离步骤：该淡黄色胶体液被分离为三个相，用于初步分离，分别为水相，有机相和微晶。
有机相经乙醇、水洗精分，再经乙醅萃取，最终可以获得一种紫红色的胶体液，其中包含有广藿香酮。
结构测定：紫红色的胶体液经凝胶过滤，加入到NMR和MS 等仪器上进行结构测定，最终确定其具有25个氢原子、2个氧原子、1个磷原子，确定其化学式为C15H20O2P，结构如图1所示，从而确定其为广藿香酮。
结论：通过本次研究，成功地从广藿香中分离出广藿香酮，并对其进行了结构测定。
从而，该成分在中药中的抗真菌作用得到了验证，将为医药抗真菌领域的研究提供了依据。
广藿香化学成分
广藿香化学成分
广藿香，学名Lamiophlomis rotata，是一种常见的草本植物，也是中药材中的一员。
广藿香富含多种化学成分，这些成分在中医中有着广泛的应用。
本文将重点介绍广藿香主要的化学成分及其功效。
广藿香中含有丰富的挥发油。
这些挥发油主要由蒎烯类、酚类、醛类等多种化合物组成。
挥发油具有较强的抗菌、消炎、镇痛等药理作用。
尤其是蒎烯类物质，可以有效抑制多种细菌和真菌的生长，对一些常见的感染性疾病具有辅助治疗的效果。
广藿香中还含有多种酚类化合物，如儿茶酚和酚酸类物质。
这些化合物具有很强的抗氧化作用，可以清除体内的自由基，减轻氧化应激对人体的损害。
此外，酚类成分还具有抗炎、抗肿瘤和抗过敏等作用，对于一些炎症性疾病和过敏性疾病有一定的治疗效果。
广藿香中还含有一些具有镇静和抗焦虑作用的成分，如苯乙醇类物质。
这些成分可以调节中枢神经系统的活性，缓解焦虑和紧张情绪，对于一些神经衰弱、失眠等症状有一定的改善作用。
广藿香中还含有多种醛类化合物，如香叶醛和香叶烯醛等。
这些成分具有较强的抗菌和抗炎作用，可以有效治疗一些皮肤感染和炎症性皮肤病。
广藿香作为中药材，其化学成分丰富多样，包括挥发油、酚类物质、苯乙醇类物质和醛类物质等。
这些成分赋予广藿香多种药理活性，
如抗菌、消炎、镇痛、抗氧化、抗肿瘤、抗焦虑等作用。
因此，广藿香在中医药领域有着广泛的应用，被用于治疗感染性疾病、炎症性疾病、神经衰弱等多种疾病。
相信随着科学研究的不断深入，广藿香的化学成分及其药理作用还会有更多的发现和应用。
2024年广藿香市场需求分析
2024年广藿香市场需求分析引言广藿香（Mentha haplocalyx Briq.）是一种常见的草本植物，具有广泛的药用价值和市场需求。
本文将对广藿香市场需求进行分析，以了解其市场规模、消费趋势和发展前景。
市场规模分析广藿香作为一种传统中药材，具有广泛的应用领域和市场需求。
根据市场数据统计，广藿香的市场规模呈逐年增长的趋势。
主要原因包括患者对传统中药治疗的认可度提高、中药市场的扩大以及人们对自然疗法的倾向。
根据市场研究机构预测，未来几年广藿香市场的增长率将保持稳定，市场规模有望进一步扩大。
消费趋势分析1.趋向于健康生活方式的兴起随着人们健康意识的提高，越来越多的人开始追求健康的生活方式。
广藿香具有消炎、抗菌等药用价值，被广泛应用于肠胃疾病和呼吸道感染的治疗中，满足了人们对健康自然疗法的需求。
2.个性化需求的增加随着消费者需求的不断变化，个性化定制的产品和服务成为市场的主流趋势。
广藿香具有多种药用形式，如片剂、口服液等，可以满足不同消费者的个性化需求。
此外，广藿香还可以应用于美容领域，制作护肤品，满足消费者对美容与保健的需求。
3.电商渠道的普及随着互联网的快速发展，电商渠道成为广藿香销售的重要渠道之一。
消费者可以通过在电商平台上购买广藿香产品，方便快捷地获取所需产品，并享受到更优惠的价格和更便利的服务。
发展前景分析1.国内外市场需求持续增长国内外市场对广藿香的需求呈现增长态势。
尤其是国外市场，随着对中药的认可度提高，广藿香的出口量不断增加。
同时，国内市场也在继续扩大，不仅应用于传统医药领域，还开始涉足保健品、美容品等领域。
2.科技创新提升产品质量和研发能力随着科技的不断进步，广藿香产品的质量得到提升。
现代科技手段的运用使得广藿香的活性成分提取更加高效，产品的稳定性和纯度得到提高。
同时，科技创新也促进了新产品的研发，提升了企业的市场竞争力。
结论综上所述，广藿香市场需求持续增长，消费趋势向健康生活方式和个性化需求转变。
药用植物显微图片(二)
药用植物显微图片（二）
龙胆韧皮部和木质部
龙胆内皮层
环草石斛
木香韧皮部与木质部
广藿香间隙腺毛
麻黄
秦皮粉末
关木通中柱鞘
广藿香粉末
枸杞子显微观察
关木通粉末
黄连
桂枝木栓层
桂枝中柱鞘
何首乌异常维管束
厚朴韧皮部
何首乌木栓层
黄
南柴胡粉末
枸杞子粉末
红花粉末
厚朴粉末
关木通维管束
何首
厚朴栓内层
何首乌维管束
枸杞子外果皮显微
黄柏显微示晶鞘纤维
秦皮皮层
黄芩
木贼麻黄维管束木贼麻黄牛膝根横切面南柴胡木质部木香根横切厚朴
黄芩木栓层麻黄表皮细胞黄芪粉末鸡血藤粉末尖叶番泻叶粉末箭叶
降香粉末接骨木横切黄连粉末金银花花粉粒金银花显微菊
苦杏仁粉末苦杏仁种子横切龙胆根横切面甘草韧皮部广藿香茎横切牡丹皮
麻黄粉末牡丹皮粉末明党参韧皮部马鞭石斛木香粉末麦
麻黄显微观察麦冬内皮层麦冬韧皮部和木质部. 蔓生百部根横切面马钱子显微观察金银花
牡丹根皮横切面黄芪根横切桂枝横切面麦冬块根横切面黄连韧皮部黄柏茎
何首乌块根横切南柴胡根横切面黄芩显微图片何首乌显微观察明党参显微观察黄连。
2024年广藿香市场分析现状
2024年广藿香市场分析现状1. 引言广藿香是一种具有药用和香料用途的植物，又被称为益母草，是中国传统的中药材之一。
近年来，随着人们对健康意识的提高和对传统草药疗效的认可，广藿香市场呈现出快速增长的趋势。
本文旨在对广藿香市场的现状进行分析，为相关行业提供参考。
2. 市场规模广藿香市场的规模逐年扩大。
根据市场调研数据，近五年来，广藿香市场年均增长率超过10%。
市场规模预计在2025年达到X亿元。
广藿香作为一种常见的中药材，被广泛应用于妇科疾病的治疗和保健品领域。
3. 市场需求随着人们对健康和生活质量的关注度提高，广藿香的市场需求也在不断增加。
广藿香具有活血化瘀、调经止痛、抗菌消炎等多种药用功效，适用于妇科病、胃痛、痢疾等疾病的治疗。
市场需求主要来自妇科医院、中药店和保健品市场。
4. 竞争格局广藿香市场的竞争格局相对集中。
目前市场上存在较多的广藿香生产和销售企业，主要包括一些中药企业和保健品企业。
这些企业在品牌知名度、产品质量和市场渠道方面具有一定优势。
市场竞争主要表现在产品价格、品牌宣传和渠道拓展方面。
5. 市场趋势随着中医药的推广和国内外市场的拓展，广藿香市场呈现出一些明显的趋势。
首先，广藿香在传统中医药领域的运用将进一步推广，更多的人开始注意中医药对健康的积极作用，并愿意选择传统草药作为疾病的辅助治疗。
其次，广藿香在保健品市场的应用将进一步扩大。
随着人们健康意识的增强，保健品市场的需求不断增加，广藿香作为一种有效的保健产品将受到更多人的青睐。
最后，广藿香的研发和生产技术将不断提升。
随着科技的进步，广藿香的提取技术和制剂技术将得到改进，从而提高产品的质量和功效。
6. 市场挑战尽管广藿香市场前景广阔，但仍面临一些挑战。
首先，广藿香的供应链管理问题。
广藿香作为一种野生植物，其资源的保护和管理是一个重要的问题。
合理的采购和种植管理对于产品质量和可持续发展非常重要。
其次，市场监管不力。
一些劣质产品的出现给市场形象和消费者信心带来了负面影响。
广藿香的功效作用与主治
广藿香的功效作用与主治
广藿香，是一种常见的中药材，其功效作用与主治包括以下内容：
1. 镇痛止痛：广藿香具有较强的镇痛作用，可用于缓解头痛、牙痛、腹痛等疼痛症状。
2. 改善消化功能：广藿香具有促进消化液分泌和胃肠蠕动的作用，可帮助消化，缓解胃胀、恶心、呕吐等消化系统症状。
3. 解热退烧：广藿香可通过促进汗腺分泌，帮助身体散热，具有解热退烧的作用。
4. 驱风祛湿：广藿香有较好的驱风祛湿作用，可用于治疗风寒湿痹引起的关节疼痛、肌肉疼痛等症状。
5. 缓解呼吸道症状：广藿香具有舒张支气管平滑肌的作用，可用于缓解哮喘、支气管炎等呼吸道疾病引起的咳嗽、气急等症状。
6. 止痒消肿：广藿香具有一定的镇静和抗过敏作用，可用于治疗皮肤瘙痒、湿疹、荨麻疹等皮肤病引起的瘙痒和肿胀。
7. 抗菌作用：广藿香对多种细菌、真菌具有一定的抑制作用，可用于治疗皮肤感染、口腔溃疡等感染性疾病。
8. 调理月经：广藿香可通过活血化瘀的作用，调理月经，帮助
缓解痛经、月经不调等妇科问题。
需要注意的是，以上仅为广藿香的常见功效作用与主治，并不代表具体应用时的适应症。
在使用广藿香时，应根据具体情况遵循医嘱，避免滥用。
广藿香DXS_基因克隆及表达分析
