第七章_蛋白质检验

第八章血浆蛋白质的测定

第一节概述

一、血浆蛋白质的组成及功能

血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右，目前已经研究的血浆蛋白质有300多种，分离出的纯品约100来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞合成，主要功能有以下几方面：

1. 维持血浆胶体渗透压；清蛋白。

2. 作为某些物质的载体，起运输作用；如清蛋白能与多种物质结合（FA、胆红素），某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能，运铁蛋白、运皮质醇蛋白。

3. 维持体液pH恒定；血浆蛋白pI一般都小于7.4是弱酸，一部分以弱酸盐形式存在，构成缓冲对。

4. 免疫功能；血浆中许多具有免疫功能的球蛋白，主要由浆细胞合成，电泳时位于γ区带，如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE，此外，还有具有免疫作用的非特异球蛋白，如补体。

5. 凝血与纤溶作用；凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质，它们促进血液凝固，防止血液流失和溶解血栓，防止重要脏器的动脉栓塞。

6. 营养作用；血浆蛋白质可分解成AA，用于合成组织蛋白或氧化供能。

7. 催化作用；血浆中有许多酶类，其中部分在血浆中发挥作用，称血浆功能性酶，如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。

二、血浆中几种主要的蛋白质

（一）前白蛋白（prealbumin，PA）分子量54kD，由肝细胞合成，电泳时移动速度较白蛋白快，位于其前方面得名，半寿期短为12h。PA是一类运载蛋白，一种能与甲状腺素结合，称为甲状腺结合蛋白，一种能与VitA结合，称为VitA结合蛋白，常用测定方法是免疫学方法，正常参与范围0.2～0.4g /L，急性炎症，恶性肿瘤，肝硬化或肾炎时下降。

（二）白蛋白（albumin，Alb）分子量66458，由肝实质细胞合成，半寿期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40%～60%，主要功能，维持血浆胶体渗透性，缓冲作用，运输作用，营养作用，调节某些激素或药物活性。

白蛋白可微量地通过肾小球，约0.04%，但大部分被血小管重吸收。

白蛋白的测定方法目前主要是溴甲酚绿（BCG）法，正常参考范围35～55g/L，血浆白蛋白增高临床少见，主要见于严重失水引起血液浓缩，血浆白蛋白降低临

床常见。①合成障碍急；慢性肝炎。②丢失过多；肾病综合症、慢性肾小球、肾炎、糖尿病、系统性斑狼疮等。③分解过多；营养不良，慢性胃肠道疾病。

（三）α1-酸性糖蛋白（α1-acid glycoprotein，AAG）、分子量约4万，含糖约45%，pI2.7～3.5，主要由肝细胞合成，某些肿瘤组织也可合成。

AAG是主要的急性时相反应蛋白，急性炎症时上升，与免疫防御功能有关。

AAG测定方法，使用AAG抗体，进行免疫扩散法或免疫比浊法检测，正常参考范围0.5～1.5g/L,主要作为急性时相反应的指标，风湿病、恶性肿瘤、心肌梗塞患者上升，营养不良、严重肝病下降。

（四）α1-抗胰蛋白酶（α1-antitrypsin，α1AT或AAT），分子量5.5万，pI4.8，含糖10%～12%，电泳时位于α1区带，占90%左右，由肝细胞合成，能抑制多种酶活性，尤其是蛋白酶，占血清中抑制蛋白酶活力的90%左右，抑制作用有明显的pH依赖性，在中性和弱碱性中活力最大。

AAT也是一种急性时相反应蛋白，主要功能是对抗多形核白细胞吞噬作用时释放的溶酶体蛋白水解酶。

AAT测定方法，目前主要采用免疫化学法，正常参考范围，新生儿血清1.45～2.7g/L，成人0.78～2.0g/L，AAT下降见于胎儿呼吸窘迫症，AAT缺陷所致的肺气肿、肝硬化等，AAT上升见于急性炎症、外科手术后，长期服用可的松药物，妊娠及服用避孕药物。

（五）甲胎蛋白（α1-fetoprotein，AFP）分子量6.5～7万，pI4.75含糖量4%，主要由胎儿肝合成，妊娠13～15周血清AFP含量最高，以后逐渐下降，出生时仅为高峰期的1%～0.1%，周岁时接近成人水平，仅10～30μg /L，功能不详。

