实验十二.青蛙骨髓染色体的制备及核型分析

• 【实验结果】 • 在显微镜下，染色体被染成紫红色，胞
浆完全不着色。对于分散好的染色体, 其间 相互散开, 短臂收缩适中, 二条姐妹染色单 体大致平行分离, 着丝粒清晰可见。
• 【实验报告】 • 1．通过对自己制做的青蛙染色体标本观察，
总结青蛙染色体的形态特征。 • 2．对于分散好的染色体，进行染色体计数。 • 3．请你分析一下在本实验中造成染色体标 本制作不佳的可能原因有哪些？本实验成 败的关键是什么？秋水仙素在本实验中起 什么作用？
• 【实验用品】 • 1．器材：解剖器具、注射器、离心机、离
心管、恒温水浴箱、载玻片、酒精灯等； • 2．试剂 0.1%秋水仙素溶液、Carnoy’s固 定液（甲醇：冰醋酸＝3：1）、0.075 mol / L KCI溶液、Giemsa染液等。 • 3．材料：青蛙
ห้องสมุดไป่ตู้
• 【方法步骤】
1.按青蛙体重4ug/g注射秋水仙素; 2.5小时后处死青蛙，取出股骨和胫骨，去肌肉。 3.用5-8毫升生理盐水冲洗骨髓腔至小烧杯中；移 至离心管，1000rpm，8分钟； 4.去上清，加0.075mol/LkCl低渗液至6毫升， 37℃，20分钟后离心，1000rpm, 8分钟； 5.去上清，加卡诺固定液至5毫升，室温20分钟； 1000rpm，8分钟； 6.重复5 7.去上清，加少量固定液。 8..滴片； 9.Gimesa染色：扣染观察。
实验十二.青蛙骨髓染色体的制备及 核型分析
• 【课前预习】 • 了解各步骤的原理
• 【目的要求】 • 1．掌握动物骨髓染色体的制备的基本过程，
了解操作步骤的原理； • 观察染色体的特点。
• 【基本原理】 • 凡细胞处于活跃增殖状态，或经过各种处理后，
细胞就可以进入分裂的动物组织，可用于染色体 分析。在正常动物体内，骨髓是处于不断分裂的 组织之一。给动物注射一定量的秋水仙素即可使 许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规 的干燥法制备染色体，可得到大量的可分析的染 色体标本。