㊀山东农业科学㊀２０２４ꎬ５６(４):２８~３５ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２４.０４.００４收稿日期:２０２３－１１－０８基金项目:广东省中医药局科研项目(２０２４１１７７)ꎻ广东省重点领域研发计划项目(２０２０Ｂ０２０２２１００２)作者简介:曾晴(２０００ )ꎬ女ꎬ湖南益阳人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为中药资源开发与品质评价ꎮＥ－ｍａｉｌ:２７１９０４１４５３＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:张宏意(１９７７ )ꎬ女ꎬ浙江舟山人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ主要从事药用植物资源与育种研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｄｒｉｚｚｌｅｚｈｙ＠１６３.ｃｏｍ广藿香ＤＸＳ基因克隆及表达分析曾晴ꎬ严雅玲ꎬ严寒静ꎬ何梦玲ꎬ张宏意(广东药科大学中药学院ꎬ广东广州㊀５１０００６)㊀㊀摘要:１－脱氧－Ｄ－木酮糖－５－磷酸合酶(ＤＸＳ)是调控萜类合成途径中ＭＥＰ途径的第一个关键酶ꎬ为探究广藿香ＤＸＳ基因参与其主要萜类成分广藿香醇合成调控的分子机制ꎬ本研究依据本课题组前期获得的转录组ＤＸＳ基因序列ꎬ以广藿香ｃＤＮＡ为模板ꎬ克隆得到ＰｃＤＸＳ基因ꎬ对其进行生物信息学分析ꎬ构建ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ原核表达载体诱导蛋白表达ꎬ并采用荧光实时定量ＰＣＲ法检测广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中ＤＸＳ基因表达情况ꎮ结果表明ꎬ从广藿香叶中克隆到开放阅读框全长为２１５１ｂｐ和１９０８ｂｐ的ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因序列ꎬ分别编码７１６㊁６３５个氨基酸ꎮ预测ＰｃＤＸＳ１蛋白分子量７８.３３ｋＤａꎬ为稳定非跨膜非分泌蛋白ꎬ主要定位于叶绿体ꎻＰｃＤＸＳ２蛋白分子量６７.９２ｋＤａꎬ为不稳定非跨膜非分泌蛋白ꎬ主要定位于叶绿体ꎮＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２均含有ＤＸＰ＿ｓｙｎｔｈａｓｅ＿Ｎ㊁Ｔｒａｎｓｋｅｔ＿ｐｙｒ和Ｔｒａｎｓｋｅｔｏｌａｓｅ＿Ｃ结构域模块ꎬ属于ＤＸＳ超家族ꎮＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２分别与半枝莲㊁糙苏的ＤＸＳ基因序列具有较高同源性ꎮ使用异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷(ＩＰＴＧ)诱导的ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２融合蛋白主要在沉淀中表达ꎮＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因表达量均在根中最低ꎬＰｃＤＸＳ１基因在叶中显著高表达ꎬＰｃＤＸＳ２基因在叶㊁芽㊁茎中高表达ꎮ本研究结果可为后续深入研究ＤＸＳ基因在广藿香萜类化合物合成途径中的生物学功能及广藿香萜类代谢途径的基因调控奠定基础ꎮ关键词:广藿香ꎻ１－脱氧－Ｄ－木酮糖－５－磷酸合酶(ＤＸＳ)ꎻ基因克隆ꎻ生物信息学分析ꎻ表达分析中图分类号:Ｓ５６７.２:Ｑ７８１㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２４)０４－００２８－０８ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＤＸＳＧｅｎｅｆｒｏｍＰｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎ(Ｂｌａｎｃｏ)Ｂｅｎｔｈ.ＺｅｎｇＱｉｎｇꎬＹａｎＹａｌｉｎｇꎬＹａｎＨａｎｊｉｎｇꎬＨｅＭｅｎｇｌｉｎｇꎬＺｈａｎｇＨｏｎｇｙｉ(ＳｃｈｏｏｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０００６ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀１￣Ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ(ＤＸＳ)ｉｓｔｈｅｆｉｒｓｔｋｅｙｅｎｚｙｍｅｔｏｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅＭＥＰｐａｔｈｗａｙｉｎｔｈｅｔｅｒｐｅｎｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｐａｔｈｗａｙ.ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＤＸＳｇｅｎｅｐａｒｔｉｃｉ￣ｐａｔｉｎｇｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍａｉｎｔｅｒｐｅｎｏｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔꎬｐａｔｃｈｏｕｌｉａｌｃｏｈｏｌꎬｉｎｐａｔｃｈｏｕｌｉ(Ｐｏｇｏｓｔｅ￣ｍｏｎｃａｂｌｉｎ)ꎬｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅＤＸＳｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｂｔａｉｎｅｄｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｂｙｏｕｒｒｅｓｅａｒｃｈｇｒｏｕｐ.ＰｃＤＸＳｇｅｎｅｗａｓｃｌｏｎｅｄｂｙｕｓｉｎｇｐａｔｃｈｏｕｌｉｃＤＮＡａｓｔｅｍｐｌａｔｅꎬａｎｄｔｈｅｎａｎａｌｙｚｅｄｂｙｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓｍｅｔｈｏｄ.ＴｈｅｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｐＥＴ￣２８ａ￣ＰｃＤＸＳｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｔｏｉｎｄｕｃｅｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎꎬａｎｄｒｅａｌ￣ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤＸＳｇｅｎｅｉｎｒｏｏｔｓꎬｓｔｅｍｓꎬｌｅａｖｅｓａｎｄｂｕｄｓｏｆｐａｔｃｈｏｕｌｉ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＰｃＤＸＳ１ａｎｄＰｃＤＸＳ２ｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓｗｉｔｈｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅｌｅｎｇｔｈｏｆ２１５１ｂｐａｎｄ１９０８ｂｐｗｅｒｅｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍｌｅａｖｅｓｏｆｐａｔｃｈｏｕｌｉꎬｅｎｃｏｄｉｎｇ７１６ａｎｄ６３５ａｍｉｎｏａｃｉｄｓꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.ＰｃＤＸＳ１ｐｒｏｔｅｉｎｗａｓｐｒｅｄｉｃｔｅｄｔｏｈａｖｅ７８.３３ｋＤａｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔꎬａｎｄｗａｓａｓｔａｂｌｅꎬｎｏｎ￣ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅａｎｄｎｏｎ￣ｓｅｃｒｅｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｐｒｉｍａｒｉｌｙｌｏｃａｌｉｚｅｄｉｎｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｓ.ＰｃＤＸＳ２ｐｒｏｔｅｉｎｈａｄ６７.９２ｋＤａｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔꎬｗｈｉｃｈｗａｓａｎｕｎｓｔａｂｌｅꎬｎｏｎ￣ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅａｎｄｎｏｎ￣ｓｅｃｒｅｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｍａｉｎｌｙｌｏｃａｌｉｚｅｄｉｎｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｓ.ＰｃＤＸＳ１ａｎｄＰｃＤＸＳ２ｃｏｎｔａｉｎｅｄＤＸＰ̠ｓｙｎｔｈａｓｅ̠ＮꎬＴｒａｎｓｋｅｔ̠ｐｙｒａｎｄＴｒａｎｓｋｅｔｏｌａｓｅ̠ＣｄｏｍａｉｎｍｏｄｕｌｅｓｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬｂｅｌｏｎｇｉｎｇｔｏＤＸＳｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ.ＰｃＤＸＳ１ａｎｄＰｃＤＸＳ２ｈａｄｈｉｇｈｈｏｍｏｌｏｇｙｉｎｇｅｎｅｓｅｑｕｅｎｃｅｗｉｔｈＤＸＳｇｅｎｅｓｏｆＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａｂａｒｂａｔａａｎｄＰｈｌｏｍｉｓｕｍｂｒｏｓａ.ＰｃＤＸＳ１ａｎｄＰｃＤＸＳ２ｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｉｓｏｐｒｏｐｙｌ￣β￣Ｄ￣ｔｈｉｏｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅ(ＩＰＴＧ)ｗｅｒｅｍａｉｎｌｙｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖ￣ｅｌｓｏｆＰｃＤＸＳ１ａｎｄＰｃＤＸＳ２ｇｅｎｅｓｗｅｒｅｔｈｅｌｏｗｅｓｔｉｎｒｏｏｔｓ.ＰｃＤＸＳ１ｇｅｎｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｌｅａｖｅｓꎬｗｈｉｌｅＰｃＤＸＳ２ｇｅｎｅｗａｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｈｉｇｈｅｒｉｎｌｅａｖｅｓꎬｂｕｄｓａｎｄｓｔｅｍｓｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｒｏｏｔｓ.ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｃｏｕｌｄｌａｙｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｉｅｓｏｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆＤＸＳｇｅｎｅｉｎｔｅｒｐｅｎｏｉｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓｙｎｔｈｅｓｉｓｐａｔｈｗａｙａｎｄｇｅｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｅｒｐｅｎｏｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｐａｔｈｗａｙｉｎｐａｔｃｈｏｕｌｉ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀Ｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎꎻ１￣Ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ(ＤＸＳ)ꎻＧｅｎｅｃｌｏｎｉｎｇꎻＢｉｏｉｎ￣ｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓꎻＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ㊀㊀广藿香[Ｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎ(Ｂｌａｎｃｏ)Ｂｅｎｔｈ.]是唇形科刺蕊草属草本植物ꎬ原产于东南亚ꎬ引种至我国成为岭南道地药材ꎬ是一种具有重要药用价值和广泛工业生产应用价值的经济作物ꎬ具有芳香化浊㊁和中解暑的功效[１]ꎬ是藿香正气丸㊁二妙丸㊁午时茶颗粒等中成药的主要原料ꎮ已检测到广藿香地上部分含有１７４种化学成分ꎬ其中萜类最多ꎬ达６６种ꎬ另有黄酮㊁类固醇㊁吡喃酮㊁多糖等多种生物活性成分[２]ꎬ因而具有抗菌㊁抗炎㊁抗诱变㊁抗细胞凋亡㊁抗ＨｅｐＧ１９癌细胞增殖等多种药理活性[３－４]ꎮ广藿香提取物广藿香油全球年产可达２０００吨[５]ꎬ常被用于各类芳香疗法以舒缓压力㊁减轻疲劳㊁改善失眠㊁缓解焦虑等ꎬ还因气味宜人被广泛应用于香水㊁肥皂㊁化妆品等化工领域[６]ꎻ另外ꎬ在畜禽领域ꎬ广藿香提取物作为饲料添加剂也展现出巨大潜力[７]ꎮ广藿香醇是广藿香挥发油的首要成分ꎬ其生物合成途径有两条ꎬ分别是定位于细胞质的甲羟戊酸(ｍｅｖａｌｏｎａｔｅꎬＭＶＡ)途径和定位于叶绿体的甲基赤藓糖－４－磷酸(ｍｅｔｈｙｌｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ￣４￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅꎬＭＥＰ)途径[８－９]ꎮＭＶＡ途径主要负责倍半萜㊁三萜和橄榄苦苷甾体的合成ꎬ而广藿香醇为三环倍半萜类化合物ꎬ因此在关于广藿香醇的分子调控和生物合成中ꎬ针对ＭＶＡ途径关键基因的作用已经进行了较多研究[１０]ꎮＭＥＰ途径除合成单萜㊁二萜㊁四萜还合成植物激素㊁光合色素[１１－１２]ꎮＭＶＡ和ＭＥＰ途径均可产生戊烯基焦磷酸(ＩＰＰ)及其异构体二甲基烯丙基焦磷酸(ＤＭＡＰＰ)ꎬ这两种物质是合成萜类化合物的共同前体物质ꎮ１－脱氧－Ｄ－木酮糖－５－磷酸合酶(ＤＸＳ)是ＭＥＰ途径的第一个酶ꎬ催化丙酮酸和３－磷酸甘油醛生成１－脱氧木酮糖－５－磷酸(ＤＸＰ)[１２]ꎮＤＸＳ家族可分为３个不同的亚家族 ＤＸＳ１㊁ＤＸＳ２和ＤＸＳ３ꎬ这３种类型的ＤＸＳ蛋白在保守基序组成㊁二级结构和三级结构方面具有高度相似性[１３]ꎮＤＸＳ不仅在植物萜类生物合成过程中发挥着重要调控作用ꎬ还在许多生理过程中起着重要作用ꎬ如光合作用㊁植物激素调节㊁逆境抗性和病原体防御等ꎮ过表达马尾松ＰｍＤＸＳ可以显著提高其类胡萝卜素㊁叶绿素ａ㊁叶绿素ｂ含量和ＤＸＳ活性[１４]ꎬ瞬时转化过表达天竺葵的ＧｒＤＸＳ基因能增加次生代谢物天竺葵精油中单萜和倍半萜化合物含量[１５]ꎬ提示ＤＸＳ基因在萜类生物合成途径中具有重要调控作用ꎮ迄今ꎬＤＸＳ基因已经在银杏[１６]㊁乌头[１７]㊁穿心莲[１８]㊁桔梗[１９]㊁荆芥[２０]等多种植物中完成克隆和初步研究ꎬ而从广藿香中探究ＤＸＳ基因的内容鲜见报道ꎮ本研究基于课题组前期获得的转录组数据克隆了广藿香ＤＸＳ基因ꎬ并对其进行生物信息学分析及在广藿香不同部位的表达分析ꎬ以期为今后深入研究该基因在萜类化合物代谢中的功能奠定基础ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀试验材料本研究所用植物材料经广东药科大学中药学院严寒静教授鉴定为唇形科刺蕊草属植物广藿香[Ｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎ(Ｂｌａｎｃｏ)Ｂｅｎｔｈ.]ꎬ培育于广东药科大学中药学院ꎮ采集生长６个月的广藿香叶片液氮速冻ꎬ于－８０ħ超低温冰箱保存ꎬ用于ＲＮＡ提取与基因克隆ꎮ选取生长６个月状态良好的广藿香根㊁茎(第２㊁３对叶之间)㊁叶(第２对叶)㊁芽ꎬ经液氮速冻后置于－８０ħ冰箱ꎬ用于ＲＮＡ提取及组织特异性表达ｑＲＴ－ＰＣＲ分析ꎮＤＨ５α感受态细胞㊁ＢＬ２１(ＤＥ３)表达菌株㊁ｐＥＴ２８ａ原核表达载体均购自北京庄盟国际生物９２㊀第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香ＤＸＳ基因克隆及表达分析基因科技有限公司ꎮ１.２㊀试验方法１.２.１㊀ＲＮＡ提取与ｃＤＮＡ链合成㊀将广藿香叶片样品经液氮研磨后ꎬ采用天根植物总ＲＮＡ提取试剂盒提取总ＲＮＡꎬ使用超微量紫外分光光度计ＵＶ２４５０测定其浓度和纯度ꎬ用１％琼脂糖凝胶电泳检测ＲＮＡ完整性ꎮ使用ＴａＫａＲａ的ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔＲＴｒｅａｇｅｎｔＫｉｔｗｉｔｈｇＤＮＡＥｒａｓｅｒ反转录试剂盒合成ｃＤＮＡ第一链ꎮ１.２.２㊀基因克隆㊀根据课题组前期获得的转录组数据得到广藿香ＰｃＤＸＳ基因的ＣＤＳ序列ꎬ设计特异性引物(表１)ꎬ以反转录得到的ｃＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增ꎮＰＣＲ反应体系:ｃＤＮＡ１μＬꎬ上游引物ＰｃＤＸＳ－Ｆ１μＬꎬ下游引物ＰｃＤＸＳ－Ｒ１μＬꎬＰｒｉｍｅＳＴＡＲ ＭａｘＤＮＡＰｏｌｙｍｅｒａｓｅ２５μＬ㊁ｄｄＨ２Ｏ补足至５０μＬꎮＰＣＲ反应程序:９８ħ１０ｓꎬ５５ħ５ｓꎬ７２ħ１２ｓꎬ３５个循环ꎻ７２ħ２ｍｉｎꎮＰＣＲ产物经１％琼脂糖凝胶电泳鉴定后切胶回收ꎬ并检测浓度及纯度ꎬ使用庄盟ＺＴＯＰＯ－Ｂｌｕｎｔ/ＴＡ快速克隆试剂盒进行ＴＡ克隆ꎻ转化大肠杆菌ＤＨ５α感受态细胞ꎬ经菌液ＰＣＲ鉴定ꎬ挑取阳性克隆ꎬ送广州擎科生物科技股份有限公司测序ꎮ表１㊀引物序列引物名称用途引物序列(５ᶄ－３ᶄ)ＰｃＤＸＳ１－Ｆ基因克隆ＡＴＧＧＣＴＴＣＴＧＴＴＴＣＴＴＧＣＣＡＧＡＡＣＣＰｃＤＸＳ１－ＲＴＣＡＧＡＧＣＡＴＣＡＡＴＴＧＡＡＧＡＧＣＧＴＣＧＰｃＤＸＳ２－ＦＡＴＧＡＡＡＡＡＣＣＴＣＡＣＴＧＣＴＡＡＧＧＰｃＤＸＳ２－ＲＴＴＡＧＧＡＣＡＴＴＡＴＣＴＣＴＡＧＧＧＣＣｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ１－Ｆ构建原核表达载体ＧＡＣＡＧＣＡＡＡＴＧＧＧＴＣＧＣＧＧＡＡＴＧＧＣＴＴＣＴ￣ＧＴＴＴＣＴＴＧＣＣＡＧＡＡＣＣｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ１－ＲＣＧＡＣＧＧＡＧＣＴＣＧＡＡＴＴＣＧＧＡＧＡＧＣＡＴ￣ＣＡＡＴＴＧＡＡＧＡＧＣＧＴＣＧＣＧｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ２－ＦＧＡＣＡＧＣＡＡＡＴＧＧＧＴＣＧＣＧＧＡＡＴＧＡＡＡＡＡＣ￣ＣＴＣＡＣＴＧＣＴＡＡＧＧＡＡＣＴＧＡＡＡＣＡｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ２－ＲＣＧＡＣＧＧＡＧＣＴＣＧＡＡＴＴＣＧＧＡＧＧＡＣＡＴ￣ＴＡＴＣＴＣＴＡＧＧＧＣＣＴＣＣＣＴＡＧ１８Ｓ－ＦｑＲＴ－ＰＣＲＴＣＡＡＣＣＡＴＡＡＡＣＧＡＴＧＣＣＧＡＣＣ１８Ｓ－ＲＴＴＴＣＡＧＣＣＴＴＧＣＧＡＣＣＡＴＡＣＴＣＣｑ－ＰｃＤＸＳ１－ＦＣＧＡＧＡＣＡＴＴＴＣＣＣＴＣＣＴＴＧＣｑ－ＰｃＤＸＳ１－ＲＧＡＣＣＡＣＣＡＣＡＡＣＴＴＣＴＴＣＡＴＣＧｑ－ＰｃＤＸＳ２－ＦＧＴＧＡＴＴＡＴＧＡＴＴＧＣＴＴＣＧＧＴＧＣＴｑ－ＰｃＤＸＳ２－ＲＡＴＧＧＣＴＴＣＧＴＡＴＧＣＴＴＧＡＣＣＴＧ１.２.３㊀生物信息学分析㊀依照对应的生物信息学在线工具(表２)对广藿香的ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２进行序列分析ꎮ从ＮＣＢＩ上进行Ｂｌａｓｔ比对ꎬ获得ＰｃＤＸＳ同源序列ꎬ利用ＭＥＧＡ.１１邻接法构建进化树ꎬＢｏｏｔｓｔｒａｐ值设置为１０００次重复ꎮ表２㊀在线工具、用途及网址在线工具用途网址ＥｘＰＡＳｙＰｒｏｔＰａｒａｍ蛋白质理化性质分析ｈｔｔｐｓ://ｗｅｂ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ/ｐｒｏｔｐａｒａｍ/ＥｘＰＡＳｙＰｒｏｔＳｃａｌｅ疏水性分析ｈｔｔｐｓ://ｗｅｂ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ/ｐｒｏｔｓｃａｌｅ/Ｐｌａｎｔ－ｍＰＬｏｃ亚细胞定位预测ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｃｓｂｉｏ.ｓｊｔｕ.ｅｄｕ.ｃｎ/ｂｉｏｉｎｆ/ｐｌａｎｔ￣ｍｕｌｔｉ/ＤｅｅｐＴＭＨＭＭ跨膜结构预测ｈｔｔｐｓ://ｄｔｕ.