AFP作为肿瘤标志物，对原发性肝Ca的诊断很有价值，80%以上原发性肝Ca患者血清AFP上升，但无特异性，肺Ca、胰腺Ca，肝硬化患者血清AFP亦升高，此外，羊水AFP含量测定可用于胎儿产前监测，AFP↑提示胎儿畸形（神经管缺损、脊柱裂、无脑儿），死胎。

AFP测定方法，火箭电泳放射自显影，放射免疫分析法，灵敏度特异性很高，有放射污染。反向间接血凝法（RPHA），操作简便，定量不够精细，适合于普查、筛选。酶联免疫法（ELISA），灵敏度接近放免，且操作简便，无放射污染，便于推广。

（六）结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）又名触珠蛋白，是一种糖蛋白，主要由肝合成，电泳时位于α2区带，是一种急性时相反应蛋白，为两对肽链组成的四聚体（α2β2），α链有α1和α2两种，其中α1有两种遗传变异体。

Hp的主要功能与血浆中游离血红蛋白结合，（不可逆结合），并送至肝细胞内降解，因此Hp在溶血后含量急剧下降。

血浆Hp测定方法，①测定Hp-Hb复合物中过氧化物酶活性。②在血浆中加入过量Hb，生成Hp-Hb复合物，凝胶层折法收复合物分离，测定结合的Hb。③电泳法。④免疫分析法，正常参考范围0.3～2.15g/L，个体间变异较大。

急性时相反应中血浆Hp上升，烧伤、肾病综合征引起Alb丢失时Hp上升，血管内溶血Hp下降。

（七）α2-巨球蛋白（α2-macroglobulin，α2MG或AMG）是血浆中分子量最大的蛋白质，分子量为62.5～80万，含糖量8%。

AMG最突出的特性能与多种分子和离子结合，特别是它能与不少蛋白水解酶结合而影响这些酶的活性，有选择地保护某些蛋白酶活性的作用。

AMG由肝细胞与单核吞噬细胞系统合成，半寿期5天。

AMG测定方法，免疫化学法，正常参考范围1.25～4.10g /L，在低Alb血症，AMG上升，妊娠、服用避孕药时AMG上升。

（八）铜蓝蛋白（ceruloplasmin，CER）含铜的糖蛋白，分子量约12～16万，含糖量约10%，因含铜而呈蓝色，故名铜蓝蛋白。

CER具有氧化酶活性，使血液中Fe2+氧化成Fe3+，故又称亚铁氧化酶。CER 还起着抗氧化剂的作用。防止组织中脂质过氧化物和自由基的生成，CER属于急性时相反应蛋白，血浆CER在感染、创伤、肿瘤上升，Wilson病（肝点状核变性）CER下降。

CER测定方法，根据其氧化酶活性或免疫化学法，成人正常参考范围0.2～0.5g/L。

（九）转铁蛋白（transferrin，TRF）血浆中主要含铁蛋白质，分子量7.7万，含糖约6%，由肝及网状皮系统合成，半寿期7天。

主要运载由消化道吸收的铁和RBC降解释放的铁，此外还可逆地结合多价金属离子，如Ca、Zn、Cu等。

TRF测定方法，扩散法、放免法、散射比浊法，成人正常参考范围2.2～4.0g/L。

TRF在急性时反应中下降，如炎症、恶性病变时、TRF、Alb、PA同时下降，慢性肝病，营养不良亦下降，妊娠、口服避孕药，注射雌激素TRF上升。

（十）β2-微球蛋白（β2-microglobulin，BMG）分子量11800，存在于所有有核细胞的表面，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞并由此释放入血，半寿期107mim。

作为人类淋巴细胞抗原β链交部分。

BMG测定方法，由于含量很低，常采用放免法，正常参考范围1.0～2.5mg/L。主要用于监测肾小管功能，特别是肾移植后，如有排斥反应，BMG在尿中排出量上升，肾功能衰竭，炎症、肿瘤血浆BMG上升。

（十一）C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP），是一种能结合肺炎双球菌