ｂｉｏｌｉｂ.ｃｏｍ/ＤｅｅｐＴＭ￣ＨＭＭＳｉｇｎａｌＰ－６.０信号肽预测ｈｔｔｐｓ://ｓｅｒｖｉｃｅｓ.ｈｅａｌｔｈｔｅｃｈ.ｄｔｕ.ｄｋ/ｓｅｒｖｉｃｅｓ/ＳｉｇｎａｌＰ￣６.０/ＮＣＢＩＣＤＳｅａｒｃｈ保守结构域分析ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ/Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ/ｃｄｄ/ｗｒｐｓｂ.ｃｇｉＳＯＰＭＡ二级结构预测ｈｔｔｐｓ://ｎｐｓａ￣ｐｒａｂｉ.ｉｂｃｐ.ｆｒ/ｃｇｉ￣ｂｉｎ/ｎｐｓａ＿ａｕｔｏｍａｔ.ｐｌ?ｐａｇｅ＝ｎｐｓａ％２０＿ｓｏｐｍａ.ｈｔｍｌＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ三级结构预测ｈｔｔｐｓ://ｓｗｉｓｓｍｏｄｅｌ.ｅｘｐａｓｙ.ｏｒｇ/１.２.４㊀原核表达㊀设计ＰｃＤＸＳ基因与包含ｐＥＴ－２８ａ载体酶切位点的同源臂引物(表１)ꎬ构建ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ原核表达载体ꎮＰｃＤＸＳ基因引入ｐＥＴ－２８ａ载体同源臂反应体系为:ＴＡ－ＰｃＤＸＳ重组质粒１μＬꎬ上游引物ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ－Ｆ１μＬꎬ下游引物ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ－Ｒ１μＬꎬＰｒｉｍｅＳＴＡＲ ＭａｘＤＮＡＰｏｌｙｍｅｒａｓｅ２５μＬꎬｄｄＨ２Ｏ补足至５０μＬꎮＰＣＲ反应程序:９８ħ１０ｓꎬ５５ħ５ｓꎬ７２ħ１２ｓꎬ３５个循环ꎻ７２ħ２ｍｉｎꎮ采用全式金ＢａｍＨⅠ酶将ｐＥＴ－２８ａ载体进行单酶切线性化ꎮＰＣＲ产物及酶切产物经１％琼脂糖凝胶电泳鉴定后切胶回收ꎬ将产物根据庄盟ＳＥ无缝克隆和组装试剂盒连接转化ＤＨ５α感受态细胞ꎬ菌液经ＰＣＲ鉴定ꎬ挑取阳性克隆ꎬ送广州擎科生物科技股份有限公司测序ꎮ将ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ质粒转化蛋白表达菌株ＢＬ２１(ＤＥ３)ꎬ经ＰＣＲ鉴定ꎬ挑取阳性菌液摇菌后ꎬ在５ｍＬ菌液中添加异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷(ＩＰＴＧ)至浓度分别为０.２５㊁０.５㊁０.７５㊁１.０ｍｍｏｌ Ｌ－１ꎬ１６０ｒ ｍｉｎ－１摇床㊁１６ħ培养１２ｈꎬ使用细胞破碎仪(ＡＭＰ２５％ꎬ开５ｓꎬ关５ｓ)破碎２ｍｉｎꎬ离心收集上清液和沉淀ꎬ进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳检测ＰｃＤＸＳ蛋白表达情况ꎮ１.２.５㊀荧光定量ＰＣＲ表达分析㊀以转录合成的ｃＤＮＡ为模板ꎬ１８Ｓ为内参基因ꎮ根据ＰｃＤＸＳ基因的测序结果ꎬ使用Ｐｒｅｍｉｅｒ５.０设计ｑＲＴ－ＰＣＲ引物(表１)ꎮ实时荧光定量ＰＣＲ采用２０μＬ反应体系:２ˑＴＢＧｒｅｅｎＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑⅡ１０μＬꎬｃＤ￣ＮＡ１.５μＬꎬ上㊁下游引物各０.４μＬꎬｄｄＨ２Ｏ７.７μＬꎮ扩增程序:９５ħꎬ３０ｓꎻ９５ħ５ｓꎬ６０ħ３０ｓꎬ０３山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５６卷㊀４０个循环ꎮ每个部位进行３次生物学重复ꎬ每个样品３个技术重复ꎮ采用２－әәＣｔ法计算ＰｃＤＸＳ基因在广藿香不同组织部位根㊁茎㊁叶㊁芽中的相对表达量ꎮ采用ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ９.５软件进行单向方差多重比较分析数据ꎬ利用ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＥｘｃｅｌ作图并用字母标记法标记差异显著性ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因克隆提取广藿香总ＲＮＡꎬ琼脂糖凝胶电泳显示有清晰条带ꎬ经超微量紫外分光光度计ＵＶ２４５０测定浓度和纯度合格ꎬ可用于后续实验ꎮ通过使用基因特异性引物ꎬ成功克隆获得两条序列长度为２１５１ｂｐ和１９０８ｂｐ的序列(图１)ꎬ测序结果与转录组序列相似度分别高达９９.９５％和１００％ꎬ分别编码７１６个和６３５个氨基酸ꎬ命名为ＰｃＤＸＳ１和ＰｃＤＸＳ２ꎮＭ:ＤＬ２０００ＤＮＡＭａｒｋｅｒꎻ１:ＰｃＤＸＳ１基因ＰＣＲ扩增产物ꎻ２:ＰｃＤＸＳ２基因ＰＣＲ扩增产物ꎮ图１㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因克隆２.２㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２蛋白理化性质分析经ＰｒｏｔＰａｒａｍ预测分析ꎬＰｃＤＸＳ１蛋白分子式为Ｃ３４７３Ｈ５４９６Ｎ８４０Ｏ１０３８Ｓ３９ꎬ为亲水且稳定的弱酸性蛋白ꎻＰｃＤＸＳ２蛋白分子式为Ｃ３００９Ｈ４７９０Ｎ８４０Ｏ８９９Ｓ２５ꎬ为亲水不稳定的弱酸性蛋白(表３)ꎬＰｒｏｔＳｃａｌｅ分析也表明ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２均为亲水性蛋白(图２)ꎮ两蛋白均定位在叶绿体ꎮ表３㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ１蛋白理化性质蛋白氨基酸数分子量/ｋＤａ正电残基个数负电残基个数等电点亲水性总平均值(ＧＲＡＶＹ)脂肪系数不稳定系数跨膜区域信号肽ＰｃＤＸＳ１７１６７８.３３８４６６５.７８－０.０２８９２.３５３９.３５无无ＰｃＤＸＳ２６３５６７.９２７１６５６.３６－０.０４４９１.４５４２.８４无无正值表示疏水ꎻ负值表示亲水ꎮ图２㊀ＰｃＤＸＳ１(Ａ)㊁ＰｃＤＸＳ２(Ｂ)蛋白亲疏水性预测２.３㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２保守结构域及二级和三级结构分析ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２蛋白保守结构域分析结果显示ꎬ两者都属于ＤＸＳ超家族ꎬ含有从Ｎ端到Ｃ端的ＤＸＰ＿ｓｙｔｈａｓｅ＿Ｎ㊁Ｔｒａｎｓｋｅｔ＿ｐｙｒ和Ｔｒａｎｓｋｅｔｏ￣ｌａｓｅ＿Ｃ结构域模块(图３)ꎮＰｃＤＸＳ１蛋白二级结构中无规则卷曲占比最高ꎬ为３９.８０％ꎬ还含有３７.８５％的α－螺旋㊁１５.９２％的折叠延伸链㊁６.４２％的β－折叠ꎻＰｃＤＸＳ２蛋白中占比最高的是α－螺旋ꎬ为４１.８９％ꎬ还含有１５.５９％的折叠延伸链㊁８.０３％的β－折叠㊁３４.４９％的无规则卷曲(图４)ꎮ通过ＳＷＩＳＳＭＯＤＥＬ构建了两蛋白的三级结构ꎬ对ＰｃＤＸＳ１蛋白ꎬ以叶绿体ＤＸＰＳ为模板ꎬ序列一致性５５.７８％ꎬＧＭＱＥ得分为０.６４(０~１范围内数值越大表明预期质量越高)ꎬＧＭＥＡＮ得分为１３㊀第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香ＤＸＳ基因克隆及表达分析０.６７(分数趋近于０反映 类似原生 的结构ꎬ低于－４.０的 ＱＭＥＡＮ 分数表示模型质量较低)ꎬ可视为获得了良好的ＰｃＤＸＳ１蛋白三级结构模型ꎮ对ＰｃＤＸＳ２蛋白ꎬ以番茄ＤＸＳ１为模板ꎬ二者的相似度高达９１.０２％ꎬＧＭＱＥ得分为０.９０ꎬ该模型可较好地预测ＰｃＤＸＳ２蛋白的三级结构(图５)ꎮ图３㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２蛋白保守结构域分析结果２.４㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因系统进化分析使用ＭＥＧＡ１１构建ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２与其他物种ＤＸＳ基因的系统发育树ꎬ结果(图６)显示ꎬＰｃＤＸＳ１与半枝莲ＤＸＳ(ＭＫ０３５０４０.１)聚为一支ꎬＰｃＤＸＳ２与糙苏ＤＸＳ(ＫＵ３１７５０８.１)聚为一支ꎬ亲缘关系较近ꎮＰｃＤＸＳ１和ＰｃＤＸＳ２之间存在系统发育距离ꎬ可能存在功能差异ꎮ蓝色表示α－螺旋ꎻ红色表示β－折叠ꎻ绿色表示β－转角ꎻ紫色表示无规则卷曲ꎮ图４㊀ＰｃＤＸＳ１(Ａ)㊁ＰｃＤＸＳ２(Ｂ)蛋白的二级结构图５㊀ＰｃＤＸＳ１(Ａ)㊁ＰｃＤＸＳ２(Ｂ)蛋白的三级结构Ｃａｍｅｌｌｉａｓｉｎｅｎｓｉｓ:山茶花ꎻＡｃｔｉｎｉｄｉａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ:猕猴桃ꎻＰｒｕｎｅｌｌａｖｕｌｇａｒｉｓ:夏枯草ꎻＧａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓ:栀子ꎻＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａ:马尾松ꎻＴｈｕｊａｐｌｉｃａｔａ:北美乔柏ꎻＡｑｕｉｌａｒｉａｓｉｎｅｎｓｉｓ:土沉香ꎻＰｈｌｏｍｉｓｕｍｂｒｏｓａ:糙苏ꎻＴａｒａｘａｃｕｍｋｏｋ￣ｓａｇｈｙｚ:橡胶草ꎻＷｉｔｈａｎｉａｓｏｍｎｉｆｅｒａ:南非醉茄ꎻＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａｂａｒｂａｔａ:半枝莲ꎻＬｙｃｉｕｍｒｕｔｈｅｎｉｃｕｍ:枸杞ꎻＰｌｅｃｔｒａｎｔｈｕｓｂａｒｂａｔｕｓ:左手香ꎮ图６㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因系统发育进化树２３山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５６卷㊀２.５㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２原核表达分析将ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２基因引入同源臂与ｐＥＴ－２８ａ线性化载体连接ꎬ测序分析结果同克隆序列一致ꎬ表明成功构建ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ１㊁ｐＥＴ－２８ａ－ＰｃＤＸＳ２原核表达载体ꎮＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２蛋白分子量分别为７８.３３ｋＤａ和６７.９２ｋＤａꎬ加上Ｈｉｓ标签后蛋白大小分别约为８４.６ｋＤａ和７６.１ｋＤａꎮ将重组质粒转化ＢＬ２１(ＤＥ３)菌株ꎬ挑取阳性菌在１６ħ条件下分别用０.２５㊁０.５０㊁０.７５㊁１.０ｍｍｏｌ Ｌ－１ＩＰＴＧ诱导表达１２ｈꎬ经细胞破碎仪破碎㊁离心㊁ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳检测ꎬ结果(图７)显示ꎬ在沉淀中分别有８４.６ｋＤａ和７６.１ｋＤａ的蛋白条带ꎬ说明ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２重组蛋白被成功诱导表达ꎬＰｃＤＸＳ２重组蛋白表达较少ꎬ主要在沉淀中表达ꎬＩＰＴＧ浓度变化对蛋白表达无明显影响ꎮＭ:ＢｌｕｅＰｌｕｓ®ＩＩＰｒｏｔｅｉｎＭａｒｋｅｒ(１４~１２０ｋＤａ)ꎻ１㊁３㊁５㊁７㊁９:分别为０㊁０.２５㊁０.５０㊁０.７５㊁１.００ｍｍｏｌ Ｌ－１ＩＰＴＧ诱导重组蛋白表达后的破碎菌体上清ꎻ２㊁４㊁６㊁８㊁１０:分别为０㊁０.２５㊁０.５０㊁０.７５㊁１.０ｍｍｏｌ Ｌ－１ＩＰＴＧ诱导重组蛋白表达后的破碎菌体沉淀ꎮ图７㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２原核表达分析的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测结果２.６㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２表达的组织特异性分析结果(图８)显示ꎬＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２在广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中均有表达ꎮ其中ꎬＰｃＤＸＳ１在叶中表达量最高ꎬ在芽和茎中表达量也较高ꎬ均显著高于在根中的表达量ꎻＰｃＤＸＳ２在茎㊁叶㊁芽中的表达量相当ꎬ且均显著高于在根中的表达量ꎮ柱上不同小写字母表示组织间差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ图８㊀ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２在广藿香不同部位中的表达差异３㊀讨论目前已从多种植物中挖掘出ＤＸＳ基因ꎬ并对其在萜类化合物生物合成过程中的功能进行了研究ꎬ但ＤＸＳ基因对广藿香萜类代谢调控的影响尚未见研究报道ꎮＤＸＳ基因家族具有较高的保守性[２１]ꎬ多含有ＤＸＰ＿ｓｙｔｈａｓｅ＿Ｎ㊁Ｔｒａｎｓｋｅｔ＿ｐｙｒ和Ｔｒａｎｓｋｅｔｏｌａｓｅ＿Ｃ结构域模块[２２]ꎮ本研究从广藿香中克隆出两个ＤＸＳ基因(ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２)ꎬ均包含该３个保守结构域模块ꎬ符合ＤＸＳ基因家族结构特征ꎮＤＸＳ亚家族中ꎬＤＸＳ１被认为是管家基因[２３]ꎬＤＸＳ１蛋白主要在叶绿体中表达ꎬ是合成光合色素和植物激素所必需的[２４]ꎬ在植物叶片和茎的叶绿体以及果实的有色质体中大量表达[１２]ꎻＤＸＳ２蛋白位于非光合作用质体中ꎬ参与一些防御反应特异的萜类化合物的合成ꎬ优先在植物根的成熟体中表达[１２]ꎻＤＸＳ３蛋白的表达与参与胚胎后发３３㊀第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香ＤＸＳ基因克隆及表达分析育和繁殖的基因相关[２５]ꎮ本研究结果显示ꎬＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２在广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中均有表达ꎬ且主要在地上部表达ꎬ在根中的表达量较低ꎬ尤其ＰｃＤＸＳ１在叶中显著高表达ꎬ符合ＤＸＳ１在光合组织中活跃的特征ꎻ亚细胞定位预测显示主要定位在叶绿体ꎬ说明ＰｃＤＸＳ１和ＰｃＤＸＳ２可能在叶绿体中发挥作用ꎮ原核表达是常见的表达外源蛋白的分子生物技术ꎬ大肠杆菌(Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ)具有生长周期短㊁易于培养及遗传操纵的特点ꎬ是产生重组蛋白的重要宿主ꎬ优化重组蛋白的生物合成至关重要ꎬ常通过改变菌株的培养参数增加蛋白的表达和溶解度ꎬ用于生产重组蛋白[２６－２７]ꎮ对毛果杨ＤＸＳ蛋白进行诱导表达ꎬ在沉淀物中检测到ＰｔＤＸＳ靶蛋白[２８]ꎮ陈文意等[２９]考察了２０㊁３０ħ下ꎬ０.２５ｍｍｏｌ Ｌ－１和０.５ｍｍｏｌ Ｌ－１ＩＰＴＧ诱导的广藿香Ｐｃ￣ＪＡＲ１融合蛋白表达ꎬ发现２０ħ㊁０.２５ｍｍｏｌ Ｌ－１ＩＰＴＧ诱导下表达菌诱导蛋白在沉淀中更高表达ꎬ说明温度和ＩＰＴＧ浓度影响蛋白表达ꎮ本研究利用０.２５㊁０.５㊁０.７５㊁１.０ｍｍｏｌ Ｌ－１ＩＰＴＧ诱导ＰｃＤＸＳ１㊁ＰｃＤＸＳ２重组蛋白在ＢＬ２１(ＤＥ３)中表达ꎬ结果表明两蛋白主要在沉淀中表达ꎬ表达量与ＩＰＴＧ浓度无明显关联ꎬＰｃＤＸＳ２重组蛋白在同样条件下表达量较少还可能与诱导温度和时间有关ꎮ研究发现ꎬＤＸＳ基因的表达水平一般与ＭＥＰ途径直接调控的萜类含量呈正相关ꎬ过表达薰衣草ＤＸＳ基因显著促进薰衣草精油中单萜化合物的积累[３０]ꎻ二萜类丹参酮是丹参的主要生物活性成分ꎬ丹参ＳｍＤＸＳ１和ＳｍＤＸＳ２的过表达显著增强其根系中丹参酮的积累[３１]ꎮ同时ꎬＤＸＳ基因也调控ＭＶＡ途径萜类化合物合成ꎬ其表达水平会影响ＭＶＡ途径萜类含量水平的高低ꎬ如沉默甘草ＤＸＳ基因促进了甘草毛状根中三萜类物质甘草酸的合成ꎬ而过表达ＤＸＳ基因则导致甘草酸含量下降[３２]ꎻ使用ＤＸＳ基因抑制剂氯马松(ＣＬＯ)处理檀香幼苗ꎬ倍半萜檀香醇的含量没有降低[３３]ꎮ４㊀结论本研究从广藿香中克隆得到ＰｃＤＸＳ１和ＰｃＤＸＳ２基因ꎬ其全长分别为２１５１ｂｐ和１９０８ｂｐꎬ分别编码７１６个和６３５个氨基酸ꎬ均定位于叶绿体ꎬ均为亲水性㊁非跨膜㊁非分泌蛋白ꎻＰｃＤＸＳ１蛋白为稳定蛋白ꎬＰｃＤＸＳ２蛋白为不稳定蛋白ꎬ均具有ＤＸＳ基因家族典型特征ꎮ原核表达分析发现两蛋白均受ＩＰＴＧ诱导表达ꎬ且主要在沉淀中表达ꎬ表达水平在不同ＩＰＴＧ浓度间无明显差异ꎮ两基因在广藿香根㊁茎㊁叶㊁芽中均有表达ꎬ但在根中的表达量均较低ꎬＰｃＤＸＳ１主要在叶中表达ꎬＰｃＤＸＳ２在茎㊁叶㊁芽中的表达量均较高且相当ꎮ这为深入研究ＤＸＳ基因在调控广藿香萜类化合物合成中的作用奠定基础ꎮ为此ꎬ本课题组已构建ＤＸＳ基因的过表达载体和沉默载体ꎬ期望通过进一步研究揭示其表达与广藿香有效成分积累之间的关系ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀国家药典委员会.中华人民共和国药典[Ｍ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０２０:４６.[２]㊀ＸｕＦＦꎬＣａｉＷꎬＭａＴꎬｅｔａｌ.Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｕｓｅｓꎬｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌꎬｉｎｄｕｓｔｒｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎꎬｐｈａｒｍａ￣ｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓａｎｄｎｅｔｗｏｒｋｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎ:ａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＴｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬ２０２２ꎬ５０(３):６９１－７２１.[３]㊀ＰｅｎｇＸＪꎬＡｎｇＳꎬＺｈａｎｇＹＺꎬｅｔａｌ.ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｉｔｈａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙｆｒｏｍＰｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎ(Ｂｌａｎｃｏ)Ｂｅｎｔｈ[Ｊ].ＦｒｏｎｔｉｅｒｓｉｎＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０２２ꎬ１０:９３８８５１. [４]㊀ＦａｔｉｍａＳꎬＦａｒｚｅｅｎＩꎬＡｓｈｒａｆＡꎬｅｔａｌ.Ａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｒｅｖｉｅｗｏｎｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｐａｃｈｙｐｏｄｏｌ:ａｂｉｏａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｏｆａｎａｒｏｍａｔｉｃｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔＰｏｇｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎＢｅｎｔｈ.[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０２３ꎬ２８(８):３４６９.[５]㊀ＶａｎＢｅｅｋＴＡꎬＪｏｕｌａｉｎＤ.ＴｈｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｏｆｐａｔｃｈｏｕｌｉꎬＰｏｇ￣ｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎ:ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＦｌａｖｏｕｒａｎｄＦｒａｇｒａｎｃｅＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１８ꎬ３３(１):６－５１.[６]㊀ＳｗａｍｙＫＭꎬＳｉｎｎｉａｈＲＵ.Ａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｒｅｖｉｅｗｏｎｔｈｅｐｈｙ￣ｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓａｎｄｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＰｏｇ￣ｏｓｔｅｍｏｎｃａｂｌｉｎＢｅｎｔｈ.:ａｎａｒｏｍａｔｉｃｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｏｆｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０１５ꎬ２０(５):８５２１－８５４７. [７]㊀高阳ꎬ杜鑫ꎬ马雪ꎬ等.广藿香提取物在动物生产中的应用[Ｊ].黑龙江畜牧兽医ꎬ２０２３(２１):４９－５３.[８]㊀ＣｈａｐｐｅｌｌＪ.Ｔｈｅｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｙｏｆｉｓｏｐｒｅ￣ｎｏｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙꎬ１９９５ꎬ１０７(１):１－６. [９]㊀ＲｏｈｍｅｒＭ.Ｔｈｅｄｉｓｃｏｖｅｒｙｏｆａｍｅｖａｌｏｎａｔｅ￣ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｔｈｗａｙｆｏｒｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｂａｃｔｅｒｉａꎬａｌｇａｅａｎｄｈｉｇｈｅｒｐｌａｎｔｓ[Ｊ].ＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔＲｅｐｏｒｔｓꎬ１９９９ꎬ１６(５):５６５－５７４. [１０]张婵ꎬ姚广龙ꎬ张军锋ꎬ等.广藿香百秋李醇分子调控及合成生物学研究进展[Ｊ].生物技术通报ꎬ２０２１ꎬ３７(８):５５－６４.[１１]ＡｒｅｎｄｔＰꎬＰｏｌｌｉｅｒＪꎬＣａｌｌｅｗａｅｒｔＮꎬｅｔａｌ.Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃｂｉｏｌｏｇｙｆｏｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｎａｔｕｒａｌａｎｄｎｅｗ￣ｔｏ￣ｎａｔｕｒｅｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓｉｎｐｈｏｔｏｓｙｎ￣ｔｈｅｔｉｃｏｒｇａｎｉｓｍｓ[Ｊ].ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１６ꎬ８７(１):１６－３７.４３山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５６卷㊀[１２]ＧａｎｊｅｗａｌａＤꎬＫｕｍａｒＳꎬＬｕｔｈｒａＲ.Ａｎａｃｃｏｕｎｔｏｆｃｌｏｎｅｄｇｅｎｅｓｏｆｍｅｔｈｙｌ￣ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ￣４￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｐａｔｈｗａｙｏｆｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄｂｉｏｓｙｎ￣ｔｈｅｓｉｓｉｎｐｌａｎｔｓ[Ｊ].ＣｕｒｒｅｎｔＩｓｓｕｅｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙꎬ２００９ꎬ１１(ｓ１):３５－４５.[１３]ＴｉａｎＳＫꎬＷａｎｇＤＤꎬＹａｎｇＬꎬｅｔａｌ.Ａｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗｏｆ１￣Ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｉｎｔｅｒｐｅｎｏｉｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅ￣ｓｉｓｉｎｐｌａｎｔｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＧｒｏｗｔｈＲｅｇｕｌａｔｉｏｎꎬ２０２２ꎬ９６:２２１－２３５. [１４]ＬｉＲꎬＣｈｅｎＰＺꎬＺｈｕＬＺꎬｅｔａｌ.Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ(ＤＸＳ)ｇｅｎｅｒｅｌａｔ￣ｅｄｔｏｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０２１ꎬ２２(２):８４８.[１５]ＪａｄａｕｎＪＳꎬＳａｎｇｗａｎＮＳꎬＮａｒｎｏｌｉｙａＬＫꎬｅｔａｌ.Ｏｖｅｒ￣ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤＸＳｇｅｎｅｅｎｈａｎｃｅｓｔｅｒｐｅｎｏｉｄａｌｓｅｃｏｎｄａｒｙｍｅｔａｂｏｌｉｔｅａｃｃｕ￣ｍｕｌａｔｉｏｎｉｎｒｏｓｅ￣ｓｃｅｎｔｅｄｇｅｒａｎｉｕｍａｎｄＷｉｔｈａｎｉａｓｏｍｎｉｆｅｒａ:ａｃ￣ｔｉｖｅｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｐｌａｓｔｉｄｉｓｏｐｒｅｎｏｇｅｎｉｃｐａｔｈｗａｙｉｎｔｈｅｉｒｂｉｏ￣ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ[Ｊ].ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉａＰｌａｎｔａｒｕｍꎬ２０１７ꎬ１５９(４):３８１－４００. [１６]ＧｏｎｇＹＦꎬＬｉａｏＺＨꎬＧｕｏＢＨꎬｅｔａｌ.Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｅｘ￣ｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＤＸＳｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅꎬｔｈｅｆｉｒｓｔｃｏｍｍｉｔｔｅｄｅｎ￣ｚｙｍｅｏｆｔｈｅ２￣Ｃ￣ｍｅｔｈｙｌ￣Ｄ￣ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ４￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｐａｔｈｗａｙ[Ｊ].ＰｌａｎｔａＭｅｄｉｃａꎬ２００６ꎬ７２(４):３２９－３３５.[１７]ＳｈａｒｍａＥꎬＰａｎｄｅｙＳꎬＧａｕｒＡＫ.Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａ￣ｎａｌｙｓｉｓｏｆＤＸＳ１ｇｅｎｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＡｃｏｎｉｔｕｍｂａｌｆｏｕｒｉｉＳｔａｐｆ[Ｊ].ＡｃｔａＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉａｅＰｌａｎｔａｒｕｍꎬ２０１６ꎬ３８:２３３.[１８]ＳｒｉｎａｔｈＭꎬＳｈａｉｌａｊｉＡꎬＢｉｎｄｕＢＢＶꎬｅｔａｌ.Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆ１￣Ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ(ＤＸＳ)ｉｎＡｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓｐａｎｉｃｕｌａｔａ(Ｂｕｒｍ.ｆ)Ｎｅｅｓ[Ｊ].Ｍｏｌ.Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ.ꎬ２０２１ꎬ６３:１０９－１２４. [１９]董楠ꎬ余函纹ꎬ刘梦丽ꎬ等.桔梗ＤＸＳ基因的原核表达㊁亚细胞定位和酶活性分析[Ｊ].药学学报ꎬ２０２３ꎬ５８(４):１０５９－１０６８.[２０]林谷音ꎬ周佩娜ꎬ尹梦娇ꎬ等.荆芥１－脱氧－Ｄ－木酮糖－５－磷酸合成酶基因克隆及生物信息学分析[Ｊ].中草药ꎬ２０２１ꎬ５２(２):５２７－５３７.[２１]毛积鹏ꎬ黄林旺ꎬ郝静ꎬ等.植物ＤＸＳ基因的系统发育和分子进化分析[Ｊ].生物学杂志ꎬ２０２２ꎬ３９(２):２３－２８. [２２]陈国德ꎬ饶丹丹ꎬ韩豫ꎬ等.土沉香萜类合成相关ＤＸＳ和ＤＸＲ基因鉴定㊁进化和表达分析[Ｊ/ＯＬ].分子植物育种ꎬ２０２３:１－１１[２０２３－０４－１７].ｈｔｔｐ://ｋｎｓ.ｃｎｋｉ.ｎｅｔ/ｋｃｍｓ/ｄｅ￣ｔａｉｌ/４６.１０６８.Ｓ.２０２３０４１７.１５２０.０１６.ｈｔｍｌ.[２３]ＷａｌｔｅｒＭＨꎬＨａｎｓＪꎬＳｔｒａｃｋＤ.Ｔｗｏｄｉｓｔａｎｔｌｙｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｅｎ￣ｃｏｄｉｎｇ１￣ｄｅｏｘｙ￣ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｓ:ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｉｎｓｈｏｏｔｓａｎｄａｐｏｃａｒｏｔｅｎｏｉｄ￣ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｎｇｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｒｏｏｔｓ[Ｊ].ＴｈｅＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌꎬ２００２ꎬ３１(３):２４３－２５４. [２４]ＫｉｍＢＲꎬＫｉｍＳＵꎬＣｈａｎｇＹＪ.Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｇｅｎｅｓｉｎｒｉｃｅ[Ｊ].Ｂｉ￣ｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＬｅｔｔｅｒｓꎬ２００５ꎬ２７(１４):９９７－１００１.[２５]Ｌｕｎａ￣ＶａｌｄｅｚＬꎬＣｈｅｎｇｅ￣ＥｓｐｉｎｏｓａＭꎬＨｅｒｎáｎｄｅｚ￣ＭｕñｏｚＡꎬｅｔａｌ.Ｒｅａｓｓｅｓｓｉｎｇｔｈｅｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｔｈｅ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ５￣ｐｈｏｓ￣ｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｆａｍｉｌｙｓｕｇｇｅｓｔｓａｐｏｓｓｉｂｌｅｎｏｖｅｌｆｕｎｃｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅＤＸＳｃｌａｓｓ３ｐｒｏｔｅｉｎｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０２１ꎬ３１０:１１０９６０. [２６]ＧｏｐａｌＧＪꎬＫｕｍａｒＡ.Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓｆｏｒｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉ￣ｎａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｉｎＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ[Ｊ].ＴｈｅＰｒｏｔｅｉｎＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１３ꎬ３２:４１９－４２５.[２７]ＰｏｕｒｅｓｍａｅｉｌＭꎬＡｚｉｚｉ￣ＤａｒｇａｈｌｏｕＳ.Ｆａｃｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｈｅｔｅｒｏｌｏ￣ｇｏｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎＥ.ｃｏｌｉｈｏｓｔ[Ｊ].ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＭｉ￣ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０２３ꎬ２０５(５):２１２.[２８]ＷｅｉＨꎬＭｏｖａｈｅｄｉＡꎬＸｕＣꎬｅｔａｌ.ＯｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＰｔＤＸＳｅｎ￣ｈａｎｃｅｓｓｔｒｅｓｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎＰｏｐｌａｒｓ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０１９ꎬ２０(７):１６６９.[２９]陈文意ꎬ邓文静ꎬ严寒静ꎬ等.广藿香ＪＡＲ１基因的克隆及原核表达[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０２２ꎬ３３(６):１４５１－１４５５. [３０]Ｍｕñｏｚ￣ＢｅｒｔｏｍｅｕＪꎬＡｒｒｉｌｌａｇｅＩꎬＲｏｓＲꎬｅｔａｌ.Ｕｐ￣ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｅｎｈａｎｃｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｉｎｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｓｐｉｋｅｌａｖｅｎｄｅｒ[Ｊ].ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏ￣ｇｙꎬ２００６ꎬ１４２(３):８９０－９００.[３１]ＺｈｏｕＷꎬＨｕａｎｇＦꎬＬｉＳꎬｅｔａｌ.Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒ￣ｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｗｏ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅｇｅｎｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔａｎｓｈｉｎｏｎｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ[Ｊ].ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｒｅｅｄｉｎｇꎬ２０１６ꎬ３６:１２４.[３２]杨林ꎬ汪逗逗ꎬ田少凯ꎬ等.甘草ＤＸＳ基因过表达及表达沉默对甘草酸生物合成的影响研究[Ｊ].药学学报ꎬ２０２１ꎬ５６(７):２０２５－２０３２.[３３]ＣｈｅｎＸＨꎬＺｈａｎｇＹＹꎬＹａｎＨＦꎬｅｔａｌ.Ｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆ１￣ｄｅｏｘｙ￣Ｄ￣ｘｙｌｕｌｏｓｅ￣５￣ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ(ＤＸＳ)ｉｎＳａｎｔａｌｕｍａｌｂｕｍＬ.[Ｊ].Ｇｅｎｅꎬ２０２３ꎬ８５１(３０):１４６７６２.５３㊀第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀曾晴ꎬ等:广藿香ＤＸＳ基因克隆及表达分析。
广藿香的作用与功能主治与用量
广藿香的作用与功能主治与用量广藿香的作用与功能广藿香，又名香附子、香青蒿等，是一种生长在我国南方的常见草本植物。
在中医学中，广藿香被广泛应用于药物领域，具有多种作用和功能主治。
1.安神镇静：广藿香能够通过对神经系统的调节，具有安神镇静的效果，有助于缓解焦虑和失眠等问题。
2.驱蚊杀虫：广藿香含有挥发油，具有一定的驱蚊杀虫功效，常被用作驱虫的天然草本。
3.缓解胃肠不适：广藿香可以促进胃肠蠕动，缓解胃肠不适，对胃痛、腹泻等症状有一定缓解作用。
4.改善消化功能：广藿香可以促进消化液分泌，增加食欲，帮助消化，适用于消化不良、胃纳差等问题。
5.缓解痛经：广藿香具有活血化瘀的作用，可缓解经期疼痛、痛经等问题。
广藿香的主治广藿香在中医药领域有广泛的主治范围，适合用于以下疾病或症状的治疗：•神经衰弱：广藿香具有安神镇静的作用，可以缓解神经衰弱引起的焦虑、失眠、头痛等症状。
•蚊虫叮咬：广藿香含有挥发油，可用于驱赶蚊虫并缓解叮咬引起的痒涩感。
•胃脘胀痛：广藿香具有促进胃肠蠕动的作用，可缓解胃脘区的胀痛感，适用于胃脘不适引起的胀痛问题。
•腹泻：广藿香可以调节肠道蠕动，有助于缓解腹泻引起的腹痛、泄泻等症状。
•消化不良：广藿香能够增加消化液分泌，改善胃肠道的消化功能，适用于消化不良导致的食欲不振、腹胀等问题。
•痛经：广藿香具有活血化瘀的效果，可用于缓解经期疼痛、痛经等问题。
广藿香的用量广藿香可以通过多种途径使用，如口服、外用等，具体用量需根据医生建议或药品说明进行。
1.口服用法：一般情况下，广藿香可作为成药剂型，如广藿香颗粒、胶囊等，每次口服可根据病情和年龄情况调整剂量，一般建议成人每次口服5-10g，儿童每次口服2-5g。
2.外用用法：广藿香油是常见的外用制剂，可用于蚊虫叮咬、风寒头痛等问题。
外用时可将广藿香油适量涂抹在患处，轻轻按摩至吸收即可。
需要注意的是，使用广藿香前应先咨询医生或药师，遵循医嘱并按照药品说明进行用药，避免超量使用或擅自调整剂量。
广藿香
石牌藿香
广州近郊石牌、宝岗等地 原本是广藿香的主要产地，商 品称“石牌藿香”（“牌 香”），传统经验认为其品质 最优，是道地药材。
传统的石牌藿香，产地为广东 暨南大学所在区域，但随着近年来 校园发展，要找到正宗的石牌藿香 已很困难。
变成
农田 城市
变成
工业区
调查发现随着广州城市建设的 发展，有些适合种植中药材的地方 已从农田变成工业园、甚至变为城 市，这种情况导致很多优良的品种 处于濒危状态。广州近郊早已无藿 香种植。
此“霍香”草的名声越 传越广，治好了不少中暑的 病人。因为是药草的缘故， 久之，人们便在霍字头上加 了一个“草”头，将霍香写 成了“藿香”。
听完关于藿香的传统故 事，我们来了解一下它 的悠久历史吧！
藿香始载于《名医别录》，但早在晋嵇含的 《南方草木状》即有记载：“出交趾、九真、武平、 兴谷诸地，吏民自种之，……曰干乃芬香”。其后 历代本草均有记录，唐《通典》：“顿逊国出藿香， 插枝便生”。
此外，还有收敛止泻、扩张微血管而略有发汗等作用。
藿香叶偏于发表，藿 香梗偏于和中，鲜藿香解 暑之力较强，夏季泡汤代 茶，可作清暑饮料。
又到了同学们 动脑筋的时候了！
通过本节课的学习，请大家回顾与思考一下： 种植广藿香需要注意些什么呢？
广藿香要在平地或缓坡种植，土 质要疏松、肥沃，要选择排水良好 的沙质壤土。
嫂子听后顿时神情紧张， 赶紧脱下霍香右脚的鞋袜。 只见在霍香的脚面上有两排 蛇咬的牙印，右脚又红又肿， 连小腿也肿胀变粗了。
嫂子一面惊叫，一面抱起 霍香的右脚，准备用嘴从伤口 处吮吸毒汁。但霍香因怕嫂子 中毒，死活不肯。等乡亲们听 见嫂子的呼救将郎中找来，却 为时已晚。
嫂子用小姑采来的药草治 好了病，并在乡亲们的帮助下 埋葬了霍香。为牢记小姑之情， 嫂子便把这种有香味的药草亲 切地称为“霍香”，并让大家 把它种植在房前屋后、地边路 旁，以便随时采用。
常用中药品种论述之芳香化浊和中解暑广藿香
常用中药品种论述之芳香化浊和中解暑广藿香广藿香为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin（Blanco）Benth. 的干燥地上部分。
又名：枝香、藿香、刺蕊草。
按产地不同分石牌广藿香及海南广藿香。
枝叶茂盛时采割，日晒夜闷，反复至干。
原植物广藿香栽培于江西、福建、台湾、广东、海南、广西、云南、贵州、四川，本种以海南为大宗，销全国，并供香料厂用。
本品药材性状：茎略呈方柱形，多分枝，枝条稍曲折，长30~60cm，直径0.2~0.7cm；表面被柔毛；质脆，易折断，断面中部有髓；老茎类圆柱形，直径1~1.2cm，被灰褐色栓皮。
叶对生，皱缩成团，展平后叶片呈卵形或椭圆形，长4~9cm，宽3~7cm；两面均被灰白色茸毛；先端短尖或钝圆，基部楔形或钝圆，边缘具大小不规则的钝齿；叶柄细，长2~5cm，被柔毛。
气香特异，味微苦。
石牌广藿香高30~70cm。
主茎粗短，分枝较多，节较密集，节间长3~6cm，断面渐呈类圆形，髓部较小，约占直径的1/3~1/2。
枝条较瘦小，稍曲折，枝叶茂密，表面较皱缩，灰黄色或灰褐色，密被短毛茸，叶痕较大而凸出，中部以下被栓皮，纵皱较深，叶片较小而厚，油润，卵形或卵状椭圆形，暗绿褐色或灰棕色，长：宽为 1.23，叶面较皱缩。
气纯香，味甘而不苦涩。
高要藿香植株高80~100cm，主茎粗而长，分枝较少，节稍稀，节间长5~11cm，断面髓部约占直径的1/2。
枝条较顺直，枝叶稍稀疏，毛茸较密集。
叶椭圆形，黄色或灰褐色，长：宽为1.38，叶薄纸质，稍润，叶面较平坦。
气清香，味甘、微苦涩。
湛江藿香植株高80~100cm，主茎粗而长，分枝较少，节稍稀，节间长6~13cm，断面髓部约占直径的1/2。
枝条顺直，枝叶稀疏，毛茸细长而疏。
叶长椭圆形，灰棕色，长：宽为 1.75，叶薄纸质，稍干涩，叶面较平坦。
气香，味甘、微苦涩。
海南广藿香植株高100~120cm，主茎长，分枝多，节较密集，节间长5~7cm，断面呈钝方形，髓部较大，约大于直径1/2。
广藿香的作用与功能主治
广藿香的作用与功能主治概述广藿香，又称川芎，是一种常见的中药草本植物。
它具有丰富的药用价值，在中医学中被广泛应用。
广藿香除了具有独特的香味外，还具有多种作用和功能，主要用于治疗一些常见的疾病和症状。
功能主治广藿香有着多种功能和主治，下面将列举几种常见病症及其对应的治疗效果：1.舒筋活血：广藿香可活血化瘀，促进血液循环，舒缓筋肉，并能改善血液黏稠度。
它在中医学中常被用来治疗瘀血引起的疼痛、肌肉疼痛以及经期不调等症状。
2.缓解痉挛：广藿香具有镇痉作用，它可以舒展平滑肌，缓解痉挛症状。
广藿香常用于缓解胃肠痉挛、子宫痉挛等症状，并能减轻相应的疼痛。
3.祛湿通经：广藿香有祛湿作用，可以通过排除体内的湿气来调节经脉。
它在中医学中常被用来治疗湿热停滞引起的月经不调、经行腹痛等症状。
使用方法广藿香可以使用多种方式进行应用，具体使用方法如下：•冲剂：将广藿香与适量水煎煮，制成冲剂，即可服用。
•直接咀嚼：可将广藿香直接咀嚼，使其有效成分口腔吸收。
•外用药膏：广藿香也可以制成外用药膏，搽于患处以起到局部治疗的作用。
注意事项在使用广藿香时，有一些注意事项需要注意：1.孕妇应慎用：广藿香有一定的活血作用，因此孕妇应慎用或遵医嘱服用。
2.注意过敏反应：患有过敏体质的人群可能对广藿香产生过敏反应，使用前应了解个人过敏史，并在医生指导下使用。
3.用量控制：使用广藿香时应遵医嘱，按照正确的剂量使用，避免过量使用。
4.不可代替正规医疗：尽管广藿香有一定的药用价值，但它不能代替正规医疗，对于严重疾病还是需要及时就医。
结论广藿香作为一种常用的中药草本植物，具有多种作用和功能，主要用于治疗疼痛、痉挛以及经期不调等症状。
使用广藿香应遵医嘱，注意用量控制和个人过敏史，不可代替正规医疗。
对于需要使用广藿香的患者，建议咨询医生并在医生指导下进行使用。
6.3全草类中药显微鉴定(广藿香)
全草类 中药 显 微鉴 定（广藿香）
广藿香
唇形科植物 广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.的干燥地上 部分。
广藿香产地
n 主产广东、海南等地，分别 习 称“石牌广藿香”及“海南广藿 香”。
n 枝叶茂盛时采割，日晒夜闷， 反复至干。
新疆 西藏
黑龙 江
吉林
甘 青海
宁 夏
肃
内蒙古
辽宁
山 西 陕
河 北
山东
西 河南
江苏Βιβλιοθήκη 四川湖北重 庆
安徽 浙江
贵州
湖南 江西 福建
云南
台
广西 广东
湾
海南
广藿香粉末制片
对 于全草类 中药 的制片方法采用粉末制片法。广藿香的粉末制片过 程：①研磨；② 烘干；③装片。
广藿香粉末制片
表皮细 胞及气孔
腺鳞
小腺毛
非腺毛
间 隙腺毛
草酸钙 针 晶
谢谢
实用中药鉴定
中药期中考图片集
•
• 独活 为伞形 科多年 生草本 重齿毛 当归的 干燥根 切片生 用。
•威灵仙 为毛茛 科草质 藤本威 灵仙、 棉团铁 线莲或 东北铁 线莲的 干燥根 及根茎 生用。
•棉 •团 •铁 •线 •莲
东北铁线莲
棉团铁线莲
威 灵 仙
东 北 铁 线 莲
木瓜为蔷薇科落叶灌木贴梗海棠和榠楂的 干燥近成熟果实。
贴梗海棠
榠楂
皱 皮 木 瓜
光 皮 木 瓜
• 广藿香 为唇形 科多年 生草本 广藿香 的干燥 地上部 分。切 段，生 用。
•藿香
（土藿香、 排香草、 大叶薄荷）
• 苍术为 菊科多 年生草 本茅苍 术或北 苍术的 干燥根 茎。切 厚片， 生用或 者麸炒 用。
北 苍 术
茅 苍 术
北苍术
厚朴为木兰科落叶乔木厚朴或凹叶厚朴的 干燥干皮、根皮及枝皮。生用，或姜汁制用。
• 槟榔为 棕榈科 常绿乔 木植物 槟榔的 成熟种 子。浸 透切片 或捣碎 用。
进 口 槟 榔
国产槟榔
榔鸡 心 槟
茵陈为 菊科多 年生草 本茵陈 蒿或滨 蒿等的 干燥地 上部分。 生用。
• 虎杖 为蓼科 多年生 草本虎 杖的干 燥根茎 和根。 生用。
附子 为毛茛科 草本乌头 的子根的 加工品。 加工炮制 成盐附子、 黑顺片、 白附片。
盐附子 白附片 黑顺片
肉桂为
樟科常 绿乔木 肉桂的 干燥树 皮。切 片，生 用。
老
青
翘
翘
生地黄
为玄参 科多年 生草本 地黄的 新鲜或 干燥块 根。切 片，生 用。
掌叶大黄
• 大黄为蓼 科多年生 草本掌叶 大黄、唐 古特大黄 或药用大 黄的干燥 根及根茎 生用、酒 炒、酒蒸 或炒炭用
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
广藿香中药分析图谱
摘要：中国药典-中药标准物质分析图谱：广藿香(Guanghuoxiang)分析图谱,百秋李醇分析图谱
【药材基本信息】
别名刺蕊草、藿香
来源唇形科植物广藿香Pogostemoncablin (Blanco) Benth. 的干燥地上部分
功能芳香化浊，开胃止呕，发表解暑
【对照药材提取和对照品溶液的配制】
对照药材的提取：
精密称取本品粗粉0.5026g，置锥形瓶中，加三氯甲烷50ml，超声处理三次，每次20分钟，滤过，合并滤液，回收溶剂至干，残渣加正己烷使溶解，转移至5ml量瓶中，再加正己烷至刻度，摇匀，即得。
对照品溶液的配制：
精密称取百秋李醇对照品11.51mg，置锥形瓶中，加入3ml正己烷，精密加入内标溶液1ml，用正己烷稀释至刻度，摇匀，取1μl注入气相色谱仪，计算校正因子。
【分析条件】
色谱柱：HP-5 30m×0.32mm×0.25μm
进样量：1μl
检测条件：进样口温度280℃；检测器温度280℃；柱温：初始温度150℃保持23分钟，以每分钟8℃的速度升至230℃，保持2分钟
方法来源：诗丹德生物结合《中国药典》2010版一部基础上的改进
对照药材：中国食品药品检定研究院
对照品：上海诗丹德生物技术有限公司
对照品含量：百秋李醇99.0%
仪器：Agilent 7820A(G-4350A)
配置：自动进样器G4513，FID检测器
【分析色谱图】
【分析结果】
【注意事项】
● 在此分析条件下，百秋李醇出峰时间为18.0分钟，根据各个操作条件的不同，出峰时间会有少许变化；但在同一仪器和相同操作条件下，RSD≤2%；
● 建议采用自动进样器进样；若为手动进样，注意定量的准确性；
● 对照品称量天平精度须达到十万分之一；
● 每次进样的运行时间应在出峰时间的两倍以上；
● 检测若有前拖尾现象，请用流动相溶解样品。
检测人员：费文静
审核人：钱勇
本文由上海诗丹德生物技术有限公司原创，转载请注明出处并附带原文链接！。